不同方法提取人参茎叶皂苷工艺研究_张旭
收稿日期:2013-06-13
基金项目:2012年吉林省大学生科技创新项目
作者简介:张 旭(1990-),男,吉林省吉林市人,吉林农业科技学院2010级生物工程专业学生。＊为本文通讯作者
不同方法提取人参茎叶皂苷工艺研究
张 旭,郭丽萍,刘亚杰,佟续宇,周丹妮,李凤林
＊
(吉林农业科技学院生物工程学院,吉林132101)
摘 要:为优化人参茎叶皂苷提取工艺,分别采用加热回流、超声波、微波三种提取方法,通过正交试验法优化其工艺参数。结果表明,微波法提取效果最佳,其优化工艺参数为:乙醇浓度为70%,料液比为20倍,微波时间为20min ,微波温度70℃,此时人参茎叶皂苷提取率可达到7.81%。
关键词:人参茎叶皂苷;提取;正交试验中图分类号:R284 文献标识码:A
Study on the Extraction Process of Saponins in Stems and Leaves of
Panax ginseng by Different Methods
ZHAN G Xu ,GUO Liping ,LIU Yajie ,TON G Xuyu ,ZHOU Danni ,LI Fenglin
(Jilin Agr icultu ral Science and Technology Universioty Scho ol of Bioengineering ,Jilin 132101)
A bstract :In order to optimize the extraction process of saponins in stems and leaves of Panax ginseng ,used three extraction methods of heating reflux method ,ultrasonic method ,microwave method to optimizing the process by orthogonal test .The results showed that the best technology for microwave extraction were that ethanol concentration 70%,ratio of material to liquid for 20times ,the microwave time 20min ,micr owave temperature 70℃,and the ex -traction rate could reach 7.81%.
Key words :saponins in stems and leaves of Panax ginse ng ;extraction ;orthogonal test 人参(Panax ginseng C .A .Meyer )是五加科人参属植物,去茎叶性昧苦、甘,寒,归肺、胃经,具有补气、益肺、祛暑、生津之功能,主要用于治疗气虚
咳嗽、暑热烦躁、津伤口渴、头目不清、四肢倦乏等[1]。随着国内外学者对人参茎叶化学、药理学等方面的研究,现已初步证明人参茎叶具有与人参根相似的药理作用。作为人参茎叶主要药理活性成分之一的皂甙,其含量明显高于人参,并且人参茎叶皂甙与人参皂甙成分相似。目前对人参茎叶皂甙的提取方法研究文献很少报道,主要还是采用加热回流提取方法进行萃取。近年来微波和超声波提取法被应用于中药化学成分提取,这2种方法操作简单,可大大缩短提取时间。本研究以人参茎叶为材料,采用加热回流提取、微波提取、超声波提取三种方法进行提取,通过正交试验优化提取工艺,以人参皂苷提取率标准,比较三种提取方法的优缺点,筛选出人参茎叶皂苷最佳提取方式及工艺参数,旨在为工业化提取人参叶皂苷提供新方法,为其开发利用奠定坚实的基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
人参茎叶由吉林农业科技学院中药化学实验室提供,人参皂苷Re 标品购买于上海金穗科技有限公司;乙醇、甲醇、冰醋酸、高氯酸、香草醛等常规试剂均为分析纯。
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1.2 主要仪器
UV759CRT紫外可见分光光度计(上海佑科仪器仪表有限公司);BT124S型电子天平(日本岛津制作所);HH-8恒温水浴箱(江苏省金坛市正基仪器有限公司);超声波仪(广州深华公司);微波仪(上海新仪微波化学科技有限公司)[2]。
1.3 人参茎叶皂苷的测定方法
1.3.1 标准曲线的绘制 精密称取人参皂苷Re 标品5.0mg,置于10mL容量瓶,用甲醇定容至刻度线,配置成人参皂苷-甲醇0.5mg/mL的对照品溶液。精密吸取60、90、120、150、180μL于10mL具塞试管中,水浴挥干溶剂,冷却后各加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL,振荡摇匀后置于60℃水浴锅恒温15min,置于冰水浴冷却10min,分别加入冰醋酸5mL,充分振荡摇匀,置于550nm处测吸光度[3]。以人参皂苷Re浓度(μg/mL)为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程y=0.0287x+0.0162(r=0.9999, n=5)
1.3.2 样品中皂苷含量的测定 将待测液按照“1.3.1”项操作,定容并稀释数倍,测吸光度(A),根据Re的标准曲线方程计算样品溶液中人参茎叶皂苷的含量,进而计算其百分含量,即提取率。
1.4 试验设计
1.4.1 回流法提取人参茎叶皂苷 将人参茎叶置于粉粹机中粉粹,过40目筛,准确称取5g人参茎叶粉末,选取乙醇浓度(%)、料液比(倍)、回流时间(min)、回流温度(℃)为考察因素,以人参茎叶皂苷提取率为评价指标进行L9(43)正交试验。试验设计见表1。
表1 回流法提取人参茎叶皂苷试验设计
水平A乙醇浓度(%)B料液比(倍)C回流时间(min)D回流温度(℃) 160106060 2701512070 3802018080
1.4.2 超声波法提取人参茎叶皂苷 准确称取5g人参茎叶粉末,选取乙醇浓度(%)、料液比(倍)、超声时间(min)、超声温度(℃)作为考察因素,以人参茎叶皂苷提取率为评价指标进行L9(43)正交试验。试验设计见表2。
表2 超声波法提取人参茎叶皂苷试验设计
水平A乙醇浓度(%)B料液比(倍)C超声时间(min)D超声温度(℃) 160101060 270152070 380203080
1.4.3 微波法提取人参茎叶皂苷 将人参茎叶置于粉粹机中粉粹,过40目筛,准确称取5g人参茎叶粉末,选取乙醇浓度(%)、料液比(倍)、微波时间(min)、微波温度(℃)作为考察单因素,以人参茎叶皂苷提取率为评价指标进行L9(43)正交试验[5]。试验设计见表3。
表3 微波法提取人参茎叶皂苷试验设计
水平A乙醇浓度(%)B料液比(倍)C微波时间(min)D微波温度(℃) 160101060 270151570 380202080
2 结果与分析
2.1 回流法提取人参茎叶皂苷工艺的优化
选乙醇浓度(%)、料液比(倍)、回流时间(min)、回流温度(℃)等为考察因素,以人参茎叶皂苷提取率为评价指标进行正交试验,结果见表4,方差分析见表5。
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表4 回流法提取人参茎叶皂苷正交试验结果
试验号A乙醇浓度(%)B料液比(倍)C回流时间(min)D回流温度(℃)提取率(%) 111114.79 212224.92 313335.73 421236.21 522315.45 623125.66 731324.78 832135.36 933215.43
K115.4415.7815.8115.67
K217.3215.7316.5615.36
K315.5716.8215.9617.30
Ka5.155.265.275.22
Kb5.785.245.525.12
Kc5.205.605.325.77
R0.630.360.250.65
表5 回流法提取人参茎叶皂苷正交试验方差分析方差来源SS df MS F
A0.7420.377.4
B0.2520.132.6
C(误差)0.1020.057.2
D0.7220.36
注:F1-0.05(2,2)=19.00;F1-0.01(2,2)=99.00
由表4可知,加热回流法提取人参茎叶皂苷各因素影响的大小为回流温度(D)>乙醇浓度(A)>料液比(B)>回流时间(C);最佳试验方案为D3A2B3C2,即回流温度为80℃,乙醇浓度为70%,料液比为20倍,回流时间为120min。由表5方差分析可知,回流时间对提取的影响较小,而乙醇浓度和回流温度对提取影响较大,由于回流时间对提取的影响较小,从节约提取时间的方面考虑,把最佳工艺定为回流温度80℃,乙醇浓度70%,料液比20倍,提取80min,提取率为6.55%。
