发酵蛋白技术背景

发酵蛋白技术背景
发酵蛋白技术背景

固态法微生物发酵蛋白饲料技术背景及必展望固态法微生物发酵蛋白饲料近年因生物工程技术的进步,得到了长足的发展,西北地区以2008年前仅以西安汉宝生物科技公司为主,现已发展到宁夏、甘肃、陕西均有生产企业存在情况;西安汉宝集团也是以年产3000吨,发展到24万吨的大型企业。固态法发酵蛋白的几个相关产品:

一、发酵豆粕

豆粕中的大豆蛋白含量很高,在43.0%~55.0%之间,而且其中80.0%以上都是水溶性蛋白。其中赖氨酸2.5%~3.0%、色氨酸0.6%~0.7%、蛋氨酸0.5%~0.7%、胱氨酸0.5%~0.8%、胡萝卜素每千克0.2毫克~0.4毫克、硫胺素每千克3毫克~6毫克、核黄素每千克3毫克~6毫克、烟酸每千克15毫克~30毫克、胆碱每千克2200毫克~2800毫克。

1、固态发酵豆粕的工艺流程

微生物发酵豆粕采用生物发酵工程技术,通过发酵过程中微生物分泌的酶将豆粕中的部分蛋白酶解为分子量3000以上的大豆肽。

2、发酵选用菌种:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等。

研究者利用乳酸链球菌发酵豆粕。豆粕经乳酸菌发酵后有酸甜芳香的气味,pH 值下降,能有效改善豆粕的适口性,促进畜禽生长,同时可以降低抗生素、酸化剂的添加量,降低饲料成本。除此之外,霉菌也经常被研究人员用于固态发酵豆粕的生产,且常常与其他菌种混合发酵。研究者采用米曲霉和啤酒酵母混合菌株固态发酵法生产发酵豆粕,利用霉菌产生的多种酶系,降解其中的纤维素及蛋白质等物质,利用酵母菌合成菌体蛋白。得到的发酵豆粕中粗蛋白含量可达49.10%,比原料中增加12.1%。而用米曲霉菌和酵母菌以麸皮和豆饼粉为主要底物,30℃混合固态发酵36小时。获得了酸性蛋白酶活力达l440U/克、酵母菌数6.29×109个/克、粗蛋白质高达70.56%(其中小肽10.12%)、还原糖8%的新型蛋白饲料。从而获得一项富含小肽的新型蛋白饲料生产工艺。

3、固态发酵生产豆粕过程

发酵过程中分为好氧发酵和厌氧发酵。在发酵前期采用好氧发酵,促使芽孢杆菌、酵母菌等好氧微生物繁殖生长,同时芽孢杆菌、酵母菌分泌产生大量酶类、

维生素等活性产物促进乳酸菌的生长。后期的厌氧发酵,促进乳酸菌的增殖,并产生大量乳酸。微生物在无氧条件下发生强制自溶,细胞中的胞内酶及其他生物活性成分分泌出来。厌氧发酵时蛋白酶发生酶解反应,并产生香味物质。综合好氧发酵和厌氧发酵的优缺点,将两者结合起来用于发酵豆粕基本可以达到以下指标:发酵酶解产生的小肽占豆粕中粗蛋白含量的30%,占成品的10%。发酵豆粕与酶解相比风味得到极大改善,且产生大量生物活性成分,但分子量多在5000~1万之间,属于多肽范畴,离大豆寡肽、小肽的生理活性、易吸收性距离很大,所以成本相对也比较低。因此越来越多的学者及研究人员研究固态发酵法发酵豆粕。固态发酵豆粕的现状及应用前景将豆粕通过生物发酵处理后,使豆粕中的各种抗原成分、抗营养因子被有效降低去除,豆粕中的蛋白质被分解成大量的植物小肽。这种无抗原的植物小肽吸收率高,可作为断奶子猪、幼禽,尤其是许多高档经济动物的优良蛋白质来源。这一产品的推广应用,将大大降低饲料工业对鱼粉等动物性饲料的依赖性,为我国节省大量用于进口鱼粉的外汇,推动饲料工业的技术进步,同时产生巨大的经济效益。

4、发酵前后营养物质的变化

豆粕经过微生物发酵脱毒,可将其中的多种抗原进行降解,使各种抗营养因子的含量大幅度下降。发酵豆粕中胰蛋白酶抑制因子一般≦200tiu/g,凝血素≦6μg/g,寡糖≦1%,脲酶活性≦0.1mg/gmin,而抗营养因子、植酸、伴豆蛋白,致甲状腺肿素可有效去除,使大豆蛋白中的抗营养因子的抗营养作用。IRENE 等(1977)研究表明,豆粕经过乳酸发酵,其VB12会大大提高,由原来的不足1ng/g升高到148ng/g。马文强等利用枯草芽孢杆菌(bacillus subtiis)酿酒酵母菌、乳酸菌对豆粕进行发酵,并对发酵后豆粕的营养特性进行分析。结果表明:发酵后豆粕中粗蛋白的含量比发酵前提高了13.48%,同时发现,粗脂肪的含量比发酵前提高了18.18%,磷的含量比发酵前提高了55.56%(p<0.01),氨基酸的含量比发酵前提高了11.49%。其中胰蛋白酶抑制因子和豆粕中的其他抗营养因子得到了彻底消除。

5、发酵豆粕在动物生产中的应用效果

发酵豆粕在猪上的应用效果报道比较多。利用发酵豆粕替代部分鱼粉可以降低仔猪腹泻率,提高仔猪日采食量和平均日增重。刘欣等(2007)在28日龄断奶

仔猪饲粮中以发酵豆粕部分替代进口鱼粉和乳清粉,结果表明饲喂微生物发酵豆粕使仔猪料重比降低5.56%(p<0.05),血清IgG降低21.43%(p<0.05),肠系膜淋巴结系数提高2.08%(p<0.05)。用曲霉发酵豆粕喂鸡,通过收集粪便测定其磷含量,结果发现磷的含量大大减少。此试验说明通过发酵可以提高植酸磷的利用率。

柯祥军(2007)在玉米-豆粕基础日粮上添加5%、10% 、15%三种不同水平的发酵豆粕饲喂肉鸡。结果发现,试验组与对照组相比日增重、日采食量提高,料肉比下降,差异均极显著。试验Ⅱ与对照组比较粗蛋白的表观消化率提高12.20;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与对照组比较钙的表观消化率分别提高5.67%,但差异性均不显著(p>0.05)。Feng等(2007),用米曲霉菌发酵豆粕替代豆粕饲喂肉鸡。结果表明,在0~21d,处理组肠道内的胰蛋白酶、脂肪酶、蛋白酶活性都得到了升高(p<0.05),十二指肠绒毛高度也明显增加,21~42d,蛋白酶活性仍显著升高。整个生长过程中处理组空肠绒毛的高度增加,隐窝的深度减小。

胡梦红等报道,发酵豆粕富含的小肽能直接被动物吸收,参与机体的生理活动,很好的促进氨基酸吸收,提高蛋白质合成利用率,促进鱼类的生长;还能改善饲料风味和提高饲料适口性,增强鱼类免疫能力,提高成活率,从而促进动物生产性能的提高。

二、发酵棉粕

棉籽粕是一种蛋白质含量较高的饲料,粗蛋白含量为36%~42%左右,各氨基酸组成较好,但由于棉籽饼粕中含有0.12%~0.28%游离棉酚,对畜禽有毒害作用。棉酚中毒的原因棉酚与蛋白质分子中的游离氨基酸各赖氨酸中的ε-氨基结合,直接降低了蛋白质和赖氨酸的利用率,使消化道中的酶活性降低而影响整个消化过程,因而限制了其在畜牧饲养中的应用。

