临床标本采集指南资料

临床检验标本采集指南及注意事项

临床检验标本采集和处理问题已普遍引起了人们的重视。为做到临床检验质量保证，中华人民共和国卫生部卫生技术标准化委员会已将临床检验标本采集和处理的有关问题，列为国家和行业的标准化文件，以达到对临床检验工作的规范化要求。如中华人民共和国卫生行业标准

ws/T225-220.WS/T229-202.WS/T223-2002.WS/T222-2002.WS/T230-2002和中华人民共和国国家标准GB 19489-2004等，分别对临床化学检验标本、便携式血糖仪血标本、凝血因子测定标本、尿液标本、乙型肝炎表面抗原酶免疫检测标本、临床酶活性浓度测定标本、临床诊断中聚合酶链反应标本和实验室生物安全等标本均提出了标准化的要求。实践证明，为保证临床检验质量，必须做到全过程质量控制，即对实验检查的全过程进行全面的质量控制和质量管理。这里包括：实验前（分析前）、实验中（分析中）和实验后（分析后）三个阶段的质量控制，其中实验前质量控制尤其重要。国内外均有报道，试验误差中60～70%来自实验前（分析前），而且实验前（分析前）误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。因此，必须注意做好实验前质量管理。实验前质量控制主要包括：

（1）病人准备（2）标本采集（3）标本运送（4）标本处理等

一、病人准备

标本采集前病人的状态对检测结果会有一定的影响，因此，各种不同检测项目对标本采集前病人的状态有不同的要求。如血脂测定须病人禁食12～14h后采血（否则出现脂血）；情绪紧张会使血糖升高；吗啡、可待因可使淀粉酶（AMS）升高；吃香蕉能使尿液5-羟吲哚乙酸升高等。所以，在病人要做某些化验检查之前，必须嘱咐病人做好相应的准备。

二、标本采集

1、血液标本

1.1防止干扰物污染（特别是定量分析标本）

1.2采血方法要正确。

1.3信息无误：标本采集后，必须在试管或容器上贴上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名，且应当场核对无误。

1.4叮嘱病人采血前4小时勿喝茶或咖啡、勿吸烟饮酒。尽量了解病人对刺激物和成瘾药物的接触史，供评价检验结果时参考。

1.5采血时间在上午7～9时进行，采血前病人应禁食12小时。

采血尽量安排在其他检查和治疗前进行。

1.6应尽量统一采血姿势，输液病人在不能停输的情况下静脉采血一定要注意远端原则。也就是说输液病人要在对侧手静脉采血。当需要重复使用止血带时，应使用另一上臂。

1.7血和混浊(收集标本用力震荡或用玻璃棒及竹签搅拌会导致溶血，餐后采血会出现脂血而混浊)。

1.8抗凝剂及防腐剂要准确使用。

1.9温度最好不超过20℃。

2 . 尿液标本

2.1尿标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大，特别是饮食的影响，故一般来说晨尿优于随机尿。

2.2尿留取方便，但受饮食、运动、药物影响较甚，易于出现假阳性和假阴性结果，如饮食性蛋白尿、饮食性糖尿、维生素c干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖，尿蛋白和尿胆原的检查。

2.3 12小时尿细胞计数，即Addis(前晚8时排空膀胱后留取至次日8时的所有尿液)，因时间较长，细菌易繁殖，须加入防腐剂甲醛。

2.4 24小时尿(第一天晨6时排空膀胱后留取至次日晨6时的所有尿液)中化学物质的定量，包括蛋白、糖、钙等，检测不同的物质，应选择不同的防腐剂防腐。

2.5清洁中段尿多用于尿细菌培养，要求无菌，冲洗外阴后留取标本。

2.6所有尿标本的收集都应足量，最少12ml，最好50ml，定时尿须全部收集，对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。

3. 粪便标本

粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便，对外观无异常的粪便须从表面、深处等多处取材。

4. 脑脊液标本

脑脊液标本采集后应立即送检，放置过久将影响检验结果：(1)如细胞变性、破坏、或纤维蛋白凝集成块，导致细胞分布不均而使计数和分类不准确。(2)有些化学物质如葡萄糖等将分解使含量减少(3)细菌发生自溶，影响细菌(尤其是脑膜炎球菌)的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。三管顺序不宜颠倒。