2.2 超声波法提取人参茎叶皂苷工艺的优化
选取乙醇浓度(%)、料液比(倍)、超声时间(min)、超声温度(℃)为考察因素,以人参茎叶皂苷提取率为评价指标进行正交实验,见表6、表7。
表6 超声波法提取人参茎叶皂苷正交试验结果
试验号A乙醇浓度(%)B料液比(倍)C超声时间(min)D超声温度(℃)提取率(%) 111115.43
212225.64
313337.25
421236.98
522317.33
623126.54
731326.17
832135.78
933216.77
K118.3218.5817.7519.53
K220.8518.7519.3918.35
K318.7220.5620.7520.01
Ka6.116.195.926.51
Kb6.956.256.466.12
Kc6.246.856.926.67
R0.840.661.000.55
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表7 超声波法提取人参茎叶皂苷正交试验方差分析方差来源SS df MS F
A1.2320.622.48
B0.8020.401.60
C1.5020.753.00
D(误差)0.4920.25
注:F1-0.05(2,2)=19.00;F1-0.01(2,2)=99.00
由表6可知,超声波法提取人参茎叶皂苷各因素影响的大小为超声时间(C)>乙醇浓度(A)>料液比(B)>超声温度(D);最佳试验方案为C3A2B3D3。由表7方差分析可知,超声温度提取人参茎叶皂苷的影响较小,而超声时间对提取影响较大,由于超声温度对提取影响较小,从节约能源的方面考虑,把最佳工艺定为超声30min,乙醇浓度70%,料液比20倍,超声温度70℃,提取率可达到7.63%。
2.3 微波法提取人参茎叶皂苷工艺的优化
选取乙醇浓度(%)、料液比(倍)、微波时间(min)、微波温度(℃)为考察因素,以人参茎叶皂苷提取率为评价指标进行正交实验,见表8、表9。
表8 微波法提取人参茎叶皂苷正交试验结果
试验号A乙醇浓度(%)B料液比(倍)C微波时间(min)D微波温度(℃)提取率(%) 111115.37 212225.72 313337.43 421237.21 522317.56 623126.72 731326.03 832135.83 933216.71
K118.5218.5117.7519.64
K221.4918.7519.3918.47
K318.5720.5620.7520.47
Ka6.176.205.976.55
Kb7.166.376.556.16
Kc6.196.957.016.82
R0.990.751.040.66
表9 微波法提取人参茎叶皂苷正交试验方差分析
方差来源SS df MS F
A1.9320.972.85
B0.9320.471.38
C1.6120.812.38
D(误差)0.6720.34
注:F1-0.05(2,2)=19.00;F1-0.01(2,2)=99.00
由表8可知,微波法提取人参茎叶皂苷各因素
影响的大小为微波时间(C)>乙醇浓度(A)>料液
比(B)>微波温度(D);最佳试验方案为C3A2B3D3。
由表9方差分析可知,微波温度提取人参茎叶皂苷
的影响较小,而微波时间对提取影响较大,由于微波温度对提取影响较小,从节约能源、更好的实现工业化的方面考虑,把最佳工艺定为微波时间20min,乙醇浓度70%,料液比20倍,微波温度70℃,提取率可达7.81%。
3 讨论
从上述三种方法提取人参茎叶皂苷比较,70%乙醇浓度和20倍料液比为最佳提取参数,而超声波法和微波法提取不仅大大节约了提取时间,并且提取率有明显的提高,这样使之更容易实现工业化。较超声波提取,微波提取技术是一种新型天然产物有效成分提取技术,是利用利率为300～30000MHz的电磁波辐射提取物,使提取物内的极性分子产生高速摆动而发生相互摩擦,使热量快速传递并得到充分利用。从人参皂苷提取率来看,微波法提取较超声波法略高,且微波提取操作更简便。因此,可以确定在上述三种方法中,微波法是提取人参茎叶皂苷最佳方法,其优化工艺参数为:乙醇浓度为70%,料液比为20倍,微波时间为20min,微波温度70℃,此时人参茎叶皂苷提取率可达到7.81%。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中国人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2005:8.
[2] 黄新生.人参茎叶生产提取方法及其含量测定[J].中成药研究,1983(5):7.
[3] 闫光军,张宝江,徐道娟.几种常用人参提取工艺研究比较[J].山东医药工业,2002,21(4):8.
[4] 吴忠正,周国明,袁玉琼.正交试验法提取人参皂苷工艺的研究[J].中国药房,2002,13(1):18.
[5] 张崇禧,张春红,罗维莹,等.人参总皂苷提取分离工艺的优选[J].吉林农业大学学报,2002,24(5):72～74.
责任编辑:建德锋
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人参皂苷的提取教学文稿
人参皂苷的提取
第一章综述 1.1 人参皂苷的简介 人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始 载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢 冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、 心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究 证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。 人参皂苷（ginsenoside，GS)是人参的主要有效成分，现已明确结果的GS单体约 有40余种；在人参中的含量在4%左右。其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为 Rg3与Rh2。众多研究表明，它具有较高的抗肿瘤活性，对正常细胞无毒副作用，与其 他化疗药物（如顺铂）联合应用有协同作用。人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱 导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤 发展，诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体，不引起周围组织炎症反应。Popovich等研究认为，人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡，其途径与地塞米松相识，均为受体依赖性。目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机 制以及临床应用等方面做了大量研究，而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。 1.2 人参皂苷成分 人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止， 文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、- Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50 余种人参皂苷。 Rh2：具有抑制癌细胞向其它器官转移，增强机体免疫力，快速恢复体质的作用。 对癌细胞具有明显的抗转移作用，可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复. Rg：具有兴奋中枢神经，抗疲劳、改善记忆与学习能力、促进DNA、RNA合成的作用。 Rg1：可快速缓解疲劳、改善学习记忆、延缓衰老，具有兴奋中枢神经作用、抑制 血小板凝集作用。 Rg2：具有抗休克作用，快速改善心肌缺血和缺氧，治疗和预防冠心病。 Rg3：可作用于细胞生殖周期的G2期，抑制癌细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的 合成，使癌细胞的增殖生长速度减慢，并且具有抑制癌细胞浸润、抗肿瘤细胞转移、促 进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等作用。 Rb1：西洋参(花旗参)的含量最多，具影响动物睾丸的潜力，亦会影响小鼠的胚胎 发育，具有增强胆碱系统的功能，增加乙酰胆碱的合成和释放以及改善记忆力作用.
