食品卫生微生物检验学2

食品卫生微生物检验学

斌 liubin618hotmail.引言

国外食品安全形势严峻，恶性事件不断发生。欧洲“二噁英”、“疯牛病”（20世纪90年代）日本大肠杆菌O157:H7中毒（1996）

中国SARS（2003）东南亚国家禽流感（2004）美国菠菜大肠杆菌O157:H7污染事件（2006）第一章绪论

主要学习容:

1.食品中的微生物

2.食品卫生标准的容

3食品微生物检验的意义

4.食品微生物检验的围

5.食品卫生标准中的微生物指标

第一节、食品中的微生物

---来自土壤

自然界中微生物的分布极为广泛，水中、高山、海底、荒漠、极地、空气等到处都生存着各种各样、形形色色的微生物。

土壤是微生物的天然培养基，它具备微生物正常发育所必须的一切条件：土壤中含有一定的无机物和有机物；土壤中含有适当的水分；大多数中性偏碱,适合大多数微生物生长；土壤中还含有气体，主要是CO2、O2和N2；温度变化不大（10-25℃）。

土壤中含有大量的微生物，土壤中的细菌来自天然生活在土壤中的自养菌和腐物寄生菌以及随动物排泄物及其尸体进入土壤的细菌。

土壤中微生物的分布：表层受日光照射和干燥的影响，不利于其生存，所以细菌数量少，离地面10-20厘米土层微生物最多.土层

越深，菌数越少。

－－来自水源

水也是微生物存在的天然环境，水中的细菌来自土壤、尘埃、污水人畜排泄物及垃圾等。水中微生物及数量因水源不同而异。

受到污染的水中含有大量的有机物，适合微生物的生存。静水中的微生物多，流水中的少；离岸近处微生物多，离岸远处少；经过大城市的河流，水受到污染，含有大量的粪便.并含有大量的致病菌。

井水和泉水中细菌少，雨水、雪水中也少，城市上空的雨水细菌多，乡村上空雨水细菌少。.国家规定，自来水中，细菌总数每毫升不得超过100个，大肠菌群不得超过3个/升.

－－来自空气

在冬春季节，更容易发生感冒等传染病，就是因为空气的传播，特别是在公共场所，人多，空气流通差，细菌多；

大城市上空微生物数量最多，乡村少；森林、草地和田野上空空气清洁，海洋、高山冰雪覆盖的地面上空，微生物更为稀少。雨后空气特别新鲜。

－－来自人体

人自出生后，外界的微生物就逐渐进入人体。在正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种控道（如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位，存在着对人体无害的微生物群，包括细菌、真菌、螺旋体、支原体等。皮肤：表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等

口腔：球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等

胃：正常一般无菌

肠道：类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破伤风杆菌、气荚膜杆菌等

鼻咽腔：甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等

眼结膜：皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等

微生物引起食品腐败变质

食品中含有蛋白质，脂肪，碳水化合物，这些成份是微生物的生长基质，所以微生物在食品中能够生长繁殖。食品腐败变质的原因有物理学、化学、生物化学殖。食品腐败变质的原因有物理学、化学、生物化学和微生物学方面的原因，但最普遍、最主要的因素是微生物。

环境中无处不存在微生物，食物在生产、加工、运输、储存销售过程中，很容易被微生物污染。只要温度适宜，微生物就会生长繁殖，分解食物中的营养素，以满足自身需要。这时食物中的蛋白质就被破坏了，食物会发出臭味和酸味，失去了原有的坚韧性和弹性，颜色也会发生变化从而造成食品变质。

第二节、食品卫生标准的容

1.感官指标.

2.理化指标.

3.微生物指标.

微生物指标：

菌落总数

大肠菌群

致病菌等

第三节、食品微生物检验的意义

（一）有害微生物对人类和生产的影响

1.引起食品变质.

2.引起食物中毒.

3.导致人体患病.

(二)、食品微生物检验的意义

1.是衡量食品卫生质量的重要指标,也是判定被检食品能否食用的科学依据

2.可以判断食品加工环境及食品卫生的情况,为卫生管理工作提供科学依据.

3.可以有效地防止或减少食物中毒和人畜共患病的发生.

4.保证产品的质量,避免不必要的损失.

