5凝集反应

5凝集反应
5凝集反应

凝集反应

1、直接抗球蛋白实验用于检测

A.血清中结合的抗体B.血清中游离的不完全抗体

C.红细胞表面结合的不完全抗体D.红细胞表面结合的完全抗体

E.血清中游离的完全抗体

2、玻片凝集试验

A.只能检测抗原,不能检测抗体B.既能检测抗原,又能检测抗体

C.只能检测抗体,不能检测抗原D.为半定量实验

E.不能用于ABO血型鉴定

3、下列哪一项不属于玻片凝集试验

A.菌种鉴定B.血清学分型C.人类ABO血型鉴定

D.定量检测前筛选试验E.血清抗体效价测定

4、试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象

A.+ B.+或++ C.++

D.+++ E.++++

5、间接抗球蛋白实验用于检测

A.血清中结合的抗体B.血清中游离的不完全抗体

C.红细胞表面结合的不完全抗体D|红细胞表面结合的完全抗体

E.血清中游离的完全抗体

6、协同凝集试验所用的载体是

A.新鲜红细胞B.洗涤红细胞C.醛化红细胞

D.聚苯乙稀颗粒E.金黄色葡萄球菌

7、自身红细胞凝集试验红细胞是

A.标准新鲜红细胞B.标准洗涤红细胞C.标准醛化红细胞

D.受检者未致敏红细胞E.受检者致敏红细胞

8、检测颗粒性抗原的血清学试验是

A.直接凝集反应

B.协同凝集反应

C.琼脂扩散试验

D.火箭免疫电泳

E.对流免疫电泳

9、妊娠试验乳胶凝集法属于

A.直接凝集反应

B.正向间接凝集试验

C.反向间接凝集试验

D.间接凝集抑制试验

E.协同凝集试验

10、关于直接Coombs试验,叙述正确的是

A.检测血清中游离的不完全抗体

B.可用试管法作半定量分析

C.出现红细胞凝集为阴性

D.多用于检测母体Rh抗体

E.可对因红细胞不相容性输血产生的血型

抗体进行检测

11、关于间接Coombs试验,叙述正确的是

A.检测血清中游离的完全抗体

B.检测红细胞上的不完全抗体

C.出现红细胞凝集为阳性

D.常用于新生儿溶血症的检测

E.常用于自身免疫性溶血性贫血的检测12、抗人球蛋白试验不能用于

A.新生儿溶血性贫血疾病的诊断

B.血型抗原抗体的检查

C.输血配型

D.细菌或立克次体的可抗原检查

E.溶血性贫血的研究

13、对间接凝集反应叙述正确的是

A.为颗粒性抗原与抗体结合出现凝集

B.分为有玻片法和试管法两类

C.需将可溶性抗原致敏于颗粒载体表面

D.只能检测抗原

E.只能检测抗体

14、正向间接凝集试验

A.抗体致敏载体,以检验标本中相应抗原

B.用于检测标本中抗原

C.形成肉眼可见凝集块者为阴性

D.临床用于检测HBsAg.AFP等

E.抗原致敏载体,以检测标本中相应的抗

15、反向间接凝集试验为

A.可溶性抗原与载体结合

B.检测待测抗体

C.出现凝集颗粒或凝集块者为阴性

D.常用乳胶、明胶颗粒等作为载体

E.可用于细菌血清学分型

16、对反向间接凝集抑制试验叙述正确的是

A.已知抗原致敏颗粒载体

B.检测标本中抗体

C.以相应抗体作为诊断试剂

D.出现凝集现象为阴性

E.出现凝集现象为阳性

17、关于协调凝集实验叙述错误的是

A.致敏颗粒为与IgG相连的金黄色葡萄球

B.桥连物为SPA

C.抗体为IgM类

D.是一种反向间接凝集试验

E.可用于检查微量的可溶性抗原

18、试管法凝集试验,错误说法是( )

A.需适当电解质参与才出现可见凝集现象

B.在一定温度范围,温度升高,反应加快

C.水浴箱水面稍高于试管内液面有利于反

应进行

D.PH以6~8为宜

E.PH过低,接近细菌抗原等点,可引起

酸凝集

19、玻片凝集试验( )

A.只能检测抗原,不能检测抗体

B.既能检测抗原,又能检测抗体

C.只能检测抗体,不能检测抗原

D.为半定量实验

E.不能用于ABO血型鉴定

20、下列哪一项不属于玻片凝集试验( )

A.菌种鉴定

B.血清学分型

C.人类ABO血型鉴定

D.定量检测前筛选试验

E.血清抗体效价测定

21、关于自身红细胞凝集试验,下列叙述错误的是( )

A.反应中的红细胞是未经致敏的受检者红

细胞

B.试剂为抗人O型红细胞单克隆抗体

C.只用于检测标本中的抗体

D.受检标本为全血,不需分离血清

E.出现凝集者为阳性

22、免疫电泳最常用的载体是( )

A.醋酸纤维薄膜

B.琼脂糖凝胶

C.淀粉凝胶

D.果胶

E.葡聚糖

23、间接抗球蛋白试验检测何类抗体( )

A.结合在红细胞表面的IgG

B.游离的IgG

C.结合在红细胞表面的IgM

D.游离的IgM

E.以上都不是

24、关于胶乳凝集试验的载体,下列叙述错误的是( )

A.载体颗粒为聚苯乙烯胶乳

B.是一种惰性载体

C.是一种直径为0.8μm的圆形颗粒

D.颗粒表面带有负电荷,能吸附蛋白质

E.抗原或抗体以非共价键交联在胶乳表面25、直接凝集反应与间接凝集反应的根本区别是( )

A.前者采用颗粒性抗原,后者是将可溶性

抗原吸附于载体颗粒上

B.参与反应介质中电解质的浓度不同

C.间接凝集反应敏感性比直接凝集反应敏

感性高

D.判断结果是在抗原抗体反应的不同阶段

E.参与反应介质中的电解质不同

26、关于凝集反应,下列叙述错误的是( )

