血清总脂含量的测定实验报告

血清总脂含量的测定实验报告
血清总脂含量的测定实验报告

血清总脂含量的测定实验报告

一、实验目的

1.掌握香草醛法测定总脂的原理和方法;

2.了解正常动物正常的血清总脂含量。

二、实验原理

1.血清总脂指血清中各种脂类的总和。测定方法有称量法,比色法等。本实验采用的香草醛法,属于常用的比色法。

2.血清中的脂类,尤其是不饱和脂类与浓硫酸共热作用,经水解后生成碳正离子。试剂中的香草醛与浓磷酸的羟基作用生成芳香族的磷酸脂,由于改变了香草醛分子中的电子分配,使醛基变成活泼的羰基。此羰基可与碳正离子起反应,生成红色的醌化合物,其强度与碳正离子成正比。反应式略

三、实验仪器与试剂

6mg/ml胆固醇标准液,显色剂,浓硫酸,浓磷酸

四、实验步骤

取4支洁净试管

编号空白管标准管测定管1 测定管2

血清--0.02 0.02

标准液-0.02 --

浓硫酸 1.0 1.0 1.0 1.0

充分混匀,放置沸水浴中10min,使脂类水解,冷水冷却

植物油碘值测定

“植物油碘值测定”的模拟考核方法 吉林省粮油卫生检验监测站曹占文 吉林中储粮质量检测中心有限公司杜东欣 碘值检验及其考评的意义:碘值的大小在一定范围内反映了油脂的不饱和程度,因此可以根据油脂的碘值判断油脂的干性程度。碘值大于130的油脂属于干性油,可以用做油漆;小于100的油脂属于不干性油;在100~130之间的油脂则为半干性油。本项目的检验过程,涉及试样称量、溶液的量取和转移、滴定、计算等多项基本的实用操作技能,所以,此项目常常作为技能鉴定实际操作考题。 一、经典方法原理 将试样溶解在溶剂中并加入Wijs试剂,在规定的时间后加入碘化钾和水,用硫代硫酸钠溶液滴定析出的碘。根据试样消耗硫代硫酸钠的量计算碘值。 碘值是指试样在标准规定的操作条件下,100g油脂样品发生加成反应所需碘的克数。 二、试剂 1.100 g /L碘化钾溶液(不含碘酸盐或游离碘); 2.5g/L淀粉溶液:将5g可溶性淀粉在30mL水中混合,加此混合液于1000mL沸水中煮沸3min并冷却; 3.硫代硫酸钠标准滴定溶液:0.1 mol/L 按GB/T 601—2002配制和标定; 4.溶剂:环己烷和冰乙酸等体积混合液; 5.韦氏(Wijs)试剂:含一氯化碘的溶液(以三氯化碘和碘配制,溶解于乙酸和环己烷混合溶剂)。 三、仪器设备

1.分析天平:感量0.1 mg; 2.碘价瓶:500 mL; 3.小烧杯:5 mL。 四、操作流程 五、测定步骤 (一)称样:试样的质量是根据估计的碘值而异,按表中所示称取样品质量。 (二)将称好试样的称量皿或小烧杯放入500 mL碘价瓶中,加入20 mL溶剂溶解试样,准确加入25.00 mL的Wijs试剂,盖好塞子,摇匀后将锥形瓶臵于暗处。 用同样试剂和仪器做空白试验。 对于碘值低于150(g/100g)的样品,锥形瓶应放在暗处反应1h,碘值高于150(g/100g)或已经聚合的物质或氧化到相当程度的物质,应臵于暗处2 h。 (三)反应结束后加20 mL碘化钾溶液,150 mL水。 用标定的硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至浅黄色。加几滴淀

血清尿素测定

【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法,了解其意义。 【原理】血清尿素(Urea)是蛋白质的正常代谢产物。它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。肾性血清尿素含量增加,提示肾小球损伤。是研究药物肾毒性的重要指标之一。 【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴 【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水 【动物】家兔2只 【方法】取家兔2只,1只注射氯化高汞5ml/kg(0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg),另 1只注射等量的生理盐水。48小时后,从家兔耳静脉取血1ml,制取血清,按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。 【结果】记录2只家兔血清尿素含量,比较并分析其差别。 附血清尿素(Urea)测定方法 【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热,缩合生成色素原二嗪化合物。因二乙酰不稳定,不宜直接加入,可由化学反应生成。通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用,产生乙二酰。二乙酰和尿素反应,缩合生成红色的二嗪。根据颜色深浅确定尿素含量的多少。 【试剂】 (1)酸性试剂:在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml,然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。冷至室温,加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。溶解后用蒸馏水稀释至1L,置棕色瓶中冰箱保存,可稳定6个月。 (2)二乙酰-肟溶液:称取二乙酰-肟20g,加蒸馏水约900ml,溶解后,再用蒸馏水稀释至1L,置棕色瓶中,贮放冰箱内可保存半年。

