酶联免疫吸附测定法检测_珠蛋白链在广西东南亚缺失型_地中海贫血筛查中的应用价值

临床研究

酶联免疫吸附测定法检测ζ珠蛋白链在广西东南

亚缺失型α-地中海贫血筛查中的应用价值

张金立,　黄　钧,　刘晓春,　何　毅,　周向阳

作者单位:530021　南宁,广西壮族自治区临床检验中心

作者简介:张金立(1956-),女,本科,主管技师,研究方向:临床血液学检验。E -m a i l :g x c c l @126.c o m

[摘要]　目的　评价并比较酶联免疫吸附试验(E L I S A )法检测ζ珠蛋白链与聚合酶链反应(P C R )方法在诊断广西东南亚缺失型α-地中海贫血中的临床诊断价值。方法　收集广西壮族自治区人民医院门诊部和产科住院病例210份血样标本(其中115例为正常对照;95例均有M C V<80f l 、M C H<27p g ,H b 在25～128

g /L 之间),采用E L I S A 法和聚合酶链反应(P C R )方法进行检测,最后对E L I S A 法筛查--S E A

携带者总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值、阳性预测值与聚合酶链反应(P C R )方法进行分析并比较其诊断--S E A 携带者的临床应用价值。结果　E L I S A 法诊断--S E A 携带者总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值和阳性预测值分

别是96.2%、98.3%、97.6%和98.3%、96.2%,而聚合酶链反应(P C R )法检测的相应指标均为100.0%(P>

0.01),两者无显著性差异。E L I S A 法不但对--S E A 携带者有很高的检出率,而且还能检出个别-α/αα的病例,

但其不能筛查出β-地中海贫血,对脐带血的检出率低(仅为65.0%)。结论　E L I S A 法能非常有效地检

出--S E A 携带者,加之该法简便快速、技术要求不高且经济实用,故很适用于常规实验室和大样本的人群筛查。

[关键词]　α-地中海贫血;　酶联免疫吸附试验;　聚合酶链反应

[中图分类号]　R 566.6　[文献标识码]　A [文章编号]　1674-3806(2009)12-1276-03 d o i :10.3969/j .i s s n .1674-3806.2009.12.18

A p p l i c a t i o nv a l u e o f e n z y m e -l i n k e di m mu n o s o r b e n t a s s a y(E L I S A )f o r z e t a -g l o b i n c h a i n s i ns c r e e n i n g o f α-t h a l a s s e m i a S o u t h e a s t A s i a nd e l e t i o ni nG u a n g x i Z H A N GJ i n -l i ,H U A N GJ u n ,L I UX i a o -c h u n ,e t a l .G u a n g x i C e n t e r f o r C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,N a n n i n g 530021,C h i n a

[A b s t r a c t ]　O b j e c t i v e T o c o m p a r e t h e c l i n i c a l d i a g n o s i s v a l u e b e t w e e n a ne n z y m e -l i n k e d i m m u n o s o r b e n t a s -s a y(E L I S A )f o r e m b r y o n i c z e t a -g l o b i n c h a i n s a n dp o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n(P C R )m e t h o d a s a r o u t i n e s c r e e n i n g

t e s t f o r (--S E A )α-t h a l a s s e m i a i n c l i n i c a l l a b o r a t o r y .Me t h o d s T w o h u n d r e d a n dt e n b l o o d s a m p l e s (115c a s e s n o r -

m a l ;95c a s e s M C V<80f l 、M C H<27p g ,H b 25～128g /L )f r o mc o n s e c u t i v e o u t p a t i e n t a n do b s t e t r i c a l i n p a t i e n t s i n T h e P e o p l e 's H o s p i t a l o f G u a n g x i Z h u a n gA u t o n o m o u s R e g i o nw i t har e q u e s t f o r h e m o g l o b i n(H b )a n a l y s i s w e r e s c r e e n e d s i m u l t a n e o u s l y f o r α-t h a l a s s e m i ad e t e r m i n a n t s b yE L I S A a n dP C Rr e s p e c t i v e l y .R e s u l t s T h e r ew e r ev e r y s i g n i f i c a n t h i g h e r s e n s i t i v i t y ,s p e c i f i c i t y ,a c c u r a c y a n dn e g a t i v e p r e d i c t i v e v a l u e s a s w e l l a s p o s i t i v e p r e d i c t i v e v a l u e s o f E L I S Am e t h o d(96.2%,98.3%,97.6%,98.3%a n d 96.2%,r e s p e c t i v e l y )l i k e P C R(100%,100%,100%,

100%a n d 100%,r e s p e c t i v e l y )f o r s c r e e n i n g f o r --S E A c a r r i e r (a l l P >0.01).T h e E L I S Am e t h o d w a s c a p a b l e o f d e -

t e c t i n g e f f e c t i v e l y o n l y t h e c a s e s w i t h -α/αα.B u t i t h a dal o wp o s i t i v e r a t ei nn e o n a t a l c o r db l o o d(o n l y 65%).C o n c l u s i o n T h eE L I S Am e t h o d i s a h i g h l y s e n s i t i v e a n d s p e c i f i c a n d r e l i a b l e t e s t f o r-α/ααa n d i s m o r e e f f e c t i v e ,T h e E L I S Am e t h o d i s s i m p l e t o p e r f o r m ,r a p i d ,a n da p p l i c a b l e t o l a r g e -s c a l e o r p o p u l a t i o n -b a s e ds c r e e n i n g p r o g r a m s a n d t o a r o u t i n e d i a g n o s t i c l a b o r a t o r y .

[K e yw o r d s ]　α-T h a l a s s e m i a ;　E n z y m e -l i n k e di m m u n o s o r b e n t a s s a y ;　P o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n α-地中海贫血(以下简称α-地贫)是一组由于α-珠蛋白基因缺失或缺陷使α-珠蛋白链的合成受到部分或完全抑制而引起的遗传性溶血性贫血。α-地贫主要见于东南亚和地中海地区,在我国则以南方地区多见,如广西、广东、四川、云南等地[1],其中广西α-地贫基因携带率高达14.95%。东南

亚缺失型(S o u t h e a s t A s i a nD e l e c t i o n ,--S E A

)是我国α-地中海

贫血1基因缺失型最常见的缺失型之一,该缺失型在人群中的基因携带率约为4%[2]。有文献显示[3]我国95%的α-地

贫缺失类型为--S E A 。而广西α-地贫1基因是以--S E A 为主,检

出率达98.35%[4]。目前对地中海贫血尚缺乏有效的治疗方

1276·C h i n e s e J o u r n a l o f N e wC l i n i c a l M e d i c i n e ,D e c e m b e r 2009,V o l u m e 2,N u m b e r 12

法,因此建立有效的检测方法,通过遗传筛查和产前诊断选择性地淘汰重型α-地贫患儿是广西控制该病发生行之有效的预防措施。

1　对象与方法

1.1　对象　标本来自2008-02～04广西壮族自治区人民医院门诊及住院部的病例,共210例(其中男95例,女115例,年龄3～55岁。正常对照组115例,血液学常规检查正常,排除肝肾等方面疾患。95例血细胞分析仪检测结果均M C V <80f l、M C H<27p g,H b在25～128g/L之间。

1.2　仪器与试剂　东南亚型α-地贫ζ珠蛋白链检测试剂盒由南方医科大学提供,购自珠海经济特区海泰生物制药有限公司;地中海贫血基因检测试剂盒购自深圳益生堂生物企业有限公司。酶标仪为美国宝特E L X-800全自动酶标仪,P C R 扩增仪为上海科华实验系统有限公司提供的F l u o c y c l e型。全自动血细胞分析仪为深圳迈瑞电子有限公司生产的迈瑞