1、棉粕发酵的脱毒效果

棉粕经过微生物发酵以后,其所含的棉酚、环丙烯脂肪酸、植酸及植酸盐、α-半乳糖苷、非淀粉多糖等抗营养因子就会降低或消除,饲喂效果大大增加。研究发现,发现发酵后的棉籽粕的粗蛋白质提高10.92%,必需氨基酸除精氨酸外均增加,赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸分别提高12.73%,22.39%和52.00%。施安

辉等利用4种酵母混合发酵,使棉酚得到高效降解,脱毒率高达97.45%。

2、发酵棉粕在动物生产中的应用效果

何涛等(2008)研究表明,处理组分别添加发酵棉粕15%、20%、30%替代部分豆粕,试验为时6周。结果显示,发酵棉籽处理组的肉仔鸡生产性能、肉品质,免疫器官指数和表观蛋白代谢值与对照组相比未有显著差异(p<0.05),但饲料成本有不同程度的下降。张维德等(1999)在饲料中添加了6.5%、7.66%、10%的发酵棉粕,鸡的产蛋率提高了0.03%、1.71%和4.03%;试验组和对照组血清中谷丙转氨酶活性、总蛋白含量、白蛋白和球蛋白的相对含量、白蛋白和球蛋白之比差异不显著。说明饲喂发酵棉粕的鸡,其肝脏和其他组织的功能仍正常。张国民等(2004)利用微生物发酵棉粕代替豆粕进行饲喂犊牛试验,经过17d的实验研究,结果发现实验1组与实验2组与对照组相比,在生产性能上没有显著性差异,但是饲料成本分别降低了36.84%和21.37%。同时发现,棉粕经过发酵后适口性提高了,粪尿中的NH3、H2S等有害气体大大降低,生态环境得到改善。

三、发酵菜籽粕

和其他的蛋白源相比,菜籽饼粕是一种比较廉价的蛋白质饲料资源,其含有较丰富的蛋白质与氨基酸组成,但因为菜籽粕中含有大量的毒素及抗营养因子,限制了其作为饲料的利用。目前国内外关于菜籽粕脱毒的方法主要有:物理脱毒法,化学脱毒法及生物脱毒法3大类。生物学脱毒法主要有酶催化水解法,微生物发酵法。和其他脱毒方法相比,微生物发酵法具有条件温和,工艺过程简单,干物质损失小等优点。

1、微生物发酵对菜籽粕的作用效果

钟世荣等(2001)利用曲霉菌将菜籽饼粕与酱油渣混合发酵生产蛋白饲料,发酵后粗蛋白质提高16.9%,粗纤维下降。研究人员利用摸拟瘤胃技术对菜籽粕进行发酵脱毒,试验表明,在菜籽粕发酵培养基含水60%的条件下,39℃厌氧发酵4天,其噁唑烷硫酮(OZT)和异硫氰酸酯(ITC)的总脱毒率可达82.7%和90.5%,单宁的降解率为48.3%。

2、发酵菜籽粕在动物生产上的应用效果

刘清兰等(2008)以玉米-豆粕型基础日粮及用5%、10%和15%的固态发酵菜

粕替代豆粕的日粮,以研究固态发酵菜粕对肉鸡肝脏和甲状腺的影响。结果表明,日粮中用15%以内的固态发酵菜粕替代部分豆粕对肉鸡的肝脏和甲状腺指数没有显著影响,因此在日粮中使用15%以内的固态发酵菜粕替代部分豆粕不会引起肉鸡的表观毒性反应。

四、发酵血粉

动物血液是一种潜力很大蛋白质资源。血液可直接干燥制成血粉,血粉的蛋白质含量很高,但其最大的缺点是氨基酸组成不平衡,消化率低、适口性差。发酵血粉与其他原料相比,其维生素、促生长因子以及游离氨基酸都增加了,各种营养物质的含量更全面、更平衡,是一种优质的蛋白质饲料。

1、发酵血粉在畜禽生产上的应用

杨远新等(2006)用发酵血粉代替豆粕对育肥猪进行试验,3个试验组分别替代日粮中的豆粕50%、75%和100%,试验期60d。结果表明:与对照组相比,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组的末重与日增重均有显著提高(p<0.05),其中日增重分别提高11.33%和14.34%;同时,试验Ⅱ组料重比显著降低。

刘定发(1998)用发酵血粉替代进口鱼粉观察对肉鸡生产性能的影响,试验发现,0~4周、5~8周试验肉鸡的日增重情况均较对照组略低,但差异不显著。同时,作者也对三个试验组鸡的健康状况进行了观察,没有发现传染病、中毒和啄肛等现象,生长发育均正常,说明发酵血粉替代部分鱼粉制定饲料配方是切实可行的。

五、其他

肉骨粉,羽毛粉等产量也很大,含有丰富的营养物质。肉骨粉蛋白质含量在45%~50%,矿物质铁、磷、钙含量很高,但骨钙大多以羟磷灰石形式存在,不利于吸收,微生物发酵产酸使羟磷灰石中磷酸钙在酸的作用下生成可溶性乳酸钙,有利于动物吸收。家禽羽毛粉蛋白质含量在85%~90%,胱氨酸含量高达4.65%。也含有维生素B和一些未知的生长素;铁、锌、硒含量很高。羽毛粉经过微生物发酵,羽毛角质蛋白降解,产生大量的游离氨基酸和小肽,具有更高的营养价值。

六、展望

通过发酵技术可以消除饲料原料中的抗营养因子,增加饲料的利用效率,缓解我国蛋白原料依赖进口的局面。我国每年生产的棉籽粕、菜籽粕数以百万吨计,由于其自身的结构及其毒副作用,利用率一直不高。微生物发酵技术的发展成熟为开发利用这些非常规蛋白原料提供了保证。此外,动物屠宰下脚料也具有很大的开发潜力。如果能够利用微生物发酵技术进行饲料生产,不但可以大大减少鱼粉的进口量,而且可以起到降低环境污染的作用。

微生物制药的一般工艺流程

微生物制药的一般工艺流程 微生物制药技术 工业微生物技术是可持续发展的一个重要支撑,是解决资源危机、生态环境危机和改造传统产业的根本技术依托。工业微生物的发展使现代生物技术渗透到包括医药、农业、能源、化工、环保等几乎所有的工业领域,并扮演着重要角色。欧美日等国已不同程度地制定了今后几十年内用生物过程取代化学过程的战略计划,可以看出工业微生物技术在未来社会发展过程中重要地位。 微生物制药技术是工业微生物技术的最主要组成部分。微生物药物的利用是从人们熟知的抗生素开始的,抗生素一般定义为:是一种在低浓度下有选择地抑制或影响其他生物机能的微生物产物及其衍生物。(有人曾建议将动植物来源的具有同样生理活性的这类物质如鱼素、蒜素、黄连素等也归于抗生素的范畴,但多数学者认为传统概念的抗生素仍应只限于微生物的次级代谢产物。)近年来,由于基础生命科学的发展和各种新的生物技术的应用,报道的微生物产生的除了抗感染、抗肿瘤以外的其他生物活性物质日益增多,如特异性的酶抑制剂、免疫调节剂、受体拮抗剂和抗氧化剂等,其活性已超出了抑制某些微生物生命活动的范围。但这些物质均为微生物次级代谢产物,其在生物合成机制、筛选研究程序及生产工艺等方面和抗生素都有共同的特