西洋参中皂苷类成分的研究
西洋参中皂苷类成分的研究 作者：鲍建材、刘刚、郑友兰、张崇禧 西洋参（Panax quinquefolius L.）系五加科人参属植物，原产于加拿大和美国，由于其具有广泛的生物活性和独特的药理作用，多年来一直深受世界各国人民的喜爱。西洋参中的化学成分比较复杂，包括皂苷类、挥发油类、氨基酸类、糖类和聚炔类等，但主要是皂苷类成分。人类对西洋参的研究可追溯到19世纪，早在1854年美国一学者便从西洋参中分离得到了第一个皂苷类成分，但对西洋参全面深人的研究却始于20世纪70年代。迄今为止，中外学者已从西洋参中分离鉴定出的皂苷类成分有3种：达玛烷型（Dammarane），齐墩果烷型（Oleanane），奥克梯隆醇型（Ocotillol）。而分离出的人参皂苷40余种。 根中皂苷的研究 1976年，李向高从美国产西洋参中分离得到3种皂苷元，即人参二醇、人参三醇和齐墩果酸皂苷元。1978年日本学者真田修一等从日本长野引种的西洋参中分离出人参皂苷Ro、Rb1、Rb2、RC、Rd、Re。1982年Besso，H．等分离出7种皂苷，即Rg1、Rg2、Rb3、Rb1、F2，绞股蓝皂苷Ⅺ和西洋参皂苷R1（quenquinoside-R1）。张崇禧从国产西洋参中分得人参皂苷RO、Rb1、Rb3。Rc、Rd、Re等。1983年魏均娴等从西洋参根中分得Ro、Rb1、Rg1、Re和pseudo-ginsenoside-F11（简称P-F11），P-F11是西洋参中的特有成分，是鉴别西洋参和人参的显著标志。1985年松浦等从西洋参根中分离出13种皂苷，包括人参皂苷Rb1。Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、F2。拟人参皂苷F11（pseudoginsenoside-F11），绞股蓝苷XVⅡ（gynostenoside-XV Ⅱ）和一种新的皂苷，即西洋参皂苷R1。1987年徐绥绪等从辽宁栽培的西洋参根中分得：RO、Rb1、Rb2、Rd、Re、Rg1。Rg2、Rg3、Rh1和一种新皂苷，命名为人参皂苷Rao。印度学者报道从美国引种栽培的西洋参中发现9种皂昔，主要为人参皂昔Rb类。LeMen-OlivierL等从法国产西洋参中分得:Rb1、Rd，Re、PF11、Gy－XVⅡ。1994年李向高等从西洋参根中分离鉴定出丙二酰基人参皂苷Rb1、Rb2、Rd。1998年周雨等从西洋参中分得丙二酸单酰基人参皂苷-Rb1（简称M-Rb1）、Rb1、Re。1997年李铣等从加拿大西洋参中分得两个新的齐墩果酸型皂苷，命名为quin-quenoside-R3,R4（简称Q-R3，Q-R4）及Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re。Rg2、Rg1、Rg3、Rhl、20R-Rh2。MaYuanchun等采用反相高效液相色谱法对西洋参中主要皂苷进行了测定，找到了主要皂苷在根中的分布和比例情况，为产品的质量控制打下了基础。吴广宣等也用高效液相色谱法对吉林与美国产西洋参中主要皂苷的含量进行了比较测定。 孙文基等对西洋参的不同部位，根。茎、叶、花和果中总皂苷采用比色法进行了测定，采用薄层扫描法对西洋参不同部位中的P－F11含量进行了考察。杨崇仁等采用高效液相色谱法对云南丽江引种的西洋参中10种皂苷成分（M-Rb1、M-Rb2、M-RC和Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1、Ro）进行了分析鉴定，并讨论了不同的栽培年代。采收季节、不同的地下部位及不同商品等级中皂苷含量的变化。西洋参根不同组织部位中皂苷的含量测定表明人参皂苷主要分布于韧皮部和周皮中，特别集中于树脂道中，木质部中含量较少，西洋参中的人参皂苷含量与韧皮部的面积呈正比；西洋参不同生育期限的增长动态及人参皂苷含量变化的研究表明，休眠期人参皂苷的含量较高，展叶后至盛花期含量明显下降。根中人参皂苷的积累随着参龄的增长而逐年增加，生长第4年参根中人参皂苷含量可达6.36％，与原产美国同年生的参根中人参皂苷含量没有明显差异。闻平等对西洋参总皂苷测定方法进行了改进，提出用超声波处理提取西洋参中的总皂苷，简化了样品的前处理过程，减少了取样量和溶剂量，方法简便易行，初步认为本法可代替部颁方法。
黄芩中黄酮类成分提取
黄芩中黄酮类成分的提取 （汉中职业技术学院王丽723000） 摘要 黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根[1]研究表明，黄芩活性成分主要为黄酮类化合物，其中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素在医药和其他领域有着广泛用途，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗过敏、调节免疫、调节心血管、解热、降压、降血糖等药理活性[2]。其传统提取方法有煎煮法、浸渍法、回流提取法等,新提取法有酶提取法等。本文分别对黄芩中的黄酮类成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素提取进行讲述，以期为黄芩黄酮类成分未来的相关研究提供依据。 关键词：黄芩黄酮提取 1、黄芩苷的提取: 1.1 传统提取方法 黄芩苷的传统提取方法有煎煮法、浸渍法、回流提取法等。 1.1.1 煎煮法 采用煎煮法提取黄芩苷时，影响因素主要有浸泡温度、煎煮次数、加水量及煎煮时间等。李晓芳等[3]对黄芩苷用水提取工艺中的降解过程进行研究，结果发现在以水为溶剂提取黄芩药材中的黄芩苷时，宜在60℃以上条件下浸泡处理，或者将黄芩药材首先煮沸，可减少黄芩苷的降解，提高黄芩苷的提取率；而李建华等[4]进一步研究却发现在60℃时进行黄芩投料提取，黄芩苷的损失仍然比较大，提出宜在80℃以上条件下浸泡处理，或者将黄芩药材预先通过炮制灭活内源酶,来减少黄芩苷的降解。对煎煮次数、加水量及煎煮时间影响黄芩苷的提取进行研究，孙益林等[5]认为用10倍量的水煎煮2次，每次1.5h为最佳工艺；王青[6]则认为黄芩水提取的最佳工艺为水煎煮3次，第1次加l0倍量的沸水提取1.5h，第2次加8倍量的水提取1h，第3次加6倍量的水提取30min，黄芩苷的收率可达91.06%；朱思明等[7]发现用料液比为1:15，提取3次，每次1.5h为黄芩苷的较佳提取工艺。根据黄芩苷的理化性质,可采用碱性离子水煎煮法提取黄芩苷。
提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项
