EM固体菌种制作方法
EM固体菌种
本品由双岐菌、乳酸菌、芽孢杆菌、光合细菌、酵母菌、放线菌、醋酸菌等单一菌种复合发酵提纯而成，每克含有益总菌数≥1000亿个。本品促进畜禽增重率提高10～30%。使用本品所产的肉、蛋、奶能延长保鲜和储存。长期应用本品，综合效益极为显著。
【主要成分】双岐菌、乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌、醋酸菌、光合细菌、解磷钾菌等
【产品名称】EM菌种
【产品性状】粉剂【批准文号】豫饲添字（2015）09003
【产品规格】10克/瓶；10瓶/盒【生产许可】豫饲添（2014）H07009
【有效日期】3年【贮藏方法】密封避光阴凉处
【制作方法】
第一步：材料准备如下：菌种1瓶；水36斤；红糖4斤；发酵桶1个；食盐20克（选加）；尿素20克（选加）；
第二步：把4斤红糖加入36斤水中后加热烧开去除杂菌；待冷却到40度以下后再装入发酵桶内。并加入1瓶菌种。
第三步：密封好发酵3到7天时间即可制作成功；成功后原液检测标准：PH在3到5之间；镜捡活菌100亿每毫升。
【注意事项】
第一：原液制作时可以加入20克食盐和20克尿素；加入的话会好些。这个是选加的；没有不加也可以。
第二：干净的水源和红糖也可以不烧开加热；但加热可以清除绝大部分杂菌；这样效果好些。
第三：制作过程中会有很强气压产生；可以每天打开放气后接着马上盖起来继续发酵；或安装自动排气阀。
第四：发酵温度最好控制在30到35度最好；低于10度不发酵；高于45度会烫死部分菌。
第五：冬天温度低需要延长发酵时间；但最好用电热毯或电灯；棉被等等包起来加温；或放太阳下晒。
第六：EM菌属于厌氧发酵；也就是说容器必须密封好发酵；密封好坏是发酵成败的关键因素。
第七：EM原液发酵饱和了PH值应在3到5之间；如高于5的话可以再延长发酵几天即可。
第八：黑糖；黄糖；葡萄糖；蜂蜜；都可以代替红糖使用；但白糖不行。
第久：制作好的液体请在12个月内用完；固体原种保存期是36个月。
第十：制作过程会有很大气压，建议使用塑料和不锈钢容器，严禁使用玻璃瓶和陶瓷瓶制作，以免意外。
第十一：瓶底有沉淀物为菌种载体，属正常情况；若瓶内有气体，请缓慢开启，以免菌液外溢。
【养殖专用菌种】
【作用机理】
1、EM有益菌可改善动物肠道内的微生物环境，帮助消化系统对食物的充分消化和吸收。
2、EM有益菌可激活动物体内上万种酶的活性；促进畜禽生长，提高动物繁殖能力。
3、EM菌可提高畜禽特异性免疫和非特异性免疫功能；达到动物抗病防病和减少发病的作用，代替抗生素。
4、EM有益菌可分解动物粪便中的有害微生物，明显消除圈舍粪便恶臭，改善饲养环境。
【作用用途】
1、EM菌种可以发酵微生物饲料、制作EM菌液（EM原露、EM原液）等微生物产品；
2、EM菌种能防治雏鸡白痢，中鸡球虫、脱肛和仔猪黄白痢、腹泻等消化道疾病；
3、EM菌种促进畜禽生长，提高动物繁殖能力，提高饲料报酬率、产蛋率和产肉率；
4、EM菌种可以用于发酵猪床，发酵猪床材料（锯末、秸秆粉、干草粉、黄土）；
【用法用量】
1、用发酵好的EM原液按1：300～500倍稀释后供动物饮用、混入饲料、喷洒到动物粪便上、发酵秸秆等；
2、治疗动物疾病时可加倍使用（1：100倍稀释）。
【种植专用菌种】
【作用功效】
1、EM菌种原液能分解木质素、粗纤维等大分子有机物，使其转化为利于动、植物吸收利用的小分子物质。
2、EM菌在发酵代谢过程中形成优势菌群和产生的多种抗生性物质，能有效抑制有机物中病原菌的滋生。
3、EM菌种原液能分泌与合成有机酸、多种酶、生理活性物质，提高肥效。
4、EM菌种原液可以鳌合有机肥料中的重金属，降解其中的有毒有害物质，防止对土壤和作物的危害。
【用法用量】
１、发酵农家肥或有机垃圾：每公斤本品（指液体菌液）可发酵农家肥（有机垃圾）100到500公斤（生料、粗料用量大些）。具体操作方法：取1公斤本品，加入100公斤左右水制成稀释液（具体的用水量，要根
据农家肥或有机垃圾自身的含水量而定），而后与有机基料均匀混合，含水量控制在40%左右（手握可见
指缝有水渗出，但不下滴），压实后用塑料膜覆盖严，如发酵料多（数吨）时，当堆心温度高于65℃时，
进行翻堆。共翻堆2～3次，夏季发酵2～3周，冬季发酵3-～4周，即可充分发酵成熟。
２、发酵人畜粪尿：按粪池内人畜粪尿量的万分之一到五（即每立方米的粪尿使用本品100～500ml，粪稀量小些），加适量水稀释后，投入粪池，搅拌均匀，起到消除恶臭和提高肥效的效果，以后每10～15天投放
一次。
３、发酵秸秆：先配制好稀释液，每堆一层秸秆喷洒一层稀释液，最后上覆20～30cm厚泥土即可。如冬季气温过低，或要求发酵快些，加盖一层薄膜，用泥或石压边密封发酵。
４、发酵沼气：将本品1L稀释1：300倍后直接加入沼气池内，可增加沼气产量300%。
【水产专用菌种】
【作用功效】
１、本品采用微生物EM菌生物工程技术，结合水产养殖业的特点，在普通益生素的基础上进行科技改良，用大自然中精选的数十种有益微生物为菌种，经特殊发酵工艺精制而成。富含水生动物生长必需的营养物质。
２、具有促进消化和吸收，提高抗逆能力，明显改善鱼、虾、蟹、蛙、贝类健康状况。
３、经常使用本品还能有效改良水质、促进残饵及其它飘浮有机物的分解、降解氨氮、亚硝酸盐、硫化氢等有害有毒物质、增加水中溶解氧，促进水体中有益浮游生物的生长；
４、益生菌原液进入水体后，能抑制病原微生物和有害物质，调整养殖生态环境，提高水中溶氧量，促进养殖系统中的正常菌群和有益藻类活化生长，保持养殖水体的生态平衡。
５、在使用消毒剂和抗生素类药物后使用本品，还可重新调整受破坏的水体环境，避免水生动物用药后引起不适。
【用法用量】
１、每亩水面一米水深算；本品菌液2公斤稀释后5～10小时后全池泼洒或直接拌料口服。
２、池塘养殖：放苗或水花时，用30ml菌液兑水10公斤，浸泡鱼苗15分钟。放苗或水花前4天每亩用2kg 菌液兑水全池泼洒。以后每隔10到15天，每亩用2kg菌液兑水泼洒。
３、水库使用，每亩按2kg菌液使用一次，每10到15天使用一次，最好配合使用有机复合肥，这样效果更佳。
４、全池泼洒：1米水深,每亩使用约1公斤菌液,10～15天使用一次；养殖中、后期可酌情加大用量至2公斤菌液。
５、拌料口服：使用饵料的0.5%,即每100公斤饲料使用500ml菌液。
【注意事项】
1、本品为活菌制剂，细菌活性较强，应密闭阴凉避光保存。温度不能超过45度；
