交叉配血实验笔记

实验八交叉配血试验

交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。

【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。

【实验对象】人体（学生自愿者）。

【实验器材和药品】

1．仪器显微镜，离心机。2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。3．药品标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。

【实验步骤和观察指标】

图4-3-1-1 交叉配血示意图

（一）红细胞悬浮液的配制

按需要型别，取全血1ml，加等渗盐水2 ～3ml，充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2 ～3ml按上述方法洗涤，共三次，取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，即成5 ％红细胞悬液。（二）交叉配血基本原理见图4-3-1-1示。

盐水介质交叉配血试验

实验原理

天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中

发生凝集现象。可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方RBC的IgM抗体（ABO血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主）。

实验步骤

取二试管，分别注明“主”、“次”字样，主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。混匀后1000rpm离心1min，取出观察结果。如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。

低离子聚凝胺介质交叉配血试验

实验原理

红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成Zeta 电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液,悬浮液具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

实验步骤

1 取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血

者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。

2各加LIM0.6ml,混合均匀后，再各加凝聚胺溶液2滴，并混合均匀。3用离心机1000转/min离心1min，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。

4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重做。5最后加入重新悬浮液 2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如果在60秒内凝集散开，代表是由凝聚胺引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

微柱凝胶介质交叉配血试验

实验原理

利用抗原抗体特异性反应的作用→通过离心技术→利用凝胶的微孔过滤作用，将发生凝集反应的RBC阻滞于凝胶之内，而未凝集的单个RBC则穿过微孔运动至柱底→从而区分有无凝集。

实验步骤

见PPT所述。结果判定肉眼直接观察。

（三）实验注意事项

1.器材、试剂、反应温度、离心、标本等注意事项同ABO血型鉴定。

2.血清优于血浆；不用溶血标本；配血后，标本置冰箱内保存至少7天。

3.RBC要用生理盐水洗干净。

4.溶血现象，实质是阳性结果，为配血不合。

5.ABO血型系统同型而不容，应首先排除ABO血型鉴定是否有误。

6.盐水介质法仅能检测IgM型RBC血型抗体，不能检测IgG型RBC 抗体。凝聚胺法可以检查出IgG型的血型抗体

7.临床输血进行交叉配血试验时，应当首先进行盐水介质法试验，

再进行聚凝胺介质法试验。

8. 聚凝胺介质法试验尽快观察结果(＜3min)

9.聚凝胺溶液必须保存在深色塑料瓶中。

10. 聚凝胺介质法试验中遇到用含肝素的血标本，要多加聚凝胺。

【思考题】

1.在无标准血清情况下已如某人为A或B型，能否用其血去检查未知血型？如何作？

2.交叉配血时为何主侧不凝集而次侧凝集时，可以少量输血？还需注意些什么？

3.红细胞凝固、凝集、聚集三者有何不同？

交叉配血操作规程

1.目的：检查受血者与献血者的抗原及抗体成分是否相容，以保证安全输血。 2.要求：要求全科人员能够熟练掌握原理及操作。 3.原理：交叉配血试验分“主侧”交叉配血试验即病人血清与献血者红细胞相容性试验；“次侧”交叉配血试验即献血者血清与病人红细胞的相容性试验。只用盐水介质进行交叉配血是有危险性,因为不完全抗体（多是IgG类不规则的血型抗体），所导致的受血者和献血员血型不相容，只是用盐水交叉配血试验检测不出来，而临床中遇到的这类血型不完全抗体所导致的血型不相容输血反应，可能是严重的甚至是致死性的，在临床交叉配血试验中，必须常规地应用能够检测出这类抗体的方法，如聚凝胺；抗人球蛋白等方法。 4.仪器试剂和材料 4.1 抗A、抗B、抗D血清 4.2 病人血样，供血者血样 4.3 聚凝胺试剂 4.4 抗人球蛋白试剂 5.操作方法 5.1 首先查看输血申请单，核对姓名、科室、床号等内容，无误后方可进行配血。★ 5.2盐水介质配血法（1）首先对患者血样充分离心后，吸出血清于另一试管中并标记。（2）取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、A C、BC、O C、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管。对患者血样进行ABO血型（正反定性）和Rh血型检定，主侧管加受血者血清2滴，献血者2%~5%红细胞悬液1滴；次侧管加献血者血清2滴，受血者2%~5%红细胞悬液1滴，对献血者血辫进行ABO血型

