分子生物学和基因工程复习题

一、名词解释

1、分子生物学

2、基因工程

3、DNA的变性与复性

4、细胞学说

5、遗传密码的简并性

6、DNA半保留复制、半不连续复制

7、SD序列

8、开放阅读框（ORF）

9、多顺反子

10、蓝白斑筛选

11、中心法则

12、限制修饰系统

13、断裂基因

14、单链结合蛋白

15、核酶

16、密码子家族

17、TA克隆

18、PCR

19、SNP

20、操纵子学说

21、DNA重组技术

22、减色效应-增色效应

23、可变剪接

24、反转录

25、同尾酶

26、加帽反应

27、蓝白斑筛选

28、表观基因组学

29、DNA的溶解温度

30、DNA的大C值

31、重叠基因

32、引物酶

33、逆转录

34、限制性内切酶

35、载体的选择标记

36、DNA甲基化

37、端粒

38、端粒酶

39、前导链

40、启动子

41、反式作用因子

42、同义密码子

43、多克隆位点（MCS）

44、基因组计划

45、C值悖论

46、顺式作用元件

47、胸腺嘧啶二聚体

48、寄主的限制修饰现象

49、拓扑异构酶

50、DNA的溶解

51、拓扑异构体

52、间隔基因

53、假基因

54、同源异型蛋白

55、翻译

56、多重PCR

57、抗终止作用

58、SD序列

59、空载tRNA

60、cDNA RACE

61、分子杂交

62、cDNA文库

63、载体

64、RT-PCR

65、反义RNA

66、延伸tRNA

67、起始tRNA

68、探针

69、反式剪接

70、增强子

71、动物基因工程

72、基因组

73、限制性内切酶

74、单顺反子

75、密码子

76、转录

77、RNA干扰

78、中心法则

79、回环模型

80、TATA box

81、前导链

82、目的基因

83、RFLP

84、RACE

二、判断

1、大肠杆菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。( )

2、DNA半保留复制时，后随链的总体延伸方向与先导链的延伸方向相反。( )

3、原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。（）

4、以一条亲代DNA(3’→ 5’)为模板时，子代链合成方向5’→ 3’，以另一条亲代DNA链

5’→ 3’为模板时，子代链合成方向3’→ 5’。（）

5、RNA的生物合成不需要引物。（）

6、大肠杆菌RNA聚合酶全酶由4个亚基（α2ββ’）组成。( )

7、大肠杆菌在多种碳源同时存在的条件下，优先利用乳糖。 ( )

8、在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。（）

9、逆转录同转录类似，二者均不需要引物。（）

10、真核生物染色体核心组蛋白的乙酰化、组蛋白H1的磷酸化，都会使基因得以失活。（）

11、在原核细胞中，起始密码子AUG可以在mRNA上的任何位置，但一个mRNA上只有一个起

始位点。( )

12、蛋白质生物合成过程中，tRNA在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子用来识别mRNA上的密码子。( )

13、表观遗传效应是不可遗传的。( )

14、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在有葡萄糖及cAMP较高时。( )

15、DNA甲基化永久关闭了某些基因的活性，这些基因在去甲基化后，仍不能表达。

（）

16、RNA聚合酶催化的反应无需引物，也无校对功能。( )

17、基因是存在于所有生命体中的最小遗传单位

18、人类基因组中大部分DNA不编码蛋白质

19、蛋白质生物合成过程中，tRNA在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子用来识别

mRNA上的密码子。 ( )

20、因为AUG是蛋白质合成的起始密码子，所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的N末端. （）

21、真核基因的外显子是成熟的mRNA或蛋白质中的存在序列，内含子是初级转录产物hnRNA加工成熟时被切除的序列。外显子是有功能的，内含子是无功能的。（）

22、一般认为，RNA聚合酶并不直接识别启动子区的碱基对本身，而是通过氢键互补的方

式加以识别。（）

23、微小RNA (microRNA) 是通过引起DNA甲基化来调节基因表达的。（）

24、鸟枪法是一种检测单核苷酸多态性(SNP)的常用方法。

25、三种RNA聚合酶发挥功能时都需要的同一种辅助因子是TBP。（）

26、摇摆碱基位于密码子的第一位和反密码子的第三位。（）

27、外显子的序列多保守，而内含子的序列变化较大。（）

28、核糖体的主要作用是参与蛋白质的修饰。（）

29、真核生物与原核生物翻译终止的区别在于不需要释放因子来识别终止密码。（）

30、核糖体小亚基最基本的功能是连接mRNA与tRNA，大亚基则催化肽键的形成。（）

31、真核生物的各种RNA都必须经过剪切、修饰才能成熟。（）

32、DNA复制的半不连续模型是由复制时两条DNA单链分别复制得来的。（）

33、细胞中σ因子的需要量要比RNA聚合酶中其他亚单位的需要量多。（）

34、增强子也具有启动子的功能。（）

35、人类基因组计划完成后，人们可完全预测出人类疾病会在何时发生。（）

36、人类基因组中大部分DNA不编码蛋白质（）

37、锌指（Zn finger）是DNA结合结构域的一种结构模式。（）

38、转录时，RNA聚合酶的核心酶沿模板DNA向其5’端移动。( )