5. 胸腹水标本

与脑脊液标本一样，采集后的标本注意安全，及时送检。一般也

分装三管，第一管细菌培养，第二管生化检查，第三管作常规细胞学检查，顺序以与脑脊液相同为宜。生化检测管应用肝素钠抗凝，否则纤维蛋白析出造成总蛋白结果偏低且有可能引起生化仪加样针的堵塞。

6. 微生物标本

6.1标本的采集时间：最好为清晨的第一口痰；支气管扩张患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。

6.2标本采集方法：

6.2.1在留取痰标本之前，用清水、冷开水反复漱口或牙刷清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下，以减少常居菌的污染，并尽可能在使用抗生素之前采集标本。用力从气管深部咳出痰，直接吐入无菌痰杯中，标本量应≥1m1。

6.2.2支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法和支气管肺泡灌洗法，均由临床医生操作采集。

6.2.3小儿取痰法：由临床医生用弯压舌板或用手指叩胸骨柄诱发咳痰法采集。

6.3咽拭子标本的采集：

标本采集应在用药前，最好在清晨，嘱患者用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使悬雍垂向外牵引，将咽拭子超过舌根到达咽后壁或悬雍垂的后侧，在咽部肉眼见明显发红或有假膜处局部反复涂抹棉拭，放入无菌拭管内立即送检。

6.4尿液标本的采集：

常用中段尿采集法：女性病人以1：1000高锰酸钾冲洗外阴及尿道口后留取标本；男性病人应清洗阴茎头后留取标本。标本多取晨尿，因为晨尿在膀胱潴留时间较长(一般都超过4h)，细菌在尿中繁殖得较多，可提高阳性率，故一般取中段晨尿2～3ml于无菌容器后立即(半小时以内)送检，不能立即送检者，应放在4℃冰箱中保存。(注：送细菌培养的尿标本在膀胱内潴留超过4小时以上临床意义才大)

6.5脓、创伤感染标本的采集：

首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。对已破溃的脓肿先用无菌棉拭子把表面的脓粘干净后丢弃，再用无菌的棉拭子取底部的脓液和分泌物(不要采集浅部的脓液)；未破溃的脓肿消毒皮肤后，用无菌注射器抽取脓液及分泌物立即送检。如深部脓肿在送需氧培养的同时应考虑送厌氧培养，厌氧培养标本应隔绝空气立即送检。

6.6穿刺液标本的采集：

应在患者用药之前或停药l～2d后进行穿刺，标本应立即送检或保存于4℃冰箱。脑脊液标本应保温，(25～37~C)，并立即送检(用手心握住送检)。

6.7大便标本采集：

6.7.1自然排便采集法：用无菌棉签挑取新鲜有脓血粘液部份的粪便2～3克置于无菌容器中立即送检。

6.7.2直肠拭子采集法：直肠拭子培养多见于新生儿或直肠癌患者术后。可以用于新生儿在肠道菌群建立之前的菌群监测和直肠癌术后直肠内直肠的需氧或兼性厌氧菌的监测。将无菌肛拭子用甘油湿润后插入肛门4～5cm(幼儿2～3cm)处，轻轻在直肠内旋转，置于无菌容器内立即送检。有腹泻的病人，在送培养标本的同时可以送细菌涂片检查。抗生素相关性腹泻性腹泻，培养是阴性，但涂片检查却可以看到细菌比例失调，涂片临床意义大于培养。