复查，以1000g离心15秒，观察结果

6.结果判断 ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血现象。为盐水介质配血结果阴性，可将原标本接着做聚凝胺法或抗人球蛋白法配血。 6.1聚凝胺法：具体方法见聚凝胺法。 6.2 抗人球蛋白法：具体方法见抗人球法。 7.附注 7.1冬季室温较低，应将试管保温以防止冷凝集引起的凝集反应。 7.2献血者血型因初复检已确定，可只做正定型，但务必要做。 7.3患者血清中纤维蛋白没完全析出时，要放置到37℃水浴箱中15分钟，然后再离心。以防未完全析出的纤维蛋白影响判断结果。 7.4 交叉配血试验中发现不配合时，首先应考虑受血者和献血者的ABO定型是否错误，必要时进行抗体筛选，注意有无特异性同种抗体。或者病人的血清在室温，37℃或抗人球蛋白血清中凝集所有的其它红细胞，造成交叉配血的困难，应进一步作有关试验进行鉴定。 7.5 在每次输血之后，受血者和献血者样本应在2℃~6℃保存10天。如果病人在输血中发生不良反应或在输血后数天内发生迟发性溶血性反应时，保存的病人和献血员的血样就有可能要重新或追加试验，必要时从发生溶血性输血反应的病人重新采取血样与输血前病人血样同时检查以资比较。 7.6 各医院前来配血时，要有输血申请单方可配血。 8.相关文件 8.1《中国输血技术操作规程》 9.相关表单 9.1 CB—004血型参比室实验记录单 9.2 CB—005青海省血液中心交叉配血报告单

配血及输血记录单

县中医医院配血及输血记录单受血者血型：________ 型输血申请单号： RH （D）标本号：姓名： ________ 性别： __________ 年龄：_________ 科别：_________ 床号:住院号: ________ 临床诊断: ____________________ 输血反应史及禁忌症：___________________ 1、受血者血型鉴定： 2、交叉配血

配血者：______________ 核对者：__________________ 配血时间：_______ 年月_____ 日________ 时_________ 分 3、不规则抗体筛选结果：______________________ 试验者： 4、其他检查结果：血液物理外观检查和信息核对情况：无/有异常____________________________ 发血者：______________ 取血者：_______________ 取血时间：_________ 年月______ 日________ 时________ 分输血核对者：______________________ 输血执行者: ______________________ 输血开始时间： ______ 年—月—日__________ 时_____ 分开始输血滴速：滴/分,输血15分钟后滴速：—滴/分。输血结束时间：____ 年_月_日___________ 时_____ 分输血不良反应：□有□无注：有输血不良反应应须填写输血不良反应回报单至输血科注意事项： 1、输血前请检查血液制剂包装是否完好无损，血液制剂外观是否正常； 2、输注前请将血液制剂轻轻摇匀； 3、除0.9%的生理盐水外，血液制剂不得与任何药剂在同一输血器内输注； 4、输血开始前15分钟内以1-2ml/min慢速输注，并严密观察是否有

S交叉配血试验标准化操作规程盐水法

落石出

交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。试验通常包括：主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂 1、试剂名称：0.9%氯化钠注射液 2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司； 3、批准文号：国药准字H2005006143020455； 4、包装规格：500ml/瓶； 5、贮藏条件；18-25℃避光保存。 6、有效期：自检定合格之日起二年；七、检测样本要求 1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。 2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。 3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。 4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。八、操作步骤 1、将受血者与献血者的红细胞血清分离； 2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液； 3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。 4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴。次侧

