硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表
硫酸铵饱和度的常用表1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃）
2．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃）
3．不同温度下饱和硫酸铵溶液的数据
聚丙烯酰胺凝胶的配制
表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液
溶液成分
不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）
5 10 15 20 25 30 40 50
6%
水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30%丙烯酰胺溶液 1 2 3 4 5 6 8 10
1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3
2.5
3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04 8%
水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9 18.5 23.2 30%丙烯酰胺溶液 1.3 2.7 4 5.3 6.7 8 10.7 13.3
1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3
2.5
3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.015 0.018 0.024 0.03 10%
水 1.9 4 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30%丙烯酰胺溶液 1.7 3.3 5 6.7 8.3 10 13.3 16.7
1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3
2.5
3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 12%
水 1.6 3.3 4.9 6.6 8.2 9.9 13.2 16.5 30%丙烯酰胺溶液 2 4 6 8 10 12 16 20
1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3
2.5
3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02
15%
水 1.1 2.3 3.4 4.6 5.7 6.9 9.2 11.5 30%丙烯酰胺溶液 2.5 5 7.5 10 12.5 15 20 25
1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3
2.5
3.8 5 6.3 7.5 10 12.5
10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 表2 配制6% Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳5%积层胶所用溶液
溶液成分
不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）123456810
水0.68 1.4 2.1 2.7 3.4 4.1 5.5 6.8 30%丙烯酰胺溶液0.170.330.50.670.831 1.3 1.7 1.5 mol/L Tris (pH8.8)0.130.250.380.50.630.750 1.25 10% SDS0.010.020.030.040.050.060.080.1 10%过硫酸氨0.010.020.030.040.050.060.080.1 TEMED0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0080.01
不同温度下硫酸铵饱和度计算表
在0℃硫酸铵终浓度，% 饱和度 硫酸铵初浓度，％饱和度 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 每100ml 溶液加固体硫酸铵的克数 0 10.6 13.4 16.4 19.4 22.6 25.8 29.1 32.6 36.1 39.8 43.6 47.6 51.6 55.9 60.3 65.0 69.7 5 7.9 10.8 13.7 16.6 19.7 22.9 26.2 29.6 33.1 36.8 40.5 44.4 48.4 52.6 57.0 61.5 66.2 10 5.3 8.1 10.9 13.9 16.9 20.0 23.3 26.6 30.1 33.7 37.4 41.2 45.2 49.3 53.6 58.1 62.7 15 2.6 5.4 8.2 11.1 14.1 17.2 20.4 23.7 27.1 30.6 34.3 38.1 42.0 46.0 50.3 54.7 59.2 20 0 2.7 5.5 8.3 11.3 14.3 17.5 20.7 24.1 27.6 31.2 34.9 38.7 42.7 46.9 51.2 55.7 25 0 2.7 5.6 8.4 11.5 14.6 17.9 21.1 24.5 28.0 31.7 35.5 39.5 43.6 47.8 52.2 30 0 2.8 5.6 8.6 11.7 14.8 18.1 21.4 24.9 28.5 32.3 36.2 40.2 44.5 48.8 35 0 2.8 5.7 8.7 11.8 15.1 18.4 