药物血浆半衰期的测定实验报告

【实验目的】

掌握药物半衰期的测定方法

【实验原理】

药物消除半衰期就是血浆药物浓度下降一半所需要的时间。其长短可反映体内药物消除速度,根据半衰期可确定给药间隔时间。按一级动力学消除的药物,其血浆半衰期就是一个固定的值,不受药物初始浓度与给药剂量的影响,仅取决于值(一级动力学的消除速率常数)的大小。

磺胺嘧啶(SＤ)的测定原理:磺胺类药物为氨基苯类化合物,在酸性溶液中可与亚硝酸钠起重氮反应生成重氮盐,此盐在碱性溶液中与麝香草酚溶液起偶联反应形成橙红色偶氮化合物,将该化合物在525nm波长下比色,其光密度与磺胺类药物的浓度成正比(朗伯比尔定律)。

【实验对象】

家兔。体重1.5～2、5ｋg。

【实验试剂】

１0%磺胺嘧啶钠,肝素,7、5%三氯醋酸,０、5%麝香草酚,0、5%亚硝酸钠,蒸馏水。

【实验器材】

离心机,分光光度计,离心管,试管,注射器,移液管,吸球,烧

杯,玻璃棒。

【实验方法】

(1)取药前血

取家兔１只称重,０.5%肝素生理盐水润湿注射器与抗凝瓶,由耳缘静脉取药前血2ml(空白对照)于抗凝瓶内。

(2)给药

由一侧耳缘静脉注射１0%磺胺嘧啶钠溶液3ml/ｋg(药物浓度为20０mg／１0ml)准确记录给药结束时间。

(3)取药后血

分别于给药后5min与３５ｍin,取另一侧耳缘静脉血各２ml分别置于抗凝瓶内(每次取血后,洗净注射器并用肝素生理盐水湿润备用)。准确记录实际采血时间。

(4)测定血液样本SD浓度

3次血液样本各准确吸取０、２ｍl,分别加至编号的含7、5%三氯醋酸2、8ml离心管中,混匀。300０ｒ/mｉn,离心10m ｉn。

准确吸取离心管各管上清液1.5ml,分别至相应编号的试管中。各管分别加入0、5%亚硝酸钠溶液0、5ml,充分混匀;再加入0、５%麝香草酚溶液1ml,混匀。

以给药前的空白管作参比,使用分光光度计在5２5nm波长处测定各管光密度值,按下列公式计算血中SD浓度。

血中ＳD浓度()＝

(5)半衰期的计算

代入上述公式:

公式中T为给药后两次取血的间隔时间,、分别为给药后两次取血的血浆药物浓度。

(6)计算零时浓度()

(7)计算表观分布容积()

计算本次实验的半衰期、预期零时浓度及表观分布容积。【注意事项】

1、采血量要准确。采血时可用食指轻弹兔耳根部,使兔耳充

血后有助于家兔耳缘静脉取血。若耳缘静脉采血不畅,可用刀片划破耳缘静脉采血或心脏取血。若未能及时采血,须以实际采血间隔时间代入公式计算。每次采血应避免采血器械交叉污染。

2、离心管及试管要注意标记编号,以免实验操作中混淆。