交叉配血试验

交叉配血试验交叉配血试验交叉配血是确定能否输血的重要依据，两侧均不凝集可输血。将献血人的红细胞和血清分别与受血人的血清和红细胞混合，观察有无凝集反应，这一试验称为交叉配血试验。用交叉配血是确定能否输血的重要依据，两侧均不凝集可输血。若献血人红细胞与受血人血清（主侧）发生凝集应禁止输血；主侧不凝集，次侧（献血人血清与受血者红细胞）凝集，必要时可少量、慢速输血。交叉配血不能只进行盐水介质交叉配血，在条件差的实验室也应该进行胶体介质配血，以尽量消除不完全抗体存在的危害，减少输血引起的不良反应。在血型鉴定的基础上，通过交叉配血试验进一步证实受血者和供血者之间不存在血型不合的抗原一抗体反应，以保证受血者的输血安全。因输血直接涉及病人的生命安全，故病人与献血员虽属同一血型也应进行交叉配血。分类交叉配血试验有多种方式，如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。 1、首先准备好受血者和献血者的血样。 2、配好用受血者血清配成的2%的红细胞悬液；用献血者血清配成的2%红细胞悬液。 3、主侧加受血者血清0.5ml，献血者血清配成的2%红细胞悬液0.25ml。 4、次侧加献血者血清0.5ml，受血者血清配成的2%的红细胞悬液0.25ml。 5、37度水浴箱孵育1小时，后观察有无凝集或溶血。不同血型的人的血清中各含有不同的凝集素，即不含有对抗内他自身红细胞凝集原的凝集素。在A型人的血清中，只含有抗B凝集素；B型人的血清中，只含有抗A凝集素；AB型人的血清中没有抗A和抗B凝集素；而O型人的血清中则含有抗A和抗B凝集素。在ABO系统血型相同的人之间进行输血，在输血前必须进行交叉配血试验（cross-match test），即不仅把供血者的红细胞与受血者的血清进行血清配合试验（这称为试验主侧）；而且要把受血者的红细胞与供血者的血清作配合试验（这称为试验的次侧）。这样，既可检验血型测定是否有误，又能发现他们的红细胞或血清中，是否还存在一些其它的凝集原或凝集素，足以引起红细胞凝集反应。在进行交叉式配血试验时，应在37℃下进行，以保证可能有的凝集反应得以充分显示。试验方式交叉配血试验有多种方式，如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。胶体介质配血法 1、首先准备好受血者和献血者的血样。 2、配好用受血者血清配成的2%的红细胞悬液；用献血者血清配成的2%红细胞悬液。 3、主侧加受血者血清0.5ml，献血者血清配成的2%红细胞悬液0.25ml。 4、次侧加献血者血清0.5ml，受血者血清配成的2%的红细胞悬液0.25ml。 5、37度水浴箱孵育1小时，后观察有无凝集或溶血。微柱凝胶试验微柱凝胶试验(Microtubes Gel Test，MGT)是20世纪90年代先后进入国内实验室并用于交叉配血的新方法。在一些先进国家已成为常规的红细胞血型血清学检测技术。而凝聚胺用于不完全抗体的测定与鉴定以及交叉配血等血清学试验也已在国内迅速推广使用。该方法简便、时间短、结果明显。诊断用人血型抗A血清、诊断用人血型抗B血清（常在血清中加入不同颜色的染料以示区别，如A型红色，B型蓝色）、生理盐水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%红细胞悬液、受血者的2%红细胞悬液。

ABO血型鉴定和交叉配血实验

ABO血型鉴定和交叉配血实验 [实验目的] 观察红细胞凝集现象。学习ABO血型鉴定方法，掌握血型鉴定原理。 [实验原理] ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型，存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B 凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素，B型标准血清中含有抗A凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应，以确定其血型。同种动物不同个体的红细胞凝集称为同族血细胞凝集作用。不同动物的血液互相混合有时也可产生红细胞凝集，称为异族血细胞凝集作用。对于动物的天然血型抗体了解不多，而且免疫效价也很低，所以同种动物第一次输血，一般不会引起严重后果。但第二次输血就必须进行交配试验，才能决定是否能相互输血。 [实验对象] 正常人。 [实验药品] A型B型标准血清。 [仪器器械] 双凹玻片，采血针，竹签，75%酒精棉球，干棉球，玻璃蜡笔（记号笔），尖头滴管，显微镜。 [实验方法与步骤] 1.ABO血型的鉴定：（1）取双凹玻片一块，在两端分别标上A和B，中央标记受试者的号码。（2）在A端和B端的凹面中分别滴上相应标准血清少许。图6.9-1 ABO血型鉴定示意图（3）75%酒精棉球消毒无名指端，用采血针刺破指端，用消毒后的尖头滴管吸取少量血（也可用红细胞悬浮液，见下述），分别与A端和B端凹面中的标准血清混合，放置1～2 min后，能肉眼观察有无凝血现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。（4）根据凝集现象的有无判断血型（图6.9-1）。

