实验7-2 丙二醛含量测定

实验7-2 丙二醛（MDA）含量测定

【实验目的】

1、掌握植物组织中丙二醛含量测定的原理和方法。

2、了解丙二醛含量测定的意义。

【实验原理】

植物器官在衰老或逆境胁迫时，会发生脂质过氧化作用，丙二醛（MDA）是其终产物之一，其含量可以反映脂类过氧化程度和植物遭受逆境伤害的程度。

在高温和酸性条件下，丙二醛与硫代巴比妥酸（TBA）反应，生成红棕色的3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮（三甲川），在532nm处有最大吸收波长。植物在胁迫条件下可溶性糖增加，而糖与硫代巴比妥酸的反应产物在532nm也有吸收（最大吸收波长为450nm），因此测定植物组织中丙二醛含量时需排除可溶性糖的干扰。

采用双组分分光光度法可分别求出丙二醛和可溶性糖的含量。蔗糖与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为85.40和7.40；丙二醛与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为0和155000，根据Lambert-Beer定律，列出二元一次方程：

A450=C1×85.4

A532- A600=C1×7.4+ C2×155000

解此方程得：

C1（mmol/L）=11.71 A450

C2（μmol/L）=6.45（A532- A600）-0.56 A450 （1）其中：C1——可溶性糖的浓度

C2——丙二醛的浓度

A450、 A532、A600分别表示450、532和600nm波长下的吸光值。【实验器材与试剂】

1、实验材料受逆境胁迫的植物叶片或衰老的植物器官、正常植物叶片或器官

2、实验试剂 10%的三氯乙酸（TCA）（称取10克TCA蒸馏水稀释定容至100mL）、石英砂、0.6%的硫代巴比妥酸（称取0.6克硫代巴比妥酸先用少量1mol/L氢氧化钠溶解，再用10%三氯乙酸定容至100mL）

3、实验仪器分光光度计、离心机、研钵、电炉、试管、量筒、天

平、移液管等

【实验步骤】

1、MDA的提取

称取材料1g，剪碎，先加入2mL10%的三氯乙酸和少量石英砂研磨，再加入8mL10%的三氯乙酸充分研磨后，4000r/min离心10min，上清液即为样品提取液。

2、显色反应及测定

吸取2mL提取液，加入2mL0.6%的硫代巴比妥酸，混匀，于沸水浴中反应15min，迅速冷却后离心。以2mL蒸馏水代替提取液作为对照。

3、测定

取上清液测定532nm 、450nm和600nm处的OD值。

4、计算

先按公式（1）计算样品提取液中丙二醛的含量，再根据植物组织的鲜重计算丙二醛的含量（μmol/gFW）。

【注意事项】

1、MDA-TBA显色反应的时间最好控制在10-15min之间。时间太短或

太长均会引起532nm

下的光吸收值下降。

2、一定要充分研磨样品以保证MDA提取完全。

【实验作业】

1、正常植物组织与胁迫条件下植物组织的丙二醛含量相比有什么变化，分析其原因。

2、为什么要测定反应液在600nm下的吸光度？

3、有哪些因素会影响植物组织中丙二醛含量的测定？

【参考文献】

1.张志良等主编.植物生理学实验指导.高等教育出版社,北京,2009.

2.郝再彬等主编. 植物生理学实验.哈尔滨工业大学出版社,哈尔滨,2004.

3.李合生主编. 植物生理生化实验原理和技术. 高等教育出版社,北京,2000.

丙二醛含量测定讲解学习

丙二醛含量测定

实验六、植物组织丙二醛含量测定植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由

于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取0.5g样品，加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移

