发光细菌法测定有机污染土壤的生物毒性
水中发光细菌的急性毒性快速检测技术
水中发光细菌的急性毒性快速检测技术 刘康 （北京市环境保护监测中心 北京 100048） 摘 要 现场检测中，通过对水体进行发光细菌急性毒性检测，快速判定水体的综合毒性和污染量级，起到早期预警作用。文章介绍了DeltaTox毒性仪及其工作原理和方法、毒性参照物实验和比对实验等内容。仪器通过高敏感度分析仪（光度计）测试发光细菌与水样混合后的光强度，并与空白实验的光强度比较，根据实验前后样本发光强度的变化得到光损失或光增益的百分比。该检测耗时短，操作简便，敏感度高，适用于现场检测或突发性污染事故的应急监测。 关键词 发光细菌；急性毒性；快速检测 Rapid Testing Technique on Acute Toxicity of Luminescent Bacteria in Water Kang Liu (Beijing Municipal Environmental Monitoring Center,Beijing,100048) Abstract By acute toxicity test using luminescent bacteria,the concerned water’s overall toxicity and polluted level can be rapidly determined right in field.This test can be used as an early warning.The essay introduced the working principle of DeltaTox instrument,the toxicity reference substance experiments and the contrast experiments,etc.The high-sensitivity analyzer(photometer)of the DeltaTox detects the light intensity of the mixture of the luminescent bacteria and the potentially contaminated https://www.360docs.net/doc/be12623310.html,paring it with the blank test,we can obtain the percentage of optical loss and gain according to the luminous intensity of the simples before and after the experiment.This testing method is a simple,sensitive and rapid way which can be used both in pollution accidents and regular on-site testing. Key words Luminescent bacteria;A cute toxicity;Rapid testing 近些年,随着工农业的快速发展,各种有毒有害物质大量产生,它们随着地表径流直接排入到江、河、湖泊等环境水体中,给人类赖以生存的水资源带来了巨大威胁.为及时掌握水质情况，控制水体污染，提高水环境安全水平,为制定水污染防治措施提供技术支撑，需要对环境水体的水质进行便捷、快速地监测．目前对水体毒性物质的分析主要采用气相或液相色谱等化学分析方法进行。通过分析某一种或几种代表性污染物浓度来估测水体的毒性．其有效性并不为毒理学界广泛认同。另外．分析化学方法虽然精密度和灵敏度较高．但设备庞大，无法在野外进行水质毒性的快速检测。近来水质毒性的生物检测方法取得了快速的进展．尤其以发光细菌检测方法相对简便和快速，应用较广泛。 1 实验部分 1.1 仪器（试剂） DeltaTox是美国SDI(Strategic Diagnostics Inc)一种急性毒性检测系统，该毒性测试技术是一种基于生物传感技术的应急毒性检测系统，测定系统的基础是使用一种发光细菌即：费希尔弧菌(Vibrio fiseheri)。该毒性仪体积小、携带方便，工作温度在10°C -28°C之间，非常适合变化的现场环境。整个系统包括一台高灵敏度的分析仪（光度计）、干冻的细菌试剂、实验控制液和补充液。
水质综合生物毒性在线监测仪
产品名称：水质综合生物毒性在线监测仪 产品型号：WTox-8000 系统概述： 水质综合生物毒性在线监测仪采用公认的ISO 11348标准测量方法，以发光细菌和待测水样反应时发光强度变化来快速准备地测出水样的生物毒性，毒谱范围涵盖多于五千种潜在的毒性物质。生物毒性测试技术是一张基于生物传感技术的毒性检测系统，它提供一种有效应对污染的检测手段，整个测量过程可以在5-30分钟内完成，因而能保证对水质变化进行最快速的反应。水样毒性的大小可以通过发光细菌发光强度变化来表示。该系统广泛用于饮用水水源安全、应急评估及多种污染物毒性测定，能对水污染事件进行预警，同时可预警一般性污染事件以及慢性中毒事件。 系统特点： 检测灵活，测量周期短，相应速度快，检测过程可自由设定，可由用户定制测量周期，最短检测时间5分钟。 自动进行质控和校准，保证测试结果的一致性和可靠性，可检测包括重金属、农药、生物毒物、其他有机和无机有毒等才超过5000多种毒性物质； 可调定量取样装置，确保仪器通过调整试剂用量和取样量来准确测量各种水样。 采用长寿命的非接触式注射泵，避免液体直接接触注射泵，可大大延长核心部件寿命、降低用户使用成本。 全进口器件及创新的分析流路设计和试剂配方保证了极高的测量重现性，目前测量重现性可达到5%。 