小金丹含药血清对肝癌细胞生长的影响

实验室常用细胞株

ATCC? Number: CRL-2865? Price: $329.00 Designations: T47D-KBluc Depositors: VS Wilson Biosafety Level: 1 Shipped: frozen Medium & Serum: See Propagation Growth Properties: adherent Organism: Hom o sapi ens (human) Morpholog y: epithelial Source: Organ: mammar y gland; breas t Tissue: duct Disease: ductal carcinoma Derived from metastatic site: pleural effusion Cell T y p e: epithelialtransfected with reporter plas mid Permits/F orms: In addition to the MTA menti oned above, other ATCC and/or regulatory per mits may be required for the transfer of this ATCC material. Any one purchasing ATCC material is ultimatel y r esponsible for obtaining the permits. Please click here for information regarding the s pecific requirements for shipment to your loc ation. Reverse Transcript: N Age: 54 years adult HeLa Mar kers: N

实验总结细胞培养方法

实验总结细胞培养方法公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]

一、培养细胞常用配置培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：10 % DMSO + 90%胎牛血清依次比例酌量配置。超净工作台常规配置移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1 台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个，常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml），枪头（1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，冻存管所需试剂：培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，75%酒精…… 实验前准备：所需的各项高压后的耗材及污物缸放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。培养基及胰酶恢复常温后使用，可37℃水浴5-10min 二、细胞复苏步骤：

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。 2. 培养液（DMEM），恒温水浴箱37℃预热20min，备用。超净台内准备一支15ml离心管备用。 3.将所需的培养基确保瓶身干净后酒精消毒放于工作台面内，点燃酒精灯，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后需再次分别消毒瓶口和瓶盖。 4. 从液氮保存罐中取出冻存管，立即放入37℃水浴中，快速摇晃，直至冻存液融化至黄豆粒大小后迅速取出。 5. 将细胞悬液移入15ml离心管，缓慢加入4ml培养液，离心（1000r/min，5min）。 6. 取出2个培养皿并做好标记（复苏日期等），提前加入5-10ml培养液；离心结束后用1ml培养液悬液混悬沉淀细胞后分别加入培养皿内。 7. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧，熄灭酒精灯，整理实验台面，取出实验试剂及污缸等，关闭超净工作台。 8. 将培养瓶放入培养箱内培养注意事项：

细胞培养集锦(一个培养300多种细胞人的经验总结)

细胞培养集锦(一个培养300多种细胞人的经验总结) 一、消化与吹打版上很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近300种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的第一篇专题，并不是因为细胞消化最重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，一起讨论： 1，其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。 2，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养

常见细胞株中文名称及缩写

人类组织正常及永生化细胞英文名中文名称 293E E转化人胚肾293细胞（B类） 293ET ET转化人胚肾293细胞（B类） 293KB KB转化人胚肾293细胞（B类） 293T人胚肾T细胞 A7d野生型人 C-KIT受体细胞株（B类）AMS3(SCF3)人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类) APP-PS1人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类) FC33ASP2人胚胎肾细胞转化细胞 FIP293FIP293(来源于HEK293)(B类) HEK-293人胚肾细胞 CCC-HPF-1人胚肺二倍体细胞 CCC-ESF-1人胚胎皮肤成纤维细胞HFF(ATCC? SCRC-1041?)人前皮肤成纤维细胞 HFSF人胚胎眼巩膜成纤维细胞 HFTF人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 HK-2人肾小球上皮细胞 HKC人胚肾上皮细胞 HSF人皮肤成纤维细胞 MRC-5人胚肺成纤维细胞 WISH人羊膜细胞 CCC-HEL-1人胚胎肝正常细胞 CCC-HEK-1人胚胎肾正常细胞 CCC-HHM-2人胚胎心肌组织来源细胞 CCC-HPE-2人胚胎胰腺组织来源细胞 CCC-HB-2人胚胎膀胱组织来源细胞 CCC-HIE-2人胚胎肠粘膜细胞 CCC-HBE-2人胚胎气管细胞动物组织正常及永生化细胞 3T3swiss swiss鼠胚胎成纤维细胞 3T3L1小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) 3T6swiss小鼠胚胎成纤维细胞 7WCY1.0人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)(B类) 7WD10人APP基因转染细胞株(CHO)(B类) 7WML6.0人APP-PSI（M146L)双基因转染细胞株（CHO)(B类） 7WPS1APP-PS1双基因转染细胞株（CHO）（B类） BaF3小鼠原B细胞（B类） BHK-21金黄地鼠肾 BS-C-1非注洲绿猴肾 C2C12小鼠成肌细胞 C3H10T1/22A6小鼠成纤维细胞 CH0dhfr二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 CHO-K1中国仓鼠卵巢细胞

