固相萃取说明书

步骤一：

1.处理小柱：SPE固相萃取小柱在进样前需要进行活化处理，处理的溶剂取决于柱子的填

充物和用途。按以下顺序进行操作：

2.反相固相萃取小柱预处理：

用2mL的乙腈或者甲醇对小柱进行淋洗，然后用水或者与样本相似的溶液进行淋洗（例如相似的pH、盐度、溶剂浓度等）。加入预处理溶液之后在填充物上面要保留一层水溶液。这促进了水样基元与固相疏水层更好的接触。

3.正相固相萃取小柱填料：向小柱中加2mL样本的溶液

4.小柱离子交换填料：根据样品的溶剂极性调整操作步骤。如果样品是非极性溶剂（例如

己烷或者二氯甲烷），用2mL样品对小柱进行处理。之后再加入2mL甲醇对小柱进行处理。用2mL适当的溶液使填料适应样品的pH、有机物浓度以及盐浓度。

5.一般处理步骤：为了保证SPE小柱在预处理与加样之间不干燥，最后一步处理时在小柱

填料顶层保留1mm的液体。如果填料在加入样品之前干燥了，重复处理步骤。在回收有机溶剂之前用水冲洗小柱中的缓冲盐。

如果样品是取自水槽，在1mLSPE小柱中多加0.5mL最后处理溶液，在3mL小柱中多加2mL,6mL中多加4mL。

步骤二：加样

1.尽量调节样品pH、盐浓度、以及有机溶剂浓度，来加强在小柱上保留适当的化合物，

洗脱或者沉淀不需要的化合物。为了避免阻塞小柱填料，在萃取之前通过过滤或者离心分离去除样品中的颗粒物质。在样品被转移到小管或者水槽之前或者之后有可能对其实行内标法。

2.用移液管（带有一次性枪头的微量移液管）准确的将样品转移到管中或者储水槽中

3.通过真空泵或者正压使样品缓慢的通过固相萃取小柱。流速会影响化合物在填料层的保

留。一般来说，流速不应超过5mL/min。

步骤三：填料层的洗脱

1.如果化合物已经富集在了小柱上，用一种或几种不会带走目标有机物的溶液洗脱以除去

不需要的物质。用同样的能溶解样品的溶液洗脱柱子上的不需要的、没有保留的物质。

通常需要不超过管体积的洗液。

为了脱除不需要的、微弱节流的物质，用中等洗脱强度的溶剂对小柱进行清洗。（例如，比样品的强比需要转移目标化合物的洗脱剂弱）。仔细选择清洗溶剂以确保只有不需要的物质被转移。一个典型的溶剂要含有的有机溶剂和无机盐要比最终洗脱剂中的少。可以调整到不同pH。与最终洗脱液在极性方面相差很大的纯溶剂或者混合溶剂也是很好的洗液。

2.如果目标化合物没有被保留在填料中，用大约1管体积的样品溶液淋洗脱去小柱中剩余

的目标溶剂。

步骤四：目标化合物的洗脱

用少量体积（一般用200μL~4mL，取决于小柱的型号）的可以洗脱目标化合物的溶剂（可以洗脱目标化合物但是留下在清洗步骤没有没有洗掉的杂质）冲洗小柱。洗出液按适合的要求进行贮存，进行下一步准备。

两小等份的洗出液一般比一大份洗出液的洗脱目标化合物的效率高。在每个洗出液接触填料30s到1min之间回收分析物是最好的。