医学微生物学复习题

1、简述微生物的种类。

细胞类型特点种类非细胞型微生物无典型细胞结构、在活细胞内

增殖

病毒

原核细胞型微生物仅有原始细胞的核、缺乏完整

细胞器细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体

真核细胞型微生物有完整上的核、有完整的细胞

器

真菌

2、郭霍法则的内容：

①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康者中不存在；

②该特殊病原菌能被分离培养得纯种；

③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；

④自人工感染的实验动物体内能重新分离得该病原菌纯培养。

3、细菌的基本形态有几类? 其中球菌按分裂后排列不同分哪五种? （1）球菌：双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌（2）杆菌

（3）螺旋菌

4、分析G+菌、G-菌细胞壁结构与组成特点及其医学意义。

（1）细菌细胞壁构造比较

G+菌G-菌

肽聚糖组成聚糖骨架

四肽侧链

五肽交联桥

聚糖骨架

四肽侧链

特点三维立体框架结构，强度高二维单层平面网络，强度差含量多，50层少，1~2层

其他成分磷壁酸外膜：脂蛋白、脂质双层、脂多糖（2）医学意义：

1、染色性：G染色紫色（G+）红色（G-）

2、抗原性：G+：磷壁酸G-：特异性多糖（O抗原/菌体抗原）

3、致病性：G+：外毒素、磷壁酸G-：内毒素（脂多糖）

4、治疗：G+：青霉素、溶菌酶有效G-：青霉素、溶菌酶无效

5、细胞壁的主要功能及相关的医学意义。

（1）保护细菌和维持菌体形态：细胞壁坚韧而富弹性，维持菌体固有形态并保护细菌抵抗低渗环境。

（2）物质交换：细胞壁上有许多小孔及特定的转运蛋白，可参与菌体内外物质交换。（3）与致病性有关：磷壁酸和LPS具有抗原性，可以诱发机体免疫应答。LPS是内毒素，可使机体发热，白细胞增加，严重时可致休克死亡。

（4）与耐药性有关：G+菌肽聚糖缺失可使作用于细胞壁的抗菌药物失效；G—菌外膜通透性的降低阻止某些抗菌药物进入和外膜主动外排抗菌药物，成为细菌重要的耐药机制。（5）与静电性有关：磷壁酸和LPS均带负电荷，能与Mg2+等双价离子结合，有助于维持菌体内离子的平衡，调节细菌生理代谢。

6、简述L型菌的特性。

（1）法国Lister研究院首先发现命名。

（2）高度多形性，不易着色，革兰阴性。

（3）高渗低琼脂血清培养基2-7天荷包蛋样、颗粒、丝状菌落。

（4）具致病性，常在应用某些抗生素（青霉素、头孢）治疗中发生，且易复发。

（5）临床症状明显但常规细菌培养（-），予以考虑L型菌感染。

7、分析溶菌酶、青霉素、链霉素、红霉素的杀菌机制。

溶菌酶：裂解 -1,4糖苷键，破坏聚糖骨架。

青霉素：竞争转肽酶，抑制四肽侧链和五肽交联桥的连接。以上两者主要是抑制G+菌。

链霉素：与细菌核糖体的30S亚基结合，干扰蛋白质合成。

红霉素：与细菌核糖体的50S亚基结合，干扰蛋白质合成。

8、为什么G-菌的L型菌比G+菌的L型菌更能抵抗低渗环境？

G+菌细胞壁缺陷形成的原生质体，由于菌体内渗透压很高，可达20—25个大气压，故在普通培养基中很容易胀裂死亡，必须保存在高渗环境中。G-菌细胞壁中肽聚糖含量较少，菌体内的渗透压(5—6个大气压)亦比G+菌低，细胞壁缺陷形成的原生质球在低渗环境中仍有一定的抵抗力

