thermo酶标仪技术数据
荧光化学发光检测仪( Fluoroskan Ascent FL)厂家Thermo
一．指标:
2合1荧光/化学发光分析技术，具有出色的性能
最新的光学系统具有高灵敏度
用户友好的Acsent软件简化荧光和化学发光应用
独特的进样系统应用于快速（flash kinetic）发光反应
适用多种板型—1孔-384孔
可与自动机械臂联用，处理高通量样品
对于需要精确控温的检测，系统提供标配的孵育器
FL在进行发光检测时，按下按钮后马上进板检测，读数时间为15s/96孔板，完全符合发光检测的技术要求。
FL最多可加3个进样器,加样范围1－1000ul,一次吸液后可加的孔数更多，减少了泵多次吸液的时间，从而更能确保每孔测量时间的均一性，保证了数据的准确性和重复性。
FL有闪烁发光检测功能，能进行如钙离子检测、水母发光蛋白的检测等。
FL同时带线性和圆周振荡，在对大孔板进行振荡时，线性振荡容易使液体溅出，且混不均匀，而圆周振荡可防止液体溅出，混匀更充分
FL可与机械臂兼容，如与Thermo CRS的全自动机械臂操作平台配合使用，构建一个高通量药物筛选的平台可进行双报告基因的检测。使在同一个程序中应用二种测量技术成为可能，如荧光检测GFP和化学发光luciferase组成的双报告基因系统可在同一孔中开展实验。
FL标配完全免费的Ascent 软件，合仪器控制和数据处理为一体。同时还具备了很多扩展的功能，如将原始数据转入EXCEL进行更进一步计算的能力。
二．指标及精度
酶标板类型:1、6、12、24、48、96和384孔酶标板（如Terasaki板），
也可以为特定的板型编程。最大尺寸：90mm*134mm*25mn
检测速率:测定96孔酶标板最低时间为15秒
摇床:有轨摇床，转速60-1200rpm，直径1-50mm
进样器:1-3个加样器
处理体积:5-1000ul，1ul增量
进样速度:25秒/板（96孔板，5ul/孔）
孵育温度范围:室温+3℃-45℃
荧光光路系统
光源:石英卤素灯
检测器: PMT
激发波长:320mm—700mm
发射波长:360mm—800mm
滤光片:高质量滤光片,激发光滤光片轮最多可放8片滤光片,发射光滤光片轮最多可放6片滤光片
激发光滤光片*:320nm，355nm、390 nm、430 nm、440 nm、444 nm、485 nm、530 nm
544 nm、578 nm、584 nm、646 nm
发射光滤光片*:405 nm、460 nm、485 nm、510 nm、518 nm、520 nm、527 nm、538 nm
555 nm、590 nm、604 nm、612 nm、620 nm、678 nm、680 nm
理论灵敏度;2fmol Flurescein/孔，用黑色96孔板
线性范围:＞6数量级（＞6decades）
化学发光光路系统
检测器:PMT
光谱范围:270nm-670nm
理论灵敏度:5fmolATP/孔,(采用热电公司ATP检测试剂盒)
线性范围:＞9数量级（9decades）
浅谈多功能酶标仪选择的要素
近年来，随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来，多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来，乱花渐欲迷人眼。除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN，还出现了众多后来者插足此市场，如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线，特性各不相同，选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱。 本文尝试从用户实际使用的角度，探讨应该如何看待花样繁多的参数特性，希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。 一、滤片Vs光栅 多功能酶标仪的分类方法众多，但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。一般来说，可以分为滤光片型和光栅型两大类。当然也有一些型号，例如Synergy4和EnVision等，一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测，还是想用光栅的时候用光栅，该用滤片的时候用滤片；还有一些实验非用其中一个不可，另一模块实现不了的。所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。 总体来说，滤片技术由于发展已久，配合二向色镜（其实也就是另一模式的滤光反光滤镜）等光路系统，可以实现大部分实验的需要。目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的，例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔（荧光素，384孔/80ul）。 但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制，不可能满足日益增加的实验类型的检测需要，而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究，所以后来就诞生了光栅型的仪器。 最先推出光栅的是MD公司，其光栅习惯上称为单光栅。由于光纯度的不足，在光栅的后面又加入了一组带阻滤片，再把杂光过滤一遍，达到了5×10-4的杂光率，基本与纯粹的滤光片系统一致。后来TECAN 又发展出了双光栅技术，通过两次光栅滤光，杂光率降到了10-6。