B C-5500型,所用试剂为配套试剂。

1.3　方法

1.3.1　M C V、M C H和H b测定　用深圳迈瑞电子有限公司生产的迈瑞B C-5500型全自动血细胞分析仪进行检测。

1.3.2　地中海贫血的基因诊断　提取外周血白细胞中的基因组D N A后,采用深圳益生堂生物企业有限公司生产的试剂进行检测。

1.3.3　E L I S A法检测ζ珠蛋白链　双抗体夹心酶免疫法定性检测血液中ζ珠蛋白链,具体操作流程严格按生产厂家提供的使用说明书进行,同时要求设立阴性、阳性和临界对照。其中结果判断依照生产厂商提供的标准进行,即在阴性对照孔吸光度(A)<0.15,临界对照孔A>0.2,阳性对照孔A> 0.50的前提下,若测定孔A>临界对照A平均值,则判为--S E A 阳性;如测定孔A<临界对照A平均值×0.85则判为--S E A阴性;A介于两者之间时,判为临界阳性,此时需要复查。

1.4　统计学方法　采用S P S S13.0软件进行处理。分别计算E L I S A法检测ζ珠蛋白链筛查东南亚缺失型α-地贫的灵敏度、特异度、准确性、阴性预测值(N P V)和阳性预测值(P P V)等指标,并与P C R方法比较,对E L I S A法进行评价。2　结果

2.1　E L I S A法检测210例标本的结果　正常对照113例,2例为假阳性;45例--S E A/αα,有1例为假阴性;7例--S E A/-α和--S E A/-αT(即H b H病),1例--S E A/-α为假阴性。另外,8例-α/ααE L I S A法检测ζ珠蛋白链还能筛查出2例,但不能检出β-地中海贫血。见表1。

2.2　P C R方法检测结果　115例为正常对照;另外α-地贫与β-地贫的基因型能全部准确检出。见表1。

表1　E L I S A法和P C R法检测ζ珠蛋白链结果比较(n)

检测方法结果正常对照

α-地中海贫血β-地中海贫血

--S E A/αα--S E A/-α和--S E A/-αT

(H b H病)α

Tα/αα-α/ααβT/βNβT/βTβT/βN合并-α/αα

合计(%)

E L I S A法(-)11311208652156(74.3) (+)2446-2---54(25.7)

P C R法(-)115-------115(54.8) (+)-457201065295(45.2)

　注:(-)为阴性,(+)为阳性,βN为正常的β珠蛋白基因,βT为β地贫基因,αT为α地贫基因

2.3　E L I S A法检测ζ珠蛋白链筛查--S E A总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值和阳性预测值　分别为96.2%、98.3%、97.6%、98.3%和96.2%,而P C R相应指标均为100.0%,比较两者无显著性差异(P>0.01)。从表1中可计算出,--S E A的阳性检出率很高,达96.2%,假阴性率为

3.8%,假阳性率为1.7%。另外E L I S A法还能有效筛查出2例-α/αα。见表2。

2.4　E L I S A法检测ζ珠蛋白链筛查--S E A　虽有2例假阴性(1例--S E A/αα,1例--S E A/-α),但该法检测的--S E A/αα与--S E A/-α和--S E A/-αT(H b H病)的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值和阳性预测值却很高,分别为97.8%、98.3%、98.1%、99.1%、95.6%与85.7%、98.3%、97.5%、99.1%、75.0%。见表2。

表2　E L I S A法检测ζ珠蛋白链筛查--S E A的各项指标(%)珠蛋白基因类型S e S p A c N P V P P V --S E A/αα97.898.398.199.195.6 --S E A/-α和--S E A/-αT(H b H病)85.798.397.599.175.0合计96.298.397.698.396.23　讨论

3.1　α-地中海贫血(以下简称α-地贫)是一组由于α-珠蛋白基因缺失或缺陷使α-珠蛋白链的合成受到部分或完全抑制而引起的遗传性溶血性贫血,其主要的分子病理基础是α-珠蛋白基因的缺失或功能障碍导致α-珠蛋白链的合成减少或不合成。α-地贫主要有以下类型[1]:(1)缺失型α-地贫,包括缺失型α-地贫1(如--S E A等)和缺失型α-地贫2(如-α3.7和-α

4.2);(2)非缺失型α-地贫,包括非缺失型α-地贫1 (如-αC S和-αQ S等)和非缺失型α-地贫2;(3)α-基因未被累及的α-地贫1。α-地贫主要见于东南亚和地中海地区,我国则以南方地区多见,如广西、广东、四川、云南等地[1]。东南亚缺失型是α-地贫1基因缺失型中最常见的缺失型之一,是我国长江以南各省区最常见的一种α-地贫类型,在人群中的基因携带率约为4%[4]。--S E A与我国常见的缺失型α-地贫2(-α3.7和-α4.2缺失型)或非缺失型α-地贫1(αC S和αQ S)相互组合,可引起中、重度贫血及严重影响生活质量的H b H 病,此病在我国广西等地较多见。据资料报告[1]广西的H b H 病中,非缺失型H b H病占52.4%,缺失型H b H病占47.6%。

1277

中国临床新医学　2009年　12月　第2卷　第12期

由于非缺失型α-地贫的突变大多位于功能较强的α2珠蛋白基因,故非缺失型H b H 病患者的临床表现要比缺失型H b H 病患者更为严重。--S E A

在纯合状态下(--S E A

/--

S E A

),可引起致

死性的H b B a r t 's 胎儿水肿综合征,患有该病的胎儿大多于妊娠23～38周死亡或出生后数小时死亡,少数可存活至出生后数天。目前对地中海贫血尚缺乏有效的根治方法,而广西是地中海贫血高发区之一,α-地贫基因携带率高达

14.95%,并且缺失型α-地贫1以--S E A

为主,因此建立有效的

检测方法,通过遗传筛查和产前诊断选择性地淘汰重型α-地

贫患儿是控制该病发生的行之有效的方法。所以--S E A

携带

者的准确快速诊断对于广西降低重型α-地贫患儿的出生率,提高人口素质具有重要的意义。

3.2　P C R 技术分析是目前α-地贫的诊断标准[5],但该法操作烦琐、费用昂贵、技术要求高,并且只有专业的实验室才提供该项目的检测,不利于临床推广应用。血红蛋白电泳[6]在地贫的筛查中也起到了重要的作用,能够定量地检测出H b A 、H b F 、H b A 2的含量,可将地中海贫血进行初步分类为α-地贫或β-地贫,还可筛查出各种异常血红蛋白,如H b H 、H b E 、H b G 等,但其缺点是不能诊断所缺失的类型。H P L C 法[7]对于定量H b F 、H b A 2具有极高的价值,可作为筛查β-地贫的有效工具,但该法对α-地贫的检出率低。酶联免疫吸

附试验(E L I S A )法检测ζ珠蛋白链是近几年建立筛查--S E A 携

带者的一种新方法,国外已有报道利用E L I S A 法检测ζ珠蛋白链筛查α-地贫东南亚缺失型的方法[8～9],但国内未见临床

应用报道。有文献显示[10]该法对筛查包括--S E A 在内的α0

-地

贫特征,具有高度的敏感度和特异度,操作简便快速、技术要求不高且经济实用,很适用于常规实验室和大样本的人群筛查。

3.3　本文以P C R 方法作为α-地贫的诊断标准,对E L I S A 法筛查广西--S E A

携带者的临床应用价值进行研究,并对两者进行比较分析。结果显示:E L I S A 法检测ζ珠蛋白链诊断

(--S E A

)α-地贫携带者总的灵敏度、特异度、准确性和阴性预

测值、阳性预测值分别为96.2%、98.3%、97.6%和98.3%、96.2%,与P C R 法差异无统计学意义(P>0.01)。而与有关

文献[10]报告E L I S A 法检测ζ珠蛋白链诊断(--S E A )α-地贫携

带者总的特异度和阳性预测值达100.0%有差异,究其引起假阴性的原因有:(1)移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸头内壁挂液太多或内壁不清洁;(2)实验过程中洗涤时冲击力太大,洗涤液浸泡时间太长,洗涤次数增加;(3)显色剂反应时间不足;(4)操作技术熟练程度不同的工作人员等。从表1中可以看出,E L I S A 法不但对--S E A

的阳性检出率很高,达96.2%,而且还能有效检出个别-α/αα的病例。相比其他筛查方法,E L I S A 法操作简便、快速、经济,对实验操作人员技术和实验室设备的要求不高,很适用于那些实验条件比较差的基层医疗单位和临床常规实验室对大批量样本的筛查。通过遗传筛查和产前诊断选择性地淘汰重型α-地贫患

儿,这对广西降低重型α-地贫患儿出生率有着很大的实用价值。另外,本实验中我们对几十例脐带血进行了ζ珠蛋白链检测,结果显示:E L I S A 法对脐带血的检出率低,仅为

65.0%。由此可见,E L I S A 法检测ζ珠蛋白链筛查--S E A

携带

者具有一定的局限性(即只适宜6个月以上的人群)。

3.4　--S E A

是广西最常见的缺失型α-地贫1,从表1可以看出,E L I S A 法对(--S E A )α-地贫的阳性率达96.2%,显示出了很大的优势,所以(--S E A )α0地贫的检出无疑是有效控制重

型α-地贫患儿出生的的关键。

综上所述,E L I S A 法检测ζ珠蛋白链是一种很适用于常

规实验室和大批量样本筛查--S E A 携带者的技术手段。由于

地中海贫血的复杂性,临床上仅靠该法进行筛查尚有不足之处,还需结合多项指标以及临床表现进行综合、全面的分析。若结果可疑者,则必须应用P C R 技术进行确诊,以避免漏诊。参考文献

1　张俊武,龙桂芳,主编.血红蛋白与血红蛋白病[M ].南宁:广西科学技术出版社,2003:204-216.