9、叙述细菌的特殊结构及其医学意义。

（1）荚膜：细菌细胞壁外包围的一层由疏水性多糖或蛋白质多聚体组成的黏液性物质结构，大多数为多糖，少数为多肽。

作用：a、抗吞噬作用——为重要毒力因子

b、黏附作用——形成生物膜

c、抗有害物质的损伤作用

（2）鞭毛：在菌体上附有细长且呈波状弯曲的丝状物。

作用：a、细菌的运动器官

b、鉴别细菌（有无鞭毛、数目、位置）

c、抗原性——H抗原，细菌分型

d、与致病性有关（粘附、运动趋向性）

（3）菌毛：许多G—菌和少数G+菌表面存在着一种直的、比鞭毛更细、更短的丝状物。

普通菌毛：粘附结构，可与宿主细胞表面受体特异性结合，与细菌的致病性密切相关。

性菌毛：a、传递遗传物质，为遗传物质的传递通道。

b、作为噬菌体的受体

（4）芽胞：某些细菌在一定的环境条件下，胞质浓缩脱水，在菌体内形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。

作用：a、鉴别细菌（有无芽胞、位置、大小、形状）

b、灭菌指标（指导灭菌，以杀灭芽胞为标准）

10、革兰氏染色法的方法、步骤、结果和意义是什么?革兰阳性菌采用4 种试剂分4 步：（菌体为紫色）

此时细菌均为深紫色

固定结晶紫碘液 95%乙醇复红

（初染）（媒染）（脱色）（复染）革兰阴性菌

（菌体为红色）革兰染色意义：

①鉴别细菌

②选择用药

③理解细菌的致病作用

11、简述细菌的生长繁殖条件。

（1）营养物质：①水②碳源③氮源④无机盐⑤生长因子（有些细菌需要）

（2）温度：37℃pH：7.2～7.6

（3）气体：①对O2要求(专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌）

②对CO2要求：5~10% CO2

（4）渗透压

12、据细菌对氧气的需要不同分为哪四类?

（1）专性需氧菌：有完善的呼吸酶系统

（2）微需氧菌：低氧压时生长最好，高时抑制

（3）兼性厌氧菌：大多数病原菌

（4）专性厌氧菌：缺乏完善的呼吸酶系统

13、IMViC试验代表哪四种实验?大肠杆菌和产气杆菌IMViC试验的结果是什么?

吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）、枸橼酸盐利用（C）四种试验常用于鉴定肠道杆菌

大肠埃希菌“++--”，产气肠杆菌“--++”

14、分析细菌的代谢产物及其医学意义。

（1）热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。

（2）毒素及侵袭性酶：

①、外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；

②、内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。

③、侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。

（3）色素：由某些细菌产生的，含不同颜色，有助于进行细菌鉴别，分为水溶性和脂溶性两类。

（4）抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。抗生素大多由放线菌和真菌产生。

（5）细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。

（6）维生素：由细菌合成，供自身需要，也可分泌到周围环境。

15、分析细菌在培养基中的生长情况。

（1）液体培养基：大多数细菌在液体培养基生长繁殖后呈现均匀浑浊状态，少数链状的细菌呈沉淀生长，专性需氧菌呈表面生长，常形成菌膜。

（2）固体培养基

生成菌落：单个细菌分裂繁殖成肉眼可见的细菌基团。菌落分为：光滑型菌落、粗糙型菌落、粘液型菌落

（3）半固体培养基：有鞭毛的细菌沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混着生长。无鞭毛细菌只能沿穿刺线呈明显的线状生长。

16、噬菌体的形态结构及化学组成是什么?其噬菌过程如何?