(3)尿素标准贮存液(100mmol/L):称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g,溶解于蒸馏水中,并稀释至100ml,加0.1g叠氮钠防腐,置冰箱内可稳定半年。 (4)尿素标准液应用液(5mmol/L):取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml. 【操作】按表T4-1进行 混匀后,置沸水中加热12分钟,置冷水中冷却5分钟后,用分光光度计在波长540nm, 以空白管调至零点。比色读取标准管及测定管的吸光度。 【计算】 【正常参考值】 2.86~8.20mmol/L 尿素 【注意事项】 1.本法线性范围达14 mmol/L 尿素,如遇高于此浓度的标本必须用生理盐水作适当的稀释后重测,然后乘以稀释倍数报告之。 2.试剂中加入硫氨脲和镉离子,增进显色强度和色泽稳定性,但仍有轻度退色现象(每小时小于5%)。加热显色冷却后应及时比色。 3.吸管必须校正,使用时务必注意清洁干净,加量务必准确。 4.世界卫生组织推荐用mmol/L尿素表示浓度,不再使用尿素氮一词。 5.血清尿素增高的病理因素常见于肾脏原因,肾脏原因又可分为肾性、肾前或肾后:①肾性:急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可见血液中尿素含量增高。②肾前或肾后:引起尿量显著减少或尿闭,如脱水、水肿、腹水、循环功能衰 竭、尿路结石或前列腺肿大引起的尿路梗阻等均可引起血清尿素含量升高。此外,生理因素也可导致血清尿素增高。如体内蛋白质分解过多:急性传染病、上消化道出血、大面积烧伤、大手术后和甲状腺功能抗进等。虽然血清尿素增高,此时其它肾功能试验结果一般均正常。

报告示例:实验三__醋酸解离度和解离常数的测定

山东轻工业学院实验报告 成绩 课程名称 基础化学实验1 指导教师 周磊 实验日期 院(系) 专业班级 实验地点 实验楼A 座412 学生姓名 学号 同组人 实验项目名称 醋酸解离度和解离常数的测定 一、实验目的 1. 学习正确使用酸度计。 2. 进一步练习溶液的配制与酸碱滴定的基本操作。 3. 用 pH 法测定醋酸的解离度和解离常数。 二、实验原理 HAc 为一元弱酸,在水溶液中存在如下解离平衡: HAc = H + + Ac - K a 起始浓度 (mol ?L -1) c 0 0 平衡浓度 (mol ?L -1) c –c α c α c α K a 表示 HAc 的解离常数 , α 为解离度 , c 为起始浓度。根据定义: 醋酸溶液总浓度 c 可以用 NaOH 标准溶液滴定测定。配制一系列已知浓度的醋酸溶液,在一定温度下,用酸度计测出其 pH 值,求出对应的 [H + ],再由上述公式计算出该温度下一系列对应的 α 和K a 值。取所得的一系列K a 值的平均值,即为该温度下醋酸的解离常数。 三、主要仪器和试剂 仪器 :酸度计, 碱式滴定管 (50mL), 锥形瓶 (250mL), 移液管 (25mL), 吸量管 (5mL), 容量瓶 (50mL), 烧杯 (50mL) 试剂:HAc 溶液, NaOH 标准溶液, 酚酞 四、实验步骤(用简洁的文字、箭头或框图等表示) 1. 醋酸溶液浓度的测定 2. 配制不同浓度的醋酸溶液 2 [H ]1a c K c θ ααα += = -

3. 不同浓度醋酸溶液pH 值的测定 五、结果记录及数据处理 表1 醋酸溶液浓度的测定 表2 HAc解离度和解离常数的测定

两种不同检测方法测定血清钙离子的比较

两种不同检测方法测定血清钙离子的比较【摘要】为了比较在宁夏彭阳县人民医院检验科实验室两种血清钙离子检测方法的分析性能,分别采用恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PH Analyzer分析仪的离子选择电极法(简称恒星)和上海爱诺电子有限公司MOL—300全自动生化分析仪及配套出品的甲基麝香草酚蓝比色法试剂盒(简称爱诺)进行测定,比较指标为不精密度、线性范围、抗干扰性、相关及偏倚。结果,血清钙离子浓度在0~3.95mmol/L时,两家分析仪在本实验室总的变异系数(CV)<5%,检测线性范围为0~4.0mmol/L。血红蛋白<10g/L、胆红素<300mg/L、维生素C<5 g/L,对两分析方法检测干扰<10%,在可接受范围内。甘油三酯(TG)<20 mmol/L时恒星不受影响(干扰<10%)。爱诺TG>15mmol/L时低值血清干扰>10%,高值血清不受干扰。50份血样进行相关分析的结果显示恒星和爱诺测定血清钙离子的相关性良好(r=0.98,P<0.01)。恒星较爱诺测定血清钙离子结果偏低,平均偏倚为0.19,线性回归分析Cusum检验显示两种方法间偏移无统计学意义(P>0.05)。实验室温度变化±5℃恒星测定血清钙离子结果不受影响而爱诺受温度影响较大,对同一份样本用恒星与爱诺测定血清钙离子的最小至最大偏差范围为1.3%~20%,平均为4.1%。本实验室两种不同检测方法测定血清钙离子的精密度、线性范围、抗干扰性符合要求。 【关键词】血清钙离子;离子选择电极法;比色法 宁夏彭阳县人民医院检验科实验室原有一台恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PH Analyzer分析仪,现又购买一台上海爱诺电