2　X uX M ,Z h o u Y Q ,L u o G X ,e t a l .T h ep r e v a l e n c ea n ds p e c t r u m o f a n db e t a t h a l a s s e m i a i nG u a n g d o n g p r o v i n c e :i m p l i c a t i o n s f o r t h e f u -t u r eh e a l t hb u r d e na n dp o p u l a t i o ns c r e e n i n g[J ].JC l i nP a t h o l ,2004,57(5):517-522.

3　王　莉,徐酉华.α-地中海贫血的诊治进展[J ].国际儿科学杂志,

2006,33(4):258-261.

4　金　琪,蒋南华,唐　霞.一种快速诊断东南亚型α-地中海贫血1的方法及其临床应用[J ].中华血液学杂志,1997,18(5):257-260.

5　T a nA S ,Q u a hT C ,L o wP S ,e t a l .A r a p i da n dr e l i a b l e 7-d e l d t i o n m u l t i p l e xp o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o na s s a yf o r a l p h a -t h a l a s s e m i a [J ].B l o o d ,2001,98(1):250-251.

6　陈忠领,魏新燕,范美珍,等.血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值[J ].现代预防医学,2007,34(6):1132-1134.7　魏小平,徐　霞,廖伟娇,等.H P L C 在β-地中海贫血筛查中的应用[J ].热带医学杂志,2007,7(3):241-253.

8　L a f f e r t y J D ,C r o w t h e r M A ,Wa y e J S ,e t a l .Ar e l i a b l es c r e e n i n gt e s t

t oi d e n t i f ya d u l t c a r r i e r so f t h e(--S E A )a l p h a 0

-t h a l a s s e m i ad e l e t i o n .

D e t e c t i o no f e m b r y o n i cz e t a -g l o b i nc h a i n sb ye n z y m e -l i n k e di m m u -n o s o r b e n t a s s a y [J ].A mJ C l i nP a t h o l ,2000,114(6):927-931.

9　M a S K ,M a V ,C h a nA Y ,e t a l .R o u t i n es c r e e n i n g o f (--S E A

)a l p h a -

t h a l a s s e m i a d e l e t i o n b y a n e n z y m e -l i n k e d i m m u n o s o r b e n t a s s a y f o r e m -b r y o n i cz e t a -g l o b i nc h a i n s [J ].A c t aH a e m a t o l ,2002,108(1):8-12.

10　吴洪秋,周玉球,肖奇志,等.酶联免疫吸附试验法和血液学分

析法筛查缺失型α-地中海贫血的比较研究[J ].中华检验医学杂志,2006,29(10):885-888.

[收稿日期　2009-07-22][本文编辑　韦挥德　刘京虹]

1278·C h i n e s e J o u r n a l o f N e wC l i n i c a l M e d i c i n e ,D e c e m b e r 2009,V o l u m e 2,N u m b e r 12

中国免疫规划信息管理系统用户与权限管理规范

中国免疫规划信息管理系统用户与权限管理规范一、总则（一）目的加强中国免疫规划信息管理系统管理，规范系统用户与权限，保障免疫规划信息管理系统的安全运行，特制定本规范。（二）依据《计算机信息系统安全保护条例》《疫苗流通和预防接种管理条例》《卫生系统电子认证服务管理办法（试行）》《预防接种工作规范》《儿童预防接种信息报告管理工作规范（试行）》《全国疑似预防接种异常反应监测方案》《中国疾病预防控制中心计算机网络安全管理办法（试行）》（三）适用范围 “中国免疫规划信息管理系统”包括预防接种、疫苗管理、疑似预防接种异常反应、冷链设备4个业务管理子系统和综合管理系统。本规范适用于使用“中国免疫规划信息管理系统”的所有机构和用户，包括各级卫生计生行政部门、疾病预防控制机构、乡级防保组织和预防接种单位、药品不良反应监测机构及其它有关机构和用户。二、用户管理（一）用户类型

1、系统管理员国家、省、市、县级疾病预防控制机构设立系统管理员，授权管理“中国免疫规划信息管理系统”用户，是履行用户管理与服务职能的唯一责任人。 2、审计管理员国家、省、市、县级疾病预防控制机构设立审计管理员，授权“中国免疫规划信息管理系统”安全审计，是履行系统安全审计的责任人。 3、业务管理员国家、省、市、县级疾病预防控制机构设立业务管理员，授权分配业务子系统用户权限，是履行所管业务子系统的权限分配、建立角色等职能的责任人。 4、普通用户各级根据业务需求，由系统管理员建立普通用户，由业务管理员授权，是执行相应业务工作的责任人。（二）用户职责 1、系统管理员负责本级的业务管理员、普通用户以及下一级系统管理员的用户账号管理，县级系统管理员还需负责辖区内乡级普通用户的账号管理。包括各类用户的创建、有效性及密码等维护管理，分配业务子系统，为所管用户提供账号使用的操作培训和技术指导等。 2、审计管理员负责本级及下一级操作安全审计，县级审计管理员还需负责辖区

免疫规划规章守则_共3篇.doc

免疫规划规章制度＿共3篇 1。免疫规划管理规章制度１.对适龄儿童根据规定的免疫程序进行疫苗接种，并宣传免疫预防知识。 2．建立儿童预防接种电子档案，及时做好信息登记和更新，上传至国家信息管理平台。档案应长期妥善保管。 3.疫苗专人管理，制定需求计划，从规定渠道购入。购入时须验收疫苗相关合格证件。做好领发登记，及时掌握使用量及耗损量。过期疫苗登记后上交。 4.疫苗的运输、贮存和使用符合冷链管理要求。建立冷链设备档案,账物相符、专物专用。５．合理安排疫苗接种门诊周期,设成人接种日。接种场所、接种人员、消毒、体检及接种均应符合相关要求。６.及时建立接种卡、接种簿与接种证，按时预约接种。做好常规查漏补种和强化免疫工作。７.做好接种率监测与常规接种月报表统计,定期评价疫苗接种情况。８．对预防接种异常反应做好登记、调查,并及时处理、上报。2。免疫规划资料档案管理规章制度一、免疫规划资料的收集要真实、完整、及时。二、免疫规划基础资料的内容包括: (一）人口资料:辖区内总人口数，人口普查或抽样调查的性别、