肝癌健康宣教

肝癌的健康教育一、用药指导 1．遵医嘱按时、准确、合理使用止痛剂。对于晚期肝癌发生难以控制的疼痛时，应尽可能在疼痛前给药。 2．出血患者，中药汤剂宜偏凉服。胃纳不佳者，中药应浓煎，并予多次少量进服，以饭前或饭后1小时为宜。对胃有刺激的药宜饭后服，补益药宜饭前服。 3．癌性发热者应用消炎痛纳肛退热时，因汗出较多，应及时补充水分，更换汗湿的衣服。 4．应用化疗药物时应防止药液外渗，并计划使用静脉。二、肝穿刺活检术注意事项 1．术前护理 ①测定肝功能，出、凝血时间，凝血酶原时间，正常者方可手术。②术前行胸部X线检查，观察有无肺气肿、胸膜肥厚。验血型，以备必要时输血。 ③向病人解释穿刺的目的、意义、方法，消除顾虑和紧张情绪，并训练其屏息呼吸方法。 2．术后护理 ①术后卧床24小时。 ②测量血压、脉搏30min一次，连测4h。 ③注意观察有无脉搏细速、血压下降、烦躁不安、面色苍白等内出血征象。④注意观察穿刺部位有无伤口渗血、红肿、疼痛。三、生活起居 1．病室宜清洁安静，定时开窗通风，清除秽气。 2．视病情适当休息，以减轻肝脏负担为宜。 3．保持生活规律，注意劳逸结合，避免情绪波动和劳累。 4．建立积极的生活方式，增加精神支柱，以提高机体抗癌能力。四、饮食指导饮食原则以高蛋白、适当热量、高维生素为宜，避免摄入高脂、高热量和刺激性食物，使肝脏负担加重。如有肝性脑病倾向，应减少蛋白质摄入。根据不同的证型指导饮食：临床常用食疗方法： 1．枸杞甲鱼：枸杞30克，甲鱼150克。将枸杞、甲鱼共蒸至烂熟即可，枸杞与甲鱼均可使用，每周一次，不宜多食，尤其是消化功能不良者，失眠者不宜食。忌饮白酒、辣椒、母猪肉、韭菜、肥肉、油煎炸、坚硬的食物及刺激性调味品。具有滋阴、清热、散结、凉血，提高机体免疫功能。 2．茯苓清蒸桂鱼：茯苓15克，桂鱼150克。加水及调料同蒸至烂熟及成。吃鱼喝汤，具有健脾利湿，益气补血功能。 3．翠衣番茄豆腐汤：西瓜翠衣30克，番茄50克，豆腐150克。将西瓜翠衣、番茄和豆腐全部切成细丝作汤食。经常食用，具有健脾消食，清热解毒，利尿、利湿等功效，虚汗体弱不宜多服。 4．菜鲫鱼汤：菜30克，鲫鱼1条。菜与鲫鱼共同煮汤，加适当调料即成。经常食用，具有消淤血、止吐、改善症状的作用。但脾胃虚寒、无淤滞者忌服。 5．芡实炖肉：芡实30克，猪瘦肉100克。两者和起放砂锅中加水适量炖熟后去药渣，吃肉喝汤。经常食用，此膳泻火，祛痰、通便，有腹水者可用此方。 6．薄荷红糖饮：薄荷15克，红糖60克。煎汤后加糖调味即成。可代茶饮，此膳清热，利湿、退黄;有黄疸、腹水者可选用。

细胞培养技术个人总结

总结---细胞培养一．基本理论概论原代培养: 也叫初代培养，指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。传代培养：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。细胞系：原代培养物成功传代后，则称之为细胞系。(如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系；已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系。) 细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。培养类型：细胞培养，组织培养，器官培养。细胞生长的方式：贴附生长，悬浮生长培养细胞的形态（形态不一定，环境改变形态可能改变）：成纤维性型细胞，上皮型细胞（单层膜样生长），游走性细胞（游散生长，常有伪足跟突起）二．培养过程及要点（切记无菌操作）（一）工作环境的处理 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 2. 实验用品以70 %酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。 3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。吸管口切勿碰到容器瓶口 4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。 5. 定期检测下列项目： CO2 钢瓶之CO2 压力。CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300 小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。（二）试验用玻璃塑料用品清洗及其消毒灭菌清洗：（1）玻璃器皿的清洗（酸液由重铬酸钾，浓硫酸，蒸馏水配置）浸泡—刷洗—浸酸—冲洗（2）胶塞的清洗刚买回的常含滑石粉等杂质，先用自来水冲洗后再按常规方法处理。2%NaoH或洗衣粉煮沸10-20分钟---1%稀Hcl浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟—晾干备用（3）塑料制品的清洗 2%NaoH浸泡过夜—自来水冲洗--5%稀Hcl浸泡30分钟—自来水和蒸馏水冲干备用。

