降钙素原在新生儿细菌感染诊断中的应用价值_龚瑾

罗氏诊断降钙素原(PCT)中文说明书

05056888 200 100测试 主要用途 用于体外定量检测人体血清或血浆中的PCT (procalcitonin)。 Elecsys BRAHMS PCT检测可辅助临床早期诊断相关的细菌感染。 Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 降钙素原（PCT）是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7kD。PCT由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酶切分解为（未成熟）降钙素、羧基端肽和氨基端肽。健康人血中仅含有少量的PCT1,2。细菌感染后PCT会明显升高。 动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT３。脓毒血症患者体内的PCT只含有114个氨基酸，缺少氨基末端的Ala-Pro4。PCT水平升高见于细菌性脓毒血症，尤其是重症脓毒血症和感染性休克5,6,7,8,9,10。PCT可作为脓毒血症的预后指标8,11,12,13，也是急性重症胰腺炎及其主要并发症的可靠指标14,15。 对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺 炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效判断的指标。 检测原理 双抗体夹心法，总检测时间：18分钟 ●第一次孵育：30μl样本、生物素化的单 克隆PCT抗体以及钌复合物标记a的单克隆 PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复 合物。 ●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠 微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素 和链霉素的作用结合。 ●将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁 珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通 过ProCell被去除。给电极加以一定的电 压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器 测量发光强度。 ●Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到 检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-co mplex (Ru(bpy){ 2 3 }三联吡啶钌 试剂－工作溶液 M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒， 0.72mg/ml；防腐剂。 R1生物素化的Anti-PCT抗体（灰色瓶盖），每瓶9ml：生物素化的Anti-PCT抗体（小鼠源）约 2.0μg/mL，磷酸盐缓冲液95 mmol/L，Ph7.5;防腐剂。 R2 钌复合物标记a的Anti-PCT抗体（黑色瓶盖），每瓶9ml：钌复合物标记a的Anti-PCT 抗体（小鼠源）5.6 μg/mL；磷酸盐缓冲液 95 mmol/L，pH7.5;防腐剂。 Cal1 冻干的PCT定标液1（白色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约0.10ng/mL; 防腐剂。 Cal2冻干的PCT定标液2（黑色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约54ng/mL; 防腐剂。 PC PCT1冻干的PCT质控品1（米色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约0.50ng/mL; 防腐剂。 PC PCT2冻干的PCT质控品2（褐色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约10ng/mL; 防腐剂。 定标：不同批号试剂条码中编码有相应批号的定标值。 质控：不同批号的批特异性质控靶值和范围参见试剂盒附带的数值表。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 所有人源性物质必须视为有潜在感染性。 所有产品由献血员单体提供，经特殊制备而成，经检测HB S Ag、HCV抗体、HIV抗体，均为阴性。 所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法令98/79/EC附件II列表A。 但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人样本一样仔细处理。接触者必须遵循健康专业机构相应的法规12，13。

新生儿医院感染的目标监测

新生儿医院感染的目标监测 成都市第三人民医院院感部郭华LOGO 目录页第2 页 新生儿医院感染危险因素新生儿医院感染监测 存在的主要问题解决方法及追踪 LOGO 过渡页第3 页第一章 新生儿医院感染危险因素LOGO 第4 页 新 生 儿 医 院 感 染 危 险 因 素 01 新生儿 足月儿：胎龄≥37周~<42周 按胎龄分类 早产儿：胎龄<37周 过期儿：胎龄≥42周 新生儿（neonate,newborn） 出生脐带结扎至生后28天内的婴儿。 LOGO 第5 页 新生儿医院感染危险因素01 正常体重儿≥2500g～＜4000g (3000g) 低出生体重儿 极低出生体重儿 超低出生体重儿 ＜2500g ＜1500g ＜1000g 巨大儿：体重＞4000g 按 出 生 体 重 分 类 LOGO 第6 页 新 生 儿 医 院 感 染 危 险 因 素 01 新生儿病房(尤其是NICU)的人群 脏器功能异常：脑、心、肺、肾、胃肠 各种严重感染：败血症、感休、颅内感染 生活能力低下：早产儿、低出生体重儿、 极低出生体重儿 高危新生儿（high risk infant） 指已经或可能发生危重疾病而需特殊监护 的新生儿。

LOGO 第7 页 新生儿医院感染危险因素01 免疫功能低下 侵入性操作多 抗生素使用多 必须有完善的消毒隔离管理制度 二 重 感 染 院 内 感 染 NICU内患儿的特点： LOGO 第8 页 新 生 儿 医 院 感 染 危 险 因 素 01 新生儿感染 早发性感染：指生后≤3d的感染，临床症状 多在生后48h内出现，感染源多来自母体。 迟发性感染：指生后＞3d住院患儿的感染， 临床症状多在生后72h后出现，感染源多来 自院内。 LOGO 第9 页 新生儿医院感染危险因素01 美国疾病预防和控制中心： 分娩时、患儿住院时及出院后48h获得的 感染,并排除垂直传播(如梅毒、弓形体病、风 疹病毒、巨细胞病毒、乙型肝炎病毒、单纯疱 疹病毒、HIV病毒)所致的感染,称院内感染。 美国国家儿童保健和人类发育研究所： 出生＞3d的新生儿在医院内获得并产生临床症 状的感染称院内感染。 LOGO 第10 页 新 生 儿 医 院 感 染 危 险 因 素 01 WHO估计每年约有500万新生儿死亡，其中98％ 发生在发展中国家。 由感染引起的死亡每年约有160万,或占新生儿死 亡的40%。 我国最近两次大的新生儿医院感染事故 2008年9月:西安交通大学第一附属医院新生儿病房 的院内感染，死亡8人。 2009年3月:天津市蓟县妇幼保健院新生儿病房的院 内感染，死亡5人。 LOGO 第11 页 新生儿医院感染危险因素01 感染途径 产前 血行播散 羊膜穿刺 取绒毛 宫内输血 产时 产道 胎膜早破 产程延长 助产 产后 环境污染 自身的感染 3天内起病 G-杆菌 3天后起病 G+球菌 LOGO 第12 页 发展中国家：6.5～38‰ Africa：20‰ SouthAsia：15‰ 极低出生体重儿:68% 发达国家：1-5‰ 极低出生体重儿:15～20% 发生率

