宁夏回族人群CYP2D6-10等位基因及基因型分布频率(一)

宁夏回族人群CYP2D6*10等位基因及基因型分布频率(一)

作者：李宗吉，王健，王惠成，葛立军

【摘要】目的了解宁夏回族人群CYP2D6*10等位基因及基因型分布频率,为临床使用CYP2D6底物药物提供依据。方法采用等位基因特异扩增（ASA-PCR）技术，分析了180例回族体检者的CYP2D6基因型。结果CYP2D6*10基因点突变结果中野生型纯合子频率为32.3%，杂合子频率为38.3%，突变型纯合子频率为29.4%，突变型等位基因频率为48.6%。结论宁夏回族人群CYP2D6*10突变基因频率与国内外其他民族有一定差异，在临床应用经CYP2D6代谢的药物时应考虑个体间的代谢速率差异，确保用药安全有效。

【关键词】CYP2D6*10；基因；多态性；回族

Abstract:ObjectiveToinvestigatethealleleandgenotypefrequencesofCYP2D6 *10inNingxiaHuipopulation.Methods180NingxiaHuibloodsampleswerecoll

ultsThemutantallelefrequenceswere48.6%.ConclusionCYP2D6*10allelefreq uencesbetweenNingxiahuiethnicityandotherpopulationswassignificantlydif ferent.

Keywords：CYP2D6*10；gene；polymorphism；Huiethnicity

细胞色素P4502D6(CYP2D6)又称硫酸异喹胍羟化酶,是近年来被广泛研究的一种肝微粒体药物氧化代谢多态性酶，该酶参与临床常用的30多种药物羟化反应,例如抗精神抑郁药、抗心律失常药、β2阻滞剂等〔1-3〕。

由于CYP2D6至少有50多处突变和73种等位基因，因此酶的活性具有高度多态性〔4-5〕。CYP2D6基因有明显的种族差异。我们于2007年1～7月间以宁夏回族人群为研究对象，采用等位基因特异扩增法（ASA-PCR)，对东方人群中最常见的基因突变型第10外显子（CYP2D6*10）进行研究，以期为患者使用CYP2D6底物药物提供依据。1材料和方法

1.1材料

全血总DNA提取试剂盒、DNATag酶ET-500、DNAMarkerB均购自北京赛百盛生物公司；引物由大连宝生物工程有限公司合成，引物序列见表1。表1引物序列（略）

1.2方法

1.2.1DNA样品制备

利用2007年1～7月间收集的宁夏回族自治区人民医院体检的180例回族受试者的外周血，采用北京赛百盛生物公司的硅胶膜基因组提取试剂盒提取基因组DNA，定量后稀释成100ng/μL,储存于-20℃备用。

1.2.2PCR扩增及产物的鉴定

用表1所述的3对引物（P1、P2)、（P1、P3)、（P1、P4)在PCR的反应条件下（表2）分别扩增出CYP2D6全长基因片段及包括第10外显子多态位点的DNA片段。PCR反应体系为50μL，含有0．2mmol/LdNTP、1．0mol/L引物、1．25mmol/LMgCl2、0．5UTaqDNA聚合酶、10×PCR 反应缓冲液。表2PCR反应条件（略）

1.2.3电泳及结果的统计分析

取PCR扩增产物用1％琼脂糖凝胶进行电泳，在BioRad的QuantityOne 凝胶成像分析系统仪上进行观察和分析。确定CYP2D6*10基因型，进行基因频率的计算分析。

2结果

2.1DNA提取质量

经紫外分光光度计检测，180名受试者外周血白细胞中提得的DNAA260/A280均在1.8～2.0之间，纯度均符合要求。

2.2PCR及电泳结果

见图1。用引物P1、P2扩增得到790bp全长CYP2D6基因，以P1、P3为引物可扩增出137bpCYP2D6*10野生型纯合子（wt)，以P1、P4为引物可扩增出137bpCYP2D6*10突变型纯合子(mt)，若以P1、P3和P1、P4为引物均可扩增出137bpCYP2D6*10片段表示CYP2D6*10为杂合子(Wt/mt)。

2.3基因型及基因频率

见表3，由表中数据可计算出180例受试者中CYP2D6突变等位基因频率为48.6%。表3180例受试者等位基因与基因型频率（略）