2、禁止与抗生素、杀虫剂、杀菌剂、消毒剂、强酸强碱类产品混合使用。
3、若上部出现白色悬浮物或少量沉淀均属正常现象，请摇匀后使用。
4、使用本品时免疫程序正常进行，最佳使用时间为上午10点至下午4点。
自制EM菌制作方法
自制EM菌制作方法 一：【操作方法】 将1公斤白糖（红糖更好,最高用量2.5公斤，用量越大，浓度越高）倒入洗干净的塑料容器中（容量大于12公斤，因为需要预留产储气空间），倒入8公斤30-40℃的冷开水，倒入本品一包（500克），简单搅拌使本品溶解，然后密封放在室温25-40℃的环境下进行培养，每天开盖放气与搅拌1-2次，3-10 天完成培养即可使用（低于25℃时间会延长，产气大的阶段正是培养作用的高峰期，产气连续2-3天感觉没有增加或下降时表示已经完成培养）。在2个月内使用效果最好，每次取出后一定要密封保存，发现塑料桶胀气特别严重时要放气，放气时切忌注意安全，防止桶盖冲开击伤人等情况发生。 【使用方法】 生产完成的EM活菌使用方法与市场上销售的基本无差异，与等量的红糖（白糖、葡萄糖也可）加适量的40℃温水激活1小时以上后使用效果最佳；自产1个月内的也可以不添加糖，直接加温水稀释后使用。 二：种制作菌液的方法：（以一瓶为例） 1、先烧开10公斤的水，加一公斤的红糖，把红糖融化开，把红糖里面的有害菌消除。 2、然后把上述融化后的红糖水冷却到30~40度情况下加1瓶菌种 3、然后把10公斤的菌水整体装进一个大塑料壶或者其他的容器中，要密封发酵，不能漏气。不要装的太满，要预留10-15%的缓冲空间，在发酵过程中会产生气体，装满容易涨破塑料壶。 4、发酵7-12天天左右，温度低要多发酵几天，打开瓶口，有气体产生。闻到酸甜闻到就证明发酵成功。（低于15度不能发酵；15-20度发酵20-15天；20-30度，发酵15-10天；30-40度发酵6-10天） 5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完，就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。技术很简单， 三：EM菌液制作方法，em菌种发酵方法，EM使用方法 EM菌种制作EM菌液的方法以制作50公斤菌液为例子 原料准备：能够密封的塑料桶（容量50公斤）红糖（5公斤）菌种（5瓶）无菌干净的水（深井水，凉开水，或者放置2天的自来水）
em菌发酵剂怎么发酵鸡粪
em菌发酵剂是微生物制剂，可以用来发酵多种的粗饲料来饲养动物，例如：粪便、潲水、豆渣、秸秆、豆粕等。em菌发酵剂来发酵鸡粪喂猪可以提高猪的免疫力减少生病，还可以改变鸡粪的适口性，像鸡粪我们都知道，鸡的肠胃较短吃进去的饲料有些根本来不及消化吸收就随着粪便排解出去，不过这些粪便在经过em菌发酵剂发酵过之后却是用来喂猪很好的饲料，因为从本身改变了鸡粪的适口性，所以猪非常爱吃。 那怎么来使用em菌发酵剂来发酵鸡粪喂猪的呢？ 由于鸡的肠子较短，食物在肠道中逗留的时间不长，吃下饲料中的养分一般只能吸收30%左右，大部分通过直肠而被排出体外。鸡粪中含有的营养物质随鸡所摄取饲料的不同而有所差异，一般地说，每公斤鸡粪的干物质中有13.4～18.8千焦的总能量，其含氮量达30～70克。现在使用农盛乐粪便发酵剂即（农盛乐饲料发酵剂）将鸡粪发酵过后就可以直接来喂猪了，因为鸡粪发酵过后是很好的喂猪饲料。 既然鸡粪里面含有这么多的营养成分，那该怎么用粪便发酵剂来发酵鸡粪喂猪的呢？ 1、鸡粪的收集 (1)使用的鸡粪必须是健康鸡的粪便，越新鲜质量越好。如果是饲喂大剂量抗生素添加剂的鸡粪，使用 (2)为避免营养的损失，夏季不要超过一日清粪，冬季不要超过三日，以当日清理当日发酵效果最好 2、发酵料配制
将无霉变无病菌的新鲜鸡粪60%(或鸽子粪、鸭粪也可发酵使用)，玉米粉15%，谷糠10%、麦麸5%、农盛乐粪便发酵剂0.5-1%(加入与菌液等比例红糖效果更好)，充分搅拌均匀，调节水分到60%左右(可以提前将农盛乐粪便发酵剂加入适量水中稀释，更利于其搅拌均匀)。其简单判断办法为：即用手紧抓物料一把能成团，松手落地能散开为宜，水分过高过低均不利。然后装入塑料袋或能密封的池子(缸或者做个小发酵池)，密封发酵5-7天(冬天时间略长)，当鸡粪呈黄绿色，无臭味而略带酒酸味时(发酵时间过长酒味过浓)，发酵基本完成，即可饲喂。饲喂时应注意遵从“由少到多，慢慢适应”的原则，猪很爱吃，不易生病，皮毛红润发亮，喜睡，一般能替代最多30%的精饲料。 3、鸡粪发酵后喂猪的技术 发酵后鸡粪的缺点是：能值仍然较低，非蛋白氮仍然较多，所以，需要结合能量高的饲料如玉米、大小麦、薯粉，高粱、麦麸等一起喂养，同时供给大量的清洁饮水，而对于生长较快的动物如肉用仔鸡，肉用仔猪等，不宜多喂。 ①空怀母猪和怀孕前90天的母猪：发酵鸡粪50%、玉米37%、麦麸7%、豆粕6%。(注意先从5%开始用起，慢慢增加用量，有一个适应的过程)，将上述混合饲料混合拌匀后喂猪更好。怀孕90天后的、哺乳母猪要少量饲喂或不饲喂发酵鸡粪。 ②中大猪：发酵鸡粪30%、玉米45%、麦麸5%、豆粕18%、鱼粉2%、。(注意先从5%开始用起，慢慢增加用量，有一个适应的过程)，将上述混合饲料混合拌匀后喂猪。
菌种活化保存法
附件： 新菌株（乳酸菌）斜面培养法 1.购买新菌株（安瓿瓶装冻干粉） 2.菌种管开启方法一：按购买菌种上的说明进行操作即可。 3.菌种管开启方法二（本次实验方法均在水平层流台进行）： 3.1水平层流台开启风机跟紫外灯，半个小时 3.2 用浸过75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。 3.3将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。 3.4 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。 3.5 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。 4.用玻璃三角瓶121.0℃灭菌约10-30ml的生理盐水20分钟 5.将开封后的冻干粉倒入生理盐水中，摇匀 6.用接种环沾取生理盐水，转接与MRS培养基平板上，在36.5℃中恒温培养48-72小时 后，得到二代菌。 7.此时可以使用二代菌进行菌株扩大培养，或对其进行保存菌种。 注意事项： 1 菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在5 ℃-10 ℃环境下。 