职业别和各年龄组人口构成资料，建卡人数,出生人数、死亡人数、出生率、死亡率、自然增长率,流动人口情况。 (二)组织机构：辖区内的各级行政区划和卫生防疫机构数，各基层单位的基本情况,接种的组织形式、接种点(门诊)数,免疫规划及冷链管理专业人员数。（三）疫情资料：免疫规划针对传染病的发病人数、病死人数、发病率、死亡率、病死率,相关传染病的“三间”分布,流行病学个案调查和暴发疫情调查,漏报调查,发病与接种的关系等资料。(四）免疫接种资料:基础免疫、加强免疫、强化免疫人数,接种率,接种质量分析,未种原因分析，接种率调查、检查考核和预防接种异常反应调查处理等资料。 (五)疫苗计划、分配，使用情况统计等资料。 (六)冷链设备及接种器材资料。 (七）监测资料:疫苗质量监测、免疫成功率监测、人群免疫水平监测、冷链系统温度监测资料。（八)其他资料：上级来文,业务会议、培训，及工作计划、总结，专题调查等资料。三、免疫规划业务资料采用分类归档的方法保存,应于每年三月底前将上年度免疫规划有关资料搜集整理齐全、分类装订归档；并长期保存。同时注意有关原始资料的保存,以形成完整的免疫规划档案化管理体系。３。免疫规划工作规章制度一、严格执行《传染病防治法》、《疫苗流通和预防接种管理条例》,按照《预防接种工作规范》进行预防接种工作。凡参加预防接种的工作人员要持预防接种上岗证，明确目的,具有高度的责任心、严格的科学态度,掌握免疫程序、制品性质、接种方法、途径和禁忌证以及反应的观察、处理方法,以确保工作质量。二、接种前详细询问病史,凡有禁忌证者一律不得接种。三、接种对象、部位、方法、剂量、次数、间隔时间应严格按预防接种工作规范执行。四、安全注射按照规范要求,严格掌握安全注射,无菌操作,实行一人一针一管。五、生物制品的运输和保存应按生物制品要求执行,凡不符合要

抗体酶的研究及其应用

抗体酶的研究及其应用郝文杰生物化学与分子生物学 201421191526 摘要：抗体酶又称催化性抗体，是具有催化活性的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，它可促进许多用普通化学方法很难完成，或者天然酶尚未能催化的新奇转变，特别是自然界不存在的高效催化剂，对生物学、化学和医学等多种学科有重要的理论意义和实用价值。本文就催化抗体的结构、性质、产生方法、筛选方法、酶学特征及应用进行了综述。关键词：抗体酶；催化；高度选择性；催化剂；实用价值；结构抗体酶是具有催化性质的抗体。从1883年Payen和Personz发现第一个酶以来，自从1986年Schultz和Lerner首次证实由过渡态类似物为半抗原，通过杂交瘤技术产生的抗体具有类似酶的催化活性以来，直至20世纪80年代初期，整整一个半世纪，发现的酶已经超过了4000种[1]。1986年，Schultz和Lerner 同时在《Science》周刊上发表了他们各自独立领导的研究组对抗体酶的研究报告，并将之命名为Abzyme。Abzyme本质为免疫球蛋白（Ig），只是在易变区被赋予了酶的属性，故又被称为催化抗体。酶的催化机制在于它能结合底物产生过渡态，降低能垒，改变化学反应的速度。抗体酶显示出在许多领域的潜在应用价值，包括许多困难和能量不利的有机合成反应，前药设计，临床治疗，材料科学等多个方面。抗体酶这种兼具抗体和酶的性质的崭新物质，它集生物学、免疫学、化学于一身，它的发现打破了只有天然酶才有的分子识别和加速催化反应的传统观念，为酶工程学开创了新的领域，同时也为验证天然酶的催化机制，进行酶的人工摸拟，以及研究天然酶催化作用的起源提供了很好的帮助。抗体酶的应用前景是十分广阔又充满希望的。 1.抗体酶的发展历史抗体酶(abzyme),又称催化抗体(catalytic antibody),是指通过一系列化学与生物技术方法制备出的具有催化活性的抗体,它既具有相应的免疫活性,又能像酶那样催化某种化学反应[2]。1946年,Linus Pauling阐明了酶的催化实质,同时指出稳定的反应过渡态类似物可以竞争性抑制酶活性的实质。酶之所以具有催化活力是因为其和反应的过渡态(底物激活)发生特异性结合,形成酶-底物复合物,大大降低了反应的活化能,从而加速了反应速率。酶产生的生物局限性是酶催化高效性无法普遍化的局限因素,突破限制就能人为地控制酶的产生。高等动物的免疫系统为我们提供了方便[3]。1969年,Jencks提供免疫诱导产生抗底物基态的抗体,该抗体具有类似酶的催化活性,这个抗体酶设想的提出,使得任何一个化学反应构造一个专一性催化酶成为可能。然而在抗体酶的研制中遇到了两个问题:1.底物基态瞬间存在,无法提取。根据Pauling的酶的竞争抑制实质,可以构造过渡态的稳定类似物作为实际抗原。2.抗原在分子量上有一定的要求,所以一般将类似物作为半抗原接到适当载体上构成抗原。1975年,Kohler和Milstein 发明了具有历史意义的单克隆技术,使抗体酶的获得成为可能。1986年,美国Scripps Clinic研究所的R.A.Lerner等宣布研制成功首例对羧酸酯水解具有催化活力的抗体酶。同年,加州大学的P.Schultz等宣布单克隆的MOPC167抗体可以催化对硝基苯氧基羧基胆碱的水解。抗体技术的发展经历了三个阶段,一是通过免疫动物产生血清多克隆抗体;二是细胞工程阶段,即用杂交瘤技术产生单克隆抗体;三是利用基因工程途径表达和改造抗体。

地中海贫血表型筛查和基因诊断的现状及展望

地中海贫血表型筛查和基因诊断的现状及展望作者：周玉球， ZHOU Yu-qiu 作者单位：519001,珠海市妇幼保健院检验科珠海市医学遗传研究所刊名：中华检验医学杂志英文刊名：Chinese Journal of Laboratory Medicine 年，卷(期)：2012,35(5) 被引用次数：3次参考文献(22条) 1.Patrinos GP;Kollia P;Papadakis MN Molecular diagnosis of inherited disorders:lessons from hemoglobinathies 2005 2.Rund D;Rachmilewitz E Beta-thalassemia 2005 3.徐湘民地中海贫血预防控制操作指南[外文期刊] 2011 4.Weatherall DJ;Clegg JB The thalassemia syndromes 2001 5.NHS Sickle Cell and Thalassaemia Screening Programme.Handbook for laboratories 6.Ryan K;Bain BJ;Worthington D Significant haemoglobinopathies:guidelines for screening and diagnosis[外文期刊] 2010(1) 7.Galanello R;Eleftherious A;Tarager-Synodinos J Prevention of thalassemias and other haemoglobin disorders 2003 8.Old JM Screening and genetic diagnosis of haemoglobin disorders[外文期刊] 2003 9.周玉球;商璇;尹保民1998-2010年珠海市地中海贫血大规模人群的遗传筛查和产前诊断结果分析 2012 10.Demir A;Yarali N;Fisgin T Most reliable indices in differentiation between thalassemia trait and iron deficiency anemia[外文期刊] 2002 11.Stephens AD;Angastiniotis M;Baysal E ICSH recommendations for the measurement of Haemoglobin A2 2012 12.Stephens AD;Angastiniotis M;Baysal E ICSH recommendations for the measurement of Haemoglobin F 2012 13.Joutovsky A;Hadzi-Nesic J;Nardi MA HPLC retention time as a diagnosis tool for hemoglobin variants and hemoglobinopathies:a study of 60000 samples in a clinical diagnosis laboratory 2004 14.Van Delft P;Lenters E;Bakker-Verweij M Evaluating five dedicated automatic devices for haemoglobinopathy diagnostics in multi-ethnic populations 2009 15.Higgins T;Mack M;Khajuria A Comparion of two methods for the quantification and identification of hemoglobin variants 2009 16.Waneesorn J;Panyasai S;Kongthai K Comparison between capillary electrophoresis and high performance liquid chromatography for detection and quantification of Hh constant spring[Hb CS; α142,Term → Gln (TAA 》 CAA IN α2)] 2011 17.Munkongdee T;Pichanun D;Butthep P Quantitative analysis of Hb Bart's in cord blood by capillary electrophoresis system 2011 18.Chan LC;Ma SK;Chan AYY Should we screen for globin gene mutations in blood samples with mean corpuscular volume (MCV) greater than 80 fl in areas with a high prevalence of thalassemia 2001