21.8 25.4 29.1 32.9 36.9 41.0 45.3 40 0 2.9 5.8 8.9 12.0 15.3 18.7 22.2 25.8 29.6 33.5 37.6 41.8 45 0 2.9 5.9 9.0 12.3 15.6 19.0 22.6 26.3 30.2 34.2 38.3 50 0 3.0 6.0 9.2 12.5 15.9 19.4 23.0 26.8 30.8 34.8 55 0 3.0 6.1 9.3 12.7 16.1 19.7 23.5 27.3 31.3 60 0 3.1 6.2 9.5 12.9 16.4 20.1 23.1 27.9 65 0 3.1 6.3 9.7 13.2 16.8 20.5 24.4 70 0 3.2 6.5 9.9 13.4 17.1 20.9 75 0 3/2 6.6 10.1 13.7 17.4 80 0 3.3 6.7 10.3 13.9 85 0 3.4 6.8 10.5 90 0 3.4 7.0 95 0 3.5 100 0
硫酸铵浓度表
附表一 1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） 在0℃硫酸铵终浓度，% 饱和度 硫酸铵初浓度，％饱和度 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 每100ml 溶液加固体硫酸铵的克数 0 10.6 13.4 16.4 19. 4 22.6 25. 8 29. 1 32.6 36. 1 39.8 43. 6 47.6 51. 6 55. 9 60.3 65. 69.7 5 7.9 10.8 13.7 16. 6 19.7 22. 9 26. 2 29.6 33. 1 36.8 40. 5 44. 4 48. 4 52. 6 57.0 61. 5 66.2 10 5.3 8.1 10.9 13. 9 16.9 20. 23. 3 26.6 30. 1 33.7 37.4 41. 2 45. 2 49. 3 53.6 58. 1 62.7 15 2.6 5.4 8.2 11. 1 14.1 17.2 20. 4 23.7 27.1 30.6 34. 3 38. 1 42. 46. 50.3 54. 7 59.2 20 0 2.7 5.5 8.3 11.3 14. 3 17.5 20.7 24. 1 27.6 31. 2 34. 9 38.7 42. 7 46.9 51. 2 55.7 25 0 2.7 5.6 8.4 11. 5 14. 6 17.9 21. 1 24.5 28. 31. 7 35. 5 39. 5 43.6 47.8 52.2 30 0 2.8 5.6 8.6 11. 7 14.8 18. 1 21.4 24. 9 28. 5 32. 3 36. 2 40.2 44. 5 48.8 35 0 2.8 5.7 8.7 11.8 15. 1 18.4 21. 8 25. 4 29. 1 32. 9 36.9 41. 45.3 40 0 2.9 5.8 8.9 12. 15.3 18. 7 22. 2 25. 8 29. 6 33.5 37.6 41.8 45 0 2.9 5.9 9.0 12.3 15. 6 19. 22. 6 26. 3 30.2 34. 2 38.3 50 0 3.0 6.0 9.2 12. 5 15. 9 19. 4 23. 26.8 30. 8 34.8 55 0 3.0 6.1 9.3 12. 7 16. 1 19. 7 23.5 27.3 31.3 60 0 3.1 6.2 9.5 12. 9 16. 4 20.1 23. 1 27.9 65 0 3.1 6.3 9.7 13. 2 16.8 20. 5 24.4 70 0 3.2 6.5 9.9 13.4 17.1 20.9 75 0 3/2 6.6 10.1 13. 7 17.4 80 0 3.3 6.7 10. 3 13.9
硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表
硫酸铵饱和度的常用表1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃）
2．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃） 3．不同温度下饱和硫酸铵溶液的数据
聚丙烯酰胺凝胶的配制 表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液 溶液成分 不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml） 5 10 15 20 25 30 40 50 6% 水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30%丙烯酰胺溶液 1 2 3 4 5 6 8 10 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04 8% 水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9 18.5 23.2 30%丙烯酰胺溶液 1.3 2.7 4 5.3 6.7 8 10.7 13.3 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.015 0.018 0.024 0.03 10% 水 1.9 4 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30%丙烯酰胺溶液 1.7 3.3 5 6.7 8.3 10 13.3 16.7 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 12% 水 1.6 3.3 4.9 6.6 8.2 9.9 13.2 16.5 30%丙烯酰胺溶液 2 4 6 8 10 12 16 20 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.8 5 6.3 7.5 10 12.5 10% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02