儿童口服抗生素的选择

儿童口服抗生素的选择 一、关于门诊患儿所感染的病原微生物 儿科门诊的患儿，以呼吸道和消化道感染来就诊的为最多，分占就诊率的第一第二位， 1、急性呼吸道感染：急性呼吸道感染通常分为急性上呼吸道感染和急性下呼吸道感染。急性上呼吸道感染是指喉部以上，上部呼吸道的鼻和咽部的急性感染。亦常用“急性鼻咽炎”、“急性咽炎”、“急性扁桃体炎”等名词诊断，统称为上呼吸道感染，简称“上感(AURI)”。上呼吸道感染的病原微生物，90%以上均为病毒感染，而支原体和细菌较为少见。于是许多所谓的“科普报纸、杂志”之类的文章就大肆抨击，说既然大部分为病毒感染，为何还要用抗生素？典型的外行话。病毒感染可以破坏呼吸道黏膜，使其失去抵抗力，细菌可乘虚而入，从而并发混合感染，所以凡是发热超过三天以上，经过常规口服抗病毒药物全身感染中毒症状不缓解的，肯定是需要使用抗生素的。 那么主要容易并发那些细菌感染呢？我们通过咽拭子做病原卫生 物培养，发现主要是以下几种细菌较为多见：β溶血性链球菌A组、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌及葡萄球菌，其中学龄儿童链球菌多见，而婴儿以流感嗜血杆菌较为常见。 而急性下呼吸道感染，包括支气管炎和肺炎，我们经过痰培养的统计，主要为肺炎链球菌、β溶血性链球菌A组、葡萄球菌及流感嗜血

杆菌。近年由于抗生素使用泛滥，许多院内感染的病原菌如肺炎克雷伯、阴沟肠杆菌、鲍蔓不动杆菌等细菌感染亦不少见。 2、消化道感染：包括急性胃炎、胃肠炎、肠炎。我们常见的病原微生物有大肠杆菌、沙门属菌、志贺菌属等，大部分为革兰氏阴性杆菌感染，金葡菌感染性胃肠炎在以前生活水平低下的年代多见，近年少见。 二、药物选用 综上所述，在呼吸道感染的疾病里，除了流感嗜血杆菌、院内获得的肺炎克雷伯、阴沟肠杆菌等位革兰氏阴性杆菌外，大部分社区获得的呼吸道感染性疾病都是革兰氏阳性菌如链球菌属和葡萄球菌属感染所 引起的。所以我们在口服抗生素的初选方面，就可以适当的考虑侧重于这方面抗菌谱的药物。 推荐：1、呼吸道感染，广谱青霉素类制剂，推荐阿莫西林克拉维酸钾。这组药物目前逐渐成为小儿抗生素口服的主流首选。上海的陆权教授，小儿抗生素专家，在他们门诊初选抗生素，做了青霉素皮试后，如果是阴性，只用这个药物。原因有二：1、鉴于链球菌为主要的病原微生物，目前为止，还是青霉素类对链球菌有特效，效果优于头孢菌素。甚至对中等耐青霉素的链球菌，只要加大药量，缩短给药时间，仍然是有显著疗效的。2、单药阿莫西林在如此众多耐药菌的围攻下，已经独木难支，所以加入了棒酸——β内酰胺酶抑制剂，这就让阿莫西林这个老药焕发出新的活力，抗感染能力提高到可以对抗中等感染甚至以上

细菌感染与抗菌药物对小儿常见病的临床应用

细菌感染与抗菌药物对小儿常见病的临 床应用 （作者： _________ 单位：___________ 邮编：___________ ） 细菌感染性疾病严重威胁我国儿童的健康，据统计感染性疾病占5岁以下儿童的80%，其中细菌感染性疾病占很大比例，目前居我国5岁以下儿童死亡前三位的死因是肺炎（30% ）、新生儿疾病（30%）和腹泻（10%），其中不少死于细菌感染。细菌感染作为唯一病原的小儿化脑、肺炎和败血症在我国仍很常见，结核病也并不少见，百日咳、破伤风也未消灭，我国仍属细菌感染性疾病发病率较高的国家。今天抗菌药物的研究也日新月异，为细菌感染性疾病的治疗提供了有力武器，同时也出现了一些新问题。笔者就抗菌药物的应用和小儿常见细菌感染性疾病的用药情况提出一些看法，以供参考。 1小儿特殊的生理特点 小儿时期新陈代谢旺盛，循环时间较短，一般对药物的排泄较快。但肝和肾的功能、中枢神经系统及某些酶系统尚未成熟，用药不当常可致不良反应或中毒。此外，小儿时期免疫防护功能低下，中性粒细

