仪器分析作业题 外标法内标法

一、外标一点法

【含量测定】芍药苷照高效液相色谱法（附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05mol ／L 磷酸二氢钾溶液(40：65)为流动相；检测波长为230nm 。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备 取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含0.5mg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品粗粉约0.5g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml ，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl ，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含芍药苷(C 23H 28O 11)不得少于1.8％。

解：设测得对照品溶液和供试品溶液峰面积为A 对=550000 A 样=7800

已知对照品溶液浓度C 对=0.5mg/ml

ml /mg 0071.0ml /mg 5.0550000

7800)(===）（对对样样C A A C

mg 5.177l

101000ml 25l 10ml /mg 0071.0V C m =⨯⨯⨯==μμ样样样

供试品中芍药苷的含量

X%=

%5.35%1001000

g 5.0mg

5.177=⨯⨯ 药典规定药材含芍药苷(C 23H 28O 11)不得少于1.8％，供试品中芍药苷的含量为35.5%，故供试品药材合格。 二、外标两点法

【含量测定】 黄芪甲苷 照高效液相色谱法（附录Ⅵ D ）测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(32：68)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不

低于4000。

对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含0.5mg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品中粉约4g ，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml ，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml ，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml ，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml ，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml 使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm ，柱高为12cm)，以水50ml 洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml 洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇80ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液10μl 、20μl ，供试品溶液20μl ，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。

本品按干燥品计算，含黄芪甲苷(C 41H 68O 14)不得少于0.040％。

解：设测得对照品溶液色谱峰面积分别为A 1=259457 A 2=523039，测得供试品溶液色谱峰面积A 3=2983。

已知对照品浓度C 对=0.5mg/ml ，对照品进样量

g 5mg 005.0l 10ml /mg 5.0m 1μμ==⨯= g 10mg 01.0l 20ml /mg 5.0m 2μμ==⨯=

根据对照品峰面积和进样量可得如下图所示方程即y=2.6e+5x-4125，得a=2.6e-4125，b=5

供试品溶液峰面积A 3=2983.带入方程，得到供试品溶液进样量m 3=1420μg=0.00142g 供试品中黄芪甲苷含量为

%875.8%1004201000

500142.0%=⨯⨯⨯

=g l

m l g X μ

药典中规定药材干燥品种含黄芪甲苷(C 41H 68O 14)不得少于0.040％，供试品中黄芪甲苷含量为8.875%。故供试品药材合格。

三、内标法

【含量测定】 照气相色谱法(附录ⅥE)测定。

色谱条件与系统适用性试验 聚乙二醇20000(PEG-20M)毛细管柱(柱长为30m ，内径为0.53mm ，膜厚度为1.0µm)，柱温为160℃。理论板数按樟脑峰计算应不低于20000。

校正因子的测定 取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml 含4mg 的溶液，作为内标溶液。另取樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品各30mg 、10mg 、20mg ，精密称定，置同一50ml 量瓶中，精密加入内标溶液5ml ，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取lµl，注入气相色谱仪，计算校正因子。

测定法 精密量取本品1ml ，置50ml 量瓶中，精密加入内标溶液5ml ，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1µl，注入气相色谱仪，测定，冰片以龙脑峰、异龙脑峰面积之和计算，即得。

本品每1ml 中含樟脑(C10H16O)应为25.5～34.5mg ；含薄荷脑(C10H20O)应为8.5～11.5mg ，含冰片(C10H18O)应为17.0～23.0mg 。

解：（1）校正因子的测定 设测得萘及樟脑、薄荷脑、冰片对照品溶液的峰面积分别为A 萘=180000，A 樟脑=450000，A 薄荷脑=500000，A 冰片=520000。由题已知萘及各对照品溶液浓度分别为C 萘=4mg/ml ，C 樟脑=0.6mg/ml,C 薄荷脑=0.2mg/ml C 冰片=0.4mg/ml 。 据公式对

对内

内

C A f A C =

可得

17.0ml

/mg 6.0450000

ml

/mg 4180000

===

樟脑

樟脑

萘萘

樟脑C

A C A f