后来，Thermo、BioTek和PE的部分新款仪器等都使用了类似双光栅技术。由于激发和发射各用了一组双光栅，此类机器又被称为四光栅型多功能酶标仪。 光栅型酶标仪的推陈出新，使得用户在波长选择上不再受限，而且在杂光率、带宽控制等性能上还超越了滤光片系统。例如，TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光栅系统的M1000酶标仪，杂光率降到了2×10-7的新低，还实现了带宽2.5～20nm连续可调。这些都是目前滤光片型酶标仪所不能或者较难实现的。 二、杂光率&波长准确性 光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流，多家厂家共同努力，已经把光栅技术推到了历史新高。在光栅的众多技术参数之中，最关键的无疑就是光栅的杂光率和波长选择的准确性了。 杂光率指得就是光源通过光栅后，得到的光线中，“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例，表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性，无论使用滤光片还是光栅，杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。一般来说，滤光片型的杂光率在10-4～10-5之间，光栅型的可以做到10-6～10-7。由于此类杂光是非特异的，而且会直接进入最后的检测器，所以有多少的杂光就会引入多少的随机误差。在荧光等检测过程中，由于检测器存在放大效应，杂光率的干扰也会被指数级放大。因此，杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。 光栅的另一个重要指标就是波长选择的准确性。因为很多检测是依赖于物质在某个波长的特征图谱。就像
多功能酶标仪技术规格要求
多功能酶标仪技术规格要求 一、采购内容 二、技术要求 1、系统性能 多模式检测模块：可见光/紫外光吸收、荧光强度（顶读&底读）、超高灵敏化学发光、时间分辨荧光和超灵敏Alpha检测。 2、激发光源： 2.1光吸收、荧光强度、TRF模块光源采用高能闪烁氙灯，波长范围230-1000 nm。*2.2 Alpha光源采用680 nm 高能固态激光光源，激光输出功率>200 mw。 *3、检测器：多模式检测模块：同时配置两个PMT：一个红敏PMT和一个独立超高灵敏度PMT。 4、可见/紫外吸收光：双光栅系统可进行光吸收检测，波长范围230-1000 nm，双光栅分光步进（increments）0.5nm。 *5、荧光强度（顶读和底读）：高精度四光栅系统，要求前置cut-off滤光片，波长范围250-850nm；分光步进（increments）0.5nm。 *6、超敏感化学发光：独立于荧光检测之外的单独光路，独立超敏感PMT检测器。 7、时间分辨荧光：激发配置320 nm/340 nm滤光片/二向色镜优化组合，保证激发光强度。发射光路为双光栅，满足包括615nm和665 nm在内的单/多波长检测。*8、超灵敏Alpha检测：优化独立Alpha专用光路，采用高能固态激光+独立超灵敏PMT优化高速组合，以达到最佳的检测效率和灵敏度。要能提供Alpha检测试剂盒及特殊应用的定制化服务。 9、温控模块：保证样品检测温度稳定到室温+3至65摄氏度。
10、具有三种振荡模式：线形、圆形、8字形，可设定震荡速度、振幅及振荡时间。具有仪器外（outside）振荡功能，在程序运行的过程中，微孔板可以伸出仪器外部振荡，便于实现程序运行中观察振荡效果，而不必中止程序。 11、具有板孔扫描功能：可选孔内圆形或方形区域中的多点扫描检测，适用于贴壁细胞或不均匀样本检测，以减少因样品分布不均匀造成的检测偏差。软件可自动优化调节检测器Z轴高度，以保证检测的灵敏度，减少孔间信号串扰。 12、配备专业仪器自动化控制及数据分析处理软件，软件友好，易学易用。具备线性拟合、动力学、剂量效应等多种常用的数据计算及分析功能，结果可以Excel、文本、网页、图片等多种格式输出。 三、技术服务要求 3.1设备安装调试 在用户指定的地点完成安装调试，并配合用户进行测试验收。 3.2 技术培训及服务 3.2.1完成设备现场安装调试和验收后，在用户所在地免费提供专业培训，就 设备的操作使用和保养维护等内容进行重点培训。 *3.2.2 要能提供原厂AlphaScreen/AlphaLISA检测试剂以及时间分辨荧光检 测试剂，并具有专业技术开发实验室及服务能力，并由应用技术工程师提供蛋 白-蛋白等分子间相互作用实验的现场操作培训以及后期新实验开发培训。 3.3质保期 整机保修1年，保修期自验收签字之日起计算。 3.4维修响应时间 接到维修通知后，2小时内作出响应，24小时内到场排除故障。
SPETROstarOmega全波长全自动多功能酶标仪
SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标仪 仪器介绍： SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标 仪是BMGLABTECH Omage 系列的一员， SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标 仪可以使用于固定波长或者连续波长检测，波长范 围220-1000nm,1nm 扫描递进，与单色器相似， 但是速度更快，分光计可以实现紫外/可见光测量 <1秒/孔，无需扫描。分光计的检测速度和操作简 易的软件让用户能更灵活地优化实验参数。 作为Omega 多功能酶标仪系列的一员， 同时带有振荡孵育，试剂进样功能。 SPECTROstar Omega 具备以下特性： SPECTROstar Omega ·即使在全波长扫描时，内置式的智能注射器仍然能够同时进行试剂的配给并启动动力学反应 ·精确的温度控制可达60oC ，多种振荡模式 ·模板管理器能够进行多种数据处理 ·多功能的动力学软件可用于终点法，long-term 和快速动力学检测 ·实时动力学检测 ·兼容384孔板 ·”QuickStart”模式允许用户只需点击3次鼠标键即可进行读数