A.参与反应的抗原可以是红细胞.细菌或

致敏颗粒

B.溶液中负离子强度愈大,抗原颗粒表面

Z电位愈大

C.降低溶液的粘滞度可促使凝集现象出现

D.增加电解质可促使凝集现象出现

E.IgM类抗体出现的凝集比IgG类抗体强27、凝集反应是( )

A.颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存

在下形成肉眼不可见的凝集现象

B.可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存

在下形成肉眼不可见的凝集现象

C.可溶性抗原与相应抗体在适当pH存在

下形成肉眼可见的凝集现象

D.可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存

在下形成肉眼可见的凝集现象

E.颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存

在下形成肉眼可见的凝集现象

28、关于协同凝集试验,下列叙述错误的是( )

A.原理与间接凝集反应类似

B.所用载体是金黄色葡萄球菌

C.金黄色葡萄球菌细胞壁含有SPA

D.SPA具有与所有特异性抗体IgGFc段结

合的特性

E.可用于细菌.病毒.毒素及各种可溶性

抗原的检测

29.关于凝集反应说法正确的是

A.IgG类抗体的作用强度比IgM类抗体要

B.IgM类抗体的作用强度比IgG类抗体要

C.IgG类抗体常出现完全反应

D.IgM类抗体常出现不完全反应

E.可进行定量检测

30、为促使凝集现象的出现可采取的措施是

A.降低电解质

B.用胰酶或神经氨酸酶处理

C.降低试验溶液的黏滞度

D.增加抗原量

E.增加抗体量

31、玻片凝集试验

A.只能检测抗原,不能检测抗体

B.只能检测抗体,不能检测抗原

C.能检测抗原,也能检测抗体

D.为半定量试验

E.常用于Widal反应

(一)单项选择题(A型题)

三、名词解释

1、滴度(效价):血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应,以出现明显凝集反应的血清最高稀释度、即滴度(效应)。

2、凝集反应:凝集反应是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体适当条例上结合形成凝集的现象。现也指颗粒抗原或与相应抗体或抗原的反应。

3、直接凝集反应:细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应。

4、凝集原:指凝集反就中的抗原。

5、凝集素:指凝集反应中的抗体。

6、试管凝集试验:是在试管内颗粒性抗原与相应抗体直接结合,在一定条件下,会出现肉眼可

见的凝集现象。

7、间接凝集反应:将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大上的颗粒性载体表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜的电解质存在的条件下,出现特异性凝集现象称间接凝集反应或被动凝集反应(passive agglutination test)。

四、问答题

1、简述间接血凝试验的基本原理。

间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的O型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞,与相应抗休(或抗原)作用,在有电解质存在的条件下,经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象,又称被动血凝试验。

2、简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。

Coombs试验又称抗入球蛋白试验,其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体,能与相应的抗原牢固结合,但在一般条件下不出现可见反应,利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接与红细胞表面抗原的特异抗体,可使红细胞凝集。

Coombs试验有二种类型:(1)直接Coombs试验:用于检测红细胞结合的不完全抗体。(2)间接Coombs 试验:用于检测血清中游的不完全抗体。

细胞凝集反应实验报告

细胞生物学实验报告 一.实验名称:细胞凝集反应 二.实验原理: 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为:细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。常用的为植物凝集素(Phytoagglutin, PNA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素 A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin, WGA)、花生凝集素 (Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin, SBA)等,凝集素是它们的总称。凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,它们具有的某些“亲合” 特性,能被免疫细胞化学技术方法所应用。 血型鉴别实验,也是凝集反应的一种。 三.实验用品: 土豆块茎 显微镜,粗天平,载玻片,滴管2支,离心管2支 PBS缓冲液:称取NaCl7.2g,Na2HPO41.48g,KH2PO40.43g,加蒸馏水,定容至1000ml,调pH值到7.2. 4.2%的红细胞 四.实验步骤:

1.称取土豆去皮块茎2g,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出的粗提液中含 有可溶性土豆凝集素。 2.以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),加生理盐水3ml,在 1000r/min,离心5min,重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。 3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充 分混匀。 4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴,置双凹片右 孔内,充分混匀,做对照实验。 5.摇晃5—10min后,观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。 图左为PBS缓冲液对照图右为土豆凝集素

细胞凝集反应实验报告 山东大学

科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应 细胞凝集反应 【实验目的】 1.了解细胞膜的表面结构; 2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理; 3.学习研究细胞凝集反应的方法。 【实验原理】 1.凝集素 凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖转移结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的为植物凝集素,通常一起被提取的植物命名,如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等,凝集素是他们的总称。 在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(又称为糖萼)。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接,在细胞间形成“桥”,从而引起细胞凝集。凝集素引起的血细胞凝集,其细胞膜结构没有发生变化,与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同;另外,凝集素能与不同的糖蛋白特异结合,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集,但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,因此,Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。 人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理,识别和研究不同类型膜结构的生物学特征,以及进行血型鉴定。ABO血型鉴定主要用于临床输血,在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体;不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。另外,凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。如:植物凝集素可抑制受精;芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性,减少HIV感染者的病毒载量;细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关,凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测,有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。 2.细胞凝集 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为,细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,如植物血球凝集素,伴刀豆凝集素和土豆凝集素等,它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 3.细胞凝集的反应技术 一、直接凝集反应技术 颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应的抗体血清混合后,在电解质的参与下,经过一定时间,抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块,这种现象称为凝集反应。 血清中的抗体称为凝集素。抗原称为凝集原。 细菌或其他凝集原都带有相同的电荷(阴电荷),在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。抗原与抗体相遇后,由于抗原和抗体分子表面存在着相互对应的化学基团,因而发生特异性结合,称为抗原抗体复合物。由于抗体与抗原结合,降低了抗原分子间的经典排斥力,抗原表面的亲水基团减少,由亲水状态变为疏水状态,此时已有凝集的趋向,在电解质(如生理盐水)参与下,由于例子的作用,中和

