如何选择二抗---根据一抗种属及类型选择合适的二抗

如何选择二抗---根据一抗种属及类型选择合适的二抗
如何选择二抗---根据一抗种属及类型选择合适的二抗

如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑:

【一抗的种属来源】

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。

【一抗的类别亚型】

二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下,可以选用抗相应物种IgG。艾美捷能为您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特异性只结合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha-Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。

【二抗的种属来源】

一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。艾美捷有相应的驴来源的二抗,非常适合做类似双标的免疫实验。

【二抗的耦联标记】

一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight 等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用Biotin/Avidin检测系统。在一些荧光检测方案中,则需要选择不同的荧光标记;而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。艾美捷能为您提供上述所有不同类型标记的二抗。

【是否经过血清吸附过的二抗】

为减少二抗与样本的非特异性结合,艾美捷还能为您提供不同血清吸附的原装进口二抗。如您的检测样本是人源的蛋白,一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗就需要选择抗小鼠源的二抗,如果您对实验的特异性要求很高,那我们向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗,这种二抗由于经过人血清吸附而排除了与人源组织(如IgG等)可能发生非特异性反应的IgG,因此将非特异性结合降低到最低。

【Anti-IgG还是Anti-IgG, F(ab’)2 fragment】

在一些如胸腺、脾脏、血液的组织以及造血细胞、淋巴细胞、B细胞等细胞内,通常含有较多的Fc受体,这时候选择二抗时最好选择Anti-IgG, F(ab’)2 fragment这样的特异性二抗,这样就消除了由于Fc部分与IgG的非特异性结合。常规的Anti-IgG (H+L)二抗与IgG 的重链和轻链都有结合反应,即与IgG的Fc的F(ab’)2片段都能结合;由于IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此Anti-IgG (H+L)与它们都有交叉反应。而Anti-IgG, F(ab’)2 fragment经过了IgG Fc片段的吸附,因此只与IgG的F(ab’)2片段结合,然而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此与它们也有交叉反应。

【Anti-IgG(H+L)、Anti-IgG (gamma)、Anti-IgM (mu)、Anti-IgA (alpha)】

在一些特殊的实验里,只需要检测样本里的IgG或者IgM,常规的Anti-IgG (H+L)由于与IgG的重链和轻链都有结合反应,而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域,因此不能特异性的检测某种类型的IgG或者IgM。这时候就需要针对特殊类型Ig分子的二抗。艾美捷备有全面的二抗现货产品并能提供最完整的二抗产品线。主要二抗品牌为全球最大的二抗产品Jackson以及前沿抗体生产商Abbkine。按照标记分,有HRP、AP、生物素等标记二抗,FITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等荧光二抗;按照检测物种分,有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛,以及多种细菌类二抗;另外,还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。

抗高血压药物的选择

抗高血压药物的选择 国内外几个重要的高血压治疗指南(指南)将利尿剂、β2受体阻滞剂、钙通道阻滞剂(CCB) 、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI) 、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)以及α2受体阻滞剂作为一线抗高血压药物。六大类抗高血压药物的广泛应用使高血压治疗及控制状况得到改观大大降低了全球心血管病发生和死亡的危险。但目前如何正确选择及合理使用抗高血压药物更大程度地使高血压患者从抗高血压药物治疗中获益是我们今后面临的重要任务之一。 抗高血压药物选择总的原则选择抗高血压药物时主要考虑的因素包括:降压疗效与降压外的心血管保护作用、耐受性和效价比或患者的经济承受能力。降压与降压外的心血管保护作用是评价药物疗效的两个主要方面。大量循证医学证明降压治疗的收益主要来自降压本身。大多数临床试验的结果提示各类降压药之间疗效上的差异是相对的当达到一定剂量时血压均可能降到同等水平。至于是否存在降压外的心血管保护作用目前对此仍有争议。从降压到降压外的心血管保护作用经历了一个认识过程。这是抗高血压药物发展和降压治疗目标重新定位的结果。人们将抗高血压治疗从单纯降压转向心血管的全面保护并更加关注各类药物间在降低心血管死亡及心血管事件发生上的差异这无疑是一种进步。然而当过分强调降压外的血管保护作用时并没有获得循证医学的充分证据。因此人们又开始怀疑甚至否认降压外的血管保护作用的存在。但近来一些大规模临床试验(如LIFE、CAMELOT)的结果在血压控制相同的情况下不同药物组间心血管相关事件发生的相对危险性存在显著性差异。因此正确地铨释那些具有价值的循证医学的结果就不难得出:不同类别降压药除降压外具有不同的其他作用。这种作用就是抗高血压药物存在降压外血管保护的药理学基础也是临床选择用药的依据两利相权取其重。降压与降压外的血管保护作用无疑降压是前提是根本,超越前提与根本就无从谈心血管的保护作用。但在血压控制的前提下要选择具有特定血管保护作用的降压药以使患者能够最大限度的获益。至于传统与新型降压药之分并不影响抗高血压药物的临床选择。因为新药不一定都是“好药”传统降压药并不一定“差”传统降压药利尿剂经过半个多世纪的考验其重要地位始终不能被动摇。 患者对药物的耐受性和药物的效价比或患者的经济承受能力直接影响患者对治疗的依从性。耐受性主要反映药物的安全性及对患者生活质量的影响。一般

