生化实验注意事项

日常使用注意事项

1 离心机要放在平坦和结实的地面或实验台上，不允许倾斜；

2 通常离心机都会有登记表，请在使用前确实登记使用者、转头、转速、时间；

3 离心管一定要用天平平衡重量（重量平衡），盖上离心管盖子并旋紧；

4 把平衡好的离心管对称地放入离心陀中（位置平衡），盖上离心陀的盖子，注意有无旋紧；

5 完成离心时，要等待离心机自动停止，不允许用手或其他物件迫使离心机停转，待转头完全静止后，才能打开舱门，请尽快取出离心管，先观察离心管是否完全，以及沉淀的位置，尽速把上清倒出，小心不要把沉淀弄混浊。

1、样品测试前的准备

1)打开电源开关，使仪器预热20分钟。（注：仪器自检，样品室不可有东西档住光路）

2)设置分析波长。

3)打开样品室，放入档光体，推或拉入光路，盖好盖，用“MODE”选透过率方式T，调

0%T。（注：一般仪器不关机，不用重调）

4)取出当光体，盖好盖，调100.0%T。（注：重新设置波长，必须调整100.0%T）

2、测试样品的透射率

1)用“MODE”选透过率方式T

2)波长设置（注：玻璃比色皿:波长340nm-1000nm;石英比色皿：波长190nm-340nm）

3)调100.0%T

4)将参比液和被测液倒入比色皿中（注：液面高度≥25mm，样品中不能有气泡和悬浮物，

比色皿光面不能有指纹、溶液痕迹、划痕，比色皿需经测试匹配）

5)将比色皿放入比色槽中，盖样品室盖（注：参比样品放在第一槽位）

6)将参比液推入光路中，调100.0%T（注：显示“BLA”，调整完显示100.0）

7)将被测液推入光路中，显示器显示透射率:xxx.x

3、测试样品的吸光度

1)用“MODE”选吸光度方式A

2)波长设置（注：玻璃比色皿:波长340nm-1000nm;石英比色皿：波长190nm-340nm）

3)调零ABS

4)将参比液和被测液倒入比色皿中（注：液面高度≥25mm，样品中不能有气泡和悬浮物，

比色皿光面不能有指纹、溶液痕迹、划痕，比色皿需经测试匹配）

5)将比色皿放入比色槽中，盖样品室盖（注：参比样品放在第一槽位）

6)将参比液推入光路中，按100.0%T，调ABS（显示“BLA”，调整完显示0.000） 7)

将被测液推入光路中，显示器显示吸光度:x.xxx

移液器使用注意事项

(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。

(2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差。

(3)浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。

(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1ml蒸馏水20℃时重0.9982g。

(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。

(6)移液器未装吸头时，切莫移液。

所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。 数字清清楚楚在显示窗中， 旋转到所需量程 (7)在设置量程时，请注意

(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。

(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。

(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。

实验原理：根据欲配制的溶液的体积和溶质的物质的量浓度，用有关物质的量浓度的计算方法，即n=C B×V、m=n×M，求出所需溶液的质量，在烧杯内用少量水将溶质溶解，在容量瓶内用水稀释为规定的体积，既得所配置的溶液。

实验步骤：

1、计算：n=C B×V=1.00mol×0.1L=0.1mol，m=n×M=0.1mol×58.5g mol-1=5.85g

2、称量：用托盘天平称取NaCl 5.9g，因为托盘天平精确0.1g。

注意：如果比较准确的配制溶液，应选用分析天平，分析天平的精确度比托盘天平高。

3、溶解：把称得的5.9gNaCl固体放入烧杯中，加入适量的蒸馏水溶解，溶解时用玻璃棒搅拌。

注意：如果溶质在溶解过程中放热，要待溶液冷却后再进行转移。因为容量瓶上已标明在一定温度下的正确体积（20℃，250ml），其含义是，只有当液体的温度与容量瓶上标出温度相同时，量出的体积才是准确的，这是因为，不管是容量瓶还是液体都存在热胀冷缩现象，而且程度不同。

4、转移：将烧杯内冷却后的溶液沿玻璃棒小心转入一定体积的容量瓶中。

注意：玻璃棒下端应靠在容量瓶刻度线下方，因为配溶液时，加水只加到刻度线，如果先加入的溶液部分残留在刻度线以上，那么溶液浓度会偏低。

5、洗涤：用蒸馏水洗涤烧杯内壁和玻璃棒2-3次，并将洗涤液转入容量瓶中，轻轻摇动容量瓶，使溶液混合均匀。

注意：烧杯内壁和玻璃棒要洗涤2-3次，如果有溶液残存，会使配制溶液浓度偏低。

6、定容：向容量瓶内加水至刻度线以下1-2cm处时，改用胶头滴管加水，使凹液面最低处恰好与刻度线相平。

问题：如果水定容时超过了刻度线，能否将超出部分再吸走？如果这样操作，会导致配制的溶液浓度怎样变化？

7、摇匀：盖好瓶塞，用食指顶住瓶塞，另一只手的手指托住瓶底，反复上下颠倒，使溶液混合均匀，最后将配制的溶液倒入试剂瓶中，贴好标签。

问题：盖上瓶塞摇匀后，液面低于刻度线，能否向其中加水？

使用容量瓶时应注意以下几点：

（1）将容量瓶倒转后，观察是否漏水，再将瓶塞旋转180度观察是否漏水。在瓶中放水到标线附近，塞紧瓶塞，使其倒立2min，用干滤纸片沿瓶口缝处检查，看有无水珠渗出。如果不漏，再把塞子旋转180°，塞紧，倒置，试验这个方向有无渗漏。这样做两次检查是必要的，因为有时瓶塞与瓶口，不是在任何位置都是密合的。

（2）不能在容量瓶里进行溶质的溶解，应将溶质在烧杯中溶解后转移到容量瓶里。容量瓶只能用于配制溶液，不能储存溶液，因为溶液可能会对瓶体进行腐蚀，从而使容量瓶的精度受到影响。

（3）用于洗涤烧杯的溶剂总量不能超过容量瓶的标线，一旦超过，必须重新进行配置。

（4）容量瓶不能进行加热。如果溶质在溶解过程中放热，要待溶液冷却后再进行转移，因为温度升高瓶体将膨胀，所量体积就会不准确。