形态结构：在电子显微镜下有3种形态，即蝌蚪形、微球形和细杆形。

化学组成：主要由核酸和蛋白质组成。

噬菌过程：吸附穿入生物合成成熟与释放

17、简述质粒的主要特性。

⑴质粒具有自我复制的能力。

⑵质粒能编码某些特定性状。

⑶质粒可自行/人工丢失与消除。

⑷质粒可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移。

⑸质粒的相容性与不相容性。

18、列举细菌常见的质粒。 致育质粒（F 质粒） 耐药质粒（R 质粒） 毒力质粒（Vi 质粒） 细菌素质粒（Col 质粒） 代谢质粒

19、分析细菌基因转移与重组的方式（转化、接合、转导）。

（1）转化：供体菌裂解游离的DNA 片段被受体菌直接摄取，并将其整合到受体菌基因中，使受体菌获得新的性状。

供菌体 受菌体

转化因子+感受态细菌→吸附→进入→重组菌：复制为突变株、原型株 影响转化的因素：

①供、受体的基因型——亲缘关系愈近，转化率愈高。转化的DNA 片段（转化因子）分子量小于1×107，不超过10~20个基因。 ②受菌的生理状态——只有处于感受态时，才能摄取转化因子。感受态是因为其表面有一种吸附DNA 的受体。出现在细菌对数生长期后期。

③环境因素——Ca2+、Mg2+、cAMP 等维持DNA 稳定，促进转化。

（2）接合：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（质粒）从供体菌转移给受体菌。

能通过接合方式转移的质粒有：F 质粒、R 质粒、Col 质粒、Vi 质粒。 ① F 质粒的接合：F 质粒通过性菌毛从F+菌变成F-菌。

高频重组菌是指F 质粒整合到细菌的染色体中可使该菌能高效地转移染色体上的基因。 F ’ 质粒是指F 质粒从染色体上脱离并带有染色体上几个临近基因。

② R 质粒的接合：R 质粒有耐药传递因子（RTH ）和耐药（r ）决定子组成。耐药传递因子与F 质粒相似，编码菌毛的产生和通过菌毛转移。

（3）转导：以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA 转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。

分为普遍性转导和局限性转导。 ①普遍性转导：由于错误的包装将细菌染色体任何部位基因包装入噬菌体头部，并将其注入受体菌内。

有两种结局：完全转导（外源性DNA 片段与受体菌的染色体整合并随染色体而传代。）流产转导（外源性DNA 片段游离在胞质中既不能与受体菌染色体整合，也不能自行复制。） ②局限性转导：所转导的只限于供体菌染色体上特定的基因。 20、分析“影印试验”。

先将抗生素敏感细菌接种在不含抗生素的琼脂平板上，待长出单个菌落后，取一块包有无菌丝的压模，在琼脂平板表面轻轻按印使压模丝绒表面黏附细菌菌落印迹，再将此菌落印迹平行按压到含有抗生素的琼脂平板上。经培养后，平板上敏感菌被完全抑制，但仍有耐药菌株菌菌落的出现。然后在原无抗生素平板上找到耐药菌的相应菌落，将此菌落移种到含有抗生素的肉汤中培养，可见细菌生长。在整个实验中，该细菌从未接触过抗生素，但已具有对抗生素的抗性。影印试验证明突变是自发的、随机的，突变是细菌在接触抗生素之前已发生，抗生素仅起筛选突变株的作用。