胞趋化性活动和吞噬能力不足，某些代谢和排泄功能不全等。所以小儿用药应特别慎重。 2抗菌药物的滥用 细菌感染性疾病的对因治疗是抗菌药物的应用。抗菌药物的选用取决于临床判断、抗菌药的活性和药代动力学知识，同时也取决于实验室试验的结果，抗菌药物的敏感性试验，细菌？一内酰胺酶，血清特异性抗菌药物浓度、血清抑制和杀菌活性的测定等，其最重要的基础是对感染微生物的分离和鉴定，以帮助医师合理使用抗菌药物。据统计现在临床上滥用最严重的一类药物就是抗菌药，造成滥用的原因是多方面的，其主要原因是抗菌药的选用自始至终是经验性的。对于小儿细菌感染性疾病的诊治中不能回答（1）是否是细菌感染；（2）是什么细菌感染；（3）这种细菌抗菌药物的敏感程度如何，造成用药 的盲目性。其次，对几种药物联合应用的效果寄于过高的期望，而对其潜在的危险性认识不足，只看到对细菌性感染的特效，而忽视了抗菌药物的针对性和毒副作用，乱用抗菌药物可以掩盖患者的某些的感染症状和体征，引起误诊和漏诊，或因用药不当而产生耐药菌珠，导致感染不能彻底控制的严重后果。 3针对病症合理使用抗菌药 抗菌药物的品种繁多，临床表现错综复杂，加之临床医师用药习惯不同，很难机械地对规定何种疾病或何种细菌一定要用何种抗菌药物。但从使用的合理而论是有原则可循的。使用抗菌药物时，应考虑患儿感

荧光量子点法降钙素原(PCT)试剂盒的研制

《专业课程设计》 荧光量子点法降钙素原（PCT）试剂盒的研制 学院 专业 指导老师 班级 姓名 学号

摘要 本产品运用免疫层析法的夹心免疫技术将量子点与PCT单克隆抗体结合，建立一种新型的免疫分析法进行特异性定性检测人血清或血浆中的PCT，使灵敏度显著提高，达到或超过某些酶联免疫吸附法(ELISA)的水平。由于待检测PCT与PCT抗体的反应，使得水溶性量子点的荧光强度产生变化，通过测定水溶性量子点荧光强度变化的量来实现对待检测PCT浓度的高选择性定量检测。本发明中的降钙素原(PCT)检测试剂盒具有制备低廉、稳定性好、易于保存，利用荧光量子点标记方法检测灵敏度高、特异性强的优点，比较容易的在临床进行推广。 1.研究背景 目前临床和科研实验室中均用免疫学方法检测PCT浓度，包括胶体金法、ELISA法和免疫化学发光法等。所有这些方法的前提都是制备PCT特异性抗体，且健康人血浆中含量极低，在200pg/mL以下，对抗体的亲和力等参数要求很高。迄今为止这些检测体系所用的抗体均来自国外大公司，价格昂贵。因此，制备PCT特异性单克隆抗体，为PCT的免疫检测提供具有自主知识产权的关键原料，对于扩大其临床应用，降低医疗成本，具有重要意义。 目前应用化学发光免疫分析技术建立人血清中降钙素原定量检测方法，采用固相包被降钙素原单克隆抗体，生物素标记另一降钙素原单克隆抗体，建立人血清中降钙素原的双抗体夹心化学发光免疫定量检测方法。在此基础上，荧光免疫分析技术是利用荧光物质标记抗体或者抗原分子，通过与待分析物的特异性结合后，检测荧光信号的强度变化，实现对目标分析物的定性和定量检测。制备荧光信号强、免疫活性好的量子点-抗体（QD-Ab）复合物是将量子点应用于荧光免疫检测的关键。QD-Ab的荧光信号放大效率主要是由量子点—抗体偶联比例以及量子点本身的荧光量子效率决定，而其免疫活性则由QD表面偶联的抗体分子的量效决定，除了抗体自身亲和力对复合物的免疫活性产生影响外，抗体与量子点间的偶联位点和抗体分子在量子点表面的空间构象也对QD—Ab复合物的免疫活性有重要影响。 简介及临床意义 PCT（降钙素原，procalcitonin）是一种无激素活性的降钙素前肽物质，来自于定位11号染色体上的单拷贝基因，该基因由2800个碱基对组成，含6个外显子和5个内含子，相对分子质量约为13×103。在正常代谢下，甲状腺C细胞产生PCT并分泌激素活性的降钙素。正常人血中PCT浓度极低，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。在自身

最新新生儿医院感染监测

高危新生儿医院感染监测方案 1监测目的 监测高危新生儿医院感染发病率； 建立高危新生儿医院感染数据比较体系； 发现医院感染流行和暴发； 评价控制效果。 2监测对象 监测单位可以是新生儿室、新生儿病房或新生儿ICU，监测对象为住进新生儿室、病房或ICU的所有新生儿；入新生儿室（ICU）超过48小时发生的感染或转出到其他病房后48小时内确定的感染均属高危新生儿感染。优先选择新生儿ICU和新生儿病房进行监测。 3监测指标 将新生儿按出生体重分为四组：＞2 500克、1 501-2 500克、1 001-1 500克、≤1 000克。监测总体医院感染率，不同出生体重新生儿医院感染率，以及不同出生体重新生儿脐/中心静脉插管、呼吸机的使用率及其相关感染率。 4器械相关性感染定义 呼吸机相关性肺炎感染前48小时内使用过呼吸机，有全身及呼吸道感染的症状和体征并有胸部X线及实验室检查依据，或临床医生诊断的肺部感染。 脐/中心静脉导管相关血流感染感染前48小时内使用过脐/中心静脉导管，留置血管内导管新生儿发生细菌血症(真菌血症)和至少有1次外周静脉血培养阳性，具备感染的临床表现[如发热、寒战和（或）低血压等]，且除血管内导管外，无其他明确的血液感染源。 5监测方法 前期准备工作监测开始前对微生物室及新生儿室、病房或新生儿ICU的主任说明该项目的意义和方法，取得支持和配合。 医务人员的教育和培训 对参与高危新生儿医院感染监测科室的医护人员进行培训，掌握器械相关感染的诊断标准；严格掌握使用导管的适应证和置管部位、执行

