生化试剂的基本知识

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反应速度特性
按照反应速度，可以将生化试剂分为二大类：
终点法试剂； 动力学法试剂：又可再分为零级动力学法和一
级动力学法
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反应速度特性之终点法
• 终点法
指经过一段时间(一般为几分钟)的
反应，反应进行到完全，使全部底物(被 A 测物)转变成产物，称终点法，更确切地
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显色原理
NAD-NADH和NADP-NADPH系统 p-NP和p-NA系统
H2O2偶联的指示系统
抗原抗体反应指示系统 其它显色反应
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显色原理
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NAD-NADH和NADP-NADPH系统
NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而 NAD和NADP在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联 的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可 以测定物质的浓度或活性。
最理想的反应模型。
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反应速度特性之终点法
属于终点法的试剂主要有：
TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，Glu，TP，Alb，TBil，D-Bil，Cr（氧化酶法），NH4+，CO2 ， Ca，P， Mg，Cl ， apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因 子)，IgG，IgA，IgM等。
作为该指示系统常用的工具酶有LDH、MDH、 GLDH和G6PDH
目前利用此指示系统进行测定的临床项目有： ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH 、 Glu、 UREA、NH4+ 、CO2等。
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显色原理
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p-NP和p-NA指示系统
p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收 峰，根据405nm吸光度的变化，可以测 定物质的浓度或活性。
说应称平衡法，这是最理想的分析类型。
整个反应达到平衡，由于正向反应的平
衡常数很大，可认为所有的被测定物已
转变为产物，反应液的吸光度不再增加
(或降低)，吸光度的增加(或降低)程度
与被测定物的浓度成正比。 终点法对反应条件(如酶量、pH、温
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度)小的改变不敏感，只要这种改变不影
响在一定时间内反应达到平衡即可，是
在一固定时间间隔中，底物浓度的变化 量正比于底物的初浓度。这是一级反应的通 性。该段时间内吸光度的增加(或)降低与被测 定物的浓度成正比。
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反应速度特性之动力学法
属于一级动力学法的试剂主要有：
Cr（苦味酸法），UREA（紫外监测法）
目前利用此指示系统进行测定的临 床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。
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显色原理
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活性的测定。
实际上，由于底物浓度不可能足够大，
随着反应的进行，底物消耗到一定程度后， 反应速度不再维持不变，同样从启动反应到
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达到最大速度需要一定时间。因此，零级动
力学法是针对于特定时间段而言的，各试剂
商对这段时间有严格规定。
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反应速度特性之动力学法
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生化试剂的基本知识
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主要内容介绍
生化试剂的分类 反应速度特性 显色原理源自文库性能评价方法
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生化试剂的分类
按照化学性质分
酶类：包括ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，α-HBDH，LDH，CK， CK-MB,α-AMY，MSO，ADA，ChE等。
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反应速度特性之动力学法
零级动力学法
指反应过程中反应速度维持不变，达到
最大，与底物浓度无关，因此，在整个反应
过程中，反应物可以匀速地生成某个产物， A
导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地
减小或增加，减小或增加的速度(△A/min)
与被测物的活性或浓度成正比，主要用于酶
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生化试剂的分类
按照临床应用分
无机离子：包括Ca，P，Mg，Cl等。 肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，
D-Bil，TBA，TP，Alb等。 肾功能：UA，UREA，Cr等。 心肌酶谱：CK，CK-MB，LDH，α-HBDH，AST，MSO。 糖尿病：GLU等。 前列腺疾病：ACP，p-ACP等。 胰腺炎：α-AMY。
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生化试剂的分类
按照临床应用分
胰腺炎：α-AMY。 血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。 痛风：UA。 有机磷中毒：ChE。 免疫性疾病：C3，C4，PFB(B因子)， IgG，IgA，IgM，
Kappa链，Lambda链。
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，UREA，Cr， Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，TBA，NH4+，CO2等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl等。
特种蛋白类：包括apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG， IgA，IgM等。
属于零级动力学法的试剂主要有：
ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，α-HBDH，LDH，CK， CK-MB,α-AMY，MSO，ADA，ChE ，TBA等
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反应速度特性之动力学法
一级动力学法(固定时间法）
在一定的反应时间内，反应速度与底物 浓度的一次方成正比,由于底物在不断的消耗， 因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸 光度的增加(或降低)速度越来越小，这类反应 A 达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时 间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应 刚启动时反应较复杂，杂反应较多，经过一 段延迟时间才能进入稳定反应期，必需在特 定时间段内进行监测，各试剂商对这段时间 有严格规定。