细胞凝集反应

科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应日期2013.03.14 姓名*** 系年级2011级生物基地学号*** 实验二细胞凝集反应 一.实验目的 1.了解细胞膜的表面结构; 2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理; 3.学习研究细胞凝集反应的方法; 4.用土豆凝集素诱导血细胞凝集,观察血细胞凝集现象; 5.学习设计实验的平行、对照原则。 二.实验原理 1.凝集素 凝集素(lectin)是一类含糖(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物,人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的有植物凝集素(phytohemagglutinin, PNA),通常一起被提取的植物命名,如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等,凝集素是他们的总称。 土豆块茎凝集素(potato tuber lectin )是一种能结合几丁质的富含羟脯氨酸的糖蛋白,单体分子量约50, 000,包含至少三个不同的结构域,其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素(wheat germ agglutinin ,WGA)等几丁质结合蛋白具有同源性。土豆凝集素含有50% (质量分数)的糖组分,其中90% 是阿拉伯糖,另有少量半乳糖;最丰富的氨基酸是羟脯氨酸,其次是半胱氨酸。土豆凝集素在水溶液中主要以单体形式存在,能与细胞膜寡糖链上的N- 乙酰葡萄糖胺特异性结合,这是其具有凝集活性的主要原因。 2.细胞凝集 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为,细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(又称为糖萼)。凝集素引起的血细胞凝集(hemagglutination),其细胞膜结构没有发生变化,与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同;另外,凝集素能与不同的糖蛋白特异性集合,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集,但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物,因此,Ponder(1983)提出应称“凝集素组织化学”而不能称“凝集素免疫组织化学”。

临床免疫学凝集反应

第五章凝集反应 本章考点 1.概述 2.直接凝集反应 3.间接凝集反应 第一节概述 细菌、红细胞等颗粒抗原,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,它们与相应抗体(或抗原)在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象,称凝集反应。 凝集反应分为两个阶段:①抗原抗体的特异性结合;②出现可见的颗粒凝聚。 凝集反应的特点:凝集试验是一个定性的检测方法,即根据凝集现象的出现与否判定结果阴性或阳性;也可以进行半定量检测,即将抗体作一系列稀释,与抗原结合产生凝集的最高稀释倍数作为其效价或滴度。由于凝集反应灵敏度高、方法简便,因而在临床检验中被广泛应用。 第二节直接凝集反应 直接凝集反应:其原理是细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原,在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称直接凝集反应。参加凝集反应的抗原称凝集原,抗体则称为凝集素。从方法上来讲,有玻片法和试管法两类。 玻片法凝集主要用于抗原的定性分析,短时间便能观察结果,一般用来鉴定菌种或分型;也用于人类AB0血型的测定。 试管凝集反应是用定量抗原悬液与一系列递度倍比稀释的待检血清混合,保温静置后,根据每管内颗粒凝集的程度,以判断待检血清中有无相应抗体及其效价,可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。例如Widal反应、Well-Felix反应、输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。 第三节间接凝集反应 间接凝集反应是将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒载体表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质存在的条件下,出现特异性凝集现象,称间接凝集反应。 根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应的方式,间接凝集反应分为4类:①正向间接凝集反应; ②反向间接凝集反应;③间接凝集抑制反应;④协同凝集反应。 图14 (正向)间接凝集反应(查抗体)

实验五 凝集反应—医学免疫学实验指导

医学免疫学实验指导 实验五凝集反应 由长沙达尔锋生物科技有限公司整理

【文章介绍】 实验是映证理论,对学生进行基本技能训练和培养科学研究能力的手段。BioRike博瑞克根据《医学免疫学实验指导》一书系统整理了14个实验项目,每个实验说明实验目的,实验原理,实验内容方法,实验要求及注意事项,希望广大师生能够从中有所收获。 BioRike简介:BioRike(中文简称“博瑞克”)是长沙达尔锋生物科技有限公司旗下的产品品牌,由旗下专业的生命科学实验室BioRike博瑞克研发和生产。BioRike是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技实验室,专门从事以Elisa试剂盒、抗体、细胞因子、免疫检测试剂盒、血清等免疫学产品为主的生物试剂的研发与销售。 【实验目的】 1.了解凝集反应的原理、基本类型及其用途。 2.熟悉玻片凝集试验、试管凝集试验、间接凝集试验的实验方法和结果分析。 【实验用品】 1. 材料试剂:伤寒杆菌、大肠杆菌18~24小时琼脂斜面培养物、伤寒杆菌H血清、伤寒杆菌H菌液、待测孕妇尿液、HCG阳性孕妇尿液、1:10稀释伤寒杆菌诊断血清、ABO血型标准血清、类风湿免疫诊断试验(用变性IgG致敏的乳胶颗粒)、HCG致敏乳胶试剂、兔抗HCG诊断血清、待测血清、生理盐水。 2.器材:洁净载玻片、巴氏吸管、乳胶皮头、接种环、酒精灯、特种铅笔(或记号笔)、小试管、牙签、采血针、75%酒精棉球、无菌干棉球、试管架;1ml、5ml刻度吸管、37℃恒温箱(或37℃/56℃水浴箱)、显微镜。 【内容和方法】 一、玻片凝集试验(slide agglutination) 1.原理 玻片凝集试验(slide agglutination)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌、立克次体、钩端螺旋体等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性;如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。此法属定性试验,主要用于检测抗原,如ABO血型鉴定、细菌鉴定和分型等。 2.方法 (1)取载玻片一张(平置实验台上),用特种铅笔或记号笔划分为3格,并标明1、2、3。 (2)取巴氏吸管一支,套上乳胶皮头后,吸取1:10 稀释的伤寒杆菌诊断血清1~2 滴于第1、2 格内,另取巴氏吸管一支,吸取生理盐水1~2 滴于第3格内。 (3)将接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌,冷却后取少许伤寒杆菌菌培养物与第1、3格内的诊断血清、生理盐水混合并涂抹成均匀悬液。然后用同样方法取少许大肠杆菌培养物与第2格内的的诊断血清混合并涂抹成均匀悬液。静置数分钟后观察结果。 3.结果观察与判定