点,但把它们通称为抗生素显然是不恰当的,于是不少学者就把微生物产生的这些具有生理活性(或称药理活性)的次级代谢产物统称为微生物药物。微生物药物的生产技术就是微生物制药技术。可以认为包括五个方面的内容: 第一方面菌种的获得 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 分离思路新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法,快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌,也必须重新进行分离纯化。具体分离操作从以下几个方面展开。 定方案:首先要查阅资料,了解所需菌种的生长培养特性。 采样:有针对性地采集样品。 增殖:人为地通过控制养分或培条件,使所需菌种增殖培养后,在数量上占优势。

年产1000吨酸性蛋白酶的生产工艺设计

1. 前言 酸性蛋白酶是一类最适pH值为2.5?5.0的天冬氨酸蛋白酶,相对分子质量为30000 ?40000。酸性蛋白酶主要来源于动物的脏器和微生物分泌物,包括胃蛋白酶、凝乳酶和一些微生物蛋白酶。根据其产生菌的不同,微生物酸性蛋白酶可分为霉菌酸性蛋白酶、酵母菌酸性蛋白酶和担子菌酸性蛋白酶.根据作用方式可分为两类:一类是与胃蛋白酶相似,主要产酶微生物是曲霉、青霉和根霉等;另一类是与凝乳酶相似,主要产酶微生物是毛霉和栗疫霉等。细菌未发现产酸性蛋白酶的菌株.由于酸性蛋白酶具有较好的耐酸性,因此被广泛地应用于食品、医药、轻工、皮革工艺以及饲料加工工业中。 国外关于酸性蛋白酶的生产研究从20世纪初就开始了。1908年,德国科学家从动物的胰脏中提取出胰蛋白酶,并将其用于皮革的鞣质。1911年美国科学家从木瓜中提取木瓜蛋白酶(在酸性,碱性和中性的条件下都能分解蛋白质的酶)并将木瓜蛋白酶用于除去啤酒中的蛋白质浑浊物。自1954年吉田首次发现黑曲霉可产生酸性蛋白酶以来,国外对微生物发酵生产酸性蛋白酶进行了广泛的研究。1964年外国科学家首次发现大孢子黑曲霉突变体能产生两种不同的酸性蛋白酶,即酸性蛋白酶和酸性蛋白酶。1965年又从血红色陀螺孔菌,中分离出了一种酸性蛋白酶,并对该酶进行了纯化和结晶。1968年从微小毛霉中筛选出了一种酸性蛋白酶,并对其进行了纯化和酶学性质分析。1995年外国科学家对烟曲霉酸性蛋白酶的基因进行了克隆和测序。2001年又从假丝酵母中筛选出了一种酸性蛋白酶菌株,并对该酶进行了核苷酸序列分析和功能分析。国外学者对曲霉酸性蛋白酶的结构和功能等己经研究的较为透彻。 与国外相比,我国对酸性蛋白酶的研究相对较晚些。1970年上海工业微生

微生物发酵工艺

第六章微生物发酵制药工艺 6.1 微生物发酵与制药 6.2 微生物生长与生产的关系 6.3 微生物生产菌种建立6.4 发酵培养基制备 6.4 发酵培养基制备 ? 概念(medium)供微生物生长繁殖和合成各种代谢产物所需要 的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 ? 培养基的组成和比例是否恰当,直接影响微生物的生长、生产和工艺选择、产品质量和产量。 6.4.1 培养基的成分 碳源 氮源无机盐水生长因子 前体与促进剂 消泡剂 1、碳源(carbon sources) 概念: 构成微生物细胞和代谢产物中碳素的营养物质。作用:为正常生理活动和过程提供能量来源,为细胞物质和代谢产物的合成提供碳骨架。 碳源种类 糖类:葡萄糖、淀粉、糊精和糖蜜 脂肪:豆油、棉籽油和猪油醇类:甘油、乙醇、甘露醇、山梨醇、肌醇蛋白类:蛋白胨、酵母膏速效碳源:糖类、有机酸 迟效碳源:酪蛋白水解产生的脂肪酸 2、氮源(nitrogen sources) 概念:构成微生物细胞和代谢产物中氮素的营养物质。 作用:为生长和代谢主要提供氮素来源。种类:无机氮源、有机氮源 有机氮源 几乎所有微生物都能利用有机氮源 黄豆饼粉、花生饼粉 棉籽饼粉、玉米浆、蛋白\胨、酵母粉、尿素 无机氮源 氨水、铵盐和硝酸盐等。氨盐比硝酸盐更快被利用。 工业应用:主要氮源或辅助氮源;调节pH值生理酸性物质:代谢后能产生酸性残留物质。(NH4)2SO4利用后,产生硫酸 生理碱性物质:代谢后能产生碱性残留物质。硝酸钠利用后,产生氢氧化钠。 3、无机盐和微量元素 ? 概念:组成生理活性物质或具有生理调节作用矿物质 ? 作用方式:低浓度起促进作用,高浓度起抑制作用。? 种类:盐离子 磷、硫、钾、钠、镁、钙,常常添加 铁、锌、铜、钼、钴、锰、氯,一般不加。 4、水 菌体细胞的主要成分。 营养传递的介质。良好导体,调节细胞生长环境温度。培养基的主要成分之一。 5、生长因子(growth factor)

饲料生产发酵技术

饲料生产发酵技术 饲料生产发酵技术引言:

微生物发酵饲料生产形式多种多样。应用微生物可利用廉价 农业 和轻工副产物生产高质量饲料蛋白原料,同时使饲料富含高活性有益微生物及其活性代谢产物。笔者所在微生物发酵课题研究小组经过8年多研究,在前人微生物发酵生产研究基础上不断获得突破进展,最终形成独特的可移动式饲料发酵生产技术,本文即对传统发酵及该课题组最新发酵技术成果分述于下。

1、生产菌种选用基本原则 1.1、安全性 ①菌体本身不产生有毒有害物质; ②不会危害环境固有的生态平衡。 1.2、有效性 ①菌体本身具有很好生长代谢活力,能有效地降解大分子 和抗营养因子,合成小肽和有机酸等小分子物质; ②能保护和加强动物体微生物区系平衡,促进动物健康。 这种功效主要指能有效地提高和维护有益微生物在动物消 化道中数量优势。它可以通过2种方式来达到目标:发酵饲料所用菌种本身就是从目标动物消化道中分离出来的有益菌,通过饲喂高比例发酵饲料可以直接提高动物消化道中有益微生物数量,使有益微生物形成优势。另一种方式是生产菌种或代谢产物可以选择性地杀灭或者抑制有害微生物,从而造成有益菌数量优势。实现这种途径的方式可以多种多样,比较. 常用的有:耗尽氧气,降低体系氧化还原电位;降低环境pH 值;代谢物中含有能选择性杀灭大肠杆菌和沙门氏菌等有害微生物的抗菌物质。

2、发酵饲料生产技术 除了生产菌种以外,生产工艺也是决定发酵技术成败的要素。到目前为止,国内外关于发酵饲料生产技术或生产工艺的内容主要包括以下几种: 2.1、青储