·Stacker和机械臂兼容 ·可根据需要升级为FLUOstar Omega或POLARstar Omega。 控制和分析软件 BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。并完全符合FDA 21CFR Part 11。 控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤，功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数，以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。 数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。数据可以通过预设的模板进行处理，也可以对通过改变统计数据来进行处理。 该软件同样能够制作标准曲线，并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值： 线性回归拟合 4-参数拟合 点对点拟合 分段回归拟合 三次样条函数拟合 2nd和3nd多项式拟合 MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算，所以很容易得到如：S/N，Delta F%和Z’等重要参数。利用标准拟合等式即可快速的进行酶动力学数据分析，让MARS软件更为完善。 只需按一下鼠标，通用型的微孔板测读器软件包就能为用户提供快速、简单的实验结果，实验步骤设计，和用户自定义数据处理。
多功能酶标仪SpectraMaxi3的操作规程
多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3 部门Department 签名/日期Signature/Date 起草人：Prepared by 樊小川，Xiaochuan Fan QC 审核人：Reviewed by 黄思佳，Sijia Huang QC 审核人：Reviewed by 褚夫兰，Fulan Chu QA 批准人：Approved by 张伯彦，Boyan Zhang 质量负责人 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。 2 适用范围
本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪：指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光（TRF)、化学发光（Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现"Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。 6.2.2 连接仪器 点击‘Choose a diffecient instrument’，打开‘Instrument Connection’对话框，在“Availible Instruments”菜单中选择仪器连接线与电脑所接的串口号(COM)。 选择所购买的酶标仪型号SpectraMax i3或添加模块卡盒型号。最后点击“OK”键连接。 6.2.3 仪器检测参数设定 点击图标后出现“Settings”对话框，对话框最上方出现Read Mode（读板模式）和Read Type（读板类型）两个选项，读板模式有ABS(光吸收)、FL(荧光强度)、LUM(化学发光)和TRF(时间分辨荧光)，读板类型有终点检测（Endpoint）、动力学（Kinetic）、单孔扫描（Well Scan）和光谱扫描（Spectrum）四种。使用者根据实验
多功能酶标仪基本操作规程
多功能酶标仪基本操作规程 一、可见与紫外光原始吸光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶 标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定，一般情况 下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔，平底，透明板)。（注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。 9、在Measurements 栏内双击Absorbance ，出现Absorbance的对话框。 10、在Absorbance的对话框中： ⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值；Reference项,在需要扣除背景波长时选中并 输入背景波长值。一般情况不选. ⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选 ⑶在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10；Settle time（使平静时间）项对于96或384孔 板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长,以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。 ⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。 11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄色）， （注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。） 12、点击OK后，箭头变绿，点击绿色箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年- 自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。 13、测定结束后，点击File 选择print,直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel， 然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。 14、关机，退出当前界面，点击左下角Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑，关仪器电源和插板电 源。 二、荧光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶 标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。荧光酶标的测定，一般情况下 选xxxxx xx Flat black (x孔，平底，黑板。6孔板测定时没有黑板可选,可选择6孔,平底,透明板)。
多功能酶标仪Gen5软件使用方法_SynergyH4_201
Gen5简要操作说明 一：新建方案 双击桌面上Gen5软件图标，出现如下界面，新建实验可以用来编辑新实验或者选择已经编辑好的方案来读板，新建方案可以编辑新的读板方法。 点击新建方案按钮，并选择标准方案（默认设置），弹出如下界面 双击程序（步骤），弹出如下界面，在此我们可以编辑检测（Read）方法 点击检测，进入下面界面 根据自己的实验类型和检测模式，选择对应的选项： 吸收光： 点击终点法后，如下设置 若点击光谱扫描，如下设置： 点击区域扫描，如下设置： 荧光强度 点击终点法，选择滤光片或者光栅，如果滤光片，如下设置： Gain值设定，默认是35，可以收到根据信号调节或者采用自动校正，如下： 或者已知微孔板信号孔分布情况，可以根据信号孔来校正增益值 选择完成后点击OK即可完成设定； 如果选择光栅检测，设置如下： 编辑完成即可： 注：1）Gain值的设定是为了获得合适的检测信号值，并不会改变信号的趋势，可以在预实验中完成，以后的相同实验固定设置来检测 2）光谱扫描，区域扫描设置方法与吸收光设置类似。 编辑完成后点击OK，确认就可以。 发光 终点法，区域扫描选择滤光片，光谱扫描选择光栅 终点法设置如下： 选择终点法时： 完成后点击OK。
温度控制 需要注意的是，温控设定后需要加热一定时间才能达到目的温度，所以可以根据实际情况在打开仪器同时设定预加热。方法如下： 点击第二排最右边按钮（仪器图标，数字显示目前仪器内部的温度），点开后出现以下对话框： 点击预热， 实验完成后，记得关闭预加热。 震荡： 动力学检测： 接着设置检测步骤： 延迟： 方案编辑完成后取名字，保存。 编辑完成后，之间点击绿色三角按钮进行读板。 点击后，将板子放在载板台上，点击ok，即可进行读数，同时读数结束后可以保存在自己的文件夹下面。如不需要原始的实验数据，也可以点击取消不保存。 三：数据导出 读板过程结束，载板台会弹出，软件上出现读板结果，我们只需要点击Excel导出数据图标，就可以把数据导出到Excel表中，进行后续的数据处理。
酶标仪的选购关键参数
酶标仪的选购|关键参数 发布日期：2010-06-21 发布人:reed5201 最后更新时间:2010-06-22 浏览次数:754 酶标仪作为一个常用的仪器，其基本功能不外乎一个比色测定，与比色计所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异，当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。我们在选购酶标仪时应该考虑如下几个关键参数： 一、滤光系统 酶标仪最简单的是用滤光方式来划分。一般来说，可以分为滤光片型和光栅型两大类。也有一些型号，例如Synergy4和EnVision等，一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测，本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。 光栅型滤光系统具有使用方便，可以进行光谱扫描，灵活性等优点。当然，滤光片系统也有其显著的优势，例如价格较为便宜，检测灵敏度高，带宽的可选择性，可以进行快速的滤光片切换，可配备有自动加样系统，在化学发光检测中光线的透过率高。 目前，滤光片系统应用更广，因为它可以让实验者完成更多的试验。 二、测定波长 一般酶标仪的测定波长在400～750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP)，底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)，其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5．