常用标本采集方法

血培养标本采集、运送与报告标准操作规程

一、血培养指征

患者出现寒战，体温超过38℃或低体温，怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎；留置中心静脉导管超过72 h；感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状；临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。

二、采血时机

一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养，最好在抗菌治疗前或停用抗菌药物24 h后，以寒战、发热时采集为宜。

三、采血流程

（一）消毒

1．培养瓶消毒程序：用消毒液消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。

2．皮肤消毒程序：用消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5 cm 以上，待消毒液挥发干燥后（常需30 s以上）穿刺采血。

（二）静脉穿刺和培养瓶接种

成人用注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内空气，直接注入血培养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头），先注于厌氧培养瓶，避免注入空气，然后注入需氧培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固。近年来，临床普遍采用负压血培养瓶，将血从患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。

（三）注意事项

1．检验单需注明抗菌药物使用情况、血液采集时间和部位、临床诊断等患者信息。

2．采血部位通常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被皮肤正常菌群污染。

3．采血次数：对于成年患者，应该同时分别在两个部位采集血标本，在两个不同部位分离到同样菌种才能确定是病原菌。

4．细菌性心内膜炎：在24 h内取血3次，每次间隔不少于30 min;必要时次日再做血培养2次。

5．采血量：以培养基与血液之比10：1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、

抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血8～10 ml，婴幼儿每次每培养瓶采血2 ml。

四、运送要求

1．所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。如果不能及时送检，宜置于室温环境。血培养瓶送到检验科放入培养箱前，不应暂存于冰箱内。

2．送检标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。

3．安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。

五、报告要求

（一）紧急口头（电话）报告

血培养出现阳性报警时，立即进行革兰氏染色、镜检，并在最短时间内将结果向临床主管医生进行紧急口头（电话）报告。口头报告包含以下内容，并记录在案。

(1)报告者全名（或工号）；

(2)报告的时间；

(3)所联系医生的全名（或工号）；

(4)报告镜检结果并强调其紧急价值；

(5)确认临床医生收到报告并复述结果。

（二）最终结果（书面）报告

(1)无菌生长（培养5天无需氧菌和厌氧菌生长）；

(2)阳性培养结果（最终鉴定结果、最终药敏结果）。

（三）其他报告和记录

1．标本被拒收时，需即刻通知临床立即重新采血，并记录在案。

2．最终结果与紧急口头报告结果不符，需要变更时，需立即通知临床，同时必须在书面报告上提供正确的结果，注明变更的内容。

3．其他需临床注意的事项的记录，如：采血量不足、标本转运时间过长、标本采集份数不够等信息。

痰标本采集与运送标准操作规程

一、采集目的

一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。

二、一般原则

1．采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。

2．宜采集清晨第二口痰液。

3．对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24 h 内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。

4．怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。

三、采集方法

（一）自然咳痰法与雾化导痰法

1．用物准备：无菌容器（盒）、生理盐水(250 ml或500 ml)、化验单。

2．核对患者床号、姓名等。

3．无痰或痰量极少者可用3%～5%氯化钠溶液5 ml雾化吸入约5 min后留取痰液。

4．如有可能，应在医护人员直视下留取清晨第二口痰。嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内。应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。

（二）支气管镜法

鼻或口腔插入支气管镜。常用采集方法有经支气管镜吸引、支气管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。

（三）经人工气道吸引法

1．用物准备：负压吸引器、生理盐水、一次性吸痰管、无菌手套，无菌容器（试管）、化验单。

2．核对患者床号、姓名等。

3．将患者头部转向操作者一侧。

4．进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器至适宜负压(成人：40.0～53.3 kPa;小儿：＜40.0 kPa)。

5．将一次性吸痰管外包装去除，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。

6．折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离(使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15 s，吸痰前后需吸入高浓度氧气1～2 min)。

7．将痰液注入无菌容器（试管）内，如痰液黏稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲人无菌容器（试管）内。