有利因素:传统工艺,历史悠久,技术成熟。 限制因素:季节性强,原料必须新鲜;只能就地利用,基本不能远距离运输;开窖后必须在短时间内用完;目前仅限应用于反刍动物领域。 青储饲料研究历史很长,有专门论著,笔者在此不再赘述,有兴趣的读者可以参考曹利军和韩鹏主编的“青储饲料标准化生产技术”,针对生产实际提出了很好的技术方法,有很 好参考价值。 2.2、利用有机废水生产单细胞蛋白或蛋白原料 这种技术主要是用于有机废水净化处理。有机废水主要来源于造纸、酒精、氨基酸和有机酸工业所产生的废水。 在20世纪60年代,国外曾选用生长速度很快的热带假丝酵母,采用液体连续培养处理造纸废水,但是生产的酵母有苦味,很难在饲料中应用。80年代末,我国工程院院士伦世仪先生领导的课题组用热带假丝酵母连续培养处理酒精废水,生产的酵母有较好适口性,但是 由于废水中有机物含量比较低,培养液中干物质得率不超过1.0%,基本没有商业价值。 西欧和北美等发达国家,特别是日本、荷兰和芬兰等国,在有机废水处理方面投入了大量研究和生产处理费用。可以说,

酸性蛋白酶生产工艺

第六节酸性蛋白酶生产工艺 07040642 47 李继江 1 蛋白酶、蛋白类酶、酸性蛋白酶 1.1 蛋白酶的定义 蛋白酶是催化肽键水解的一类酶,它可迅速水解蛋白质为胨、肽类,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。同时大多数微生物蛋白酶都是胞外酶。 1.2 微生物蛋白酶分类 微生物蛋白酶按其作用的最适pH可分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶三类。 碱性蛋白酶为透明褐色液体,能与水混溶,最适温度50~60℃,最适pH8.5。 中性蛋白酶为金属酶,褐色颗粒或液体,易溶于水,最适温度45~55℃,最适pH5.5~7.5。 酸性蛋白酶为近乎白色至浅黄色无定型粉末或液体,易溶于水,最适温度45℃,最适pH2.5。 1.3 蛋白类酶 蛋白类酶主要是指由蛋白质组成的酶(P酶);而主要由核糖核酸组成的酶称为核酸类酶(R酶)。 蛋白类酶分为氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶(或称连接酶)。 1.4 酶的生产方法 酶的生产方法主要有:提取分离法、生物合成法、化学合成法。 酶的微生物合成法主要有:液体深层发酵、固体培养发酵、固定化细胞培养、固定化原生质发酵。 酸性蛋白酶用微生物发酵法生产,采用液体深层发酵。 液体深层发酵是指液体培养基在发酵罐中灭菌冷却后,接入产酶细胞,一定条件下发酵,适用于微生物细胞、动植物细胞的培养。具有机械化程度高、技术管理严格、酶产率高、质量稳定,产品回收率高的特点,是目前酶发酵的主要方式。 1.5 酸性蛋白酶制剂的性能 1.5.1 酸性蛋白酶的作用机理 酶是一种蛋白质,它是活细胞产生的生物催化剂,生物体的新陈代谢活动都离不开酶的作用。酶的种类很多,酸性蛋白酶是水解酶类的一种,能够在微酸环境下(pH2.5~4.0)

微生物发酵蛋白饲料项目概述

微生物发酵蛋白饲料 项目概述 (一)微生物发酵蛋白产品: 发酵蛋白饲料是以微生物、复合酶为生物饲料发酵剂菌种,将饲料原料转化为微生物菌体蛋白、生物活性小肽类氨基酸、微生物活性益生菌和复合酶制剂为一体的生物发酵蛋白饲料。 (二)微生物发酵蛋白产品生产背景: 生物技术特别是微生物发酵技术来开发新型蛋白饲料资源,具有广泛的应用前景。利用微生物生产的饲料蛋白、酶制剂、氨基酸、维生素、抗生素和益生菌等相关产品,可以弥补常规饲料中容易缺乏的氨基酸等物质,而且能使其他粗饲料原料营养成分迅速转化,达到增强消化吸收利用效果。 饲料和粮食生产一直是我国国民经济的薄弱环节。由于受人口增长、耕地减少和肉食品消费增加的影响,我国粮食供需平衡十分脆弱。我国人均占有粮食一直在400k以下其中粮食总产量的40%左右用于饲料生产。在耕地和水资源长期紧缺的情况下,我国粮食产量已很难提高。饲料资源短缺的问题长期制约着我国农牧业的发展,尤其是蛋白质饲料的严重不足已经成为全球性问题。发展高效饲料工业,提高粮食向畜牧产品的转化效率和饲料利用率、开发新型蛋白饲料是满足人民对肉、禽、鱼、蛋越来越大的需求量的最佳途径。 (三)微生物发酵的分类: 微生物发酵根据获得产品的不同可分为微生物酶发酵、微生物菌体发酵、微生物代谢产物发酵、微生物的转化发酵、生物工程细胞的发酵。根据微生物

的种类不同可分为厌氧发酵和好氧发酵,厌氧发酵在发酵时不需要供给空气,如利用乳酸杆菌进行的丙酮、丁醇发酵等;好氧发酵需要在发酵过程中不断的通入一定量的空气,如利用黑曲霉进的柠檬酸发酵,利用棒状杆菌进行的谷氨酸发酵利用黄单胞菌进行的多糖发酵等。根据培养基的同可分为固体发酵和液体发酵,根据设备不同可分为敞口发酵、密闭发酵、浅盘发酵和深层发酵。 (四)微生物发酵的优越性 4.1发酵脱毒 多数情况下微生物的代谢产物可以降低饲料毒素含量,甘露聚糖可以有效地降解黄曲霉B 1 等。有研究表明,曲霉属,串珠霉属等 5个菌株能效的降低发酵棉籽粕中游离棉酚的含量。 4.2改变蛋白质的品质 微生物可以分解品质较差的植物性或动物性蛋白质,合成品质较好的微生物蛋白质,例如活性肽、寡肽等。微生物能把15%以上的糖、半纤维粗纤维3%及以上的粗脂肪转化为30%以上的粗蛋白、赖氨酸和蛋氨酸,有利于畜禽的消化吸收。 4.3 产生促生长因子 不同的菌种发酵饲料后所产生的促生长因子量不同,这些促生长因子主要有有机酸族维B素和未知生长因子等。 4.4降低粗纤维 一般发酵水平可使发酵基料的粗纤维含量降低12%~16%,增加适口性和消化率等研究。Carlson报道,发酵后饲料中的植酸磷或无机磷酸盐被降解或析出,变成了易被动物吸收的游离磷。

微生物制药技术介绍

微生物制药技术介绍 工业微生物技术是可持续发展的一个重要支撑,是解决资源危机、生态环境危机和改造传统产业的根本技术依托。工业微生物的发展使现代生物技术渗透到包括医药、农业、能源、化工、环保等几乎所有的工业领域,并扮演着重要角色。欧美日等国已不同程度地制定了今后几十年内用生物过程取代化学过程的战略计划,可以看出工业微生物技术在未来社会发展过程中重要地位。 微生物制药技术是工业微生物技术的最主要组成部分。微生物药物的利用是从人们熟知的抗生素开始的,抗生素一般定义为:是一种在低浓度下有选择地抑制或影响其他生物机能的微生物产物及其 衍生物。(有人曾建议将动植物的具有同样生理活性的这类物质如鱼素、蒜素、黄连素等也归于抗生素的范畴,但多数学者认为传统概念的抗生素仍应只限于微生物的次级代谢产物。)近年来,由于基础生命科学的发展和各种新的生物技术的应用,报道的微生物产生的除了抗感染、抗肿瘤以外的其他生物活性物质日益增多,如特异性的酶抑制剂、免疫调节剂、受体拮抗剂和抗氧化剂等,其活性已超出了抑制某些微生物生命活动的范围。但这些物质均为微生物次级代谢产物,其在生物合成机制、筛选研究程序及生产工艺等方面和抗生素都有共同的特点,但把它们通称为抗生素显然是不恰当的,于是不少学者就把微生物产生的这些具有生理活性(或称药理活性)的次级代谢产物统称为微生物药物。微生物药物的生产技术就是微生物制药技术。可以认为包括五个方面的内容:

根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 分离思路新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法, 快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌,也必须重新进行分离纯化。具体分离操作从以下几个方面展开。 定方案:首先要查阅资料,了解所需菌种的生长培养特性。 采样:有针对性地采集样品。 增殖:人为地通过控制养分或培条件,使所需菌种增殖培养后,在数量上占优势。 分离:利用分离技术得到纯种。 发酵性能测定:进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 工业上生产用菌株都是经过选育过的。工业菌种的育种是运用遗传学原理和技术对某个用于特定生物技术目的的菌株进行的多方位的改造。通过改造,可使现存的优良性状强化,或去除不良性质或增加新的性状。 工业菌种育种的方法:诱变、基因转移、基因重组。

3吨碱性蛋白酶课程设计--年产3吨碱性蛋白酶发酵工艺设计

年产3吨碱性蛋白酶发酵工艺设计 摘要 在现代食品工业中, 酶的应用几乎涉及到食品加工的各个领域。随着酶制剂日益广泛的应用,经济效益显著。蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称, 而碱性蛋白酶则适宜在碱性条件( pH9——11) 下水解动植物蛋白质, 广泛存在于动植物及微生物中。设计中首先根据参考资料选定了碱性蛋白酶发酵生产的具体工艺流程,通过物料衡算确定需要立方米发酵罐台和立方米种子罐台,在此基础上得出发酵工段所需要的各种原料量,通过能量衡算确定水、无菌空气和蒸汽等的消耗量。然后对主要设备进行计算和选型,得出发酵罐、种子罐及通用设备、非标准设备等的结构尺寸、冷却装置、传动装置,根据工艺要求确定罐的附属设备和辅助设备以及发酵过程中的优化控制。 根据计算结果,设计了两张图纸,分别为发酵罐装配图、工艺流程图。 关键词:碱性蛋白酶发酵罐种子罐物料衡算

1绪论-------------------------------------------------------------- 1 1.1碱性蛋白酶概述---------------------------------------------- 1 1.2碱性蛋白酶的性质-------------------------------------------- 1 1.3碱性蛋白酶的使用条件---------------------------------------- 1 1.4碱性蛋白酶的保存-------------------------------------------- 1 1.5注意事项---------------------------------------------------- 1 1.6碱性蛋白酶的主要应用---------------------------------------- 2 1.6.1在洗涤剂中的应用-------------------------------------- 2 1.6.2在皮革中的应用---------------------------------------- 2 1.6.3在饲料添加剂中的应用---------------------------------- 3 1.6.4在纺织行业的应用-------------------------------------- 3 1.6.7在玉米深加工中的应用---------------------------------- 3 1.7碱性蛋白酶的发展前景---------------------------------------- 4 2设计任务---------------------------------------------------------- 4 2.1设计内容---------------------------------------------------- 4 2.2设计要求---------------------------------------------------- 4 3碱性蛋白酶生产工艺选择-------------------------------------------- 5 3.1生产工艺的选择---------------------------------------------- 5 3.2工艺流程图-------------------------------------------------- 5 3.3工艺流程图说明---------------------------------------------- 6 3.3.1菌种的制备-------------------------------------------- 6 3.3.2孢子的制备-------------------------------------------- 6 3.3.3种子的制备-------------------------------------------- 6 3.4菌种的改良-------------------------------------------------- 6 3.5培养基的制备------------------------------------------------ 8 3.6灭菌的方法-------------------------------------------------- 8 3.6.1湿热灭菌---------------------------------------------- 8 3.6.2培养基的连续灭菌-------------------------------------- 9 3.6.3空气除菌---------------------------------------------- 9

生物发酵饲料相关资料

生物发酵饲料相关资料 一、生物发酵饲料技术 1、菌种的溶解: A、在桶中放入20到30斤温水(温度为30度); B、加入红糖一公斤搅拌均匀; C、先加入固体菌种搅拌均匀,然后再加入液体菌种搅拌均匀; D、放置一小时。 2、在将搅拌均匀的菌种加水稀释至三百公斤; 3、和七百公斤饲料混合均匀; 4、放入缸中或者袋子(薄膜袋)中进行发酵; 5、3到5天后,闻到酒香味为发酵成熟生物发酵饲料含有较多的纤维分解菌、半纤维分解菌、微生物酶的有益微生物制剂,在动物机体内发酵过程中不但能将畜禽难以消化吸收的粗蛋白质、淀粉中的大分子物质,加工分解转变成易消化吸收的葡萄糖、氨基酸和维生素等小分子营养物质,而且能大大降解粗纤维,产生大量的生物活性物质,从而提高饲料的消化吸收率和营养价值。另外,生物发酵饲料中的有益微生物还能杀死病原菌,维持动物体内微生态平衡,增强机能的免疫力,具有一定的防病治病作用。 二、生物发酵饲料的制作方法 (一) 生物发酵饲料配方。 统糠或草粉55%、麦麸16%、玉米15%、饼粕10%、糖蜜或红糠2%、有益微生物制剂2%(含纤维素分解菌类、芽胞杆菌类、乳酸菌类、双歧杆菌类、酵母菌类等五大类菌群几十个菌种)。 (二) 生物发酵饲料的制作方法 1.按照上述配方分别称取原料,粉碎后过筛(1mm孔),然后搅拌均匀备用。 2.有益微生物制剂有固体型和液体型两种,若使用固体型有益微生物制剂,则可将其直接加入到上述原料中搅拌均匀即可;若使用液体型有益微生物制剂,则可先将其倒入无漂白粉的自来水或深进水中溶解后,再将红糖或糖蜜掺入,制成均一的含糖菌水。 3.将含糖菌水或糖水(指用固体型有益微生物制剂者)均匀喷洒在发酵料中,边拌边洒,使发酵料的含水量达到手捏成团、落地即散的程度,一般料、水重量