全自动运行，无需人员值守，可实现自动调零、自动校准、自动测量、自动清洗、自动维护、自我保护、自动回复等职能化功能。 在线监测方式多样式，可实现人工随时测量、自动定时测量、自动周期性测量等测定方式。 技术参数： 测量方式：发光菌法； 光监测器：光电倍增管； 测试量程：0~100%； 重复性：5%； 检测下限：0.5%； 相应时间：可根据水样自行调整，最少5min； 测试方式：定时、等间隔、手动； 校准方式：自动校准； 相应范围：可响应5000多种有毒物质； 维护周期：1-2周更换一次发光菌； 模拟输出：4—20mA 模拟输出； 数据传输方式：RS232,RS485,GPRS； 显示：8寸彩色触摸屏，分辨率为800*600； 数据存储：五年有效数据； 工作温度：+0℃~ ＋40℃； 电源：220V AC±10% / 50-60H； 功耗：约100W；
DXY-3型智能化生物毒性污染测试仪使用说明书
DXY-3型智能化生物毒性(污染)测试仪使用说明书 一、仪器特点 DXY-3型智能化生物毒性(污染)测试仪是在DXY-2型生物毒性(污染)测试仪基础上改进，并加人智能化功能的新型号机，与国际上同类产品相当，但是，价格低廉，发光菌能保证供应。 该仪器是基于毒性物质对特殊的发光细菌的发光度的抑制作用而设计的，它通过测定发光细菌发光度的变化，量度被测环境样品中由重金属和其它有机污染物所造成的急性生物毒性。与传统的鱼、蚤和其它水生生物作为生物检测方法相比，发光细菌法简便、快速、灵敏、适应性强、重复性好、精度高、费用低、用途广，凡有毒化合物、废水、废弃物的生物毒性均可测定。因此，它是对受污染环境的生物毒性检测进行初筛、监测较为理想的工具，也是其他领域开拓新的实验测试方法的新工具。 该仪器可测量和显示待测液的毒性含量，测量所得数据可存储，可一次存储10组数据，每组数据包含3个标准液测量值和3个待检溶液的测量值，以便查看；同时，可以上传到计算机，以便分析和长期保存。仪器显示界面由液晶显示屏提供，仪器的控制输入由按键实现。 该仪器2型机为中国环境监测总站监制产品。 该仪器测定方法为国家标准，标准号：“GB/T15441-1995水质急性毒性的测定发光细菌法”由中国标准出版社出标准文版。仪器标准号：Ｑ宁/KTS 01-93。经过近三十年的不断开发，已经在环境科学、微生物学、免疫学、细菌学、生物化学和临床检验等领域得到广泛应用。 二、仪器用途 测定纯化合物(包括有机分子、无机金属离子)的急性毒性。 测定受污染水体(包括工业排放污水、矿山采矿和冶炼废水、河水等水系)的急性毒性。 测定受污染土壤、河流和沿海带底泥的急性毒性。 用于研究有毒元素以及化合物相互之间的相互作用－协同或拮抗效应。 用于慢性反应的化学发光分析等。 三、测试原理 测试原理：总体急性生物毒性。 明亮发光杆菌之所以发光，是由于菌的发光系统发生了如下反应： 基质 ↓ ATP ATP A TP 还原型辅酶A → 黄素(H2) → 细胞色素→ 02 ↓ 载氢黄素单核苷酸 荧光酶(电子)↓ 02RCH0 RCO0H 电子→ FMNH2→ 电子→ FMNH → 光＋FMN＋电子十H2O ↓ OOH 黑暗↓ 电子十黄素单核苷酸十H2O2 当细胞活性高，处于积极分裂状态时，细胞A TP含量高，发光强；休眠细胞ATP含量明显下降，发光弱；当细胞死亡，ATP立即消失，发光停止。 处于活性期的发光菌，当加入毒性物质(如重金属离子Cu2＋/Cd2＋/Se4＋/Zn2＋/As3＋/Pb2＋，农药五氧吩嗪、福美双，染料对氨基苯甲醚、对硝基邻甲苯胺，酸、碱等)，菌体就会受抑甚至死亡，体内A TP含量也会随之降低甚至消失，发光度便下降甚至到零。由于毒物浓度与菌体发光度呈线性负相关地变化，因而可据
生物发光毒性测试分析.pdf
生物发光毒性测试分析 毒性是一项综合的生物学参数，它是衡量样品对活性生物体所产生的影响，不能以化学分析的方法进行测定，一些生物测试方法如鱼类试验、浮游动物试验、藻类试验等则较为复杂，且必须使用高等生物进行试验，从而引起众多的争议。发光细菌测试使用了具有发光特性的天然或人工遗传改造的微生物，这一方法经研究被证实具有快速、简便的特点，同时有很好的灵敏度和可靠性，发光细菌本身又没有危害性。发光细菌试验已成为环境样品毒性检测的生物测试技术，被列入了我国国家标准GB/T 15441-1995，德国国家标准(DIN38412)和国际标准(ISO11348)。 发光细菌毒性测试方法是一个我国国家标准和ISO标准认证的，运用发光细菌Vibrio fischeri进行急性毒理测试。 发光细菌闪烁测试（flash test）是一个改良的方法用于测试含有固体和有色的样品。 上述两个系统包括化学发光检测仪（闪烁测试系统的发光仪必需有自动样品注射器），软件程序，试剂冷却/孵育器和冷冻干粉状态的测试用发光细菌。 生物重金属试剂盒是一个革命性地用于分析环境中少量样品的方法。这些细菌能够特异性地感受到某种特定金属的存在，如来自固体和液体样品中ppb水平的铅、汞、砷和镉。发光终点测试方法具有很高的灵敏度，快速和高通量进行。 发光细菌毒性测试 此方法是传统和标准的通过发光细菌方法来测试化合物或污水的毒性（GB/T 15441-1995，ISO 113483: 水质）测定水样对Vibrio fischeri <发光细菌测试>的光发射抑制效果。这个测试方法是建立在此基础之上的――当有毒性的化合物存在时，细菌的发光量会降低。这个方法非常快速，只需要5－30分钟就可以完成。。 标准发光细菌的测试过程是：把样品和细菌混合在一起，经过短暂的孵育，测试发光强度。检测仪器只需要化学发光仪（如Berthold Detection Systems管式或板式化学发光仪)。 检测系统包括仪器和试剂（冷冻干粉）。细菌可以常温运送给客户。 生物发光毒性测试产品： Berthold Detection Systems公司的化学发光仪 Kenreal TM生物毒性试剂盒 制冷恒温孵育器 分析软件