3 菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。 4 菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。 第二代第2 代)观察是否具有典型的菌落形态,然后挑取单一的纯菌落,进行革兰染色、镜检,观察其染色特征及菌体形态,并进一步做生化鉴定实验以确定菌种。第三代为工作用菌。 乳酸菌菌种保存法 方法一：斜面保存法（略） 方法二：20%甘油保存法 器材：冻存盒、冻存管(2ml装)、甘油（丙三醇）、MRS肉汤培养基、1ml移液器及枪头、酒精灯、水平层流台、高压灭菌锅 操作步骤： 1.在水平层流台中用接种环挑取所需保存的的菌株放于灭菌过的MRS肉汤培养液，进行 36.5℃恒温培养48小时 2.配制40%的甘油，用移液器移取0.5ml于冻存管中，放于冻存盒 3.用报纸将冻存盒包扎好，放于灭菌锅中灭菌（121.0℃、20Min） 4.在水平层流台中，用移液器移取0.5ml培养后的MRS肉汤培养液加入到冻存管中，拧 紧盖子，摇匀，标识。 5.在冻存盒外也做好操作人，日期，所保存的菌种等信息标记 6.将冻存盒放于保鲜袋中，放入冰箱的冷冻室层进行保存，一般可以保存至两三年。 7.若是需用，那一冻存管样进行培养即可。 实验室菌种激活方法
EM菌液制作方法与配方
E M菌液制作方法与配方 Prepared on 24 November 2020
EM菌液制作方法与配方 信息来源：广宇生物加入日期：2009-2-13点出：384 一、【ＥＭ原液发酵方法】：制作ＥＭ菌种发酵液——EM原液 EM菌液（100公斤）=12支EM菌种+70公斤水+15公斤红糖+食盐2汤勺+100公斤能够密封的水桶+前6天不要打开 注意：不要用自来水。红糖食盐用温水化开，最后加菌种，搅拌均匀，夏天3-6天，冬天10-15天左右，密封即可。 二、【水产养殖水肥配方】 1、有机肥：（发酵动物粪便40%，桔杆或草粉10%，泥碳土20%、活性小肽%） 2、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）10% 3、活菌制剂：（EM原液）1% 4、复合氨基酸1%，复合维生素1%，多糖%，核酸%，腐植酸1%，蛋白酶%，淀
粉酶（共5%） 5、微量元素10%（N=%、P=4%、K=4%、Ca、Na、Mg、Cu、Fe、Zn、Mn、B、Si） 三、【高效种植微生物肥料配方】 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）4% 2、活菌制剂：EM菌原液1% 3、动物粪便：80% 4、微量元素%、N=%、P=5%、K=5%（合计15%） 四、【种植叶面微生物肥料配方】 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）12% 2、活菌制剂：（EM原液）80% 3、复合氨基酸1%，复合多维生素1%，多糖%，核酸%，腐植酸1%，蛋白酶%，淀粉酶%（合计4%） 4、微量元素%、N=%、P=1%、K=1%（合计4%）
五、【微生物饲料—全价料配方】玉米 小麦麸 大豆粕 棉籽粕 菜籽粕 微生物发酵秸秆粉 复合酶 复合微量元素 复合维生素 皮毛营养调控剂 无氟磷酸氢钙
使用em菌发酵剂发酵鸡粪的方法
鸡粪、鸽粪、鸭粪、猪粪、牛粪、羊粪等动物粪便有很多的营养价值，直接排放不仅污染环境，而且造成很大的浪费，其实这些粪便经过专业的发酵剂处理之后不仅可以制作成肥料，还可以发酵做成动物饲料。 （一）、利用农盛乐em菌发酵剂发酵鸡粪做肥料的方法： 1）发酵原料：如谷糠、杂草、人、畜、禽粪便、作物秸秆（切碎）、茎叶、锯末木屑、食用菌基质残渣和饼粕等。 2）工具：搅拌机；塑料容器或水泥池（或者土坑垫塑料薄膜）；塑料薄膜；粉碎机（普通农用型）；铁锹。 3）发酵菌：种植em菌发酵剂 4）配比：谷糠、杂草、人、畜、禽粪便、作物秸秆（切碎）、茎叶、锯末木屑、食用菌基质残渣和饼粕等。准备400公斤材料和种植em 菌发酵剂1公斤 5）操作规程： ①将发酵原料按配比准备400公斤，此为发酵原料待用； ②将1公斤种植em菌发酵剂倒入50公斤水中稀释搅拌均匀，稀释用水最好为井水或河水，若为自来水请放置24小时后再用；能够适当的溶解一些红糖在里面效果更佳。 ③如有搅拌机：可以先将发酵原料混合2分钟后，再倒入发酵剂稀释液搅拌6分钟；没有搅拌机：用铁锹搅拌按由少到多的原则，即先将菌液稀释液倒入少量发酵原料中搅拌均匀，直到没有团块，然后再将搅拌好的少量发酵原料倒入剩余发酵原料中搅拌均匀，直到没有团
块；（注意：视发酵原料干湿程度增减稀释用水水量，稀释的em菌发酵剂用水应是发酵原料的40%左右，拌成以手握成团，指缝见水但不滴水珠，松手即散为好。注意：水多了易酸，少了发酵不透。如发酵原料较湿，应减少稀释的用水量。） ④将混合后的发酵原料放入塑料容器或水泥池（或者土坑垫塑料薄膜）中，最后装满压实，排去空气后用塑料薄膜密封，一定要完全密闭，适宜温度为25-35℃，发酵5-10天（一般夏4天，春秋7天，冬10天），注意温度和时间的掌握，直到没有臭味含有酒味即为发酵成功。 （二）利用农盛乐em菌发酵剂发酵鸡粪做饲料的方法：将无霉变无病菌的新鲜鸡粪60%(或鸽子粪、鸭粪也可发酵使用），玉米粉15%，谷糠10%、麦麸5%、em菌发酵剂0.5-1%（加入与菌液等比例红糖效果更好），充分搅拌均匀，调节水分到60%左右（可以提前将em菌发酵剂加入适量水中稀释，更利于其搅拌均匀）。其简单判断办法为：即用手紧抓物料一把能成团，松手落地能散开为宜，水分过高过低均不利。然后装入塑料袋或能密封的池子（缸或者做个小发酵池），密封发酵5-7天（冬天时间略长），当鸡粪呈黄绿色，无臭味而略带酒酸味时（发酵时间过长酒味过浓），发酵基本完成，即可饲喂。饲喂时应注意遵从“由少到多，慢慢适应”的原则，猪很爱吃，不易生病，皮毛红润发亮，喜睡，一般能替代最多30%的精饲料。 发酵后鸡粪的缺点是：能值仍然较低，非蛋白氮仍然较多，所以，需
菌种活化-操作方法
