神经元特异性烯醇化酶测定影响因素的研究及在肺癌检测中的应用_佟素香
神经元特异性烯醇化酶测定影响因素的研究
及在肺癌检测中的应用
佟素香,王小芳,曾 轶,徐 魁
(同济医科大学附属协和医院肿瘤诊疗研究中心,湖北武汉430030)
【摘要】 目的 探讨溶血和标本保存时间对神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定的影响及其在肺癌检测中的应用。方法 采用ELISA双抗体夹心法,对不同浓度的溶血标本进行测定,计算因溶血产生的血红蛋白与NSE含量的关系;对正常人和4例小细胞肺癌患者抽取血液标本后立即测定和分别放置1、2、3d再测定,计算其NSE含量的变化;对良性肺病患者20例、非小细胞肺癌患者54例、小细胞肺癌患者46例进行NSE测定;并对12例小细胞肺癌患者进行治疗前、治疗后动态观察。结果 溶血对NSE测定结果影响很大,因溶血每增加1g血红蛋白就可测定出32.46μg/L的NSE;标本放置1、2、3d再测定,其NSE含量显著增加(P<0.01);良性肺病与非小细胞肺癌、小细胞肺癌之间,非小细胞肺癌与小细胞肺癌之间,均显示差异有极显著意义(P<0.01);小细胞肺癌患者治疗前和恢复后的NSE水平差异有极显著意义(P< 0.01)。结论 NSE的测定,对小细胞肺癌等的辅助诊断、疗效观察价值很大。但因标本溶血及延长测定时间对NSE的结果影响甚大。因此实际工作中,应绝对禁止使用溶血标本,且抽取标本后必须尽快测定,以提高结果的准确性。
【关键词】 神经元特异性烯醇化酶;肺癌;影响因素;溶血
【中图分类号】 R446.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1004-0501(2005)12-1400-03
神经元特异性烯醇化酶(NSE)是烯醇化酶的一种同工酶,是小细胞肺癌、神经母细胞瘤最敏感、最特异的肿瘤标志物。现已广泛在临床实验室应用。标本溶血对实验结果影响很大,致于影响程度究竟如何,至今尚未见报道。我们使用瑞士康乃格公司提供的E LISA 法NSE试剂盒,采用自制溶血标本,观察因标本溶血对实验结果的影响,并计算不同程度的溶血与NSE含量的关系;及观察抽取标本后立即测定和将标本放置1,2,3d后再测定,其血清中NSE含量的变化;同时对临床患者标本进行测定。现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 一般资料:正常人标本,男48岁,系各项体检指标均正常的健康体检者。4例小细胞肺癌患者标本,系2004年8～9月确诊的我院男性住院患者,年龄37～49岁。自制溶血标本:取一份无溶血的正常人标本(本院职工),测定上清NSE含量为0.85μg/L。人工使其溶血后高速离心,取上清备用。临床标本:良性肺病患者22例(其中肺炎10例、慢性支气管炎5例、肺结核5例、结核性胸膜炎2例),年龄25～65岁,平均50岁;原发性肺癌患者标本100例:非小细胞肺癌54例,小细胞肺癌46例(我院住院患者),年龄37～70岁。
1.2 试剂与仪器:ELI SA法NSE试剂盒,瑞士康乃格公司提供;酶标仪,奥地利生产biocell2010型;SF3000血液分析仪,日本东亚公司生产。
1.3 方法:按瑞士康乃格公司试剂盒说明书进行操作(试剂盒为双抗体夹心法,使用碱性磷酸酶)。正常人血清标本立即测定后,再分别放置1,2,3d各重复测定。每次、每份标本重复测定5次,计算其均值、标准差及进行差异显著性检验,结果见表1。4例小细胞肺癌患者(下称例1,2,3,4),血清标本立即测定后,再分别放置1,2,3d各重复测定。每次、每份标本重复测定5次,计算其均值、标准差及进行差异显著性检验,结果见表2。
1.3.1将自制的溶血标本,再次离心,取上清液用SF3000血液分析仪重复测定数次,调整血红蛋白含量使其均值为4.0g/L。将其倍比稀释成
2.0,1.0,0.5, 0.25,0.125,0.063,0.031g/L的8个梯度。每个梯度重复测定5次,计算其NSE均值(μg/L)。再依次计算出每克血红蛋白NSE含量(μg/L),最后以NSE和血红蛋白总量,计算出总平均每克血红蛋白NSE含量(μg/ L),结果见表3。
1.3.2 自制溶血标本NSE含量与肉眼观察各管溶液染色的对照,见表4。
1.3.3 临床应用
1.3.3.1 良性肺病患者22例、非小细胞肺癌患者54例、小细胞肺癌患者46例的NSE结果,见表5。
1.3.3.2 随机统计12例,治疗前和治疗恢复后的小细胞肺癌患者NSE水平,以动态观察治疗效果。
2 结 果
2.1 正常人血清标本立即测定和放置1,2,3d后,NSE 测定结果及差异显著性,见表1。
表1 正常人血清标本立即测定和放置1,2,3d NSE测定
测定时间
NSE
(x±s,μg/L)
1～3d
增高/立即(%)
1～3d
差异显著性/立即
立即测定8.2±0.35——