在线生物毒性水质分析仪(生物综合毒性在线监测仪)
NTOX-1000在线生物毒性水质分析仪（生物综合毒性在线监测仪） 操作说明书
前言 欢迎您使用深圳市耐思特科学仪器有限公司生产的在线生物毒性分析仪，本操作说明书，将对在线生物毒性水质分析仪（以下简称分析仪）的使用方法进行说明。 在您使用分析仪之前，请务必阅读本操作说明书。阅读完毕后，将本操作说明书保管于可以立即取阅的地方。 本产品的规格和外观，出于改进的目的，有可能在没有预先通知的情况下发生变更。本说明书中所记载的内容，也有可能在没有预先通知的情况下发生变更，请予谅解。 此说明书由深圳市耐思特科学仪器有限公司提供，若需更多的了解在线生物毒性分析仪器的详细信息，请搜索深圳耐思特科学仪器进入网站。 保修及责任范围 本产品的保修期限为您购买之日起的1年时间。在保修期间产品发生了由于本公司责任而导致的故障，提供免费维修或是更换部件。但以下情况不属于保修的范围：如对在线毒性仪器有意向，请搜索深圳市耐思特科学仪器公司网站了解更多详情，谢谢！ ?由于误操作导致的故障； ?由于非本公司进行的修理或改造而导致的故障； ?由于在不合适的环境使用本产品而导致的故障； ?由于非本说明书记载的方法而导致的故障； ?由于非本公司责任的事故而导致的故障； ?由于灾害而导致的故障； ?由于本产品坠落而导致的故障； ?由于腐蚀、生锈而导致的故障，或是外观的损坏及老化； ?消耗品 由于本产品故障而导致的损害，由于数据丢失而导致的损害，以及由于使用本产品而产生的其它损害，本公司一律不承担责任，请予谅解。 标签含义 ?警告：潜在的危险状况，如果不加以避免，有发生严重伤害的可能性； ?注意：潜在的危险状况，如果不加以避免，有发生轻度或中度伤害的可能性。
Lumifox2000便携式发光细菌水质综合毒性检测仪
产品名称:手持式发光细菌毒性检测仪 Product name: portable water toxicity detector 小巧、轻便的理想应急检测产品 Smart and lightweight product ideal for emergency 快速、准确 Fast, accuracy 一次性检测出水质综合毒性 detect comprehensive toxicity of water quality at a time 中文智能引导式操作界面 Chinese intelligent operation guide menu LumiFox 2000 手持式发光细菌毒性检测仪是朗石公司最新推出的专利产品，其 工作原理是通过检测水质综合毒性对发光细菌发光强度的抑制率来确定水样的毒性强弱。LumiFox 2000是手持式的，其最大优点是可在现场快速方便地进行水质毒性（尤其是对于未知化学污染物）检测。在出现水质污染紧急事故时，可以帮助您快速评估水样的污染程度。因此，它是一种理想的应急产品。 Lumifox2000 portable water toxicity detector is a patent product published by Labsun. The design principle on the basis is detecting the intensity of emitting-light of the bacterium for evaluating the toxicity of water sample. The portable Lumifox2000’s greatest strength is fast and easily on-site detecting poison materials in water (especially for un-known pollutant). When water pollution emergency occurred, Lumifox2000 can help you fast evaluate the pollution level. Consequently it is an ideal choice for emergency. 产品用途：水环境污染事故应急监测
生物毒性在线分析仪 TOXcontrol Engine 中文操作手册
在线毒性监测仪TOXcontrol Engine软件 使用手册 2006. 12 .30
目录 1.简介（Introduction） (3) 2. TOXcontrol Engine软件的安装（Installation of TOXcontrol Engine） 3 3. TOXcontrol Engine软件的界面外观（Overview TOXcontrol Engine） (4) 4.文件菜单和控制菜单项目（File and Control menu items） (6) 5.状态页面（Status Page） (7) 5.1.其它的操作（The different programs） (8) 5.2.注解按钮（The remark button） (9) 5.3．参数值的设定（Changing a variable） (10) 6.变量页面（Variable page） (13) 6.1．操作者定义页面（User defined page） (13) 6.2.高级定义页面（Manager defined page） (14) 7.曲线图（Graph page） (17) 7.1 时间选择器（The Period selector） (18) 8.历史数据页面（History page） (19) 9.注解页面（Remarks page） (20) 10.活动页面（Activity page） (22)