2.交叉配血实验：（1）分别对供血动物和受血动物消毒、静脉取血，制备成血清和红细胞悬浮液。红细胞悬浮液是将受检者的血液一滴，加入装有生理盐水约1 ml的小试管中，即为2%的红细胞悬浮液。加盖备用。（2）取双凹玻片一块，在两端分别标上供血动物和受血动物的名称或代号，分别滴上它们的血清少许。（3）将供血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴到受血者的血清中（称为主侧配血,图6.9-2）；将受血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴入供血者的血清中（称为次侧配血），混合。放置10～30 min后，肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。如果两次交叉配血均无凝集反应，说明配血相合，能够输血。如果主侧发生凝集反应，说明配血不合，不论次侧配血如何都不能输血。如果仅次侧配血发生凝集反应，只有在紧急情况下才有可能考虑是否输血。 [注意事项]

凝聚胺交叉配血标准操作规程

凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。五、试剂及材料 (一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所) 成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温 (二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求： (一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。 (二)标本保存：血液样本必须密封，2~8℃保存7天。 (三)用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本。七、操作程序：

(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。 (二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。 (三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。 (五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。 (六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。 (七) 最后加入重悬液2滴，轻轻转动试管混合，并同时观察结果，必要时在显微镜下观察结果。八、结果判定： (一)阴性：60秒内凝块散开，代表由聚凝胺溶液引起的非特异性凝集，配血结果相合。 (二)阳性：60秒内凝块不散开，代表红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。 (三)如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。九、注意事项： (一)若病人血浆（血清）含肝素，须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝素。 (二)冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反应，影响结果判断。 (三)加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提高离子强度，降低致敏效果。 (四)抗原抗体比例适当。 .

(整理)凝聚胺介质交叉配血试验操作规程

凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(SOP文件) 1目的作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。 2检验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene)溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。 3储存条件及有效期

未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。 4样本要求 4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。 4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。5检验方法辅助交叉配血试验 5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。 5.2各加LIM0.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。 5.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。 5.4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重做。 5.5最后加入Resuspending 2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如果在60秒内凝集散开，代表是由Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为

交叉配血试验(凝聚胺方法)

交叉配血试验（凝聚胺方法）一、试剂储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2～25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。二、样本要求 1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3%-5%的红细胞悬液。 2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。三、检验方法 1、取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者 3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管反之。 2、各加 LIM0.7ml,混合均匀后，再各加 Polybrene2 滴，并混合均匀。 3、用血库离心机 3400 转/分离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。 4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。 5、最后加入 Resuspending2 滴，轻轻转动试管混合并涂片，显微镜下观察结果：在 30 秒-1 分钟内凝集散开，代表是由 Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。四、注意事项 1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用。 2、若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。 3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。 4、若试剂使用前为低温贮存，请恢复室温再行操作。 5、加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。 6、在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在60秒内观察结果。 7、红细胞抗原检测步骤同抗体筛检试验，其检测标准血清用已知标准血清。 8、可使用IgG抗D抗体（效价≥64）与RhD阳性红细胞反应做阳性对照试验，测试本试剂的有效性。

交叉配血实验笔记

实验八交叉配血试验交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。【实验对象】人体（学生自愿者）。【实验器材和药品】 1．仪器显微镜，离心机。2．器械采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。3．药品标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。【实验步骤和观察指标】

图4-3-1-1 交叉配血示意图（一）红细胞悬浮液的配制按需要型别，取全血1ml，加等渗盐水2 ～3ml，充分摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2 ～3ml 按上述方法洗涤，共三次，取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，即成5 ％红细胞悬液。（二）交叉配血基本原理见图4-3-1-1示。盐水介质交叉配血试验实验原理天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。可以检查供、受者血清中是否存在破坏对方RBC的IgM抗体（ABO血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主）。实验步骤

取二试管，分别注明“主”、“次”字样，主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。混匀后1000rpm离心1min，取出观察结果。如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。低离子聚凝胺介质交叉配血试验实验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，形成Zeta 电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液,悬浮液具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。实验步骤 1 取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血