正确的置管方法和置管后的护理。 使用海报、宣传手册和卡片等手段广泛宣传教育，以利于监测工作顺利进行，收集数据的准确。 5. 确保新生儿室（ICU）护理质量，以减少器械相关感染的发生率。各级人员职责与任务 为了能保证高危新生儿医院感染调查工作顺利进行，资料准确、详尽，需要各级人员积极配合，各级人员职责与任务如下。 医师①严格掌握使用导管的适应证、置管部位、正确的置管的方法。 ②当发生或怀疑器械相关感染时，应送标本做细菌微生物培养。脐/中心静脉置管患者不需常规进行导管尖端的培养，在考虑中心静脉导管相关血流感染时，应首先判断导管是否仍有保留的必要性，根据保留与否，分别采用不同的送检方法。③正确填写检验报告申请单。④根据微生物学药敏结果选择抗菌治疗。 护士①每日晨8时（或午夜12时），登记新生儿室（ICU）新生儿日志表。②观察新生儿生命体征及插管部位变化。如留置脐/中心静脉导管新生儿出现插管局部疼痛，不明原因的发热，或其他提示发生局部或血流感染的迹象时，应检查插管部位。③记录导管置入和拔除的时间以及操作者。④加强导管和置管部位护理。如对于中心静脉导管（短导管）每2天更换一次纱布敷料，每7天更换一次透明敷料；当敷料变潮、松动、污染或需要观察插管部位时，更换敷料。⑤当发生感染或怀疑感染时，按要求正确采集标本并及时送检。标本应在采集后1小时内送往实验室（厌氧培养要在10分钟内送检）。⑥通知医院感染监控专职人员。 微生物室工作人员①接收标本时应初步确认送检标本是否合格。②在检测标本时应确认标本合格后才进行相应检测。③严格遵守检验操作规程，如静脉导管的定量和半定量培养，血培养（在必要时）应进行定量细菌培养，在进行静脉导管血和周围静脉血培养时应记录报阳时间。细菌培养阳性后，立即进行革兰染色，电话报告所见及初步意见；传代培养后进行初步药敏试验并报告；在进行菌种鉴定及标准药敏试验后书面报告。血培养若培养阴性时，第三天报告1次，之后3天若有阳性可以补发报告。④用计算机打印结果报告单时，标本名称

常见儿童抗生素对比

常见儿童抗生素头孢克洛&阿莫西林&阿奇霉素 一）分类 抗生素从化学结构上分为β—内酰胺类（头孢克洛），氨基糖苷类，大环内酯类（阿奇霉素），四环素类，氯霉素类，利福霉素类以及其它类。 头孢克洛属于第二代头孢菌素： 第二代头孢菌素药物有头孢呋辛（cefuroxime）、头孢孟多（cefamandole）、头孢克洛（cefaclor）、头孢丙烯（cefprozil）等；前二者为注射制剂，后两者为口服制剂。比第一代头孢菌素肾脏毒性降低，也就是说有肾毒性。 主要用于敏感阳性和阴性菌，尤其是产酶耐药的阴性菌所致的呼吸道感染、胆道感染、骨关节感染及皮肤软组织感染、泌尿道感染、妇产科感染及耐青霉素淋球菌感染等。 著名的针剂：头孢曲松（ceftriaxone）是第三代头孢菌素。第三代头孢菌素还有：头孢噻肟（cefotaxime）、头孢他定（ceftazidime）、头孢哌酮（cefoperazone）等。第三代基本没有肾毒性的了。阿奇霉素属于第二代大环内酯类(一般称为红霉素类) 阿奇霉素属于第二代大环内酯类药物，同类有：阿奇霉素（azithromycin）、克拉霉素（clarithromycin）、罗红霉素（roxithromycin）、罗他霉素（rokitamycin）。第一代大环内酯类常见药物有：红霉素（Erythromycin）乙酰螺旋霉素（acetylspiramycin）、麦迪霉素（midecamycin）主要用于呼吸道、泌尿道和软组织感染；不良反应较少。 阿莫西林属于半合成广谱青霉素类药。 二）适应症 1、头孢克洛: [适应症] 本品适用于治疗敏感菌所致的呼吸系统、泌尿系统、耳鼻喉科及皮肤软组织感染等。 中耳炎：由肺炎双球菌、流感嗜血杆菌、葡萄球菌、化脓性链球菌（A组β溶血性链球菌）和卡他莫拉氏菌引起。 下呼吸道感染（包括肺炎）：由肺炎双球菌、流感嗜血杆菌、化脓性链球菌（A组β溶血性