1.人参皂苷提取 人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可得到三种皂甙元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。而不能得到原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解过程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元，经重结晶获得纯品，分别与已知皂甙的红外光谱相一致。 2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程 ①人参皂甙提取工艺： 人参茎叶粗粉20g 热水提取1小时，粗滤，（棉花） 提取液药渣 加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤 沉淀物滤液 浓硫酸调PH7，放置10分钟。 中性提取液 回收后，上大孔树脂柱，先用水洗至无色，再用 70％氨性醇洗至绿色。 乙醇洗脱液 回收乙醇 人参总皂甙（黄白色） a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程 人参总皂甙 加含5％HCl的50％乙醇液， 加热回流2小时 沉淀水解液 （酸性皂甙元部分）加水稀释，水浴蒸去醇，氯仿萃取 3次（10，5，5ml）
水层氯仿层 干燥， 无水NaSO 4 回收氯仿 总皂甙元 少量苯溶解，硅胶柱 层析，用苯－乙酸乙脂 （8：2）洗脱 组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ95％乙醇重95％乙醇重丙酮结晶 结晶3次结晶3次2次 齐墩果酸人参二醇人参三醇 mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃ 1.操作方法 人参总皂甙的提取：取人参茎叶粗粉20g，放入烧杯用热水（80℃－90℃）提取1小时，然后用棉花粗滤，在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9－10放置10分钟左右，过滤，再将滤液用浓硫酸（少量）调PH7，放置10分钟左右，回收提取液至少量（5－10ml），再上大孔树脂柱（注：此柱应提前洗好，清洗办法略）先用蒸馏水洗至无色，再用70％的乙醇洗至无色，分别用小瓶接收。便得到了乙醇洗脱液，回收乙醇，便得到了人参总皂甙（黄白色）。 人参皂甙的水解 称取人参皂甙（）4－5g（不足时由老师提供），加20倍量含5％HCl的50％乙醇溶液，加热回流2小时，放冷，加倍水，水浴去醇，转入分液漏斗中，用氯仿萃取3此（10，5，5ml），合并氯仿层，加少量无水硫酸钠干燥，回收氯仿即得总皂甙元。 甙元柱层析分离 称取100－200目硅胶（105℃活化30分钟）50g，用苯做洗脱剂湿法装柱，柱顶放一层脱脂棉，压上数个玻璃球，放出多余的苯（至高于吸附剂1cm），计算保留体积。总皂甙元用少量苯溶解上柱，用苯－乙酸乙脂（8：2）洗脱，薄层检识（与甙元标准品对照）相同组分合并，回收溶剂。齐墩果酸、人参二醇用95％乙醇重结晶，人参三醇用丙酮重结晶，纯品80℃干燥，收集于小瓶中。 2.人参皂甙的检验 （一）显色反应
强肾片药学
强肾片 处方来源：强肾片是在六味地黄丸（山茱萸、熟地黄、牡丹皮、茯苓、泽泻、山药） 的基础上增加鹿茸、人参茎叶总皂苷、枸杞子、补骨脂、桑椹、杜仲、丹参、益母草八位中药组成的养肾、护肾的现代中成药。 处方的组成：鹿茸、山药、人参茎叶总皂苷、枸杞子、山茱萸、熟地黄、牡丹皮、杜仲、茯苓、泽泻、益母草、补骨脂、桑椹、丹参。 功能主治：补肾填精，益气壮阳。用
于阴阳两虚所致的肾虚水肿、腰痛、遗精、早泄、夜尿频数；慢性肾炎和久治不愈的肾盂肾炎。 鹿茸 性味归经：甘、咸，温。归肾、肝经。 功效：壮肾阳。益精血，强筋骨，调冲任，固带脉，托疮毒。 临床应用：1、用于肾阳不足，精血亏虚的阳痿早泄，宫寒不孕，尿频不禁，头晕耳鸣，腰膝酸痛，肢冷神疲等症。 2、用于肝肾不足的筋骨痿软，小儿发育不良，门过期不合，齿迟，行迟
等。 3、用于冲任虚寒，带脉不固的崩漏不止，带下过多。 4、用于疮疡久溃不敛，脓出清稀，或阴疽内陷不起。（温补精血） 主要化学成分：含雌二醇、雌酮等雌激素样活性成分。 药理作用：能促进生长发育、增强免疫、增强体力、抗皮劳、促进核酸和蛋白的合成、调节内分泌和新陈代谢，具有促进性激素样作用，可增加肾脏利尿功能。 山药
性味归经：甘，平。归脾、肺、肾经。 功效：益气养阴，补脾肺肾，固精止带。 临床应用：1、用于脾胃虚弱证。 2、用于肺肾虚弱证。 3、用于阴虚内热，口渴多饮，小便频数的消渴证。（消渴病：是中国传统医学的病名，是指以多饮、多尿、多食及消瘦、疲乏、尿甜为主要特征的综合病证。） 主要化学成分：含薯预皂苷元、皂苷、粘液质、胆碱、淀粉、糖
蛋白、游离氨基酸、维生素C等多种成分。 药理作用：有降血糖、缓解肠管平滑肌痉挛、增强雄性激素样作用。山药多糖能增强免疫功能，有抗衰老作用。 山茱萸 性味归经：酸，微温。归肝、肾经。 功效：补益肝肾，收敛固涩。临床应用：1、用于肝肾亏虚之头晕目眩，腰膝酸软，阳痿等症。2、用于遗精滑精，遗尿尿频。
黄芩苷提取条件的实验设计(精)
黄芩苷提取条件的实验设计 【摘要】目的：优选黄芩苷的提取工艺。方法：通过正交设计试验，以黄芩苷的得率为指标，考察粒度、温度、超声时间对提取效果的影响。结果：黄芩苷的最佳提取工艺为0.6~0.9mm的中档片加50%乙醇50倍量，温度60℃，超声振荡15min。结论：该提取工艺提净率高、简单方便。【关键 词】黄芩；黄芩苷；正交试验黄芩（Radix Scutellariae）为唇形科植物黄芩（Scutellariae baicalensiS Georgi）的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒、止血、安胎的作用［1］。其主要成分有黄芩苷元（Baicalein）、黄芩苷（Baicalin）、汉黄芩素（Wogonin）,此外尚含β-谷固醇（β-Sitosterol）等,其中黄芩苷是主要有效成分，具有抗菌、消炎之作用［2］。传统的提取方法有温浸法、煎煮法、加热回流法、索氏法等。超声波提取法是利用超声波的空化作用加速有效成分浸出的一种新发展起来的技术。超声方法与传统方法相比较，具有设备简单，提取时间短，提取率高等特点。本实验利用超声波提取法，设置L9(34)正交试验，以黄芩的含量为指标，紫外法检测，寻求超声提取的最佳提取工艺条件［3］。 1 仪器与试 药 V-530型紫外分光光度计；AS 5150A型超声波清洗器；普利赛斯 92SM-202A型电子分析天平。黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所生产，批号：0715-200111）。黄芩为市售药村，经周口市药检所鉴定。乙醇为分析纯，水为蒸馏水。 2 方法与结果 2.1 原料的预处理将黄芩净洗切制分为3档，厚度1~2mm为厚档片，0.6~0.9mm为中档片，0.5mm以下的为薄档片。干燥后分装样品袋中，备用。 2.2 黄芩苷的含量测定方法2.2.1 测定波长的选择精密称取黄芩苷对照品适量，用50%的乙醇溶液配制成为15μg/ml的溶液，以50%乙醇为空白，用V-530型紫外分光光度计，在200~350nm的波长范围内扫描，在278nm波长处有最大吸收。 2.2.2 标准曲线的绘制精密称取60℃减压干燥至恒重的黄芩苷对照品18.0mg于50ml量瓶中，加50%乙醇溶液溶解到刻度。