1.简介（Introduction） TOXcontrol Engine这个软件是为实现对在线毒性仪的控制而设计的。监测过程中所得到的所有数据都是有参考意义的，这些所得到的结果都保存在指定的数据库里。下面的这个图描述了TOXcontrol Engine与仪器之间以及其它的软件之间的相互关系。 仪器按照TOXcontrol Engine软件所给的指令运行。使用者根据计算要求所进行的不同设置（变量，参数）在TOXcontrol Engine软件一开始运行时即立刻生效。所有的数据在TOXview软件运行阶段将被保存，用于以后的评估目的或作为历史背景值。 在图表页面和TOXView软件中，我们可以对不同参数的曲线图进行选择和操作。2. TOXcontrol Engine软件的安装（Installation of TOXcontrol Engine） 软件事先已经由microLAN公司安装好了。使用者或仪器的管理者可以对标准设置进行更改，这在5.3节中有详细的介绍。
发光细菌法测生物毒性
主要任务 1.对常用钻井液材料进行生物毒性分析，遴选出符合环保要求的材料。 2.通过进行生物毒性分析，对不符合环保要求的钻井液材料，如果是必备材 料而且目前又找不到相同功能的替代品，则研制新型的符合环保要求的替代品材料。 3.在遴选出的钻井液材料中，择优选用价格性能比较好的材料，通过室内钻 井液性能综合试验研究，研制出一种钻井液性能优良，能保证钻探施工顺 利进行，符合环境保护要求的新型钻井液体系。 4.现场试验两口井，通过实践检验其钻井液综合性能，整理试验数据，编写 研究报告。 一、完成了符合环保要求的钻井液材料的遴选 1．生物毒性测定方法的选择 （1）糠虾生物试验法 （2）微毒性分析法 （3）发光细菌法 通过对发光细菌法与糠虾法试验结果对比，我们发现发光细菌法的EC50值与糠虾生物试验法的LC50值之间具有一定的相关性：EC50值总是小于LC50值，实验结果见表1。这说明相同数值的EC50值和LC50值相比，EC50值比LC50值对环境的毒性污染更小，更安全可靠。
表1 四种钻井液体系的EC 50值与LC 50值比较 因此本项目采用发光细菌法，测定钻井液单剂及体系的生物毒性，用EC50(相对发光率50%时)来表征被测物的生物毒性， EC50值越大，表明被测物的生物毒性越小；EC50值越小，表明被测物的生物毒性越大。我们参照糠虾法的排放标准，以EC50＞30000ppm 作为钻井液单剂及体系允许排放的标准。并参照糠虾生物毒性试验法的生物毒性分级标准，将生物毒性等级划分为六个等级(表2)，以此作为本项目的环境可接受性评价方法和标准。 表2 生物毒性等级分类
生物毒性在线监测仪
系统概述： 慕迪WTox-8000生物毒性在线监测仪采用公认的ISO 11348标准测量方法，以发光细菌和待测水样反应时发光强度变化来快速准备地测出水样的生物毒性，毒谱范围涵盖多于五千种潜在的毒性物质。生物毒性测试技术是一张基于生物传感技术的毒性检测系统，它提供一种有效应对污染的检测手段，整个测量过程可以在5-30分钟内完成，因而能保证对水质变化进行最快速的反应。水样毒性的大小可以通过发光细菌发光强度变化来表示。该系统广泛用于饮用水水源安全、应急评估及多种污染物毒性测定，能对水污染事件进行预警，同时可预警一般性污染事件以及慢性中毒事件。 系统特点： 检测灵活，测量周期短，相应速度快，检测过程可自由设定，可由用户定制测量周期，最短检测时间5分钟。 自动进行质控和校准，保证测试结果的一致性和可靠性，可检测包括重金属、农药、生物毒物、其他有机和无机有毒等才超过5000多种毒性物质； 可调定量取样装置，确保仪器通过调整试剂用量和取样量来准确测量各种水样。 生物毒性在线监测仪采用长寿命的非接触式注射泵，避免液体直接接触注射泵，可大大延长核心部件寿命、降低用户使用成本。 全进口器件及创新的分析流路设计和试剂配方保证了极高的测量重现性，目前测量重现性可达到5%。 全自动运行，无需人员值守，可实现自动调零、自动校准、自动测量、自动清洗、自动维护、自我保护、自动回复等职能化功能。 在线监测方式多样式，可实现人工随时测量、自动定时测量、自动周期性测量等测定方式。 技术参数： 测量方式：发光菌法 光监测器：光电倍增管 测试量程：0~100% 重复性：5% 检测下限：0.5% 相应时间：可根据水样自行调整，最少5min； 测试方式：定时、等间隔、手动； 校准方式：自动校准； 相应范围：可响应5000多种有毒物质； 维护周期：1-2周更换一次发光菌； 模拟输出：4—20mA 模拟输出； 数据传输方式：RS232,RS485,GPRS； 显示：8寸彩色触摸屏，分辨率为800*600； 数据存储：五年有效数据； 工作温度：+0℃~ ＋40℃； 电源：220V AC±10% / 50-60H； 功耗：约100W； 尺寸：500mm*1650mm*321mm； 重量：约70KG；
ISO15189有关生物安全及仪器试剂要求
ISO 15189有关生物安全及仪器试剂要求 丛玉隆
标题：空间及环境控制程序版本号：A修订号：0 文件编号：PLA301-LJK-CX-018发布日期：2004年6月29日 生效日期：2004年7月1日发布部门：安全管理小组 编制人：马骏龙、邓新立审核人：丁志平 批准人（签章）：秦小玲页码：第1页，共3页 空间及环境控制程序 1.目的 规范实验室在常规工作中的空间及环境控制活动，使科室空间及环境满足医学实验室工作和活动的需要。 2范围 实验室在常规工作中的空间及环境控制活动。