丙二醛含量测定

植物组织或器官中丙二醛含量的测定一、实验目的二、实验原理：三、实验仪器：紫外可见分光光度计离心机四、实验步骤： ●1 MDA的提取称2g叶片，加入10％三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂，研磨；进一步加入8mlTCA充分研磨，接着把匀浆液以4000r／min离心10min，其上清液即为MDA提取液。 ●2 MDA显色反应及测定取2ml MDA提取液（对照组取2ml 蒸馏水），在加2ml 0.6％TBA混匀，在试管上加棉塞，置沸水中加热15min，迅速拿出水浴锅冷却，以4000r／min离心15min ，于波长532nm和450nm下测定OD值。五、结果计算 ●以测得的OD532减去OD600的非特异吸收值，分别计算衰老和对照组的值。 MDA浓度(μmol/L)=6.45OD532-0.56OD450 D450、D532分别代表450nm、532nm波长下的光密度值。六、注意事项： ●0.1-0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适，若高于此浓度，其反应液的非专一性吸收偏高； ●MDA-TBA显色反应的加热时间，最好控制沸水浴10-15min之间。时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降； ●如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间。 ●低浓度的铁离子能增强MDA与TBA的显色反应，当植物组织中铁离子浓度过低时应补充Fe3+（最终浓度为0.5 nmol·L-1） ●可溶性糖与TBA显色反应的产物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），当植物处于干旱、高温、低温等逆境时可溶性糖含量会增高，必要时要排除可溶性糖的干扰。丙二醛(MDA)含量的测定 ①测定步骤称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。 ②计算(3-6)式中：C—MDA的浓度；A450，A532 和A600—分别代表450、532和600nm 波长下的吸光度值。丙二醛(MDA)含量的测定丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。关键词：丙二醛含量测定氧化作用MDA膜脂过氧化硫代巴比妥酸TBATBA显色反应植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出后，可以与蛋白质、核酸反应，从而丧失功能，还可使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。因此，MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。 [原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁

丙二醛测量方法

硫代巴比妥酸法（丙二醛含量测定）一：原理丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。二：试剂 1：质量分数为10％三氯乙酸(TCA)； 2：质量分数0.6％硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解，再用10％的三氯乙酸定容；三：方法 1：MDA的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。

2：显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。四：结果 C1＝11.71D450 C2＝{6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1 C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1) C2——MDA的浓度（·umol·L-1） D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。 N:提取液总体积（ml） W:植物组织鲜重

土壤有机质测定实验报告

土壤实验报告土壤有机质的测定姓名：学号：实验日期：一、方法原理：土壤有机质是土壤的重要组成物质之一，是作为衡量土壤肥力高低的一个重要指标，土壤有机质含量也反映一定的成土过程。测定土壤有机质方法很多，一般采用重铬酸钾硫酸法。此法操作简便，设备简单，速度快，再现性较好，适合大批样品分析和实验室用。所谓重铬酸钾硫酸法就是在加热条件下，用一定量的标准重铬酸钾溶液，氧化土壤有机碳，多余的重铬酸钾则用硫酸亚铁溶液滴定，以实际消耗的重铬酸钾量计算出有机碳的含量，再乘以常数1.724，即为土壤有机质含量，其反应方程式如下： 2K2Cr2O7+3C+6H2SO4=2K2SO4+Cr2(SO4)3+3CO2+8H2O K2Cr2O7+6FeSO4+7H2SO4=K2SO4+Cr2(SO4)3+3Fe2(SO4)3+7H20 二、操作步骤：（1）准确称取通过60号筛风干土样0.1～0.5克（精确到0.0001克），放入干的硬质试管中，用移液管加入5毫升重铬酸钾标准溶液，再用移液管（或加液器）加入5毫升浓硫酸，小心摇匀，在试管口上加一弯颈小漏斗。（2）预先将植物油浴锅温度升到185～190度，将试管插入铁丝笼中，并将铁丝笼放入上述油锅中加热，此时温度控制在170～180度，使管内溶液保持沸腾5分钟，然后取出铁丝笼，待试管稍冷后，擦净外部油液。（3）冷却后将试管内溶液洗入250毫升三角瓶中，使瓶内总体积在60～80毫升，此时酸度约为1.5mol/L，然后加邻啡罗啉指示剂3－5滴，用0.2mol/L硫酸亚铁溶液滴定，溶液颜色由黄色经过绿色突变到棕红色即为终点。（4）在测定样品时必须做空白实验，可以用纯砂或灼烧土代替样品，以免溅出溶液。其他手续同上。实验操作时注意事项：（1）此法要求有机质含量在2％以上者，相对误差不超过5％，有机质含量低于2％，绝对误差不超过0.05，因此，必须根据有机质含量多少决定称量，一是有机质在7～15％的土样可称0.1～0.5克。2～4％者可称0.5～0.2克少于2％可0.5克以上，以减少误差。（2）消化煮沸的时间必须尽量准确一致，否则，对分析结果有较大影响，必须从

丙二醛含量测定

植物组织中丙二醛含量测定方法一：一、目的通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。二、原理丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。四、实验步骤 1. 丙二醛的提取称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15 min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。