精密量取上述标准液 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0ml分别置50ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，在278nm波长处测吸光度，由吸光度（A）对溶液浓度（C）作线性回 归。回归方程（n=5）为：A=0.0294+0.0591C r=0.9999 表明黄芩在7.2μg~36μg范围内线性关系良好。 2.2.3 黄芩样品溶液的制备精密称取黄芩样品1.0g，加50倍量的50%乙醇溶剂浸泡30min后，放入振荡器中（频率20KHZ）。根据正交试验表选择一定的提取时间和温度进行超声处理后，过滤、补足滤液至50ml。精密量取上述滤液1ml至100ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度。百事通 2.2.4 黄芩样品含量的测 定取2.2.3项下的溶液在278nm波长处测吸光度（A），由回归方程计算出黄芩苷的对应波度（C）。按下式计算黄芩苷的含量X%。 X%=C对 ×0.5 2.3 L9（34）正交试验取黄芩样品1.0g 精密称定，采用正交试验法以黄芩苷含量为参考指标，考察黄芩饮片厚度、提取时间和提取温度3个因素。提取因素水平见表1，正交试验结果及方差分析见表2和表3。表1 正交试验因素水平表（略）表2 L9（34）正交试验结果表（略）表3 方差分析表（略）注： F0.05(2,2)=19.00。 2.4 方差分析由表2、3可知，采用超声波直接提取法，以黄芩苷为提取率考察指标时，各因素对黄芩提取工艺影响的大小为C>A>B,其中提取温度对黄芩苷
黄芩中黄芩甙不同提取方法的比较
3 讨论 我们制定降粘 号片的工艺时以中医药基本理论为指导,根据药材中与组方理论相一致的有药理作用的成分来制定出切实可行的具体工艺,并在生产过程中严格控制制剂的质量标准,通过药效学实验的结果和三年来的临床观察,证明此工艺的制定是可行的,有效的,从而为今后制定其它药品的工艺流程提供较为可靠的依据. 参考文献 1王浴生.中药药理与应用.北京:人民卫生出版社,1983:983～984 2湖北医学院基础部药理教研室.科技通讯,1979;(4):19 3廖福龙.活血化瘀药性的血液流变学研究.中西医结合杂志, 1986;6(2):1034徐理纳.阿魏酸抗血小板聚集的实验研究.中国医学科学院学报,1984;6:44 5董忠田.丹参素对离体猪冠状动脉的作用.药学学报,1982;17 (3):224 6李承珠.丹参抑制体外血栓形成机理的实验研究.上海第一医学院学报,1979;6(3):145 7王浴生.中药药理与应用.北京:人民卫生出版社,1983:863 8王宗仁,夏 天,马世平.降粘抗栓片I号对心血管的药理作用.中国医药学报,1996;11(增刊):332～334 9王宗仁,夏 天,马世平.降粘抗栓 号治疗44例高粘血症的血液流变性初步观察.中国血液流变学杂志,1994;4(增刊):88～89 (收稿1996-05-06 修回1996-11-07) 编辑 黄良田 李之源 黄芩中黄芩甙不同提取方法的比较3 赵越平 雷其云 苏永芝 苏士银 蒋永培 (第四军医大学西京医院药品制剂科 西安710033) 关键词 黄芩 黄芩甙 紫外分光光度法 中图号 R284.2 黄芩的主要有效成分为黄芩甙.测定黄芩甙的含量,是控制有黄芩中药复方制剂的质量指标之一.我们采用同一种溶剂(75%)乙醇,分别以回流法、索氏抽提法、超声法和浸泡法等不同提取方法,从黄芩原药材中提取黄芩甙,进行对比实验,从中找出准确、简便、快速的提取方法. 1 材料和方法 1.1 仪器与试剂 UV2265型分光光度计(岛津?日本), UV21型三用紫外分析仪(上海),对照品黄芩甙(中国药品生物制品检定所),聚酰胺薄膜(浙江黄岩),黄芩饮片陕西省药材公司购进,其他试剂均为AR. 1.2 提取 用75%乙醇提取溶剂.黄芩饮片粉碎过40目筛,80℃干燥至恒重.准确称取4份,每份1g,供提取用. 1.2.1 回流法 取检品1份,第一次加溶剂45ml,第二次加40ml,每次回流1.5h,合并两次回流液,滤过,滤液置100ml量瓶中,用少量溶剂洗涤容器和残渣,补加溶剂至刻度,摇匀即得. 1.2.2 索氏抽提法 取检品1份,加溶剂80ml,抽提5 h.滤过,滤液置100ml量瓶中,用少量溶剂洗涤,补加溶剂至刻度,摇匀即得. 3本文在1996年6月扬州市召开的中国中医药学会制剂分会第2次学术大会上发言 赵越平,女,41岁,主管药师1.2.3 超声法 取检品1份,超声三次,每次加溶剂30 ml,超声30min.合并三次提取液,滤过,滤液置100ml 量瓶中,用少量溶剂洗涤,补加溶剂至刻度,摇匀即得. 1.2.4 浸泡法 取检品1份,浸泡三次,每次加溶剂30 ml,浸泡24h.合并三次浸泡液,滤过,滤液置100ml量瓶中,用少量溶剂洗涤,补加溶剂至刻度,摇匀即得. 1.3 精制 准确量取各法提取液50ml,置已恒重的瓷蒸发皿内,水浴浓缩,干燥至恒重,得总提取物重量.残渣加水适量分次洗涤至全部沉淀移入已恒重的离心管内,加稀盐酸调节pH1～2,离心,倾取水洗液(备用).沉淀用少量丙酮分次洗涤,离心,至洗液无色,合并丙酮洗液(备用).沉淀干燥至恒重,得精制品黄芩甙. 2 质量控制 2.1 薄层层析 取对照品黄芩甙溶液,精制品溶液,水洗液,丙酮洗液一定量,分别点于聚酰胺薄膜上,36%醋酸为展开剂,展距约6cm,取出晾干,在紫外光灯下检视,对照品黄芩甙显暗斑.喷10%醋酸铅试剂显桔黄色.结果精制品色谱中在与对照品黄芩甙色谱相应的位置上,显相同的色斑.水洗液和丙酮洗液色谱中在与对照品黄芩甙色谱相应的位置上,不显或微显相同的色斑(图1,2). 2.2 含量测定 取干燥至恒重的精制品黄芩甙约15mg,精密称定,置100ml量瓶中,加95%乙醇适量,水浴加热使溶解完全,冷却至室温,补加溶剂至刻度摇匀.精密吸 574 第四军医大学学报(J Fourth Milit Med Univ)1996;17(6)
人参叶的功效与作用
人参叶的功效与作用 人参叶的功效与作用有哪些？人参叶的功效与作用：具有养血，补胃气，泻心火，调中治气，消食开胃，治脾胃阳气不足及肺气促，短气、少气，补中缓中，泻肺脾胃中火邪等功效。人参叶可用于暑热口渴，用于热病伤津，用于肺燥干咳及虚火牙痛。下面小编就详细为您介绍人参叶的功效与作用及食用方法。 人参叶多年生草本，高30-70cm。根肥大，肉质，圆柱或纺锤形，末端多分歧，外皮淡黄色。叶为掌状复叶，具长柄；轮生叶的数目依生长年限而不同，一般1年生者1片三出复叶，2年复叶，最多可达6片复叶；小叶5，偶有7片， 考证 1.《本经》：主补五脏，安精神，止惊悸，除邪气，明目，开心益智。 2.《别录》：疗肠胃中冷，心腹鼓痛，胸肋逆满，霍乱吐逆，调中，止消渴，通血脉，破坚积，令人不 人参叶-原植物 忘。 3.《药性论》：主五脏气不足，五劳七伤，虚损瘦弱，吐逆不下食，止霍乱烦闷呕哕，补五脏六腑，保中守神。消胸中痰，主肺痿吐脓，冷气逆上，伤寒不下食，患人虚而多梦纷纭，加而用之。 4.《日华子本草》：调中治气，消食开胃。 5.《珍珠囊》：养血，补胃气，泻心火。 6.《医学启源》：治脾胃阳气不足及肺气促，短气、少气，补中缓中，泻肺脾胃中火邪。《主治秘要》：补元气，止泻，生津液。 7.《滇南本草》：治阴阳不足，肺气虚弱。 8.《本草蒙筌》：定喘嗽，通畅血脉，泻阴火，滋补元阳。 9.《纲目》：治男妇一切虚证，发热自汗，眩晕头痛，反胃吐食，寒疟，滑泻久痢，小便频数，淋沥，劳倦内伤，中风，中暑，痿痹，吐血，嗽血，下血，血淋，血崩，胎前产后诸病。 医学作用 【化学成分】 人参茎叶含三萜类及其皂甙成分：人参皂甙（ginsenoside）-Rb1、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rg4、-Rh1、-Rh2、-Rh3、-F1、-F2、-F3、-F4、-La,20