3职责 3.1科主任负责任命安全小组，指导、规范其工作。 3.2安全小组组长负责安全小组日常工作的安排。 3.3安全小组为科室空间及环境监控的常设机构，负责与医疗有关的空间及环境监控的日常工作。 4工作程序 4.1安全小组组成，具体规定《安全管理程序》。 4.2科室活动空间的确定、评估与监督 4.2.1科主任确定科室大致区间的划分，各实验室负责人和安全小组组长确定科室具体空间的划分，保证科室各种物品及资源放臵合理有序。
4.2.1.1划分污染区和非污染区。严禁污染区的物品未经消毒处理进入非污染区；禁止患者及其他来访者在未采取隔离措施的情况下进入污染区；所有标本为污染源，直接接触标本的区域为污染区。 4.2.1.2标本接受区域、标本处理区域、标本储存区域应严格划分，不得混淆。 4.2.1.3科室规定检验工作区域，非工作人员未经许可，严禁进入。 4.2.1.4保证仪器放臵区间适合仪器工作的需要，避免各种干扰。具体规定见《仪器管理程序》。 4.2.2 安全小组对科室活动空间的执行情况进行监督。
发光细菌毒性测试仪器LUMIStox300简易操作步骤
发光细菌毒性测试仪器LUMIStox300 SCREEN法简易操作步骤 1.打开LUMIStox300电源，预热30分钟。 2.打开LUMIStherm电源，必须等待其温度达到15℃才能使用。 3.准备样品。浊度大的污水，需静置后取上清液。一般样品不需加任何处理。如果是冷冻 样品，必须完全解冻；漩涡后沉淀、离心过滤必须混匀；如果样品pH值不在6.5-8.0之间，用HCL或NaOH调节至7.0±0.2；水样按3%比例投加NaCl置冰箱备用。若样品盐度不足2%，则应添加固体NaCl。样品盐度应在2%-5%之间。(选用2%的最小投加量，因为之前有加过缓冲盐，并且某些碱度样品中有碳酸盐。) 4.若每个样品测量两次，则一个批次可以同时测量9个样品；如果每个样品测量一次，则 一个批次可以同时测量14个样品。根据样品测量次数，用移液管移取每个样品以及一份控制液（LCK481，2%NaCl溶液）1.5 ml (供两次测量使用) 或1 ml (供一次测量使用)到每个测量试管中，放在LUMIStherm预温槽里使其达到正确的温度。 5.将LCK491冻干粉置冰浴中，加入1.0mL复苏液(LCX047)，盖盖，摇晃，继续置冰浴中15 分钟。然后取0.1mL复苏发光细菌溶液，以1：50的体积比例，加入5mL稀释液(LCX048)，制成细菌悬浮液，放在LUMIStherm上。 6.根据样品和控制溶液的数量，用移液管迅速移取相应数量的0.5 ml 细菌悬浮液到每个 测量试管中，放在LUMIStherm上恒温15分钟。 7.用移液管移取每个样品和控制溶液各0.5 ml 到每个细菌悬浮液测量试管中，继续放在 LUMIStherm预温槽中恒温15分钟。 8.在LUMIStox300上选择LU测量模式，测量参比溶液的发光度值，此数值应在800-1200之 间，表示发光细菌活性良好。若数值低于800，说明发光细菌活性较差，需要在下一批次制备细菌悬浮液时降低稀释液的比例。 9.在LUMIStox 300上选择评估模式
便携式生物毒性分析仪
一、便携式生物毒性分析仪 1.运行环境 环境温度：适宜温度10-30℃ 相对湿度：10-90％ 使用电源：200V/50Hz 2.技术参数 测量方法: 使用国际先进的生物技术，利用发光细菌对有毒物质的特定发光反应进行检测； 仪器能够检测不同毒性物的混合作用效果，特别是一些重金属和有机物混合后的综合毒性效果。最快检测时间: 5分钟。用于急性综合毒性的快速检测。 检测范围宽，可检测包括汞、镉、铬、铜、铅、镍等污染事件中常见的重金属离子，有机磷、有机氯、菊酯类农药；PCDs 、氰化物、二恶英持久性有机污染物等；亦可检测肉毒杆菌霉素、氯仿、洗涤剂、柴油、荧蒽等众多有机和无机有毒物质。 可检测到的毒性物种类：＞2100种 灵敏度高，可检测到低于ppm的含量； 仪器检测的毒性数据直接显示在仪器自带的显示屏上 重量：2kg左右，体积小，便于携带 检测器：超高速单光子计数光电倍增管 波长范围：380-630nm 测量时间：1-999秒，1秒步进 数据结果可显示并同步储存于机体内部快闪记忆体中，或传至PC储存及分析。 数据存储量：2000组 灵敏度：1amol ATP(1amol=10-18mol) 主供电：220v市电，野外供电：可充电Ni-Cd电池 适宜工作温度:10-30℃ 软件：内置微电脑控制软件，预置6个检测模板。数据可使用Excel软件进行分析，不需要另配专用的分析软件。可使用多种型式样品管 一机两用，可实验室或便携使用 平均试验误差≤9%，最大误差≤12%（通过美国USEPA认证） 接口：RS232 美国EPA认可（美国环保局） 3.配置 3.1.主机1台
1）充电电池3个 2）便携工具箱1个 3）中英文说明书1本3.2.专用试剂（满足200次测试所需）1套 1）生物指示剂(发光细菌) 4瓶2）储存缓冲液（5ml/支）1支3）阳性质控标样（1ml/支）1支3.3.测试管200支3.4.可调节移液枪5-50uL 1个3.5.可调节移液枪100-1000uL 1个3.6.数据采集和分析软件1个3.7.现场测试箱1个3.8.现场试剂架1个3.9.计时器1个
发光细菌
