皱纹盘鲍延绳式养殖技术

皱纹盘鲍细胞培养基及细胞系的构建方法与制作流程

本技术提供了一种皱纹盘鲍细胞培养基，是以L15培养基为基础，并添加无机盐、生长因子、L谷氨酰胺、虾青素、γ氨基丁酸、羧甲基葡聚糖、牛磺酸、氢化可的松、皱纹盘鲍贝壳水提物、胎牛血清以及抗生素等组分。本技术还提供了一种皱纹盘鲍细胞系的构建方法，是以皱纹盘鲍心脏组织为材料，采用机械解离法获得单细胞，重悬于上述细胞培养基中进行原代培养，继而成功构建皱纹盘鲍心脏细胞系。本技术培养基及方法可以很好地维持皱纹盘鲍心脏细胞在体外的存活和生长，构建的细胞系具有连续传代的能力。本技术显著提高了皱纹盘鲍心脏细胞体外培养的存活率，延长了其体外培养的时长，具有快速易操作、稳定易重复的特点。 权利要求书 1.一种皱纹盘鲍细胞培养基，其特征在于，所述培养基以L-15培养基为基础培养基，并添加如下终浓度的组分：NaCl 10.0-14.0g/L，KCl 0.3-0.6g/L，ZnSO4 0.2-0.4g/L，MgCl20.8- 1.2g/L，CaCl2 0.1-0.2g/L，KH2PO4 50-70mg/L，葡萄糖0.8-1.2g/L，碱性成纤维生长因子15-20ng/mL，表皮生长因子3-5ng/mL，L-谷氨酰胺0.25-0.35g/L，虾青素20-30μmol/L，γ-氨基丁酸16-20mg/L，羧甲基葡聚糖45-55mg/L，牛磺酸37-43mmol/L，氢化可的松1.7- 2.3mg/L，皱纹盘鲍贝壳水提物50-70mg/L，胎牛血清10%，青霉素钠100IU/mL，硫酸链霉素100μg/mL，亚胺培南10μg/mL。 2.根据权利要求1所述的一种皱纹盘鲍细胞培养基，其特征在于，所述培养基的pH值为7.0-7.4。 3.根据权利要求1所述的一种皱纹盘鲍细胞培养基，其特征在于，所述培养基的渗透压为900-1100mOsm/kg。 4.根据权利要求1所述的一种皱纹盘鲍细胞培养基，其特征在于，所述培养基配制完成后，采用0.22μm滤膜过滤除菌，4℃冷藏备用。