1d测定8.7±0.446.1P<0.01
2d测定9.6±0.4617.1P<0.01
3d测定10.8±0.9231.7P<0.01
2.2 例1,2,3,4血清标本立即和放置1,2,3d后NSE
测定结果及差异显著性,见表2。
表2 例1,2,3,4血清标本立即测定
和放置1,2,3dNSE测定 (μg/L,x±s)患 者患者1患者2患者3患者4
立即测定20.14±1.2833.04±1.5542.30±2.1455.60±2.10 1d测定24.18±1.17①37.94±2.19①47.57±1.30①66.90±3.23①2d测定28.41±1.20①45.30±1.30①58.94±2.76①80.14±3.45①3d测定31.50±1.23①52.20±1.17①68.43±1.41①96.38±3.16① 注:①差异有极显著意义,P<0.01
2.3 自制溶血标本NSE测定结果,见表3。
表3 自制溶血标本NSE测定结果
系列血红蛋白
(g/L)4.02.01.00.50.250.1250.0630.031测定出NSE
(μg/L)138.064.233.017.28.74.041.911.08每克Hb含NSE
(μg/L)34.532.133.034.434.831.131.827.0总平均每克Hb
N SE含量
(μg/L)
32.46 2.4 自制溶血标本NSE含量与肉眼观察各管溶液颜色对照,见表4。
表4 自制溶血标本NSE含量与肉眼观察
各管溶液颜色对照
血红蛋白(g/L)4.02.01.00.50.250.130.060.03 NSE(μg/L)138.064.233.217.28.74.041.911.08
颜 色红红浅红微浅红微微浅色微浊微微浊无色
2.5 良性肺病、非小细胞肺癌、小细胞肺癌血清标本NSE测定结果,见表5。
表5 良性肺病、非小细胞肺癌、小细胞肺癌
血清标本NSE测定结果
组 别n NES(x±s,μg/L)阳性率(%)
良性肺病225.48±1.991/22(4.5)非小细胞肺癌5414.00±8.7210/54(18.5)
小细胞肺癌4648.14±34.2035/46(76.1)
注:P<0.01
2.6 12例小细胞肺癌患者治疗前和治疗后恢复期的动态NSE水平。治疗前NSE为(54.12±19.20)μg/L、治疗后为(10.06±4.24)μg/L。治疗前结果明显增高;治疗后有2例稍偏高、10例恢复到正常水平。治疗前、后差异有极显著意义(P<0.01)。
3 讨 论
NSE是烯醇化酶的一种同工酶,分子量为78KD。烯醇化酶同工酶根据α、β、γ三个辅基的不同,可分为αα、ββ、γγ、αβ和αγ五种二聚体同工酶。α亚基主要存在于肝、肾等组织;β亚基主要存在于骨骼肌和心肌;γ亚基主要存在于神经组织。γγ亚基组成的同工酶属神经元和神经内分泌细胞特有,故命名为神经元特异性烯醇化酶。NSE在正常人脑组织中含量很高,起源于神经元和神经内分泌细胞的肿瘤组织也呈异常表达。NSE是一种细胞内酶,参与糖酵解,使癌肿组织糖酵解作用增强,细胞增殖周期加快,细胞内的NSE释放进入血液增多,导致此酶在血清内含量增多。小细胞肺癌也是一种能分泌NSE的神经内分泌性质的肿瘤。所以,NSE是小细胞肺癌、神经母细胞瘤最敏感、最特异的肿瘤标志物。它的测定不仅可对小细胞肺癌、神经母细胞瘤的辅助诊断、疗效观察和预后评价提供依据,也可对嗜铬细胞瘤、黑色素瘤、甲状腺髓样癌、胰岛细胞瘤等提供诊断信息[1]。
NES也存在于正常红细胞中,溶血标本将会干扰结果的正常判断;由于红细胞可释放大量的NSE,因此溶血可导致结果偏高;同样NSE也可从血小板中释放,因此,离心不充分的样本NSE的结果也会偏高等[1～3]。检验界对溶血标本对血清钾测定的影响尽管提法有异,但历史上早已达成共识。如有的报道,红细胞中含钾约为血浆的20倍,所以标本中任何溶血都会引起血钾结果增高;肉眼能观察到的溶血,血清钾增加0.2mmol/L。所以测定血清钾时不能用溶血标本;甚至没有溶血的标本若放置过久,血清与血细胞凝块接触,钾离子从血细胞向血清转移而使血清钾增高[4]。由于细胞内钾含量为(151±11.5)mmol/L,是细胞外含量的40～50倍,因此,只要有1%的细胞内钾转移到细胞外,就可使细胞外液中的钾总量增加40%～50%[5]。 但是红细胞内存在NSE的量以及溶血对血清NSE 测定结果究竟有多大的影响,至今未见报道。我们研究得出,每溶解红细胞释放1g血红蛋白量,就平均测定出32.46μg/L的NSE,属假阳性结果。在观察溶血与NSE含量关系中看到,当溶血产生0.25g/L血红蛋白、肉眼观察溶液颜色显微微浅色(几乎看不到红色)时,NSE含量即在8.7μg/L;溶血产生0.5g/L血红蛋白时,肉眼观察溶液显微浅红色时,NSE含量达17.2μg/ L,已超过试剂盒的参考范围(14.0μg/L),可见溶血对实验结果影响很大;同时正常人和小细胞肺癌患者血清标本立即测定和放置1、2、3d后再测定,均显示立即和各天间NSE结果差异有极显著意义(P<0.01)。