人参皂苷的提取与分离材料
人参皂苷的提取与分离 学生姓名 专业 班级
学院 摘要 首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。 关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。 Abstract The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process of extraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation. key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;
目录 摘要 (1) Abstract ..................................... 错误!未定义书签。 1 绪论 (3) 1.1 ............................................. 人参概述 错误!未定义书签。 1.2 ........................................ 人参的化学成分 1 1.2.1人参皂苷 (1) 1.2.2人参蛋白 (1) 1.2.3人参多糖 (1) 1.2.4无机元素 (2) 1.2.5其他成分 (2) 1.3 ................................ 人参的生理功能及药理活性 2 1.3.1增强免疫功能 (2) 1.3.2抗衰老 (2) 1.3.3抗肿瘤 (3) 1.3.4增强学习和记忆能力 (3) 1.3.5保护心血管系统 (3) 2 实验部分 (5) 2.1 ............................................ 实验材料 5 2.2 人参皂苷的提取分离 (5) 2.2.1 人参皂苷的提取分离原理 (5) 2.2.2 人参皂苷提取和苷元分离工艺流程 (5) 2.3 ........................................ 人参皂苷的检识 7 2.3.1 显色反应 (7)
黄芩苷提取工艺的综述
中药分析课程论文 黄芩苷提取工艺的综述 黄芩苷 教学院部：化学与材料工程学院 专业班级：应用化学112班 姓名：黄二朋 学号： 1882110210 安徽科技学院 二零一四年十月
黄芩苷提取工艺的综述 应用化学黄二朋 摘要：根据国内有关文献，对目前黄芩苷的提取工艺结合生产实际作初步总结。从黄芩苷的来源、黄芩苷的提取及药理作用作了比较详细的综合分析。对黄芩苷的提取工艺关键作了概括，为黄芩苷的进一步研究提供科学参考。 关键词：黄芩苷；来源；提取工艺；药理作用 The summary of the baicalin distill technology Applied chemistry Huang Er Peng Abstract：In terms of the relevant domestic literature，the present distill technology of baicalin connect with produce practices were summarized preliminary. From the source of the baicalin、the pick of baicalin and pharmacological effects which analysis detailed synthetical relatively. Summary the distill technology sticking point of baicalin which provide the scientific consult to further study of baicalin。 Key words:baicalin; source; distill technology; pharmacological effects 引言：黄芩苷分子式为C 21 H 18 O 11 , 相对分子量为446.35, 黄色结晶，熔点223℃。淡 黄色细针晶（甲醇），熔点223-225℃，[α]18D+123℃（c=0.2，吡啶-水）；易溶于N，N-二甲基甲酰胺，吡啶中，可溶于碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中，但在碱液中不稳定，渐变暗棕色，微溶于热冰醋酸，难溶于甲酸、乙酸、丙酮，几乎不溶于水，乙醚、苯、氯仿等。黄芩苷(baicalin)广泛存在于并头黄芩、川黄芩、大车前、滇黄芩、甘肃黄芩、丽江黄芩、木蝴蝶、黏毛黄芩等中药植物中，其中黄芩中含量较高。黄芩苷是由唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根中提取的一种黄酮类化合物。其原植物主要产于东北、河北、山西、河南、陕西、内蒙古等地，以山西产量最大，河北承德产的质量最好，黄芩味苦、性寒。归肺、肝、胆、大肠、小肠经。功能清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。黄芩苷是黄芩的主要有效成分之一，是黄芩及其制剂的主要质量控制指标成分，据药理学研究报道，黄芩苷具有抗微生物、抗变态反应、降压和镇静、利胆、保肝和解痉等作用。本文对黄芩苷的来源、黄芩苷的提取、含量测定及药理作用作了比较详细的综述。 1 黄芩苷的药理作用[1] 黄芩苷具有抑菌抗炎、清热解毒、鳌合金属离子、镇静、降压、神经保护作用、抗变态反应和清除超声阴离子等药理作用。临床用于感染、肺炎、肝炎、高血压和先兆流产等疾病。 1．1抗菌、抗病毒作用黄芩苷的抗菌谱较广，对痢疾杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、葡萄
黄芩的化学成分及提取方法探究8
宁夏师范学院化学与化学工程学院 毕业论文 论文题目：黄芩的化学成分、药理作用及提取方法研究 姓名梁玉彩 性别女 学号 30 年级 07级 专业化学教育 系（院）化学与化学工程学院 指导教师王芸芸 2011年5 月16 日