肝癌的健康教育汇总

肝癌手术健康教育 1入院教育患者进入病室,护士热情接待,介绍各级医、工、患人员.详细介绍病区环境、常规工作时间及作息时间、患者住院规则,发放入院告知书,并请患者或家属签名,1份交患者,1份存病历内。 2心理指导先实行保护性医疗制度,适当的时候让患者了解病情、手术的重要性、疾病的转归过程,消除其顾虑,增强战胜疾病的信心,以积极的状态和良好的心理准备迎接手术。 3用药指导肝区疼痛时,慎用吗啡、鲁米那、氯丙嗪等药物,因上述药物在肝脏中代谢,肝功能障碍时易引起蓄积中毒而致肝昏迷,必要时可选用强痛定、颅痛定或度冷丁止痛。 4术前教育指导并督促患者完成各项检查,全面了解病情,如血、尿等常规,出凝血时间、血型、交叉配血、肝功能、乙肝全套、抗HIV、AFP、心、肺、。片功能检查。避免劳累,做好肠道准备,术前晚用甘油110ml灌肠。肠道是血氮的主要来源之一,灌肠可清除肠道内含氨物质,减少血氨的来源,不宜使用肥皂水灌肠,因为肥皂水是碱性的溶液,灌肠后使结肠内呈碱性,当PH值小于6时,易使氨离子形成氨大量弥散入血,造成血氨增高,而容易诱发肝昏迷。指导患者预防并发症,劝患者戒烟,作有效的咳嗽、咳痰,预防后肺不张。术前1天开始训练患者在床上排尿,以养成患者轻松自如地床上排尿的习惯,预防潴留。适当活动,预防静脉血栓。术前1天备皮,做抗生素皮试。术前12h禁食,术前4~6时禁水。5术后教育术后第1天取坐卧位,使内脏随体位下移,不压迫膈肌,有利于呼吸,可使腹腔渗液流入盆腔,防止膈下感染,也便于腹腔引流。避免过早下床活动,一般卧床休息5~7天,以免术后活动过早而引起肝断面摩擦出血。肝脏一半以上切除者,吸氧3~4天,以增加余肝的肝细胞血氧含量,不得自行把氧气管拔出。腹腔引流管用以引流肝断面渗出液和脱落的肝组织,防止感染,利于肝断面愈合,翻身时,注意防止脱出,不能扭曲或折叠引流管。经常挤压腹腔引流管,防止血块堵塞。引流袋低于切口水平,以免引流液倒流,引起逆行感染。胃肠减压可及时引流出胃肠内积液积气,避免肠胀气。肠胀气对肠壁压力增大,使肝营养物质

细胞培养总结

细胞培养学习总结 --贴壁细胞培养技术一、细胞培养一般流程：㈠、复苏： 1、实验前做好相关准备工作（水浴锅37℃；超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪器和试剂）。 2、把冻存管从液氮灌中取出来，立即投入37℃（≦40℃）水浴锅中，晃动冻存管，使液体在1min以内全部融解（关键步骤），用酒精棉擦拭其外壁，放到超净工作台里。 3、把上述细胞悬液吸到15ml的离心管中，加入适量培养基，(用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来，转移时不要直接倒，以防污染)，1000转离心1-3min（可根据所培养细胞调整）。 4、吸弃上清液，加适量培养基把细胞吹散成细胞悬液，转移到培养瓶中，加适量完全培养基（常为覆盖培养瓶底面即可）。 5、标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后再换培养基。 6、注意观察细胞生长状态，及时换液或传代。㈡、换液： 1、实验前做好相关准备工作（超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪器和试剂）。 2、取出培养瓶，用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液，用适量（如2ml）PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞（可根据细胞状态洗1-2遍，一般从没有细胞的那一侧倒掉）。 4、加入适量新鲜完全培养基，放回培养箱继续培养。㈢、传代：

1、实验前做好相关准备工作（超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪器和试剂）。 2、取出培养瓶，用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液，用适量（如2ml）PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞（可根据细胞状态洗1-2遍）。（前面步骤同换液） 4、加适当的胰蛋白酶（0.05%）(能覆盖细胞就行)，放入细胞培养箱中消化 1-2min（根据不同类型细胞而定）。 5、细胞都变圆后加如入等体积的完全培养基终止消化。 6、用滴管缓慢吹打细胞，使细胞都悬浮起来成细胞悬液，吸到15ml的离心管中，1000转离心1-3min。 7、倒掉上清液，加1-2ml完全培养基，将细胞吹散成单个细胞。 8、根据细胞浓度把细胞传到几个培养瓶中，加入适量完全培养基（一般癌细胞一个培养瓶分2个），放回培养箱中继续培养。㈣、冻存： 1、实验前做好相关准备工作（预先配置好冻存液放入4℃保存，常为 10%DMSO+90%血清，配制过程中加入DMSO要缓慢，且边滴边摇；超净工作台的无菌环境；准备好实验相关仪器和试剂）。 2、取出培养瓶，用75%酒精消毒后放入超净实验台。 3、吸弃旧培养液，用适量（如2ml）PBS（磷酸盐缓冲液）清洗细胞（可根据细胞状态洗1-2遍）。 4、加适当的胰蛋白酶（0.05%）(能覆盖细胞就行)，放入细胞培养箱中消化 1-2min（根据不同类型细胞而定）。 5、细胞都变圆后加入等体积的完全培养基终止消化。 6、用滴管缓慢吹打细胞，把细胞都悬浮起来成细胞悬液，吸到15ml的离心管中，1000转离心1-3min。（同细胞传代中步骤） 7、倒掉上清液，加入预制的冻存液制成细胞悬液，分装到灭菌的冻存管中，（注意不要加满，预留其结冰后的空间，一般1.8ml的冻存管加入≦1.5ml 的细胞悬液）。