荧光标记二抗的选择

荧光标记二抗的选择 荧光标记二抗的选择-FITC/Rhodamine/Texas Red/Cy/PE/AMCA 一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP 或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC, RRX, TR, PE, Rhodamine)和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用Biotin/Avidin检测系统。其中荧光素是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多,目前常用于荧光标记二抗有以下几种: 【异硫氰酸荧光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC)荧光标记二抗】 FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年,是目前应用最广泛的荧光素。由于FITC是小分子化合物,每一个抗体可标记几个FITC分子,IgM通常用小分子的荧光素标记,如FITC、Cy3/5、Texas Red等。FITC荧光二抗主要优点是人眼对黄绿色较为敏感,通常切片标本中的绿色荧光少于红色。然而FITC的最大缺点是淬灭快,因此要和抗淬灭剂一起使用。 【四甲基异硫氰酸罗丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC),Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR)荧光标记二抗】 这些罗丹明的衍生物耦联基团具有不同的吸收波长(550, 570, 596nm)和最大发 射波长(570, 590, 620nm)。尽管TRITC经常和FITC一起在双标记实验中使用,使用RRX和TR可以得到更好的颜色区分。在使用装有氪氩灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记的实验时,RRX尤其有用,可以和Cy2(或者FITC)和Cy5一起使用,因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间,而且和这两者覆盖都很少。氪氩灯激发光为488nm,598nm和647nm,分别是Cy2(FITC), RRX和Cy5的理想激发波长。因为FITC和PE可以被氩灯的488nm波长激发, 在流式细胞仪中用FITC作双标,另一种用藻红蛋白(PE)耦联基团要比罗丹明好。TRITC为罗丹明的衍生物,呈紫红色粉末,较稳定。最大吸收光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈现橙红色荧光,与FITC的绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。 【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)】 Cy2耦联基团激发波长为492nm,发光为波长510nm的绿色可见光。Cy2和FITC 使用相同的滤波片。由于Cy2比FITC在光下更稳定。要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂,因为这种抗淬灭剂和Cy2反应,在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮,更稳定,背景更弱。Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm,最强发射光为570nm。因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中,可使用和TRITC一样的滤波片。 Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50%的光强,在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75%。Cy3可以和荧光素一起作双标。Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。Cy5耦联基团的激发波长最大650nm,发光波长最大670nm。在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98%的荧光,在氦氖灯下(633nm)为63%。Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。由于它的最大发射波长在670nm,Cy5很难用裸眼观察,而且不能用汞灯作理想

中小型企业选择服务器六大原则

中小企业在选购服务器时,要注意三个方面:价格与成本、产品的扩展与业务的扩展、售后服务。首先,由于中小企业对信息化的投入有限,因此需要注意的是产品价格低并不代表总拥有成本低,总拥有成本还包括后续的维护成本、升级成本等。其次,中小企业最大的特点就是业务增长迅速,他们需要产品能随着企业业务的发展而升级,一方面满足业务的需要,另一方面也保护原有的投资。最后,服务是购买任何产品都要考虑的,但中小企业尤其看重售后服务,因为由于自身技术水平和人力所限,当产品出现故障后,他们更加依赖厂商的售后服务。具体地说,中小企业选择服务器有如下六大原则。 稳定可靠原则 为了保证局域网能正常运转,中小型企业选择的服务器首先要确保稳定。一个性能不稳定的服务器,即使技术再先进,也不能运行企业的应用。特别是运行企业重要业务的服务器或存放核心信息的数据库服务器,一旦出现宕机或重启,就可能造成信息的丢失或者整个系统的瘫痪,甚至给企业造成难以估计的损失。 合适够用原则 如果光考虑稳定可靠,就会使服务器采购走向追求性能,求高求好的误区,因此,合适够用原则是第二个要考虑的因素。对于中小企业而言,最重要的是从当前实际情况以及将来的扩展出发,有针对性地选择满足当前的应用需要并适当超前,投入又不太高的解决方案。另外,对于那些现有的,已经无法满足需求的服务器,可以将它改作为其它性能要求较低的服务器,如DNS、FTP服务器等,或者进行适当扩充,采用集群的方式提升性能,将来再为新的网络需求购置新型服务器。 为了减少升级服务器带来的额外开销和对业务的影响,服务器应当具有较高的可扩展性,可以及时调整配置来适应企业的发展。服务器的可扩展性主要表现在几个方面,如:在机架上要有为硬盘和电源的增加留有充分余地,在主机板上的插槽不但种类齐全,而且有一定数量,以便让企业用户可以自由地对配件进行增加,以保证运行的稳定性,同时也可提升系统配置和增加功能。 易于管理原则 所谓易于操作和管理主要是指用相应的技术来简化管理以降低维护费用成本,一般通过硬件与软件两方面来达到这个目标。硬件方面,一般服务器主板机箱、控制面板以及电源等零件上都有相应的智能芯片来监测。这些芯片监控着其它硬件的运行状态并做出日志文件,发生故障时还能做出采取相应的处理。而软件则是通过与硬件管理芯片的协作将其人性化地提供给管理员。如通过网络管理软件,用户可以在自己的电脑上监控制服务器的故障并及时处理。对于那些没有配备网络管理人员的中小企业,尤其要注意选择一台使用非常简单方便的服务器。 售后服务原则