7,病理标本

7.1按要求填写病理诊断申请单，病人病史须详细完整。

7.2采集时请勿挤压、损伤组织。

7.3活检组织按要求采集，组织勿太少。

7.4标本应立即放入固定液(10％福尔马林缓冲液)，固定液为标本体积的4～5倍。

7.5盛装标本瓶的瓶口宜大些，勿乱切标本。

7.6结核标本需固定7～10天才能切开。

7.7盛放标本瓶外面一定要写上或贴上病人姓名、科室或检验单的条形码号。

7.8如同一病人有两种或数种不同的组织送检，或在同一器官的不同部位取材标本必须要用分开的容器盛放。

7.9不同病人的标本绝不能放于同一容器内。

7.10外地邮寄标本要妥善包装，以免途中损坏。

7.1l各种液体穿吸液的细胞检查标本应立即送检，不能立即送检者应离心，涂片2～4张，再按规定要求固定后送检。

8 . PCR标本要求

8.1血清

用无菌注射器抽取受检者静脉血3-5毫升，注入PCR专用的一次性试管(不得与其他生化标本混用)，于室温离心，吸取上清即为血标本。所需标本类型为未溶血的血清或血浆，用无菌真空试管(由检验中心统一提供)采集，注意血浆标本所用的抗凝剂，不可使用肝素。标本为全血时及时分离出血浆保存。

8.2分泌物

男性：取尿道分泌物用细小棉拭子伸入尿道约2～4厘米，略捻拭子取出分泌物(应略带黏膜)。将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。

女性：阴道…用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌

棉拭子插入宫颈内，停5秒钟后旋动棉拭子采取宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。

女性：尿道…用无菌生理盐水棉球洗净尿道口，再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米，略捻拭子取出分泌物(应略带黏膜)。将棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。

三、标本运送注意事项

1、标本采集后连同检验申请单一起由专职护工或护士送住院部检验科进行及时处理，并在合适的环境中存放，一般血液标本应首先分离血清或血浆，否则由于血细胞代谢，气体交换及物质转移使血细胞内外多种成份发生变化，导致分析结果出现误差如血钾增高，血糖降低等。

2、标本送到检验科后，检验科将由专人负责标本的收集，核对和编号处理。标本上的姓名一定要与检验申请单上病人姓名相符，若不相符，要求重新采集标本或拒收此标本。检验科到临床各科收标本时间规定为每天上午8：30—9：OO收集血液标本(生化、血沉、血凝、血常规)，9：OO—9：30收集大小便标本，错过收集时间请临床各科安排护士或护工将标本送到检验科进行检验。

3、标本的保存，血液、大小便标本采集后必须在1小时内送到检验科进行检验，尿蛋白定量标本需加甲苯或二甲苯3—5m1防腐，尿艾迪氏计数标本需加甲醛3—5ml防腐，特殊项目当天不能检测标本必须将血清分离后放2—8℃冰箱保存。一般标本检验后保存3天，合血或特殊项目标本需保存7天。

四、标本运送要求

l标本由临床运送至实验室要尽可能快，必要时可分离出血清(浆)后运送。

2标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染(标本管要盖盖子)。

3有特殊要求的标本要按特殊要求运送(如血气分析标本应严格密封，与外界空气隔绝；测定VA、VB6、B一胡萝h素、胆红素等标本,应注意避免暴露于光线下，用黑纸或铝箔保护标本)。

4关于自动化运送(物流)系统(真空采血管；运送车；气运；人工运送等物流系统)，应注意保证对实验结果无影响(保证红细胞膜完整性)。红细胞膜完整性被破坏会严重影响实验结果的项目主要有：LDH、K、Hb、ACP；有值得注意的影响的项目主要有：Fe、ALT、T4；有轻微影响或不太受影响的项目主要有：TP、ALB、ALP、AST、TBiL、WBC、Cr、Urea、UA、P、Mg、Ca。

5标本送出及签收

临床人员从病人采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接受临床标本，均应按标准化要求进行，并且一定要做到认真

核对。包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等，标本送出人员和标本接受人员都要做认真的记录并签字。

患者准备对检测结果的影响

1．患者的状态：原则上患者应在平静、休息状态下采集样本，特别是血液样本。患者处于激动、兴奋、恐惧状态时，可使血红蛋白、白细胞增高。运动后，由于能量消耗、体液丢失、剧烈呼吸，可造成许多检验结果的变化，如谷-丙转氨酶(AlT)、谷-草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等一时升高，还可引起血中钾、钠、钙、白蛋白、血糖等成分的变化。