肝癌的血液指标有哪些

肝癌的血液指标有哪些文章目录*一、肝癌的血液指标有哪些*二、肝癌的元凶是什么*三、肝癌患者的食疗方肝癌的血液指标有哪些1、肝癌的血液指标有哪些血清AFP:及其异质体是诊断肝癌的重要指标和特异性最强的肿瘤标记物,国内常用于肝癌的普查、早期诊断、术后监测和随访。对于AFP≥400μg/L超过1个月,或≥200μg/L持续2个月,排除妊娠、生殖腺胚胎癌和活动性肝病,应该高度怀疑肝癌。另外还有部分病人有癌胚抗原(CEA)和糖类抗原CA19-9等异常增高。乙肝表面抗原(HBsAg)阳性或“二对半”五项定量检查(包括HBsAg、HBeAg、HBeAb和抗-HBc) 阳性和/或丙肝抗体阳性(抗HCVIgG、抗HCVst、抗HCVns和抗HCVIgM)都是肝炎病毒感染的重要标志;而HBV DNA 和HCV mRNA可以反映肝炎病毒载量。抽血检查是肝癌病人的必查项目,当病人做B超、CT不能确诊时,还可以做全身PET-CT检查,不仅可以直接提供肝癌的证据,还能判断全身其他部位有没有转移病灶。 2、CT可以检测肝癌分辨率高,可检出直径约一厘米左右的初期肝癌,利用加强扫描有助与血管瘤辨别。对付肝癌的诊断合适率高达百分之九十。但用度昂贵。尚不能广泛利用。

3、抉择性腹腔动脉或肝动脉造影可以检测肝癌对血管丰硕的癌肿,偶然可表现直径为零点五到一厘米的占位病变,其诊断精确率高达百分之九十。可确定病变的部位、巨细和散布,特别是对小肝癌的定位诊断是今朝各类检测法子中最优者。 4、X线可以检测肝癌腹部透视或平片可见肝脏暗影扩展。肝右叶的癌肿常可见右边膈肌降低,勾当受限或呈范围性隆起,位于肝左叶或庞大的肝癌,X线钡餐检测可见胃和横结肠被推压征象。肝癌的元凶是什么乙肝病毒是肝癌最大的隐患。多数肝癌患者都是由乙肝患者或者乙肝携带者转变而来。原因是人感染乙肝病毒之后,病毒在体内复制、活跃,对肝脏造成损害。长期的这种损害导致肝硬化,进而引发肝癌。胆道系统疾病也是肝癌的重要诱发因素。虽然肝病和胆病的病因和发病机制不同,但是由于肝脏和胆离得近,互相影响,所以胆道疾病也是肝癌的诱因。胆道疾病严重可致慢性肝衰竭。另外最新研究表明,严重的脂肪肝也能导致肝硬化,最后发展为肝癌。肝癌患者的食疗方枸杞甲鱼: 枸杞30克,甲鱼150克。将枸杞、甲鱼共蒸至熟烂即可,枸杞与甲鱼汤均可食用。每周1次,不宜多食,尤其是消化不良、失

Clausenidin及其结构类似物对於人类肝癌细胞株 Hep G2

Clausenidin及其結構類似物對於人類肝癌細胞株Hep G2/A2與Hep 3B/T2作用的研究 Study the effects of clausenidin and it's analogue on human hepatoma cell lines Hep G2/A2 and Hep 3B/T2 蘇俊圖 Su, Chun-Tu 生物藥學研究所關鍵詞: 生物科技;藥學;肝癌細胞株;Clausenidin; Keyword: BIOTECHNOLOGY;PHARMACOLOGY; 摘要: B型肝炎是全球性的流行疾病，尤其在亞非地區最為盛行。由流行病學上的研究顯示，B型肝炎帶原者罹患肝癌的機率遠大於正常人，但至今仍無有效藥物可供治療之用，因此這方面的新藥開發是一重要課題。本論文以帶有B型肝炎病毒基因且能表現B型肝炎病毒表面抗原的人類肝癌細胞株Hep G2/A2、Hep 3B/T2作為藥物篩選模式，並對所篩得之化合物其抑制表面抗原產生及對細胞生長之調節機制做探討。在本論文中，發現到在一些pyranocoumarin的結構類似物中， Clausenidin對於抑制 B型肝炎病毒表面抗原的能力最強，其中Clausenidin之抑制濃度EC(50)為1.0μg/ml 。由RT-PCR分析，發現表面抗原基因之mRNA表現量會受影響。在另一株無HBV基因但有高效率轉染HBV基因之人類肝癌細胞株HuH-7細胞，發現Clausenidin處理後，其HBV表面抗原的promoter-SPII，以及HBV基因會受到影響。經對細胞預先處理TPA以去除蛋自激活酵素C(PKC)的實驗，得知Clausenidin 抑制細胞產生表面抗原的作用與PKC活化途徑無關。人類肝癌細胞株HepG2/A2經Clausenidin處理其抑制B型肝炎病毒表面抗原的能力具有可逆性，但處理Clausenidin長時期(6天)對HepG2/A2細胞會抑制細胞生長；但在另一肝癌細胞株 Hep3B/T2，細胞生長則不被抑制。經由細胞週期及DNA複製分析發現經Clausenidin處理，使HepG2/A2之細胞週期進行停止，DNA複製能力減弱。在兩種不同人類肝癌細胞 Hep G2/A2，Hep3B/T2經lausenidin長期處理後對於另一肝癌細胞指標?甲型胎兒蛋白(AFP) ，在Hep G2/A2 細胞中AFP分泌量增加，但在Hep 3B/T2細胞中分泌量卻減少。在藥物篩選中同時發現另一pyranocoumarin?Clausarin，會造成細胞死亡的效果。經由細胞外型、去氧核糖核酸分析，以及用螢光顯微鏡染色，觀察細胞核，認為細胞之死亡其應是細胞程序性死亡(apoptosis)。一些pyranocoumarin的結構類似物，對於抑制表面抗原之結構-活性間之關係(SAR)，以及Clausenidin如何影響細胞生長、甲型胎兒蛋白在不同細胞的作用差異，與 Clausarin如何造成細胞死亡，都值得做更進一步的探討。 Hepatitis B virus (HBV) infection is a world-wide public health and epidemiology probl em, especially in Asia and Africa. Epidemic studies have clearly shown that the chronic carriers of HBV can cause highe r percentage of liver diseases such as hepatocellular carcinoma (HCC) and cirrhosis than normal people. To date, no tru ly effective drugs against HBV are available, therefore it is important to develop anti-HBV drugs. In these studies we d emonstrated that human hepatoma, Hep G2/A2 and Hep 3B/T2 cells, cell line containing HBV genomes and by transfection HBV genomes respectively, which continually secrete HBsAg into culture medium, can serve as a quick assay system for drug s creening for anti- HBV activity. Furthermore the regulatory mechanism of suppression of production of HBsAg and cell gr owth were also investigated. In this studies from some pyranocoumarins, Clausenidin strongly suppressed the production o f HBsAg. Clausenidin suppressed the HBsA g production by bot h Hep G2/A2 and Hep 3B/T2 cells with EC5o 1.0μg/ml. RT-PCR analysis reveals that the suppression of HBsAg gene expression by Clausenidin is mainly at the mRNA level. Clausenidin n ot only suppress the endogeneously expressed HBsAg in the Hep G2/A2 cells but also suppresses the HBsAg, HBeAg produced