细胞凝集反应

细胞凝集反应 一、实验目的 1.了解细胞膜的表面结构 2.掌握凝集素促进细胞凝集的方法 3.学习研究细胞凝集反应的方法 二、实验原理 凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质,能与细胞外被的寡糖链相连接,使细胞发生凝集:①细胞质膜外表面的一层黏性多糖物质构成的,细胞被在细胞间的联系和识别、细胞的生长分化、免疫反应及肿瘤发生等过程中发挥着重要作用;②动物细胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖链伸向膜表面,它们是细胞识别、细胞免疫及细胞接触抑制现象的必要组分;③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果。④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价,并与细胞膜上受体的分布有关。 三、实验用品 1 .器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架 2 .材料: 土豆块茎 3 .试剂: 兔子血、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、生理盐水和其他等渗液。 四、实验步骤 1.去皮土豆块茎2g,加10mLPBS缓冲液浸泡24h,所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素. 2.抽取兔静脉血1mL加抗凝剂,加入3mL生理盐水,1000r/min离心5min,重复洗涤三次。按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。 3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴,置于双凹片左孔混匀;吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。 4.摇晃5-10min观察,并以低倍镜镜检。 五、实验结果 如图1可看到,混合了土豆凝集素的兔血红细胞(右侧)聚集成块,周围液体较澄清;而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞(左侧)未发生凝集,液体浑浊。 低倍镜下镜检(图2)可看到,凝集了的细胞聚成一簇不规则的团,而未发生凝集的红细胞很均匀。

凝集反应

第十五章凝集反应 Chapter 15 Agglutination Test 第一部分教学内容和要求 一、目的要求 ·掌握:凝集反应的原理、类型及临床应用;熟悉:凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体;了解:凝集反应各阶段的特征。 二、教学内容 1。凝集反应的特点与类型。 2。直接凝集反应:玻片凝集试验,试管凝集试验。 3。间接凝集反应:间接凝集反应的类型,间接血凝试验,胶乳凝集试验,间接凝集试验的临床应用。 4.自身红细胞凝集试验。 5.抗球蛋白试验。 第二部分测试题 一、选择题 (一)单项选择题(A型题) 1.直接抗球蛋白实验用于检测 A.血清中结合的抗体B.血清中游离的不完全抗体C.红细胞表面结合的不完全抗体D.红细胞表面结合的完全抗体E.血清中游离的完全抗体 2.玻片凝集实验 A.只能检测抗原,不能检测抗体B.既能检测抗原,又能检测抗体 C.只能检测抗体,不能检测抗原D.为半定量实验 E.不能用于ABO血型鉴定 3。下列哪一项不属于玻片凝集试验 A。菌种鉴定 B。血清学分型 C。人类ABO血型鉴定 D.定量检测前筛选试验 E。血清抗体效价测定 4.试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象 A.“+”B.“+或++”C.“++”D.“+++”E.“++++” 5.间接抗球蛋白实验用于检测 A.血清中结合的抗体B.血清中游离的不完全抗体C.红细胞表面结合的不完全抗体D.红细胞表面结合的完全抗体E.血清中游离的完全抗体 6.协同凝集试验所用的载体是 A.新鲜红细胞B.洗涤红细胞C.醛化红细胞D.聚苯乙烯颗粒E.金黄色葡萄球菌7.自身红细胞凝集试验红细胞是 A.标准新鲜红细胞B.标准洗涤红细胞C.标准醛化红细胞 D.受检者未致敏红细胞E.受检者致敏红细胞 (二)多项选择题(X型题) 1.实验中,促进凝集现象的措施有 A.低温离心 B.增加电解质或蛋白质 C.加入右旋糖酐或葡聚糖 D.用胰酶处理 E.加入抗原 2。利用试管凝集试验可辅助临床诊断的疾病 A.痢疾 B.伤寒和副伤寒 C.恙虫病 D.布鲁菌病 E.霍乱弧菌 3. 间接凝集试验常用的载体 A.人O型红细胞 B.聚苯乙烯胶乳 C.皂土 D.明胶颗粒 E.活性炭 4.符合正向间接凝集试验的是 A.抗原致敏载体 B.用于检测标本中的抗体 C.出现凝集为阴性 D.敏感性很高 E.特异性不强 5.符合反向间接凝集试验的是 A.抗体致敏载体 B.用于检测标本中的抗原 C.出现凝集为阴性 D.敏感性很高 E.特异性强 6.符合正向间接凝集抑制试验的是 A.检测标本中的抗原B.抗原致敏载体C.抗体为诊断试剂 D.出现凝集为阳性E.不出现凝集为阳性

细胞凝集反应实验报告

【实验题目】 细胞凝集反应 【实验目的】 1、了解细胞的表面结构。 2、掌握细胞凝集的原理。 3、掌握细胞凝集实验的操作方法。 【实验材料与用品】 1. 试剂:PBS缓冲溶液、0.9%的氯化钠溶液(生理盐水) 2. 器具:酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管 3. 材料:兔子静脉血 【实验原理】 1.凝集素 凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素,在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物、人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的为植物凝集素,通常以其被提取的植物命名,凝集素为它们的总称。 在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(糖萼)。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 2.细胞凝集 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团,目前认为,细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。 3.细胞凝集的反应技术 (1)直接凝集反应技术 颗粒性抗原与相应的抗体血清混合后,在电解质的参与下,经过一定时间,抗原抗体凝集成肉眼可见的凝集块,这种现象称为凝集反应。血清中的抗体称为凝集素。抗原称为凝集原。细菌或其他凝集原都带有相同的电荷(阴电荷),在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状