土的压缩性实验报告doc

土的压缩性实验报告篇一：土力学实验报告土力学实验报告班级：姓名：学号：小组成员：中国矿业大学建筑工程学院岩土工程研究所二〇一四年十二月试验一含水量试验一、目的本试验之目的在于测定土的含水量，借与其它试验相配合计隙比及饱和度等；并查表确定地基土的容许承载力。二、解释（1）含水量w是土中水的质量与干土颗粒质量之比，用百分数表示。（2）本方法适用于有机物含量不超过干土重5%的土。若土中有机物含量在5～l0%之间，应将烘干温度控制在65-70℃，并在记录中注明）。三、设备（1）有盖的称量盒数只；（2）天平，感量0.01克；（3）烘箱（温度100~110℃）（4）干燥器（内有干燥剂CaCl2）。四、操作步骤（1）选取具有代表性的土样l5-30克（砂土适当多取）

放入称量盒。盖好盒盖，称盒加湿土质量。（2）打开盒盖，放入烘箱。在105～110℃下烘至恒重。烘干的时间一般为：粘土、粉土不得少于8小时；砂土不得少于6小时。（3）将烘好的试样连同称量盒一并放入干燥器内，让其冷却至室温。（4）从干燥器内取出试样，称盒加干土质量。（5）实验称量应准确至0.01克以上并进行2次平行测定，取平均值。（6）按下式计算含水量： 12 w?2??100% 式中： w——含水量，％； m1——称量盒加湿土质量，g； m2——称量盒加干土质量，g： m——称量盒质量，g（根据盒上标号查表）。本试验须进行2次平行测定，其平行误差允许值；当含水量w小于5%时，允许平行误差为0.3%；当含水量w等于或大于5%而小于40%时允许平行误差为l%；当含水量w等于或大于40% 时，允许平行误差为2%。五、注意事项（1）称量盒使用前应先检查盒盖与盒体号码是否一致，

植物组织MDA含量测定

植物组织MDA 含量测定一、目的要求 1．掌握植物组织MDA 含量测定的原理及具体测量步骤； 2．深化理解MDA 与逆境和衰老的关系，理解植物组织MDA 含量测定的意义； 3．了解膜脂过氧化、氧自由基和MDA 形成的关系； 4．能够根据待测材料的具体情况设计实验步骤测定MDA 含量； 5．学习分光光度计，低温离心机等仪器的使用方法。二、实验原理植物遭受逆境胁迫或衰老时，体内会发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低，活性氧平衡失调及内源激素平衡失调等。活性氧代谢失调直接导致植物体内活性氧的大量积累，从而引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。膜脂过氧化的产物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ）是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此在植物衰老生理和抗性生理研究中，MDA 含量是一个常用指标，可通过测定MDA 了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。 MDA 在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA ）反应，产生红棕色的产物3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（Trimet —nine ），又名三甲川，该物质在532nm 处有最大光吸收，在600nm 处有最小光吸收。由于TBA 也可与其它物质反应，并在532nm 处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm 与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的浓度。即：A 532－A 600＝ε·C ·L 式中，A 532和A 600分别表示532nm 和600nm 处的吸光度值，C 是MDA 浓度，L 为比色杯厚度，ε=155L·mmol -1·cm -1。 + 100 C O H N S N H O O O H H H N H S N H O O H O OH N N H S 2O TB A MDA 3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮需要指出的是，植物组织中糖类物质可能对MDA-TBA 反应有干扰作用。可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。

土壤有机质的测定2.0

实验报告课程名称：土壤学实验指导老师：谢晓梅成绩：__________________ 实验名称：土壤有机质的测定同组学生姓名：边舒萍一、实验目的和要求二、实验内容和原理三、实验材料与试剂四、实验器材与仪器五、操作方法和实验步骤六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析八、讨论、心得一、实验目的和要求 1. 了解土壤有机质测定对于农业生产的意义； 2. 掌握土壤有机质含量的测定方法。二、实验内容和原理有机质是土壤中重要组成成分，其含量水平是衡量土壤肥力的重要指标之一。本实验采用重铬酸钾容量法——稀释热法，利用浓硫酸和重铬酸钾混合时产生的热氧化有机质中的碳，通过测定消耗的氧化剂的量来计算得出土壤有机质含量，从而分析该土壤肥力水平，并对此提出改良措施。重铬酸钾容量法——稀释热法过程的化学反应式：氧化过程：K 2Cr 2O 7+C+H 2SO 4→K 2SO 4+Cr 2(SO 4)3+CO 2+H 2O 滴定过程：K 2Cr 2O 7+FeSO 4+H 2SO 4→K 2SO 4+Cr 2(SO 4)3+Fe 2(SO 4)3+H 2O 土壤有机碳与有机质换算公式：土壤有机质（g/Kg ）=土壤有机碳（g/Kg ）×1.724 三、实验器材与仪器土样（取于余杭塘路施工旁，风干研磨细后过100目筛）；