内科护理学-原发性肝癌

一、概述原发性肝癌（primary carcinoma of the liver，简称肝癌）是指肝细胞或肝内胆管细胞发生的恶性肿瘤，我国为高发区，在消化系统恶性肿瘤死亡率中位居第三位，排位于胃癌和食管癌之后。本病可发生于各年龄段，以40-49岁为最多见，男性多于女性，男女之比大约为2:1-5:1。（一）病因本病病因尚未完全肯定。 1.病毒性肝炎原发性肝癌病人中约有1/3有慢性肝炎史。流行病学调查发现，肝癌高发区人群的HBsAg 阳性率高于低发区，而肝癌病人血清HBsAg及其他乙型肝炎标志的阳性率也高达90%，提示乙型肝炎病毒与肝癌高发有明显关系。研究提示丙型病毒性肝炎与肝癌的发病也密切有关。 2.肝硬化原发性肝癌合并肝硬化者占50%-90%，主要是在乙型和丙型病毒性肝炎基础上发生，而在欧美国家肝癌则常发生在酒精性肝硬化的基础上。 3.黄曲霉素黄曲霉素中的代谢产物黄曲霉素B1有强烈的致癌作用，流行病学调查结果发现，在粮油、食物受黄曲霉素污染严重的地区，肝癌发病率也较高。 4.其他因素肝癌的发生还与遗传、水源污染、有机氯类农药、亚硝胺类、华支睾吸虫感染等有关。（二）分型肝癌按大体形态分为巨块型、结节型、弥漫型和小癌型，按细胞分为肝细胞型、胆管细胞型和混合型。（三）转移方式肝癌的转移方式有血行转移、淋巴转移、种植转移三种。肝内血行转移发生最早、也最常见，很容易侵犯门静脉分支形成癌栓，脱落后引起肝内多发性转移灶；肝外血行转移以肺多见，其次为肾上腺、骨、主动脉旁淋巴结等。淋巴转移以转移至肝门淋巴结最多。二、护理评估（一）症状与体征原发性肝癌病人起病较隐匿，早期多无任何临床症状和体征，一般是经AFP普查检查出的早期肝癌，又称亚临床肝癌。中晚期病人主要表现有： 1.肝区疼痛为常见的首发症状，约占31%-74%。多呈肝区持续性刺痛或钝痛。当肝表面的癌节结破裂，坏死的癌组织及血液流入腹腔时，出现腹部剧痛和急腹症的表现，如出血量大，还会引起晕厥或休克。 2.胃肠道症状主要为食欲减退和腹胀，也可有恶心、呕吐及腹泻等。 3.全身症状可有乏力、进行性消瘦、发热、营养不良和恶病质等。 4.转移灶症状如咳嗽、咯血、气短，头痛、呕吐和神经定位体征等。 5.最常见的体征是肝脏呈进行性肿大，质地坚硬，表面凹凸不平，有大小不等节结或巨块，边缘不规则，常伴有不同程度的压痛。黄疸常在病程晚期出现。伴有肝硬化门静脉高压者可有脾大、腹腔积液、静脉侧支循环形成等表现。（二）并发症 1.肝性脑病是肝癌晚期的严重并发症，大约的肝癌病人因此死亡。 2.上消化道出血上消化道出血约占肝癌死亡原因的，常因合并食管、胃底静脉曲张，破裂时发生呕血和（或）黑便。晚期还可因胃肠道黏膜糜烂合并凝血功能障碍而有广泛出血。 3.肝癌结节破裂出血当癌结节破裂局限于肝包膜下，可形成压痛性包块，破裂进入腹腔可引起急性腹痛及腹膜刺激征。

