N_cadherin在非小细胞肺癌组织中的表达及临床生物学意义

?研究原著?文章编号:100022790(2005)022*******

N 2cadheri n 在非小细胞肺癌组织中的表达及临床生物学意义

张卫强1,王云杰1,林　华2,周勇安1,程庆书1,刘　锟1,李小飞1,王小平

1

(第四军医大学:

1

唐都医院胸外科,陕西西安710038,2西京医院神经内科,陕西西安710033)

收稿日期:2004209201;　修回日期:2004211209

作者简介:张卫强(1971-),男(汉族),河北省巨鹿县人.主治医师,博士生(导师王云杰).Tel .(029)83377736　Email 1congcong .01@

https://www.360docs.net/doc/234198127.html,

Expressi on of N 2cadher i n i n pa ti en ts w ith pr i m ary non 2s ma ll cell lung canc 2er and its cli n i ca l si gn i f i cance

ZHAN G W ei 2Q iang 1

,WAN G Yun 2J ie 1

,L I N Hua 2

,ZHOU Yong 2A n 1

,CHEN G Q ing 2Shu 1

,L I U Kun 1

,L I X iao 2Fei 1

,WAN G X iao 2Ping

11

Depart m ent of Thoracic Surgery,Tangdu Hos p ital,Fourth M ili 2

tary Medical University,Xi πan 710038,China,2

Depart m ent of

Neur ol ogy,Xijing Hos p ital,Fourth M ilitary Medical University,

Xi πan 710033,China

【Abstract 】A I M :To e xp l o re the exp re s si o n l e ve l o f N 2ca d 2

he ri n gene i n p a ti e n ts w ith p ri m a ry no n 2sm a ll ce ll l ung canc 2e r (N SCLC ).M ETHOD S:The e xp re s s i o n o f N 2ca dhe ri n p r o te i n w a s de tec te d i n 90N SCLC tis sue s by i m m uno h ist o 2chem is try .RESUL TS:The po s iti ve ra te o f N 2ca dhe ri n e x 2p re s s i o n i n N SCLC tissue s w a s 3313%(30/90).No s i gn i fi 2ca n t d i ffe rence o f N 2ca dhe ri n exp re ss i o n w a s f o und i n N SCLC tis sue s o f squam o u s ce ll ca rc i nom a (30%)and a d 2e no ca rc i nom a (35%)(P >0105).The po s iti ve ra te o f N 2cadhe ri n e xp re s s i o n (47106%)i n the N SCLC tis sue s o f Ⅲs ta ge w a s s i gn i fi ca n tl y h i ghe r than tha t i n N SCLC tis sue s o f

Ⅰand Ⅱs ta ge s (25%)(P <0105).The po siti ve ra te o f N 2

cadhe ri n exp re s si o n (42131%)i n the N SCLC tis sue s o f N 1,2and 3g r o up s w a s s i gn i fi ca n tl y h i ghe r than tha t i n the N SCLC tissue s o f N 0g r o up (21105%)(P <0105).N 2ca d 2he ri n e xp re ss i o n ra te w a s re l a te d t o the l y m p h no de m e ta s 2ta s is (P <0105)and T NM stages of lung cancer (P <0105),but not t o the hist ol ogical classificati on .CO NCL US I O N:N 2cadhe ri n p r o te i n e xp re s si o n m ay be a s so c i a te d w ith the i n 2va s i o n and p r o g re s s i o n o f N SCLC.

【Keywords 】cadhe ri n πs;ca rc i nom a ,no n 2sm a ll 2ce ll l ung;

i m uno h is t o chem is try;l y m p ha ti c m e ta s ta s is

【摘　要】目的:研究N 2cadherin (神经性钙黏附分子)在非小细胞肺癌组织中的表达及临床生物学意义.方法:常规石

蜡包埋切片行免疫组织化学检测90例非小细胞肺癌组织中

N 2cadherin 的表达.结果:90例非小细胞肺癌组织中N 2cad 2herin 表达阳性的例数为30例(3313%);34例Ⅲ期患者中N 2cadherin 阳性率47106%,56例Ⅰ、Ⅱ期患者中N 2cadherin 阳

性率25%,差异具有显著性意义(P <0105).有淋巴结转移的患者中N 2cadherin 阳性率42131%,无淋巴结转移的患者中

N -cadherin 阳性率21105%,差异具有显著性意义(P <0105).N 2cadherin 在肺腺癌和鳞癌中的表达无显著性差异(P >0105).N 2cadherin 在非小细胞肺癌组织中的表达与其分

期、淋巴结转移有关.结论:N 2cadherin 可能参与非小细胞肺癌侵袭和转移.