韦氏法测定花生油中的碘值

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/3c15900248.html, 韦氏法测定花生油中的碘值 作者:胡敏 来源:《科技风》2016年第17期 摘要:花生油的不饱和度可以用氯化碘加成法进行测定,氯化碘加成法也称韦氏法,笔 者利用韦氏法测定出花生油中的碘值。 关键词:韦氏液;测定;花生油;碘值 伴随着我国国民经济的快速发展,国民生活水平也有了明显的提高,日常的膳食结构发生了较大的改变。油脂是现代居民膳食中非常重要的一部分,油脂可以为人体机能的正常运行提供必要的热量、能量和其他的营养物质。 脂肪酸是油脂的主要成分,油脂中的不饱和脂肪酸可以保证细胞的正常生理功能、降低血液粘度及胆固醇含量、改善血液循环、提高脑细胞活力、增强记忆力及思维能力;与此同时油脂中还有饱和脂肪酸,如果过量摄入饱和脂肪酸就会造成血粘度和血压升增高,进而引发心脑血管疾病,威胁人们的生命健康安全。 由此可知,在评定食用油营养水平高低时,油脂中不饱和脂肪酸的含量是重要评测指标,对油脂中不饱和脂肪酸的检测有助于规范食用油生产,保障人们饮食安全。 不饱和度是用来衡量油脂中不饱和脂肪酸的含量,不饱和度则是用油脂碘值来体现。这里说的油脂碘值,就是在规定的条件下,每100g油脂加成反应所需要加入碘的克数,碘值越高,就表示油脂的不饱和度越高,不饱和脂肪酸含量越大。 有很多种方法可以用来检测油脂碘值,其中氯化碘加成法又称为韦氏加成法,这个方法有操作简单、快速、结果准确等特点,是测定油脂碘值的最常用的方法。 1 基本原理 将过量的氯化碘溶液和不饱和化合物分子中的双键进行定量的加成反应: 反应完全后,加入碘化钾溶液,与剩余的氯化碘作用析出碘,以淀粉作指示剂,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,同时做空白试验。 KI + ICI → I2 +KCI I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6 分析结果计算如下:

《诊断学》 第二节 血清脂质和脂蛋白检测

第二节血清脂质和脂蛋白检 测 一、血清脂质检测 血清脂质包括胆固醇、三酰甘油、磷脂(phospholipid)和游离脂肪酸(free fattyacid,FFA)。血清脂质检测除了可作为脂质代谢紊乱及有关疾病的诊断指标外,还可协助诊断原发性胆汁性肝硬化、肾病综合征、肝硬化及吸收不良综合征等。 (一)总胆固醇测定 胆固醇(cholesterol,CHO)是脂质的组成成分之一。胆固醇中70%为胆固醇酯(cholesterol esterase,CE)、30%为游离胆固醇(free cholesterol,FC),总称为总胆固醇(total cholesterol,TC)。CHO检测的适应证有:①早期识别动脉粥样硬化的危险性。②使用降脂药物治疗后的监测。 【参考值】 ①合适水平:<5.20mmol/L。②边缘水平:5.23~5.69mmol/L。③升高:>5.72mmol/L。 【临床意义】 血清TC水平受年龄、家族、性别、遗传、饮食、精神等多种因素影响,且男性高于女性,体力劳动者低于脑力劳动者。因此,很难制定统一的参考值。根据CH0高低及其引起心、脑血管疾病的危险性分为合适水平(desirable)、边缘水