抗体酶及其应用前景

抗体酶及其应用前景徐应容，党曦俻,石莹，周烨，顾昱晓摘要：催化抗体也叫抗体酶，是具有催化活性的免疫球蛋白.由于它兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性，因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的，特别是自然界不存在的高效催化剂，对生物学、化学和医学等多种学科有重要的理论意义和实用价值.综述了催化抗体研究的最新进展，讨论了该领域目前存在的问题，提出了解决这些问题的可能办法。 1．概念介绍： 1.1关于抗体：当人体（以及其它高等动物）受到外来抗原的刺激时，其免疫系统会根据抗原的特点（抗原表面决定簇）产生特定抗体。一般来说，一种抗原可以刺激产生108种抗体，并且所产生的抗原均具备极高的特异性，即与抗原强烈结合。 1.2关于酶：首先，酶催化具有两个特征，即高催化效率和高选择性。关于酶的催化机制，已有许多假说，但在众多观点中最有影响的是，鲍林(Pauling) 在1946年用过渡态理论阐明了酶催化的实质，即酶之所以具有催化活力是因为它能特异性结合并稳定化学反应的过渡态(底物激态)，从而降低反应能级。他指出，酶通过某种方式与高能、短寿命的过渡态结合而起催化作用。这个过渡态构型中某些键在形成，另一些键在断裂，存在时间极短，半衰期约为10 ~10 s，实际中极难捕获。 1.3二者对比：

抗体和酶的根本不同在于前者是结合一个基态分子，并且抗原与抗体结合后会发生沉淀，一般条件下不会自动分离，而抗体选择性的结合一个化学反应的过渡态，帮助反应顺利进行，在完成反应后的瞬间与生成物迅速分离 2.背景知识： 1946年，Pauling用过渡态理论阐明了酶催化的实质，后经过Jencks等人的探索，他们发现，过渡态分子难以捕获，而过渡态类似物是能够模拟一个酶催化反应过渡态的结构的稳定物质，于是设想，只要寻找到与反应中决定性步骤的相应酶紧密结合的酶竞争性抑制剂，就等于发现了过渡态类似物；还有一种思路，就是这种类似物也能根据化学反应机制推测设计出来。然后，以过渡态类似物为半抗原，利用哺乳动物的免疫系统，诱导与其互补构象的抗体产生，这种抗体即具有催化活性；接着，Kohler和Milstein于1975年发明了具有历史意义的单克隆技术，使抗体酶的生产成为可能。 1984年Lerner进一步推测：以过渡态类似物作为半抗原，则其诱发出的抗体即与该类似物有着互补的构象，这种抗体与底物结合后，即可诱导底物进入过渡态构象，从而引起催化作用。根据这个猜想Lerner和P．C．Schultz分别领导各自的研究小组独立地证明了：针对羧酸酯水解的过渡态类似物产生的抗体，能催化相应的羧酸酯和碳酸酯的水解反应。1986年美国《Science》杂志同时发表了他们的发现，并将这类具有催化能力的免疫球蛋白称为抗体酶（abzyme）或催化抗体（catalyticantibody）。 3.抗体酶的制备 3.1抗体酶的制备原则实现抗体向酶转变的关键是抗原能诱导已具有酶活性的抗体。要使抗体具备催化活性即要使其具备酶的特征，为使抗体具有酶的结构，就必须在抗原的结构上进行改造。而抗体设计的原则就是酶的催化机制，故免疫学原理以及过渡态理论是抗体酶设计的主要依据。酶－底物、抗体－抗原的结合模式是相近的，即均具有高亲和力和空间结构及电荷分布上的互补特性。但上述两种结合对象不同，由于抗体仅仅与低能结构结合，所以通常情况下抗体不具备催化活性。

地中海贫血筛查

地中海贫血筛查地中海贫血是一种隐性遗传性的血液疾病，主要是构成红血球的基因失常所致，其中有α地中海贫血(α链受累)和β地中海贫血(β链受累)。也可按照一个或两个基因缺损来分为轻型或重型地中海贫血，α地中海贫血多见于黑人(黑人中25％至少有一个基因缺陷)，β地中海贫血多见于地中海地区或东南亚。日型地中海贫血较为常见，临床上又大致分为重型、中型和轻型三类。轻型患者病情很轻，常没有症状或只有轻度贫血，体力、智力、寿命均不受影响。如果夫妻双方是同型基因携带者，则每次怀孕时，胎儿有Z5％的可能完全正常，50％的可能成为携带者，还有25％的可能成为重型地中海贫血患者。目前国内外对地中海贫血尚无有效的根治方法，患上重型地中海贫血的孩子必须长期输血而且难以活到成年。重症地中海贫血，都会危及孕妇和胎儿的生命及健康，因此，夫妻在婚前或产前接受地中海贫血筛查，是非常重要的。地中海贫血三种类型及症状： (1)重型：出生数日即出现贫血、肝脾肿大进行性加重，黄疸，并有发育不良，其特殊表现有：头大、眼距增宽、马鞍鼻、前额突出、两颊突出，其典型的表现是臀状头，长骨可骨折。骨骼改变是骨髓造血功能亢进、骨髓腔变宽、皮质变薄所致。少数患者在肋骨及脊椎之间发生胸腔肿块，亦可见胆石症、下肢溃疡。常见并发症有急性心包炎、继发性脾功能亢进、继发性血色病。

(2)中间型：轻度至中度贫血，患者大多可存活至成年。 (3)轻型：轻度贫血或无症状，一般在调查家族史时发现。中医认识地中海贫血海洋性贫血在中医学中属“虚劳”、“黄疸”范畴。自幼贫血，中焦受气，化血不足，更兼禀赋薄弱，阳不生阴，精血匮乏，水谷不能克消，精微反作水湿，阻遏胆液，浸渍肌肤为虚劳发黄之证，若气血阴阳不足，又见外邪客表，则可见虚实挟杂之征。海洋性贫血最常遭遇的问题地中海贫血最常遭遇的问题这些病人常会有心脏、肝脏和内分泌的功能异常。海洋性贫血的治疗轻型地贫无需特殊治疗。中间型和重型地贫应采取下列一种或数种方法给予治疗。 1.一般治疗注意休息和营养，积极预防感染。适当补充芝元雪康组合进行补血，它的补血功能是经过几十位资深专家检测的，无任何副作用，患者可以放心使用。 2.输血和去铁治疗红细胞输注少量输注法仅适用于中间型α和β地贫，不主张用于重型β地贫。对于重型β地贫应从早期开始给予中、高量输血，以使患儿生长发育接近正常和防止骨骼病变。其方法是：先反复输注浓缩红细胞，使患儿血红蛋白含量达120～150g/L；然后每隔2～4周输注浓缩红细胞10～15ml/kg ，使血红蛋白含量维持在90～105g/L以上。

免疫规划信息管理系统操作手册

免疫规划信息管理系统操作手册（疫苗、注射器和AEFI）免疫规划信息管理系统（疫苗、注射器和AEFI）用户操作手册中国疾病预防控制中心 2008年3月

目录 1疫苗管理 (2) 1.1NIP疫苗计划 (2) 1.2疫苗出入库管理 (5) 1.3疫苗出入库查询 (12) 1.4统计分析 (14) 1.4.1疫苗计划数量 (14) 1.4.2疫苗出入库数量 (16) 1.4.3疫苗过期预警 (18) 2注射器管理 (20) 2.1NIP注射器计划 (20) 2.2注射器出入库管理 (23) 2.3注射器出入库查询 (29) 2.4统计分析 (31) 2.4.1注射器计划数量 (31) 2.4.2注射器出入库数量 (33) 2.4.3注射器过期预警 (35) 3AEFI管理 (37) 3.1AEFI个案查询/录入 (37) 3.2群体性AEFI查询/录入 (53) 3.3统计分析 (63) 3.3.1AEFI分类 (63) 3.3.2AEFI报告县数 (65) 3.3.3AEFI季节分布 (67) 3.3.4AEFI年龄分布 (69) 3.3.5AEFI<1岁儿童月龄分布 (72) 3.3.6AEFI间隔分布 (74) 3.3.7AEFI疫苗分布 (76) 3.3.8AEFI疫苗批号分布 (79) 3.3.9AEFI临床诊断分布 (81) 3.3.10一般反应的症状分布 (83) 3.3.11AEFI报告/调查及时率 (85) 3.3.12AEFI个案完整率 (87) 4用户档案管理 (89)