菌种活化-操作方法-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化 A. 低温保存管之临时存放及解冻 1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。 2. 准备 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。 3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于 37℃浴槽之小试管架上。 4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。 B. 菌株活化: 在无菌操作下 1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。 2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。 C. 划线法 1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。 2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。 3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。 4. 灼烧接种环，将接种环归位。 D. 图示 （1）金属接种环 （2）平板划线法
EM菌液制作方法
一、EM菌液制作方法( 细菌生长繁殖的条件) 1、液体EM菌种的制作方法：按EM固体原菌种10克：红糖0.1公斤：水1公斤（100度白开水放凉到40度时的无菌水）的比例混合均匀，密闭保温（人体温度35-37度）发酵，每1-2天摇动一次，5-7天即成，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。保持密闭、放置阴凉干燥处，通常可保存18个月。可以作为液体菌种使用。请参考( 细菌生长繁殖的条件) 2、液体菌种扩陪成EM原液：按液体菌种1公斤：红糖1公斤：水10公斤（100度白开水放凉到40度时的无菌水）的比例混合均匀，密闭保温（人体温度35-37度）发酵，每1-2天摇动一次，5-7天即成，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。保持密闭、放置阴凉干燥处，通常可保存18个月。用时按照说明书稀释比例稀释。请参考( 细菌生长繁殖的条件) 3、用EM菌液制做植物防虫、杀菌液请参考( 细菌生长繁殖的条件) EM菌种、红糖、30℃以上白酒、清水按1：8：1：100的比例备料。 将等量的EM发酵液、红糖与酒及100倍的清水混合，搅匀盖紧，发酵5-10天左右，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。保持密闭置阴凉干燥处通常可保存6－18个月。
EM防虫液能增强植物新陈代谢，强化叶片保护膜的角质层，防止病原菌进入，它的酯成分在草食害虫体内不分解，产生生理障碍致死，对线虫等多种害虫有显着效果，但应及早使用，虫害大面积发生时使用效果甚微。 使用时的标准稀释倍数为1000-500，雾状喷施，叶片的正反两面都喷到。 二、【生产水产养殖水肥配方】请参考( 细菌生长繁殖的条件) 1、有机肥：（发酵动物粪便40%，桔杆或草粉10%，泥碳土20%、活性小肽%） 2、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）10% 3、活菌制剂：（EM原液）1% 4、复合氨基酸1%，复合维生素1%，多糖%，核酸%，腐植酸1%，蛋白酶%，淀粉酶（共5%） 5、微量元素10%（N=%、P=4%、K=4%、Ca、Na、Mg、Cu、Fe、Zn、Mn、B、Si） 三、【生产高效种植微生物肥料配方】请参考( 细菌生长繁殖的条件) 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）4% 2、活菌制剂：EM菌原液1% 3、动物粪便：80% 4、微量元素%、N=%、P=5%、K=5%（合计15%）
EM菌的简易生产方法
EM菌的简易生产方法 1．EM菌的生产方法 (1)场地设备：生产场地可选择光线较暗的室内或能遮光的楼上阳台。主要生产设备是容量50千克或25千克的有盖塑料桶、提水桶、塑料瓶、锅和台秤。 (2)生产原料：EM菌种(原露)、红糖、干净的井水或自来水。 (3)发酵方法：以生产50千克为例，先将容量50千克的塑料桶洗干净，加入干净生水45千克静置24小时备用，再将2千克红糖溶于4千克热水中，冷却至35～37℃后加入EM菌种2千克，密封2小时使菌种活化，然后倒人大塑料水桶中盖上桶盖，不必完全密封，让其在半密封状态下发酵。在发酵期间要注意开盖观察，发酵到第四天，水面会出现泡沫，到第十天泡沫消失，水面浮起一片白色悬浮物，15天后悬浮物沉人桶底，发酵结束。一般气温在30℃以上，发酵15～20天完成，气温在30℃以下，发酵时间要延长到25～35天才完成(比原来资料介绍的时间要长得多)。 2．EM活菌剂质量检测方法 (1)看颜色：正常为棕黄色。若为乳白色，说明发酵失败。 (2)闻气味：有较浓的甜酸味。没有酸味或变味说明变质。 (3)pH值：用试纸检测pH值在3．2～3．8之间达标。若pH值未达标，说明发酵时间不够或红糖放得少，必须加糖继续发酵。 (4)把EM装入一个矿泉水瓶中，装到大半瓶就拧紧瓶盖，用力摇几下，如果瓶中有大量气体，说明发酵成功，没有气体说明发酵失败。瓶里出现一些悬浮物属于正常现象。 (5)有条件的要定期对EM菌液内5科、10属、80种微生物的含量进行检测，以保证EM菌种的质量。 3．EM贮存及使用的注意事项
(1)EM活菌制剂要保存在不透明的容器内，保存期为6个月。如用透明塑料瓶装，很快就会变质。自产EM用做2级菌种，使用期为3个月；用于养殖业，使用期为6个月。 (2)长时间不使用，要放在阴暗干燥处半密封保存。若完全密封保存时间过长，气味会发生变化，影响质量。 (3)一次引种，可连续不断生产使用。在生产过程中，应注意不断提纯复壮菌种。没有提纯复壮能力的，一般连续接种生产4～6代以后就要更换新菌种。 (4)在EM生产和使用过程中，不能接触任何抗生素药品。养殖使用抗生素药品，用EM时要注意间隔期(一般要求间隔12～24小时)。
菌种活化_操作方法