通过临床标本的测定,充分显示了小细胞肺癌患者血清NSE的含量显著增加,阳性率达76.10%,与良性肺病、非小细胞性肺癌差异有极显著意义(P< 0.01)。非小细胞肺癌的阳性率为18.5%,提示部分非小细胞肺癌也可能含有神经内分泌颗粒。有报道,通过免疫电镜与免疫组化的方法在非小细胞肺癌的胞浆中也发现了神经内分泌颗粒[6]。Satoh H等也发现35.8%非小细胞肺癌患者血清NSE水平升高[7]。对12例小细胞肺癌患者治疗前和治疗后的动态NSE水平,观察到治疗前NSE显著增高的小细胞肺癌患者通
Genistein影响人催乳素瘤细胞增殖及机制
黄 海,邹自英,袁成良,赵 碧,胡晓莉
(成都军区总医院,四川成都610083)
【摘要】 目的 研究genistein对人催乳素瘤细胞的增殖代谢和DNA合成的影响,并深入探讨genistein影响催乳素瘤细胞增殖作用的机制,观察genistein作用后催乳素瘤细胞内蛋白激酶C(PKC)及cAMP/cGMP的变化。方法 采用MMT和[3H]TdR掺入实验检测genistein对人催乳素瘤细胞增殖和DNA合成的影响;通过PKC活性及cAMP和cGMP含量测定,深入探讨genistein影响催乳素瘤细胞增殖分化的分子机制。结果 ①Genistein抑制催乳素瘤细胞的增殖和DNA 合成,并呈剂量依赖性;②与空白处理组相比,使用PKC的激动剂PMA处理培养的人催乳素瘤细胞时可使胞膜和细胞总PKC活性浓度均升高,但genistein(10μmol/L)作用15min后,胞浆、胞膜和细胞总PKC活性均下降;③Genistein作用于人催乳素瘤细胞15min后,胞内cAMP水平显著升高,而cGMP没有明显改变。结论 实验结果为探讨genistein抑制催乳素瘤细胞增殖的分子机制提供了重要线索,同时提示,genistein对催乳素瘤细胞增殖分化的调控作用是细胞内多信息系统相互整合的结果。
【关键词】 Genistein;催乳素瘤;蛋白激酶C;cAMP/cGMP
【中图分类号】 R392.6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1004-0501(2005)12-1402-03
异黄酮(isoflavones)是一类具有广泛生物活性的植物次生代谢物,不同的异黄酮可分别表现出抗氧化、清除自由基、抗癌及抗菌抗病毒作用[1,2]。genistein是异黄酮的一种,最初认为其具有雌激素样的作用,有研究显示其能抑制大鼠垂体前叶细胞增殖[3],最近,人们对于genistein潜在的抗癌作用给予了大量的关注和研究。体内、体外实验的大量资料表明,genistein对多种肿瘤具有抑制细胞增殖、抑制肿瘤生长及转移等作用,如乳腺癌、结肠癌、性腺肿瘤及皮肤肿瘤等[4～7],但到目前为止,genistein对人催乳素瘤细胞的影响及机制所知不多。因此,我们选择人催乳素瘤作为研究对象,通过体外实验探讨genistein对培养的人催乳素瘤细胞增殖的影响及其机制。
1 材料和方法
1.1 材料:新鲜人催乳素瘤12例,由本院神经外科提供,诊断均经临床表现和病理组织学检查证实。将手术取下的瘤组织置于无菌生理盐水中暂时保存。Genistein、胶原酶、胰蛋白酶、DNA酶、MTT(噻唑蓝)购自美国Sigma公司;DF12培养基和PKC检测试剂盒购自美国Gibco公司;c AMP、c GMP放免试剂盒购自上海中医药大学。新生牛血清为杭州四季青生物制品公司产品;[3H]TdR购自上海原子能科学研究院。
1.2 方法
1.2.1 催乳素瘤细胞的分离和培养:在超净台内,用DF12培养液清洗瘤组织的血液3次,置于青霉素小瓶中剪碎至糊状,分别加入2.5g/L胰蛋白酶、6.7mkat/ L的胶原酶、3.3mkat/L的DNA酶各5ml,37℃水浴振摇消化25min,加牛血清,用200目滤网过滤,离心弃上清,加DF12培养液,轻轻吹起细胞,离心弃上清,加含100ml/L胎牛血清的DF12培养液,轻轻吹起细胞,调整为5×108/L,并接种于96孔板,每孔100μl,移入CO2孵箱中,在37℃、50ml/L CO2及饱和湿度条件下培养。24h换液,之后48h换液1次。
过治疗后,83.3%恢复到了正常水平。
综上,NSE的测定对小细胞肺癌的辅助诊断、疗效观察、预后判断有一定的临床价值。但因标本溶血和标本放置对试验结果影响甚大,故NSE测定必须避免标本溶血;标本抽取后尽快分离血清立即测定。如果不能及时测定,必须尽快分离血清后放冰箱中保存。避免因标本溶血和标本放置时间过长使红细胞内的NSE逸入血清中,影响测定结果。
参考文献:
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神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒说明书