39、断裂基因和间隔基因是同一个的遗传单位的表述名词。( )

40、真核生物中所有的高度重复序列统称为卫星DNA。（）

三、填空

1、大肠杆菌RNA聚合酶为多亚基酶，亚基组成，称为酶，其中

亚基组成为核心酶，功能是，σ亚基的功能是

。

2、 DNA生物合成的方向是，冈崎片段的方向是。

3、真核生物RNA聚合酶共有三种、、，

它们分别催化、、的生物合成。

4、DNA的英文全称，RNA的英文全称。

5、氢键的配对原则与配对，与配对。

6、真核生物mRNA转录后的加工包括、和。

7、在密码子表中，三个终止密码子分别是、和。

8、基因工程中蓝白斑筛选利用为诱导物，为底物，产生的色斑点为带有插入片段的菌株。

9、Southern杂交检测的是，Northern杂交检测的是，Western杂交检

测的是。

10、在DNA复制时，RNA引物为DNA新链的合成提供了，RNA引物由合成。

11、PCR的基本反应过程包括：、、三个阶段。

12、DNA复制中，链的合成是的，合成的方向和复制叉移动方向相同；链的合成是的，合成的方向与复制叉方向相反。

13、核酸的组成、、。

14、大肠杆菌RNA聚合酶的核心酶由、和两个组成。

15、RNA聚合酶沿DNA模板方向移动，RNA合成方向。

16、蛋白质的合成以为原料，以为模板，以为运载工具，以为合成场所。

17、基因工程中蓝白斑筛选利用为诱导物，为底物产生蓝色。

18、限制性内切酶的主要类型包括、、，在基因工程中常用的是限制性内切酶。

19、在DNA复制过程中，催化双莲解开的酶是。

20、DNA一级结构5’端带有，3’端带有。

21、在DNA复制过程中，改变DNA螺旋程度的酶是。

22、DNA聚合酶以为底物，需要激活，链的延伸方向是。

23、原核生物的启动子由和组成。

24、蛋白质合成中的氨基酸搬运，是由----------------------酶催化生成--------------------。

25、依赖DNA的转录调节因子通常含----------------结构域和----------------结构域。

26、对α鹅膏蕈碱最为敏感的真核生物RNA聚合酶是，最不敏感的是。

27、在色氨酸操纵元中存在和两个控制系统。

28、一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，的选择与改造，

的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。

29、YAC代表，其组成三要素是、、。

30、1 OD260 DNA= ug/mL，1 OD260 RNA= ug/mL。

31、目前DNA序列的手工测定或自动化测定所基于的技术原理为。

32、限制性内切酶的主要类型包括、、，在基因工程中常用的是限制性内切酶。

四、问答题

1、乳糖操纵子的结构?它是如何进行调控的?

2、简述DNA复制过程中后随链是怎样延伸的？

3、分别说出5种以上RNA的功能？

4、什么是卫星DNA？组成特点是什么？举一例说明其应用。

5、真核生物基因表达调控有哪些方面?有哪些检测基因表达的方法?

6、端粒的结构特点及其生物学功能。

7、简述重组DNA操作的基本程序。

8、简述PCR及其反应体系和参数。

9、什么是RNA干扰？在RNA干扰中将长的双链RNA切割成小片段的酶是什么？简要介绍该技术的优点及用途。

10、设有一个基因的5和3端部分序列如下：ACTGATGCGAGATGCAATGAC………….CTAGTTGAGACCTAGTTC,请设计一对引物，写出其序列，使其扩增产物的5`端加上KpnI（GGTACC），3`端加上XhoI（CTCGAG）位点，以便用于将其插入到某质粒的对应位点。

11、简述构建的载体是否正确常用的方法。

12、什么是核酶？举例两例说明。

13、亲子鉴定的原理和方法。

14、列举基因工程常用的工具酶

15、简述tRNA二级结构的5个臂及其作用

16、简述参与DNA复制起始和引发的蛋白质

17、简述真核、原核生物基因组的差异。

18、简述DNA双螺旋结构的主要特征

19、简述用于高等哺乳动物细胞基因转移的方法

20、何谓限制性核酸内切酶？写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。

21、简述遗传密码的特点

22、简述DNA聚合酶的共同特点，什么是反义RNA？

23、真核生物中反义RNA调节基因表达的机理是什么？

24、简述为实现外源基因在原核生物中高效表达应考虑的因素。

25、简述Sanger酶学（双脱氧终止）测序法的原理

26、简述遗传密码的特点

27、简述真核生物断裂基因的结构，并说明其表达的过程。

28、简述原核生物启动子的序列特征

29、简述原核生物与真核生物mRNA的主要差别。

30、用连续的（CCA）n核苷酸序列合成一段mRNA，放在试管内加入胞浆提取液（含翻译所需的所有组分）及20种氨基酸。反应结果得到由组氨酸、脯氨酸、苏氨酸组成的肽。已知组氨酸和苏氨酸的遗传密码是CAC、ACC，你能否判断出脯氨酸的密码？