250mL三角瓶×2,10mL量筒，100mL量筒，5mL移液管，5.00mL移液枪，棕色酸式滴定管； 1mol/L 1/6 K2Cr2O7标准溶液，浓硫酸，领啡啰啉指示剂，0.5021mol/L FeSO4标准溶液。四、操作方法和实验步骤 1.在500mL三角瓶中加入m=0.5070g土样； 2.用移液管加入1mol/L 1/6 K2Cr2O7标准溶液10mL； 3.混匀后用移液枪移取浓硫酸20mL，旋转摇动1min，之后放置30mL，加水100mL； 4.滴入3滴指示剂后用0.5021mol/L FeSO4标准溶液滴定至溶液由绿色变暗绿色，最终以瞬间变为砖红色为终点； 5.用相同方法作空白对照（不加土样）测定。五、实验数据记录和处理表1 FeSO4标准溶液消耗体积与土壤有机质（碳）含量样品滴定前读数V1/mL 滴定后读数V2/mL FeSO4消耗体积 V（V0）/mL 土壤有机碳么 m1（g/Kg）土壤有机质 m2（g/Kg）第一组0.00 18.70 18.70 5.255 9.060 空白组 3.32 23.35 20.03 注：m1={[c(V0-V)×10-3×3.0×1.33]/m}×1000;m2=m1×1.724 其中，1.33为氧化校正系数；m为所称量土样重。六、实验结果与分析

丙二醛含量测定

应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm 与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子； (11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) L 磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) ％硫代巴比妥酸溶液：称取硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取样品，加入2ml预冷的L 的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5ml。在4500转/min离心10min。上清液即为丙二醛提取液。 2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中，加入％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，于沸水浴上加热10min，迅速冷却。于4500

大学土壤微生物分离实验报告

从土壤中分离纯化培养微生物并作初步观察鉴定【摘要】利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离与纯化，根据细菌在选择培养基的存活情况，确定该菌种的固氮解磷解钾属性。【关键词】细菌芽孢杆菌培养基、选择培养基的配制高压蒸汽灭菌前言：在自然条件下，微生物常常在各种生态系统中群居杂聚。群落是不同种类微物的混和体。为了生产和科研的需要，人们往往需要从自然界混杂的微生物群体中分离出具有特殊功能的纯种微生物；或重新分离被其他微生物污染或因自发突变而丧失原有优良性状的菌株；或通过诱变及遗传改造后选出优良性状的突变株及重组株。这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物的分离纯化技术。分离纯化技术主要由采集样品、富集培养、纯种分离和性能测定等几个基本环节组成。实验目的： 1、学习从土壤中分离、纯化微生物的原理与方法。 2、学习、掌握微生物的鉴定方法。 3、对提取的土样进行微生物选择培养、分离、纯化，根据菌落的存活状况来判断未知菌的属性。实验原理：菌种来源:选择无机磷农药含量较高的土壤,有机磷农药化工厂旁边的土壤和排污口区的污水. 培养基的选取：五组选择培养基，分别以辛硫磷、甲胺磷、敌敌畏、草甘膦及五种有机磷农药混合为微生物生长的唯一氮源磷源。分离纯化微生物：稀释倒平板法、涂布平板法、稀释摇管法、平板划线分离法。此次实验采取的是平板分离法，该方法操作简便，普遍用于微生物的分离与纯化，其基本原理主要包括两个方面：（一）选择适合于待分离微生物的生长条件或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰大部