神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒说明书 本试剂仅供研究使用标本：体液 神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒试验原理： BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。 神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒自备材料 1．蒸馏水。 2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 3．振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒操作注意事项 1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法 1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 试剂的准备 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。 2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。 神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒操作步骤 1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。 3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。 4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
神经元特异烯醇化酶检测作业指导书医学检验
《文件已阅声明表》 《Procedure circulation form》 文件名称: 神经元特异烯醇化酶检测作业指导书表号: KM-MP03?02?02 《文件修改记录页》
《Procedure amendment form》 表号:KM-MP03.02.03 《文件信息表》 《Procedure information form》表号:KM-MP03?02?04
神经元烯醇化酶（NSE）检测作业指导书 （Standard operation procedure for analysis of NSE）1.原理（Test principle）: 反应原理“三明治”法，总检测时间：18 分钟。 第一次孵育：20μl 标本和一份生物素抗NSE 特异性单克隆抗体一起孵育，一份钌复合体标记的NSE 特异性单克隆抗体后，反应形成一“三明治”样抗原－抗体复合
体。 第二次孵育：加入链酶亲和素包被的微粒，复合体在链酶亲和素和生物素相互作用下形成固相。将反应液吸入检测池中，检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面。未结合的物质通过ProCell 除去。在电极上加以一定的电压，使复合体化学发光，用光电倍增器检测发光的强度。 通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2 定标点和试剂条形码上获得的主曲线生成的。 2.样本收集和储存（Specimen Collection and Storage）: 2.1样本收集（specimen collection）：类型（type）：血清（serum）；用量（volume）50μL，仪器加样量（sample volume ）20μL。 2.2拒收标本（specimen rejection）：EDTA抗凝血、严重脂血标本、接受过鼠单克隆抗体者、严重溶血（hemolysis）标本拒收 2.3标本储存条件(sample storage conditions)：室温（room temperature）保存6小时； 2-8℃24小时； -20℃3个月；十五天后处理标本。 2.4其他（others）：为避免纤维蛋白对结果的影响，必须确定离心处理前样本已经完全充分凝集。对于正在接受抗凝剂治疗的病人样本，需要延长凝集时间。 3.试剂(Reagent)： 3.1Elecsys NSE 试剂盒, 产品目录号12133113 3.1.1试剂内组份： 试剂包装，100个检测 M 链酶亲和素包被的微粒（透明瓶盖）每瓶6.5ml 链酶亲和素包被的微粒：0.72mg/ml，结合力：470ng 生物素/mg 微粒，微粒经防腐处理。 R1 生物素化NSE 特异性抗体（灰色瓶盖）每瓶10ml。生物素化单克隆抗NSE 抗体18E5 （小鼠）：2mg/L；磷酸盐缓冲液：100mmol/L，PH值7.4；经防腐处理。 R2 钌复合物标记的NSE 特异性抗体（黑色瓶盖）每瓶10ml。钌复合物标记抗NSE 单克隆抗体（小鼠）：84B10 1.0mg/L； 磷酸盐缓冲液：100mmol/L，PH 值7.2；经过防腐处理。 3.1.2未随试剂盒提供的组分 Modular Analytics COBAS601 免疫分析仪所需材料:
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神经元特异性烯醇化酶与急性脑梗死的相关性研究 黄招君;李辉华;李名生 【期刊名称】《中国医药科学》 【年(卷),期】2013(000)023 【摘要】目的：探讨脑梗死患者血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）与梗死体积、梗死部位、神经功能缺损评分的关系。方法选取发病24h以内的脑梗死患者145例作为病例组，健康体检者50例作为对照组，分别检测两组空腹血清NSE浓度及完成病例组入院时的颅脑MRI、中国卒中量表评分（CSS）等资料。结果大梗死灶组血清NSE浓度高于中、小梗死灶组血清NSE浓度（P＜0.01）；病灶部位不同各组比较血清NSE浓度无统计学意义；神经功能缺损评分高的脑梗死患者血清NSE浓度高于评分低的脑梗死患者血清NSE浓度（P＜0.01）。NSE浓度与神经功能缺损评分、梗死体积的Pearson秩相关分析呈显著正相关（P＜0.01）。结论NSE水平与梗死体积及神经功能评分有关，可作为判断急性脑梗死患者病情严重程度、临床转归及预后的重要生化指标。%Objective To explore the relationship between the serum neuron-specific enolase (neuron-specific enolase,NSE)level with stroke volume、area of cerebral infarction,neurological deficit score. Methods 145 cases of cerebral infarction within 24h were selected as patients group,50 cases of healthy subjects were selected as control group, fasting plasma NSE concentration was respectively detected ,patients,brain MRI and China Stroke Score(CSS) were completed on admitted. Results NSE concentrations in large infarct group were higher than in middle and
神经系统的组成和功能
神经系统的组成和功能 神经系统的组成： 人体神经系统是由脑、脊髓和它们 所发出的神经组成的。其中，脑和脊髓是 神经系统的中枢部分，组成中枢神经系 统；脑神经和脊神经是神经系统的周围部 分，组成周围神经系统。神经系统的组成 可概括为： 神经元： 神经元又叫神经细胞，是神经系统结构和功能的基本单位。 脑： 脑位于颅腔内，包括大脑，小脑和脑干三部分 （1）大脑 大脑由左、右两个大脑半球组成。大脑皮层是覆盖大脑半球表面的一层灰质，大脑皮层表面具有许多深浅不同的裂或沟以及沟裂之间隆起的回，因而大大增加了大脑皮层的总面积和神经元的数量。大脑皮层是调节人体生理活动的最高级中枢，其中比较重要的中枢有：躯体运动中枢(管理身体对侧骨骼肌的运动)、躯体感觉中枢(与身体对侧皮肤，肌肉等处接受刺激而使人产生感觉有关)、语言中枢(说话、书写、阅读和理解语言关，为人类特有)、视觉中枢(与产生视觉有关)。 （2）小脑 小脑位于脑干背侧、大脑的后下方。小脑的主要功能是使运动协调、准确，维持身体的平衡。人喝酒喝醉了，走路摇晃，站立不稳，这是由于小脑被酒精麻痹而引起的。 （3）脑干 脑干灰质中，有一些调节人体基本生命活动的中枢，如心血管运动中枢、呼吸中枢等。如果这一部分中枢受到损伤，会立即引起心跳、呼吸停止而危及生命。 脊髓： 脊髓位于脊柱的椎管内，上端与脑相连，下端与第一腰椎下缘平齐。脊髓是脑与躯体、内脏之间的联系通道。 （1）脊髓的结构 从脊髓的横切面可以看出，脊髓包括灰质和白质两部分。灰质在中央，呈蝶形；白质在灰质的周围。白质内的神经纤维在脊髓各部分之问以及脊髓和脑之间，起着联系作用。（2）脊髓的功能 反射功能：人的脊髓灰质里有许多低级中枢，可以完成一些基本的反射活动，如膝跳反射、排便反射等。但是，脊髓里的神经中枢是受大脑控制的。 传导功能：脊髓能对外界或体内的刺激产生有规律的反应，还能将这些刺激的反应传导到大脑。反之，脑的活动也要通过脊髓才能传递到身体各部位。因此脊髓是脑与躯干、内脏之间联系的通道。