HUVEC细胞培养心得

HUVEC 培养交流讨论：各位仁兄，我查了一下，关于HUVEC 的贴子有几千篇，不知有那位知道的多的能给总结一下？我想应该有以下几 1、讲清HUVEC 与ECV304区别 2、HUVEC 原代与细胞株的关系、区别问题 3、能否总结一下国内有哪些单位可以买到HUVEC ？是原代还是细胞株？ 4、培养中到底添加ECGS 还是ECGF ？ 5、有些推荐细胞的应该讲清自己的是原代还是细胞株，能养多少代。希望能抛砖引玉。票数+收藏2回帖16浏览2686我也要发帖举报 ? 浙江医院招聘浙江省老年医学研究所（临床医学） ? 请教关于HUVEC 细胞的培养 ? 求购HUVEC ? 【互助小组】正在养或已经养过HUVEC 的请进。 docter_zhao ? 0 2004-08-03 15:14 消息引用分享 huvec 必需加ECGS 及肝素，否则很难生长增殖举报 ? zjqlucky ? 15 ? 5 ? 7 2004-08-03 17:27 消息引用分享 docter_zhao wrote: huvec 必需加ECGS 及肝素，否则很难生长增殖这个好像也未必吧，我养的原代的huvec 只用20％胎牛血清的RPMI1640也长的很好呀，只是传ecgs 能传这么多代吧票数+收藏1 举报 ? 2004-09-08 00:20 消息引用分享我们曾试过用m199或DMEM 加20％胎牛血清原代培养，感觉效果不佳，后来加了ECGS 及肝素，发现细胞长得能有改变票数+收藏1 举报引用分享 huvec 是脐静脉内皮细胞,不是那么难养,细胞可以从脐带自己提取,卖现成的细胞株也不贵,用内皮细胞的配套培email-sinian19988@https://www.360docs.net/doc/062883976.html,

BHK细胞培养小结

BHK细胞培养小结报告人： 1、细胞培养（1）培养基：DMEM培养基+10%无支原体新生牛血清+100U/ml青/链霉素（2）细胞传代：细胞长满瓶壁90%-95%时，将上清倒掉，用D-Hanks液洗2-3遍细胞，加1ml0.25%胰酶37℃温箱消化3-5分钟后，加入3ml培养基将细胞吹下来，转移至15ml离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入3ml新鲜培养基重悬细胞，将细胞吹打均匀后按1：2或1：3的比例接种于新的培养瓶中，加入5ml新鲜培养基，放入培养箱培养。 2、细胞冻存及复苏（1）细胞冻存液：90%无支原体新生牛血清+10%DMSO （2）细胞冻存方法：细胞长满瓶壁90%后，细胞消化离心，弃上清，加入配制好的冻存培养液（含10%DMSO），重悬细胞，或者用细胞计数板计数细胞浓度，将细胞浓度调至106个/ml，将细胞转移至冻存管，每管1ml，用棉花包住冻存管放入-80℃冰箱，2天后将冻存管放入液氮冻存。（3）细胞复苏：先准备一支15ml离心管，加入5-8ml新鲜培养基，再从液氮取出细胞后立刻放入37-40℃水浴，在1min内融化，然后将细胞转移至装有培养基的离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入2ml新鲜培养基重悬，再转移到1个新的培养瓶中，加入4ml新鲜培养基放入培养箱培养，1天后细胞贴壁，换液。 3、注意事项（1）如果细胞生长太慢可选用含20%无支原体血清的DMEM培养基培养，可加快细胞生长；（2）细胞传代时必须先离心后再重悬，如果不离心直接吹打后传代细胞不能吹打成单个细胞悬液，传代细胞成堆生长，影响细胞状态；（3）细胞传代时不能传得太稀，如果传代时细胞浓度太低的细胞生长速度会很慢，而且细胞容易成堆生长；（4）胰酶在使用前最好预热到37度。由于胰酶平时保存在4度，反复预热对胰酶的活性不好，可以将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热；（5）BHK还是比较好消化的，2-3min应该足够了，消化时间太长对细胞不利。可以在显微镜下观察消化情况，必要时可以拍打培养瓶帮助细胞分散，消化结束后直接加入培养基即可，胰酶会被血清灭活；（6）细胞冻存时要选细胞状态好的细胞冻存，否则细胞不容易复苏。