平(boar-denline)和升高(或减低)即危险水平(risk)。作为诊断指标,TC不特异,也不灵敏,只能作为某些疾病,特别是动脉粥样硬化的一种危险因素。因此,测定TC常作为动脉粥样硬化的预防、发病估计、疗效观察的参考指标。TC变化的临床意义见表4-7-5。肝脏病胆固醇变化的临床意义见第六章第一节。 (二)三酰甘油测定 三酰甘油(triglyceride,TG)是甘油和3个脂肪酸所形成的酯,又称为中性脂肪(neutral fat)。TG是机体恒定的供能来源,主要存在于β一脂蛋白和乳糜颗粒中,直接参与CHO 和CE的合成。TG也是动脉粥样硬化的危险因素之一。TG检测的适应证有:①早期识别动脉粥样硬化的危险性和高脂血症的分类。②对低脂饮食和药物治疗的监测。 【参考值】

药物分析实验报告

实验四苯甲酸钠的含量测定 一、目的 掌握双相滴定法测定苯甲酸钠含量的原理和操作 二、操作 取本品1.5g,精密称定,置分液漏斗中,加水约25mL,乙醚50mL和甲基橙指示液2滴,用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定,随滴随振摇,至水层显持续橙红色,分取水层,置具塞锥形瓶中,乙醚层用水5mL洗涤,洗涤液并入锥形瓶中,加乙醚20mL,继续用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定,随滴随振摇,至水层显持续橙红色,即得,每1mL的盐酸滴定液(0.5mol/L)相当于72.06mg的C7H5O2Na。 本品按干燥品计算,含C7H5O2Na不得少于99.0% 三、说明 1.苯甲酸钠为有机酸的碱金属盐,显碱性,可用盐酸标准液滴定。 COO Na +H C l COOH +N aC l 在水溶液中滴定时,由于碱性较弱(Pk b=9.80)突跃不明显,故加入和水不相溶混的溶剂乙醚提除反应生成物苯甲酸,使反应定量完成,同时也避免了苯甲酸在瓶中析出影响终点的观察。 2.滴定时应充分振摇,使生成的苯甲酸转入乙醚层。 3.在振摇和分取水层时,应避免样品的损失,滴定前,使用乙醚检查分液漏斗是否严密。 四、思考题 1.乙醚为什么要分两次加入?第一次滴定至水层显持续橙红色时,是否已达终点?为什么? 2.分取水层后乙醚层用5mL水洗涤的目的是什么? 实验五阿司匹林片的分析 一、目的 1.掌握片剂分析的特点及赋形剂的干扰和排除方法。 2.掌握阿司匹林片鉴别、检查、含量测定的原理及方法。 二、操作 [鉴别] 1.取本品的细粉适量(约相当于阿司匹林0.1g),加水10mL煮沸,放冷,加三氯化铁试液1滴,即显紫堇色。 2.取本品的细粉(约相当于阿司匹林0.5g),加碳酸钠试液10mL,振摇后,放置5分钟,滤过,滤液煮沸2分钟,放冷,加过量的稀硫酸,即析出白色沉淀,并发生醋酸的臭气。 [检查] 游离水杨酸 取本品的细粉适量(约相当于阿司匹林0.1g),加无水氯仿3mL,不断搅拌2分钟,用无水氯仿湿润的滤纸滤过,滤渣用无水氯仿洗涤2次,每次1mL,合并滤液和洗液,在室温下通风挥发至干;残渣用无水乙醇4mL溶解后,移至100mL量瓶中,用少量5%乙醇洗涤容器、洗液并入量瓶中,加5%乙醇稀释至刻度,摇匀,分取50mL,立即加新制的稀硫酸铁铵溶液[取盐酸液(1mol/L)1mL,加硫酸铁铵指示液2mL后,再加水适量使成100mL] 1mL,摇匀;30秒钟内如显色,和对照液(精密称取水杨酸0.1g,置1000mL量瓶中,加冰醋酸1mL,

实验七__胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇

生物化学与分子生物学设计实验 (胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇及二乙酰一肟 法测定血清尿素) 小组成员: 班级:麻醉11-2班 日期:2012年12月19 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇及二乙酰一肟法 测定血清尿素

实验目的 1、掌握酶法测定总胆固醇的原理和方法。 2、学习用比色法测定血清尿素。 3、巩固有关胆固醇和尿素的知识。 4、进一步熟练UV2100型分光光度计的 重点、难点: 重点:1、氧化酶法测定总胆固醇的原理 2、二乙酰一肟法测定血清尿素的注意事项 难点:氧化酶法测定总胆固醇的原理 一、实验原理 (一)氧化酶法测定血清总胆固醇 血清总胆固醇(TC)包括:游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)两部分。本实验是胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶和过氧化物酶相偶联发生的偶联反应。 第一步:血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA) 。 第二步:胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2。 第三步:H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物,其颜色深浅与标本中TC含 量成正比。 (二)二乙酰一肟法测定血清尿素 二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物,颜色深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定,故由试剂中二乙酰一肟与强酸作用产生二乙酰。 二、操作步骤 (一)氧化酶法测定血清总胆固醇