神经元特异性烯醇化酶临床意义
神经元特异性烯醇化酶临床意义： (1)小细胞肺癌患者(SCLC)血清NSE明显增高，60-81%小细胞肺癌病例NSE浓度升高。尽管NSE浓度与转移部位或脑部转移没有相关性，但是与临床分期如疾病进展有很好的相关性。NSE的诊断灵敏度达80%，特异性达80%～90%，而非小细胞肺癌(NSCLC)患者并无明显增高，故可作为SCLC与NSCLC的鉴别诊断。血清NSE水平与SCLC的临床分期呈正相关，因此，血清NSE检测对SCLC的监测病情、疗效评价及预测复发具有重要的临床价值。 (2)神经母细胞瘤时，NSE阳性率可达96%～100%，其测定值明显增高，血清NSE 水平与病期及预后相关。测定血清NSE对该类肿瘤的早期诊断及预后判断具有较高的临床价值。 (3)血清NSE增高还可见于少数NSCLC、甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、转移性精原细胞癌、黑色素瘤、胰腺内分泌瘤等。 临床医学的研究表明，神经元特异性烯醇化酶(NSE)是一种在临床上很有应用价值的分子学标记物。这是从2个方面的应用来评述的，一是NSE可以作为肺癌和儿童神经母细胞瘤的肿瘤标记物，用于肺小细胞癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)的鉴别诊断；监测肺小细胞癌和神经母细胞瘤的病情、治疗反应和预报复发。二是NSE的活性改变同神经损伤所致的许多神经性疾病关系密切。本文将主要对NSE作为一种有用的肿瘤标记物来评述其临床意义。 胸膜腔穿刺记录 患者入院诊断“冠状动脉粥样硬化性心脏病心功能II-III级右侧胸腔积液右肺占位？高血压病脑梗塞”，为缓解症状及明确胸水原因，予以胸腔置管，相关利弊均已向患者家属说明，表示理解，患者取坐位，穿刺点定于右肩胛下线第9肋间为穿刺点，常规消毒，2%利多卡因自皮肤至胸膜壁层逐层浸润麻醉后，胸穿针自穿刺点刺入胸腔，沿穿刺针导入导丝，沿导丝导入深静脉导管，深度约12cm，胶布固定，术中术后患者无不适，外接引流袋，引流出黄色胸水800ml，予封管，胸水标本患方拒绝检查，嘱注意休息，继续给予休息、抗血小板、减轻心脏负荷、活血化瘀对症支持治疗，注意病情变化。
急性脑梗死患者神经元特异性烯醇化酶水平检测的临床意义
急性脑梗死患者神经元特异性烯醇化酶 水平检测的临床意义 （作者： ________ 单位：____________ 邮编： ___________ ） 【关键词】急性脑梗死；神经元特异性烯醇化酶；梗死面积；认知功能障碍 因急性脑梗死（ACI）常伴有较高的病死率和致残率，故临床医生对其病情发展及预后判断十分重视。神经元特异性烯醇化酶（NSE）是一 种细胞内蛋白质，特异地存在于神经细胞和神经内分泌细胞。当缺血、缺氧、中毒或损伤时，细胞膜的完整性受到破坏，NSE便从细胞内释放出来。动物实验表明，脑脊液NSE可用来判断脑梗死急性期脑损伤程度和鉴别脑的可复性与不可复性变化，这是许多现代影像学技 术如CT磁共振成像等所不能代替的〔1〕。本文检测206例ACI患者血清NSE水平，探讨其对ACI病情及预后判断的临床意义。 1对象与方法 1.1研究对象2008年1月至2009年12月我科住院ACI患者206 例，男112例，女94例，年龄48~79〔平均（5 2.3 士 2.8）丨岁。病程
4~24 h;均符合全国第四届脑血管病学术会议修订的标准〔2〕，并经头颅CT和（或）MRI证实。正常对照组为同期我院健康查体者120 例, 其中男女各半，年龄50~80〔平均(55.3 士 2.1)丨岁，排除心血管疾病、糖尿病及最近有感染史、严重肝肾功能障碍及外伤者。ACI组于入院次日清晨以及正常对照组体检日清晨抽取空腹静脉血，分离血清保存待测。根据患者临床神经功能缺损程度评分标准〔3〕按病情轻重分为轻度组69例，年龄49~72岁，男42例，女27例；中度组56 例,年龄52~79岁，男28例，女28例；重度组91例，年龄48~75岁，男42例，女39例。参照陈明生等〔4〕对脑梗死灶大小的分类标准， 将患者分为大面积梗死组(10 cm3)65例，男37例，女28例，年龄 50~72岁；中面积梗死组(5?10 cm3)77例，男43例，女34例，年龄48~75岁；小面积梗死组(5 cm3)64例，男女各半，年龄49~79岁。根据简易精神状态检查量表(MMSE于入院当天对ACI患者认知功能进行评定。MMS评分小于等于参考值者〔评分标准：满分30分,文盲W 17分；小学(受教育年限w 6年)<20分；初中及以上者w 4分〕为脑卒中后认知功能障碍者124例;评分24分者为非脑卒中后认知功能障碍者82例。根据MMS评分结果，将脑卒中后认知功能障碍者分为轻度组52例，男30例，女22例，年龄48~76岁；中度组38例，男20例，女18例，年龄52~73岁；重度组34例，男18例，女16例，年龄 50~79岁。 1.2标本采集和处理ACI组于入院次日清晨以及正常对照组体检日
