多肽纯化的常见问题分享

多肽纯化的常见问题分享

多肽纯化常见的问题有哪些呢?多肽纯化常见的问题有以下内容：多肽产品中除了多肽本身还包括生产过程中带入的水份及有机盐分等杂质，多肽纯度仅指多肽本身所含肽产品的含量及杂质的含量，不包括水份等杂质;而多肽含量则是指目标多肽在产品中的净含量，一般以N元素分析或氨基酸分子的方法来检测;因此条多肽即使纯度达到99%，因为产品中还包含水份及有机盐分等，它的含量可能也只有

70-80%。

影响多肽纯度检测结果的因素很多，主要包括：流动相体系、色谱柱型号、柱温、波长及色谱仪的性能指标，每项不同都可能造成结果产生误差。

多数多肽都是在TFA体系下分离纯化的，所以多肽以TFA盐的形式最多，其次药物肽一般有醋酸盐及盐酸盐的形式，极少数药物肽会有一些特殊的盐形式。转盐方式多为离子交换法和HPLC法，而脱盐可用透析袋和超滤膜。

TFA起到类似离子对的作用，一般浓度在0.05-0.1%，过高的浓度，会使溶液偏酸，长时间使用可能影响柱子寿命。

同时TFA可以抑制硅胶表面硅醇基，改善碱性化合物的峰型。有时0.1%TFA分离不好的话。可以考虑加大浓度到0.2%。但要注意用完后要及时冲洗色谱柱。

走梯度时，因为走成基线漂移，但对制备的影响不大。

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