硫酸铵浓度表
1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） 在0℃硫酸铵终浓度，% 饱和度 硫酸铵初浓度，％饱和度 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 每100ml 溶液加固体硫酸铵的克数 0 10.6 13.4 16.4 19. 4 22.6 25. 8 29. 1 32.6 36. 1 39. 8 43. 6 47.6 51.6 55. 9 60.3 65. 69.7 5 7.9 10.8 13.7 16. 6 19.7 22. 9 26. 2 29.6 33. 1 36. 8 40. 5 44. 4 48.4 52. 6 57.0 61. 5 66.2 10 5.3 8.1 10.9 13. 9 16.9 20. 23. 3 26.6 30. 1 33.7 37.4 41. 2 45.2 49. 3 53.6 58. 1 62.7 15 2.6 5.4 8.2 11. 1 14.1 17.2 20. 4 23.7 27.1 30. 6 34. 3 38. 1 42.0 46. 50.3 54. 7 59.2 20 0 2.7 5.5 8.3 11.3 14. 3 17.5 20.7 24. 1 27.6 31. 2 34. 9 38.7 42. 7 46.9 51. 2 55.7 25 0 2.7 5.6 8.4 11. 5 14. 6 17.9 21. 1 24.5 28. 31. 7 35.5 39. 5 43.6 47.8 52.2 30 0 2.8 5.6 8.6 11. 7 14.8 18. 1 21. 4 24. 9 28. 5 32.3 36. 2 40.2 44. 5 48.8 35 0 2.8 5.7 8.7 11.8 15. 1 18. 4 21. 8 25. 4 29.1 32. 9 36.9 41. 45.3 40 0 2.9 5.8 8.9 12. 15. 3 18. 7 22. 2 25.8 29. 6 33.5 37.6 41.8 45 0 2.9 5.9 9.0 12. 3 15. 6 19. 22.6 26. 3 30.2 34. 2 38.3 50 0 3.0 6.0 9.2 12. 5 15. 9 19.4 23. 26.8 30. 8 34.8 55 0 3.0 6.1 9.3 12. 7 16.1 19. 7 23.5 27.3 31.3 60 0 3.1 6.2 9.5 12.9 16. 4 20.1 23. 1 27.9 65 0 3.1 6.3 9.7 13. 2 16.8 20. 5 24.4 70 0 3.2 6.5 9.9 13.4 17.1 20.9 75 0 3/2 6.6 10.1 13. 7 17.4 80 0 3.3 6.7 10. 3 13.9 85 0 3.4 6.8 10.5 90 0 3.4 7.0
硫酸铵饱和度常用表
117 附录五 硫酸铵饱和度的常用表 １．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（２５℃） 硫 酸 铵 终 浓 度 ， % 饱 和 度 10 20 25 30 33 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 90 100 每1升溶液加固体硫酸铵的克数 ① 0 56 114 144 176 196 209 243 277 313 351 390 430 472 516 561 662 767 10 57 86 118 137 150 183 216 251 288 326 365 406 449 494 592 694 20 29 59 78 91 123 155 189 225 262 300 340 382 424 520 619 25 30 49 61 93 125 158 193 230 267 307 348 390 485 583 30 19 30 62 94 127 162 198 235 273 314 356 449 546 33 12 43 74 107 142 177 214 252 292 333 426 522 35 31 63 94 129 164 200 238 278 319 411 506 40 31 63 97 132 168 205 245 285 375 469 45 32 65 99 134 171 210 250 339 431 50 33 66 101 137 176 214 302 392 55 33 67 103 141 179 264 353 60 34 69 105 143 227 314 65 34 70 107 190 275 70 35 72 153 237 75 36 115 198 80 77 157 硫 酸 铵 初 浓 度 ， % 饱 和 度 90 79 ○ 1在25℃下硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表
硫酸鞍饱和度旳吊酰胺凝胶的配制表
硫酸鞍饱和度的常用表1.调整硫酸鞍溶液饱和度计算衷(0-C) 在O'C硫酸镀终浓度，％饱和度
2.调整硫酸镀溶液饱和度计算表（25C）