血清异常凝血酶原检测在肝癌患者中的应用

血清异常凝血酶原检测在肝癌患者中的应用 [摘要]目的探讨血清异常凝血酶原检测在肝癌患者中的诊断价值及其意义。方法随机选取2012年4月―2014年4月该院收治的100例原发性肝癌患者资料进行分析，将其设置为实验组，同期选择100例非原发性肝癌患者作为对照组，入选患者均检测血清异常凝血酶原，分析血清异常凝血酶原检测在肝癌患者中的检测效果。结果实验组原发性肝癌患者AFP 指标，血清异常凝血酶原指标，显著高于对照组其他疾病患者(P<0.05);慢性肝病、消化道肿瘤、继发性肝癌以及其他肝脏疾病患者相比血清AFP和血清异常凝血酶原显著低于对照组(P<0.05);血清异常凝血酶原诊断符合率、阳性预测值、阴性预测值，显著高于单一甲胎蛋白检测(P<0.05);血清异常凝血酶原联合甲胎蛋白检测特异性、符合率、阳性预测值，显著高于甲胎蛋白和血清异常凝血酶原(P<0.05)。结论肝癌患者治疗过程中检测血清异常凝血酶原效果理想，且检测过程中联合甲胎蛋白能够提高患者敏感性和特异性。 [关键词] 血清异常凝血酶原;诊断价值;意义;肝癌原发性肝癌(primary hepatocellular carcinoma)是临床上常见的疾病，这种疾病发病率较高，且随着人们生活节奏的加快其发病率出现上升趋势，它是全世界第五大癌症，占癌症死亡人数的第三位。目前，临床上对于肝癌尚缺乏理想的诊断方法，常规方法主要依赖影像学检查或肝组织病理活检等方法，这些方法虽然能够帮助患者诊断，但是特异性和敏感性较差[1]。因此，临床上研究积极有效的血清肿瘤标志物加强肝癌诊断具有重要的意义。近年来，血清异常凝血酶原检测在肝癌患者中广为使用，且效果理想，它是一种特异性较强的原发性肝癌标志物[2]。为了探讨血清异常凝血酶原检测在肝癌患者中的诊断价值及其意义，随机选取2012年4月―2014年4月该院收治的100例原发性肝癌患者资料进行分析，现报道如下。一、资料与方法 1.1 一般资料随机选取2012年4月―2014年4月该院收治的100例原发性肝癌患者资料进行分析，将其设置为实验组，患者中男58例、女42例，年龄为21.5～78.9岁，平均年龄为(55.7±3.1)岁。原发性肝癌患者血清标本均来源于由病理学诊断或临床诊断为原发性肝癌;同期选择100例非原发性肝癌患者作为对照组，患者中男45例、女55例，年龄为22.7～82.9岁，平均年龄为(57.3±2.6)岁。患者中29例慢性肝病、21例消化系统肿瘤、18例继发性肝癌、20例其他肝脏病变及12例对照组。患者对诊断方案、护理措施等有知情权、患者年龄、病程等差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。 1.2 方法 ①标本要求：采集的标本排除存在明显溶血、脂血、黄疸或者伴有其他微生物污染等标本。标本采集后进行温室保存时在时温度控制在2～8 ℃保存不超过7 d标本温度控制在-20℃冻存(冻存时间不宜超过1个月)或者冻存温度控制在-80 ℃(冻存时间不超过6个月)[3]。②试验方法。采用Modular E170全自动免疫分析仪电化学发光法检测患者甲胎蛋白。参考范围为<20 ng/mL;采用酶化学发光法检测血清异常凝血酶原，相关仪器和试剂由南京迪安医学检验中心提供，参考范围为<40 mAU/mL。所选试剂均为原装试剂盒，相关操作步骤必须严格遵循实验室相关操作步骤必须严格相关操作步骤进行。在试验标本检验测试前、检验中、

原发性肝癌患者的护理

原发性肝癌患者的护理原发性肝癌简称肝癌,是指发生自肝细胞和肝内胆管细胞的癌肿，是我国常见的恶性肿瘤之一，在消化系统恶性肿瘤中死亡率仅次于胃癌、食管癌，位居第三。本病可发生于任何年龄阶段，以40～49岁为多见，男女之比为(2～5)：1。 1 临床表现原发性肝癌起病隐匿，早期缺乏典型表现。经甲胎蛋白(AFP)测定检出的早期病例可无任何症状和体征，称为亚临床肝癌。自行就诊的患者多为中晚期，其主要表现有： 1.1症状(1)肝区疼痛：有半数以上的患者有肝区疼痛，常局限于右上腹部，呈持续性胀痛或钝痛。肝痛与肿瘤的迅速增长使肝包膜被牵拉有关。当肝癌结节破裂，坏死的癌组织及血液流入腹腔，可引起全腹剧痛，产生急腹症的表现，严重时可出现休克。(2)全身症状：有腹胀、食欲减退、恶心、呕吐及进行性消瘦、发热、营养不良和恶病质等。(3)转移灶的表现：如发生肺、骨、胸腔等转移，则可产生相应的症状。(4)其他：由于肿瘤本身导致代谢异常，引起红细胞增多、低血糖、高血脂、高血钙等。 1.2体征(1)肝肿大：肝呈进行性肿大，触之质地坚硬，表面凹凸不平，有大小不等的结节，边缘钝而不齐，常有压痛。(2)黄疸：晚期可由于肿瘤压迫或侵蚀肝门附近胆管，或癌组织脱落导致胆道梗阻引起黄疸。(3)肝硬化征象：肝癌伴肝硬化门脉高压者可有脾大、腹水、侧支循环建立等表现。