0左右时，DAB在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L 0时，最大吸收波长移至492 nm，同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H：O：和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340 nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。 酶标仪有单波长和双波长检测功能。有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定；而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外，同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定，酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的，来自于板孔上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此，在ELISA比色测定中，最好使用双波长，且不必设空白孔。 三、测定的吸光度范围 通常，酶标仪的吸光度测定范围在0～2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0～2.5之间，但现在基本上都做了拓宽，可达到3.5以上，并且能保持很好的精密度与线性。如Labsystems公司Dragon Wellscan MK—2的吸光度测定范围为0—3.5，而Multiskan Ascent的吸光度测定范围(Abs)达0～4．0，在0～4．0范围，线性误差不超过±2．0％，在0．3—3．0吸光度范围内，测定精密度CV小于±0．2％；3．0～4．0Abs范围内，测定精密度CV小于士0．2％。
酶标仪原理及结构-科邦实验室
酶标仪的原理及结构 酶标仪即酶联免疫检测仪，是酶联免疫吸附试验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计，即用比色法来分析抗原或抗体的含量。 酶标法是什么 酶联免疫吸附试验方法简称酶标法，是标记技术中的一种，是从荧光抗体技术，同位素免疫技术发展而来的一种敏感，特异，快速并且能自动化的现代技术。 酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体，此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应，并牢固地结合形成仍保持活性的免疫复合物。当加入相应底物时，底物被酶催化而呈现出相应反应颜色。颜色深浅与相应抗原或抗体含量成正比。 由于此技术是建立在抗原-抗体反应和酶的高效催化作用的基础上，因此，具有高度的灵敏性和特异性，是一种极富生命力的免疫学试验技术。 酶标仪的原理 酶标仪就是应用酶标法原理的仪器，酶标仪类似于一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。
光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号，电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，Z后由显示器和打印机显示结果。 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X，Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单。 微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。其常见规格有40孔板，55孔板，96孔板等多种，不同的仪器选用不同规格的孔板，对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测。 酶标仪测定是在特定波长下，检测被测物的吸光值。随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。 酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。 酶标仪的结构 酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得，也可用分光光度计相同的单色器来得到。在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样，滤光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，其效果是相同的。光源灯发出的光经聚光镜，光栏后到达反射镜，经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液，然后再经滤光片送到光电管。 酶标仪可分为单通道和多通道2种类型，单通道又有自动和手动2种之分。自动型的仪器有X，Y方向的机械驱动机构，可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试，手动型则靠手工移动微孔板来进行测量。