低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化 A. 低温保存管之临时存放及解冻 1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。 2. 准备 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。 3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于 37℃浴槽之小试管架上。 4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。 B. 菌株活化: 在无菌操作下 1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。 2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。 C. 划线法 1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。 2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。 3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。 4. 灼烧接种环，将接种环归位。 D. 图示 （1）金属接种环
（2）平板划线法 冷冻干燥管之开管说明 下列步骤请在无菌环境下操作： 1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。 2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。 3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。 4、( a ) 适用于细菌 用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。 ( b ) 适用于霉菌、酵母菌 用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml无菌水，滴入内管内，待干燥粉末溶解后，以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml 无菌水之试管内，轻微震荡使其均匀后，静置30至60分钟。 5、取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板培养基上，做划线分离培养或做成一系列之稀释，用无菌L 型玻棒均匀涂抹，以检验菌种之纯度及活化情形，而剩余的菌体则全部移入指定的液体培养基内，并依指定的温度培养之。 6、某些菌种经过冷冻干燥保存后，迟滞期( lag period ) 较长，必须等培养二倍时间后才能长出，且再经过一、二次继代培养(Subculture) 后才能正常生长。经过以上的努力后仍培养失败，才视为不能活化。 7、若菌种未能活化，或活化之菌落有疑问时，请于收到菌种之一个月内，以问题菌株反应单传真至本中心，即进行处理。 8．未开封之冷冻干燥管，请冷藏于4℃冰箱，切勿冷冻保存。
em菌液制作发酵床的步骤
em菌液制作发酵床的方法： 材料准备：锯末、稻壳、盐、土、农盛乐em菌液（也可使用发酵床菌种，比较经济划算）。（没有锯末或者稻壳也可以用玉米芯和秸秆代替，最好用锯末（锯末耐腐烂性比较好，用的时间会比较长）） 材料比例：锯末60%左右，稻壳30%左右，土10%，盐0.3%，农盛乐EM菌液2L/m3。材料打碎：物料粗细大小标准是2mm以上5mm以下。垫料太粗没有截口，微生物难以侵入，发酵效果不理想或者根本不发酵。物料太细其碳化速度太快，没等到发酵，就已经白白浪费掉了。 水分调节：水分的控制要根据垫料的干湿程度来决定加水的多少，要求垫料混合后水分应在50%左右。（即手抓成团，不滴水，手上留有水印，放下一触能散即可） 发酵方法： ①将所有准备好的物料（物料可以因地制宜，自由搭配）按比例混合均匀。 ②将农盛乐EM菌液加水稀释（稀释倍数根据物料水分来定），均匀喷洒在物料上，边喷洒，边翻堆，直至拌均匀，水分调节在50%左右，水分不足时可另外加水单独喷洒（注，不要一次性把计算好的水全部加入，最好分次加，这样才能更好的控制水分，不至于水分过大而影响发酵质量）。农盛乐提供发酵床专用菌种，可以制作养猪养鸡养羊养牛养鸭养鹅发酵床，另外提供发酵床技术支持，保证成功。农盛乐发酵床菌种一瓶30元，可以制作10平米的发酵床。 农盛乐em菌液主要是由放线菌、乳酸菌、芽孢杆菌、枯草杆菌、光合细菌、酵母菌等七大类微生物中的10属80种有益微生物复合而成，有效活菌数≥200亿cfu/ml（%）。我们提供发酵床制作技术支持，量大的可以上门指导。 发酵床垫料发酵成功的标准： 刚发酵好的垫料手感松软，略带酸香或清香味，有时会见到白色的菌丝，温度在20～40℃左右（这个和发酵所处外界温度有关系）。（15-20度发酵15-10天；20-30度，发酵10-7天；30-40度发酵7-4天，发酵时间越长效果越好） 发酵床垫料的更换： 牲畜每批次转栏或出栏后，应对圈舍进行全面立体的消毒处理，然后补充部分新鲜木屑或秸秆粉及适量农盛乐EM原液，调节水分至50%左右，将垫料在圈栏中堆积起来进行发酵处理，温度上升到50℃以上高温24小时后，即可作为发酵床垫料重新使用。
EM菌液制作方法与配方
EM菌液制作方法与配方 信息来源：广宇生物加入日期：2009-2-13 点出：384 一、【ＥＭ原液发酵方法】：制作ＥＭ菌种发酵液——EM原液 EM菌液（100公斤）=12支EM菌种+70公斤水+15公斤红糖+食盐2汤勺+100公斤能够密封的水桶+前6天不要打开 注意：不要用自来水。红糖食盐用温水化开，最后加菌种，搅拌均匀，夏天3-6天，冬天10-15天左右，密封即可。 二、【水产养殖水肥配方】 1、有机肥：（发酵动物粪便 40%，桔杆或草粉 10%，泥碳土 20%、活性小肽 0.3%） 2、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）10% 3、活菌制剂：（EM原液）1% 4、复合氨基酸1%，复合维生素1%，多糖0.5%，核酸0.5%，腐植酸1%，蛋白酶0.5%，淀粉酶0.5 （共5%） 5、微量元素 10%（N=0.5%、P=4%、K=4%、Ca、Na、Mg、Cu、Fe、Zn、Mn、B、Si） 三、【高效种植微生物肥料配方】 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）4% 2、活菌制剂：EM菌原液1% 3、动物粪便：80%