细菌感染的原因与诊断标准

细菌感染的原因与诊断标准 人体全身各个器官，各系统都可发生细菌感染，引起多种疾病，常见的有细菌性感冒。那么，为什么会出现细菌感染呢？细菌感染有什么症状？一起来看看下面的回答吧。 一、出现细菌感染的原因： 细菌感染是致病菌或条件致病菌侵入血循环中生长繁殖，产生毒素和其他代谢产物所引起的急性全身性感染，细菌则容易侵入体内；人体的免疫反应可分为非特异性免疫反应及特异性免疫反应两种，后者又可分为细胞免疫与体液免疫两方面。 当机体免疫功能下降时，不能充分发挥其吞噬杀灭细菌的作用，即使入侵的细菌量较少，致病力不强也能引起感染；条件致病菌所引起的医源性感染也逐渐增多。细菌因素主要与病原菌的毒力和数量有关。毒力强或数量多的致病菌进入机体，引起败血症的可能性较大。细菌侵入人体后是否引起感染，与人的防御、免疫功能，细菌的毒力及数量有关。完整的皮肤和粘膜是防止细菌侵入人体的天然屏障。 细菌感染的原因与诊断标准 二、细菌感染如何诊断？ 临床上以寒战、高热、皮疹、关节痛及肝脾肿大为特征，部分可有感染性休克和迁徙性病灶。病原微生物自伤口或体内感染病灶侵入血液引起的急性全身性感染。临床上部分患者还可出现烦躁、四肢厥冷及紫绀、脉细速、呼吸增快、血压下降等。 病毒感染：能在人体寄生繁殖，并能致病的病毒引起的传染病。主要表现有发热、头痛、全身不适等全身中毒症状及病毒寄主和侵袭组织器官导致炎症损伤而引起的局部症状。 真菌感染：真菌感染引起的疾病称为真菌病，发病率最高的念珠菌病和皮肤癣菌病由人体正常菌群的真菌引起，感染可区分为：表面感染，皮肤感染，皮下组织感染，深部感染和条件性感染。 三、细菌感染的治疗和预防： 细菌感染最好预防，而且最容易治疗，一般都有特效药，只要治疗及时一般都能治愈。预防只要注意清洁卫生即可防止感染。经常保持皮肤和粘膜的清洁和完整，避免创伤，切忌挤压，应积极治疗、控制慢性病，合理使用免疫抑制剂和抗生素类药物，烧伤病房应严格消毒等措施，均可预防发生。 一切明显的或隐匿的化脓性病灶如能及早予以清除，感染的发生就可以减少。小儿时常见的等每易继发较重的呼吸道感染，从而发生细菌感染。对这类病儿，必须加强保护。对不论多么细小的皮肤创伤必须予以重视，早作适当处理。 四、细菌性感冒和病毒性感冒有什么区别？

关于哪些抗生素儿童不能用

儿童由于其特殊的解剖、生理、免疫等自身特点,容易遭受病原感染。年龄越小越易受到感染。一旦确定细菌性感染,抗生素使用是主要的治疗手段。因此,确定是否存在细菌性感染是合理使用抗生素的前提。 抗生素的三大副作用 一是过敏反应。任何抗生素均有可能引起程度不同的过敏反应,皮疹、荨麻疹在临床上较为常见,较为少见的如血管神经性水肿、哮喘、药物热等,严重者可出现过敏性休克,甚至死亡。首次用药一般不会引起过敏反应,再次或多次使用相同或同类药物,有可能发生过敏反应。 二是毒性反应。主要影响肝、肾功能。毒性反应也具有明显的个体差异性,易感个体容易产生药物毒性作用。 三是局部刺激反应。主要表现为静脉或肌肉注射处疼痛或静脉炎。 使用抗生素的五个原则 由于儿童细菌性感染难以有一个明确的指标,所以临床初次抗生素治疗要真正做到正确、准确、合理极为困难,绝大部分依靠经验性治疗。因此,儿童抗生素使用需要遵守以下主要原则: 1.怀疑细菌感染,可先用抗生素进行经验治疗。2.诊断为病毒感染和不明原因发热,不宜早期应用抗生素。3.应根据不同细菌种类和药敏试验选择抗生素。4.抗生素使用应考虑抗菌作用、抗菌谱、药代动力学、细菌耐药性、药物不良反应等。5.应根据个体生理特点、病理变化调整抗生素,必要时进行血药浓度监测。 儿童抗生素使用既要临床医师依靠自己的临床经验及临床检验合理选择,调整使用抗生素,同时,还必须把抗生素使用依据、目的、可能产生的不良反应与患儿家长充分沟通,达成共识。唯有这样,才能在儿童抗生素合理使用与尽可能避免副作用之间找到平衡点。 各种抗生素的副作用 青霉素类及半合成青霉素类抗生素青霉素类药物组织毒性极微,除口服有轻微的胃肠道症状外,一般无毒性反应。但青霉素类可有比较严重的过敏性休克反应。因此,每次使用均需要做皮试;如有青霉素类过敏史,则应使用其他药物治疗。 头孢类抗生素头孢类抗生素药物总体毒性较低,对某些敏感儿童有肾毒作用,对肝功能有轻微影响,但停药后即可恢复。头孢拉定等第一代头孢药,用后可出现血尿;口服可出现腹痛、腹泻、皮疹等不良反应。 大环内酯类抗生素口服用药恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状较为常见,静脉用药可引起静脉疼痛和静脉炎。红霉素长期服用可引起肝脏损害,临床已逐渐少用。阿奇霉素作为治疗非典型病原感染的首选药物,胃肠道反应虽已减轻,但仍然存在。 氨基糖甙类抗生素其不良反应主要包括神经毒性和肾毒性,对于易感儿童可导致听力下降,甚至耳聋,或出现蛋白尿、血尿、管型尿等。6岁以下儿童一般禁用。 磺胺类抗生素易感儿童可有肾脏损害,出现血尿、结晶尿及肾功能衰竭;多样型皮肤损害;白细胞减少和抑制骨髓造血功能;恶心、呕吐等。目前,磺胺类抗生素在儿科已很少使用。 林可霉素和克林霉素林可霉素和克林霉素的临床副作用较小。万古霉素主要用于耐药的金葡菌感染,但有肾毒性、耳毒性,肾功能不全及年幼儿慎用。 喹诺酮类抗生素成人临床较常用,但动物实验可引起动物软骨损害,故美国fda及我国许多药物手册建议12岁以下儿童不使用。

