黄铜类成分分析

黄酮类成分分析

一、概述

黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟

基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，

小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。生长在南太平洋所罗门群岛中的向天果这种野生植物同样含有丰富的黄酮化合物成分，具有很广范的药用功效，《马来西亚草药目录》中记载，向天果味苦、涩、性凉，解热、收敛、种仁强壮！其种子主治：糖尿病、高血压。

中文名

黄酮类化合物

英文名

flavonoids

别称

黄碱素、黄酮

化学式

以C6-C3-C6为基本碳架的系列化合物

外观

多显黄色；多为结晶性固体，少数为无定型粉末

二、定性鉴别

（一）显色反应

1、盐酸-镁粉还原反应

取药材粉末少许与试管中，用乙醇或甲醇数毫升温浸提取，取提取液加镁粉少许振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内即出现颜色。大多黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类显红-紫红色，黄酮类显橙色，异黄酮及查尔酮类无变化。如芦丁的盐酸镁粉反应中溶液由黄色变红色。其他还原反应还有：盐酸-锌粉反应，黄酮、黄酮醇类常不显色，只有二氢黄酮醇类可被锌粉还原呈深红色；钠-汞齐反应，黄酮类成分可产生黄、橙、红等色；四氢硼钠（钾）反应，仅二氢黄酮醇类可被四氢硼钠还原呈红色，其他黄酮类不反应。

例大山楂丸的鉴别

主要组成：山楂、六神曲（麸炒）、麦芽（炒）。

鉴别：取本品9g，剪碎，加乙醇40ml，加热回流10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，加正丁醇15ml振瑶提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5ml 使溶解，滤过。取滤液1ml，加少量镁粉与盐酸2-3滴，加热4-5分钟后，即显橙红色。

2、与金属盐类试剂的配合反应

黄酮类成分和铝盐、镁盐、铅盐、锆盐等试剂反应，生成有色的络合物，可供某些类

型黄酮的鉴别。产生络合作用的条件是黄酮类成分必须具备下列条件之一，如5-羟基、3-羟基或邻二羟基。根据有色络合物的最大吸收波长，可进行定量测定。常用的试剂有三氯化铝、醋酸铅、醋酸镁与二氯氧化锆等试剂。

例银黄口服液中黄芩提取液的鉴别

主要组成：金银花提取物、黄芩提取物。

鉴别：取本品少量，加水2ml，滴加亲氧化钠一滴，容液显橙黄色，滴加稀醋酸使溶液颜色基本褪去，再滴加5%二氯化痒锆容液1滴，容液显黄色，加稀盐酸颜色不褪。

（二）色谱鉴别

1、纸色谱：适用于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类混合物。混合物的鉴定常采用双向色谱法。以黄酮苷类来说，一般第一向展开采用某种醇性溶剂，如正丁醇-醋酸-水（4：1：5，上层）等，主要是根据分配作用原理进行分离。第二向展开溶剂则用水或其他含水溶液，如2～6%醋酸等，主要是根据吸附作用原理进行分离。

黄酮类化合物苷元中，平面性分子如黄酮、黄酮醇、查耳酮等，用含水溶剂如3%～5%HOAC 展开时，几乎停留在原点不动（Rf＜0.02）；而非平面性分子如二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢查耳酮等，因亲水性较强，Rf值较大（0.10～0.30）。医学教育|网收集整理黄酮类化合物分子中羟基苷化后，极性随之增大，在醇性展开剂中Rf值相应降低，同一类型苷元，Rf 值依次为：苷元＞单糖苷＞双糖苷。但在用水或2～8%醋酸、3%氯化钠水溶液或1%盐酸展开时，则苷元几乎停留在原点不动，Rf值大小顺序为：苷元＜单糖苷＜双糖苷。

2.硅胶薄层色谱：用于分离和鉴定弱极性黄酮类化合物。分离黄酮苷元常用的展开剂是甲苯-甲酸乙酯-甲酸（5：4：1）。

3.聚酰胺薄层色谱：特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类。展开剂中多含有醇、酸和高效液相色谱法（HPLC）

4.高效液相色谱法：适用于极性大、沸点高、分子量大、热稳定性差的化合物分析，是黄酮类化合物分离检测中使用非常广泛的一种方法，具有效率高、灵敏度高、分离效率高等优点。高效液相色谱法采用液体为流动相，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。黄酮类化合物的分离中常用的色谱柱是C18柱，对复杂化合物的分析经常采用梯度洗脱系统，实现高效率的分离，紫外检测器、二极管阵列检测器是黄酮类化合物分析中最常用的检测器，具有灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱的特点。

水。