4、微量元素1.5%、N=3.5%、P=5%、K=5%（合计15%） 四、【种植叶面微生物肥料配方】 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）12% 2、活菌制剂：（EM原液）80% 3、复合氨基酸1%，复合多维生素1%，多糖0.4%，核酸0.1%，腐植酸1%，蛋白酶0.2%，淀粉酶0.3%（合计4%） 4、微量元素1.5%、N=0.5%、P=1%、K=1%（合计4%） 五、【微生物饲料—全价料配方】 玉米 50.0 小麦麸 8.00 大豆粕 8.00 棉籽粕 3.00 菜籽粕 2.00 微生物发酵秸秆粉 28.0 复合酶 0.15 复合微量元素 0.15 复合维生素 0.02 皮毛营养调控剂 0.02 无氟磷酸氢钙 0.16 食盐 0.20 复合赖氨酸 0.10 石粉 0.20 六、【微生物饲料—添加剂配方】
2018-大肠杆菌菌种活化步骤-推荐word版 (6页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！ == 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ == 大肠杆菌菌种活化步骤 篇一：抑菌实验步骤 抑菌实验：待测菌金色葡萄球菌；枯草芽孢杆菌；大肠杆菌；绿脓杆菌 菌种活化：菌种，进行活化，可以划线，也可以涂布， 划线：直接用接种环在酒精灯上烧过之后，等之冷却，蘸 取进行划线！ 涂布：用枪头吸取100ul的菌液涂布既可！本实验采用涂 布法 1.金色葡萄球菌最佳生长条件(过夜培养一般为12h) 2. 枯草芽孢杆菌培养条件（过夜培养） 3.绿脓杆菌最佳培养条件（14-17h） 培养基 MH（A）培养基( Mueller-Hinton Agar)成分：牛肉浸粉（牛肉膏） 5g；酪蛋 白水解物 17.5g；淀粉 1.5g；琼脂 12.5g MH液体培养基配制方法：称取本品36.5克，加入1000ml蒸馏水中，加热煮沸 溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟备用。 牛肉膏蛋白胨固体培养基（LB培养基）：牛肉膏10 g，蛋白胨10 g，琼脂15g，NaCl 5 g，双蒸水1000mL，pH 7.2-7.5，121℃灭菌20min。 牛肉膏蛋白胨液体培养基：不加琼脂，其他同牛肉膏蛋白胨固体培养基。 菌悬液的配制
将冰箱保存的大肠杆菌移接到牛肉膏蛋白胨固体培养基上，置于37℃恒温培养 箱中培养24 h，用接种环挑取少许菌体与装有无菌生理盐水的试管中，震荡均匀，制成菌悬液。具体为用接种环挑取一环（本实验是吸取100uL菌悬液）于 5 mL的无菌生理盐水中，每10倍稀释一次地逐级稀释，取（10-8、10-9、10- 10 、10-11）的浓度100μL做涂布实验，每个梯度平行三组，加100μL药品 溶剂（二甲基亚砜）的空白对照3个平板，完全不加任何样品即只是LB培养基的完全空白对照1个平板，调整菌悬液浓度，用平板菌落法测定其菌液浓度， 使其含菌体数为103 cfu/mL，即为供试菌悬液。 抑菌作用初步筛选 将灭菌固体培养基加热至熔化，待冷却至50℃时，每20ml培养基倒入无菌培 养皿中。待平板自然晾干后，分别移取0.1ml待测药品，0.1 mL供试菌悬液， 均匀涂布于加药平板上，每个处理3次重复。(涂布30min后再倒置)另设置对 照组，涂菌，以等量无菌水（溶解药品物质）代替药液。上述操作在超净工作 台内进行。将做好的细菌平板在37℃恒温培养24 h，统计菌落个数，按照下式计算抑菌率。 抑菌率=对照菌落数-处理菌落数?100% 对照菌落数 实验结果表示为：平均数±标准误差（Mean±SDE）。 菌种活化：37℃培养；约24H 挑取两环于50ml 液体培养基上活化：先恒温150r/min震荡12h,再静置培养 8-12h。达到稳定期后，4度保藏，备用。 生理盐水：8.5gNaCl加入到1000ml 蒸馏水中，121度高压蒸汽灭菌15-20min 即可。 篇二：大肠杆菌电击转化流程 大肠杆菌感受态制备及电转化流程 1. 细菌电转化感受态细胞的制备 准备：50mL离心管3个 10%甘油≥200mL 灭菌蒸馏水≥100mL 冰盒（50mL离心管预冷）2个 1）由-80℃冰箱保存的菌种划单菌落，过夜培养16-20h。晚上将新鲜的菌落接 种于装有20mLLB培养基的250mL三角瓶中，37℃振荡培养过夜（约12h），转 速控制在200rpm； 2）第二天，取过夜培养物以1%接种量（可适当加大）转接入2个含50mLLB培 养基的 250mL三角瓶中，37℃剧烈振荡（200rpm）培养至OD600约为0.5~0.6；
EM菌液制作方法
E M菌液制作方法 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
制作EM菌液方法：比例：100克EM菌液，200克红糖，15公斤水，按这个比例剩余的就放在饮料瓶中密封保存 有以下两种制作方法： 【第一种方法】：直接制作：1瓶菌种+4斤红糖+36斤水+密封装起来发酵3到7天=40斤原液；优点是简单方便；缺点是发酵没有第二种充分； 【第二种方法】：激活菌种：取菌种10克 + 红糖公斤 + 水1公斤；密封培养1到2天后即可激活；激活后就是液体菌种了；随后转入原液制作阶段） 制作原液：（1公斤液体菌种+红糖2公斤+17公斤+密封发酵3到7天=制作成40斤EM菌原液）打开容器口闻到有酸甜味即制作成功。可以作为原液使用。 原液标准：（气味：酸甜；PH值：3～5；镜检活菌含量：100亿/ml左右） 【制作说明】第一：第一种方法简单容易操作；第二种方法制作原液效果更好；强烈推荐用第二种； 第二；有条件的可以加点食盐和尿素；加入的话会好些。但会影响气味和PH值； 第三；最好恒温35度制作速度会很快；气温低也可，只是需要延长发酵时间； 第四；本品制作过程菌种活性很强；会产生很强气压；务必缓慢打开容器；以免喷洒出来； 有以下两种制作方法： 【第一种方法】：直接制作：1瓶菌种+4斤红糖+36斤水+密封装起来发酵3到7天=40斤原液；优点是简单方便；缺点是发酵没有第二种充分； 【第二种方法】：激活菌种：取菌种10克 + 红糖公斤 + 水1公斤；密封培养1到2天后即可激活；激活后就是液体菌种了；随后转入原液制作阶段）
EM菌液制作方法