四川省射洪县人民医院配血报告单

的。" 6.方茴说："我觉得之所以说相见不如怀念，是因为相见只能让人在现实面前无奈地哀悼伤痛，而怀念却可以把已经注定的谎言变成童话。" 7.在村头有一截巨大的雷击木，直径十几米，此时主干上唯一的柳条已经在朝霞中掩去了莹光，变得普普通通了。四川省射洪县人民医院输血科配血试验报告单病人ABO血型Rh血型其它血型申请单联号病人姓名性别年龄民族科室床号住院号申请日期血清学检查发现配血者：建议：复核者：报告日期：发血日期：发血者：特别说明； 1取血和输血执行者必须认真核对病人姓名、性别、年龄、科别、床号、住院号，以及配血单上标明的血袋编码、血型、交叉配血试验的结果解释，并检查血液质量。 1."噢，居然有土龙肉，给我一块！" 2.老人们都笑了，自巨石上起身。而那些身材健壮如虎的成年人则是一阵笑骂，数落着自己的孩子，拎着骨棒与阔剑也快步向自家中走去。

的。" 6.方茴说："我觉得之所以说相见不如怀念，是因为相见只能让人在现实面前无奈地哀悼伤痛，而怀念却可以把已经注定的谎言变成童话。" 7.在村头有一截巨大的雷击木，直径十几米，此时主干上唯一的柳条已经在朝霞中掩去了莹光，变得普普通通了。 2在输血前需观察和记录病人的生命体征，在输血过程中严密观察病人情况。 3在快速大量输血或给有强冷凝集素的病人输血，宜将血液加温到接近体温，但勿超过37℃ 4如发生输血反应或可疑输血反应，应立即停止输血并采取相应措施，及时报告负责医师和输血科值班人员。 5对发生即刻的输血反应终止输血后的余血或输血完备后的血袋请及时交回输血科保留24小时备查。 6此联需贴于病历上妥善保存，请勿遗失。 1."噢，居然有土龙肉，给我一块！" 2.老人们都笑了，自巨石上起身。而那些身材健壮如虎的成年人则是一阵笑骂，数落着自己的孩子，拎着骨棒与阔剑也快步向自家中走去。

交叉配血标准操作规程

交叉配血标准操作规程（抗人球蛋白法）一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。四、试剂及材料 (一)试剂：抗人球蛋白检测卡（西班牙Diagnostic Grifols,S.A公司生产） (二)设备：戴安娜专用离心机（型号：DG SPIN）、戴安娜专用孵育器（型号：DG THERM）、微量移液器（5-50ul）、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求： (一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。 (二)标本保存：血液样本必须密封，2-8℃保存7天。 (三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。六、操作步骤： (一)交叉配血前，先复检患者和献血者ABO和Rh血型。 (二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右，取出待用。 (三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧，撕掉配血卡上的封条。 (四)取试管两支，分别配制患者和献血者红细胞悬液（浓度为1%）待用。 (五)交叉配血：主侧：用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆

25ul ；次侧：用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。 (六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，取出观察结果。七、结果观察： (一)主侧和次侧均不凝集，细胞沉于反应卡的底部，配血相合，可以输血 (二)主侧或次侧出现凝集，细胞悬挂于卡的中间或上部，配血不相合，不可以输血 (三)若输注血液为红细胞，则只需主侧配血相合。微柱卡式法凝集强度描述

