实验6：a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
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1.制备固定化a-淀粉酶 2.进行淀粉水解的测定
定义：含有酶的制品 分类：液体酶制剂、固体酶制剂 酶的生产：
◦ ①提取法 ◦ ②发酵法 (通过微生物发酵获得所需要的酶)
优点：催化效率高、低能耗、低污染 缺点：易失活、难回收,不能被再次利用、难分离
固定化酶：就是将水溶性的酶用物理或化学的方法 固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活 性的制剂。
淀粉 α-淀粉酶 糊精 β淀粉酶 麦芽糖 糖化淀粉酶 葡萄糖
遇碘显蓝色
遇碘显红色
遇碘不显色
枯草杆菌
a-淀粉酶的固定化 可溶性淀粉溶液 KI-I2溶液
淀粉 5ml注射器 反应柱 固定化酶
筛板 气门心 夹子
收集流出液，鉴定
直接使用酶和固定化酶的优缺点
类型
优点
不足
直接使 用酶
催化效率高 低耗能 低污染
◦ 可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出 液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中 没有淀粉酶了。
2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
◦ 可以在高温下使淀粉快速水解，而且酶不会因高温上而失 活，所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应 中使用。
对环境条件非常敏感，容易 失活；溶液中的酶很难回收， 不能被再次利用，提高了生 产成本；反应后酶会混在产
物中，难分离
酶既能与反应物接
固定化 酶
触，又能与产物分 离，同时，固定在 载体上的酶还可以
被反复利用
在生产实践中，很多产物 的形成都通过一系列的酶
促wk.baidu.com应才能得到的
难以一次性固定化多种酶
1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?
定义：即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不 溶于水的载体上)
固定化酶技术的优点： （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用。
将酶固定化的方法
包埋法
将酶包埋在细微网格里
交联法 将酶相互连接起来
吸附法 将酶吸附在载体表面上
实验原理：用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上， 一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉 水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红 色表明水解产物糊精生成
定义：含有酶的制品 分类：液体酶制剂、固体酶制剂 酶的生产：
◦ ①提取法 ◦ ②发酵法 (通过微生物发酵获得所需要的酶)
优点：催化效率高、低能耗、低污染 缺点：易失活、难回收,不能被再次利用、难分离
固定化酶：就是将水溶性的酶用物理或化学的方法 固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活 性的制剂。
淀粉 α-淀粉酶 糊精 β淀粉酶 麦芽糖 糖化淀粉酶 葡萄糖
遇碘显蓝色
遇碘显红色
遇碘不显色
枯草杆菌
a-淀粉酶的固定化 可溶性淀粉溶液 KI-I2溶液
淀粉 5ml注射器 反应柱 固定化酶
筛板 气门心 夹子
收集流出液，鉴定
直接使用酶和固定化酶的优缺点
类型
优点
不足
直接使 用酶
催化效率高 低耗能 低污染
◦ 可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出 液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中 没有淀粉酶了。
2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
◦ 可以在高温下使淀粉快速水解，而且酶不会因高温上而失 活，所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应 中使用。
对环境条件非常敏感，容易 失活；溶液中的酶很难回收， 不能被再次利用，提高了生 产成本；反应后酶会混在产
物中，难分离
酶既能与反应物接
固定化 酶
触，又能与产物分 离，同时，固定在 载体上的酶还可以
被反复利用
在生产实践中，很多产物 的形成都通过一系列的酶
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难以一次性固定化多种酶
1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?
定义：即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不 溶于水的载体上)
固定化酶技术的优点： （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用。
将酶固定化的方法
包埋法
将酶包埋在细微网格里
交联法 将酶相互连接起来
吸附法 将酶吸附在载体表面上
实验原理：用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上， 一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉 水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红 色表明水解产物糊精生成