教你如何选择二抗

*教你如何正确选择二抗 通常情况下,某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择,如何能选择到最适合该实验的二抗,需要综合以下几个方面进行考虑: ●一抗的物种来源 一抗是在什么物种来源的,相应的二抗也要是抗该物种的抗体。例如,如果一抗是在小鼠体内制备的,那么你就应当选择抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔体内制备的,那么二抗就应当是抗兔的抗体。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。 ●一抗是属于哪个类或亚类 二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体. 单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM,或是抗小鼠IgG抗体。 如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。 如果你不知道一抗是哪一类别或亚类,那么抗小鼠IgG是一个不错的选择,因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

二抗的特异性 下面总结了几种具有不同特异性的二抗:针对整个抗体分子(H+L)具有特异性:如抗IgG(H+L),此类抗体既可以与抗体的重链结合也可以与轻链结合,即与抗体分子的Fc,F(ab’)2/Fab部分(见图5)均可反应,抗IgG(H+L)也可以与其他免疫球蛋白家族反应(如IgM和IgA),因为所有的免疫球蛋白都具有相同的轻链(kappa链或lambda 链)。 针对Fab片段具有特异性:这类抗体与重链轻链均可以结合,由于它们可以与轻链反应,它们同时也已和具有相同轻链的其他种类的免疫球蛋白反应。 这对Fc片段或重链具有特异性:这类抗体和重链的Fc部分反应,一次它们是类别特异性的(即gamma链特异性抗体只与IgG反应,mu链特异性抗体只识别IgM,依此类推)。 轻链(kappa,labmda)特异性:与所有类别的抗体反应,因为所有类别的抗体均具有相同的lambda链或kappa链。 经过吸附处理的二抗(cross-absorbed):不同来源的免疫球蛋白含有相似的结构,抗一个物种的抗体可能与其他物种发生交叉反应,一次有些二抗经过了动物或人类IgG吸附处理,以减少非特异性背景。例如,如果是小

服务器虚拟化的十大必须考虑因素

服务器虚拟化的十大必须考虑因素 1. 性能 为什么处理损耗如此重要?因为它影响应用程序的性能,并最终影响客户的满意程度。如果虚拟化基础架构的处理损耗较高,只能运行非产品级或不太重要的应用服务。由于产品不同,虚拟化解决方案的处理损耗从1%到60%。虚拟化应用程序的运行效率差异很大,有的能够做到接近原始物理环境下运行的效率,有的则低劣到用户难以接受的程度。同一虚拟化技术路线的不同产品性能也有很大差异,但通常来说,虚拟化硬件会造成较大的性能损耗,但操作系统虚拟化性能损耗极低,几乎可以忽略不计。 2. 管理工具 许多用户试用虚拟化是因为可以降低硬件成本,因为这些数据中心的硬件仅有15%~20%的利用率。虽然硬件和环境的成本本身已经相当可观,但管理成本中更大的部分仍然是来自于服务器的管理成本。因此对于虚拟化基础设施的管理而言,管理工具就更加重要,只有很好地进行资源的管理和监控才能真正做到有效利用虚拟服务器的资源。 每种虚拟化解决方案能提供的管理工具都很不相同。一些虚拟化解决方案几乎没有什么管理工具,而且使用非常受限制。某些特定的虚拟化解决方案提供很多优秀的工具集,并和产品放在一起以优惠价打包促销。但某些工具却非常贵,常常是按可选择的产品组件的价格进行销售。 3. 平台支持 虚拟化技术将虚拟服务器从其下的硬件中抽象出来,但这并不意味着虚拟基础结构可以支持任何硬件。需要特别注意的是,硬件虚拟化和并行虚拟化必须支持从CPU芯片到显卡等计算机的所有硬件。而操作系统虚拟化技术建立在标准的操作系统之上,因此支持操作系统支持的所有硬件,所以操作系统虚拟化产品部署过程更容易。

4. 迁移 虚拟化技术将虚拟服务器从硬件中抽象出来,这样做最大的好处是虚拟服务器可以在不同物理服务器中来回迁移。迁移能力允许将虚拟服务器克隆出来,或从一台物理服务器迁移到另外一台。 许多虚拟化解决方案拥有克隆或迁移能力,但他们在软件功能、限制和成本方面有相当大的差异。高端的零宕机解决方案迁移成本极高且需要SAN集中存储设备的支持。在做服务器迁移时,用户需要评估迁移的重要性,明确怎样迁移才能更适应企业的应用环境。 5. 资源管理 三类不同的虚拟化技术对服务器资源分配采用不同的处理方式。硬件虚拟化技术和并行虚拟化技术将虚拟出的硬件资源分配给不同的虚拟服务器使用。这两种技术在分配和更换硬件资源方面的灵活性有所不同。实际上这两种技术为虚拟服务器分配的是虚拟资源,会有很多的限制,比如可以用于分配的CPU和内存资源总是有限的。 操作系统虚拟化对资源的管理是非常灵活的,允许在不中断应用服务或虚拟服务器情况下实时更新资源。 6. 隔离和安全 对于隔离和安全问题,每种虚拟化技术的处理方式都不同。虚拟化解决方案最基本的组件就是分区。所有虚拟计算机必须完全隔离,这样进程、动态连接库及应用程序才不会影响同一台服务器的其他虚拟服务器上的应用。 相对于普通服务器,由于虚拟化技术改变了访问节点和不同的组件,所以不太可能对于虚拟服务器实施常规性攻击。同隔离一样,对于同一台物理服务器上的两个虚拟服务器来说,彼此之间的安全同样重要。