临床输血须知.pdf

临床输血须知第一章临床用血管理 1．临床用血管理有哪些规定？ 1998年10月1日实行的《中华人民共和国献血法》（以下简称《献血法》）第十三条至第十六条对临床用血管理提出具体的规范性要求。第十三条规定，医疗机构对临床用血必须核查。做好核查是医疗机构保证输血安全的不可缺少、不可忽视的重要环节。第十四条规定，无偿献血者或配偶、直系亲属用血时实行费用优惠，减免血液采集储存分离检验等费用。未保证急救用血，防止发生血液供应不上的问题。第十五条和第十六条分别对医疗机构开源节流责任做出了规定。第十五条规定，提倡择期手术患者自身储血，亲友、单位互助献血。第十六条规定，医疗机构要制定用血计划，合理用血、科学用血，推行成分输血，开展临床用血新技术的研究。此外，卫生部1999年元月下发了《医疗机构临床用血管理办法（试行）》，对临床用血管理工作作出了具体规定。 2．医院违反临床用血管理规定如何处罚？《献血法》第二十二条规定，医疗机构的医务人员违反本法规定，将不符合国家规定标准的血液用于患者的，由县级以上地方人民政府卫生行政部门责令改正；给患者健康造成损害的，应当依法赔偿；对直接负责的主管人员和其他直接责任人员，依法给予行政处分；构成犯罪的，依法连究刑事责任。对违反临床用血管理规定，造成传染病扩散的医疗机构，由卫生行政部门按照《中华人民共和国传染病防治法实施办法》第六十六条的规定处理；情节严重构成犯罪的，由卫生行政部门提请司法机关依法处理。 3．对非法出卖、采集、供应血液的单位或个人应给予什么处罚? 第八届全国人民代表大会第五次会议上修订通过的《中华人民共和国刑法》第 333条和第334条对非法组织他人出卖血液的，非法采集、供应血液或者制作、供应血液制品的和血液制品危害他人健康的处五年以上十年以下有期徒刑，并处罚金；造成特别严重后果的，处以十年以上有期徒刑或者无期徒刑，并处罚金或者没收财产。《献血法》第十八条规定对非法采集血液的，非法组织他人出卖血液的违法犯罪行为没收违法所得，并处十万元以下的罚款；构成犯罪的，依法追究刑事责任。4．医院如何作好临床用血开源节流工作？各级医院有责任与义务向广大群众宣传、贯彻《献血法》，普及血液知识，并动员医务工作者带头无偿献血。医院对于需要输血的或提出输血要求的患者，要进行输血前健康教育，既讲清输血对医疗的必要性，又要讲清输血的危险性，杜绝不必要输血。对适合自身输血、亲友互助献血的需要输血的患者，要进行自身储血或互助献血的指导。在保证医疗安全的前提下，减少对异体血的使用。医院要制定临床用血管理制度，严格控制输血指征，合理用血、科学用血，大力推广成分输血。成分输血既能一血多用，节约用血，又能提高疗效，减少输血不良反应。这是开源节流的最好措施。 5．一家医院为何不能同时使用2家或2家以上采供血机构的血液? 采供血机构虽然根据《血站管理办法》（暂行）（卫生部1998年第2号卫生部令）的有关规定，对献血者进行健康体检，对所采集的血液进行检验，但仍不能完全避免经血液途径传播的疾病的发生。当一名患者在一家医院同时使用或先后使用

交叉配血实验笔记

实验八交叉配血试验交叉配血就是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合,观察有无凝集现象(见图4-3-1-1)。输血时,一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集;其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧(也叫直接配血),后者叫交叉配血的次侧(也叫间接配血)。只有主侧与次侧均无凝集,称为“配血相合”,才能进行输血;如果主侧凝集,称为“配血不合”或“配血禁忌”,绝对不能输血;如果主侧不凝集,而次侧凝集,可以认为“基本相合”,但输血要特别谨慎,不宜过快过多,密切注视有无输血反应。【实验目的】学习交叉配血的三种常用方法。【实验对象】人体(学生自愿者)。【实验器材与药品】 1.仪器显微镜,离心机。 2.器械采血针,消毒注射器,双凹玻片,小试管,竹签,棉球,腊笔。 3.药品标准A血清,标准B血清,生理盐水,75％酒精,碘酒。【实验步骤与观察指标】

图4-3-1-1 交叉配血示意图 (一)红细胞悬浮液的配制按需要型别,取全血1ml,加等渗盐水2 ～3ml,充分摇匀离心沉淀,弃去上清液,然后再加生理盐水2 ～3ml按上述方法洗涤,共三次,取压积红细胞5 滴,加新鲜等渗盐水4 ml ,即成5 ％红细胞悬液。(二)交叉配血基本原理见图4-3-1-1示。盐水介质交叉配血试验实验原理天然IGM类血型抗体与对应的红细胞抗原在室温下盐水介质中发生凝集现象。可以检查供、受者血清中就是否存在破坏对方RBC 的IgM抗体(ABO血型中抗A抗B抗体以IgM抗体为主)。实验步骤

取二试管,分别注明“主”、“次”字样,主侧滴入供血者红细胞悬液一滴与受血者血清一滴;次则滴入受血者红细胞悬液一滴与供血者血清一滴。混匀后1000rpm离心1min,取出观察结果。如两侧均无凝集现象,可多量输血;如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血;如主侧凝集则不能输血。低离子聚凝胺介质交叉配血试验实验原理红细胞表面带有大量的负电荷,以避免其产生自发性聚集,当红细胞悬浮在电解质时,阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,形成Zeta电位,Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM),降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞与血清(血浆)中的抗体结合。其后,加入凝聚胺溶液,它就是一种高价阳离子多聚物、肝素中与剂,溶解后能产生很多正电荷,可以中与红细胞表面带有的负电荷,使红细胞Zeta电位降低,缩短红细胞之间的距离,使红细胞产生非特异性的凝聚。最后,加入悬浮液,悬浮液具有中与凝聚胺阳离子的作用,使正常的红细胞非特异性凝聚散开,试验结果为阴性;但如果红细胞被相应的抗体致敏,则会被凝聚胺凝结,凝集就不会散开,试验结果为阳性。实验步骤 1 取试管二支,标主次侧,主侧管加病人血清(血浆)2滴,加供血者