四、运送和保存

应在2h之内送至实验室，否则应4℃冷藏，但放置时间不可超过24 h。

手术部位感染标本采集及运送标准操作规程

一、一般原则

I．在抗菌药物使用前，且仅在有临床感染症状或伤口恶化或长期不能愈合时采集标本。

2．皮肤或黏膜表面的清洁。

(1)闭合伤口和穿刺物标本：消毒方法同血培养标本的皮肤消毒（见《血培养标本采集和运送标准操作规程》）。

(2)开放伤口：无菌生理盐水充分冲洗伤口部位。不可以用消毒剂。

3．采集新鲜的感染组织，避免采集浅表的组织碎屑。

4．若可以采集穿刺物或活检标本，应避免拭子标本。

二、容器

1．较大的标本：含有少量生理盐水的带螺纹口的无菌塑料容器。

2．标本较小或拭子标本：MW&E TRANSWAB运输培养基，适用于需氧和厌氧菌。

三、采集方法

（一）封闭性脓肿

1．注射器穿刺抽取脓液。

2．若无法抽到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再次穿刺抽吸脓液；若脓液过多，应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。脓液的量以大于1 ml 为宜。

3．排除注射器内部及针头的气体，用无菌橡皮塞封闭针头送检；或直接打入血培养瓶中。疑为厌氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中。

（二）组织和活检标本

1．采集足够大的组织，体积以1 mm3为宜，避免在坏死区域采集。

2．将小块的组织放在运输培养基内；较大的放在无菌容器中，并加入少量无菌生理盐水。

（三）开放伤口

1．无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物和碎屑。

2．用拭子深入伤口的基底部或伤口一正常组织边缘部采集两个标本，分别用于培养和革兰氏染色。

四、标本的标识

填写患者信息、标本类型（深部组织、表浅组织、脓肿和穿刺物等）、标本的来源（腹腔、腿和上臂等），记录标本采集的日期和时间及是否在使用抗菌药物前采集，选择检查项目（需氧培养或厌氧培养）。

五、标本的送检

为了更好地分离病原菌，标本应在采集后的30 min内送到实验室。送检时应保持标本的湿润（尽量采用运输培养基，组织可以放在生理盐水中）。在送检前或运送过程中，禁止将标本敢于冰箱。若不能及时送检，运输培养基中标本应室温保存，但最长不可超过24 h。

尿液标本采集和运送标准操作规程

一、采集时机

宜为抗菌药物使用之前的清晨第一次尿液。

二、采集方法

（一）清洁中段尿

1．女性：采样前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液等冲洗外阴，用手指分开阴唇，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10～20 ml于无菌容器内。

2．男性：采样前用肥皂水或0.05%～0.1%的聚维酮碘（碘伏）溶液等消毒液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10～20 ml于无菌容器内。

（二）耻骨上膀胱穿刺

主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿、脊柱损伤患者的尿液采集。先用0.25%的聚维酮碘溶液等消毒液消毒穿刺部位皮肤，然后使用无菌注射器直接从耻骨联合与脐连线上高于耻骨联合2 cm处刺入膀胱吸取尿液10--20 ml于无菌容器内。

（三）导尿管尿

1．直接导尿法：使用0.05%～0.1%的聚维酮碘溶液等消毒剂消毒会阴局部，用导尿管直接经尿道插入膀胱，先弃其前段尿液约15 ml，再留取中段尿液10～20 ml于无菌容器内。

2．留置导尿管法：医院内尿路感染中，临床最常用此法。采集前先夹住导尿管，采集时则松管弃其前段尿液，使用0.25%～0.5%的聚维酮碘溶液等消毒剂消毒导尿管的采样部位，使用无菌注射器斜刺入导尿管（从采样口或靠近尿道的导尿管管壁）抽取10～20 ml尿液于无菌容器内。

3．回肠造口导尿管法：摘除导管，弃去里面的尿液，先用0.05%～0.1%的聚维酮碘溶液等消毒剂消毒吻合口，再将导尿管插入到清洁的吻合口，直至筋膜的深部采集10—20 ml尿液于无菌容器内。

（四）小儿收集包

对于无自控能力的小儿可应用收集包采集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。

三、标本运送

标本采集后应及时送检并接种，室温下保存时间不应超过2 h（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存）。如果不能及时运送或接种，应4℃冷藏，但保存时间也不应超过8h。

四、注意事项

1．不应从集尿袋中采集尿液。

2．尿液中不应加防腐剂或消毒剂。

3．若尿液培养前患者曾使用抗菌药物，应反复多次送检。

4．多次采集或24 h尿不应用于尿液培养。

5-除非进行流行病学调查，不应对长期留置导尿管患者常规进行尿液培养。

6．培养结果应结合临床表现、菌落计数以及微生物种类等，进行综合判断。