第四节、食品微生物检验的任务及围

任务：

通过测定微生物指标，判断食品在加工环境和食品原料及其在加工过程中被微生物污染及生长的情况，为食品环境卫生管理和食品生产管理及某些传染病的防疫措施提供科学依据。

围：

1.生产环境的检验

2.原辅料的检验

3.食品加工、储藏、销售储环节的检验

4.食品的检验（重点）

第五节、食品卫生标准中的微生物指标

1.菌落总数

2.大肠菌群

3.致病菌

4.霉菌及其毒素

5.其他指标

一、细菌总数与食品卫生质量评定

细菌总数是指在普通营养琼脂培养基上在一定条件下（需氧情况下，36±1℃，48±2h）培养长出的菌落总数。

以1g或1平方厘米表面积或1毫升含有的菌落总数来表示。细菌总数的食品卫生学意义

作为食品被污染程度的指标，反映食品的新鲜程度；预测食品的存放期限、食品生产过程中变质与否、食品生产过程中的一般卫生状况。

菌落总数：是指在被检样品的单位重量(g)、容积(ml)或表面积(cm2)，所含能在严格规定的条件下(培养基及其PH、培养温度与时间、计数方法等)培

养所生成的细菌集落总数.

二、大肠菌群与食品卫生质量评定

什么是大肠菌群？

是指一群好氧及兼性厌氧、在37℃、24h能分解乳糖产酸、产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。

大肠菌群已被许多国家用作食品卫生质量评价的指标菌。一般认为，大肠菌群都是直接或间接来自人与温血动物的粪便。

检测大肠菌群的食品卫生意义：

在粪便中的数量最大，可作为粪便污染食品的指示菌。在外界存活期限与肠道致病菌存活期大致相同，可作为肠道致病菌污染食品的指示菌。

检验技术要求不高。

大肠菌群

目前该项指标已被广泛应用于食品生产中卫生质量方面的指标菌，其数量是采用相当于100g或100ml食品中的可能数来表示，或称大肠菌群最近似数(Maximun Probable N umber,MPN)。大肠菌数的高低，表明粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。典型大肠杆菌代表粪便的近期污染，非典型的可能为粪便的旧污染。

三、致病菌与食品卫生质量评定

所有食品均不得检出致病菌

病原菌种类：国家食品卫生标准中要求检验的病原菌至少有15中，食品种类繁多，只能根据不同食品可能污染情况针对性的重点检查。

蛋、禽类、肉类必须检测沙门氏菌。

低酸性罐头必须检测肉毒杆菌及其毒素。

水产品一般检测副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌等。

四、食品中的细菌菌相与食品卫生质量

细菌菌相是指共存于食品中的细菌种类及其相对数量的构成。

食品在细菌作用下所发生的变化程度和特征，尤其是变化特征主要决定于菌相，特别是优势菌种。

复习题目

1、食品的卫生标准容包括哪些？

2、对食品进行微生物检验具有何意义？

3、食品微生物检验的围包括哪些？

4、食品卫生标准中的微生物指标有哪些？

第二章食品微生物检验的基本条件的与设备

学习目标：

1）了解微生物检验室的基本要求通过学习能独立建设一般的食品微生物检验室。

2）认识和熟悉微生物检验中常用仪器设备（尤其是普通光学显微镜）及其结构与性能，能正确使用和进行一般的维护。

3）认识和熟悉微生物检验中常用玻璃器皿，掌握灭菌消毒的技术要求。

第一节微生物检验室

微生物检验室要求高度清洁卫生，要尽可能地为其创造无菌条件。为达此目的，房屋的墙壁和地板，使用的各种家具都要符合便于清洗的要求。

一、检验室建设要求

选址与规模

（1）化验室应建设在远离粉尘、噪声、散发异味气体等地点电源电压应当相对稳定的地点。根据企业规模和产品点，应建设不同要求的化验室。但是，最小建筑面积：理化检验室不能小于30平方米；微生物检验室（无菌室）不能小于8平方米。这样有助于仪器设备的合理摆放，便于操作，便于样品流通和空气流通。

（2）室应有足够的照明条件。

（3）室必须配置干粉或二氧化碳灭火器，以备电器或化学品燃烧灭火使用。

（4）所有电器插坐均应有牢固的地线装置，以防止设备带电，造成操作人员触电事故。有条件的还应在地面铺设绝缘胶板。其次还应必须有上下水设施、通风橱（在通风橱进行对发生出有害气体的分析操作）。

室的布局

(1)动仪器与静仪器分开：精密仪器（如光度计、天平、比色计、酸度计、色谱仪等）应必须与震动仪器（如震荡器、验粉筛、离心机、搅拌器等）。

(2)常温与热源设备分开：热源仪器（如电热蒸馏水器、恒温干燥箱、高温电阻炉、恒温培养箱、水浴锅、电炉等）必须与其它一切设备分开，不然会影响其它设备的正常使用，严重的会造成热蒸汽腐蚀其它设备，影响其使用寿命。