分不需要的微生物。（二）微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体，因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。获得单菌落的方法可通过稀释涂布平板法或平板划线法等技术来完成。微生物的观察可以用显微镜观察其细胞形态，也可以用肉眼观察其菌落形态。前者是微生物的显微镜观察技术，后者是微生物的肉眼观察技术。 1. 实验器材、试剂与实验方法： 1.1器材：试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布、培养皿、自动立式压力蒸汽灭菌器、烘箱、玻璃珠、移液枪、枪头、称量纸、药匙、试管架、接种环、酒精灯、超净工作台, 粉碎机，接种环，移液枪配枪头。 1.2试剂：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、1mol/L NaOH、1mol/LHCl、NaCl、95%乙醇、75%酒精，草甘膦，甲甘磷，敌敌畏，辛硫磷。 1.3土样、样品：取自二十三冶草莓园的土壤，建设北路的大棚蔬菜菜地土壤，化工厂污水口。 1.4 实验方法 1.4.1配制培养基： (一）配制牛肉膏蛋白胨琼脂培养基200ml(用2个100ml三角瓶和2支试管分装）牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普遍的细菌基础培养基。配方如下：牛肉膏 0.6g 蛋白胨 2g NaCl 1g 琼脂 3~4g 水 200ml pH 7.4-7.6 1、称药品按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏和蛋白胨可分别放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后倒入大烧杯。蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。 2、加热溶解在烧杯中加入少于所需的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻璃棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入已溶解的药品中，再加热融化，在此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补充所失水分。 3、调pH 用pH试纸或酸碱度计检测培养基的pH值，若pH偏酸，可滴加1mol/L NaoH，边加边搅拌，并随时检测，直至达到所需pH范围。若偏碱，则用１mol/l HCL进行调节。 pH调节通常放在加琼脂之前。注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的

土壤成分测定实验报告

土壤成分测定实验报告 Prepared on 22 November 2020

土壤有效成分速测土壤有效养分待测液的制备 1、取相当2g风干土壤于三角瓶中，加入1mol（NaCl）L1‐—（HCl）L1‐浸提液20ml，大力摇1分钟。 2、过滤到干燥洁净的三角瓶或试管中，滤液即为待测液，用于测定铵态氮，磷及钾。一、铵态氮的测定 1、测定原理土壤待测液中的铵离子，与纳氏离子作用时，会生成碘化汞铵合氧化汞的橙黄色络合物，铵离子愈多，生成的橙黄色就越深，通过与已知的铵态氮含量的标准色阶比较，便可求出土壤铵态氮的含量，在强碱性条件下，其反应式如下：值得注意，水田在浸水情况下，会出现Fe2﹢，它会干扰铵的测定，另外，待测液中存在的Fe2﹢，Al3+，Ca2+，Mg2+等离子，也会干扰铵的测定，故在测铵前，必须先加入碳酸钠，使它们产生沉淀，以消除干扰。 NH4++4OH‐+2HgI4‐→碘化汞铵合氧化汞（橙黄色）↓+7I-+H2O 碘化汞离子 2、测定步骤 ①取待测液约5ml，放入试管中，加入固体碳酸钠（约3粒黄豆大小），摇匀，使溶解静置15min，等溶液澄清后，再吸取上层清液进行测定（测定有效钾，亦用此清液）。

二、有效磷的测定 1、测定原理土壤待测液中的有效磷，与钼酸铵作用，生成钼酸杂多酸，在一定酸度范围内，磷钼杂多酸被氯化亚锡或金属锡还原为兰色的磷酸络合物，其反应如下： H3PO4+10MoO4-+2Sn2++24H+ → (MoO4·4MoO4-)2·H3PO4·4H2O+2Sn++8H2O 待测液的有效磷越多，兰色就越深，将其与标准比色阶比较，就可求出土壤有效磷的含量。 2、测定步骤：

土壤成分测定实验报告

土壤有效成分速测土壤有效养分待测液的制备 1、取相当2g风干土壤于三角瓶中，加入1mol（NaCl）L1‐—0.025mol（HCl）L1‐浸提液20ml，大力摇1分钟。 2、过滤到干燥洁净的三角瓶或试管中，滤液即为待测液，用于测定铵态氮，磷及钾。一、铵态氮的测定 1、测定原理土壤待测液中的铵离子，与纳氏离子作用时，会生成碘化汞铵合氧化汞的橙黄色络合物，铵离子愈多，生成的橙黄色就越深，通过与已知的铵态氮含量的标准色阶比较，便可求出土壤铵态氮的含量，在强碱性条件下，其反应式如下：值得注意，水田在浸水情况下，会出现Fe2﹢，它会干扰铵的测定，另外，待测液中存在的Fe2﹢，Al3+，Ca2+，Mg2+等离子，也会干扰铵的测定，故在测铵前，必须先加入碳酸钠，使它们产生沉淀，以消除干扰。 NH4++4OH‐+2HgI4‐→碘化汞铵合氧化汞（橙黄色）↓+7I-+H2O 碘化汞离子 2、测定步骤 ①取待测液约5ml，放入试管中，加入固体碳酸钠（约3粒黄豆大小），摇匀，使溶解静置15min，等溶液澄清后，再吸取上层清液进行测定 1、测定原理