终点法检测TC,取试管3支按下表依次加样。 酶法测定TC操作步骤 加入物(μl) 空白管标准管测定管血清--20 标准液或定值血清-20 -蒸馏水20 -- 酶试剂 1 000 1 000 1 000 混匀后,37℃保温10 min,每管加3ml水混匀,用分光光度计比色,于500 nm波长处以空白管调零,读出各管吸光度。 (二)二乙酰一肟法测定血清尿素 取试管3支,按下表依次加样。 二乙酰一肟法操作步骤 加入物(ml) 空白管标准管测定管 血清--0.02 尿素标准应用液-0.02 - 蒸馏水0.02 -- 二乙酰一肟溶液0.5 0.5 0.5 酸性试剂 5.0 5.0 5.0 混匀,置沸水浴加热12min,取出置冷水中冷却5min,以空白管调零,在540nm处读取各管吸光度。 三、注意事项 (一)氧化酶法测定血清总胆固醇 1、最后加酶试剂,各管反应时间应一致; 2、比色应在30min内完成; 3、试管在操作前尽量保持干燥; 4、试剂中酶的质量影响测定结果;

醋酸钠含量测定流程介绍

醋酸钠含量测定流程介绍 醋酸钠,无色无味的结晶体,在空气中可被风化,可燃。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。123℃时失去结晶水。但是通常湿法制取的有醋酸的味道。水中发生水解,呈碱性。在生产生活中需要对其含量进行测定,具体过程如下: 实验目的 1.掌握非水溶液酸碱滴定的原理及操作。 2.掌握结晶紫指示剂的滴定终点的判断方法。 实验原理 醋酸钠在水溶液中,是一种很弱的碱(pKb=9.24),不能在水中用强酸准确滴定,因此需用非水滴定法。选择适当的溶剂如冰醋酸则可大大提高醋酸钠的碱性,可以为标准溶液进行滴定,其滴定反应为:邻苯二甲酸氢钾常作为标定标准溶液的基准物,其反应如下: 由于测定和标定的产物为和,它们在非水介质中的溶解度都较小,故滴定过程中随着标准溶液的不断加入,慢慢有白色混浊物产生,但并不影响滴定结果。本实验选用乙酸酐、冰醋酸混合溶剂,以结晶紫为指示剂,用标准高氯酸-冰醋酸溶液滴定。 仪器试剂 1.仪器:25mL酸式滴定管,250mL锥形瓶。 2.试剂: (1)(0.1mol·L-1):在700~800mL的冰醋酸中缓缓加入72%(质量比)的高氯酸8.5mL,摇匀,在室温下缓缓滴加乙酸酐24mL,边

加边摇,加完后再振摇均匀,冷却,加适量的冰醋酸,稀释至1L,摇匀,放置24h(使乙酸酐与溶液中水充分反应)。 (2)结晶紫指示剂:0.2g结晶紫溶于100mL冰醋酸溶液中。 (3)冰醋酸(A.R) (4)邻苯二甲酸氢钾(A.R) (5)乙酸酐(A.R) 实验步骤 1、滴定剂的标定 准确称取0.15~0.2g于干燥锥形瓶中,加入冰醋酸20~25mL使其溶解,加结晶紫指示剂1滴,用(0.1mol/L)缓缓滴定至溶液呈稳定蓝色(略带紫色),即为终点,平行测定三份。取相同量的冰醋酸进行空白试验校正。根据的质量和所消耗的的体积,计算溶液的浓度。 2、醋酸钠含量的测定 准确称取0.1g无水醋酸钠(0.25g试样三水醋酸钠),置于洁净且干燥的250mL锥形瓶中,加入20mL冰醋酸使之完全溶解,再加5mL乙酸酐,加结晶紫指示剂1滴,用0.1mol/L标准溶液滴至溶液由紫色转变为蓝色,即为终点。平行测定三份,并将结果用空白试验校正。根据所消耗的体积(mL),计算试样中醋酸钠的质量分数。 注意事项 乙酸酐是由2个醋酸分子脱去1分子而成,它与作用发生剧烈反应,反应式为: 同时放出大量的热,过热易引起爆炸,因此,配制时不可使高氯

碘值的测定方法

目 录 1 使用范围 (2) 2 方法来源 (2) 3 原理 (2) 4 试剂与试药 (2) 5 仪器与设备 (3) 6 分析步骤 (3) 7 质量控制 (6)