输血单子填写的相关要求

输血病人单子填写的相关要求一、医院输血治疗同意书（医生必须把所有项目填写完整，并且有病人家属签字）二、医院配血试验报告单（试验报告单上两排的空格要求申请医生填写完整，病人血型这一排和表格里的内容、配血者签名、复核者签名、报告日期由化验室的工作人员填写，并在献血员编码处粘有献血员的的编码）我科护士在领血时和化验室的工作人员认真查对： ①血袋装置有无破损有无渗漏； ②血液颜色是否正常； ③血液的有效期是否过期；三、医院临床输血核对记录单核对结果： 1、科别床号姓名性别年龄住院号例如骨外3床何金沛男 2、血型：病人血型为A型 3、医嘱输注血液品种：血浆 4、输注血液量：100ml 5、献血员编码：004799 6、医嘱输注血型编码:医嘱输注A型Rh阳性004799 7、输注血液颜色：检查血液颜色正常 8、血袋外观是否破损、渗漏：检查血袋装置无破损、无渗漏 9、输注血液有效期：在有效期内使用 10、交叉配血试验：与配血试验报告单相符

11、结果：可以进行输血。怎么进行输血单内容的填写？内容填写：输血前核对：骨外3床何金沛男70岁住院号201205892 血型为A型:医嘱输注A型Rh阳性004799血浆100ml检查血液颜色正常，血袋装置无破损、无渗漏，血液颜色正常，与配血试验报告单相符，在有效期内。输血时核对记录骨外3床何金沛男70岁住院号201205892 血型为A型:医嘱输注A型Rh阳性004799血浆100ml检查血液颜色正常，血袋装置无破损、无渗漏，血液颜色正常，与配血试验报告单相符，在有效期内使用，可以进行输血。输血前核对人签字： ⑴医生、护士共同查对交叉配血单和所领的血液包装上的内容是否一致。 ⑵核对人签字（要求是进行核对的医生护士） ⑶核对日期：要求写年月日具体查对的时间（时间一样笔迹各落各的）输血时核对人签字： ⑴要求医生、护士（带病历交叉配血结果单血液）共同到患者床旁完成。 ⑵共同查对病人姓名、性别、年龄、床号与交叉配血单和所领的血

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞等进行交叉配血试验。二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。试验通常包括：（一、）主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；（二、）次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。五、仪器设备

普通离心机；血型专用离心机；六、0.9%氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公司）批准文号：国药准字H51021158；有效期：自生产日期之日起三年；七、检测样本要求 1、标本类型：静脉血(EDTA－K2真空紫头采血管1支+ 普通红头真空采血管1支)。 2、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。 3、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。八、操作步骤 1、将受血者与献血者的红细胞血清分离； 2、分别配制受血者与献血者红细胞配成3 % RBC悬液 3% RBC悬液配制：1滴压积RBC + 1.6 ml（40滴）生理盐水 3、取一次性试管2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。 4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。混匀，以1000r/min离心2min，轻轻侧动试管，观察结果。冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。 5、结果判断： ABO同型配血，主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌，可