1.3并发症(1)上消化道出血：因肝癌多合并肝硬化，引起食管、胃底静脉曲张，一旦破裂则可发生呕血、黑便。晚期可由于胃肠屏障功能减弱及凝血功能障碍，胃肠黏膜出现糜烂、溃疡致广泛出血。(2)肝性脑病：是肝癌晚期的并发症，病死率高。(3)癌结节破裂出血：表现为急腹症症状，有10％肝癌患者因癌结节破裂出血而致死亡。(4)继发感染：由于患者长期处于消耗状态及进行放疗、化疗引起的副作用等导致自身抵抗力低下，易继发肺炎、败血症、肠道感染等。 2 临床护理 2.1疼痛的护理肝癌晚期患者往往疼痛剧烈，且较为持续，难以忍受。在护理上，除了给予关心、疏导外，要给患者提供一个舒适、安静，利于休息的环境。评估其疼痛的性质、强度、部位，注意遵医嘱给止痛药，并观察用药后的疗效。同时，可鼓励患者采用转移注意力，放松、分散疗法等非药物方法止痛。 2.2饮食护理提供高蛋白、适当热量、高维生素的饮食。有食欲不振、恶心、呕吐的患者，可通过在进食前做好口腔护理，少量多餐等方法促进食欲，增加进食量。对于进食少的患者，应给予营养支持疗法，包括肠道内营养、静脉营养的应用，必要时还可静脉给予白蛋白。腹水严重的患者应限制每日水、钠的摄入，准确记录尿量。有肝性脑病倾向的患者，对蛋白的摄入应减少，甚至禁食。 2.3心理护理本病起病隐匿，一旦发现多已是晚期，面对突如其来的沉重打击，患者极易产生悲观、绝望的情绪。护理人员应加强跟患者的交流沟通，了解患者在不同阶段的情绪变化，给予相应的护理，

南方医科大学研究生细胞培养技术考试重点总结

一. 细胞培养技术的概念,简史在体外对细胞培养并进行研究的技术, 也叫细胞克隆技术. 细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。细胞培养技术主要包括二大方面内容: 1.微生物细胞培养技术 2.动, 植物细胞培养技术：1) 器官培养技术 2) 组织培养技术 3) 细胞培养技术二. 细胞培养的优点 1.得到的是活细胞：能长时间、直接观察、研究活细胞的形态、结构、生命活动 2.可控制：（1）可控制-选择对象：类型：上皮？间质？性质：正常？肿瘤？（2）可控制-调节条件：各种因素:物理、化学、生物等因素（3）可控制-利用方法。采用各种研究技术、记录方法：研究：倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记-- 记录：摄影照片、缩时电影、电视-- 3. 应用广（1）学科多：（2）对象广：各种动物：低等动物--高等动物--人类；一种动物：不同年龄；不同组织: 正常或异常（肿瘤）4.较经济：花钱较少但可得到大量、同时、重复性好的生物学性状相似的实验对象 5. 不易污染环境三、细胞培养的缺点 1. 现人工无法完全模拟体内环境： a. 失去彼邻关系b.失去神经体液的调节和细胞相互间的影响 2. 细胞趋向单一化 3.失去原有组织结构和细胞形态 4.分化减弱或不显：要正确认识体外培养细胞是一种特定条件下生长的细胞群体。 5. 某些类型细胞还很难培养 6.大规模培养难度大四. 体外细胞培养的方式 1.粘附型培养: 附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。粘附是大

多数有机体细胞在体内外生存和生长发育的基本存在方式 2.悬浮型培养: 不必附着于固相支持物表面，而在悬浮状态下即可生长的细胞。来源:来自血，脾或骨髓，尤以血中白细胞.癌肿细胞也可以. 特点:在悬浮中生长良好,细胞圆形，单个或小细胞团优点: 生存空间大，提供数量大,传代方便(不需消化),易于收获可获得稳定状态. 缺点:观察不方便, 很多细胞不能悬浮生长(尤以正常细胞) 五.体外培养细胞的生长形态分类根据形态大致的不同，主要2类： 1.上皮样：来源：来源于外胚层，内胚层细胞如：皮肤及其衍生物, 消化道，乳腺，肺泡, 上皮性肿瘤形态：类似体内的上皮细胞，扁平，不规则多角形，中有圆形核易相连成片相靠—紧密相连—成薄层—铺石状 2.成纤维细胞样：培养中形态与成纤维细胞类似。来源：中胚层间充质组织起源的组织如：真正的成纤维细胞：心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮形态：似体内成纤维细胞的形态，胞体梭形或不规则三角形，胞质向外伸出2—3个长短不等的突起，中有卵圆形核。 3.其它，不定型六. 常用术语1.细胞系（cell line）：原代培养物首次传代后，就可以称细胞系。不能或有限传代下去称有限细胞系。能连续传代的称连续细胞系。 2.细胞株：某类细胞经传代克隆并保持了该类细胞理化特征的细胞群体。 3.原代培养：直接取自生物体的组织细胞并进行培养 4.传代培养：将细胞从一个培养物内分散到另一个培养物的过程。 5.转染（transfection）：将某个基