Westernblot一抗和二抗的选择讲解学习

W e s t e r n b l o t一抗和二抗的选择

精品文档 Westernblot一抗和二抗的选择 抗体分类:根据重链恒定区的血清学类型,可将抗体分为IgM,IgG,IgA,IgD,IgE 五类,它们的重链分别为mu, gamma, alpha, delta, epsilon链。在上述每一类别中,按重链构造上的变异又可分为几个亚类,例如人的IgG可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类。轻链分为两种类型,kappa链和lambda链,但每种抗体中只存在一种类型的轻 链。二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。 二,如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗 广义上是指专门和进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,**捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑:【一抗的种属来源】 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。**捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。【一抗的类别亚型】 二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下,可以选用抗相应物种IgG。**捷能为您提供通用的IgG(H+L)二抗,或者特异性只结合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha-Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。【二抗的种属来源】 一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的 收集于网络,如有侵权请联系管理员删除

服务器的选择评估报告

服务器的选择评估报告 ---by Raul-Qin 服务器的设计标准(RASUM标准): R:Reliability可靠性; A:Availability可用性; S:Scalability可扩展性; U:Usability易用性; M:Manageability可管理性 服务器的分类 目前服务器的分类按架构分类主要分为三种,分别是塔式服务器、机架式服务器和刀片服务器。 塔式服务器 外形跟普通的PC类似,扩展性强,费用低廉,不需要机柜;一般来说,入门级和工作组服务器都采用塔式服务器,因为只有一台主机,即使进行升级扩张也有个限度,所以在一些应用需求较高的企业中,单机服务器就无法满足要求了,需要多机协同工作,而塔式服务器个头太大,独立性太强,协同工作在空间占用和系统管理上都不方便,这也是塔式服务器的局限性 机架式服务器 机架服务器实际上是工业标准化下的产品,其外观按照统一标准来设计,配合机柜统一使用,以满足企业的服务器密集部署需求。机架服务器的主要作用是为节省空间,由于能够将多台服务器装到一个机柜上,不仅可以占用更小的空间,而且也便于统一管理。机架服务器的宽度为19英寸,高度以U为单位(1U=1.75英寸=44.45毫米),通常有1U,2U,3U,4U,

5U,7U几种标准的服务器。最常用的有1U 2U。 这种服务器的优点是占用空间小,而且便于统一管理,但由于内部空间限制,扩充性较受限制,例如1U的服务器大都只有1到2个PCI扩充槽。 这种服务器多用于服务器数量较多的大型企业使用,也有不少企业采用这种类型的服务器,但将服务器交付给专门的服务器托管机构来托管,尤其是目前很多网站的服务器都采用这种方式。 这种服务器由于在扩展性和散热问题上受到限制,因而单机性能比较有限,应用范围也受到一定限制,往往只专注于在某方面的应用,如远程存储和网络服务等。 刀片服务器 刀片服务器是指在标准高度的机架式机箱内可插装多个卡式的服务器单元,是一种实现HAHD(HighAvaiMabiMityHighDensity,高可用高密度)的低成本服务器平台。 其主要结构为一大型主体机箱,内部可插上许多“刀片”,其中每一块刀片实际上就是一块系统母板,类似于一个个独立的服务器,它们可以通过本地硬盘启动自己的操作系统。 由于支持热插拔操作,所以刀片式服务器比较容易维护。 刀片服务器比机架式服务器更节省空间,同时,散热问题也更突出,往往要在机箱内装上大型强力风扇来散热。此型服务器虽然空间较节省,但是其机柜与刀片价格都不低,一般应用于大型的数据中心或者需要大规模计算的领域,如银行电信金融行业以及互联网数据中心等。 比较表格 机架式中等小一般一般良好企业应用 刀片昂贵小一般优优大型数据中心或金融机 构 *由于价格跟服务器的价格跟配置相关,表格中所给的服务器价格只是各种服务器的相对价格。 服务器的用途

WB检测抗体如何选择(下)

WB检测抗体如何选择 WB检测之二抗 二抗选择 二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。 二抗选择要考虑的问题有: ①对单抗类一抗,二抗需与一抗的类别或亚类相匹配(多抗类一抗主要是IgG类免疫球蛋白故相应二抗就是抗 IgGF(ab’)2二抗,避免各种Ig保守结构域导致的交叉反应。然而各种Ig仍具有保守的轻链结构域,因此还是有一定程度的交叉反应。 WB检测之内参抗体 Western Blot检测方法不仅能检测靶蛋白存在与否,还能比较不同条件下或者不同组织中靶蛋白的相对表达量,可作为蛋白表达水平最直接的证据。在WB实验中有众多不确定因素影响靶蛋白表达水平的测定,如方法学本身性质、操作误差等。为准确衡量靶蛋白表达水平,需要精确一致的上样量,使用内参的意义即是保证上样量的一致。内参即内部参照(Internal Control),对哺乳动物细胞一般指管家基因的表达蛋白(Housekeeping Proteins)。此类蛋白在各组织和细胞中的表达相对恒定,可作为检测蛋白表达水平变化的参照物。当内参条带亮度基本一致时,基本可以确定上样量是一致的,通常采用比较靶蛋白和内参蛋白条带亮度比值来进行相对定量。 WB实验中涉及到的蛋白-抗体结合是一个复杂的活性生物大分子间的相互作用,众多因素都会影响实验的结果。例如时间、温度、浓度、离子强度等,在实验设计时就需要有严谨的对照方案,通过对照就容易判断问题所在,严谨的WB实验中需要设立蛋白分子量标准、空白载体对照、未诱导对照、已知量标准物正对照和内参。 内参使用方法 1.标记内参:酶标的内参抗体可避免二抗结合总蛋白中某些免疫球蛋白产生的杂带,使用时只需在二抗孵育时加入酶标内参抗体,按照正常操作即可。 2.普通内参:当靶蛋白分子量与所选内参分子量相差不大时,可先对靶蛋白进行显色检测,然后用Strip缓冲液洗掉膜上抗体,重新对内参蛋白进行显色检测。当靶蛋白分子量与所选内参分子量相差较明显时,可对转膜预染,根据蛋白质分子量将膜剪为两部分并分开进行靶蛋白和内参蛋白的显色检测。 内参抗体选择 常用的蛋白内参有GAPDH和β-actin或β-tubulin,内参的选择原则是选择与靶蛋白分子量相差5KD以上的内参,对不同的样本则需要根据实际情况进行选择。 1.根据物种选择 哺乳动物来源的组织或细胞样本通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na+/K+-ATPase等。植物来源的样本常选择plant actin、Rubisco等。对于其他研究稀少的物种可参考报导的文献进行选择。以GAPDH为例,抗GAPDH单抗(ABGENT,clone 6C5)能够与非洲蟾蜍、猴、猪、羊、狗、猫、鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应,但不能与酵母GAPDH反应。 2.根据组织类型选择