2.患者的饮食：

2．1进食后一定时间内可使血液中许多化学成分发生变化。研究表明，一顿标准餐后，可使血中甘油三酯(TG)增高50％、血糖(GLU)增高15％。进食高碳水化合物食物，可引起GLU增高；进食高蛋白或高核酸食物，可引起血中尿素氮(BUN)及尿酸(UA)的增高；进食高脂肪食物，可引起TG的大幅度增高。餐后采集的血液样本，其血清常出现乳糜状，影响到许多检验测定的正确性。甚至一些饮料如咖啡，也可使淀粉酶(AMY)、AST、ALT、碱性磷酸酶(ALP)、促甲状腺素(TSH)等升高。由于人们饮食的多样性，生理功能又不完全相同，控制这一因素的唯一办法是空腹采血(空腹12小时左右)，许多正常参考范围是以空腹血液测定值为基础的。最好是早晨空腹采血。

2.2禁食过久也会影响检测结果。通常补体C3、白蛋白、前白蛋白和运铁蛋白会降低，血糖浓度也有下降的趋势。饥饿状态下胆红素清除速率降低，因此血清胆红素浓度会上升。绝食状态下脂肪酸和酮酸成为肌肉能量来源，因此血清中酮体、脂肪酸和甘油的浓度会显著增加。禁食48小时后，血清甘油三酯增加20％，此后又会下降。绝食使血清尿酸盐浓度显著上升。身体饥饿时醛固酮分泌增加，尿排钾增加，结果会降低血浆钾的浓度。钙、镁、和磷酸盐所受到的影响也类似钾。禁食刚开始时，血浆生长激素浓度可能升高达15倍之多，但是经过三天后可能会降回正常范围。

2.3素食者：长期素食者低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)浓度都会偏低，总脂质和磷脂浓度也会减少，胆固醇和三酸甘油脂浓度可能只有杂食个体的三分之二，短期素食者的效应不显著。

2.4咖啡因：咖啡、可乐、茶、以及多种药物都含有咖啡因，它是一种温和的刺激物和微弱的利尿剂。能刺激肾上腺髓质，促使儿茶酚胺分泌增加，使血糖浓度轻微上升。肾上腺皮质也会受到咖啡因的影响，血浆皮质醇会因而上升。咖啡因是磷酸二酯酶抑制物，摄食数小时内就可以使血浆三酸甘油脂、游离脂肪酸、皮质醇和总脂质上升；但是血清胆固醇浓度会下降。

2.5乙醇：酒精具有引起尿糖的效应，因此饮用后立即会使血糖上升。酒精会促使肝脏合成三酸甘油酯，减缓乳糜微粒和极低密度脂蛋白移除，所以喝酒容易造成高三酸甘油脂血症。中度酒精量会伤害骨骼肌细微结构，因此饮用酒精也会使血清肌酸激酶(CK)活性上升。有报道喝酒会使ALT和AST测定值上升，不过少量饮酒的影响效应很低。长期饮酒的个体，血清r—GT活性会上升。慢性酒精中毒者，多项生化检查都可能会有异常，包括脑垂体分泌异常、肾上腺皮质和髓质功能异常。

2.6抽烟：香烟中所含的尼古丁会影响多种检测项目。尼古丁会刺肾上腺髓质和皮质，使血液肾上腺素浓度上升，从尿液排出的儿茶酚胺和其代谢产物以及5-羟吲哚乙酸也会增加。抽烟者皮质醇浓度、血糖比未抽烟者高。抽烟也会使血浆丙酮酸浓度下降，而乳酸增加。血液中生长激素浓度变化，对抽烟特别敏感，抽烟后3O分钟内生长激素可上升达10倍之多。抽烟者血浆β脂蛋白、胆固醇、三酸甘油脂等浓度高于未抽烟者，而高密度脂蛋白胆固醇低于未抽烟者。抽烟会使血中尼古丁、镉、一氧化碳和氰化物浓度增加。抽烟除会引起红细胞数和血红蛋白增加外，也会引起白细胞数量增加。

3．药物的影响：

3.1药理作用：如某些甲状腺素类制剂能造成血糖增高和胆固醇降低；咖啡因可使血糖和胆固醇增高：冠心平可使甘油三酯和乳酸脱氢酶降低；维生素C可使乳酸脱氢酶减低；血和尿中维生素C能影响测定过程中的化学反应：口服避孕药会使甲状腺结合球蛋白、纤溶酶原、转铁蛋白、铁和三酸甘油脂等增高，而白蛋白和锌下降，另外口服避孕药会增加ALT和r—GT活性。有些药物对造血功能，肝、肾功能造成损害，引起有关指标的变化。