发光细菌 一、填空题 1．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441—1995)，若须排除pH影响，应先将水样和氯化钠溶液的pH进行调整，具体为：含铜水样的pH调整为，含其他金属水样的pH调整为 5.4，含有机化合物水样的pH调整为。 2．《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T15441-1995)适用于、和实验室条件下可溶性化学物质的水质的急性毒性监测。 3．发光菌急性毒性试验中，样品的急性毒性水平可用相对发光度、 或等来表示。 4．淡水型的发光菌急性毒性试验中，样品的急性毒性水平则用相对发光度、 和等来表示。 5．用青海弧菌Q67进行发光菌急性毒性测定时，环境温度在℃之间均可进行，但在测试过程中要求温度波动在±℃内。 二、判断题 1．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441-1995)，用发光菌测定样品的毒性非常简便，冻干粉经复苏后即可用于进行样品的测定。( ) 2．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T15441-1995)，若须测定包括pH影响在内的急性毒性，不应调节水样pH。( ) 3．在进行发光菌急性毒性试验中，对含有固体悬浮物的样品须离心或过滤去除，以免干扰测定。( ) 4．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441-1995)，氯化汞母液可在2～5℃冰箱里保存6个月，而氯化汞工作液在2～5℃冰箱里只能保存24h。( ) 5．根据《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB／T 15441-1995)，在测定有色样品时，先要进行颜色干扰的校正，计算出因颜色引起的发光量校正值。( ) 6．进行淡水型发光菌急性毒性试验时，苯酚溶液的保存和氯化汞溶液相同。( ) 7．EC50值越小，表示受试物的毒性也越小。( )
发光细菌的特性及其在环境监测方面的应用(精)
发光细菌的特性及其在环境监测方面的应用 发布时间：2008年7月30日 16时19分来源：化学工程与装备网 贺志庆1,王文波2 (1台州市环境监测中心站,浙江台州 318050 2台州市路桥区环境监测站,浙江台州 318050) 摘要：随着现代工业的不断发展，随之而来的环境问题也越来越突出。因此一些新的环境监测方法也应运而生。发光细菌检测方法就是其中的一种。它具有快速、简便、灵敏等特点，并在环境监测中的应用范围也很广泛。本文主要从发光细菌的原理、测定方法及其在环境监测中的应用等方面对其进 行了阐述。 关键词：发光细菌环境监测毒性 1 前言 到了二十一世纪，世界进入了工业化时代，随着现代工业的不断发展，当今世界面临着严重的环境问题。我国是一个发展中的大国 ,几十年来 ,尤其是改革开放以来经济发展突飞猛进 ,令全世界瞩目。但是随着工业化和城市化的不断发展，环境问题日益突出 ,严重影响了我国经济与社会的进一步发展。数量，种类日益增多的环境污染物迫切需要进行毒性鉴定，而传统的分析手段已难以对此做出迅速、有效、全面的回答。因此，发展新的快速，准确评价各类污染物毒性的有效方法显得非常迫切，必要。 环境中有毒物质生物毒性的测定与评价，一般用水生生物（如鱼，枣等）。植物（紫露草，蚕豆根类等）细菌或其他生物作为指示生物，以其形态，运动性，生理代谢的变化或死亡率做指标来评价环境物质的毒性。但这些方法大都操作繁琐，需要较多的仪器设备，结果不稳定，重复性差，因而难以推广应用。随着科学的不断发展，新的环境中有毒物质生物毒性的测定与评价不断建立，其指示生物包括细菌，藻类，底栖软体动物，浮游生物和鱼等，其中发光细菌因其独特的生理特性，与现代光电检测手段完美匹备的特点而备受关注，因此由其而发展起来的发光细菌毒性测试技术引人注目。发光细菌检测法是一种简单快速的生物毒性检测方法，它不仅能测试理化法所能测定的单因子指标，尤其能快速准确的测出环境的综合毒性指标，具有理化法无可比拟的 特点。 2 发光细菌检测有毒物质的原理 发光菌检测法是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物，以其发光强度的变化为指标，测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法。细菌的发光过程是菌体内一种新陈代谢的生理过程，是光呼吸进程，是呼吸链上的一个
发光细菌法急性毒性的测定
发光细菌法急性毒性的测定 大连理工大学环境与生命学院
1978年美国Beckman 公司即推出功能完备的生物发光光度计“Microtox”，自此，这一急性毒性测试技术在世界范围内迅速推广。因此人们也将发光菌毒性测试称为Microtox 测试。 简介 发光菌毒性测试是20世纪70年代后兴起 的一种微生物监测环境污染及检测污染物毒 性的新方法。
采用现代光电检测手段(生物发光光度计)的发光菌生物毒性实验是毒理学中生物测定的方法之一。该方法快速、简便、灵敏、廉价,在有毒物质的筛选，环境污染生物学评价等方面有重要的意义，因而备受各国有关研究者的关注。 1995年3月，国家环境保护局、国家技术监督局将发光菌毒性测试定为水质监测标准方法(GB/T 15441-1995)。
一、实验目的与内容 实验目的 1. 掌握发光细菌毒性测试的标准方法； 2. 根据发光细菌发光强度的变化判断 受试化合物的毒性； 3. 初步了解发光细菌毒性测试的影响因素。
实验内容 1. 发光细菌的复苏； 2. 发光细菌发光强度的测定； 3. 受试化合物毒性的计算。
实验原理 发光菌的发光现象是其正常的代谢活动, 在一定条件下发光强度是恒定的, 与外来受试物(无机、有机毒物, 抑菌、杀菌物等) 接触后, 其发光强度即有所改变。变化的大小与受试物的浓度呈相关关系, 同时与该物质的毒性大小有关。通常认为外来受试物通过下面两个途径抑制细菌发光: (1) 直接抑制参与发光反应的酶类活性; (2) 抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程(如细胞呼吸等)。 毒物的毒性可以用EC50表示, 即发光菌发光强度降低50% 时毒物的浓度。实验结果显示, 毒物浓度与菌体发光强度呈线性负相关关系。因而可以根据发光菌发光强度判断毒物毒性大小, 用发光强度表征毒物所在环境的急性毒性。