病毒性感染和细菌性感染的区别

细菌性与病毒性呼吸道感染的区别 细菌性与病毒性呼吸道感染的临床症状比较相似。下面四个方面是细菌性与病毒性呼吸道感染的区别。 1、流行性病毒性呼吸道感染具有明显的群体发病的特点，短期内有多数人发病，或一家人中有数人发病；而细菌性呼吸道感染则以散发性多见，患者身旁少有或没有同时上感发热病人。 2、病毒性上呼吸道感染一般鼻腔流涕症状比咽部症状明显；而细菌性上呼吸道感染则扁桃体或咽部红肿及疼痛比较明显。若伴有腹泻或眼结膜充血，则倾向是病毒感染。 3、单纯病毒性呼吸道感染多无脓性分泌物，而脓痰是细菌性感染的重要证据。 4、病毒性感染起病急骤，全身中毒症状可轻可重；而细菌感染，起病可急可缓，全身中毒症状相对较重。如果开始发热不高，2-3天后，病情继而加重，则多为细菌性感染。 小儿病毒性感染与细菌性感染的区别 如何根据原始初级资料判断上感病原 1、从发病率上讲，85--90%为病毒，细菌大概不足10%，另外，支原体等亦可引起。 2、细菌：中毒征重，热退后精神依然不好；病毒：中毒征轻，热退后精神如常。 3、细菌：多为驰张热型（体温忽上忽下）；病毒：多为稽留热型（体温居高不下）。 4、扁桃体上有脓点------细菌；扁桃体上有疱疹、滤泡-----病毒。 5、扁桃体充血，表面不平、乌暗------细菌；扁桃体充血，表面光滑、色鲜-----病毒。 6、有卡他症状（留清涕）----病毒；有脓涕、脓性分泌物----细菌。 7、病毒感染常伴皮疹。 8、小年龄组（婴幼儿）-----细菌多；大年龄组------病毒多。 9、上感>3--5天，多合并细菌感染。 10、清涕、稀薄痰----多见病毒感染，但也有人认为其中少数为杆菌感染。 11、咳嗽痰多----多为细菌；咳嗽痰少-----多为病毒。 12、祖国医学认为：清痰（涕）为寒，黄（脓）痰（涕）为热，现代医学从另一侧面认为：前者为病毒感染，但也有例外，小部为杆菌，后者为细菌感染。

降钙素原(PCT)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求深圳华迈兴微

降钙素原（PCT）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 2.性能指标 2.1外观 试剂盒上标签标识内容应清晰，无磨损；试剂盒无破损，试剂盒内各组份齐全、完整，液体无渗漏。 试剂盒各组分外观和性状为：Rm 应为含棕色固体微粒的液体，无板结、无絮状物；Rb、Rd、清洗液和发光液均应为清澈透明的液体，无沉淀、无絮状物。 校准品和质控品冻干组分呈疏松体，加入纯化水后应在10min 内完全溶解，溶液无沉淀或絮状物 2.2装量 试剂盒内各组分装量不少于标示量。 2.3线性 本试剂盒的测定范围为0.02ng/mL~100ng/mL 的范围内，相关系数r≥0.9900。 2.4检出限 本试剂盒的检出限：≤0.02ng/mL。 2.5准确度 用具有溯源性的正确度控制品作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应 在±15%范围内。 2.6重复性 测试（0.5±0.1）ng/mL 和（10±1）ng/mL 两个区间样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于10%。 2.7批间差 测试（0.5±0.1）ng/mL 和（10±1）ng/mL 两个区间样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于15%。 2.8校准品均一性 校准品A 和B 瓶间变异系数（CV）应不大于10%，校准品C 瓶间变异系数

（CV）应不大于20%。 2.9校准品准确度

校准品A 和B 测量结果的相对偏差应在±10%范围内，校准品C 浓度应不大于0.02ng/mL。 2.10质控品均一性 质控品瓶间变异系数（CV）应不大于10%。 2.11质控品测定值 以质控品作为样本进行检测，其检测结果应在试剂盒规定的范围内。