1使用范围 本方法适用于动植物油脂、脂肪酸类、醇类、胺类以及由它们制成的表面活性剂等原料的碘值测定。 2方法来源 GB/T 5532-2008 动植物油脂碘值的测定 GB/T 13892-2012 表面活性剂碘值的测定 GB/T 601-2002 化学试剂标准滴定溶液的制备 3原理 一定量的试样溶解在溶剂中,先加入韦氏(Wijs)试剂反应一定时间后,再加入碘化钾溶液与剩余的氯化碘溶液反应,用硫代硫酸钠溶液滴定析出的碘,接近滴定终点时加入淀粉溶液指示剂,继续滴定直到蓝色刚好消失,即为滴定终点。主要化学反应式如下: R1CH=CR2+ICl→R1CHI—CHClR2 (1) ICl+ KI →KCl+I2 (2) I2+2NaS2O3→2Na I+ Na2S4O6 (3) 4试剂与试药 方法所用试剂除另有说明外,均为分析纯试剂。所用水应符合GB/T6682中三级水的要求。4.1混合溶剂:将环己烷和冰乙酸等体积混合。 注意:所用冰乙酸不应含有还原性物质。检查方法:取2mL冰乙酸,加少许重铬酸钾及硫酸,若呈绿色,则证明有还原性物质存在。 4.2韦氏(Wijs)试剂 将25 g一氯化碘溶解在1500 mL冰醋酸中,搅拌后置于棕色小口玻璃瓶内,在25 ℃以下保存。(韦氏试剂稳定性较差,使用器皿必须洁净,干燥,需要做空白试验,也可以直接购买商品化的韦氏试剂)。 4.30.5%淀粉指示剂 称取0.5 g淀粉,加30 mL水使成糊状,在搅拌下将糊状物加至100 mL水中,煮沸3 min,淀粉

实验室血清学常用检测方法

常用血清学检测方法介绍 一、酶联免疫吸附试验诊断技术 目前,该项技术已在兽医学上得到广泛的应用,大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。 1、酶联免疫吸附试验的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 2、ELISA的类型 根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型: ①.双抗体夹心法测抗原 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA,就是根据这种原理设计的。 ②.双抗原夹心法测抗体 反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。乙肝HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备,需要根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法。 此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于于间接法。此外,该方法不受被检动物种属差异的限制。

血清脂类测定

血清脂类测定 血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。 目前,对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程,均必须检测血浆(清)中的脂类,通过其含量的变化,对临床疾患提供协助诊断的依据。有关医学科研工作,脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。 1.胆固醇测定 血浆中胆固醇及其酯的含量检测,从方法学上可分为两大类:一类是化学法包括抽提法和直接测定法,这类方法目前仍在沿用;另一类是酶法测定,方法敏感特异快速,并能自动化分析,已常规应用。化学测定法种类多,由于显色反应的特异性不同,其结果有一定的差异。目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。另外,三氯化铁-硫酸反应法(Zak法)具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法,胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点,缺点是特异性差,干扰因素比L-B法多,如冰醋酸中含有的乙醛酸,血清样品中的血红蛋白,胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性,Zak法更适合于科研使用。酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用,国产试剂已能满足临床的需要。胆固醇测定用的标准品,按美国国家标准局(NBS)出品纯度达%,是国际公认的参考物,国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品,已供临床检测血清胆固醇使用。 2.甘油三酯测定 血浆甘油三酯的测定,目前多以化学法和酶法定量。化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性,水解成甘油,并以甘油为计算依据。酶法是以特异酶水解甘油三酯,除去脂肪酸,再测定甘油,方法特异,准确而快速,临床广为应用。目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据,然而血清样品中存在有游离甘油,如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油,多年来一直在研究讨论这一问题。若不减去,其测定值将会高于血清样品中的真值,如果要减去,就必须先测出血清样品中的游离甘油,甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤,实际工作中难以做到。有报道血清样品中的游离甘油实际量是~L,相当于甘油三酯的~L,为此建议,实测的甘油三酯量减去一个校正系数即:甘油三酯(mmol/L)=[×总甘油(mmol/L)](mmol/L)。 这一校正系数也仅适用于健康人,对临床病人并不一定适用。据报道,血清样品的游离甘油一直是个未知数,无法测准。为此,目前临床测定血清甘油三酯时,基本上未考虑游离甘油,因为其含量很少,暂且忽略不记。甘油三酯测定的参考物,推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物(2:1,W/W),此参考物适用于化学法。在酶法测定中,仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。 3.磷脂测定 血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。如需要分别检测各种磷脂,可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。目前,临床仅测定血清磷脂总量。血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。化学法是以磷脂中的磷为定量依据,因为每磷脂分子中都含有一个磷酸根,故将磷脂的磷称为脂性磷。由于血清中磷脂大部分为卵磷脂,其分子量中磷约占4%,故将脂性磷换算成磷脂的系数,一般为25。由于化学法均需要抽提,再测抽提液中的磷脂的磷,血清中的磷酸盐不可能混入抽提液中,因此血清中的磷酸盐对磷脂测定的干扰很少。酶法是利用磷脂酶进行定量测定。生物体中磷脂酶包括磷脂酶A1、A2、C和D四种。磷脂酶D特异性差,均可水解卵磷脂、溶血卵磷脂和神经磷脂,三者约占血清总磷脂的95%,临床多用含磷脂酶d 的试剂进行磷脂的定量测定。 4.游离脂肪酸测定