神经元特异性烯醇化酶临床意义
神经元特异性烯醇化酶 神经元特异性烯醇化酶(Neuron—specific enolase，NSE)是神经母细胞瘤的肿瘤标志物，由于小细胞肺癌(SCLC)是最常表现由神经内分泌性质的肿瘤，目前NSE也是SCLC 最敏感最特异的肿瘤标志物。近年来，NSE作为神经元损伤的敏感性和特异性标志其与中枢神经系统疾病的关系已引起了国内外学者的极大关注。 一、生化特性 NSE是催化糖原酵解途径中甘油分解的最后的酶。由3个独立的基因片段编码3种免疫学性质不同的亚基α、β、γ，组成5种形式的同工酶αα、ββ、γγ、αγ、βγ。二聚体是该酶分子的活性形式，γ亚基同工酶存在于神经原和神经内分泌细胞的胞浆中，称为NSE。α亚基同工酶定位于胶质细胞，其结构和免疫学特性与肝脏中的烯醇化酶相同，称为非神经原特异性烯醇化酶(NNE)；NSE和NNE的分子量分别为78kD和87kD。 二、测定方法与正常参考值 烯醇化酶的测定方法主要有两类，一是酶活性测定法，一是酶含量测定法。酶活性测定法主要有直接分光光度法、酶偶联速率法、生物发光法和琼脂糖凝胶电泳法等，酶含量测定主要采用免疫化学法。 目前NSE测定最常用的方法有RIA和ELISA两种，RIA有放射污染，而ELISA无RIA的不足，并且灵敏度较高。国内陈惠鹏等建立的ABC-ELISA灵敏度为2ng/ml;军事医学科学院建立的ELISA测定试剂盒，灵敏度达1ng/ml,且操作简便，重复性好。最近国外学者报道用时间分辨荧光免疫分析法测定血清NSE,其重复性好，灵敏度、特异性与RIA法一致，相关系数为0.99,正常参考值女性为2.9?9.6μg/L，男性为3.4?11.7μg/L,性别间有显著差异（P<0.001）。不同方法的NSE测定值有一定差异，一般说来，健康成人血清NSE水平在10ng/ml以下均属正常。
神经元的结构 分类和功能
神经元的结构、分类和功能: 神经系统的细胞构成包括两类细胞：神经细胞和神经胶质细胞，一般将神经细胞称作神经元（neuron），被认为是神经系统行使功能、信息处理最基本的单位。而胶质细胞则主要起支持、营养和保护的作用，但随着人们积累知识的增加，逐渐发现胶质细胞也能够行使一些特殊的生理功能。 在人类的中枢神经系统中约含有1011个神经元，其种类很多，大小、形态以及功能相差很大，但它们也具有一些共性，例如突起。我们以运动神经元为例介绍神经元的典型结构，如图2-37所示。与一般的细胞一样，神经元也是由细胞膜、细胞核、细胞质组成的胞体（cell body）和一些突起（neurite）构成的。胞体为代谢和营养的中心，直径大小在μm级别。除胞体外，与神经元行使功能密切相关的结构是各种各样的特异性突起，也称为神经纤维。其中自胞体一侧发出、较细长的圆柱形突起为轴突（axon），每个运动神经元一般只有一个轴突，其功能是信息的输出通道，代表着神经元的输出端；同时还可以借助轴浆进行物质的运输，主要包括由胞体合成的神经递质、激素以及内源性的神经营养物质，这种运输称为轴浆运输。轴突从胞体发出的部位呈椎状隆起，称为轴丘（axon hillock），并逐渐变细形成轴突的起始段（initial segmeng），这一部分的功能及其重要，它是神经元产生冲动的起始部位，并随后继续沿着轴突向外传导。轴突通常被髓鞘（myelin）包裹，但并非是完全的将其包裹，而是分段包裹，髓鞘之间裸露的地方为郎飞结（node of Ranvier），其上含有大量的电压门控钠离子通道。轴突末梢（aoxn terminal）膨大的部分称为突触小体（synaptic knob），这是信息在某个神经元传递的终点，它能与另一个神经元或者效应器细胞相接触，并通过突触结构（synapse）进行信息的传递。 神经元中另一类重要的突起为树突（dendritic），一般是从胞体向外发散和延伸构成，数量较多，由于与树枝的分布类似而得名，是神经元进行信息接收的部位。树突表面长出的一些小的突起称为树突棘（dendritic spine），数目不等，它们的大小、形态数量与神经元发育和功能有关。当神经元活动较为频繁时，树突棘的数量和形状会发生相应的变化，是神经元可塑性研究的重要方面。轴突和树突的作用反映了功能两极分化的基本原理。 图2-37神经元的一般结构 按照不同的分类方法可以将神经元进行如下分类： （1）根据细胞形态分类 神经元形态的多样性令人印象深刻，根据树突和轴突相对于彼此或胞体的方向形态进行的分类如图2-38所示，可分为单极神经元、双极神经元、和多级神经元。形态学相似饿神经元倾向于集中在神经系统的某一特定区域，并具有相似
神经元的结构分类和功能
神经元的结构分类和功 能 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