态。抗原和抗体相遇后,由于抗原和抗体分子表面存在相互对应的化学基团,因而发生特异性结合,称为抗原抗体复合物,由于抗体与抗原结合,降低了抗原分子间的排斥力,抗原表面的亲水基团减少,此时已有凝集趋势,在电解质参与下,中和了抗原抗体复合物的大部分电荷,使之失去了经典排斥力,分子间相互吸引,凝集成较大颗粒。出现了肉眼可见的凝集反应。 (2)间接凝集反应技术 可溶性抗原(或抗体)吸附于免疫学反应无关的颗粒表面上,当这些致敏的颗粒与相应的抗体(或抗原)相遇时,就会产生特异性的结合,在电解质的参与下,这些颗粒就会发生凝集现象。这种借助于载体的抗原抗体凝集现象就叫做间接凝集反应技术。 4.载体 具有吸附抗原(抗体)的载体很多,如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。 良好的载体有以下几点基本要求: (1)在生理盐水或缓冲液中无自凝现象; (2)大小均匀; (3)比重与介质相似,短时间内不沉淀; (4)无化学或血清学活性; (5)吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性; 目前使用最广泛的是人的O型红血球和绵羊红血球。后者使用更广,因其来源方便,另外绵羊红血球的表面有大量的糖蛋白受体,极易吸附某些抗原物质,吸附性能好,且大小均匀一致。

血凝实验实验报告

影响血液凝固的因素 (一)实验目的:通过本实验来了解血液凝固的基本过程及了解影响血液凝固的一些因素。 (二)实验对象:家兔 (三)实验步骤:(略) (四)实验结果: 1、观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用:实验中可见到静置杯内血液发生凝固。搅拌杯内血液不凝固,但在毛刷上见到红色的血凝块,经水冲洗后毛刷上缠绕有白色丝状物。 2、观察影响血凝的一些理化因素:如下表9-1所示。 表9-3 影响血凝的一些理化因素实验条件 1.加少许棉花 2.用石蜡油均匀涂试管内壁 3.放置37℃水浴 4.放置冰水水浴 5.加肝素10个单位 6.加草酸钾2mg (表9-3文字说明:略) 3、观察内源性及外源性凝血过程:如下表9-2所示 表9-2 内源性和外源性凝血过程的观察 试剂 1、富血小板血浆 2、少血小板血浆 3、生理盐水 4、羊肺悬液 5、0.025mol/l cacl2 血液凝固时间 (表9-2文字说明:略) (五)讨论: 血液凝固是指血液由流动的液体状态变为不流动的冻胶状态血液凝固过程大致分为三个 主要阶段:①凝血酶原激活物形成;②凝血酶原激活成凝血酶,③纤维蛋白原转变为纤维蛋白。在凝血酶原激活物的形成过程中分有两种不同的途径:内源性凝血途径和外源性凝血途径。内源性凝血途径是由凝血因子?启动的,参和血凝的全部凝血因子都在血浆内。凝血因子?可被各种带负电荷的物质等所激活,如血管内膜暴露的胶原纤维、玻璃、陶器等。外源性凝血途径是由存在于血管外组织中的凝血因子ⅲ所启动的,其余参和的凝血因子也在血管内。凝 血因子ⅲ在脑、肺、胎盘组织含量很丰富。 不管是内源性凝血途径或外源性凝血途径,他们最后的是使血纤维蛋白的形成而使血液 发生凝固。在观察纤维蛋白原在凝血过程中作用的实验中,由于参和凝血的全部凝血因子都在血浆中,因此其凝血过程是属于内源性凝血。由于玻璃和毛刷表面都带有负电荷,后者可激活凝血因子?,启动内源性凝血过程。凝血到最后阶段时,在凝血酶的作用下,把纤维蛋白原水解成血纤维蛋白;形成的纤维蛋白不断地交叉成网状结构,把血液中的所有血细胞网凝血时间50’’ 8’15’’ 2’15’’ 6’45’’ 不凝不凝试管1 0.2 ml 0.2 ml 0.2 ml 2’15’’ 试管2 0.2 ml 0.2 ml 0.2 ml 3’45’’ 试管3 0.2 ml 0.2 ml 0.2 ml 45’’ 罗于其中,从而使血液发生凝固。静置杯中的血液,由于发生了上述的血液凝固过程, 所形成的纤维蛋白没有被破坏,所以杯中血液凝固。而搅拌过的杯内血液,虽也发生血液凝固过程,但所形成的纤维蛋白却不断缠绕到毛刷上,当杯内血液的纤维蛋白原全部水解掉后,形成的纤维蛋白也全部缠绕在毛刷上,这时血纤维只能网罗毛刷附近的一些血细胞,在毛刷上见

细胞凝集反应 实验报告

姓名董朔晖系年级生命科学院2011级学号201100230164 科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应日期2012.2.23 实验一:细胞凝集反应 一、实验目的 1、了解细胞的表面结构。 2、掌握细胞凝集的原理。 3、掌握细胞凝集实验的操作方法。 4、掌握普通光学显微镜的使用方法。 二、实验材料 1、实验材料 家兔(或2%家兔红细胞悬液)、土豆块茎(或由土豆块茎制作的可溶性土豆凝集素粗提取液)、PBS缓冲溶液(磷酸缓冲溶液)、柠檬酸钠溶液、0.9%的氯化钠溶液(生理盐水) 2、实验器材 5ml注射器、酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管 三、实验原理 1、在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(糖萼)。目前认为,细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。 2、凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,即糖蛋白,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素能与细胞外