3.2对测定方法产生影响：有些影响是物理性的，如有的药物有颜色，影响比色；有的药物参与化学反应，如抗坏血酸具还原性，对利用氧化还原法的测定就带来一定影响：还有的药物可抑制酶的活性，造成酶活性测定结果的降低。

4．体外变化：

4.1溶血：样本溶血虽有可能是疾病引起，但通常是在采血过程或样本处置不当所引起，常见的技术因素有压血带施压太久：皮肤穿剌位置有剩余的酒精：针头、针筒或血液容器含有水气或有污染：使用的针头孔径太小；抽血时有空气跑进去；针筒内的血液经由针头拍排到其它容器；血液与抗凝剂混合时剧烈震荡；抽血太快或太大用力；血液未完全凝固就拿去离心等。溶血会造成两种类型的干扰：1)光学干扰：分析过程中若用到血红素的吸收光谱区便会产生分析误差。2)红细胞含有某些物的浓度与血浆或血清的含量相差悬殊，如钾、镁、

磷、乳酸脱氢酶、醛缩酶、酸性磷酸酶、AST、ALT、葡萄糖、钠、钙等，血红素中所含的蛋白成份也会使血清总蛋白和白蛋白测定值升高，而血红素所含铁也会使血清铁浓度升高。故中度或大量溶血时，应再次采血。

4.2脂血：脂血可能是抽血前吃入富含脂肪的食物，也可能是疾病的关系；若空腹患者有脂血现象，应是属病理因素。血液中含有的三酸甘油脂浓度过高，会使血浆或血清呈现混浊状：若胆固醇含量增高，则外观不会有变化：若含有乳糜微粒，会在血液或血清液面浮上一层奶油状物质。脂血造成的混浊会使光学测定时引起光线散射，并导致吸光值假性增加脂血也会引起电解质检测错误。

4.3黄疸：血清含有过量胆红素是患者体内的病理反应，对检验室而言，并无防范之道，但在检验报告单上应注明该样本有黄疸现象。

临床检验样本拒收的准则

1．盛样本容器和／或检验申请单上信息缺失或不符。

1.1样本容器上无标识或标识不清。

1.2样本容器上标签与检验申请单上信息不符。

1.3临床检验申请单上未填写患者姓名、检测项目和检测材料中的任何一项。

1.4检验申请单上送检项目本中心未开展，属需预约的科研项目但未事先联系确认。

2．样本不合要求。

2.1未使用合适的抗凝剂或样本类型不当。如基因检测项目错用肝素抗凝，促肾上腺皮质激素未抗凝等。

2.2应该分离血清送检的标本如离子检测(钾、钠、氯、钙、镁、磷)、乳酸脱氢酶LDH、肌酸激酶CK、C-肽、胰岛素、嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、贫血三项(铁蛋白、叶酸、维生素B12)等项目标本送检时未分离出血清。

2.3未按特定要求采集标本，如促肾上腺皮质激素(ACTH)等未冰浴采血，微量元素未使用专用采集管等。

2.4送检样本容器破损、有渗漏或选择不当。

2.5样本采集后保存不当。如淋球菌培养、脑脊液培养未室温保存，肾素活性、促肾上腺皮质激素(ACTH)、生长激素(GH)、降钙素(CT)、B型脑利钠肽(BNP)、甲状旁腺素(血清)、肿瘤坏死因子o(等未冰冻保存，样本反复冻溶，未按要求防腐等。

2.6患者准备状态不恰当，影响到实验结果。如未空腹查血脂。

2.7影响检测结果质量的其他样本状况。

3.发生下列情况原则上拒收样本：中度以上溶血：中度以上脂血：抗凝血中有凝块：量不够等。但由于情况特殊或取材困难或感染疾病的咨询等，本中心应临床的要求进行检测，并在报告单上注明样本状态供临床参考。

样本拒收后的处理：样本拒收后均会开具《不合格样本退单通知》，告知退单原因，并连同检验申请单一同返回给临床，样本按通常保存要求保存在我中心实验室或直接退回临床（除非临床明确提出处理要求），超过保存期后按医用垃圾处理。

检验科