1 疫苗管理 “疫苗管理”的主要功能是实现对疫苗的批次及出入库管理。 1.1 NIP疫苗计划功能说明该模块主要完成的功能是通过选择“地区”，“计划年度”实现对具体地区在某年度内NIP疫苗计划信息的查询。同时，也可以对NIP疫苗计划的信息执行添加、查看、修改和删除操作。进入方式点击左侧功能树【疫苗管理】【NIP疫苗计划】，进入NIP疫苗计划查询列表界面，如下图所示： NIP疫苗计划查询列表界面每页最多显示20条信息记录，可以在输入框中输入数字来确定每页显示的信息条数量，同时还可以点击“首页”、“上页”、“下页”、“末页”进行翻页操作，也可以在文本框中输入页码，实现页面直接跳转。界面说明页面整体上分为两部分，上半部分为查询条件输入区域，下半部分列表区域显示接种单位信息，并提供对信息的修改、查看和删除操作。下面对该页面中的几大功能分别进行说明。：完成的功能：根据指定的查询条件，查询浏览符合条件的NIP疫苗计划信息。操作

学校免疫规划管理制度

学校免疫规划管理制度公司：编制：日期：

学校免疫规划管理制度为预防相应传染病在校园内发生，确保全体新生完成免疫规划疫苗接种，建立有效的免疫屏障，保护学生身体健康，维护学校正常教学秩序，根据《中华人民共和国传染病防治法》、国务院《疫苗流通和预防接种管理条例》、卫生部和教育部《关于做好入托、入学儿童预防接种证查验工作的通知》等法规文件规定，特制定学生免疫规划管理暨预防接种证查验制度。一、将入学新生预防接种证查验工作纳入报到程序，在新生入学报到时，必须向学校交《**市入托入学查验证明》或接种医院开具的查验证明，报到人员负责做好查验登记工作，漏苗的要及时补种。学校必须严格把关,并配合卫生部门做好疫苗补种工作的组织、协调和监督管理工作。二、按国家免疫程序判断是否接种合格，以《**市入托入学查验证明》或接种医院开具的查验证明为为准。无证明或免疫史不详者按免疫空白处理，并及时将情况向所在区域的疾病预防机构反馈。补种的疫苗以纳入国家免疫规划的一类疫苗为主。三、全校学生查验工作普及率达100%，不留隐患；将《**市入托入学查验证明》或接种医院开具的查验证明装订存入新生健康档案，做好新生建康巡检和晨检工作，发现异常情况及时上报。四、学校应在每学期结束前，将幼儿园和小学一年级的学生花名册报至辖区接种医院。五、查验接种证工作程序

（一）学校应在新生入学须知中提醒家长准备2份《**市入托入学查验证明》或接种医院开具的查验证明。（二）新生（幼儿）办理入学手续时，应要求其家长或监护人必须出示《**市入托入学查验证明》或接种医院开具的查验证明。（三）当发现无《**市入托入学查验证明》或接种医院开具的查验证明的儿童时，应告知家长使用“小豆苗App”下载打印《**市入托入学查验证明》或到儿童原来接受预防接种的预防接种门诊去开具证明。（四）对必须接种而尚未接种的学生要求及时进行补种。学校应主动与当地预防接种门诊取得联系，当地预防接种门诊的医生应尽快到学校对登记记录进行核对。预防接种门诊医生确定接种时间，学校负责通知家长去接种医院进行接种。补种完成后，学校应向要求接种医院反馈接种信息。（五）学校对学生查验接种证登记和疫苗查漏补种的资料存档，以备卫生部门和教育部门的检查。

抗体酶

抗体酶综述陈璇【摘要】抗体酶是一类以过渡态类似物，为半抗原，可诱导免疫系统产生具有类似天然酶催化活性的免疫球蛋白。抗体酶既具有抗体的高效选择性，又能像酶那样高效催化化学反应，开创了催化剂研究的崭新领域。本文从抗体酶的发展历史、作用原理、制备、应用及研究展望多个角度进行综述。【关键词】抗体酶；发现史；作用原理；制备；现状及应用前景抗体酶抗体酶(abzyme)，又称催化抗体(cat·alytic antibody)，是指通过一系列化学与生物技术方法制备出的具有催化活性的抗体，它除了具有相应免疫学性质，还类似于酶，能催化某种活性反应。抗体与酶相似，它们都是蛋白质分子．酶与底物的结合及抗体与抗原的结合都是高度专一性的，但这两种结合的基本区别在于酶与高能态的过渡态分子相结合，而抗体则与抗原(基态分子)相结合。抗体与天然酶相比，最大的优点在于抗体的种类是巨大的，免疫系统可以拥有10 种抗原特异性不同的抗体分子。制备成功的抗体酶不但能催化一些天然酶能催化的反应，而且还能催化一些天然酶不能催化的反应。抗体酶的发现早在l948年，美国斯坦福大学荣誉退休化学教授l』_波林(LinusPaulin'f)就提出过渡态理论(transition state theory) [2]。这一理论认为，酶之所以具有催化能力，是因为它与反应分子(底

物)的牢固结合的方式，有利于反应中的过渡态(transition state)的结构。而这种结构会迅速重新排列成该反应的产物。任何有利于过渡态，而不是其它可能的结构的因素，都能加快化学反应速度。1 969年，布兰戴斯大学生物化学家w ·詹克斯(w ·Jenks)进一步发展了这一理论。他和几位美国科学家认为，如果波林的观点是正确的话，那么利用某一反应过渡态的模拟物作为免疫原，则会得到催化该反应的抗体。这种抗体能特异地识别化学反应的过渡态，并利用其结合能降低反应的活化能。那么，适当的抗体也就能够以一种方式与真正的酶反应物结合．成为“酶家族”中新成员，去催化正常情况下由酶来完成的化学反应。 1986年以后，抗体酶研究进入一个新的阶段。这一年的12月，R．A．Lerner和P．G．SChutz两个小组同时在《科学》(Science)杂志上报道，他们已成功地得到了具有酶活性的抗体酶。SChutz等人认为对硝基苯酚磷酸胆碱酯（PNPPC）作为相应羧酸二酯水解反应的过渡态类似物，推测用这个类似物作为半抗原诱导产生的单克隆抗体可能对羧酸二酯的水解反应有催化活性。通过对单克隆抗体的筛选，找到了一株MOPC167单抗，后来又找到一株抗体酶T15,经证明该催化反应的动力学行为满足米氏方程。[3] Lerner等人，从金属肽酶的研究成果中得到启发，合成了一个含有吡啶甲酸的膦酸酯类似物为半抗原诱导产生一个单抗6D4，用来催化不含吡啶甲酸的相应羧酸酯化合物的水解反应，使反应加速近1000倍，并表现出底物专一性和对介质pH的依赖性等。[3]