被中的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的作用,从而凝集细胞。凝集素引起的细胞凝集,其细胞膜结构没有发生改变。与血液凝固中发生的复杂生化反应完全不同。 3、竞争性抑制实验:凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞凝集。 四、实验步骤 1、2%家兔红细胞悬液制备:以无菌方法抽取家兔耳缘静脉血液1ml (5ml注射器中先吸取3ml柠檬酸钠溶液),用0.9%的氯化钠溶液洗5次,3000r/s离心5min,最后按沉淀的红细胞体积用0.9%的氯化钠溶液配成2%的红细胞悬液。 2、土豆凝集素制备:称取去皮土豆块茎2g,切成薄片,加10mlPBS 缓冲液,浸泡2h,浸出粗提液中含有可溶性土豆凝集素。 3、细胞凝集反应:双凹片土左侧滴土豆凝集素1滴,2%家兔红细胞悬液1滴;右侧滴PBS缓冲液1滴,2%家兔红细胞悬液1滴。在双凹片上混匀,摇动。 4、低倍镜下观察。 五、实验结果 1、实验结论 2、实验照片

凝集反应(ABO血型的鉴定)

实验一凝集反应(ABO血型的鉴定) [实验目的] 1.掌握凝集反应的原理,玻片法和试管法凝集实验的实验方法和结果分析。 2.了解凝集反应基本类型及血型鉴定的各种方法包括正、反定型,血型板鉴定法和血型卡鉴定法。 [实验原理] 在一定浓度的电解质溶液中,颗粒性抗原与相应抗体结合后,出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应。人类ABO血型抗原主要有A和B两种,根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种。据此,将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合,抗A或(和)抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,据其凝集情况便可判定出受试者的血型。 [实验器材] 1.器材:光学学显微镜,消毒缸 2.材料:消毒干棉球,一次性采血针,载玻片,玻璃试管,一次性带刻度朔料吸管,医用黄色垃圾袋 3.试剂:75%医用酒精,0.9%NaCl注射液,抗血清试剂抗A、抗B [内容与方法] (一)玻片法凝集实验 1.用酒精棉签消毒被检者手指尖端,以采血针刺破皮肤,稍加挤压,使血液流出。滴1至2滴血液于含有1ml生理盐水的试管内,摇匀,制成约0.5%血球悬液。用干棉球止血。2.取洁净载玻片1块,在中间用蜡笔画一条竖线,将抗A、B分型试剂分别加1滴于载玻片两端。 3. 用毛细吸管吸取血球悬液,在白瓷板的两个圆孔内各加一滴,并充分混匀,放置5-10分钟。 4.肉眼观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分散。若肉眼观察不明显,可在显微镜下观察是否存在微小凝集 5.记录凝集情况,判定受检者的血型。 (二)试管法凝集实验 1.用酒精棉签消毒被检者手指尖端,以采血针刺破皮肤,稍加挤压,使血液流出。滴1至2滴血液于含有生理盐水的试管内,摇匀,制成约0.5%血球悬液。用干棉球止血。 2.取洁净试管2支,分别标记上A、B字样,将抗A、B分型试剂分别加1滴于相应标记的试管中 3.用一次性吸管吸取血球悬液,在2支标记试管中各加一滴,并充分混匀,放置5-10分钟。4.观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分散。若肉眼观察不明显,可在显微镜下观察是否存在微小凝集 5.记录凝集情况,判定受检者的血型。 (三)演示实验(包括反定型鉴定法、板式和卡式法的结果判读) 1.实验老师准备0.5%标准红细胞:A型、B型、O型,已分离血浆的抗凝血 2.取洁净试管3支,分别标记上A、B、O字样,将受检者血浆加入已标注A、B、O字样的试管中各1滴。 3.用一次性吸管吸取0.5%标准红细胞血球悬液A、B、O 型,分别加于相应标记的试管内,并充分混匀,放置5-10分钟,(离心后观察结果)。 4.观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分

凝集反应题库1-0-8

凝集反应题库1-0-8

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]间接血凝可检测的是() A.直接抗ABO系统抗原 B.不完全红细胞凝集素 C.直接致敏红细胞上的抗原 D.直接抗Rh抗原 E.白细胞表面抗原 血凝试验又称为Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法。它分为直接Coombs试验和间接Coombs试验,直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体而间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]直接凝集反应是() A.颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼不可见的凝集现象 B.颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象 C.可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼不可见的凝集现象 D.可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象 E.以上均不对 直接凝集反应为颗粒性抗原直接与相应抗体反应,比例合适时出现凝集。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]血清学试验用于急性传染病诊断最可靠的发现是() A.高抗体滴度 B.抗体滴度逐渐下降 C.抗体滴度逐渐增高 D.阳性补体结合试验 E.没有相应抗体 抗体滴度逐渐增高说明存在急性感染或感染逐渐加剧的可能。 https://www.360docs.net/doc/3515618340.html,/ 旅游管理

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]间接血凝试验阳性() A.红细胞溶解 B.红细胞不溶解 C.红细胞凝集 D.红细胞不凝集 E.胶乳颗粒不凝集 间接血凝试验是以红细胞为载体的间接凝集试验,用已知的抗原或抗体致敏红细胞,然后与待测样本中的抗体或抗原反应,出现红细胞凝集者为阳性。

血凝抑制实验报告_1

( 实验报告) 姓名:____________________ 单位:____________________ 日期:____________________ 编号:YB-BH-004573 血凝抑制实验报告Hemagglutination inhibition test report

血凝抑制实验报告 血凝抑制实验报告一 禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法,而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点,已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为操作影响较大,经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。 一、血凝试验操作程序 1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25 μL PBS液。 2、吸取25 μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。 3、从第1孔吸取25 μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL 加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25 μL。第三排孔至第四排孔同上操作。 4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。

5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30 min 观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。 6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU) 二、血凝抑制试验操作程序 1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。(即1HAU抗原除以4) 2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25 μL PBS。 3、在第1孔加入25 μL被检血清,充分混匀后移出25 μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25 μL。 4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。 5、在第1~12孔各加入25 μL 4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30 min。 6、每孔加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀,室温(20-25℃)静置40 min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃条件下进行,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。 7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2 log2,阳性对照孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。 三、试验过程中的注意事项 1样品的保存及试验前处理 1.1 采集的血液样品应及时分离血清,最好分装至离心管中,标记清楚,离