【关键词】钙黏着糖蛋白类;癌,非小细胞肺,免疫组织化学;

淋巴转移

【中图号】R73412 【文献标识码】A

0　引言

恶性肿瘤的侵袭和转移严重威胁着患者的生命.

钙黏附分子家族(cadherin fa m ily )和肿瘤的侵袭和转移有密切的关系,其中以上皮性钙黏附分子(E 2cad 2herin )和神经性钙黏附分子(N 2cadherin )分布最为广泛.E 2cadherin 已经被认为是肿瘤转移的抑制因子,在恶性肿瘤组织中的表达减少.最近研究表明,N -cadherin 在前列腺癌的表达增多,并且在引起肿瘤的

浸润和转移方面有比E 2cadherin 的减少更为重要的作用

[1]

.本试验研究非小细胞肺癌组织中N 2cadherin

的表达及其转移的关系.

1　材料和方法

111　组织标本和临床资料　标本取自2003-06/2004-05在我院胸外科住院手术切除的肺癌组织90(男60,女30)例.年龄40～74(平均5515±815)岁.

所有患者术前均未行化疗和放疗.所有标本均经病理证实,其中鳞癌50例,腺癌40例.按1997年U I CC 标准进行T NM 分期:Ⅰ期20例,Ⅱ期36例,Ⅲ期34例.每例标本于手术切下后立即取癌组织3c m 3

大小,标本均经40g/L 甲醛固定,常规制作石蜡包埋切

片,连续4μm 切片.另取同期需手术切除肺良性疾病的正常肺组织30例作为对照组.

112　方法

11211　主要试剂　鼠抗人N2cadherin单克隆抗体为

美国Transducti on Laborat ories公司产品,辣根过氧化酶标记兔抗鼠I gG(Dako Envisi on)购自丹麦Dako公司.

11212　免疫组化染色　常规脱蜡、水化,30g/L双氧水,微波抗原修复,100mL/L正常羊血清封闭.分别滴加1∶150N2cadherin抗体,4℃过夜,滴加辣根过氧化酶标记兔抗鼠I gG,37℃1h,DAB显色,苏木素复染,透明树胶封片.阴性对照用P BS代替一抗,阳性对照为已知的阳性胃癌组织.

11213　结果判定　免疫反应染色阳性病例(+):棕色颗粒样,染色均匀,切片中阳性细胞率≥50%.阴性病例(-):所有细胞均呈阴性或阳性细胞率

<5%. 统计学处理:采用χ2检验,P<0105有统计学意义.

2　结果

211　N2cadher i n蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达　免疫组化染色结果显示,N2cadherin免疫组化阳性产物主要定位于细胞膜/质,偶见定位于细胞核.90例非小细胞肺癌组织中N2cadherin表达的阳性率为3313%(30/90),30例正常肺组织中N2cadherin无表达(Fig1,2).

Fig1　Exp ressi on of N-cadherin in hu man NSC LC ×200图1　非小细胞肺癌组织中N-cadherin蛋白的表达

212　N2cadher i n蛋白的表达与临床病理特征的关系　34例Ⅲ期患者中N-cadherin阳性率47106%,56例Ⅰ、Ⅱ期患者中N2cadherin阳性率25%,差异具有显著性意义(P<0105).有淋巴结转移的患者中N2 cadherin阳性率4213%,无淋巴结转移的患者中N2 cadherin阳性率21105%,差异具有显著性意义(P<0105).N2cadherin在肺腺癌和鳞癌中的表达无显著性差异(P>0105,Tab1).