地中海贫血筛查在产前诊断中的临床意义

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/1b13776715.html, 地中海贫血筛查在产前诊断中的临床意义作者：赵翠莲来源：《医学信息》2016年第03期摘要：目的研究产前诊断中进行地中海贫血筛查的临床意义。方法收集产前地中海贫血筛查对象5200例，行血红蛋白电泳检测、基因诊断，确诊地中海贫血胎儿。结果共确诊634例地中海贫血，其中α型、β型地中海贫血分别占8.31%、3.88%，两种地中海贫血确诊率接近，P>0.05；夫妇同型地中海贫血共25对，产前诊断确诊6例重型地中海贫血患儿，引产后基因诊断符合率为100.00%。结论产前检查及地中海贫血筛查能有效避免地中海贫血重症患儿出生。关键词：产前检查；地中海贫血；基因诊断地中海贫血是某种珠蛋白肽链或几种珠蛋白肽链合成障碍，破坏珠蛋白肽链合成平衡，引起血溶性贫血，又被称作蛋白合成障碍贫血。进行性的慢性溶血性贫血是地中海贫血的主要临床症状，病情较轻的患者仅有轻度贫血或无贫血，重度患者有肝脾肿大、骨骼改变、严重贫血、生长发育缓慢等症状。目前临床使用干细胞移植术，此外并无其他有效根治之法[1]。 1 资料与方法 1.1一般资料 2011年9月～2015年6月我院产科门诊接收行产前检查的孕妇及配偶作为本次研究对象，共筛查5200例；孕妇年龄（21～39）岁，平均（25.6±3.2）岁；孕周（8～34）w，平均（25.5±1.3）w。 1.2方法血红蛋白电泳使用全自动毛细血管电泳仪（法国；Sebia minicap）及配套试剂，分离血红蛋白成分及比例。血常规使用五分类血球计数仪（日本；SYSMEX SX-800i），使用配套试剂，测定平均红细胞体积和平均红细胞蛋白量及血红蛋白。参考区间[2]：血常规平均红细胞体积（MCV）为82～99 fl，平均红细胞蛋白量（MCH）为27～32 pg。成人血红蛋白电泳HbA2取2.5%～3.5%，且未发现异常的血红蛋白带。若MCV2.0%），提示β地中海贫血表型呈阳性；当MCV23 w后经皮脐血取样检测地中海贫血基因。术前使用B型超声进行定位，消毒、铺巾后于超声引导下绕开胎盘和胎儿，根据不同孕周进行取样，提取DNA并行基因诊断。当胎儿被诊断为β地中海贫血纯合子或双重杂合子，α地中海贫血纯合子，均为重型地中海贫血，说服孕妇及其配偶接受引产[3]。在知情且自愿条件下检出中间型地中海贫血胎儿并终止妊娠。 1.3观察指标观察5200例对象血红蛋白电泳、血常规测定后α型地中海贫血及β型地中海贫血阳性情况；观察基因诊断确诊的α及β型地中海贫血情况；记录携带同型地中海贫血的夫妇对数，记录胎儿地中海贫血状况。

抗体酶的催化反应及应用前景

抗体酶的催化反应及应用前景摘要：抗体酶又叫催化抗体，兼具抗体的高度选择性和酶的高效性，可人为生产适应各种用途的，特别是自然界不存在的高效催化剂。本文主要讲解了抗体酶催化反应的催化特征、催化反应类型及其应用前景。 1.抗体酶的概述抗体酶又叫催化抗体，兼具抗体的高度选择性和酶的高效性，可人为生产适应各种用途的，特别是自然界不存在的高效催化剂。 2.抗体酶的催化反应 2.1.抗体酶的催化特征与天然酶的催化特性相比，抗体酶有自己的一些特点。 2.1.1能催化一些天然酶不能催化的反应抗体酶的多样性决定了抗体酶的催化反应类型多样性；催化抗体的构建，表明可通过免疫学技术，为人工酶的设计和制备开辟一条新的、实用化的途径。这种利用抗原-抗体识别功能，把催化活性引入免疫球蛋白结合位点的技术，或许可能发展成为构建某种具有定向特异性和催化活性的生物催化剂的一般方法。 2.1.2有更强的专一性和稳定性抗体酶作为一种具酶和抗体双重功能的新型大分子用作分子识别元件，具有优于酶和抗体的突出特点。因为配体底物与抗体酶的活性部位结合后，会立即发生催化反应，释放产物，所以每一次分子反应之后，抗体的分子识别位点都可以再生，这就使催化抗体能够作为一种可以连续反复使用的可逆性分子。 2.1.3催化作用机制不同酶催化机制是“锁钥学说”（Lock and Key）及“诱导契合学说”（Induced-Fit）；而抗体酶的催化剂至目前还没有完全搞清楚。Janda曾提出“识别开关”或“诱饵开关”（Bait and Switch）机制，即抗体将底物“钓进”抗体结合部位，然后使其与抗体结合，打开底物转化为反应过渡态的“开关”，导致共价键断裂，形成产物，还有待研究。 2.2抗体酶的催化反应类型迄今为止，获得的抗体酶已能成功地催化五种类型以上的酶促反应和几十种类型的化学反应。下面是一些比较常见的抗体酶的催化反应。

地中海贫血的诊断方法.doc

地中海贫血的诊断方法 B-地中海贫血的筛查和诊断主要依赖实验室检查，方法主要有： 1 血常规检测地中海贫血的重要特征之一是小细胞低色素性贫血，如MCV≤80 fl，MCH≤25．0 Pg，则可疑为地中海贫血患者或基因携带者，可同时测定血清铁和铁蛋白，以排除缺铁性贫血。 2 红细胞渗透脆性试验(一管法) 其原理是地中海贫血红细胞膜表面粗糙、凹陷、折叠和浆膜扩展，膜与内容物之比增大，对渗透溶解的抗性增加，在0．32％(或0．36％)NaC1中溶解度降低(脆性降低)。一管法可用于地中海贫血群体筛查。 3 血红蛋白(Hb)电泳Hb电泳是检测地中海贫血、异常血红蛋白最常用的方法，可观察到HbE、HbH等异常血红蛋白区带，同时可定量检测HbF、HbA2的含量并区分常见类型的地中海贫血。有研究显示MCV、Hb电泳和红细胞脆性实验三者联合检测的灵敏度可达100％，阴性预告值达100％，联合特异度可达100％，阳性预告值达100％DS。 4 高效液相色谱技术(HPLC) 原理：采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱技术，全自动分析仪可分离血红蛋白的变异体与亚型，容易发现重型和轻型B地中海贫血。在操作上，HPLC采用的是全血标本，不需要制备Hb液，只要将全血标本直接放在仪器上，通过电脑操作便能实现HbA、HbA2、HbF等定

量检测。优点：所需样本量少，自动化程度高，操作简单，快速，能消除人为误差，结果准确。HPLC也可用于胎儿脐带血的产前诊断，可诊断出重型B地中海贫血，但不能区分正常胎儿和杂合子胎儿。近年来，地中海贫血高发地区也采用此法进行携带者检测。 5 基因诊断近年来，随着分子生物学研究领域的不断发展，从最初的B珠蛋白基因簇限制性酶切多态性检测至目前的聚合酶链反应(PCR)技术结合其他分子生物学方法，B地中海贫血的诊断已逐步改进和完善。基因诊断方法有下列几种： 5．1 限制性片段长度多态性连锁分析(RFLP连锁分析) 原理：DNA限制性内切酶可识别并切割DNA上特定的核苷酸序列，得到一定长度的DNA片段，而碱基的突变可导致酶切位点的丢失或形成，从而改变酶切片段的大小。突变基因在经过相应的限制性内切酶水解后，其电泳条带的数量和大小就会发生改变，根据这些改变可判断出突变是否存在。缺点：由于单独使用该方法，不能直接测出受试者突变基因的类型，必须结合寡核苷酸探针等技术，故其应用范围有一定限制，且操作繁琐。如果母亲或父亲在所有的多态性位点上都为纯合子，无法用此方法进行产前诊断，或者患儿和父母所有位点上都是杂合状态，只能进行50％的排除性诊断。 5．2 探针斑点杂交技术(allele—specific oligonucleotide ASO)应用引物扩增珠蛋白基因，同时合成与正常序列和突变序列完全互补的寡核苷酸探针。将PCR扩增产物点在尼龙膜上，分别与

免疫规划信息管理系统(技术手册)