现代医院临床输血操作流程

现代医院临床输血操作流程一、临床输血·医师： 1、严格掌握输血指征，履行告知义务。 2、进行输血前9项检查，填写书写申请单（通知血库）。交叉配合单（病历归档）输血不良反应当（检验科存档）。输血治疗风险同意书（病历归档）。 3、输血过程中，密切观察病人病情变化，观察5分钟、15分钟30分钟患者反应，异常反映立即停止输血，及时处理并在并在病档中详细如实记录，上报医务科。 4、填写不良反应报告单。 5、一次性输血超过2000ml，请上级医生会诊并报告院领导审批。 6、手术室输血由麻醉师负责。二、临床输血·护理: 1、护士协助医生做输血前9项检查工作、负责核对患者，并向患者及家属做解释工作。 2、将交叉配血单及采血管核对患者信息，无误后采血。（核对四项） 3、由医护人员将4单及血标本一起送至检验科，核对后双签名。 4、取回血后，护士与检验科人员共同核对患者与血样信息并双签名。 5、血液恢复室温后输入，输血时两名护士携病历到床边核对病人基本信息及9项检查，将血袋上备查条码粘于交叉配合血报告单上，方能输血，调滴数10—15滴/分。并交代输血注意事项。 6、观察输血十五分钟后调整滴数，填写护理记录，记录5分钟、15分钟30分钟输血情况，详细记录输血时间、血型、核对者等。 7、随时观察输血后反应及变化，发生异常及时报告值班医生，并记录。 8、输血完毕当班护士再核对无误后，将血袋置入黄色污物袋内并填写护理记录签名（血输完时间，有无输血反应，病人有无不适）。 9、将储存血袋的污物袋和医生填写的《输血不良反应报告单》在24小时内，送至检验科保存，核对后双签名。三、临床输血·检验科： 1、检验科接到医护人员送来的输血申请单后，双方逐项核对后送血库备血。 2、取血回来后，检验科逐项对受血者和供血者血样复查，受血者和供血者ABO血型（正反定型），并常规检查患者Rh血型，正确无误时可进行交叉配血。 3、交叉配血实验由两人互相核对并签字。 4、检验科发血，由有资质护士及检验医生，双方共同查对患者姓名、性别、病案号、病室、床号、血型、血液有效期及交叉配血，以及保存血液外观等，双签字后方可发出，将血袋上条码粘于输血申请单上。 5、血液发到后，受血者和供血者血样保存至少7天。 6、检验科详细登记交叉配血登记表，血液入出库登记表，合血标本验收登记表及血袋回收处理登记并备案。注：输血前9项检查为：AlT、HBsAg、抗HBs抗体、HBeAg、抗HBe抗体、抗HBc抗体、Hcv、HIv梅毒四单:临床输血申请单，交叉配血实验报告单、输血不良反应回报单、输血治疗同意书。查对9项内容：姓名、性别、年龄、住院号、病案、床号、血型、血液报告、血液有效期。

交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程 1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。 2范围：患者的血液标本与供血者标本。 3职责： 3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。 3.2血库进行交叉配血试验。 4所用设备与试剂 4.1BY-320A离心机 4.2聚凝胺介质试剂 5原理：红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液（Resuspending）,Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。

6操作将受血者、供血者的标本选择工况3分离血清及血浆待用。用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次） 6.1盐水介质交叉配血试验： 6.1.1取小试管2支标记主、次侧。主侧管：受血者血清（PS）100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC） 6.1.2将上述试管混匀后，放入离心机，选工况1 6.1.3取出试管，观察上清液是否溶血，如果没有溶血，然后轻轻晃动试管，肉眼观察结果。 6.1.4结果判定： 6.1.4.1肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性、配血结果不相合，无凝集为阴性、配血结果相合。 6.1.4.2对于不能明显判定为阴性而未达到任何阳性凝集的反应，可通过显微镜进一步判断。镜下有红细胞凝集的反应为阳性，配血结果不能相合。无凝集为阴性，配血结果相合。 6.1.4.3如果试验在室温进行，若有凝集产生，可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开，以排除冷凝激素造成的凝集影响测定结果。 6.1.5注意事项：如果盐水介质配血结果阴性，可将原标本接着做凝聚胺法配血。 6.2凝聚胺介质交叉配血试验：

交叉配血操作规程(凝聚胺法)

交叉配血操作规程（凝聚胺法）一．目的规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。二．适用范围适用于临床配血标本。三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需材料和设备材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤 1.凝聚胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液 1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～ 5%的红细胞悬液1滴混匀。（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）

（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。（9）结果判定如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min可能变为阴性。六．注意事项 1.配血技术 ①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血； ②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。 2.主侧交叉配血不相合的原因 ①患者或供者ABO血型定型不正确，或二者的ABO血型不配合； ②患者血清中存在同种抗体，与供者红细胞上的相应抗原起反应；③患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞中的相应抗原起反应；④供者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白阳性； ⑤患者血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性（用盐水添加试验来解决）； ⑥试验系统被污染。 3.次侧交叉配血不相合的原因 ①供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体； ②患者与供者的ABO血型不相合； ③患者红细胞已经包被了抗体，直接抗球蛋白试验阳性。