冰醋酸含量测定报告

冰醋酸含量测定报告 Prepared on 22 November 2020

冰醋酸的成分含量测定方法 实验目的:主要是为了测定供应商提供的冰醋酸的浓度含量是否达到标准要求(CH3COOH%>=98%)。 实验器材:烧杯三个(50ml)锥形瓶两个(带活塞1个)(250ml)酸式滴定管1个100g的精密电子秤一个 .滴管2个 实验原料:100ml的冰醋酸(无色透明液体,具有很强的挥发性,刺激性气味)的氢氧化钠(L的NaoH是无色透明液体,有腐蚀性)酚酞指示剂(主要是为了测 定溶液的碱性)蒸馏水(500ml以上)(注意不能用自来水) 实验原理:主要是通过冰醋酸与氢氧化钠的中和反应,酚酞试剂遇碱变色的原理.往稀释的冰醋酸溶液中滴入的NaOH溶液,直至溶液变成微红色。(通过化学反应, 可知1摩尔的醋酸消耗1摩尔的氢氧化钠。测出消耗多少体积的氢氧化钠, 就可以算出消耗多少摩尔的氢氧化钠,进而计算出消耗多少质量的醋酸,通 过反应消耗醋酸的质量与样品的质量百分比,就求出样品中醋酸的含量百分 比。) 化学反应式: NaOH + CH3COOH = CH3COONa + H2O 计算公式:CH3COOH%={N(NaOH)*V(NaOH)*样品重(g)*1000}*100% 实验步骤:1.先在实验室充分准备好此次实验的器材和实验的原料。(拿一个250ml的锥形瓶(带活塞)到车间的助剂室提取100ml的冰醋酸,并立即盖好塞子。 贴上标签)其他的材料均可在实验室提取。 2. 分别给烧杯编上(1、2、3)号,锥形瓶((装有样品醋酸的为1)、装稀 释的醋酸为2),滴定管(1、2) 3.开电子秤(待电子秤显示数据),接着把烧杯1放到电子称上面称量,调 零。并关闭好各个电子称的各个门。 4.把装有醋酸的锥型瓶半倾,将滴管1伸进醋酸溶液的中间吸取溶液,接着将 滴管1取出,并盖好锥形瓶1瓶子。 5.先打开电子称的顶门,将滴管1伸入电子秤上空中,滴2-3滴()左右的醋 酸溶液,关好电子秤的顶门,待秤上读数稳定,读取读数,并记录读数g。 6.把滴定管放到烧杯2中,迅速打开电子秤的侧门,将烧杯1取出,并用蒸馏 水进行稀释(将蒸馏瓶嘴贴着烧杯1口环绕注入蒸馏水),导入锥形瓶2 中,25ml左右一次,进行四次,共100ml, 7.关闭电子秤,将其他器材与移到滴定管旁边。并在滴定管下方放一张白纸, 防止滴定管漏出的NaOH溶液腐蚀试验台。 8.用滴管2吸取酚酞试剂,往锥形瓶2滴入1—2滴酚酞试剂。 9.倒入适量的氢氧化钠溶液到烧杯3.在将烧杯3的氢氧化钠溶液缓慢的倒入滴 定管中,使得滴定管的液面升到刻度10ml左右。 10.将烧杯3沾取滴定管口溢出的NaOH溶液,读取滴定管的数据,并记录V2. 11.将锥形瓶2放到滴定管的正下方,左手控制滴定管的旋转开关(主要是为 了控制滴定管的滴定速度。)一滴,一滴的放,右手拿着锥形瓶2.晃动锥形