31、拓扑异构酶有何生物学功能

32、简述分子生物学发展过程中证明RNA是遗传物质的实验证明

33、简述为什么需要RNA引物来引发复制

34、简述分子生物学遵循的三大原则。

35、简述真核生物基因表达调控的过程。

36、简述DNA一级结构的特点。

37、简述影响DNA分子热变性Tm值的主要因素。

38、简述参与DNA复制和引发的蛋白质及其作用。

39、简述基因工程操作的基本过程。

40、简述植物转基因技术的基本路线。

41、简述真核生物基因表达调控的环节。

42、简述基因工程创立的关键技术。

43、简述参与DNA复制和引发的蛋白质及其作用。

44、简述真核生物mRNA的转录终止过程。

45、简述大肠杆菌表达外源基因的优势。

46、简述RT-PCR的原理。

47、简述衰减子对基因表达的调控。

48、简述RNA合成的特点

49、简述原核生物启动子的序列特征。

50、简述微卫星重复序列及其应用。

51、简述基因组文库构建的一般步骤。

52、简述PCR技术的基本原理。

53、简述基因工程的酶学基础，最少列举5种常用的酶。

54、简述基因表达载体的构建过程。

55、简述基因工程中目的基因的获取方法。

56、简述cDNA文库构建的一般步骤。

57、什么是RNAi，简述其作用。

58、简述蛋白质的生物合成过程。

59、简述原核生物内源性转录终止的序列特征（不依赖于ρ因子的转录终止）。

60、简述将目的基因导入植物细胞的方法。

61、简述什么是转录因子？以RNA聚合酶II的转录说明转录因子的作用。

62、简述在蛋白质生物合成中各种RNA的作用。

63、简述简述用于筛选和鉴定阳性重组子的方法。

1、论述基因工程基本操作程序（10分）

2、阐述原核生物转录终止的两种主要机制是什么？（10分）

3、假设你需要将一段 cDNA 克隆到表达载体中并转化到大肠杆菌中。cDNA 的两端和载体

上均有 BamHI 的酶切位点，你需要用 BamHI 切割 cDNA 和载体然后将它们连接在一起。下面是实验方法要求的具体步骤：

a.用 BamHI 处理载体DNA，然后用碱性磷酸酶去除5′端的磷酸基；

b. b. 用BamHI处理cDNA，然后与步骤a中得到的载体DNA混合，加入DNA连接

酶，在适当的条件下使 cDNA 与载体连接；

c. 将步骤b的产物转入大肠杆菌感受态细胞中，培养后均匀涂在含有抗生素的琼脂

培养皿上。因为表达载体中含有抗性基因，能表达抵制抗生素的酶，所以只有含

有载体的大肠杆菌才可以在含有抗生素的培养皿上生长，而未被转化的细菌则因

受到抗生素的抑制而死掉。你还参照实验手册做了下面四组对照：对照一、在含有抗生素的培养皿上面涂布未被转化的（即不含有载体的）大肠杆菌感受态细胞（cells alone）。

对照二、用未被酶切的载体直接转化大肠杆菌感受态细胞，将产物涂布在含有抗生素的培养皿上面（vector alone）。

对照三、用 BamHI 酶切载体 DNA 后，不用碱性磷酸酶处理，不需要 cDNA，直接加入 DNA连接酶，然后转化、涂板(Omit phosphatase, omit cDNA)。

对照四、除使用碱性磷酸酶外，其它与对照三相同 (Omit cDNA)。

你一共做了三次实验，在第一次中所有的平板中都长出很多细菌。在第二

次实验中所有的平板中都没有长细菌。在第三次实验中你得到了较好的结

果，转化成功，具体克隆数见下表：

请回答下列问题：

A. 解释第一次实验失败的原因，并说明对照一的目的是什么；

B. 解释第二次实验失败的原因，并说明对照二的目的是什么；

C. 对照三和对照四的目的是什么？为什么实验手册上建议用碱性磷酸酶处理载体？

4、论述核酸是遗传物质的证据

5、论述DNA半保留复制的实验证据

6、论述E.coli和真核表达体系各自的优、缺点。

7、论述Sorthern blotting Western blotting Northern blotting 的实验目的及主要实验步骤

8、论述大肠杆菌乳糖操纵子的调控机制。

9、说明真核生物断裂基因的结构，并论述其转录表达的过程及调控。

10、如何利用基因工程方法在细菌体内表达一段外源DNA序列？论述其操作程序

11、论述原核生物和真核生物基因表达调控的差异。

12、论述论述PCR反应的原理、过程，体系及应用。

13、论述基因工程中目的基因的检测与鉴定方法。

14、论述mRNA转录后的加工过程。

15、论述外源基因在大肠杆菌中高效表达的原理。