聚丙烯酰胺凝胶的配制 表1配制Tris?甘低酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液 6% 26. 水 2.6 5.37.9 10.6 13.2 15.9 21.2 5 30%丙烯酰 胺溶液123 4 568 10 1.5 mol/L1 2. Tris (pH&8) 1.3 2.5 3.8 5 6.37.510 5 10% SDS0.050.1 0.150.2 0.250.30.4 0.5 10%过硫酸 氨0.050.1 0.150.2 0.250.30.4 0.5 0.00 0.00 0.01 0.010.02 0.03 0.0 TEMED482 6 0.024 2 4 8% 23. 水 2.3 4.6 6.99.3 11.5 13.9 18.5 2 30%丙烯酰13.胺溶液 1.3 2.74 5.3 6.7810.7 3 1.5 mol/L1 2. Tris (pH&8) 1.3 2.5 3.8 5 6.37.510 5 10% SDS0.050.1 0.150.2 0.250.30.4 0.5 10%过硫酸 氨0.050.1 0.150.2 0.250.30.4 0.5 0.00 0.00 0.00 0.01 0.01 0.01 0.02 0.0 TEMED369 2 58 4 3 10% 19. 1.9 4 5.9 7.9 9.9 11.915.9 8
硫酸铵饱和溶液 计算
（四）抗原的分离与纯化 从细胞中提取出来的生物大分子是不纯净的，必须进一步分离纯化才能获得纯品。在生物大分子制备工作中，分离纯化是比较复杂和重要的一个环节。对于异类的物质，如提纯蛋白质和酶时混杂着核酸，提纯核酸时混杂着蛋白质或多糖，一般可用专一性酶水解、有机溶剂抽提、选择性分部沉淀等方法处理，小分子物质常在整个制备过程中多次液相与固相互相转化被分离或最后用透析方法除去。而对同类物质，如酶和杂蛋白，RNA和DNA以及不同结构的蛋白质、酶、核酸之间的分离，情况则复杂得多，主要应用的方法有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、吸附法、结晶法、电泳法、超速离心法、柱层析法等。其中盐析法、等电点法、结晶法用于蛋白、酶的提纯较多；有机溶剂抽提和沉淀用于核酸提纯较多；柱层析法、梯度离心法在蛋白质和核酸的提纯工作中应用均十分广泛。本节侧重对蛋白质、酶和核酸分离纯化中与溶解度有关的一些方法作一简要叙述。 1．蛋白质分离纯化的一些方法 （1）盐析法 ①原理：盐析法对于许多非电解质的分离纯化都是适合的，也是蛋白质和酶提纯工作应用最早，至今仍广泛使用的方法。其原理是蛋白质、酶在低盐浓度下的溶解质随着盐液浓度升高而增加（此时称为盐溶）；当盐浓度不断上升时，蛋白质和酶的溶解度又以不同程度下降并先后析出，称为蛋白质的盐析。这一现象是由于蛋白质分子内及分子间电荷的极性基团有着静电引力，当水中加入少量盐类时，由于盐类离子与水分子对蛋白质分子上的极性基团的影响，使蛋白质在水中溶解度增大。但盐浓度增加到一定程度时，蛋白质表面的电荷大量被中和，水化膜被破坏，于是蛋白质就相互聚集而沉淀析出。盐析法就根据不同蛋白质和酶在一定浓度的盐溶液中溶解度降低程度的不同而达到彼此分离的方法。 ②盐的选择：蛋白质盐析常用中性盐，主要有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等。其中应用最广的是硫酸铵，其优点是温度系数小而溶解度大（25℃时饱和溶解度为4.1mol/L,即767g/L;0℃时饱和溶解度为3.9mol/L，即676g/L），在这一溶解度范围内，许多蛋白质和酶都可以盐析出来，而且硫酸铵价廉易得，分段效果比其他盐好，不容易引起蛋白质变性。应用硫酸铵时，对蛋白氮的测定有干扰，缓冲能力比较差，故有时也应用硫酸钠，如盐析免疫球蛋白，用硫酸钠的效果也不错，硫酸钠的缺点是30℃以上溶解度太低。其他的中性盐如磷酸钠的盐析作用比硫酸铵好，但也由于溶解度太低，受温度影响大，故应用不广。 硫酸铵浓溶液的pH在4.5～5.5之间，市售的硫酸铵常含有少量游离硫酸，pH值往往降至4.5以下，当用其他pH值进行盐析时，需用硫酸或氨水调节。 ③硫酸铵饱和度计算法及加入方式：在分段盐析时，加盐浓度一般以饱和度表示，饱和溶液的饱和度定为100%。用硫酸铵盐析时其溶液饱和度调整方法有3种。一是当蛋白质溶液体积不大，所需调整的浓度不高时，可加入饱和硫酸铵溶
硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表
硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表
硫酸铵饱和度的常用表1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） 在0℃ 硫酸铵终浓度，% 饱和度 硫酸铵初浓度，％饱和度 20253035404550556065707580859095100每 100ml 溶液加固体硫酸铵的克数 010.613.416.419.422.625.829.132.636.139.843.647.651.655.960.365.069.7 57.910.813.716.619.722.926.229.633.136.840.544.448.452.657.061.566.2 10 5.38.110.913.916.920.023.326.630.133.737.441.245.249.353.658.162.7 15 2.6 5.48.211.114.117.220.423.727.130.634.338.142.046.050.354.759.2 200 2.7 5.58.311.314.317.520.724.127.631.234.938.742.746.951.255.7 250 2.7 5.68.411.514.617.921.124.528.031.735.539.543.647.852.2 3002.8 5.68.611.714.818.121.424.928.532.336.240.244.548.8 