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 Standard Operation of SpectraMax i3 部门签名/日期 Department Signature/Date 起草人: XX， Xiaochuan X Prepared by QC 审核人: XX， Sijia XX Reviewed by QC 审核人: XX， Fulan X Reviewed by QA 批准人: XX， Boyan XX Approved by 质量负责人 颁发部门执行日期质量保证部-QA Issued by Effective Date 替换文件复审日期 Version 00 Replaced For Review Date 分发部门 QA，QC Distributed to 1 of 7 编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪 检测时的操作。 2 适用范围
本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧 光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现 "Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。
酶标仪(使用方法)
酶标仪使用方法 一、仪器准备 1．将MK3酶标仪后部的电源开关打开，仪器将显示自检，基础酶联，软件版本号。2．等待数秒后，荧屏显示“基础酶联，准备和时间”。表示仪器正常，处于等待状态。操作规程 1．工作人员心须详细阅读仪器操作使用说明书。 2．将被测样品板放入酶标盘中，同时打开与酶标仪相连的打印机开关。 3．按“测量模式”键：进入选择波长程序 荧屏显示：“基础酶联” “1.单波长检测” 按“↑”“↓”选择单波长.双波长检测. 4．按“输入”键：进入选择好的文件名状态。 若选择单波长检测, 荧屏显示：“1.单波长检测” “滤光片405” 再用数字键选择需要的波长. 若选择双波长检测, 荧屏显示：“2.双波长检测” “1.滤光片450” 再用数字键选择需要的第一检测波长.按”输入”键, 荧屏显示: “2双波长检测” “2.滤光片630” 再用数字键选择需要的第二检测波长.按”输入”键, 荧屏显示：“2双波长检测” “无试剂空白” 5．继续按”输入”键, 荧屏显示：“2双波长检测” “最终结果”(单波长无此步骤) 6．按”输入”键,返回到荧屏显示“基础酶联，准备和时间” 7．按”开始”键, 启动阅读功能，酶标仪对样品板开始进行测试。 8．读数完毕，被测孔子板复位，荧屏显示“正在传送数据”,等待数秒后,打印机开始打印测试结果。当打印完毕后，关闭打印机开关，荧屏回到主菜单状态。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
二、计算机控制 1．将MK3酶标仪后部的电源开关打开，仪器将显示自检，基础酶联，软件版本号2．等待数秒后，荧屏显示“基础酶联，准备和时间”。表示仪器正常，处于等待状态。3．在lab-35计算机的桌面上打开“思桥检验科管理系统”,输入用户名“system”及密码“system”. 4．进入系统后，选择“酶标仪”菜单。在下拉框中选择“酶标项目设置” （1）在面板当中进行单，双波长的设置，点击“仪器通迅设置”。 （2）在“仪器通迅设置”面板上，默认为单波长的方式，如要选择双波长，勾选双波长的选框。 （3）在主滤光片及副滤光片上选择相应的所需波长大小。 （4）选择完成后，点击“确认”键，系统显示“设置成功”，按“确定”退回。（5）点击“退出”键，系统显示“酶标仪器设置成功”，按“确定”键返回到“酶标项目设置”的面板上。 （6）在“酶标仪”的下拉框中选择“酶标仪操作”，在此面板中完成读板，数据存储及打印的工作。 5. （1）点击“连机”，在状态栏显示“连机成功”，表明计算机已与酶标仪连接成功。（2）点击“启动”，在状态栏显示“计算机远程控制成功”,表明计算机已远程控制酶标仪。如未显示此项，则读板功能不能完成，数据传输异常。 （3）顺利完成上面两项后，继续点击“读板”键，启动酶标仪读板功能。数秒后，酶标仪开始读板，完成读板后，在“状态”栏显示“结果数据分离成功”，并在面板的样品栏显示读板后的数据。（在此“酶标仪操作”面板未关闭之前，可连续读板，如关闭面板需重复“连机”，“启动“） （4）点击“入库”键，系统显示“入库完毕”，按“确定”返回。此项完成了数据的存储。 （5）点出“计算“键，系统显示“计算完毕”, 按“确定”返回。此项完成后才可以打印。 （6）点出“打印”键，完成打印到此波长选择设置成功，点击“关闭”键，退出“酶标项目设置” （7）当打印完毕后，关闭打印机开关。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
多功能酶标仪常见配置及全参数
Infinite M200 PRO 1．一般参数： 支持的检测模式：光吸收、荧光顶部底部、时间分辨荧光（TRF）、连续发光、瞬时发光、双色发光、BRET、光吸收和荧光波长扫描 1.1 光源：UV高能闪烁氙灯，10^8次闪烁寿命，自带光强监测、校准，免维护无需预热 1.2 光栅杂光率：＜10^-6 1.3 支持板型：6-384孔板，预设常用品牌型号；自动扫描并定义特殊规格板型，NanoQuant微量检测板，4位卧式比色杯，立式比色杯（选配） 1.4 孔内多点读数（光吸收/荧光顶底）：6-384孔板，最多15×15个点（依板型模式可有不同），覆盖全孔，7种点布局 1.5 温度控制：环境温度+5℃至42℃（选配） 1.6 振荡：线性或圆形可选；振幅1-6mm，0.5mm步进；1-1000秒可调 1.7 多标记多模式检测：单个实验中可进行无限制的多波长、多模式检测（光吸收、荧光、发光、波长扫描） 1.8 最快读板速度：96孔板：20秒；384孔板：30秒 1.9 波长扫描速度（FI EX/EM）：150秒；450-550nm，5nm步进，96孔板 1.10 认证：DLReady，Transcreener Red FI 2.