Fig2　P BS staining in negative contr ol ×400

图2　P BS代替一抗作为阴性对照

表1　非小细胞肺癌组织中N2cadherin蛋白的表达及与临床病理特征的关系

Tab1　Exp ressi on of N2cadherin and its relati on of clinical patho2 l ogical characteristics in patients with NSCLC

Gr oup n Positive Negative Positive rate(%) Hist ol ogy

Squa mous cell

　carcino ma

501535

Adenocarcino ma401426 35100

Stage

　Ⅰ～Ⅱ561442 25100

　Ⅲ341618 47106a

Nodal status

　N

38830 21105

　N

1

　N

2

　N

3

522230 42131c

a P<0105vs stageⅠ-Ⅱ;c P<0105vs N

.

3　讨论

Cadherin家族是由一系列结构和功能相似的单链跨膜糖蛋白组成.经典的Cadherin蛋白按其最初来源分为:E(上皮)、N(神经)、P(胎盘)3种,分子量均约为120ku.主要参与介导钙离子依赖的同型细胞间的黏附.该家族的特点是既可以作为受体,又可以作为配体按嗜同类结合方式而相互结合,在维持正常组织结构方面起着重要的作用.

目前研究认为,E2cadherin是作为一种肿瘤抑制基因而发挥作用,E2cadherin蛋白的表达缺失与肺癌的发生、发展有密切的关系.在人类肺癌形成过程中, E2cadherin基因的表达减少,淋巴结转移的患者E2 cadherin基因的表达明显减少.肿瘤的T NM分期越晚,E2cadherin的表达水平就越低,其预后就越

差[2-5].因此,E2cadherin基因是做为一种抑癌基因而发挥作用的,E2cadherin表达下降,其介导的细胞黏附功能受损,肿瘤细胞连接松散,容易脱落发生转移.

近年来研究发现,N2cadherin对于肿瘤上皮细胞及表达N2cadherin的血管平滑肌细胞和外皮细胞之间的黏附起着重要的作用.在肿瘤形成的过程中,N2 cadherin的表达有助于血管形成及上皮细胞-间质细胞的迁移,从而使肿瘤细胞更加富于侵袭性,易于转移[6].U tsuki等[7]学者发现在脑胶质母细胞瘤和星形细胞瘤中N2cadherin的表达增加并且和肿瘤的病理分级相关,而E2cadherin的表达减少.Makagiansar 等[8]发现N2cadherin可以增加恶性T细胞瘤对上皮细胞的黏附力,使其更容易发生转移.Suya ma等的研究发现N2cadherin的增加可以通过FGF激活MAPK2 ERK信号转导途径,诱导MMP29基因表达,有利于肿瘤血管的形成,使肿瘤易于生长和转移[9].

T om ita等[10]研究认为在前列腺癌中有“cadherin 转换现象”,即在E2cadherin表达减少的区域N2cad2 herin的表达增多,并且和肿瘤的分化程度有关.cav2 allar odeng认为在恶性肿瘤组织中存在“cadherin转换现象”,即E2cadherin表达减少而N2cadherin的表达增多,其确切机制尚不清楚.可能在恶性肿瘤发展过程中,E2cadherin表达增多可能是早期事件,接下来N2cadherin的表达增多,诱导E2cadherin表达减少,使细胞恶性程度增加,促进肿瘤血管形成和转移[11].

在我们的研究中,非小细胞肺癌组织中N2cad2 herin表达的阳性率为3313%(30/90),并且和肺癌的分期和转移有密切的关系.Ⅲ期患者N2cadherin阳性率高于Ⅰ、Ⅱ期患者(47106%vs25%);有淋巴结转移的患者中N2cadherin阳性率高于无淋巴结转移的患者(4213%vs21105%).我们的试验也说明,N2 cadherin也参与了非小细胞肺癌发展过程中的浸润和转移.

总之,在非小细胞肺癌的发展过程中,N2cadherin 的表达增多,可能有利于癌细胞的浸润和转移,其确切机制尚待阐明.

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编辑　王小仲