3502.8 5.78.711.815.118.421.825.429.132.936.941.045.3 4002.9 5.88.912.015.318.722.225.829.633.537.641.8 4502.9 5.99.012.315.619.022.626.330.234.238.3 5003.0 6.09.212.515.919.423.026.830.834.8 5503.0 6.19.312.716.119.723.527.331.3 6003.1 6.29.512.916.420.123.127.9 6503.1 6.39.713.216.820.524.4 7003.2 6.59.913.417.120.9 7503/2 6.610.113.717.4 8003.3 6.710.313.9 8503.4 6.810.5 9003.47.0 9503.5 1000
不同温度下硫酸铵饱和度计算表
此次生化实验可参考以下公式计算 g-表示1升溶液中需要加入固体硫酸铵的克数 -要求达到的百分饱和度 -原溶液中的百分饱和度 1．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） 在0℃硫酸铵终浓度，% 饱和度 硫酸铵初浓度，％饱和度 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 每100ml 溶液加固体硫酸铵的克数 0 10.6 13.4 16.4 19.4 22.6 25.8 29.1 32.6 36.1 39.8 43.6 47.6 51.6 55.9 60.3 65.0 69.7 5 7.9 10.8 13.7 16.6 19.7 22.9 26.2 29.6 33.1 36.8 40.5 44.4 48.4 52.6 57.0 61.5 66.2 10 5.3 8.1 10.9 13.9 16.9 20.0 23.3 26.6 30.1 33.7 37.4 41.2 45.2 49.3 53.6 58.1 62.7 15 2.6 5.4 8.2 11.1 14.1 17.2 20.4 23.7 27.1 30.6 34.3 38.1 42.0 46.0 50.3 54.7 59.2 20 0 2.7 5.5 8.3 11.3 14.3 17.5 20.7 24.1 27.6 31.2 34.9 38.7 42.7 46.9 51.2 55.7 25 0 2.7 5.6 8.4 11.5 14.6 17.9 21.1 24.5 28.0 31.7 35.5 39.5 43.6 47.8 52.2 30 0 2.8 5.6 8.6 11.7 14.8 18.1 21.4 24.9 28.5 32.3 36.2 40.2 44.5 48.8 35 0 2.8 5.7 8.7 11.8 15.1 18.4 21.8 25.4 29.1 32.9 36.9 41.0 45.3 40 0 2.9 5.8 8.9 12.0 15.3 18.7 22.2 25.8 29.6 33.5 37.6 41.8 45 0 2.9 5.9 9.0 12.3 15.6 19.0 22.6 26.3 30.2 34.2 38.3 50 0 3.0 6.0 9.2 12.5 15.9 19.4 23.0 26.8 30.8 34.8 55 0 3.0 6.1 9.3 12.7 16.1 19.7 23.5 27.3 31.3 60 0 3.1 6.2 9.5 12.9 16.4 20.1 23.1 27.9 65 0 3.1 6.3 9.7 13.2 16.8 20.5 24.4 70 0 3.2 6.5 9.9 13.4 17.1 20.9 75 0 3/2 6.6 10.1 13.7 17.4 80 0 3.3 6.7 10.3 13.9 85 0 3.4 6.8 10.5 90 0 3.4 7.0 95 0 3.5 100 0
常用浓度配制表格
附录1 硫酸铵饱和度常用表 （一）调整硫酸铵溶液饱和度计算表（25℃） 硫酸铵终浓度，饱和度∕% 在25℃时，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
(二)调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） 硫酸铵终浓度，饱和度∕% *在0℃时，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每100ml溶液所加固体硫酸铵的克数。
附录2 实验中常用酸、碱的比重和浓度的关系 名称化学式分子量比重 质量分数/ %（W / W）物质的量浓度（粗略）/ mol·L-1 配1L 1mol·L-1 溶液所需量/mL 盐酸HCl 36.47 1.19 37.2 12.0 84 1.18 35.4 11.8 1.10 20.0 6.0 硫酸H2SO498.09 1.84 95.6 18.0 28 1.18 24.8 3.0 硝酸HNO363.02 1.42 70.98 16.0 63 1.40 65.3 14.5 1.20 3 2.36 6.1 冰醋酸CH3COOH 60.05 1.05 99.5 17.4 59 醋酸CH3COOH 1.075 80.0 14.3 69.93 磷酸H3PO498.06 1.71 85.0 15 67 氨水NH4OH 35.05 0.90 15 67 0.904 27.0 14.3 70 0.91 25.0 13.4 0.96 10.0 5.6 氢氧化钠NaOH 40.0 1.5 50.0 19 53 溶液
