高中生物实验(必考)超详细

实验一观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26）一．实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法

二．实验原理：

1．甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。

2．盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA 与染色剂结合。

三．方法步骤：

后才换用高倍物镜观察

实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）

一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。如：

加热

葡萄糖+ Cu ( OH ) 2葡萄糖酸+ Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。）

三．实验材料

1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）

2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。

3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

四、实验试剂

斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。

五、方法步骤：

操作方法注意问题解释

1. 制备组织样液。

（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，

组织液很易被氧化成褐色，

将产生的颜色掩盖。

2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。

3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液

分别配制、储存，使用前才将甲、

乙液等量混匀成斐林试剂；

切勿将甲液、乙液分别加入苹果

组织样液中进行检测。

斐林试剂很不稳定，甲、乙

液混合保存时，生成的Cu

( OH ) 2在70~900C下分解

成黑色CuO和水；

甲、乙液分别加入时可能会

与组织样液发生反应，无

Cu ( OH ) 2生成。

4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使

试管底部不触及烧杯底部，试管

口不朝向实验者。

防止试管内的溶液冲出试

管，造成烫伤；

1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，

而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。

考点提示：

（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？

（2 ）还原性糖植物组织取材条件？

（3）研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？

（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？

（5）还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：

（6）花生种子切片为何要薄？

（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？

（8）脂肪鉴定中乙醇作用？

（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？

（1）葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

（2 ）含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。（3）加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

（4）混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。

（5）浅蓝色棕色砖红色

（6）只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。

（7）切片的厚薄不均匀。

（8）洗去浮色。

（9）不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。

实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）

一．实验目的：

使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。

二．实验原理：

叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。

线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。

健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。

三．实验材料：

观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。

若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。

1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？

答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。

2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？

答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。

实验六观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一P61“探究”）

一、实验目的：

1．学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。

2．了解植物细胞发生渗透作用的原理。

二．实验原理：

1．质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。2．质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

二、实验材料：

紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。

1．如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？

答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。

2．当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？答：不会。因为红细胞不具细胞壁。

考点提示：

（1）洋葱为何要选紫色的？若紫色过淡怎么办？

（2）洋葱表皮应撕还是削？为何？

（3）植物细胞为何会出现质壁分离？

（4）质壁分离时，液泡大小和颜色的变化？复原时呢？

（5）若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么？

（6）高倍镜使用前，装片如何移动？

（7）换高倍物镜后，怎样使物像清晰？视野明暗度会怎样变化？如何调亮？

（8）所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系？

（9）物像清晰后，物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系？

（10）总放大倍数的计算方法？放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数？

（11）放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系？

（12）更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上；更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。

（13）怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度？

（1）紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化；缩小光圈，使视野变暗些。（2）表皮应撕不能削，因为削的表皮往往太厚。

（3）当细胞失去水分时，其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性；动物细胞不会发生质壁分离，因为动物细胞没有细胞壁。

（4）细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深；当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。

（5）细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长）（6）若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，因为显微镜视野中看到的是倒像。

（7）换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清晰；视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。

（8）目镜越长，放大倍数越小；物镜越长，放大倍数越大。

（9）物镜与载玻片之间的距离越小，放大倍数越大。

（10）总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积；放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。

（11）放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。

（12）更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上；更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。

（13）①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。

实验七探究影响酶活性的因素（必修一P78、P83）

一．实验目的：

1．探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。

2．培养实验设计能力。

二．方法步骤：

提出问题→作出假设→设计实验→（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）→实施实验→分析与结论→表达与交流。

实例1：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率

一）．实验原理：

鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。

①实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。肝脏如果不新鲜，肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解，使组织中酶分子的数量减少且活性降低。

②实验中使用肝脏的研磨液，可以加大肝细胞内过氧化氢酶与试管中过氧化氢的接触面积，从而加速过氧化氢的分解。

考点提示：

（1）为何要选新鲜的肝脏？

（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？为什么？

（3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？

（4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？为什么？

（5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？为什么？

（1）因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。

（2）应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。（3）因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。

（4）研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。

（5）不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。

酶的专一性

（1）方案一：用同一种酶催化两种不同物质

淀粉（非还原糖）麦芽糖（还原糖）

淀粉酶

①

淀粉酶