凝集反应题库1-1-8

凝集反应题库1-1-8

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]试管凝集试验常用于() A.抗原定性 B.抗体定性 C.抗原定量 D.抗体半定量 E.抗体定量 试管凝集是将待检抗血清进行稀释,与一定量的已知抗原反应,以出现明显凝集所需抗血清的量稀释度,判断待检抗体的效价。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]外斐反应的原理是() A.沉淀反应 B.间接凝集反应 C.交叉凝集反应 D.反向间接血凝反应 E.直接凝集反应 斑疹伤寒等立克次体的脂多糖与变形杆菌某些菌株的O抗原有共同的抗原成分。由于变形杆菌易于制备,其凝集反应结果又便于观察,因此临床检验中常用这类变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集反应叫外斐反应,用于检测人类或动物血清中有无相应抗体,供立克次病的辅助诊断。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]下列试验属于凝集试验的是() A.WB试验 B.免疫电泳试验 C.RIA试验 D.ELISA试验 E.肥达反应 肥达反应是利用已知的颗粒性细菌抗原检测血清中是否有相应的抗体,属于凝集反应。https://www.360docs.net/doc/3515618340.html,/ 情侣名字

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]玻片法血清凝集反应主要优点是() A.省钱 B.易操作 C.反应简单 D.报告结果快 E.省抗原 玻片法血清凝集反应出结果较快,给病人带来很大的方便。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]反向间接血凝是检测标本中的() A.抗体 B.抗原 C.CIC D.不完全抗体 E.凝集素 反向间接凝集试验是检测标本中的抗原。

实验报告

免疫检验技术实践报告

实践一直接凝集试验 一、玻片凝集试验((细菌鉴定) (一)实验目的 1,学会细菌玻片凝集试验的操作和结果判断。 2,理解抗原抗体反应的特异性,能做出正确的检验报告。 (二)实验原理 玻片凝集试验是用已知的诊断血清,与被检的未知细菌进行凝集试验,如出现特异性凝集,可确定被检细菌的种属或型别。 (三)实验材料 1,待检细菌: 2,试剂:诊断血清: 3,器材:玻片、接种环、酒精灯 (四)实验结果记录 反应物反应现象 (凝集或不凝集) 结果判断(阳性或阴性) (五)实验报告 (六)实验讨论 1,志贺菌抗体与伤寒沙门菌能发生凝集吗?为什么? 2,做玻片凝集试验时,应怎样操作才能使凝集现象明显,利于结果的判断? 报告者: 报告日期:

二、试管凝集试验(肥达反应常量法) (一)实验目的 1,学会试管直接凝集试验的操作方法,熟练使用吸量管移液并进行连续二倍稀释。 2,能够正确进行首管血清喜事度的计算。 3,能够准确判断试管凝集试验的各级凝集程度和凝集效价,并准确报告结果。 (二)实验原理 肥达试验是用伤寒沙门菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)、乙型(B)副伤寒沙门菌的诊断菌液与病人血清做凝集试验,对伤寒、副伤寒作辅助诊断。如果需要,有些地区可增加丙型(C)副伤寒沙门菌等其他沙门菌的诊断菌液。 (三)实验材料 1,诊断菌液 2,待检血清 3,器材:小试管、刻度吸管、试管架等 (四)实验结果记录 *反应现象分别以—、+、++、+++、++++表示。 (五)实验报告 (六)实验讨论 1,如何进行血清的连续二倍稀释? 2,如果首管血清要求是1:15稀释,稀释后的总液量是3ml,应该如何进行稀释? 3,试管直接凝集反应,是稀释抗原还是稀释抗体?为什么? 4,应如何观察试管凝集反应的结果? 报告者: 报告日期:

凝集反应题库1-2-10

凝集反应题库1-2-10

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]外斐反应的原理是() A.沉淀反应 B.间接凝集反应 C.交叉凝集反应 D.反向间接血凝反应 E.直接凝集反应 斑疹伤寒等立克次体的脂多糖与变形杆菌某些菌株的O抗原有共同的抗原成分。由于变形杆菌易于制备,其凝集反应结果又便于观察,因此临床检验中常用这类变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集反应叫外斐反应,用于检测人类或动物血清中有无相应抗体,供立克次病的辅助诊断。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]下列试验属于凝集试验的是() A.WB试验 B.免疫电泳试验 C.RIA试验 D.ELISA试验 E.肥达反应 肥达反应是利用已知的颗粒性细菌抗原检测血清中是否有相应的抗体,属于凝集反应。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]玻片法血清凝集反应主要优点是() A.省钱 B.易操作 C.反应简单 D.报告结果快 E.省抗原 玻片法血清凝集反应出结果较快,给病人带来很大的方便。(互联网彩票 https://www.360docs.net/doc/3515618340.html,)

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]反向间接血凝是检测标本中的() A.抗体 B.抗原 C.CIC D.不完全抗体 E.凝集素 反向间接凝集试验是检测标本中的抗原。

问题: [单选,A2型题,A1A2型题]间接血凝可检测的是() A.直接抗ABO系统抗原 B.不完全红细胞凝集素 C.直接致敏红细胞上的抗原 D.直接抗Rh抗原 E.白细胞表面抗原 血凝试验又称为Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法。它分为直接Coombs试验和间接Coombs试验,直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体,而间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。

细胞凝集反应实验

细胞凝集反应 王玉琼201005232142 齐鲁医学班 一实验目的: 1了解细胞膜的表面结构 2了解血细胞凝集原理 3学习研究细胞凝集反应的方法 二实验原理: 细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起,成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为,细胞间的联系,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,如植物血球凝集素,伴刀豆凝集素和土豆凝集素等,它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 三实验用品: PBS缓冲液显微镜双凹载玻片滴管 土豆凝集素 土豆凝集素的提取:去皮土豆块茎2g,加10mLPBS缓冲液浸泡24h,所得粗提液中既含有可溶性土豆凝集素. 1%兔血红细胞 2.1%兔血红细胞制备:抽取兔静脉血1mL加抗凝剂,加入3mL生理盐水,1000r/min离心5min,重复洗涤三次。按红细胞压积配成1%红细胞悬浊液。 四实验步骤: 1.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%兔血红细胞各一滴,置于双凹片左孔混匀。 2.吸取PBS缓冲液各一滴置于双凹片右孔混匀。 3.摇晃5-10min观察,并以低倍镜镜检。 五实验结果: 反应前反应后 (左为混合了PBS的兔血红细胞,右为混合了土豆凝集素的兔血红细胞)