光吸收模块 2.1 波长范围：230-1000nm，1nm连续可调 2.2 波长选择：双光栅 2.3 带宽：＜5nm（λ≦315nm），＜9nm（λ＞315nm） 2.4 波长准确性：＜±0.3nm（λ≦315nm），＜±0.5nm（λ＞315nm） 2.5 波长重复性：＜±0.3nm（λ≦315nm），＜±0.5nm（λ＞315nm） 2.6 检测器：紫外硅光电二级管 2.7 检测范围：0-4 OD 2.8 检测分辨率：0.0001 OD 2.9 检测准确性：＜0.5% @260nm 2.10 检测精确性：＜0.2% @260nm 2.11 260/280nm精度：±0.07
酶标仪
全自动酶标仪(XLx800) 1 目的：规范设备操作，确保生产质量和人身安全。 2 适用范围：适用于全自动酶标仪(XLx800)的操作。 3 责任人：设备操作人员及设备维护人员。 4 程序： 4.1 编辑检测方案 任何一次实验（包括方案和实验数据）都需要以相应的方案（检测的具体程序步骤）为基础,因此实验的第一步就是要打开一个方案或创建一个新的方案。 4.1.1 确保仪器与计算机之间正确连接,打开仪器,待仪器自检完成后,双击Gen5软件图标，打开软件，出现任务管理器。点击方案，通过“新建...”或“打开”按钮创建新的方案或重新编辑已有方案。 4.1.2 点击新建... ,选择合适的方案类型（在此以标准方案为例），出现方案界面，进行程序、板布局。数据处理、报告/导出构建器的编辑。
4.1.2.1 双击程序 ，出现程序界面（根据仪器的配置不同，可以选择的功能按钮为黑色，不能选择的功能按钮变为灰色）： (1) 板类型：在下拉框中选择酶标板的型号和类型，默认为96孔板。 (2) 预先设定：在检测选项中选择检测范围后，检测范围固定。 随时设定：适用于相同的多次实验检测范围不固定的情况，选择后实验开始前再进行检测范围的选择。
(3) 验证：对所编写的程序是否符合逻辑进行有效性的验证，如果不符合则会显示错误的问题在第几 步。 (4) 检测：点击检测按钮，进行参数设置。 检测方法：吸收光，荧光，发光。 检测类型：终点，区域扫描，光谱。 检测速度：正常（反复检测8次），快速。 全板：选择检测范围。 光程校准：光程校正（表示对样本孔的值进行光程校正，因为酶标板各样本孔内样本液的高度不一定为1cm，使用该选项，可自动把吸收值校正为光程1cm时的吸收值）。 波长：选择或输入（全波长酶标仪适用）可以同时定义6个检测波长。 区域扫描: 选择该功能可以对每个孔进行多次读数，读数的次数通过设置矩阵的大小来控制，读数次数越多准确度越高，但是读板
全波长酶标仪
全波长酶标仪 酶标仪（Microplate Reader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应是通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。 一、酶标仪的工作原理 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 二、酶标仪的应用 酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。目前在国内血站临床试验室中酶标仪成为ELISA测定的重要工具。在农业中利用酶标仪研究酚氧化酶，为开发以该酶为靶标的新型害虫控制剂提供理论依据。伏马菌素是最近发现的一族主要由几种真菌产生的结构相关的毒素代谢产物，该毒素已被世界卫生组织列为近年来首先进行研究的几种霉菌毒素之一。因此快速、高效的检测伏马菌素便显得尤为重要。在450nm或630nm的滤镜下使用酶标仪对微孔板进行光学测量，可以检测伏马菌素的含量，在食品安全方面有着重要的应用。生长曲线一般指菌落总数CFU/mI。或者菌落总数的对数log CFU/ml。随时间变化曲线，可用来展示微生物生长情况和新陈代谢规律。目前通过分光光度计测定菌悬液时存在即时性差、操作繁琐、易污染等缺点，由于酶标仪是一种快速、准确、高通量的仪器，所以我们总会选择使用酶标仪来进行菌悬液OD值的测定，来提高工作效率，节约时间。
酶标仪工作原理及使用方法
酶标仪简介： 酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 酶标仪原理： 酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单. 微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液. 光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。 酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。 检测单位 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
多功能酶标仪参数