黄芩的化学成分、药理作用及黄芩苷的提取方法研究 论文完成日期：2011年5月16日 指导教师签字：
黄芩的化学成分、药理作用及黄芩苷的提取方研究 摘要 黄芩是我国传统中药，其主要有效成分是黄铜类化合物黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等。目前，黄芩主要通过煎煮法、回流法等提取，但这些方法存在有效成分提取效率低的问题，通过参阅今年来国内外文献，并进行整理综述，以黄芩苷和黄芩素的含量较高，黄芩苷的提取工艺多种多样，各有优劣，并且黄芩苷有很重要的药理作用，已成为多种中成药的组成之一，其提取方法有超滤、水提酸沉淀、醇提酸沉法等，今年来发展起来的先进方法值得关注。 关键词：黄芩;化学成分;提取方法 Abstract: The skullcap is a traditional Chinese medicine, the main active ingredient is copper compounds baicalin, Han baicalin, baicalein, wogonin and so on. Currently, baicalin mainly through boiling, reflux extraction method, etc., but the active ingredients of these methods the problem of low extraction efficiency, by referring to the literature this year, and to collate review to baicalin and baicalein were higher, Extraction of baicalin diverse, each with advantages and disadvantages, and baicalin have important pharmacological effects, has become one of a variety of proprietary composition, methods of ultrafiltration and its extraction, water extraction and acid precipitation, alcohol extraction and acid Journal of Law, and so this year to develop advanced methods of concern。 Key words: baicalin; chemical composition; extraction method
黄芩中黄芩苷的提取分离与鉴定修订版
黄芩中黄芩苷的提取分离与鉴定修订版 IBMT standardization office【IBMT5AB-IBMT08-IBMT2C-ZZT18】
药学专业综合实验（二） 题目：黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定学院：医药学院 班级： xxxxxxxxxxx 姓名： xxxxxxxxxxxxxxx 学号： xxxxxxxxx
黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定 黄芩简介： 黄芩又名山茶根、黄芩茶、土金茶根；为唇形科植物，以根入药。有清热燥湿，凉血安胎，解毒等功效。 含多种黄酮类化合物，主要为黄芩甙，黄芩素，汉黄芩甙，汉黄芩素，７-甲氧基黄芩素，７-甲氧基去甲基汉黄芩素，黄芩黄酮Ⅰ，黄芩黄酮Ⅱ等。 主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。产于河北、辽宁、陕西、山西、山东、内蒙古、黑龙江等。 一、实验目的 1掌握从黄芩中提取、精制黄芩苷的原理、方法及操作要点。 2掌握黄芩苷的结构鉴定原理及方法。 二、实验原理 黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄 酮化合物，具有一定的脂溶性和弱酸性， 提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液，同 时其可在碱性溶液中溶解，形成钠盐，在 提取液中加酸酸化，使黄芩苷游离析出。利用黄芩苷能溶于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质分离。
三、实验材料与仪器 材料：黄芩干燥根 仪器：旋转蒸发仪离心沉淀机 200g摇摆式高速中药粉碎机电子天平真空泵抽滤装置圆底烧瓶水浴锅索氏提取器 量筒玻璃棒PH试纸 试剂：浓盐酸 60%乙醇 40%氢氧化钠 95%乙醇 50%乙醇 2mol/l盐酸镁粉二氧化锆枸橼酸三氧化铝 四、实验步骤 1、黄芩苷的提取、分离 黄芩粗粉100g 101h过滤 两次滤液药渣 1-2，80℃水浴保温0.5h，充分结晶，过滤 氢氧化钠调pH至6.5-7，加 95%乙醇，过滤 滤渣(弃去
(完整版)黄芩苷提取
项目一天然植物有效成分提取 子项目一、黄芩根中黄芩苷的提取 1、【项目目的】 （1）掌握黄芩苷不同提取工艺和操作要点，不同工艺对产品得率和品质的影响； （2）通过黄芩苷含量检测，掌握定性、定量方法在黄酮类物质检测中的应用；（3）通过对黄芩苷的单因素和正交实验优化，掌握正交方法在植物有效成分提取中的应用； （4）通过黄芩苷的提取工艺优化实训，掌握黄酮类物质提取的一般规律。 2、【项目任务】 （1）通过查阅文献，掌握水提法、醇提法在黄芩苷提取中的基本原理； （2）查阅文献设计不同的黄芩苷提取工艺，并结合正交实验进行黄芩苷的提取工艺优化，得到提取得率最大化； （3）查阅文献并结合黄芩苷国标检测方法，对提取中黄芩苷含量进行准确测定； （4）总结黄芩苷提取工艺各环节具体参数，得出最佳工艺条件，并分析存在的问题，各小组以PPT形式作出整体汇报。 3、【项目要求】 （1）能够全面准确采用单因素实验对可能影响提取得率的因素进行测定分析，同时确定主要影响因素； （2）在单因素的基础上进行正交分析，确定合适的因素和水平设计正交实验；（3）通过正交分析确定最佳提取工艺条件 4、【项目背景】 （1）黄芩及黄芩苷简介 黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi ）具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。其主要成分黄芩苷（Baicalin）是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮
类化合物，具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉作用，且具有较强的抗癌反应等生理效能。黄芩苷还能吸收紫外线，清除氧自由基，同时，又能抑制黑色素的生成，是一种很好的功能性美容化妆品原料，具有较高的开发利用前景。 黄芩化学成分研究逐渐为药学和化学工作者所重视，目前，国内对黄芩苷提取工艺的研究有较多报道，其提取方法主要有温浸法、煎煮法、微波法、超滤法等，但如何提高黄芩苷收率和纯度一直是实际生产中存在的问题，缺乏对整个工艺条件进行全面研究，因此，有必要对影响黄芩苷提取工艺及其影响因素作一全面探讨。 A、水提法 黄芩粉碎为20-40目，提取2次，物料比为10和5倍，时间为60 min和30 min，分离方式为先用双层细滤布过滤再离心分离，60℃用盐酸调 pH 2—3，再70℃保温60 min，静置3 h，蒸馏水分离洗涤两次，干燥得黄芩苷粗品，测量黄芩苷的含量，计算提取率。 工艺流程 原料选择→粉碎→煎煮→过滤→离心→调节Ph值→保温→静置→洗涤→粗制品→加蒸馏水溶解→调节Ph值→加乙醇→调节Ph值→冷却→过滤→干燥→成品。 B、回流提取法 黄酮苷类(如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等)一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇一水(1：1)或甲醇。乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂，高浓度的醇(如90％、95％)宜于提取甙元，60％左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取甙类物质。可以采用一定浓度的醇溶剂提取，测量黄芩苷的含量，计算提取率。
不同干燥方法对黄芩提取物损耗的影响
不同干燥方法对黄芩提取物损耗的影响 发表时间：2015-10-19T16:22:33.977Z 来源：《医药前沿》2015年第23期供稿作者：宋爽葛志学 [导读] 甘肃省中医学校甘肃兰州本实验通过单因素实验分别采用三种不同的干燥方法对黄芩提取物进行干燥工艺的优化。最终确定微波干燥方法是最佳干燥方法。 宋爽葛志学 （甘肃省中医学校甘肃兰州 730050） 【摘要】目的：优选黄芩提取物的最佳干燥工艺，将损耗率降至最低。方法：采用单因素实验设计，以黄芩苷的损耗量为指标，考察不同干燥方法对黄芩提取物的影响。结果：确定黄芩提取物最佳干燥方法为微波干燥法。结论：优选的干燥工艺合理，操作简便，将黄芩提取物的损耗降至最低，为大生产的可行性提供理论依据。 【关键词】干燥方法；黄芩提取物；黄芩苷 【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2015）23-0318-02 黄芩是唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根[1]。归肺、胆、脾、大肠、小肠经，性味苦寒，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效[2]。黄芩中的主要成分是黄酮类化合物，以黄芩苷为代表，具有抗菌、抗炎、解热的功效[3]。为了将黄芩中有效成分提取完全，根据相关文献资料，以8倍量，60%浓度乙醇回流提取3次，每次1.5小时对黄芩进行提取。得到黄芩提取物的乙醇溶液。进行乙醇的减压回收。然后分别采用不同的干燥方法，以黄芩苷为检测标准，测定黄芩苷的损耗量，从而比较不同的干燥方法对黄芩提取物的损耗影响。 1.仪器与材料 Agilent 1100高效液相色谱仪(安捷伦)、SIL-20AC自动进样器、CTO-20AC柱温箱、CBM-20A控制器、DGU-20A3脱气机、LC solution 色谱工作站（日本岛津），KQ2200B超声波清洗器（上海紫一有限公司），Quintix电子天平（塞多利斯仪器有限公司）。试验中所用药材黄芩（自购）。黄芩苷对照品（由中国药品生物制品检定所提供，含量测定用，批号110715-201117）；甲醇为色谱纯（山东省禹王实业有限公司，批号:20110517），无水乙醇（山东省禹王实业有限公司，批号：20111011)，水为蒸馏水，其他试剂均为分析纯。 2.方法与结果 2.1 黄芩苷含量测定[4] 2.1.1色谱条件谱柱ZORBAX Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6mm，5μm）；流动相甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)；检测波长280nm；流量 1.0mL?min；柱温25℃；进样量20μL。。理论板数以黄芩苷峰计算应不低于2500。 2.1.2线性关系考察精密称取黄芩苷对照品1.10mg，置10mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL含黄芩苷0.11mg）。精密吸取4，6，8，10，12，14?L，注入液相色谱仪，记录峰面积。以对照品进样量（?g）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线并进行线性回归，回归方程为y = 246950.23x - 213116.80，R = 0.9998。结果黄芩苷在1.336～8.016?g范围内与其色谱峰面积呈良好线性关系。 2.1.3供试品溶液制备分别称取干燥后的取提取物粉末约0.3g，精密称定。加入70%乙醇40ml，超声溶解30min。抽滤，滤渣及容器洗涤4次，一并移入100ml的容量瓶中。用70%乙醇定容至100ml，摇匀。用移液管精密量取1ml置于10ml容量瓶中，用甲醇定容至10ml。摇匀，备用。 2.1.4精密度试验精密吸取黄芩苷对照品溶液20?L，注入液相色谱仪，连续进样5次，测得黄芩苷峰面积积分值的RSD 1.20%（n＝5）。 2.1.5稳定性试验精密吸取同一供试品溶液20?L，分别在2，4，6，8，10，12h注入液相色谱仪中，测定黄芩苷峰面积，积分值的RSD1.21%。结果表明，本品在12h内稳定。 2.2 测定方法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各20?L，注入液相色谱仪，依法测定，按外标法计算含量。 2.3 干燥工艺优选 2.3.1单因素实验方法以干燥物中黄芩苷的损失率为评价指标，分别进行常压干燥、减压干燥、微波干燥试验。 2.3.2试验结果见表格1 表1 实验结果 干燥方法干燥物性状黄芩苷损失率（%） 减压干燥棕褐色 10.03 常压干燥黑褐色 15.92 微波干燥棕褐色 6.48 2.3.3结果分析由表1的结果可知，微波干燥的黄芩苷损失率最低，故干燥工艺中微波干燥是最佳干燥方法。 3.讨论 本实验通过单因素实验分别采用三种不同的干燥方法对黄芩提取物进行干燥工艺的优化。最终确定微波干燥方法是最佳干燥方法。为黄芩提取物的研究开发提供了理论依据。 【参考文献】 [1] 丁芳林;张雯杰;陈波;姚守拙;正交法优化超声醇提黄芩活性成分研究[J];湖南中医药大学学报;2008年03期 [2] 宋承富;叶萍;黄芩提取物工艺研究[J];中华中医药学刊;2011年03期 [3] 李欣;魏朔南;黄芩的生物学研究进展[J];中国野生植物资源;2006年06期