国内怎么选择合适的服务器和配置

一.选择国内的物理机,可以先确定线路,因为国内运营商的关系,因为各个之间互访速度比较慢,在选择这个的时候,一般是根据你自身网站所面向的用户来确定的,如果你的客户以电信或者联通为主,你就可以选择单线路;如果二者都有,选择双线是个不错的选择;如果用户群体比较广泛,那么多线很适合。目前国内服务商关于不同线路产品的推出,多款产品价格其实差不多,目前市面上单、多线的价格月付其实都一样,就是年付价格会有一点差异。 二.现在网络可以说是一个让人又爱又恨的地方了,在这之中,虽然会让我们享受到更加便利的服务,可是这里也充斥着各种的危险,各种网络攻击让人防不胜防。在选择服务器的时候,我们要看自身的网站是不是有攻击,这样可以确定是否需要选择带防御的机器。 如果你的网站没有攻击的话,不带防御的就可以了,力度小的话,可以选择防御不大的机房,如果攻击比较大的话,那么高防机器就是你的选择了。要是总是受到相关的攻击,但你却没有选择带防御的,那么你的服务器就会很不稳定,你的网站也会经常崩溃,这对于一个站点来说打击是很大的,用户的大量流失是必然的。

三.接下来就是配置了,服务器的主要包括CPU、内存、硬盘、带宽等。在选择配置的时候我们不能一味追求价格低去选择低配的机器,也不能一味的觉得高配就是好的,毕竟如果你用不了这么高的,多余的完全就是浪费了。选择配置主要是根据网站情况来选择,看流量数据大小适合什么样的需求。 1、CPU 新建的网站,应用少,访问量也少,这个就可以选择配置低点的,这样可以节省一部分资金,等后期网站业务发展起来,访问流量增加再升级更高的。一台机器上如果需要同时运行多种应用服务,可以选择至强系列或者双至强CPU。 2、内存 它的大小的选择主要取决于服务器的用户数量,还有运行的应用软件大小。小的话2G到4G的就足够了,大的话,选择8G或者16G 甚至更高,保证网站能能够正常运行。

如何选择二抗

如何选择二抗 抗体简介 抗体:是高等动物在抗原物质的刺激下由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。抗体通常存在于血清合淋巴(组织液)中。 单克隆抗体及多克隆抗体:由单一克隆的细胞(通常是单一克隆的杂交瘤细胞)所产生的识别某一抗原表位的单一抗体;多克隆抗体是由多种细胞分别接触相应抗原而产生的多种抗体的总和,多克隆抗体抗原识别抗原的多个表位。 抗体结构:抗体是由四条肽链构成的“Y”形对称的分子,包括两条重链和两条轻链。在“Y”的尖端部位的氨基酸顺序在不同的抗体分子中差别很大,是负责与抗原进行特异性结合的区域,称为可变区,余下的区域则称为恒定区。 抗体分类 抗体分类:根据重链恒定区的血清学类型,可将抗体分为IgM,IgG,IgA,IgD,IgE五类,它们的重链分别为mu, gamma, alpha, delta, epsilon链。在上述每一类别中,按重链构造上的变异又可分为几个亚类,例如人的IgG可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类。 轻链分为两种类型,kappa链和lambda链,但每种抗体中只存在一种类型的轻链。 二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。 二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。 抗体特异性产品 整个分子(H+L) 特 Affinity Purified Anti-BOVINE IgG (H&L) (GOAT) 异性抗体 Peroxidase Conjugated Anti-BOVINE IgG (H&L) (GOAT) Fluorescein Conjugated Affinity Purified Anti-BOVINE IgG (H&L) (GOAT) Fab 特异性抗体Peroxidase Conjugated Anti--HORSE IgG F(ab)2 (GOAT)

桩基资料(各类表格)