新生儿医院感染管理制度

新生儿室医院感染管理制度 一、人员管理制度 1.医务人员须穿清洁的工作服，有明显污染时应及时更换； 2.医务人员应严格遵守《医务人员手卫生规范》； 3.诊疗操作时，应严格执行无菌技术操作规程； 4.感染性疾病或不明原因疾病的患儿应单间隔离，无条件时同类疾病可同室隔离，护理人员固 定、诊疗用品专用，医务人员接触患儿前应加穿隔离衣，脱掉隔离衣以后方可接触其它患儿； 5.医务人员患有腹泻、呼吸道感染、皮肤有疖肿或破溃时，治愈前不得接触患儿。 6.母亲患有急性感染性疾病时不得接触或母乳喂养新生儿； 7.限制不必要的探视，确需探视时，探视者不得有急性感染性疾病，接触新生儿之前医务人员 应指导探视者做好手卫生； 8.科室监控小组成员应密切关注新生儿的疾病状况，一旦发现特殊感染情况应立即报告医院感 染管理科。 二、环境和物品管理制度 ㈠空气：保持空气清新与流通，每天上、下午开窗通风各1次，每次30分 钟。通风不良时可安装空气净化消毒器。室内温度保持在22℃～24℃，湿度保持在55%～65%。 ㈡墙面和门窗：应保持清洁、干燥，无污迹、霉斑；有明显污染时使用清洁剂或消毒剂擦拭。 ㈢地面：包括治疗室、储藏室、病房、走廊、卫生间、污物间等，每天 1 次使用清水或清洁剂湿式擦拭，污染时随时擦拭。 ㈣医疗器械：包括呼吸机、监护仪、输液泵、微量注射泵、听诊器、血压 计等，尤其是频繁接触的物体表面，如仪器按钮、操作面板，每天1次使用75％酒精擦拭消毒； ㈤诊疗物品:包括治疗台、治疗车、药品柜、病历夹、床栏杆、床头柜、电话、门把手等，每天1次 使用500mg/L含氯消毒剂擦拭消毒。雾化吸入器、呼吸面罩、氧气管、体温表应当一人一用一消毒。 ㈥床单元：患儿因出院、转科(院)、死亡等离开以后，应及时对床单元使 1

人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒说明书

人降钙素原(PCT)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断! 预期应用 ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中PCT含量。 实验原理 用纯化的PCT抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的PCT抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PCT呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1、酶标板：一块（96孔） 2、标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖 好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2,000 pg/ml，将其稀释为1,000 pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成1,000 pg/ml，500 pg/ml，250 pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml， 15.6 pg/ml，样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制500 pg/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）1,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、样品稀释液：1×20ml。 4、检测稀释液A：1×10ml。 5、检测稀释液B：1×10ml。 6、检测溶液A：1×120/瓶（1:100）。临用前以检测稀释液A 1:100稀释（如：10 检 测溶液A / 990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。 7、检测溶液B：1×120/瓶（1:100）。临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检 测溶液A。 8、底物溶液：1×10ml/瓶。 9、浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10、终止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。 11、覆膜：5张 12、使用说明书：1份 自备物品

常见儿童抗生素对比

常见儿童抗生素头孢克洛& 阿莫西林& 阿奇霉素 一)分类 抗生素从化学结构上分为B—内酰胺类(头孢克洛)，氨基糖苷类，大环内酯类(阿 奇霉素)，四环素类，氯霉素类，利福霉素类以及其它类。 头孢克洛属于第二代头孢菌素： 第二代头孢菌素药物有头孢呋辛( cefuroxime )、头孢孟多( cefamandole )、头孢克洛( cefaclor )、头孢丙烯( cefprozil )等；前二者为注射制剂，后两者为口服制剂。比第一代头孢菌素肾脏毒性降低，也就是说有肾毒性。主要用于敏感阳性和阴性菌，尤其是产酶耐药的阴性菌所致的呼吸道感染、胆道感染、骨关节感染及皮肤软组织感染、泌尿道感染、妇产科感染及耐青霉素淋球菌感染等。 着名的针剂：头孢曲松( ceftriaxone )是第三代头孢菌素。第三代头孢菌素还有：头孢噻肟( cefotaxime )、头孢他定( ceftazidime )、头孢哌酮( cefoperazone ) 等。第三代基本没有肾毒性的了。阿奇霉素属于第二代大环内酯类( 一般称为红霉素类) 阿奇霉素属于第二代大环内酯类药物，同类有：阿奇霉素( azithromycin )、克拉 霉素 (clarithromycin )、罗红霉素 (roxithromycin )、罗他霉素 (rokitamycin )。 第一代大环内酯类常见药物有：红霉素(Erythromyc in ) 乙酰螺旋霉素 ( acetylspiramycin )、麦迪霉素( midecamycin )主要用于呼吸道、泌尿道和软组织感染；不良反应较少。 阿莫西林属于半合成广谱青霉素类药。 二)适应症 1、头孢克洛: [ 适应症]

新生儿科医院感染预防与控制措施

新生儿科医院感染预防与控制措施 1、加强新生儿病室医院感染管理，建立《新生儿探视制度》、《新生儿病房医院感染管理制度》，并按照医院感染控制原则设臵工作流程，降低医院感染危险。 2、新生儿病室应当通过有效的环境卫生学监测和医疗设备消毒灭菌等措施，减少发生感染的危险。 3、新生儿病室要保持空气清新与流通，每日通风不少于2次，每次15-30分钟。新生儿病室工作人员进入工作区要换（室内）工作服、工作鞋。 4、新生儿科按照规定建立新生儿病室医院感染监控和报告制度，开展必要的环境卫生学监测和新生儿医院感染目标监测。针对监测结果，应当进行分析并进行整改。存在严重医院感染隐患时，应当立即停止接受新患儿，并将在院患儿转出。 5、新生儿使用器械、器具及物品 应当遵循以下原则。 5.1手术使用的医疗器械、器具必须达到灭菌标准。 5.2一次性使用的医疗器械、器具应当符合国家有关规定,不得重复使用。 5.3呼吸机湿化瓶、氧气湿化瓶、吸痰瓶应当每日更换清洗消毒,呼吸机管路消毒按照有关规定执行。 5.4蓝光箱和暖箱应当每日清洁并更换湿化瓶,一人一用一消毒。同一患儿长期连续使用暖箱和蓝光箱时,应当每周消毒一次,用后终末消毒。