附录3 常用固态酸、碱、盐的物质的量浓度配制参考表 名称化学式Mr 物质的量浓度 /mol·L-1配1L 1mol/L溶液所需量/ g·L-1 草酸H2C2O4·2H2O 126.08 1.0 63.04 柠檬酸H3C6H5O7·H2O 210.14 0.1 7.00 氢氧化钾KOH 56.10 5.0 280.50 氢氧化钠NaOH 40.00 1.0 40.00 碳酸钠Na2CO3 106.00 0.5 53.00 磷酸氢二钠Na2HPO4·12H2O 358.20 1.0 358.20 磷酸二氢钾KH2PO4 136.10 1/15 9.08 重铬酸钾K2Cr2O7 294.20 1/60 4.9035 碘化钾KI 166.00 0.5 83.00 高锰酸钾KMnO4158.00 0.05 3.16 乙酸钠NaC2H3O2 82.04 1.0 82.04 硫代硫酸钠Na2S2O3·5H2O 248.20 0.1 24.82
饱和硫酸铵溶液的配制
饱和硫酸铵溶液的配制 ①在25℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。1．?2．?调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） ①在0℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。可以在加进去之后，用微波炉加热到溶解为止，然后放置在过夜，第二天就会有晶体析出，这就可以了。 双蒸水中加入过量硫酸铵，热至50－60度保温数分钟，趁热滤出沉淀，在0度或25度平衡1－2天，有固体析出时即达100％饱和度，以氨水调节PH值至。 硫酸铵在水中的溶解度，100度时为ml，0度时为ml 。因此，每100ml蒸馏水加90gAR 级结晶硫酸铵，80度溶解，趁热过滤，降至室温后即有结晶析出，应任其留存瓶中，使用前吸出所需的量，用28%的氨水调PH至即可。结晶（要留着，随着温度变化，溶解度也会变化，你总要保证溶液中是饱和的，所以结晶留在瓶底，不需要再过滤，使用时取上面的溶液即可。或影响不大，也有调到的，因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。） 最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌，上层澄清的就是饱和的了。 另外较快达到饱和状态的方法是，将过量的硫酸铵（参考不同温度下的溶解大多数，或干脆多加点）放在水浴箱内高温溶解，取出致室温放置至其平衡（会有硫酸铵重新析出），上清即为室温下的饱和硫酸铵 先将硫酸氨80克溶解到100水中，加热到80左右，溶解部分过滤，其余的再溶，仍有一部分结晶，过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶，平衡一两天，取上清用同时氨水调节PH值用。 硫酸铵沉淀主要分为两种形式： 1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中，这种方法精确度高，硫酸铵是弱酸性的，事先调好pH后，再补入溶液中pH变化小，适合于对pH敏感的蛋白（酶类）或要求比较高的实验。 2.直接将固体硫酸铵补入目标溶液中，这种方法比较快速，但是加入后溶液pH值会有一定程度的降低，适合于对pH不敏感的蛋白，这种操作应该能满足一般实验的要求。
饱和硫酸铵溶液的配制
①在25℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。 1． 2．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0℃） ①在0℃下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。 25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。可以在加进去之后，用微波炉加热到溶解为止，然后放置在过夜，第二天就会有晶体析出，这就可以了。 双蒸水中加入过量硫酸铵，热至50－60度保温数分钟，趁热滤出沉淀，在0度或25度平衡1－2天，有固体析出时即达100％饱和度，以氨水调节PH值至7.0。 硫酸铵在水中的溶解度，100度时为1.034g/ml，0度时为0.706g/ml 。因此，每100ml蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵，80度溶解，趁热过滤，降至室温后即有结晶析出，应任其留存瓶中，使用前吸出所需的量，用28%的氨水调PH至7.2即可。结晶（要留着，随着温度变化，溶解度也会变化，你总要保证溶液中是饱和的，所以结晶留在瓶底，不需要再过滤，使用时取上面的溶液即可。pH7.0或7.2影响不大，也有调到7.4的，因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。）最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌，上层澄清的就是饱和的了。 另外较快达到饱和状态的方法是，将过量的硫酸铵（参考不同温度下的溶解大多数，或干脆多加点）放在水浴箱内高温溶解，取出致室温放置至其平衡（会有硫酸铵重新析出），上清即为室温下的饱和硫酸铵 先将硫酸氨80克溶解到100水中，加热到80左右，溶解部分过滤，其余的再溶，仍有一部分结晶，过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶，平衡一两天，取上清用同时氨水调节PH值用。 硫酸铵沉淀主要分为两种形式： 1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中，这种方法精确度高，硫酸铵是弱酸性的，事先调好pH后，再补入溶液中pH变化小，适合于对pH敏感的蛋白（酶类）或要求比较高的实验。 2.直接将固体硫酸铵补入目标溶液中，这种方法比较快速，但是加入后溶液pH值会有一定程度的降低，适合于对pH不敏感的蛋白，这种操作应该能满足一般实验的要求。