土壤待测液中的有效磷，与钼酸铵作用，生成钼酸杂多酸，在一定酸度范围内，磷钼杂多酸被氯化亚锡或金属锡还原为兰色的磷酸络合物，其反应如下： H3PO4+10MoO4-+2Sn2++24H+ → (MoO4·4MoO4-)2·H3PO4·4H2O+2Sn++8H2O 待测液的有效磷越多，兰色就越深，将其与标准比色阶比较，就可求出土壤有效磷的含量。 2、测定步骤：附 1、测定原理存在于土壤待测液中的钾，在弱碱性条件下与四苯硼钠作用，生成四苯硼钾白色沉淀，其反应式如下： K++B(C6H5)4→B(C6H5)K↓ 四苯硼离子四苯硼钾（白色）土壤待测液中，钾离子越多，白色沉淀越多，因此可以根据浑浊的程度来确定钾的含量，由于铵离子也能和四苯硼钠作用生成白色沉淀干扰测定，故在测钾之前加入甲醛，供生成的环六次甲基四胺，以除去它的干扰，由于反应是在弱碱性条件下进行，土壤待测液中可能有Fe3﹢，Al3+，Ca2+，Mg2+等离子，也会产生黄色或白色的氢氧化物，碳酸盐或碱式碳酸盐沉淀，从而干扰钾的测定。为此，在除去铵离子之前，必须先加入碳酸钠于土壤待测液中，以除去Fe3﹢，Al3+，Ca2+，Mg2+等离子的干扰。

土壤成分测定实验报告

土壤成分测定实验报告 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

土壤有效成分速测土壤有效养分待测液的制备 1、取相当2g风干土壤于三角瓶中，加入1mol（NaCl）L1‐—0.025mol （HCl）L1‐浸提液20ml，大力摇1分钟。 2、过滤到干燥洁净的三角瓶或试管中，滤液即为待测液，用于测定铵态氮，磷及钾。一、铵态氮的测定 1、测定原理土壤待测液中的铵离子，与纳氏离子作用时，会生成碘化汞铵合氧化汞的橙黄色络合物，铵离子愈多，生成的橙黄色就越深，通过与已知的铵态氮含量的标准色阶比较，便可求出土壤铵态氮的含量，在强碱性条件下，其反应式如下：值得注意，水田在浸水情况下，会出现Fe2﹢，它会干扰铵的测定，另外，待测液中存在的Fe2﹢，Al3+，Ca2+，Mg2+等离子，也会干扰铵的测定，故在测铵前，必须先加入碳酸钠，使它们产生沉淀，以消除干扰。 NH4++4OH‐+2HgI4‐→碘化汞铵合氧化汞（橙黄色）↓+7I-+H2O 碘化汞离子 2、测定步骤 ①取待测液约5ml，放入试管中，加入固体碳酸钠（约3粒黄豆大小），摇匀，使溶解静置15min，等溶液澄清后，再吸取上层清液进 1、测定原理

土壤待测液中的有效磷，与钼酸铵作用，生成钼酸杂多酸，在一定酸度范围内，磷钼杂多酸被氯化亚锡或金属锡还原为兰色的磷酸络合物，其反应如下： H 3PO 4+10MoO 4-+2Sn 2++24H + → (MoO 4·4MoO 4-)2·H 3PO 4·4H 2O+2Sn ++8H 2O 待测液的有效磷越多，兰色就越深，将其与标准比色阶比较，就可求出土壤有效磷的含量。 2、测定步骤：附 1、测定原理存在于土壤待测液中的钾，在弱碱性条件下与四苯硼钠作用，生成四苯硼钾白色沉淀，其反应式如下： K ++B(C 6H 5)4 → B(C 6H 5)K ↓ 四苯硼离子四苯硼钾（白色）土壤待测液中，钾离子越多，白色沉淀越多，因此可以根据浑浊的程度来确定钾的含量，由于铵离子也能和四苯硼钠作用生成白色沉淀干扰测定，故在测钾之前加入甲醛，供生成的环六次甲基四胺，以除去它的干扰，由于反应是在弱碱性条件下进行，土壤待测液中可能有Fe 3﹢，Al 3+，Ca 2+，Mg 2+等离子，也会产生黄色或白色的氢氧化物，碳酸盐或碱式碳酸盐沉淀，从而干扰钾的测定。为此，在除去铵离子之前，必须先加入碳酸钠于土壤待测液中，以除去Fe 3﹢，Al 3+，Ca 2+，Mg 2+等离子的干扰。