BTA便携式生物毒剂检测仪
BTA便携式生物快速检测仪 1、用途： BTA是一种快速定性测定方法，用于 检测液体样品中炭疽麻毒素、鼠疫、 天花（前面四种已配）葡萄球菌肠毒 素、肉毒酐菌、培训测试盒、 THURINGIENSIS酐菌、兔热病、菌生 物危险品介质。 2、性能参数： BAT系统设计轻巧便于携带，生物危品检测项目多、准确性好、操作程序简单；使用温度：4℃--40℃，储存温度：-29℃--60℃，手工实验时间为2.5分钟，自动实验时间为15分钟，湿度范围：温度达到31℃时最大相对湿度为80%，到40℃时降到50%；结果显示为阴性或阳性并包括样本编号、实验条类型、日期/时间、标志等。可储存200个实验结果及打印和传输。时钟24小时工作，电池可用10年，预设置为格林尼制标准时间不能更改。 3、使用方法： 1、把1ml的(BTA) 缓冲液加入小试管内(瓶上刻有0.1, 0.5, 1.0, 1.5 ml 标记)； 2、收集样本(利用沾有缓冲液的棉花棒采集样本)； 3、把样本加入试管内的缓冲液内 (转动约10秒)； 4、把试管上多余的缓冲液除去，盖上瓶子，猛烈摇动，
并给大片样本沉淀（15-30秒）；5、测试样本溶液的酸碱度；(利用样本收集盒内的pH酸碱试纸，确保样本溶液的酸碱值是 4-10，否则再作 1: 4 的样本稀释)6、把5滴样本溶液加入测试条上的加样孔，等侯15分钟出结果(利用测试盒内的一次性球形点滴器)。 4、维护保养 1、机器外壳可以用软的棉布试擦，保持表面清洁。 2、仪器至少每个月要运行一次。 3、如果液体滴入仪器内，应立即切断电源，暴露外面直至完全干燥。 5、注意事项 1、在插入试纸条到机子之前，任何试纸条都要用肉眼检查，插入之前必须去掉异物，防止直接接触试纸。 2、在按[ABORT]以后，操作者还有30秒停止试验。 3、打印过程不要按任何键。 4、不要将AA电池装在仪器内储存。 5、仪器使用时要轻拿轻放。
发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用(精)
全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会 发光细菌毒性试验在水质监测与评价中的应用 张绮王克波赵人王争 南京２１００２９南京医科大学公共卫生学院 摘要：发光细菌毒性试验已广泛应用于水质监测中。本文主要概述了发光细菌的分类、发光细菌毒性检测原理及其在工业废水、城市污水及河流等水域的水质综合毒性评价的应用。 关键词：发光细菌；水质监测；综述 随着工农业的不断发展，当今世界面临日益严重的环境污染问题，水污染尤为突出。水中污染物种类繁多，性质复杂，且污染物之间可发生协同、相加或拮抗等复杂作用。传统的水质检测虽能准确定量分析污染物中主要成分及含量，但不能检测水中各种污染物对环境和生物产生的综合毒性。发光细菌毒性试验因其独特的生理特性，与现代光电检测手段结合具快速、灵敏、简便等特点，检测结果可反映水中污染物的综合毒性，比测定单一组分污染物更具实际意义。 １．发光细菌的分类及其生物毒性检测用商品种类 发光细菌属革兰氏阴性、兼性厌氧菌，大小约０．４一１．Ｏ×１．０—２．５ｕｍ。无孢子、荚膜，有端生鞭毛一根或数根，最适温度２０—３０＂Ｃ，ｐＨ６～９，ＮａＣｌ浓度３％，０．３％的甘油对发光反应有利。其分类目前普遍采用美国学者ＥＢａｕｍａｎｎ的方法【ｌ’２１，见表１。 表１发光细菌的分类 大多用明亮发光杆菌、鲳鱼发光杆菌及费氏弧菌作有毒有害物急性毒性效应的检测。检测时测试体系中须加入较高浓度的盐以维持其正常生存，大量氯离子的存在会在相当程度上影响样品中一些污染物的生物可利用性和毒性顺序。由我国学者分离的淡水型发光青海弧菌则具有较广泛的酸碱和温度适应性，可在蒸馏水中正常发光，使测试体系得到简化【引。 发光菌除用于急性毒性效应检测外，其发光菌经过处理以后的暗变异株在接触致突变物后可恢复一定的发光能力，通常可使暗变株的发光强度增加１０００倍左右。因此利用暗变异株恢复发光的现象可对各种遗传毒物进行筛选、检测。这类菌株有鲳鱼发光杆菌暗变株ＳＤ．１８、ＲＣ．９３，费氏弧菌暗变异株Ｐｆ－１３，明亮发光菌暗变种＂１＂９１７１等。 目前发光细菌毒性检测有３种方法，即发光菌新鲜培养物测定、发光菌冷冻干燥制剂测定及发光菌与海藻混合测定的方法。新鲜培养的发光细菌其培养条件很难限制在同一水平上，这会造成发光细菌对１３０ 全国水体污染控制、治理技术与突发性水污染事故应急处理高级研讨会
发光细菌实验方案
一：准备工作 需消毒：①培养皿12个②移液管③试管12个④接种环2个⑤三角玻棒（暂无）⑥锥形瓶6个（暂无）⑦玻璃棒2个 仪器不需消毒：①灭菌锅（暂无）②恒温培养箱（暂无）③电子显微镜（暂无）④振荡器（暂无）⑤电炉（不可用）⑥离心机（暂无）⑦电子天平⑧酒精灯2 个（暂无）⑨牛皮纸⑩剪刀?pH计?棉花?火柴（暂无） 试剂：①蛋白胨②牛肉膏③琼脂粉④无菌水⑤甘油（丙三醇）⑥人工海水（调pH7.4~7.8）（无机成分：NaCl400mmol/L，MgSO4·7H2O 100mmol/L，KCl 20mmol/L，CaCl2·2H2O 20mmol/L，必须分别溶解后再混合；有机成分质量分数：0.3%的甘油，0.5%酵母膏，0.5%胰蛋白胨，再加入0.1%CaCO3。） 培养过程的特殊需求（均为暂无）：0.25μm~0.45μm硝基纤维滤膜（方法三过滤），铁架台和漏斗（方法三过滤），不透光的黑布（方法二），磷酸高铁（方法二陪简易培养基） 提取过程的特殊需求（均为暂无）：手电筒，半透明红纸 二：培养 方法一：直接将鱿鱼/内脏剪碎，放于无菌水中震荡，取浸出液在普通固体培养基（就是我们已经配好还没溶解的那个）的培养皿上划线分离或涂布分离，在恒温培养箱中培育2~3天。 