制作EM菌液方法：比例：100克EM菌液，200克红糖，15公斤水，按这个比例剩余的就放在饮料瓶中密封保存 有以下两种制作方法： 【第一种方法】：直接制作：1瓶菌种+4斤红糖+36斤水+密封装起来发酵3到7天=40斤原液；优点是简单方便；缺点是发酵没有第二种充分； 【第二种方法】：激活菌种：取菌种10克 + 红糖0.1公斤 + 水1公斤；密封培养1到2天后即可激活；激活后就是液体菌种了；随后转入原液制作阶段） 制作原液：（1公斤液体菌种+红糖2公斤+17公斤+密封发酵3到7天=制作成40斤EM菌原液）打开容器口闻到有酸甜味即制作成功。可以作为原液使用。 原液标准：（气味：酸甜； PH值：3～5；镜检活菌含量：100亿/ml左右） 【制作说明】第一：第一种方法简单容易操作；第二种方法制作原液效果更好；强烈推荐用第二种； 第二；有条件的可以加点食盐和尿素；加入的话会好些。但会影响气味和PH值； 第三；最好恒温35度制作速度会很快；气温低也可，只是需要延长发酵时间； 第四；本品制作过程菌种活性很强；会产生很强气压；务必缓慢打开容器；以免喷洒出来； 有以下两种制作方法： 【第一种方法】：直接制作：1瓶菌种+4斤红糖+36斤水+密封装起来发酵3到7天=40斤原液；优点是简单方便；缺点是发酵没有第二种充分； 【第二种方法】：激活菌种：取菌种10克 + 红糖0.1公斤 + 水1公斤；密封培养1到2天后即可激活；激活后就是液体菌种了；随后转入原液制作阶段） 制作原液：（1公斤液体菌种+红糖2公斤+17公斤+密封发酵3到7天=制作成40斤EM菌原液）打开容器口闻到有酸甜味即制作成功。可以作为原液使用。
自制培育EM菌原液的方法
如何自制EM菌液 EM菌广泛应用在水产、种植、养殖等领域，越来越多的人在使用EM菌，那么我们怎样通过自制EM菌节省成本呢？ EM菌是有益微生物复合菌群，包括光和菌、乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌、醋酸菌、双歧杆菌、放线菌七大类80多种菌，所以自己要配置的话，不容易搜集这么多菌、但是却可以根据自己用途单独搜集某单类菌。 比如说，我们把米饭用盒子装好，然后放入密林中埋起来，过一周时间，取出盒子，就能看看到盒子里的米饭长了一层白色的绒毛，这就是土著菌，当然还会有其他的腐败细菌。 新疆畜科院饲料所王文奇说，EM菌原露都是购买的，因为要制作EM菌原露需要各种微生物，原料很复杂，一般自制是不可能的，所以建议需要时最好到正规厂家购买。 但是，EM菌原液在用量大的时候也是一笔不小的开支，那么我们怎样降低EM菌的应用成本又可以自制培育正规的EM菌原液呢？ 河南农富康生物科技有限公司为大家解决了这一问题，农富康公司推出EM菌原种，既休眠状态下存储的粉末状的EM菌，使用时候加入培养液激活便可大量繁殖培育出EM菌原液，除了包含上述菌群外，农富康EM菌种还加入了硝化细菌、土著菌等两大类20多种有益细菌、扩展了EM菌的应用功能提高了使用效果。 使用农富康EM菌种培育EM菌原液时，一瓶农富康EM菌种可培育10公斤原液，使用时候按1：200的比例稀释，也就是说一瓶农富康EM菌种可配置200公斤稀释液，而一瓶农富康EM菌种的售价仅为35元，这也是农富康公司对7年来新老客户对农富康公司一如既往支持的回馈。 所以呢，在降低成本的同时，为了保证EM菌使用质量我们可选择农富康EM菌种自行配置EM菌原液。 农富康EM菌种配置菌液的方法如下： 以制作50公斤菌液为例子 原料准备：能够密封的塑料桶（容量50公斤）红糖（5公斤）农富康菌种（5瓶）无菌干净的水（深井水，凉开水，或者放置２天的自来水） 步骤1、先把塑料桶装入40公斤无菌干净的水。
EM菌液制作方法与配方精选文档
E M菌液制作方法与配 方精选文档 TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-
EM菌液制作方法与配方 ?信息来源：广宇生物? ??加入日期：2009-2-13?点出：384 一、【ＥＭ原液发酵方法】?：制作ＥＭ菌种发酵液——EM原液 ???? ???? EM菌液（100公斤）=12支EM菌种+70公斤水+15公斤红糖+食盐2汤勺+100公斤能够密封的水桶+前6天不要打开 注意：不要用自来水。红糖食盐用温水化开，最后加菌种，搅拌均匀，夏天3-6天，冬天10-15天左右，密封即可。 二、【水产养殖水肥配方】 1、有机肥：（发酵动物粪便?40%，桔杆或草粉?10%，泥碳土?20%、活性小肽?0.3%） 2、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）10% 3、活菌制剂：（EM原液）1% 4、复合氨基酸1%，复合维生素1%，多糖0.5%，核酸0.5%，腐植酸1%，蛋
白酶0.5%，淀粉酶0.5?（共5%） 5、微量元素?10%（N=0.5%、P=4%、K=4%、Ca、Na、Mg、Cu、Fe、Zn、Mn、 B、Si） 三、【高效种植微生物肥料配方】 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）4% 2、活菌制剂：EM菌原液1% 3、动物粪便：80% 4、微量元素1.5%、N=3.5%、P=5%、K=5%（合计15%） 四、【种植叶面微生物肥料配方】 1、生物肥：（固N菌、解P菌、解K菌）12% 2、活菌制剂：（EM原液）80% 3、复合氨基酸1%，复合多维生素1%，多糖0.4%，核酸0.1%，腐植酸1%，蛋白酶0.2%，淀粉酶0.3%（合计4%） 4、微量元素1.5%、N=0.5%、P=1%、K=1%（合计4%）
菌种活化方法
低温保存管（cryo tube）中之一般菌种临时存放及活化 A. 低温保存管之临时存放及解冻 1. 低温保存管（cryo tube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。 2. 准备 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。 3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于 37℃浴槽之小试管架上。 4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。 B. 菌株活化: 在无菌操作下 1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。 2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。 C. 划线法 1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。 2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。 3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。 4. 灼烧接种环，将接种环归位。 D. 图示 （1）金属接种环
