MINI-PAM快速操作指南-20120522(1)
MINI-PAM基本实验操作步骤
仪器的开机及设置
1．测定前请先仔细阅读说明书。
2．按照说明书，连接光纤、2030‐B叶夹和主机，按ON键，开机。界面如下图所示
3．夹上叶片，观察此时的F值，如果F值在200‐500（最好是200‐300），表示测量光（MEAS. LIGHT）强度适合，可以继续进行下面的设置；如果F值不在200‐300之间，应调节测量光强度（见4、5步）。 4．调节测量光强度步骤：通过∧或∨键将主屏翻到第50屏，调整测量光强度，按SET键，之后用∧或∨键调整测量光强度数据（可以在0‐12间进行调节），直到F值在200‐500之间。如下图所示
5．注意，调节过测量光强度后，需要对MINI‐PAM重新调零，步骤为：暂时拿掉叶片，调节∧或∨键返回第2屏，按SET键，仪器自动调零（也就是测量时，背景信号会被自动剪去）。如果在调节过测量光强度或者Gain值后，不做此步，仪器会显示 ？NEW OFFSET？ 以提示自动调零！如下图
6．通过∧或∨键到第15屏，设置Act‐Light光化光强度，按SET键，通过∧或∨键设置，光强梯度可以在1‐12（此处的数值是光强梯度，不是实际PAR值，实际PAR值在屏幕右下角 L处查看）间选择。
Act‐ Light强度可根据需要或植物生长环境光强设置。
最大光量子产量Fv/Fm及实际光量子产量Yield的测量：
1．用黑布将待测叶片或枝条蒙上，暗适应处理20分钟以上。（最好开机之前就进行提前处理完毕），遮光情况下将叶片夹上。
2．通过∧或∨键到第25屏，按SET键，测量Fo和Fm，得到Fv/Fm，一秒钟之后，最大光量子产量Fv/Fm 测量完毕。此功能可以利用双键：MODE+MEM直接完成。如下图所示
3．打开光化光（或者将黑布取出，让样品处在太阳下）：通过∧或∨键到第12屏，按SET键，将ACT‐LIGHT
打开。此时，窗口左上角会有ACT字样闪烁。如下图
4．待荧光值稳定后（大约三到五分钟），点击“START”按钮，即可测量一组在对应光强下叶片的实际光量子产量Yield及其他所有的荧光参数。所有操作请尽量用黑布将测量头遮盖，避免外界光对实验的影响。
慢速荧光诱导动力学曲线的测量：
1．先对样品暗处理20分钟以上（用黑布或黑色塑料套子均可）。
2．设置光化光强度，如上第6步所述。
3．设置光化光照光时间：通过∧或∨键调节到第14屏，按SET 键，并利用∧或∨键来选择设定，时间步长为10s。注意，为了防止仪器内部过热，光化光持续时间最大设置值为5min。如下图所示
4．设置诱导曲线延迟时间：通过∧或∨键调节到第23屏，按SET键，并利用∧或∨键设置荧光诱导曲线中，测量Fv/Fm后到打开光化光之间的延迟时间。默认值为40s,一般选择默认值即可。如下图
5．设置诱导曲线饱和脉冲间的间隔时间：通过∧或∨键调节到第24屏，按SET键，并利用∧或∨键设置荧光诱导曲线中，连续打开两个饱和脉冲的间隔时间。默认值为20s,可以在5s—3min范围内设置，一般选择20s或30s即可。如下图
6．执行诱导曲线程序：通过∧或∨键调节到第21屏，按SET键执行诱导曲线，数据会自动记录，待曲线执行完毕即可。如下图
快速光响应曲线的测量：
1．设置快速光曲线初始光强：通过∧或∨键调节到第20屏，按SET键，并利用∧或∨键调节快速光曲线的初始光强，可以在1‐5间选择（阳生性植物，建议在3‐5间选择；阴生性植物，建议在1‐3间选择）。如下图
2．设置快速光曲线的光强梯度的照光时间：通过∧或∨键调节到第19屏，按SET键并利用∧或∨键调节快速光曲线每个光化光强的持续时间，一般设置为10s或20s即可，为了避免内部过热，每个光
强梯度的最大持续时间为3min。如下图
3．执行快速光响应曲线程序：通过∧或∨键调节到第17屏，按SET键执行快速光响应曲线，数据会自动记录，待曲线执行完毕即可。
实验数据的导出保存：
1．使用WinControl_2.08软件，参考以下2‐4步骤：
2．MINI‐PAM关机，用RS232线（串口线）连接MINI‐PAM和电脑。
3．打开WinControl软件，点击File下拉菜单中的Data Transfer from PAM。如下图
4．出现传输界面，用户可以选择传输哪些数据（从First Data到Last Data），点击Start Transfer开始数据传输。打开Report可以查看数据。如下图
5．使用WinControl_3.18软件，参考以下6‐10步骤：
6．MINI‐PAM关机，用RS232线（串口线）连接MINI‐PAM和电脑。
7．打开WinControl_3.18软件，点击Memory选项卡，点击Download按钮，将主机中的数据导入软件，如下图
8．选择选项Clear existing data before Download如下图
9．开始从主机下载数据到软件，如下图所示
10．进入Report界面，将右侧所有参数均勾选上，点击OPtions，在下拉菜单中选择Export All，选择保存路径，即可以将全部数据下载下来，如下图所示
注意事项：
1. MINI-PAM属于高级研究型仪器，仪器应轻拿轻放，操作前请仔细阅读操作指南。
2.保持仪器清洁，注意防尘，远离水和潮湿的地方。特别是主机和叶夹2030-B更应防潮和防尘。只要
把敏感部位（如微型光量子探头）用塑料袋包住，即使在极端环境中（如潮湿或有风沙的地方）仪器也可正常操作运行
3.建议使用带过载保护功能的接线板连接仪器，以防止由于电压剧烈波动造成仪器烧坏。
4.严格按照操作手册连接电源，禁止在MINI-PAM 开机的情况下连接外接电源！！！
5.禁止过度弯曲光导纤维！禁止将光纤末端对着眼睛，防止灼伤！！！
6.光源不用时应当关闭，这样可以延长光源的寿命。
7.测量间隙较长时应关闭主机，这样可以省电。仪器长期放置不用时，应每隔2个月充电一次！
8.每次测量开始前应通过调节“Gain”、测量光强或光纤与样品间的距离使只打开测量光时的荧光Ft（即
Fo）在200～500 之间
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