21、细菌的毒力由哪些因素构成(物质基础)? 细菌的毒力表示细菌致病性的强弱程度。

构成病原菌毒力的物质基础主要包括侵袭力和毒素两个方面。

（一）侵袭力：病原菌突破宿主皮肤、黏膜生理屏障等免疫防疫机制，进入机体定居、繁殖和扩散的能力。 组成：

直接摄取 游离DNA

1.黏附素（adhesin）：

菌毛黏附素：如大肠杆菌菌毛黏附素（普通菌毛）。

非菌毛黏附素：如A群链球菌细胞壁的LTA（脂磷壁酸）。

2.荚膜与微荚膜

荚膜：如肺炎链球菌荚膜。

微荚膜：SPA、M蛋白、Vi-Ag、K-Ag。

3.侵袭性蛋白/酶

侵袭蛋白：如G-的Ⅲ型分泌系统分泌的蛋白，可直接注入感染细胞，促进细菌的传播。

侵袭性酶类：如金葡菌的血浆凝固酶→抗吞噬、抗消化。链球菌：透明质酸酶→扩散↑。

4.细菌的微菌落和生物膜

微菌落：是人肉眼看不到的细菌集落，一般为一个克隆。

生物膜：不是细菌的简单堆积，而是以微菌落为基本结构单位的有序性“社区”结构，可为不同种属的细菌共同形成（如：牙菌斑）。

二.毒素（toxin）：内、外毒素

1.外毒素（exotoxin）

神经毒素：如破伤风痉挛毒素

细胞毒素：如白喉外毒素

肠毒素：如霍乱毒素

2.内毒素（endotoxin）

22、试述外毒素与内毒素的主要区别是什么？

区别要点外毒素内毒素

来源G+与部分G—G—

编码基因质粒和前噬菌体或染色体基因染色体基因

存在部位从活菌中分泌出，少数菌崩解后释

放

细胞壁组分，菌裂解后释出

化学成分蛋白质脂多糖

稳定性60~80℃，30分钟被破坏160℃，2—4小时才被破坏

毒性作用强，对组织器官有选择性毒害效应，

引起特殊临床表现较弱，各菌的毒性效应大致相同，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、

DIC等全身反应

抗原性强，刺激机体产生抗毒素；甲醛液

处理脱毒形成类毒素弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱，甲醛液处理不形成类毒素

23、构成非特异性免疫的因素有哪些?

（一）屏障结构

1.皮肤与黏膜屏障: 机械阻挡、呼吸道纤毛运动等; 分泌杀菌物质(汗腺分泌的乳酸); 菌群拮抗作用

2.血脑屏障:软脑膜+脉络膜+脑毛细血管+星状胶质细胞

3.胎盘屏障: 母体子宫内膜的基蜕膜+胎儿绒毛膜(3个月后完善)

（二）吞噬细胞

大吞噬细胞：血液中单核细胞和组织中巨噬细胞

小吞噬细胞：血液中中性粒细胞

吞噬杀伤过程：趋化→识别与黏附→吞入→杀灭与消化

依氧杀菌机制：通过氧化酶的作用，使分子氧活化成为多种活性氧中介物和活性氮中介物，直接作用于微生物，破坏细菌的DNA、蛋白质和膜脂类；或通过髓过氧化物酶和卤化物的

协同而杀灭微生物。

非依氧杀菌系统：不需分子氧的参与，而是通过溶菌酶、酸性环境和杀菌性蛋白发挥作用。杀死的病原体进一步由蛋白酶、核酸酶、酯酶等降解、消化，最后将残渣排至吞噬细胞外。吞噬作用的后果：

完全吞噬：病原体在吞噬溶酶体内被杀灭、消化、排除残渣的过程。（5-10分钟死亡，30-60分钟破坏）

不完全吞噬：只被吞噬，却不被杀死。

对机体不利:病原体得以保护、不受抗体、药物的作用. 病原体在吞噬细胞内增殖，导致吞噬细胞死亡. 随吞噬细胞游走造成更广泛的扩散.

组织损伤: 吞噬过程中，溶酶体酶也能破坏邻近的正常组织，造成组织损伤和炎症反应。（三）体液因素

1.补体：是存在于正常体液中的一组球蛋白，具有调理、溶菌、溶细胞等防御作用。

2.溶菌酶：为一种碱性蛋白，存在于血清, 唾液, 泪液, 乳汁中，主要作用于G+菌.

3.抗微生物肽：多肽, 破坏细菌细胞膜的完整性，使菌细胞溶解死亡。

24、临床标本的采集和运送原则

1、早期采集

2、无菌采集

3、采集适当标本

4、采集双份血清

5、尽快送检