(3)化学分析台与热源设备分开：化学分析台面上应尽量少放易燃和腐蚀性试剂。使用电炉或酒精灯加热时应坚持有人看管和监视。化学分析台的摆放应远离热源设备。

化验室应建立可行的规章制度：化验室人员工作管理制度、标准管理制度、危险化学试剂的管理制度、检验过程的管理制度、检测设备检定管理制度

1、新建无菌室的处理程序

先用3%的煤酚皂擦洗工作台面及地面，再用甲醛加高锰酸钾熏蒸空气。日后要定期熏蒸；

每两星期用酒精棉球擦拭紫外线灯管；

每次使用无菌室前用紫外灯照射30～60分钟；

每次使用完无菌室后，要及时用3%的煤酚皂擦洗工作台面及地面。

2、超净工作台的使用

使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面然后用消毒剂擦拭消毒。

接通电源，提前50分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区工作台表面积累的微生物，30分钟后，关闭紫外灯，开启送风机

工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰

操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。

最后开启工作台紫外灯，照射消毒30分钟后，关闭紫外灯，切断电源。

每二月用风速计测量一次工作区平均风速，如发现不符合技术标准，应调节调压器手柄，改变风机输入电压，使工作台处于最佳状况。

每月进行一次维护检查，并填写维护记录。

每次使用完毕，立即清洁仪器，悬挂标识，并填写仪器使用记录。

取样结束后，先用毛刷刷去洁净工作区的杂物和浮尘，用细软布擦拭工作台表面污迹、污垢目测无清洁剂残留，用清洁布擦干；要经常用纱布沾上酒精将紫外线杀菌灯表面擦干净,保持表面清洁,否则会影响杀菌能力；设备外表面应该光亮整洁，没有污迹。

一、常用仪器及其使用

.显微镜 .冰箱 .超净工作台、杀菌锅

.离心机 .水浴锅、培养箱 .烘箱或干燥箱

.匀质器 .各种玻璃器材

（一）显微镜

普通显微镜的保养

1、观察完后，移去观察的载玻片标本。

2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭2—3次，最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。

3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。

4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。

（二）、培养箱

1.智能隔水恒温培养箱

2.隔水培养箱

3.电热培养箱

4.生化培养箱

1、普通恒温培养箱

卧式恒温振荡培养箱

智能培养箱

微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能，镜面不锈钢胆，外门层用一层门，观察箱情况时不影响箱温度。9000系列隔水式加热方式，具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。隔水式培养箱

.隔水式培养箱数字控温，不锈钢胆，

俗称水夹套培养箱。温度均匀，断电后仍

能保持较长时间恒温。

电热恒温培养箱

2生化培养箱

3、二氧化碳培养箱

培养箱的配置和使用

配置：22（℃）、30（℃）、37（℃）培养箱各一个

使用注意事项：

(1)箱不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。

(2)放一杯水，以保持湿度。

(3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。

(4)每月消毒一次，先用3%的来尔液涂布消毒，再用清水擦净。

(5)不得当烘箱使用。

4、水浴锅

（1）37 ℃和42 ℃水浴锅24小时工作；

（2）其余水涡锅用后关掉电源；

（3）水浴锅应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。（三）匀质器

无菌均质器

该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交叉污染。（四）、超净工作台

三大类型：侧流式、直流式和外流式

超净台的使用和注意事项

1使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间40—60分钟

2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭；

3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物；

4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯；

5、请做好使用记录。

6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系，尽早排除故障。

7学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。

（五）离心机

.离心机的类型：.普通离心机.高速离心机.超速离心

转子

许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。

.1．水平转子：盛样品的离心管放在吊桶，以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。

.2．角式转子：许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短，沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。

.3．垂直管转子：用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。

（六）、灭菌器

.干热灭菌器

.湿热灭菌器

1、电烘箱（干燥箱）

用途：

用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。

玻璃器皿等物的灭菌，温度160—165℃，温度160~165℃，灭菌2小时。

玻璃器材的干热灭菌方法

(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。

(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。

(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。

(4)待箱空气排出到定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160℃—165℃保持2小时即可。(5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取

出玻璃2、高压灭菌锅

.用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。

.种类：手提式、立式、卧式杀菌锅

大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法

1.放干消毒锅的剩余水，加入纯净水至最高水位；

2.放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针拨至“关”；

3.选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电源；

4.当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止；

5.当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。

使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项

A：为避免烫伤，只有当温度降低到70℃以下时放可小心的打开消毒锅门。

B：为避免消毒锅冷却后消毒室产生负压而打不开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70℃时就可慢慢把门打开。

C：根据消毒物品选择排气方式：

（1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。

（2）.如只有废品等可选择快排。

手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法

（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。

（2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。

（3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅的空气，再关闭活门。

（4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。

（5）、稍微打开一点排气活门，使锅蒸气缓慢排除。（6）、当压力表指针降到零、锅蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。

（7）、最后将高压灭菌器的剩余水排出。

思考题

.干热灭菌和高压蒸汽法适用围如何?