年产1000吨酸性蛋白酶的生产工艺设计

1. 前言 酸性蛋白酶是一类最适pH值为的天冬氨酸蛋白酶,相对分子质量为30000 40000。酸性蛋白酶主要来源于动物的脏器和微生物分泌物,包括胃蛋白酶、凝乳酶和一些微生物蛋白酶。根据其产生菌的不同,微生物酸性蛋白酶可分为霉菌酸性蛋白酶、酵母菌酸性蛋白酶和担子菌酸性蛋白酶.根据作用方式可分为两类:一类是与胃蛋白酶相似,主要产酶微生物是曲霉、青霉和根霉等;另一类是与凝乳酶相似,主要产酶微生物是毛霉和栗疫霉等。细菌中尚未发现产酸性蛋白酶的菌株.由于酸性蛋白酶具有较好的耐酸性,因此被广泛地应用于食品、医药、轻工、皮革工艺以及饲料加工工业中。 国外关于酸性蛋白酶的生产研究从20世纪初就开始了。1908年,德国科学家从动物的胰脏中提取出胰蛋白酶,并将其用于皮革的鞣质。1911年美国科学家从木瓜中提取木瓜蛋白酶(在酸性,碱性和中性的条件下都能分解蛋白质的酶)并将木瓜蛋白酶用于除去啤酒中的蛋白质浑浊物。自1954年吉田首次发现黑曲霉可产生酸性蛋白酶以来,国内外对微生物发酵生产酸性蛋白酶进行了广泛的研究。1964年外国科学家首次发现大孢子黑曲霉突变体能产生两种不同的酸性蛋白酶,即酸性蛋白酶和酸性蛋白酶。1965年又从血红色陀螺孔菌,中分离出了一种酸性蛋白酶,并对该酶进行了纯化和结晶。1968年从微小毛霉中筛选出了一种酸性蛋白酶,并对其进行了纯化和酶学性质分析。1995年外国科学家对烟曲霉酸性蛋白酶的基因进行了克隆和测序。2001年又从假丝酵母中筛选出了一种酸性蛋白酶菌株,并对该酶进行了核苷酸序列分析和功能分析。国外学者对曲霉酸性蛋白酶的结构和功能等己经研究的较为透彻。 与国外相比,我国对酸性蛋白酶的研究相对较晚些。1970年上海工业微生物研究所首先从黑曲霉中筛选出一株产酸性蛋白酶菌株,并和上海酒精厂协作进行中试生产,填补了我国酸性蛋白酶制剂的空白.近年来国内在酸性蛋白酶上的研究大都致力于选育产酶活力高、抗逆性好的菌种,并获得了一些很有应用前途的产酶菌株。目前用于酸性蛋白酶生产的高产菌株主要有黑曲霉、宇佐美曲霉和青霉及它们的突变株。李永泉等,对宇佐美曲霉所产的酸性蛋白酶进行了发酵过程动力学研究.戚淑威等对青霉产酸性蛋白酶的适宜条件和酶学性质进行了分析。谢必峰等,采用硫酸铵盐析法和离子交换层析法分离纯化了黑曲霉产酸性蛋

工业微生物发酵技术汇总

发酵技术指标 沃蒙特发酵技术服务平台 NO 项目英文技术名称名称指标 1他克莫司Tacrolimus 发酵单位:大于 1.0g/L, 发酵周期: 240 小时 , 提取收 率: 60-70% 2西罗莫司Sirolimus\Rapamyci 发酵单位: 1000±200 mg/L,发酵周期: 192hrs ,收率:35- 40% n产品含量:≥ 98% 3乳酸链球菌素Nisin 发酵水平 : 12-15g /L ,发酵时间:16-20小时,收率 :65% 以上。 4霉酚酸mycophenolate 发酵单位: 12g/L 以上,发酵时 间:160 小时,提取得率:mofetil, MMF 75% 5去甲金霉素DMCT,Demethylchlor 发酵单位: 10± 2g/L ,发酵时间: 200 小时,产品收率: 75% tetracycline 6雄烯二酮Androstenedione 发酵时间 96 ± 24 hrs ,每 3- 3.3 公斤植物甾醇可获 得 1 公斤雄烯二酮。 7利福霉素Rifamycin 发酵周期 220 小时,发酵单位大于 20g/L ,收率 65% 86- 羟基烟酸6-Hydroxynicotinic 纯度:≥ 98%,用途说明:用于合成维 生素 A Acid 9L- 缬氨酸Valine 发酵产酸: 60±5 克 /L ,发酵周 期: 60 ± 5 小时,提取 收 率: 65%(医药级) 10 L- 异亮氨酸Isoleucine 发酵产酸: 25-30 克 / 升,发酵周期 : 60-72 小时, 提取收 率: 80% 发酵单位 :35 ± 3g/L ,发酵时间 :33-35 小时,产品 得率 : 饲 11 L- 色氨酸Tryptophan 料级≥ 85%,药品级 ≥ 70%,产品质量 :>98.0%( 纯度 ) , 糖转化率: 18% 12 糖化酶Glucoamylase 发酵周期: 6~7 天,酶 活: 8 万- 10 万 U 13 耐高温淀粉酶Amylase 发酵周期: 140h,酶活: 17 万单位 14 纤维素酶Cellulase 发酵周期: 6~7 天,酶活: 80-100IU 15 超级泰乐菌素Super tylosin 发酵单位: 14000- 16000U/ml 发酵时间: 130-150 小时提 取 收率: 70-75%

植物蛋白行业发展现状调研及投资前景分析报告(2020-2026)

植物蛋白行业发展现状调研及投资前景分析报告(2020-2026) 恒州博智(QYResearch) 2020年

2019年全球植物蛋白市场总值达到了750亿元,预计2026年可以增长到1622亿元,年复合增长率(CAGR)为11.5%。 本报告研究全球与中国植物蛋白的发展现状及未来发展趋势,分别从生产和消费的角度分析植物蛋白的主要生产地区、主要消费地区以及主要的生产商。重点分析全球与中国的主要厂商产品特点、产品产品类型、不同产品类型产品的价格、产量、产值及全球和中国主要生产商的市场份额。主要生产商包括: DowDuPont ADM CHS Manildra Group Roquette Midwest Grain CropEnergies Tereos Syral Showa Sangyo Fuji Oil Cargill Cosucra Nisshin Oillio Tate & Lyle

World Food Processing Topagri Gushen Biological Shansong Biological Tianguan Yuwang Group Scents Holdings Chinalotus Goldensea Industry Sinoglory Health Food Shuangta Food Harbin Hi-tech Soybean Fiber Source Biological Engineering Oriental Protein Tech Wonderful Industrial Group Tianjing Plant Albumen 按照不同产品类型,包括如下几个类别: >80% <80% 按照不同应用,主要包括如下几个方面:食品和饮料 饲料

生物发酵饲料完整版

生物发酵饲料 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

1. 微生物发酵饲料的目的及主要方法 微生物发酵饲料的主要目的是:在人为的可控制的条件下,以植物性农副产品为主要原料,通过微生物的代谢作用,降解部分多糖、蛋白质、和脂肪等大分子物质,生成有机酸、可溶性多肽等小分子物质,形成营养丰富、适口性好、有益活菌含量高的生物饲料或饲料原料,从而使饲料成分变得丰富、营养易于动物吸收,使动物更好的成长。同时将廉价的农业或轻工业副产物变废为宝,生产出高质量的饲料蛋白原料,并且还可以通过微生物发酵饲料获得高活性的有益微生物。 微生物发酵饲料的主要方法有四类: 第一,固态发酵饲料,就是利用微生物的发酵作用来改变饲料原料的理化性状,或提高消化吸收率、延长贮存时间,或变废为宝,将秕壳残渣变为饲料,或解毒脱毒,将有毒饼粕转变为无毒、低毒的饲料,这一类发酵饲料包括青贮、微贮、粗饲料与担子菌发酵、畜禽粪与动物性下脚料发酵、饼粕类发酵脱毒饲料以及固态菌体发酵蛋白饲料; 第二,利用微生物在液态基质中大量生长繁殖的菌体以及生产单细胞蛋白(SCP)如酵母饲料、细菌饲料,以及菌体蛋白(MBP),如丝状真菌菌体、食用菌菌丝体及光合细菌、微型藻饲料等; 第三,利用现代化的微生物工程,发酵积累微生物有用的中间代谢产物或特殊代谢产物,以此生产饲用氨基酸、酶制剂以及抗生素、维生素等;