植物体内丙二醛含量的测定

植物体内丙二醛含量的测定一、目的通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。二、原理丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。四、实验步骤 1. 丙二醛的提取称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。五、丙二醛含量计算：由于蔗糖－TBA反应产物的最大吸收波长为450nm，毫摩尔吸收系数为85.4×10－3，MDA －TBA反应产物在532nm的毫摩尔吸收系数分别是7.4×10－3和155×10－3。532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组即可求出MDA及可溶性糖浓度。方程组： A450=（85.4×10－3）·C糖（A532－A600）=（155×10－3）·C MDA+（7.4×10－3）·C糖解得： A450 C糖= —————— = 11.71A450（mmol·L－1） 85.4×10－3

土壤腐殖质组成的测定实验报告

貴州大學植物营养与技术学实验第1次题目土壤腐殖质组成的测定植物营养学专业09级学号200912286姓名裴贺霞2009年10月15日 1. 实验目的：学会用重铬酸钾氧化法测定土壤腐殖质的组成。 2. 范围：本方法适用于土壤腐殖质组成的测定。 3. 原理：土壤腐殖质由胡敏酸、富啡酸和存在于残渣中的胡敏酸素等组成。采用焦磷酸钠-氢氧化钠浸提液提取腐殖质，浸提液具有极强的络合能力，能将土壤中的难溶于水和易溶于水的结合态腐殖质，结合成易溶于水的腐殖酸钠盐，从而较完全地将腐殖质提取到溶液中。取一部分浸出液测定碳量，作为赫敏算和富啡酸的总量。再取一部分浸出液，经酸化后使胡敏酸沉淀，分理处富啡酸，然后将沉淀溶解于氢氧化钠中，测定碳量组委胡敏酸含量。富啡酸可按参数算出。留在图样残渣红豆有机质胡敏素，由腐殖质测定中的全碳量减去胡敏酸和富啡酸是含碳量算出。碳量的测定采用重铬酸钾氧化外加热法。 4. 试剂与仪器浸提液（0.1mol/L）氢氧化钠溶液（0.05mol/L）硫酸溶液（0.5mol/L、0.025mol/L）重铬酸钾标准溶液（0.8000mol/L）硫酸亚铁标准溶液（0.2mol/L）邻菲啰啉指示剂油浴锅温度计振荡机试管酸式滴定管吸耳球移液管锥形瓶滴管 5. 试样制备取10g未磨过的均匀风干的土样，挑去砾石和植物残体，研磨，并通过0.149mm筛孔，装于小广口瓶。称样测定时，同时另称样测定吸附水，最后换算成烘干样计算结果。 6. 操作步骤 6.1 腐殖质中圈碳量的测定：同F-HZ-DZ-TR0046土壤有机质的测定（重铬酸钾氧化外加热法） 6.2 待测溶液的制备：称取5.0000g土样（精确至0.0001g）置于250ml 锥形瓶中，加入100.00ml浸提液，加塞，振荡5min后，放在沸水浴中加热1h。摇匀用慢速滤纸过滤。如有浑浊，可倒回重新过滤。如过滤太慢，也可用离心机澄清，清液收集于锥形瓶中，加塞，待测。弃去残渣。 6.3 胡敏酸和富啡酸中总碳量的测定：吸取5.00ml~15.00ml浸出液（视溶液颜色深浅而定），置于盛有少量石英砂的硬质试管中，逐滴加入0.5mol/L硫酸溶液中和至pH7（用pH试纸试验），使溶