5.5接触患儿皮肤、粘膜的器械、器具及物品应当一人一用一消毒。如雾化吸入器、面罩、氧气管、体温表、吸痰管、浴巾、浴垫等。 5.6患儿使用后的奶嘴用清水清洗干净,高温或微波消毒,奶瓶由配奶室统一回收清洗、高温或高压消毒,盛放奶瓶的容器每日必须清洁消毒,保存奶制品的冰箱要定期清洁与消毒。 5.7新生儿使用的被服、衣物等应当保持清洁,每日至少更换一次,污染后及时更换。患儿出院后床单要进行终末消毒。 6、新生儿病室应当根据相关规定建立消毒清洁制度,并按照制度对地面和物体表面进行清洁或消毒。 7、新生儿医务人员在诊疗过程中应当实施标准预防,并严格执行手卫生规范和无菌操作技术。 8、发现特殊或不明原因感染患儿,要按照传染病管理有关规定实施单间隔离、专人护理,并采取相应消毒措施。所用物品优先选择一次性物品,非一次性物品必须专人专用专消毒,不得交叉使用。 9、医务人员在接触患儿前后均应当实施手卫生。诊疗和护理操作应当以先早产儿后足月儿、先非感染性患儿后感染性患儿的原则进行。接触血液、体液、分泌物、排泄物等操作时应当戴手套,操作结束后应当立即脱掉手套并洗手。 10、新生儿病室的医疗废物管理应当按照《医疗废物管理条例》及有关规定进行分类、处理。 院感科2011年4月28日

-儿童药中有哪些常见的抗生素类药物

儿童药中有哪些常见的抗生素类药物 感谢阅读悟空问答，我是儿科药师梅贰康，我重点从儿童人群用药的这个角度，来回答这个问题。儿童常用的抗生素1、其实，关于儿童常用的抗生素，而且也要适合儿童的抗生素，种类也就那么几种，比如青霉素类、头孢菌素类和大环内脂内，这三种是门诊就诊时最常用的口服类抗生素，当然，还有一些其他类型的抗生素，主要考虑到是住院患儿使用的，是相对高级别的或危重患儿使用的或者是注射剂，因为比较复杂，这里将不再赘述。2、我就来重点说说常用的口服抗生素吧，这些药物对于儿童来说，也是安全性和有效性比较靠谱的药物。第一、青霉素类的抗生素，这类抗生素是最经典的了，最具代表性的就是阿莫西林了，比如水果味或甜味的阿莫西林颗粒、阿莫西林克拉维酸钾干混淆剂。第二，头孢菌素类的抗生素，适合儿童口感和剂型的，代表性药物是草莓味的头孢克洛干混悬剂。另外，还会用到头孢丙烯分散片、头孢克肟分散片和头孢地尼分散片或者是它们的颗粒剂。第三、大环内酯类抗生素，儿童使用代表性的药物有阿奇霉素干混悬剂，另外还有红霉素的颗粒剂。3、还要再补充一点，头孢类抗生素中，第一代头抱菌素如头抱氨茉、头抱拉定等儿童应谨慎大剂量使用。此类药物对肾脏有一定的毒性，可引起血尿、肾组织坏死，与强利尿剂合用时

毒性增加。这个常识我们要知道，所以在上述抗生素列举中就没有提到这两个。合理的使用抗生素1、有使用抗生素的指征，需综合病情、病原菌种类及抗菌药物特点制定给药途径，轻症感染选择口服给药，重症、全身性感染可以先静脉给药，根据临床情况酌情改为口服给药。2、按照药物的抗菌作用特点及其体内代谢过程特点选择用药。根据病原菌种类、药敏结果选用适合的药物品种，按各种抗菌药物治疗剂量范围决定给药剂量，根据药代动力学和药效学相结合的原则决定给药次数。3、使用抗生素必须保证足够的剂量，在体内必须要达到有效浓度，且要维持一定的时间，才能有效控制感染，不会造成细菌产生耐药性，切不可随意停用或减少用药次数。一般感染用药72小时(重症48小时)后重新评估，决定是否需要更换抗生素。4、抗菌药物疗程因感染不同而异，一般用至体温正常、症状消退后72~96小时，但败血症、感染性心内膜炎、化脓性脑膜炎、伤寒、深部真菌病、结核病等需较长的疗程方能彻底治愈，并防止复发。若一旦见效就马上停药，易造成致病菌死灰复燃，病情迁延不愈治疗起来更加困难。参考文献：1、李金英，浅谈儿童抗生素的应用，中国现代药物应用杂志，2012年第13期。2、张忠浩，略论儿童抗生素的合理使用，中国临床医生杂志，2017 年第4期。

犬降钙素原(PCT)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书

犬降钙素原(PCT)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定犬血清，血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬降钙素原(PCT)水平。用纯化的犬降钙素原(PCT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入降钙素原(PCT)，再与HRP 标记的降钙素原(PCT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的降钙素原(PCT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中犬降钙素原(PCT)浓度。 试剂盒组成： 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/

分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤： 1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标 准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为600 ng/L，400ng/L ，200 ng/L，100ng/L，50 ng/L）。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15分钟. 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。