.电热烘箱和高压锅如何操作?各有哪些使用注意事项?

3、滤菌器

（七）、普通冰箱冰柜

1、取用冰箱冰柜物品尽可能快，取完后及时将有用物品放回原处；

2、关冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往外拉一下

检查是否关好;

3、冰柜的不要样品应及时清理。

快速自动菌数导电测定仪

1、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化，或利用菌体在代过程中的产物所造成的导电度变化，快速测定样品中细菌含量数目。

2、适用于各种食品，制药，石化工厂的微生物品质管理，取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。细胞/颗粒分析计数仪

细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作，避免人工操作的误差数据精确，省时省力是您作细胞研究的好助手，是研究细胞的更高层次的选择

二、常用玻璃仪器及用具

（一）量器类

1、移液管

1ml，2ml，5ml，10ml，25ml

2、容量瓶

50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml

3、量筒

容量（ml）10、25、50、10、25、500、1000、2000

4、微量取样器

（二）、其他常用玻璃器皿

1、培养皿

3.5cm,7cm，9cm，15cm

2、试管

各种试管的使用

. 13mmX100mm：生化反应及凝集反应

. 15mmX150mm：斜面培养

. 18mmX180mm：检样稀释

3、三角瓶

型号150ml，200ml，250ml，500ml，1L，2L，3L烧杯

容量（ml）：

30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、3000

三、玻璃器皿的清洗和灭菌

(一)、新购的玻璃器皿

1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。

2、再浸泡于１～２％的盐酸中数小时，最后用流水冲净。

(二)、用过的玻璃器皿1、含油脂器材的清洗

（1）、单独高压灭菌；

（2）、趁热倒去污物；

（3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100 ℃烘箱中烤0.5h;

（4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。

2、含菌试管的清洗

.高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。3、含菌平皿的灭菌

（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌；

（2）、趁热倒去污物；

（3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。

4、含菌吸管的清洗

（1）、把含菌吸管投入3%的来尔液浸泡30min以上杀菌；

（2）、用肥皂水洗涤一次；

（3）、最后用清水冲洗干净即可。

5、载玻片及盖玻片的清洗

（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5 %的来尔液浸泡过夜，取出水洗干净；

（2）盖片用软布擦干即可；

（3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。

（三）、玻璃器材的灭菌

（1）清洗后烘干；

（2）加塞包扎；

（3）灭菌:

干热灭菌:160 ~165℃烘箱中烤2h

思考题

1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题?

2、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题?

3、如何正确使用超净台?

4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌?

5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法

6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?

第三章培养基和实验基本操作技术

第一节培养基

一、培养基中的主要成分及其作用

（一）、营养物质

N源、C源、无机盐、生长因子、水

1、常用的N源物质

蛋白胨

牛肉膏

肉浸汁

酵母膏

（1）蛋白胨

有：普通蛋白胨和胰蛋白胨

（2）牛肉浸液

成份：

含氮物：肌酸、嘌吟、核苷酸尿酸肌肽等

糖类物质：葡萄酒3肝糖、肝糖、P--已糖

生长因子：硫胺、核黄素、泛酸、叶酸等8种B 族维生素

（3）组织浸液

组织浸液，主要为微生物生长繁殖提供可溶性含氮物质、核酸降解物、维生素及无机盐等，补充蛋白胨营养成分的不足部分。包括动物组织浸液、植物组织浸液、微生物细胞浸液。

2、糖、醇类物质

单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖

双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖

多糖：淀粉、纤维素、菊糖

醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油

（二）、水

用蒸馏水，不能用自来水

（三）、凝固剂

琼脂、明胶、血清等

要求：清一色杂质少

（四）、抑制剂

1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率

2、种类：

盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等

染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红

胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素（五）、指示剂

1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质、和含氮化合物，产酸产碱的能力。

2、常用的指示剂：

酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等

二、培养基的类型

在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代产物的任何营养基质，都叫做培养基 (Media)。由于各类微生物对营养的要求不同，因而培养基的种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。

（一）、根据培养基的物理状态来区分

固体培养基

液体培养基

半固体培养基

1、液体培养基

主要用于增菌培养、鉴别性培养

2、固体培养基

用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等

3、半固体培养基

观察微生物的动力，有时用来保藏菌种。

（二）、根据培养基的用途来区分

增殖培养基

选择培养基

鉴别培养基

1、增殖培养基

在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。

增菌、运送用培养基