关于桩基工程资料发放的通知
各桩基工程施工单位: 为了提高温州市桩基工程资料管理水平,有利于质量检查与工程档案管理,
现根据相应设计、施工、验收规范、标准,并结合温州市以往施工经验,推荐 一套桩基工程资料标准形式,经温州市质量监督站、温州市城建档案馆研究同 意,2008 年 1 月 1 日开始将桩基工程资料进行规范、统一实施。
附:桩基工程资料标准形式
代号说明:ZKZ-A 代表钻孔灌注桩测量、定位及成孔等验收施工记录 ZKZ-B 代表钻孔灌注桩钢筋笼、沉渣等隐蔽工程验收、施工记录 ZKZ-C 代表钻孔灌注桩混凝土灌注及注浆等验收、施工记录 ZKZ-D 代表钻孔灌注桩质量验收记录 YGZ-A 代表预应力管桩施工记录 YGZ-B 代表预应力管桩隐蔽工程检查验收记录 ZCZ-A 代表振动沉管灌注桩施工记录 RWZ-A 代表人工挖孔桩施工记录 SJZ-A 代表深层水泥搅拌桩施工记录
要求:混凝土灌注桩检验批质量验收记录(GB50202-2002)表 5.6.4-2 及混凝土灌注桩钢筋笼 检验批质量验收记录(GB50202-2002)表 5.6.4-1 中检验批的定义能否不以根为单位, 而以每次验收批中同一施工条件,同一设计要求的桩为验收批。
温州市建筑业协会基础工程分会 二○○七年十月十九日

钻孔灌注桩资料目录
序号
资料名称
1 桩位轴线控制网
2 桩位测量定位记录
3 试打桩记录
4 静压式预应力管桩(预制桩)施工记录
5 锤击式预应力管桩(预制桩)施工记录
6 预应力管桩隐蔽工程检查验收表
7 振动沉管灌注桩施工记录
8 人工挖孔桩施工记录
9 深层水泥搅拌桩施工记录
10 钻孔灌注桩开孔申请表
11 钻孔灌注桩成孔施工记录
12 隐蔽工程(钢筋笼)检查验收表
13 钻孔灌注桩灌注前隐蔽工程验收记录
14 钻孔灌注桩水下混凝土灌注记录
15 砼施工日记
16 钻孔灌注桩桩底注浆记录
17 钻孔灌注桩桩位偏差记录
18 砼强度汇总评定表
19 混凝土灌注桩钢筋笼检验批质量验收记录
20 混凝土灌注桩检验批质量验收记录
21 分部(子分部)工程验收记录
22 分项工程质量验收表
23 桩基工程验收报告
编号 ZKZ-A-01 ZKZ-A-02 ZKZ-A-03 YGZ-A-05 YGZ-A-04 YGZ-B-01 ZCZ-A-04 RWZ-A-04 SJZ-A-04 ZKZ-A-04 ZKZ-A-05 ZKZ-B-01 ZKZ-B-02 ZKZ-C-01 ZKZ-C-02 ZKZ-C-03 ZKZ-D-01
使用说明

中小型企业选择服务器六大原则

中小企业在选购时,要注意三个方面:价格与成本、产品的扩展与业务的扩展、售后服务。首先,由于中小企业对信息化的投入有限,因此需要注意的是产品价格低并不代表总拥有成本低,总拥有成本还包括后续的维护成本、升级成本等。其次,中小企业最大的特点就是业务增长迅速,他们需要产品能随着企业业务的发展而升级,一方面满足业务的需要,另一方面也保护原有的投资。最后,服务是购买任何产品都要考虑的,但中小企业尤其看重售后服务,因为由于自身技术水平和人力所限,当产品出现故障后,他们更加依赖厂商的售后服务。具体地说,中小企业选择有如下六大原则。 稳定可靠原则 为了保证局域网能正常运转,中小型企业选择的服务器首先要确保稳定。一个性能不稳定的服务器,即使技术再先进,也不能运行企业的应用。特别是运行企业重要业务的服务器或存放核心信息的数据库服务器,一旦出现宕机或重启,就可能造成信息的丢失或者整个系统的瘫痪,甚至给企业造成难以估计的损失。 合适够用原则 如果光考虑稳定可靠,就会使服务器采购走向追求性能,求高求好的误区,因此,合适够用原则是第二个要考虑的因素。对于中小企业而言,最重要的是从当前实际情况以及将来的扩展出发,有针对性地选择满足当前的应用需要并适当超前,投入又不太高的解决方案。另外,对于那些现有的,已经无法满足需求的服务器,可以将它改作为其它性能要

求较低的服务器,如DNS、FTP服务器等,或者进行适当扩充,采用集群的方式提升性能,将来再为新的网络需求购置新型服务器。 为了减少升级服务器带来的额外开销和对业务的影响,服务器应当具有较高的可扩展性,可以及时调整配置来适应企业的发展。服务器的可扩展性主要表现在几个方面,如:在机架上要有为硬盘和电源的增加留有充分余地,在主机板上的插槽不但种类齐全,而且有一定数量,以便让企业用户可以自由地对配件进行增加,以保证运行的稳定性,同时也可提升系统配置和增加功能。 易于管理原则 所谓易于操作和管理主要是指用相应的技术来简化管理以降低维护费用成本,一般通过硬件与软件两方面来达到这个目标。硬件方面,一般服务器主板机箱、控制面板以及电源等零件上都有相应的智能芯片来监测。这些芯片监控着其它硬件的运行状态并做出日志文件,发生故障时还能做出采取相应的处理。而软件则是通过与硬件管理芯片的协作将其人性化地提供给管理员。如通过网络管理软件,用户可以在自己的电脑上监控制服务器的故障并及时处理。对于那些没有配备网络管理人员的中小企业,尤其要注意选择一台使用非常简单方便的服务器。

