高中生物选修一专题练

选修一微生物的实验室培养专题练1．(2017·山东潍坊期末)近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，《舌尖上的中国》多次讲述了利于不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请回答：

(1)腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种到豆腐上，这样可以___________________。腐乳制作的过程中，加盐的作用是_______________和__________。从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于____________。

(2)在果醋制作时，醋酸菌在____________供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用____________生成醋酸。

(3)制作泡菜的原理是________________________________________。

2.(2017·贵阳一检)某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如图所示。(注：培养皿旁的数字代表菌落数目；实验条件适宜；实验操作规范等)请回答相关问题：

(1)在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的________和________条件；另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。

(2)据图，研究小组采用的是________________法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9 mL生理盐水的4支试管________，并编号1～4号；第二步，用移液管从样品中吸取1 mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推。4号试管的稀释倍数是________________。

(3)资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%～15%NaCl肉汤中生长。本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为____________培养基，以利于金黄色葡萄球菌生长，抑制或阻止其他微生物的生长。

(4)在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1 mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为____________。

3．将没有吃完的西瓜，盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。

(1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、 ____________

和____________。一般采用____________法对培养基进行灭菌。

(2)为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板____________(填“正置”或“倒置”)。为了观察

浸出液中微生物的种类和数量，采用____________法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验

操作应在____________附近进行。

(3)在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有____________(填

“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越____________(填“高”或“低”)。

4．解磷微生物能分解有机磷，可降低水体富营养化程度。下图是从湖泊污泥中筛选解磷微生物的过程示意

图，下表是分离纯化的结果。请回答下列问题：

菌落编号123

48小时

72小时

96小时

(1)培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl及无菌卵黄液，其中____________主要提供有机磷。从

土壤中富集解磷微生物时，应选用____________(填“固体”或“液体”)培养基。

(2)在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是____________。配制成10－1浓度稀释液时，

用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1 mL，移入盛有____________mL无菌水的试管中，并依次配制10－2～

10－10的梯度稀释液。

(3)分析菌种的分离纯化结果，应选择____________号菌落进行扩大生产，原因是

___________________。

5.（2014·新课标Ⅱ-贵州）39．[生物——选修1：生物技术实践]（15分）

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是。

（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液

的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。

6.（2013·新课标Ⅱ-贵州）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_____________法或_____________法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B______；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明______________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的__________。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。

7.（2016新课标2卷.39)[生物——选修1：生物技术实践]（15分）

苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：

（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在

酵母菌细胞的________________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度________________。

（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。

（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段。

（4）醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中（填“含有”或“不含有”）线粒体。

（2016新课标Ⅲ卷.39）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，

乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是

_________________。

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

8．(2017·淄博市一模)请分析回答下列问题：

(1)用新鲜胡萝卜提取胡萝卜素时，在干燥处理过程中控制温度和时间的原因是____________。胡萝卜素萃取剂宜选用不溶于____________的有机溶剂，萃取过程的加热采用____________法。

(2)鉴定胡萝卜素粗品的常用方法是____________，鉴定过程需与____________进行比对。

(3)β-胡萝卜素可从生活在高浓度盐湖中的杜氏盐藻中提取，由于杜氏盐藻的细胞壁不含纤维素，因此提高了β-胡萝卜素的____________。与细菌培养基相比，培养杜氏盐藻的液体培养基在成分上的主要特点是________________________________________________________。

9．利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌(单细胞真菌)，未突变菌不能在含有浓度为10－5 M 的β-紫罗酮的培养基上生长。菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程。

图甲 图乙

(1)三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是__________________。

(2)培养基中的葡萄糖为菌体生长提供________；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加________。

(3)进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。为筛选纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，采取重复________(填图甲中数字)过程。

(4)固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是________。

(5)过程⑥是________，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量________，提取的色素少。

10.【2017·全国I 卷】[生物——选修1：生物技术实践]（15分）

某些土壤细菌可将尿素分解成2CO 和3NH ，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生 。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物2CO 作为碳源，原因是 。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 （答出两点即可）。

（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择 （填“尿素”“43NH NO ”或“尿

素43NH NO ”）作为氮源，不选择其他两组的原因是 。

（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有24KH PO 和24Na HPO ，其作用有 （答出两点即可）。

11.（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]

已知微生物A 可以产生油脂，微生物B 可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A 菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A 产生的油脂不易挥发，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B 的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B 的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。

（4）为了确定微生物B 产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g 油脂所需酶量依次为4mg 、1mg 、6mg ，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。

12.(2017贵州适应性考试)[生物——选修1:生物技术实践]（15分）

我国最早的诗集《诗经》中有“田中有庐，疆场有瓜是剥是菹”的诗句，其中“庐”和“瓜”是蔬菜，“剥”和“菹”是腌制加工的意思。泡菜是一种历史悠久、深受群众喜爱的传统美食。某兴趣小组的同学进行了制作泡菜的实践活动。

回答下列问题：

（1）按清水与盐质量比为4:1的比例制好盐水后，需将盐水煮沸，其作用是______________。

（2）为测定泡菜中亚硝酸盐含量，首先要配制________标准显色液，并与样品进行比较。泡菜制作的第3-5天亚硝酸盐含量较高不宜食用，原因是________________。

（3）若将稀释105

倍的某细菌菌液，用直接计数法和稀释涂布平板法进行计数。

①直接计数法：用吸管吸取该菌液，滴于血球计数板上的________________边缘，待该细菌全部沉降到计数室底部，用显微镜直接计数，并计算出每升菌液的细菌数目。

②稀释涂布平板法计数：在五个固体培养基上分别接种该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：20、40、152、154、156，则每升菌液中细菌数量为________个。

③正常操作情况下，上述两种计数法中，________________统计获得的细菌数量数目偏多，原因是________________。

13．(2017·贵州黔南州期末)请回答下列与微生物有关的问题：

(1)微生物的分布：纤维素分解菌主要分布在富含__________的土壤表层。

(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用__________和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用__________法进行灭菌。

(3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生型__________发酵产生酒

精。

(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是__________和稀释涂布平板法。

(5)微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_______________________。

(6)微生物的鉴定：为筛选出纤维素分解菌，应向培养基中加入__________染料，将呈红色反应，再依据培养基中是否产生__________来筛选纤维素分解菌。

14.（15分）【生物——选修1 生物技术实践】

随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：

（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在__________的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，_______________，__________________和__________________。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制__________________培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的__________________。

（3）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是______，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行__________处理。（添“消毒”或者“灭菌”）

（4）产生葡萄糖后需要用到____________（微生物种类）发酵产生酒精，还可以使用_________检测产物是否为酒精，该试剂在酸性条件下可与酒精反应，溶液呈灰绿色。

15.【生物——选修1：生物技术实践】（15分）

苹果酒的制作过程如下：苹果冲洗榨汁，加入适量的糖后放人发酵瓶，搅拌密封后发酵。初期，泡沫不断增多，随着时间的延长，泡沬逐渐减少，待基本不产生气泡后，结束发酵。根据上述过程，回答以下问题：

（1）耐高糖的酵母菌是理想的酒精发酵菌种。菌种筛选的步骤如下：

①从土壤中获得酵母菌。

②制备培养基：为了选出所需菌种，培养基中除基本营养物质外，还应该添加_________________。从功能上来说，这种培养基属于______________培养基。在制备固体培养某进行倒平板操作时，平板冷凝后，需将平板倒置，其原因是______________。检测培养基是否被污染的方法是_____________________。

③接种：可采用_________________法将酵母菌接种在已灭菌的固体培养基上。