2上皮组织结缔组织观察.
2.上皮组织、结缔组织观察
一、目的要求
通过观擦各种类型的上皮组织结构，掌握上皮组织的共同特点，并了解各种类型上皮组织结构与机能的关系。
二、实验器材
显微镜；单层立方上皮切片；单层柱状上皮切片；变移上皮切片；复层扁平上皮切片（示范）；单层扁平上皮切片（示范）；假复层柱状纤毛上皮切片（示范）。
三、实验内容
一）、单层扁平上皮（示范）――结缔组织中的小血管。
在高倍镜下，观察小血管管腔内表面，可见细胞呈梭形，细胞核扁圆形，位于细胞中央，细胞质极少。
二）、单层立方上皮――马甲状腺切片，H、E染色。
（一）低倍镜观察：
可看到许多含胶体的滤泡，胶体染成深粉红色，胶体周围由滤泡状的滤泡包围。由于制片时，胶体收缩，在胶体与滤泡间有空隙。滤泡壁由单层立方上皮构成。选择完整的滤泡转高倍镜观察。
（二）高倍镜观察：
观察一个滤泡壁的结构，由单层立方上皮构成，注意立方上皮高度与宽度略等，呈立方形或稍扁（变化与机能状态有关），细胞核圆形，位于细胞中央，染成蓝紫色细胞质淡粉红色。细胞与细胞紧密相连，细胞之间界限不清。
三、单层柱状上皮――猫小肠横切片，HE染色。
小肠内腔表面有很多指状突起称绒毛，突起的表面衬有单层柱状上皮。
（一）低倍镜观察：
小肠内腔绒毛表面，找寻上皮完整的，然后转高倍镜。
（二）高倍镜观察：
上皮为单层，排列整齐，细胞为高棱柱状。细胞核呈椭圆形，靠近细胞基部，各细胞核同样也排列在同一水平（由于切片关系，常可见到细胞核有重叠现象），
胞核蓝紫色，胞质粉红色。细胞游离面覆有一层染色亮红的边缘，是微绒毛形成的称纹状缘。
在柱状细胞中间夹杂着少量杯状细胞，是单个腺上皮细胞，呈高脚酒杯状。核位于基部，呈三角形。胞质淡染近于无色，游离面无纹状缘。
四、假复层柱状纤毛上皮（示范）――猪气管横切面，H、E染色。
高倍镜观察气管内表面，可见细胞核不在一个水平面上，似2---3层，一部分细胞呈柱状，游离面有纤毛，另一部分细胞呈梭形或锥形。
五、复层扁平上皮（示范）――马皮肤切片，HE染色。
皮肤的表层为复层扁平上皮，其最表面一层染色浅（粉红色），是扁平的角化细胞，没有细胞核，细胞扁平，其下为2－3层多角形细胞，核呈圆形或椭圆形，最深一层为矮柱状细胞，整齐的排列在波纹状的基膜上。
六、变移上皮――猪输尿管横切片，H、E染色。
低倍镜观察：输尿管内腔的粘膜上皮为变移上皮，注意变移上皮与已观察过的上皮类型不同点。注意变移上皮的层次与每层的形态，上层细胞多为宽立方形，核卵圆形，中层细胞多角形，底层细胞为低柱状。
绘图
1、高倍镜下单层立方上皮。
2、高倍镜下单层柱状上皮。
注意名词：细胞质；细胞核；基膜；纹状缘；纤毛；杯状细胞；滤泡；胶体；结缔组织；
结缔组织
一、目的要求
掌握结缔组织结构特点（与上皮比较），了解致密结缔组织、脂肪组织的一般结构，认识并掌握家畜血液的基本有形成分，了解软骨组织（主要是透明软骨）和骨组织的一般结构。
二、实验器材
显微镜；疏松结缔组织铺片；致密结缔组织切片（示范）；脂肪组织切片（示范）；血涂片；软骨组织切片；骨组织磨片（示范）。
三、实验内容
一、疏松结缔组织—经过活体注射染料的大白鼠肠系膜铺片，H、E染色。
疏松结缔组织没有一定的形状。系由胶原纤维、弹性纤维、无定形基质及多种细胞组成。
（一）低倍镜观察
选择铺片中铺的较薄、纤维较分布均匀的部位，观察胶原纤维为较粗的纤维束，染成红色。弹性纤维细丝状染成兰黑色，不集合成束。两种纤维交织呈网状，在纤维之间无色部分为无定形基质，纤维间有点状的细胞。
（二）高倍镜观察
1、胶原纤维较粗，平行集合成束，染色粉红色，纤维多弯曲有分支呈波浪状，互相交织成网状，而获得很大的坚韧性。
2、弹性纤维亦成网状，分散分布，可有分支，如细丝状，染成兰黑色，具有弹性。
纤维网眼中有许多染色深浅不等的细胞核（呈兰色），其中最多的细胞为成纤维细胞，其次是组织细胞。
3、成纤维细胞呈多角形或星形的扁平细胞，胞质染色很浅，因此细胞轮廓不清。细胞核大呈椭圆形，核染色质细故淡染，可见1～2个核仁。
4、组织细胞形状不一，注意与成纤维细胞的区别在于细胞质中含有吞噬的台盼兰染料颗粒。细胞核较成纤维细胞小，圆形或卵形，染色较深，核内结构
不清，细胞质染色亦稍深。