方法二：将鱿鱼/内脏剪碎，在2216E培养基（简易制法：蛋白胨5g，酵母粉1g，琼脂粉15g，磷酸高铁0.01g，用在黑暗环境下放置2~3天的人工海水加至1000ml，调pH为7.6~7.8）中置于暗室（我觉得盖上不透光的黑布就行）培育3~4天，然后在倒有普通固体培养基的培养皿上划线分离或涂布分离，在恒温培养箱中培育2~3天。 方法三：将鱿鱼/内脏剪碎丢入无菌水中震荡，静置后用移液管取上层溶液用硝基纤维滤膜过滤，之后直接将硝基纤维滤膜铺在普通固体培养基上进行培养，在恒温培养箱中培育2~3天。 P.S.2216E培养基完整成分：蛋白胨5g，酵母粉1g，琼脂粉15g，磷酸高铁0.01g，NaCl 19.45g，KCl 0.55g，CaCl2 1.8g，MgCl2 5.98g，Na2SO4 3.24g，Na2CO3 0.16g，KBr 0.68g 三：提取 方法一：在暗室中用肉眼观察是否有蓝绿色光点，用灭过菌（一般是用酒精灯火焰灼烧至发红再冷却）的接种环，轻轻接触到该光点（不能触及不发光的地方），立即在另一个培养皿中划线，然后置于室温（至少10℃以上）培养14~16h。在暗室中观察是否有单个发光点，
朗石发光细菌综合毒性在线监测仪Lumifox8000
产品名称：在线发光细菌毒性监测系统 Product name: online bio-monitoring system (lumifox8000) 国内唯一的发光细菌法的在线式水质毒性监测系统可靠性高、早期预警检测 污染物检测范围广、灵敏监控水质变化、易于部署及维护 Lumifox8000 is the first and only online water quality toxicity monitoring system developed in China which adopting luminous bacteria method. High-reliable, early-warning, broad range of contamination detected, sensitivity monitor variation of water quality, ease to lay out and maintenance 产品简介： LumiFox 8000是深圳市朗石生物仪器有限公司联合南京大学和中国科学院研制 的国内唯一的发光细菌法的在线式水质毒性监测系统。该仪器采用国标 GB/T15441-1995的方法，以发光细菌和样品反应时的发光强度变化来快速准确 地测试出样品的毒性，毒谱范围含盖上千种潜在的毒性物质。可来代替传统的 用鱼类或其它标准动物所进行的毒理学试验。该系统广泛用于饮用水系统安全、应急评估及多种污染物毒性测定，可预警重大水污染事件，如水质瞬间大幅度 变化，人为投毒等引起的急性中毒事件；同时可预警一般性污染事件以及慢性 中毒事件。 Lumifox8000 co-developed by Shenzhen Labsun bio-instrument Co.,Ltd , Nanjing University and Chinese Academy of Sciences (CAS), is the first online water quality toxicity monitoring system developed in China which adopt luminous bacteria method. This instrument, compliant with national standard GB/T15441-1995, fast and precisely detects thousands of potential contaminants through measuring the luminescence before and after exposition and calculating the inhibition. Luminous bacteria method can replace typical toxicology experiment which uses fish or other animals in laboratory. This system widely makes application for drinking water system, emergency assessment, toxicity detection of contamination, early alarm heavy water pollution accident, acute poisoning incidents caused by sudden change of water quality and spreading poison with intent, meanwhile it can early alarm general contamination event and chronic poisoning. 产品特点： Product characteristics: 操作简单 Easy operation 全中文即时帮助式操作软件，集成报表生成和打印 Real-time Chinese help operational software, generating and printing report 实时反应全过程监测，并动态显示测试项目的反应曲线 Real-time reaction and full process monitoring, dynamic display of reaction curve 检测灵活、广谱 Flexible detection, broad spectrum