免疫规划信息管理系统门诊应用手册河北世窗信息技术有限公司 2012年2月技术支持热线：400-600-1850

第一部分：系统应用简介 “免疫规划信息管理系统”应用贯穿于日常疫苗接种工作整个周期当中，疫苗接种工作可以大致分为两个部分，一个是对辖区内适龄儿童的统一管理，即对辖区内的符合疫苗接种条件儿童的统一管理，包括常住儿童、流动儿童和临时接种儿童；另一个就是对所管理儿童的疫苗接种工作，包括应种儿童的计算和预约、疫苗接种、接种信息修改和查漏补种等。儿童信息管理：在儿童信息管理方面系统实现儿童个案和接种记录的网络共享，任何一名纳入系统管理的儿童在任何接种单位都可以得到信息共享，解决了异地接种、流动接种困难问题。系统平台通过新增儿童信息、儿童信息列表、导出儿童基本信息等功能实现对儿童个案信息的录入、修改和导出功能。疫苗接种：以接种单位的接种日为中心，在接种日之前为疫苗接种准备阶段；接种日当天为应种儿童的疫苗接种阶段；接种日完成之后为接种后的整理阶段。通过这三个阶段的工作组成一个完整的接种周期。具体如下： 1、准备阶段：在这个阶段需要整理出符合条件的应种儿童，并对这些儿童进行预约通知，同时根据应种儿童的实际应种疫苗情况准备疫苗和接种器材； 2、疫苗接种阶段：即接种日当天，需要根据儿童的应种疫苗准确的为儿童接种疫苗； 3、整理阶段：需要对接种日当天的接种数据进行整理、汇总、记录。免疫规划信息管理系统可以应用于整个接种周期，在各个环节上为应用单位提供解决方案，具体如下： A、准备阶段：通过免疫规划信息管理系统5.0接种预约管理-5.1发送短信息通知操作界面，可以由系统平台为应用者自动计算并查询出符合条件的应种儿童，此操作只需要应用者设定条件，无需人工计算；查询出应种儿童之后，系统可以以群发手机短信的方式对应种儿童进行预约，手机短信预约具有覆盖率广、及时率、准确率高等特点，从而大大的节省了人工预约的工作量。 B、疫苗接种阶段：由于每一名适龄儿童的个案信息和接种记录都已经纳入了系统，因此在接种日当天，工作人员只需要根据儿童基本信息（生日、父母姓名简拼等）或者

学校卫生防疫各项制度

2018-2019年度古昌镇盛家沟完全小学疫情报告管理制度一、为加强学校疫情报告管理工作,根据《传染病防治法》的规定，学校应成立传染病防治领导组织，建立传染病疫情报告网络，固定专（兼）职疫情管理人员、消毒人员，积极应对突发公共卫生事件的发生。。二、学校校长执行职务的医疗保健、疫情管理人员为责任疫情报告人，学校领导、老师、学生等为义务报告人，责任疫情报告人和义务报告人发现法定传染病病人、疑似病人和病原携带者应在规定时限，向辖区疾病预防控制机构报告。责任疫情报告人应认真学习《传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急处理条例》等法律法规和传染病防治知识，熟练掌握常见传染病诊断、报告、隔离消毒及疫情处理程序，切实增强传染病防治能力。三、责任疫情报告人发现甲类传染病，乙类传染病中传染性非典型肺炎、肺炭疽和人感染高致病性禽流感城镇于2小时，农村于6 小时通过传染病疫情监测信息系统进行报告。对其它乙类传染病人、疑似病人和病原携带者，城镇于6小时，农村于12小时通过传染病监测信息系统进行报告。对丙类传染病和其它传染病，应当在24小时通过传染病疫情监测信息系统进行报告。四、传染病暴发、流行时，责任疫情报告人应当以最快的通讯式向当地疾病预防控制机构报告疫情。

五、学校要进一步落实“晨检、午检”制度，对请假、缺课的学生要询问原因，注意追踪，确保对传染病疫情做到早发现、早报告，早隔离、早治疗。六、对对儿童实行预防接种证制度。儿童入托、入学时，托幼机构、学校应当查验预防接种证，发现未依照免疫规划受种的儿童，应当及时向当地疾病预防控制机构或接种单位报告并配合做好补种工作。七、学校要进一步加强卫生防病知识宣传教育工作，采取开设健康教育课、设立宣传栏、举办黑板报等多种形式进行传染病防治知识培训。卫生部门要经常深入学校进行防病知识宣传，倡导健康、文明的生活式。八、学校要积极开展爱国卫生运动，保持室外环境卫生。教室、宿舍要经常通风，设置防蚊灭蝇设施。食堂要讲究卫生，预防食源性疾病和食物中毒的发生。学生要合理营养、平衡膳食，加强锻炼，提高身体素质。九、任单位和个人对突发公共卫生事件和传染病疫情，不得隐瞒、缓报、谎报或者授意他人隐瞒、缓报、谎报，对那些玩忽职守，导致传染病疫情扩散流行的单位和个人，将按照《传染病防治法》的有关规定予以肃处理，构成犯罪的移交司法机关。为加强学校疫情报告管理工作,根据《传染病防治法》的规定，学校应成立传染病防治领导组织，建立传染病疫情报告网络，固定专

地中海贫血的诊断方法

地中海贫血的诊断方法 Document number：PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998

将全血标本直接放在仪器上，通过电脑操作便能实现HbA、HbA2、HbF等定量检测。优点：所需样本量少，自动化程度高，操作简单，快速，能消除人为误差，结果准确。HPLC也可用于胎儿脐带血的产前诊断，可诊断出重型B地中海贫血，但不能区分正常胎儿和杂合子胎儿。近年来，地中海贫血高发地区也采用此法进行携带者检测。 5 基因诊断近年来，随着分子生物学研究领域的不断发展，从最初的B珠蛋白基因簇限制性酶切多态性检测至目前的聚合酶链反应(PCR)技术结合其他分子生物学方法，B地中海贫血的诊断已逐步改进和完善。基因诊断方法有下列几种： 5．1 限制性片段长度多态性连锁分析(RFLP连锁分析) 原理：DNA限制性内切酶可识别并切割DNA上特定的核苷酸序列，得到一定长度的DNA片段，而碱基的突变可导致酶切位点的丢失或形成，从而改变酶切片段的大小。突变基因在经过相应的限制性内切酶水解后，其电泳条带的数量和大小就会发生改变，根据这些改变可判断出突变是否存在。缺点：由于单独使用该方法，不能直接测出受试者突变基因的类型，必须结合寡核苷酸探针等技术，故其应用范围有一定限制，且操作繁琐。如果母亲或父亲在所有的多态性位点上都为纯合子，无法用此方法进行产前诊断，或者患儿和父母所有位点上都是杂合状态，只能进行50％的排除性诊断。

免疫规划信息管理系统操作手册

免疫规划信息管理系统（疫苗、注射器和）用户操作手册中国疾病预防控制中心 2008年3月

目录 1疫苗管理........................................................................................................... 错误!未指定书签。 1.1疫苗计划 .................................................................................................. 错误!未指定书签。 1.2疫苗出入库管理 ...................................................................................... 错误!未指定书签。 1.3疫苗出入库查询 ...................................................................................... 错误!未指定书签。 1.4统计分析 .................................................................................................. 错误!未指定书签。 1.4.1疫苗计划数量................................................................................. 错误!未指定书签。 1.4.2疫苗出入库数量 ............................................................................. 错误!未指定书签。 1.4.3疫苗过期预警................................................................................. 错误!未指定书签。2注射器管理....................................................................................................... 错误!未指定书签。 2.1注射器计划 .............................................................................................. 错误!未指定书签。 2.2注射器出入库管理 .................................................................................. 错误!未指定书签。 2.3注射器出入库查询 .................................................................................. 错误!未指定书签。 2.4统计分析 .................................................................................................. 错误!未指定书签。 2.4.1注射器计划数量 ............................................................................. 错误!未指定书签。 2.4.2注射器出入库数量 ......................................................................... 错误!未指定书签。 2.4.3注射器过期预警 ............................................................................. 错误!未指定书签。3管理................................................................................................................... 错误!未指定书签。 3.1个案查询/录入 ......................................................................................... 错误!未指定书签。 3.2群体性查询/录入 ..................................................................................... 错误!未指定书签。 3.3统计分析 .................................................................................................. 错误!未指定书签。 3.3.1分类................................................................................................. 错误!未指定书签。 3.3.2报告县数......................................................................................... 错误!未指定书签。 3.3.3季节分布......................................................................................... 错误!未指定书签。 3.3.4年龄分布......................................................................................... 错误!未指定书签。 3.3.5<1岁儿童月龄分布 ....................................................................... 错误!未指定书签。 3.3.6间隔分布......................................................................................... 错误!未指定书签。 3.3.7疫苗分布......................................................................................... 错误!未指定书签。 3.3.8疫苗批号分布................................................................................. 错误!未指定书签。 3.3.9临床诊断分布................................................................................. 错误!未指定书签。 3.3.10一般反应的症状分布................................................................. 错误!未指定书签。 3.3.11报告/调查及时率............................................................................ 错误!未指定书签。 3.3.12个案完整率..................................................................................... 错误!未指定书签。4用户档案管理................................................................................................... 错误!未指定书签。