神经元的结构、分类和功能: 神经系统的细胞构成包括两类细胞：神经细胞和神经胶质细胞，一般将神经细胞称作神经元（neuron），被认为是神经系统行使功能、信息处理最基本的单位。而胶质细胞则主要起支持、营养和保护的作用，但随着人们积累知识的增加，逐渐发现胶质细胞也能够行使一些特殊的生理功能。 在人类的中枢神经系统中约含有1011个神经元，其种类很多，大小、形态以及功能相差很大，但它们也具有一些共性，例如突起。我们以运动神经元为例介绍神经元的典型结构，如图2-37所示。与一般的细胞一样，神经元也是由细胞膜、细胞核、细胞质组成的胞体（cell body）和一些突起（neurite）构成的。胞体为代谢和营养的中心，直径大小在μm级别。除胞体外，与神经元行使功能密切相关的结构是各种各样的特异性突起，也称为神经纤维。其中自胞体一侧发出、较细长的圆柱形突起为轴突（axon），每个运动神经元一般只有一个轴突，其功能是信息的输出通道，代表着神经元的输出端；同时还可以借助轴浆进行物质的运输，主要包括由胞体合成的神经递质、激素以及内源性的神经营养物质，这种运输称为轴浆运输。轴突从胞体发出的部位呈椎状隆起，称为轴丘（axon hillock），并逐渐变细形成轴突的起始段（initial segmeng），这一部分的功能及其重要，它是神经元产生冲动的起始部位，并随后继续沿着轴突向外传导。轴突通常被髓鞘（myelin）包裹，但并非是完全的将其包裹，而是分段包裹，髓鞘之间裸露的地方为郎飞结（node of Ranvier），其上含有大量的电压门控钠离子通道。轴突末梢（aoxn terminal）膨大的部分称为突触小体（synaptic knob），这是信息在某个神经元传递的终点，它能与另一个神经元或者效应器细胞相接触，并通过突触结构（synapse）进行信息的传递。 神经元中另一类重要的突起为树突（dendritic），一般是从胞体向外发散和延伸构成，数量较多，由于与树枝的分布类似而得名，是神经元进行信息接收的部位。树突表面长出的一些小的突起称为树突棘（dendritic spine），数目不等，它们的大小、形态数量与神经元发育和功能有关。当神经元活动较为频繁时，树突棘的数量和形状会发生相应的变化，是神经元可塑性研究的重要方面。轴突和树突的作用反映了功能两极分化的基本原理。 图2-37神经元的一般结构 按照不同的分类方法可以将神经元进行如下分类： （1）根据细胞形态分类 神经元形态的多样性令人印象深刻，根据树突和轴突相对于彼此或胞体的方向形态进行的分类如图2-38所示，可分为单极神经元、双极神经元、和多级
神经系统的结构和功能的基本单位是神经元
神经系统的结构和功能的基本单位是神经元；神经元的基本结构包括细胞体和突起两部分 脑干位于大脑的下方和小脑的前方，它的最下面与脊髓相连，脑干的灰质中含有一些 调节人体基本生命活动的中枢（如心血管中枢、呼吸中枢等 皮肤分为表皮和真皮，表皮分为角质层和生发层，角质层细胞排列紧密，能阻挡化学 物质的侵入，生发层中有黑色素细胞能产生黑色素，阻挡紫外线对内部组织的损伤， 真皮中有大量的弹性纤维、胶原纤维，使皮肤具有一定的弹性和韧性，真皮内有丰富 的血管和感觉神经末梢，能够使皮肤得到营养，还能够接受冷、热、痛、触等刺激，盲文或称点字、凸字，是专为盲人设计、靠触觉感知的文字，所以盲人用手“阅读” 盲文时是依靠皮肤中的触压觉感受器。 脊髓包括灰质和白质两部分，灰质在中央，呈蝶形，在脊髓的灰质里，有许多低级的 神经中枢，可以完成一些基本的反射活动，如膝跳反射、排便反射、排尿反射等，脊 髓里的神经中枢是受大脑控制的，白质在灰质的周围，白质内的神经纤维在脊髓的各 部分之间、以及脊髓与脑之间，起着联系作用，所以脊髓是脑与躯干、内脏之间的联 系通路，因此脊髓具有反射和传导功能，下肢截瘫的病人损伤的是脊髓。 语言中枢是人类特有的中枢，动物没有语言中枢，因此动物只能对各种具体的刺激做 出发射，人类除了对具体信号的刺激发生反应外，还能对由具体信号抽象出来的语言、文字发生反应，建立人类特有的发射，这类发射的建立与人类的大脑皮层中具有语言 中枢有关。 大脑内有调节人体活动的高级神经中枢，不合题意;B小脑能协调运动，维持身体平衡，符合题意;C脑干内有一些调节基本生命活动的中枢，如呼吸中枢，不合题意；D脊髓 内有一些低级的反射中枢，不合题意，故选B 皮质深层为白质，由各种神经纤维构成，皮质是神经系统调节躯体的最高中枢，主要 由神经元细胞体组成 神经系统由脑、脊髓和它们所发出的神经组成，脑和脊髓是神经系统的中枢部分，叫 中枢神经系统，由脑发出的脑神经和由脊髓发出的脊神经是神经系统的周围部分，叫 周围神经系统，脑位于颅腔内，包括大脑、小脑和脑干三部分 大脑皮层是调节人体生理活动的最高级中枢，比较重要的中枢有：躯体运动中枢、躯 体感觉中枢、语言中枢、视觉中枢、听觉中枢等 人体八大系统的功能如下：运动系统，运动、支持和保护；消化系统，消化食物和吸 收营养物质；循环系统，运输体内物质；呼吸系统，吸入氧和呼出二氧化碳；泌尿系