（2）平板划线法 冷冻干燥管之开管说明 下列步骤请在无菌环境下操作： 1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。 2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。 3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。 4、( a ) 适用于细菌 用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。 ( b ) 适用于霉菌、酵母菌 用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml无菌水，滴入内管内，待干燥粉末溶解后，以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内，轻微震荡使其均匀后，静置30至60分钟。 5、取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板培养基上，做划线分离培养或做成一系列之稀释，用无菌L型玻棒均匀涂抹，以检验菌种之纯度及活化情形，而剩余的菌体则全部移入指定的液体培养基内，并依指定的温度培养之。 6、某些菌种经过冷冻干燥保存后，迟滞期 ( lag period ) 较长，必须等培养二倍时间后才能长出，且再经过一、二次继代培养 (Subculture) 后才能正常生长。经过以上的努力后仍培养失败，才视为不能活化。 7、若菌种未能活化，或活化之菌落有疑问时，请于收到菌种之一个月内，以问题菌株反应单传真至本中心，即进行处理。
EM菌技术
em菌液制作技术 来源：河南中广农业信息开发有限公司发布时间：2009-05-19 16:00:43 查看次数：1631 1、EM菌液制作方法：按EM菌种10克：红糖1KG：水10KG（100度白开水放凉到40度的无菌水）的比例混合均匀，密闭保温（人体温度35-37度）发酵，每1-2天摇动一次，5-7天即成，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。保持密闭置阴凉干燥处通常可保存18个月。用时加水1：500倍稀释后使用。 2、用EM菌种发酵液制做植物防虫、杀菌液 EM菌种、红糖、30℃以上白酒、清水按1：8：1：100的比例备料。 将等量的EM发酵液、红糖与酒及100倍的清水混合，搅匀盖紧，发酵5-10天左右，其间，因产生气体容器鼓起时，要及时松动盖子放气，并立即盖紧，到气体不再产生，能闻到酸甜香味时，表明发酵成功。保持密闭置阴凉干燥处通常可保存6－18个月。
EM防虫液能增强植物新陈代谢，强化叶片保护膜的角质层，防止病原菌进入，它的酯成分在草食害虫体内不分解，产生生理障碍致死，对线虫等多种害虫有显著效果，但应及早使用，虫害大面积发生时使用效果甚微。 使用时的标准稀释倍数为1000-500，雾状喷施，叶片的正反两面都喷到。 EM的主要成分 来源：河南中广农业信息开发有限公司发布时间：2009-05-19 15:53:29 查看次数：153 ＥＭ由整个生态系统都存在的气大类微生物中的多种有益微生物组成。EM的生产方法是采用适当的比例和独特的发酵工艺，把经过仔细筛选出来的好气性和嫌气性有益微生物混合培养，形成多种多样的微生物群落，这些菌群在生长中产生的有益物质及其分泌物质成为各自或相互生长的基质（食物），正是通过这样一种共生增殖关系，组成了复杂而稳定的微生态系统，形成功能多样的强大而又独特的优势，其最初发现人为日本国琉球大学教授比嘉照夫。 １．光合菌群（好气性和嫌气性）
em菌制作方法
em菌制作方法 一、对益生菌原液的认识 em菌制作,益生菌原液是日本琉球大学比嘉昭夫教授等研制出来的一种活 菌剂，经过筛选的多种微生物共生在一起，能够产生多种功能的复合菌液，采用独特的发酵工艺按一定比例加以混合，培养出多种多样的微生物群落，形成一种人工的有效微生物生态系统，在这个系统中各种微生物在生长过程中形成相互间的共生增殖关系，相互作用，相互促进，起到群体的协同作用，抑制有害微生物的生长繁殖，它们的代谢产物能促进动、植物和其他生物的生长，抑制病害发生。这项技术告诉人们可以建立一种比自然的微生物生态系统更有效的人工微生态系统，并在种植业、养殖业、环境保护和人体健康方面具有广泛的应用价值，为我国的生态农业和生态牧业建设和绿色食品生产开辟了一条新途径。 益生菌原液是由厌氧性细菌和好氧性细菌等10个属80多种作用各异的有益微生物（主要有乳酸菌群、酵母菌群、光合菌群、发酵菌系的丝状菌群、革兰氏阳性放线菌群）混合培养的。这些微生物广泛生存于自然界，大部分菌种被用于食品加工等行业，对人畜无害。 em菌制作,益生菌原液被作为微生物土壤改良剂用于水稻、蔬菜、果树等的栽培，对提高产量和品质发挥了作用。用于养殖上除氨、臭味效果显著，减少苍蝇，还具有减少家畜家禽疾病、应激反应，提高肉品质、蛋品质、奶品质。增加牧草产量，提高青贮饲料品质等多种效果。 现将其中几类具有代表性的微生物介绍如下：EM菌的使用方法 1、光合细菌类：具有分解有机物的能力，将有害物质转化成无害物质，并在转化过程中产生抗氧化物质，利用太阳光和热能进行光合作用产生氧气，供其他生物利用，利用CO2和氮等物质合成糖类、氨基酸、维生素和生物活性物质等，促进其他生物的生长繁殖。 2、乳酸菌类：它能分解难以分解的木质素和纤维素，使未腐熟的有机物质进行发酵，转化为对动植物可利用的有效养分。它能将较易降解的有机物质转化为葡萄糖、氨基酸和生物活性物质等，供动、植物直接吸收和利用。乳酸菌具有抑制引起连作障碍的镰刀菌的繁殖和活动，可以减轻有害线虫的发生。乳酸菌产生的乳酸还可抑制菌核菌类病原菌的繁殖和活动。