第四,是培养繁殖可以直接饲用的微生物,制备活菌制剂(又称微生态制剂、益生素等)。有益菌通过竞争性抑制作用(包括定殖位点和夺取营养物质)阻止有害微生物在肠粘膜附着与繁殖。 微生物发酵饲料大体有以下几步: (1)选育优良的菌种,如菌体本身不产生有毒有害物质,菌体本身有很好的生长代谢活力,能有效降解大分子合成有机酸、小肽等小分子物质。 (2)活化菌种、制备种子液。 (3)二次扩大培养或三次扩大培养。将种子液接入二次扩大培养基中进行发酵培养。二次扩大培养结束后再接入三次扩大培养基中培养。 (4)发酵饲料,将扩大培养的培养基接入发酵罐中培养一定时间。 2、饲料的分析与检验项目、方法 饲料分析检验的基本程序: (1)检验采样 (2)饲料感官检验 (3)样品处理及制备 (4)实验测定分析,包括营养分析、有害物质检测等。 (5)数据处理,记录检验报告 发酵饲料的检验项目包括: 1)水分测定:试样在105±2℃烘箱内,在大气压下烘干,直至恒重,逸失的重量为水分。 2)粗蛋白:凯氏定氮法

新型蛋白质发酵饲料

新型发酵蛋白饲料的工业生产研究与应用 摘要:本文将就目前蛋白饲料的研究与生产情况做一定的论述,并将其原理与生产流程和 在生产过程中的各种影响因素做出阐述,以及发酵生产蛋白饲料的菌种类群和对发酵设备的 要求具体说明。本文还将说明蛋白饲料在国计民生中具有的重要地位以及重要作用。国内目 前生产水平还落后发达国家,因此加大研究与生产力度十分迫切,以下就将目前的进展进行 叙述。 Abstract : This article prese nts the curre nt research and product ion of prote in feed to do some expositi on, and the prin ciple and the product ion process and the various factors in the product ion process to make elaborated, as well as groups of bacteria ferme ntatio n product ion of protein feed and ferme ntatio n equipme ntthe requireme nts specified. The article also describes the protein feed has an important position in people's livelihood and an importa nt role. Curre nt product ion levels are still laggi ng beh ind developed coun tries, and therefore very urge nt to in crease the research and product ion efforts, the follow ing will be the curre nt progress of descriptio n. 关键词:蛋白饲料生物发酵霉菌 前言:饲料和粮食生产一直是我国国民经济的薄弱环节。由于受人口增长、耕地减少和肉食品消费增加的影响,我国粮食供需平衡十分脆弱。我国人均占有粮食一直在400kg以下,其中粮食总产量的40流右用于饲料生产[1]。发展高效饲料工业,提高粮食向畜牧产品的转化效率和饲料利用率、开发新型饲料原料是 满足人民对肉、禽、鱼、蛋越来越大的需求量的最佳途径[2]。用生物技术特别是微生物发酵技术来开发新型饲料资源、生产蛋白质饲料和新型添加剂越来越受到人们的重视。特别是进入21世纪后,利用微生物生产的饲料蛋白、酶制剂、氨基酸、维生素、抗生素和益生菌微生物制剂等饲料产品的使用使发酵工程技术在饲料工业中得到了更广泛的应用。 1蛋白饲料发酵原理 1.1发酵机理 微生物发酵饲料的原理是利用高活性微生物菌剂,主要有霉菌、酵母及细菌的一些类群,其一是利用霉菌分泌多种酶类,同时将饲料中纤维物质、淀粉及果胶转化为各种糖类;其二是利用酵母和乳酸类细菌将饲料的某些成分进一步合成营养价值较高或适口性较好的物质,如蛋白质、氨基酸、维生素、有机物酸、未知促生长因子等[3]。 1.2发酵优势 a、在高效分解因子的作用下,将粗纤维、木质素、长分子链,通过生物生化的作用,把畜禽不能吸收的高分子碳水化合物转化成可吸收利用的低分碳水化合物。 b、发酵剂里的多种有益菌群能大量吸取畜禽难以利用的有机氮、无机氮,使之转化成营养成份较高的菌体蛋白质。 c、有益菌株在发酵中能产生大量蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶,纤维素分解酶等。 d、有益菌群在畜禽肠胃里,增强了免疫力,减少疾病发生。 2蛋白饲料发酵方法(技术) 到目前为止,国内外关于发酵饲料生产技术或生产工艺的内容主要包括以下几种:

实验二、细菌蛋白酶的发酵制备

实验二、细菌蛋白酶的发酵制备 一、实验目的原理 了解气升式发酵罐的结构及特点,学会使用该类型的发酵罐培养微生物。本实验在5L 发酵罐中进行细菌培养。通过测定菌体浓度了解细菌的生长规律,通过测定蛋白酶活力了解产物生成,分析菌体生长与产物生成的关系。同时检测发酵过程中的溶氧、pH等。 二、材料与方法 1.实验用培养基 LB培养基:胰蛋白胨10g/L,酵母提取物 5g/L,氯化钠10g/L,卡那霉素5mg/L,pH7.4。 0.5mg/mL抗生素溶液:称取 0.05g 卡那霉素溶于 100ml 无菌水。小管分装后置-20℃冻存备用。 斜面培养基:配方同 LB 液体培养,调pH至7.4后添加琼脂15g/L。 三、实验过程 1.种子制备 250mL锥形瓶装培养基50mL,接种斜面菌种一环,于旋转摇床37℃培养12h 转速150-200转/分。 2.发酵前准 1).清洗。发酵罐培养前后进行清洗(空气分布器、管内壁、顶板放零件的小间隙),外壁、底板、顶板擦干净。 2).连接。进行发酵之前要对发酵系统(蒸汽发生器管路、空气压缩系统、冷却系统、发酵流加系统及在线控制系统)进行调试。主要工作是检查通气与通水管道的连接正确与否、管道是否破损、空压机能否正常工作、在线控制系统能否正常工作。发酵罐中配置用于供给冷却水、循环水及排水的管子。空压机空气供给的配管。连接发酵罐、PH 控制器、DO 控制器等电源。注意不漏电和接错线。 3).试剂。配置培养基、酸碱平衡液、消泡剂等。 3.电极标定 3.1 pH 电极标定 pH 电极零点和斜率要在进行灭菌以前进行,电极在使用前先用蒸馏水清洗并检查电极信号有无故障,然后再进行标定。一般而言如果发酵液偏酸性我们用6.86 和4.00 的缓冲液,如果偏碱性则配制6.86 和9.18 的缓冲液。 点击控制器屏幕画面下方的“标定”,弹出标定菜单,选择相应罐(F1-F4)下的“pH 电极”,弹出相应的pH 电极标定界面。先进行零点标定,以酸性为例,将pH 电极联好电极线用蒸馏水洗净后插入pH6.86 的标准液中,点击“零点值”,输入6.86,然后点击“开始”,待采样值完全稳定后点击“结束”。然后用蒸馏水清洗电极探测头后插入pH4.01 的标准液中,同样方法输入斜率值 4.01 来标定斜率。 接下来将PH 电极插在发酵罐上与培养基一起进行灭菌,并用纱布和牛皮纸将电极的金属头包住,以免接触到水。实消后,冷却下来,连上电极线,接到灌上,这时PH 电极将信号传给控制系统并显示发酵罐内发酵液的PH 值。在发酵控制台上设定需要控制的PH,控制系统会通过流加酸碱控制PH。也可不控制PH,通过电极对发酵过程的PH 变化进行检测。