发生凝集的细胞未发生凝集的细胞 图2 低倍镜(*10)下混合了了土豆凝集素(左)和PBS缓冲溶液(右)的兔血红细胞观察结果分析: 混合土豆凝集素9分钟时细胞开始发生凝集,可以观察到细小沙粒状的细胞团,随时间流逝小细胞团变大。 如图1可看到,混合了土豆凝集素的兔血红细胞(右侧)聚集成块,周围液体较澄清;而混合了PBS缓冲溶液的兔血红细胞(左侧)未发生凝集,液体浑浊。 低倍镜下镜检(图2)可看到,凝集了的细胞聚成一簇不规则的团,而未发生凝集的红细胞很均匀。 六关于实验操作的反思 1 兔子耳缘静脉抽血: 基本操作:按压兔子耳缘静脉的近心端,用酒精棉球擦拭,可以看到耳缘静脉鼓起来。针尖孔朝上,平行进针。看到针尖回血后,抽取血液。拔针止血。 第一次抽血,手还是有点抖,不过还是抽到血。 存在问题:感觉抽不动针的活塞。不习惯拿针管的姿势。 2细胞凝集反应操作反思: 前两次由于滴入的PBS缓冲液太多,致使两边混合在一起。因此,要少滴,摇晃玻璃片时要缓慢。 七关于实验内容的理解体会 一关于实验原理 定义:颗粒性抗原(细菌、红细胞、偶联抗原的乳胶颗粒)与相应抗体结合后出现肉眼可见的凝集现象, 此称

免疫学——凝集试验

文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑. 实验报告 课程名称:病原生物学与免疫学实验指导老师:陈玮__ _____成绩: 实验名称:凝集反应和吞噬作用______实验类型:_____________同组学生姓名:钟一鸣____ 1.直接凝集反应——ABO血型鉴定 【实验原理】 细菌、细胞等颗粒性抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应。常用的包括玻片法和试管法两种。 玻片凝集试验为定性实验,一般用已知抗体作为诊断血清,与受检颗粒性抗原如菌液或红细胞,各加一滴在玻片上,混匀,数分钟后即可用肉眼观察凝集结果,出现凝集颗粒的为阳性。此法简便、快速,适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断或分型,也可用于红细胞ABO血型的鉴定。 在ABO血型系统,根据红细胞膜上是否含有A、B抗原而分为A(含A抗原)、B(含B抗原)、AB(含A、B抗原)、O(均不含A、B抗原)型。将受试者的红细胞加入抗B抗体试剂和抗A抗体试剂中,观察有无凝集现象,从而测知受试者红细胞上有无A、B抗原。 表1 ABO血型鉴定表 血型抗A分型试剂抗B分型试剂 A+- B- + AB++ O- - 【实验现象】 1).在抗A抗体中,可见红细胞均匀分散,虽有时会见红细胞在圆孔中间沉积,但再加以摇晃便可发现红细胞分散。整体液体较为浑浊 2).在抗B抗体中,可见红细胞在圆孔中央凝集成块,加以摇晃也不分散,周围液体较为澄清。 【实验结论】 该受试者血液红细胞含B抗原,为B型血 【实验讨论】

文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑.欢迎下载支持. 1)实验时应当注意抗体和抗原的比例。即滴加的血液含量以及抗体含量应适当,而不要一个特别多一个特别少,会影响实验结果 2)当看到有红细胞类似在圆孔中间凝集时,可多加晃动,看其是否会分散——有可能是因为圆圈状离心晃动使红细胞向中间沉积,而不是因凝集产生的现象。若分散则为干扰现象,并不是凝集反应。 2.间接凝集反应——血清类风湿因子测定 【实验原理】 以红细胞为载体,将人丙种球蛋白(可溶性抗原)吸附在载体表面而成为致敏红细胞,然后用此致敏红细胞检测类风湿性关节炎患者血清中的类风湿因子(抗变性IgG抗体),当患者血清中含有类风湿因子时红细胞发生凝集。此方法常用于检测血清中的抗体,辅助诊断疾病。 【实验现象】 理论上第九孔阴性对照中,孔中的红细胞应紧密集中与孔中央,成为一暗红点,孔周围整齐光滑。第十孔阳性对照红细胞均凝集并均匀地铺于孔的四周,孔中央无红细胞沉积的暗红点。第1-8孔,若有类风湿因子,则应随着稀释度增加,红细胞由完全凝集于孔四周看不到中央红点,逐渐转变为可看见中央有疏松的红点,若最终稀释过多可致如阴性对照的结果。 本次实验,所有孔中,包括阴性对照,红细胞均凝集并均匀地铺于孔的四周,孔中央无红细胞沉积的暗红点。 【实验结论】 十个孔均为“++++”,无法判断凝集效价以及结果是否阳性 【实验讨论】 1).本次实验阴性对照仍出现完全凝集并均匀铺于孔四周的现象。经分析可能是由于稀释液遭到污染,使得所有孔中红细胞均发生完全凝集。 2).实验时从恒温槽中取出96孔板时要注意轻拿,防止铺于孔四周已经凝集的红细胞因震动向孔心滑动,出现类似阴性的现象。 3).加致敏红细胞悬液时应从第9孔阴性对照开始一次从低浓度向高浓度进行。 3.协同凝集实验 【实验原理】 金黄色葡萄球菌细胞壁含有一种蛋白质,称为金黄色葡萄球菌A蛋白SPA。SPA具有

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