土壤含水量的测定实验报告书

1. 实验二土壤含水量的测定（烘干法与酒精燃烧法）一、目的意义进行土壤含水量的测定有两个目的：一是为了解田间土壤的实际含水情况，以便及时进行播种、灌排、保墒措施，以保证作物的正常生长；或联系作物长相长势及耕作栽培措施，总结丰产的水肥条件。二是风干土样水分的测定，是各项分析结果计算的基础。土壤含水量的测定方法很多，如烘干法、酒精燃烧法和中子测量法等，其中烘干法是目前国际上土壤水分测定的标准方法，虽然需要采集土样，并且干燥时间较长但是因为它比较准确，且便于大批测定，故为常用的方法。二、土壤自然含水量的测定土壤自然含水量是指田间土壤中实际的含水量，它随时在变化之中，不是一个常数。土壤自然含水量测定的方法，介绍烘干法和酒精燃烧法。（一）烘干法 1．方法原理将土壤样品放在105℃±2℃的烘箱中烘至恒重，求出土壤失水重量占烘干重量的百分数。在此温度下，包括吸湿水（土粒表面从空气中吸取活动力强的水汽分子而成的一种水分）在内的所有水分烘掉，而一般土壤有机质不致分解。 2．操作步骤（1）将铝盒擦净，烘干冷却，在1/100天平上称重，并记下铝盒号码（A ）。（2）在田间取有代表性的土样（0~20cm ）20g 左右，迅速装入铝盒中，盖好盒盖，带回室内（注意铝盒不可倒置，以免样品撒落），在天平上称重（B ），每个样品至少重复测3份。（3）将打开盖子的铝盒（盖子放在铝盒旁侧或盖子平放在盒下），放人105℃±2℃的恒温箱中烘6~8小时。（4）待烘箱温度下降至50℃左右时，盖好盖子，置铝盒于干燥器中30分钟左右，冷却至室温，称重（C ），如无干燥器，亦可将盖好的铝盒放在磁盘或木盘中，待至不烫手时称重。（5）然后，启开盒盖，再烘4小时，冷却后称重，一直到前后两次称重相差不超过1%时为止（C ）。 3．结果计算土壤含水量（%）= 100A C C B ?-- 式中：A — 铝盒重（g ） B — 铝盒加湿土重（g ） C — 铝盒加烘干土重（g ） 4．注意事项（1）烘箱温度以105℃±2℃为宜，温度过高，土壤有机质易碳化逸失。在烘箱中，一

植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)

植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法) 简介：动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对植物组织(根、茎、叶、种子等)MDA进行检测，是专门用于植物脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测的试剂盒，不适用于动物组织、细胞、血液等。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在有最大吸收，该复合物的吸光系数为155mmol/(L.cm)，并且在长处有最小吸收。植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰，我们总结出经验公式，以消除这一干扰。亦可以通过比标准品进行比较，进行含量检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。组成：自备材料： 1、植物根茎、叶子等 2、剪刀 3、离心管、小试管或96孔板 4、分光光度计或酶标仪 5、水浴锅或恒温箱 6、离心机操作步骤(仅供参考)：编号名称TO1023 50T TO1023 100T Storage 试剂(A): 组织匀浆液250ml 500ml RT 避光试剂(A): TBA 0.35g 0.7g RT 避光试剂(C): 抗氧化剂0.5ml 1ml 4℃ 试剂(D): MDA标准品(1mmol/L) 0.5ml 1ml -20℃避光使用说明书

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA荧光法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 荧光法) 简介：动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA 在内的复杂化合物，此时通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA 的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA ，例如thromboxane synthase 也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 荧光法，MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过荧光比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA 进行定量检测，广泛用于脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA 发生反应，形成红色的MDA-TBA 加合物，MDA-TBA 加合物在处有最大吸收，以为激发光，据此可以通过荧光比色法进行检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。组成：自备材料： 1、蒸馏水 2、离心管、小试管或96孔板 3、荧光分光光度计或荧光酶标仪 4、水浴锅或恒温箱 5、离心机操作步骤(仅供参考)： 1、样本处理： ①血清、血浆、尿液、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血。取待编号名称 TO1015 50T TO1015 100T Storage 试剂(A): TBA 0.4g 0.8g RT 避光试剂(B): TBA 稀释液 50ml 100ml RT 避光试剂(C): 抗氧化剂 2.5ml 5ml 4℃ 试剂(D): MDA 标准品(1mmol/L) 0.2ml 0.4ml -20℃ 避光使用说明书说明书