饲料生产发酵技术.doc

饲料生产发酵技术 引言: 微生物发酵饲料生产形式多种多样。应用微生物可利用廉价农业和轻工副产物生产高质量饲料蛋白原料,同时使饲料富含高活性有益微生物及其活性代谢产物。笔者所在微生物发酵课题研究小组经过8年多研究,在前人微生物发酵生产研究基础上不断获得突破进展,最终形成独特的可移动式饲料发酵生产技术,本文即对传统发酵及该课题组最新发酵技术成果分述于下。 1、生产菌种选用基本原则 1.1、安全性 ①菌体本身不产生有毒有害物质; ②不会危害环境固有的生态平衡。 1.2、有效性 ①菌体本身具有很好生长代谢活力,能有效地降解大分子和抗营养因子,合成小肽和有机酸等小分子物质; ②能保护和加强动物体微生物区系平衡,促进动物健康。这种功效主要指能有效地提高和维护有益微生物在动物消化道中数量优势。它可以通过2种方式来达到目标:发酵饲料所用菌种本身就是从目标动物消化道中分离出来的有益菌,通过饲喂高比例发酵饲料可以直接提高动物消化道中有益微生物数量,使有益微生物形成优势。另一种方式是生产菌种或代谢产物可以选择性地杀灭或者抑制有害微生物,从而造成有益菌数量优势。实现这种途径的方式可以多种多样,比较

常用的有:耗尽氧气,降低体系氧化还原电位;降低环境pH值;代谢物中含有能选择性杀灭大肠杆菌和沙门氏菌等有害微生物的抗菌物质。 2、发酵饲料生产技术 除了生产菌种以外,生产工艺也是决定发酵技术成败的要素。到目前为止,国内外关于发酵饲料生产技术或生产工艺的内容主要包括以下几种: 2.1、青储 有利因素:传统工艺,历史悠久,技术成熟。 限制因素:季节性强,原料必须新鲜;只能就地利用,基本不能远距离运输;开窖后必须在短时间内用完;目前仅限应用于反刍动物领域。 青储饲料研究历史很长,有专门论著,笔者在此不再赘述,有兴趣的读者可以参考曹利军和韩鹏主编的“青储饲料标准化生产技术”,针对生产实际提出了很好的技术方法,有很好参考价值。 2.2、利用有机废水生产单细胞蛋白或蛋白原料 这种技术主要是用于有机废水净化处理。有机废水主要来源于造纸、酒精、氨基酸和有机酸工业所产生的废水。 在20世纪60年代,国外曾选用生长速度很快的热带假丝酵母,采用液体连续培养处理造纸废水,但是生产的酵母有苦味,很难在饲料中应用。80年代末,我国工程院院士伦世仪先生领导的课题组用热带假丝酵母连续培养处理酒精废水,生产的酵母有较好适口性,但是

(完整版)微生物与制药综述

微生物制药的研究进展 姓名:李青嵘 班级:生工102 学号:1014200044

摘要 本文通过对历史文献的检索,从微生物生产维生素,微生物生产多价不饱和脂肪酸,微生物生产抗生素,微生物生产抗癌物质,微生物生产医用酶制剂等五个方面综述了微生物制药的研究进展。 关键词:微生物,制药,发酵工程 1.前言 随着生物技术的迅猛发展,在医药领域的许多方面取得了巨大的进展.,其中采用微生物制药,具有生产工艺简单,生产成本低廉,产品产量高,产品纯度高,可大规模工业化生产等优势,同样得到了巨大的发展。从传统工艺,如利用发酵工程生产抗生素、酶制剂以及B-胡萝卜素等;到现今的利用转基因技术生产干扰素、胰岛素、生长因子等几十种新药和疫苗。本文着重综述了微生物的发酵工程在医药研究和生产中应用的最近进展,主要包括生产维生素、多价不饱和脂肪酸、抗生素、抗癌物质医用酶制剂等五个方面。 2.研究内容 2.1.微生物生产维生素 维生素是六大生命要素之一, 为整个生命活动所必需。β-胡萝卜素、VC、VE是目前应用最为广泛,效果最为显著的三种维生素,它们的作用分别是:β-胡萝卜素是强力抗氧化剂, 有抑制癌细胞增殖和提高机体免疫力等作用。V C 和V E 均是抗氧化剂, 前者可阻止、破坏自由基形成,还具有激活免疫系统细胞的活力,刺激机体产生干扰素以抵御外来侵染因子。至于VE可产生抗体,增强机体免疫力。目前,上述的“三素”以实现了微生物工业化生产。 目前,β-胡萝卜素主要是由三孢布拉霉菌生产,在1998年,陈涛等[1]已经针对三孢布拉霉菌的特点,优化发酵工艺,在3M3的发酵罐中发酵120h,生产的β-胡萝卜素产量已达到1146.5mg/L。虽然,传统的工艺生产β-胡萝卜素的产量高,生产周期比较短,但是传统的工艺复杂,成本过高,不利于大规模工业化生产。故,目前许多课题组专注于开发新的生产β-胡萝卜素的菌种或改进传统工艺。据近年所发表的期刊文献,目前,采用红酵母发酵生产β-胡萝卜素是一种工艺简单,成本低廉的方法,虽然在产量方面较传统方法的低很多,但是该方法仍具有很大的发展潜力。何海燕等[2]采用粘红酵母R3-35摇瓶发酵84h,生产的β-胡萝

蛋白酶的工厂设计

年产1500m3蛋白酶的工厂设计 摘要 蛋白酶是催化肽键水解的一类酶,它可迅速水解蛋白质为胨、肽类,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。同时大多数微生物蛋白酶都是胞外酶。微生物蛋白酶按其作用的最适pH可分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶三类。酸性蛋白酶是一种羧基蛋白酶,它的分子质量为30-40kD,等电点(pH3.0-5.0) 酸性蛋白酶现已广泛应用于食品、饲料、酿造、毛皮与皮革、医药、胶原纤维等各个行业之中。本设计采用豆饼粉、玉米粉、淀粉为主要的培养基原料,并选用黑曲霉(Aspergillus niger )3.350菌种发酵。其中豆饼粉3.75%,玉米粉0.625%,鱼粉0.625%,氯化铵1%,氯化钙0.5%,磷酸氢二钠0.2%。 本设计利用通风搅拌式发酵罐进行发酵,同时利用离子交换树脂对母液进行提取,提高了酸性蛋白酶的生产效率,减少了生产成本。设计还包括发酵罐,全厂平面图,车间平面布置图,工艺流程图。 关键词:酸性蛋白酶发酵工厂设计

The Process Design of the Protease used for Section with the Capacity of 1500m3 Annually Abstract protease is a kind of Peptone and peptide. It has been discover across in animal giblets ,the stem of plant,fruit , microbial and so on.Most of the Microbial protease are ectoenzyme .According to its best Optimum pH function ,Microbial protease Can be divided into Acid protease ,Neutral protease and alkaline protease .Acid protease is a kind of Carboxyl protease , Its molecular weight is 30-40 kd, lower isoelectric point (pH3.0-5.0) Acid protease in food, medicine, textile, leather, feed, cosmetics, washing industries have applications, natural health, avirulent and harmless, quite safe. So in this paper the basic content of more acid protease, production process and application development were introduced. This design USES the bean cake powder, corn flour, starch as the main medium of raw materials, and selects the Aspergillus Niger, Aspergillus Niger) 3.350 bacterial fermentation. With bean cake powder 3.75%, corn flour 3.75%, 0.625% fish meal, 1% ammonium chloride, calcium chloride 0.5%, disodium hydrogen phosphate 0.2%. This design using the ventilation agitator in fermentor, using ion exchange resin in mother liquid was extracted at the same time, improve the efficiency of the acid protease production, reduce the production cost. The design also includes Fermentor, The factory plan, Shop floor plan, Flow Chart. Key Words: Acid protease ; fermentation; plant-design;

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