一抗的选择

随着生命科学的发展,围绕蛋白进行的研究越来越多,抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。面临着纷呈复杂的抗体试剂市场,如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。 当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候,如何选择适合我们实验需要的抗体,并恰当保存使用,是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多,品牌众多,技术参数不一,价格和质量更是相差甚大,如何购买到高质量价格合适的抗体,并准确地做出我们想要的结果,其中有很多细节需要注意。 一、抗体选择总体原则 1. 关于特异性的选择 特异性的选择主要需要考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。 (1)蛋白特异性 针对需要检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达,则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式,特殊表型的蛋白需要进行序列比对,并结合抗体免疫原序列,查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点,不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在,不宜一概而论。

(2)种属特异性 同种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的,根据蛋白的同源性情况与其他种属发生交叉反应。需要参照说明书注明的可反应种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,可以通过蛋白的序列比对,选择同源序列免疫的抗体,不过一般这种情况生产商不会受理其关于质量的申诉,如果可以申请到免费的抗体样品,则利于抗体选择。 (3)实验方法特异性 目前使用抗体的实验方法有很多,不同的使用方法过程中,因为对蛋白样品的处理方式不一样,蛋白的含量有差异,对抗体的识别表位和效价要求都是不一样的。具体的根据说明书注明的产品应用方法进行选择。但是生产商一般不会将每个抗体都进行各种实验的检测,目前检测比较多的只是WB、IHC、IF等,如果针对具体的实验方法没有找到合适的抗体的,可以结合蛋白序列分析和抗体的抗原信息,选择尽可能有效果的抗体。同样,申请到免费的抗体样品是个很好的途径。 (4)标记物的特异性 一般基于实验操作的实验方法不会使用带有标记的一抗,比如WB、IHC 等,都是通过二抗类的试剂标记达到结果呈现的目的。但是基于仪器分析的一些实验,可能就会使用到直接标记的一抗,比如流式实验。那么需要了解到自己将要使用的仪器能检测到的荧光范围,针对不通的参数

Jackson ImmunoResearch 公司二抗选用指南

Jackson ImmunoResearch 公司二抗选用指南 (此部分内容来源于Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc网站,如有疑问,请参考原网站) 亲和层析法纯化的二抗 用亲和层析法纯化的抗体是指,利用耦联到琼脂糖凝胶上的 抗原将抗血清中的抗体亲和层析下来。我们采用一种特有的 连续的洗脱过程将抗体从固态抗原上分离出来。我们提供的 未标记的亲和层析法纯化的抗体是不含有稳定剂和防腐剂的 无菌液体。耦联标记物的抗体是冻干粉,里面含有稳定剂和 防腐剂,但是过氧化物酶标记的抗体里面不含防腐剂。 (下面内容中的页码指的是Jackson 2006年原版目录中的页 码) 亲和层析纯化抗体的选择和定位 第一步:选择Whole IgG(8-17页)、F(ab’)2片段(18-22页),或者Fab片段(23-25)抗体。 我们提供三种亲和纯化的抗体:Whole IgG,F(ab’)2片段,Fab片段。 Whole IgG(8-17页)抗体是从抗血清中分离出来的完整的分子。这些抗体有一个Fc部分和两个与抗原结合的Fab部分,因此是二价的。Whole IgG抗体适用于多数情况(见F(ab’)2片段、Fab片段的特例),也是性价比最高的。 F(ab’)2片段(18-22页)抗体是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分,剩下两个靠二硫键连接的结合抗原的Fab部分(依然是二价的)。这些抗体用在特定的情况中,例如避免抗体与Protain A 或G 结合,或者与有Fc受体的活细胞结合。但是,如果一抗是whole IgG,不管二抗是哪种形式都可能出现结合Fc受体。这时,为了阻止抗体结合到Fc受体上,可以在4度将细胞预培养于含有叠氮钠和二抗来源物种正常血清的缓冲液中。

数据备份重要性及服务器必要性

为什么要数据备份 防止数据丢失的第一道防线是实行数据备份,备份就像锻炼身体,虽然重要,但却常常被忽视,数据备份观念在一些企业中,甚至是在网络管理员中仍然得不到足够的重视。当网站更新或添加内容时,如果实行了数据备份,那么即使出现操作失误,把有用的资讯或者重要的内容删掉了,那么也不至于让之前花了很长时间辛辛苦苦建立起来的数据付之东流,只要及时地通过系统备份和恢复方案就可以实现数据的安全性和可靠性了;又或者是企业网站发生灾难,原始数据丢失或遭到破坏,利用备份数据就可以把原始数据恢复出来,使系统能够继续正常工作。可见,数据备份是何等的重要,数据备份是为了以后能够顺利地将被破坏了或丢失了的数据库安全地恢复的基础性工作,可以这么说,没有数据库的备份,就没有数据库的恢复,企业应当把数据备份和恢复的工作列为一项不可忽视的系统工作,为其网站选择相应的备份设备和技术,进行经济可靠的数据备份,从而避免可能发生的重大损失。 选择合适的数据备份方法 备份是一种实现数据安全的策略,是对原始数据完全一致的复制,根据备份的对象来分,企业数据备份大体上可以分为文件备份和数据库备份,文件备份的对象是电子文档,电子报表、图片与影音文件等;数据库备份的对象是数据库库文件、数据库日志等等。在实际应用中,如何选择合适的备份方法即规划备份策略是一项非常重要的工作,而无论是何种数据备份都有许多方法,企业应该针对不同的情况,采取相应的备份策略方法。 数据备份有三种基本的形式,分别是:标准备份,增量备份,差量备份;一般地,数据的大小及其数据的修改频率决定了实现数据库备份的方式: 1、完全/标准数据备份 一个“标准”或“完全”备份将归档所有文件,包括系统文件,应用文件,用户文件等等,然后重置或清空所有存档位。这种方法对数据进行了很好的保护,非常耗时,但从完全备份中恢复数据的过程比其它备份形式要简单,要快,因为全部数据都保存在一个磁带或多个磁带中。

