物拟南芥和烟草甲醛代谢机理的差异
１７６４
光谱学与光谱分析
第３０卷
１材料与方法
１．１植物材料
拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ，ｅｃｏｔｙｐｅ，ｃｏｌｕｍｂｉａ）和烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＣＶ．Ｘａｎｔｈ）种子经表面消毒，播种在ＭＳ培养基中，长大后用于甲醛吸收和代谢及ＦｎＲ分析。１．２方法
１．２．１植物甲醛吸收及代谢能力测定
取５ｇ植物材料放入三角瓶中，加入２００ｒ１１Ｌ的甲醛处理液（Ｚｍｍｏｌ?Ｌ～ＨＣＨＯ，５ｍｍｏｌ?Ｌ－１ＫＨＣ０３和０．１％ＭＥＳ），２３℃持续光照振荡培养，处理不同时间后用Ｎａｓｈ法［５］测定处理液中残留甲醛的浓度。另取０．４～２．０ｇ植物材料浸泡于１０～４０ｍＬ甲醛处理液（２ｍｍｏｌ?Ｌ－１ＨＣＨ０，２
ｇＣｉＨ１４ＣＨ０，５ｍｍｏｌ?Ｌ１ＫＨａ岛，０．１％ＭＥＳ）中，２３℃
持续光照振荡培养过夜，用１０％三氯乙酸（ＴＣＡ）抽提并离心得到植物可溶性部分（上清液）和不溶性部分（残渣），不溶性部分连续使用５ｏＡＴＣＡ洗ｉ次，５０％乙醇洗２次，１００％乙醇洗１次。用液闪仪测定上清液和残渣的１４ｃ同位素活性，并计算出其占起始同位素１４Ｃ活性的百分比【５］。
１．２．２
ＦＴｍ样品的制备
取５ｇ植物材料放入２ｍｍｏｌ?Ｌ１甲醛处理液（２００ｍＬ）中，２３℃持续光照振荡培养。在处理不同时间后取出植物样品，用清水洗去表面残留甲醛，１０５℃杀青，６４℃烘箱干燥
２４
ｈ，磨成粉状２００目过筛。置于５０℃烘箱中烘至恒重，准
确称取１．００ｍｇ样本，混入２００．００ｎａｇ碎晶型ＫＢｒ于玛瑙研钵中充分研磨，全部转移到模具中用压片机制备出均匀、透明锭片。每个处理样本制备３个锭片，于傅里叶变换红外光
谱仪上采集谱图。
１．２．３
ＦＴＩＲ分析
ＮｉｃｏｌｅｔＦＴⅡ０５７００傅里叶变换红外光谱仪，ＤＴＧＳ检测
器，扫描范围４
０００～４００咖～，分辨率为４锄＇。，扫描累加
３２次。每个锭片选取３个点采集３张谱图，取其平均谱图作为最后的样品谱图。应用ＯＭＮＩＣＦ－ＳＰ．５．１智能操作软件进行谱图数据处理。每个样品测定前均对背景进行扫描，得到的红外光谱进行基线校正，确定峰值和吸光度。
２结果与讨论
２．Ｉ拟南芥、烟草吸收和代谢甲醛及抵抗甲醛能力的差异
图１（ａ）显示拟南芥、烟草在２ｍｍｏｌ?Ｌ－１甲醛处理液中吸收甲醛的速率。拟南芥完全吸收处理液中所有甲醛需３６个ｈ，但烟草样品需要处理到４８ｈ才检测不到残留甲醛，由此可以看出两种植物均能够吸收处理液中的甲醛，但拟南芥的甲醛吸收能力要强于烟草。用放射性甲醛（Ｈ１４ＣＨＯ）处理植物后，在植物的可溶性部分（代谢中间产物）和不溶性部分（代谢终产物）均有１４Ｃ活性出现，但前者强度仅为后者的１１５（图１（ｂ）），这说明甲醛在植物体内主要被固定成不溶性组分，固定能力的强弱是影响植物甲醛代谢能力的主要因素。拟南芥不溶性部分中回收的１４Ｃ活性是９．５％，而烟草为６．２％，这表明前者的甲醛固定能力要优于后者。图１（ｃ）显示拟南芥、烟草在２ｍｍｏｌ?Ｌ－１甲醛处理不同天数后叶片颜色和形态的变化。在甲醛处理后第３天，烟草的叶片上开始出现透明区域或自斑，至第４天，烟草叶片上出现较大面积的透明区和坏死区，但是拟南芥叶片在甲醛处理后的第３天至第４天都没有发生任何可见的变化或损伤。这说明拟南芥
Ｆｉｇ．１
Ｕｐｔａｋｅ．ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｂｉｌｉｔｉｅｓｏｆａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓａｎｄ
ｔｏｂａ咖ａｎｄ
ｃｈａｎｇｅｓｉｎｔｈｅｉｒｌｅａｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｕｎｄｅｒＨＣＨＯ
ｓｔｒｅｓｓ
（ａ）：Ｕｐｔａｋｅｏｆ
２
ｍｍｏｌ?Ｌ一１ＨＣＨＯｂｙａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓａｎｄｔｏｂａｃｃｏ
（ｂ）：ＨＣＨＯｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｂｙａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓａｎｄ
ｔｏｂａｃｃｏ；（ｃ）：Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓａｎｄｔｏｂａｃｃｏｌｅａｖｅｓｕｎｄｅｒ２ｍｍｏｌ?Ｌ一１ＨＣＨＯ
ｓｔｒｅｓｓ
应用FTIR研究模式植物拟南芥和烟草甲醛代谢机理的差异
作者：宋中邦， 梅岩， 程琴， 张道君， 黄庶识， 陈丽梅， SONG Zhong-bang， MEI Yan，CHENG Qin， ZHANG Dao-jun， HUANG Shu-shi， CHEN Li-mei
作者单位：宋中邦,梅岩,张道君,陈丽梅,SONG Zhong-bang,MEI Yan,ZHANG Dao-jun,CHEN Li-mei(昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心,云南,昆明,650224)， 程琴,黄庶识
,CHENG Qin,HUANG Shu-shi(昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心,云南
,昆明,650224;广西科学院生物物理实验室,广西,南宁,530003)
刊名：
光谱学与光谱分析
英文刊名：SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS
年，卷(期)：2010，30(7)
被引用次数：0次
参考文献(11条)
1.Achkor H.Diaz M.Fernandez M R查看详情 2003(4)
2.Giese M.Bauer-Doranth https://www.360docs.net/doc/0c5311729.html,ngebartels C查看详情 1994(4)
3.Hanson A D.Roje S查看详情 2001
4.Hanson A D.Gage D A.Shachar-Hill Y查看详情 2000(5)
5.Chen L M.Yurimoto H.Li K Z查看详情 2010(3)
6.ZHANG Xiao-bin.LIU Peng.LI Dan-ting查看详情 2008(5)
7.Feldman M Y查看详情 1973
8.Cossins E A查看详情 1964
9.Kordic S.Cummins I.Edwards R查看详情 2002(2)
10.Ambard-Bretteville F.Sorin C.Rebeille F查看详情 2003(6)
11.Shiraishi T.Fukusaki E.Kobayashi A查看详情 2000(3)
本文链接：https://www.360docs.net/doc/0c5311729.html,/Periodical_gpxygpfx201007009.aspx
授权使用：河南农业大学(hnnydx)，授权号：c1adc1d6-cb77-484e-b98c-9e4e009eecd6
下载时间：2010年12月16日