A：四功能多功能酶标仪 实现功能：光吸收、荧光顶底读、发光、时间分辨荧光功能。 1. 一般光学参数 1.1 光源：UV 高能闪烁氙灯 1.2 波长选择 1.2.1 带宽Ex:≤20nm Em: ≤20nm #1.2.2 光栅系统或滤光片 1.3 光吸收 *1.3.1 波长准确性±2.0nm 1.3.2 波长精确度<±0.3nm for λ≤315nm <±0.5nm forλ>315nm 或±1 nm （0-2 OD/ABS） 1.4 波长范围 1.4.1 荧光强度：Ex 250-850nm, Em 280-850nm 1.4.2 光吸收 230-999nm 1.5 检测器 1.5.1 光吸收：光电二极管 1.5.2 荧光：光电倍增管（PMT） 1.5.3 发光低暗电流单光子计数光电倍增管 1.6 检测范围 0-4 OD 1.7 板型： 6-384孔板或微量检测板(可检测低至2微升的核酸样本) 1.8 温度控制：室温+5℃ 至42℃ 1.9 振板方式：多种振荡模式，速度和振幅可调 2. 荧光参数 2.1 荧光强度模块顶读、底读模式，包括时间分辨荧光检测功能（TRF）2.2 荧光背景校正功能 2.3 荧光灵敏度 #2.3.1 荧光顶部阅读≤1fmol/孔（384孔板） *2.3.2 荧光底部阅读≤5fmol/孔（384孔板） *2.3.3 测量范围≥5个数量级 #2.4 具有自动增益功能 3. 时间分辨荧光 3.1 灵敏度：≤120amol/孔 (0.9pM; 384孔板) 3.2 测量范围≥6个数量级 4. 发光参数
4.1 化学发光检测模块具有双色化学发光检测能力；配备单光子计数光电倍增管4.2 发光灵敏度 #4.2.1 瞬时发光：<25amolATP/孔 (218 fM; 384孔板) 4.2.2 测量范围≥6个数量级 4.3 具有自动增益功能 5. 加样器 *5.1 可同时添加两支或以上微量注射泵，1μl 步进 5.2 可用于快速触发的动力学荧光、化学发光和光吸收 #5.3 吸收检测加样泵速度：100-300μl/秒；加样体积：最大300μl 5.4 自动完成加样器清洗和维护工作 5.5 具有自适应功能，防止过量加液的溢出 6. 标准配置 6.1 具有光吸收、荧光等功能的酶标仪主机（可正常开机，实现基本业务需求）1台 6.2 时间分辨荧光模块 1个 6.3 化学发光模块 1个 6.4 必备操作软件 1套 6.5 专用计算机 1台 6.6 打印机 1台 6.7 稳压电源 1个 B：六功能多功能酶标仪 实现功能：光吸收、荧光顶底读、发光、时间分辨荧光功能、ALPHASCREEN功能、气体控制模块功能 1. 一般光学参数 1.1 光源：UV 高能闪烁氙灯或LED光源或激光光源 1.2 波长选择 1.2.1 带宽Ex:≤20nm Em: ≤20nm #1.2.2 光栅系统或滤光片 1.3 光吸收 *1.3.1 波长准确性±2.0nm 1.3.2 波长精确度<±0.3nm for λ≤315nm <±0.5nm forλ>315nm 或±1 nm （0-2 OD/ABS）
酶标仪
酶标仪的使用方法 作为微孔板比色计的酶标仪，其基本功能为测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件等功能，当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。 一、测定波长目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物通常为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0左右时，DAB 在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L 0时，最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H:O:和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6~8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室
希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。酶标仪有单波长和双波长检测功能有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450 nm 或492 nm进行比色测定；而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外，同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定，酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的，来自于板子上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此，在ELISA比色测定中，最好使用双波长，且不必设空白孔。 二、测定的吸光度范围通常，酶标仪的吸光度测定范围在。0-2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0-2.5之间，但现在基本上都做了拓宽，可达到3.5以上，并且能保持很好的精密度与线性。如Labsystems公司Dragon Wellscan MK-2的吸光度测定范围为0-3.5，而Multiskan Ascent的吸光度测定范围（Abs）达0-4.0，在0-4.0范围，线性误差不超过±2.0%，在0.3-3.0吸光度范围内，测定精密度CV小于±0.2%；3.0-4.0 Abs范围内，测定精密度CV小于士0.2%。因此，对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围，主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。 三、光学系统酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道（通常为