桩基础的几种类型及施工方法

灌注桩 一、钻孔灌注桩 钻孔灌注桩的施工,因其所选护壁形成的不同,有泥浆护壁方式法和全套管施工法两种 泥浆护壁施工法 平整场地→泥浆制备→埋设护筒→铺设工作平台→安装钻机并定位(钻机位置的偏差不大于2cm)→钻进成孔→清孔并检查成孔质量→下放钢筋笼→灌注水下混凝土→拔出护筒→检查质量。 泥浆:钻孔泥浆由水、粘土(膨润土)和添加剂组成。具有浮悬钻渣、冷却钻头、润滑钻具, 增大静水压力,并在孔壁形成泥皮,隔断孔内外渗流,防止坍孔的作用。泥浆太稀,排渣能力小、护壁效果差;泥浆太稠会削弱钻头冲击功能,降低钻进速度。 清孔:在钻孔达到设计要求深度后,应对孔深、孔位、孔形、孔径等进行检查。在终孔检 查完全符合设计要求时,应立即进行孔底清理,避免隔时过长以致泥浆沉淀,引起钻孔坍塌。对于摩擦桩当孔壁容易坍塌时,要求在灌注水下混凝土前沉渣厚度不大于30cm;当孔壁不易坍塌时,不大于20cm。对于柱桩,要求在射水或射风前,沉渣厚度不大于5cm。清孔方法是使用的钻机不同而灵活应用。通常可采用正循环旋转钻机、反循环旋转机真空吸泥机以及抽渣筒等清孔。其中用吸泥机清孔,所需设备不多,操作方便,清孔也较彻底,但在不稳定土层中应慎重使用。其原理就是用压缩机产生的高压空气吹入吸泥机管道内将泥渣吹出。 (1)塌孔 预防措施:根据不同地层,控制使用好泥浆指标。在回填土、松软层及流砂层钻进时,严格控制速度。地下水位过高,应升高护筒,加大水头。地下障碍物处理时,一定要将残留的砼块处理清除。孔壁坍塌严重时,应探明坍塌位置,用砂和粘土混合回填至坍塌孔段以上1—2m处,捣实后重新钻进。 (2)缩径 预防措施:选用带保径装置钻头,钻头直径应满足成孔直径要求,并应经常检查,及时修复。易缩径孔段钻进时,可适当提高泥浆的粘度。对易缩径部位也可采用上下反复扫孔的方法来扩大孔径。

一抗的选择

一抗得选择 检测任何目得靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体得选择范围选中合适得抗体,需要考虑如下几种因素: 分析试验应用得类型l 样本蛋白得结构性质l 样本得种属l 抗体宿主得种类l 抗体得标记与检测l 1、分析试验应用得类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WBIHCICC ELASA分析等,如果抗体说明书没有提及得应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅就是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。 2、样本蛋白得结构性质 了解样本蛋白得结构性质有助于选择最合适得抗体,至少两方面因素需要考虑 待测样本蛋白得结构域:抗体就是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中得免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原得描述,如果打算检测得就是蛋白片断或一种特殊得同型物或蛋白全长得某一区域,则必须选择用含此片段域得免疫原制备出得抗体.如果打算用FACS流式检测活细胞得表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白得胞外域来免疫制备得抗体。l 样本得提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原与变性得、表位已暴露不受二级四级结构阻碍得蛋白样本,另一方面,某些抗体仅识别天然折叠状态得蛋白。当选择免疫组化得抗体时,应注意某些抗体只识别未固定得冷冻得组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚得甲醛固定石蜡包埋得组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来l 3、样本得物种 应选择物种相同或有交叉反应得抗体,抗体可能与不同物种得同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本得种类未列入抗体说明书上得交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种得蛋白,而只就是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对得方法来预测交叉反应,可应用Expasy 与NCBI BLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。 4、一抗宿主物种得选择 一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物得一抗时,一抗宿主动物得物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种得一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源得一抗,最好选兔源得一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)得抗兔IgG。如果选择有偶联物得一抗则不适用上述情况,除免疫组化外得其它对不含内源性免疫球蛋白样本得检测方法,则抗体宿主物种得影响不大,如对不含IgG得细胞裂解物样本得western blott ing检测,尽管如此,含有血清得组织裂解物与组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot检测中则结合出现IgG分子50 and 25kDa得重链与轻链条带. 如何选择二抗-—根据一抗种属及类型选择合适得二抗 广义上就是指专门与进行特异性反应与结合得抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同得二抗,艾美捷能为您得科研工作提供最适合与最全面得二抗产品。检测任何目得靶

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