5、肥大细胞轮廓清楚，呈圆形或卵圆形。胞核小呈圆形染成兰紫色，位于细胞中央。细胞质中充满大小一致的红色异染颗粒。
此外在片中，尚可见到淋巴细胞及毛细血管等。
二、致密结缔组织（示范）马皮肤切片，腱纵切片H、E染色。
腱纵切片显示规则致密结替组织，由许多平行排列的胶原纤维束和夹在其间的成行排列的腱细胞构成，注意腱细胞在纤维束间排列成单行，切片上呈长棱形，核椭圆形。
马皮肤的真皮部，显示不规则致密结缔组织，此片中呈粉红色的粗大胶原纤维束排列不规则呈网状，在纤维之间有分散存在的成纤维细胞，核呈椭圆形。
三、脂肪组织（示范）输尿管横切片，H、E染色。
在输尿管壁以外的结缔组织中可见一些空泡状结构，此即是脂肪细胞，由于细胞质中脂肪被制片中的酒精和二甲苯溶解而呈空泡状，并因互相挤压使细胞呈椭圆形或多边形，又因许多细胞聚集在一起，形成蜂窝状。细胞核呈新月形，靠近细胞膜处。
四、血涂片，瑞氏染色。
观察血液有形成分的构造，应注意各种有形成分的构造及相互之间的异同点，同时也要注意各种类型细胞在数量上的比例关系。
（一）低倍镜观察
驴血涂片在推片过程中开始部分较厚，末端较薄细胞较分散，选择涂的较薄的部分。可见淡红色的点状细胞，均匀分布（若聚集成块，则涂片太厚了），其中散在分布一些兰色点为白细胞。
（二）高倍镜观察
1、红细胞较小、圆形、无核，染成桔红色，是涂片中最多的细胞，细胞边缘较中心染色深（何故？）。
2、慢慢移动涂片，观察各种白细胞。白细胞虽然数目少，寻找困难，但细胞体大，细胞核明显，易与红细胞区分。白细胞亦为圆形。
（1）嗜中性粒细胞数量在白细胞中最多，细胞圆形，胞质含有淡紫色的细小颗粒（需用油镜方可看到），胞质染成粉红色。核紫兰色形状变化很大，杆状核是嗜中性粒细胞幼稚型，多数为分叶核，分成2-5叶，叶间有染色质丝相连。
（2）嗜酸性粒细胞数量少，体积稍大，胞核多分两叶、染成兰紫色，胞质中充满被伊红染成鲜红色的大小一致的粗大圆形颗粒，有时颗粒几乎完全掩盖住细胞核。
（3）嗜碱性粒细胞数量极少（少于白细胞的百分之一），不易找到，体积较大，胞质淡紫色，内含大小不一染成紫兰色或深兰色的颗粒，分布不匀。核形状不定，且染色浅，一般被颗粒遮盖形象不清。
（4）淋巴细胞数量稍多，分大、中、小三型，血液中主要为小淋巴细胞和一定数量的中淋巴细胞。小淋巴细胞的大小与红细胞近似。胞核大而细胞质少。核呈圆形，一侧常有一缺痕，染色质集成粗大的结块，故染色较深，染成深兰紫色。细胞质较少，呈环形或呈细月牙形，天兰色，近核处染色较淡称淡染晕。
中淋巴细胞较大，核圆形或卵圆形，位于细胞中部，染成深兰紫色。细胞质较小淋巴细胞稍多，染成天兰色。
（5）单核细胞体积大，是白细胞中最大的一种。细胞核为卵圆形、肾形或马蹄形，常位于细胞的一侧，染色质的集块较小，故染色稍淡。胞质较多呈均匀一致的兰灰色。
（6）血小板是形状不规则的小体，染成淡兰色，内有紫色颗粒聚集。常成堆分布在细胞之间。
五、软骨组织——猪气管横切片，H、E染色。
软骨组织因形态与机能不同分为三种——透明软骨、弹性软骨和纤维软骨。气管的软骨环为透明软骨。
（一）低倍镜观察
找出气管中的软骨，它在气管壁的中部，染成淡兰色。在软骨周围有一薄层结缔组织染成红色为软骨膜，软骨内无血管和神经。
（二）高倍镜观察
从软骨膜处向软骨深处逐渐仔细观察，软骨生长主要在靠近软骨膜的部位，因此软骨深部细胞较成熟、较大；边缘部细胞比较年幼、较扁；且平行软骨膜排列。软骨细胞埋于基质形成的陷窝（称软骨囊）中，每个陷窝中有一个或几个细胞称同族群，经过制片软骨细胞常收缩和软骨囊脱离而见空白地方。细胞周围的基质染成天兰色。
六、骨组织（示教）羊长骨横断面磨片，美兰染色
低倍镜观察：
长骨干为密质骨，可见骨的内外面有数层平行于骨面的骨板，此为内外环骨板。内外环骨板之间可见许多同心圆排列的哈氏骨板，在哈氏骨板之间有平行排列但呈不规则形的骨间板。各骨间板间有规律的出现骨腔隙呈棱行多突起状，是生活时骨细胞在骨板中所占的腔隙，称骨陷窝。
绘图
高倍镜下：疏松结缔组织结构；高倍镜下血液的细胞结构；高倍镜下部分透明软骨结构。
注意名词：基质；胶原纤维；弹性纤维；成纤维细胞；组织细胞；肥大细胞；台盼兰颗粒；腱细胞；脂肪细胞；红细胞；嗜中性粒细胞（幼稚型核和分叶核）；嗜酸性粒细胞；淋巴细胞；单核细胞；血小板；软骨膜；软骨细胞；骨板；骨陷窝。