食醋中醋酸含量的测定

醋酸是一种弱酸,如果用强碱氢氧化钠溶液来滴定,在滴定终点突变点前的pH会维持在4~6之间,因此变色范围在4~6之间的指示剂不适合,例如甲基橙就不适合。应该选择酚酞作为指示剂。 2.实验原理 2 1 食醋中的酸性物质主要是醋酸,可以用酸碱中和反应原理,以已知浓度的氢氧化钠溶液进行中和滴定。反应方程式为:CH3COOH+NaOH=CH3COONa+H2O 2 2 NaOH在称量过程中不可避免地会吸收空气中的二氧化碳,使得配制的NaOH溶液浓度比真实值偏高,最终使实验测定结果偏高,因此,为得到更准确的数据,必须将NaOH 溶液以标准酸溶液邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)标定。标定时遵守酸碱中和反应原理,其中参加反应的NaOH与KHC8H4O4的物质的量之比为1∶1。 3.实验用品 31试剂 醋精、糯米甜醋、白醋、陈醋、自制家醋、邻苯二甲酸氢钾、氢氧化钠、活性炭、酚酞。 32仪器 烧杯、容量瓶、玻璃棒、锥形瓶、25mL酸式滴定管、25mL碱式滴定管、漏斗、滤纸、铁架台、托盘天平、25mL移液管、婆梅氏重表、分析天平、洗耳球。 4.实验操作 42食醋的中和滴定 421用移液管准确量取上述滤液各25mL,转移到250mL容量瓶中加蒸馏水到刻度线,配制成稀醋酸溶液。 422将上述各种稀醋酸溶液注入酸式滴定管中并调整液面在“0”刻度线或以下,读取刻度。 423用托盘天平准确称取200g NaOH固体,配制成500mL溶液。 424将上述NaOH溶液注入碱式滴定管中,并调整液面读取刻度。 425根据不同食醋的特点,分别从酸式滴定管中放入约20mL、10mL、5mL溶液于锥形中,滴加2~3滴酚酞指示剂,读取滴定管中刻度。 426左手控制碱式滴定者,右手不断摇晃锥形瓶,当锥形瓶里溶液呈浅红色,且在半分钟内不再褪色,停止滴定,读取滴定管刻度。

血清尿素的测定标准操作规程

血清尿素的测定标准操作规程 【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法,了解其意义。 【原理】血清尿素(Urea)是蛋白质的正常代谢产物。它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。肾性血清尿素含量增加,提示肾小球损伤。是研究药物肾毒性的重要指标之一。 【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴 【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水 【动物】家兔2只 【方法】取家兔2只,1只注射氯化高汞5ml/kg(0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg),另1只注射等量的生理盐水。48小时后,从家兔耳静脉取血1ml,制取血清,按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。 【结果】记录2只家兔血清尿素含量,比较并分析其差别。 附血清尿素(Urea)测定方法 【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热,缩合生成色素原二嗪化合物。因二乙酰不稳定,不宜直接加入,可由化学反应生成。通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用,产生乙二酰。二乙酰和尿素反应,缩合生成红色的二嗪。根据颜色深浅确定尿素含量的多少。 【试剂】 (1)酸性试剂:在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml,然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。冷至室温,加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。溶解后用蒸馏水稀释至1L,置棕色瓶中冰箱保存,可稳定6个月。 (2)二乙酰-肟溶液:称取二乙酰-肟20g,加蒸馏水约900ml,溶解后,再用蒸馏水稀释至1L,置棕色瓶中,贮放冰箱内可保存半年。 (3)尿素标准贮存液(100mmol/L):称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g,溶解于蒸馏水中,并稀释至100ml,加0.1g叠氮钠防腐,置冰箱内可稳定半年。 (4)尿素标准液应用液(5mmol/L):取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml. 【操作】按表T4-1进行 混匀后,置沸水中加热12分钟,置冷水中冷却5分钟后,用分光光度计在波长540nm,以空白管调至零点。比色读取标准管及测定管的吸光度。 【计算】 【正常参考值】 2.86~8.20mmol/L 尿素

巯基乙酸钠含量的测定

巯基乙酸钠含量的测定 1、主题内容与适用范围 本主题的内容是用碘酸钾与碘化钾氧化法测定巯基乙酸含量的方法,适用于分析生产过程中含巯基乙酸(或其盐类)的各种物料,如尾液、酸化液、除臭液、萃取尾液以及各种含巯基乙酸的产品,分析结果均以巯基乙酸百分含量表示。2、原理 碘酸钾在弱酸性溶液中与碘化钾作用,析出的碘氧化巯基乙酸成二硫撑酯酸,反应式如下: KIO3 + 5KI+ 3H2SO4 →3I2 + 3K2SO4 + 3H2O 2HSCH2COOH + I2 →HOOCCH2SSCH2COOH + 2HI 3、试剂及标准溶液 3.1、硫酸溶液,1+1 将100 ml 浓硫酸慢慢地加入100 ml 水中,冷却后使用。 3.2、硫酸溶液,20% 量取128 ml 浓硫酸,慢慢地加入约700 ml 水中,冷却稀释到1000 ml。3.3、碘化钾 3.4、淀粉指示剂,5 g/L 称取0.5g淀粉,加入5ml 水使成糊状。在搅拌下将糊状物加到90ml沸腾的水中,煮沸1-2分钟,冷却稀释到100 ml。 3.5、硫代硫酸钠标准溶液,C(NaS2O3)-0.1mol/L 3.5.1 配制: 称取26g硫代硫酸钠,溶于1000ml水中,缓缓煮沸10分钟。冷却放置两周后过滤备用。 3.5.2 标定: 称取0.15g于120℃烘至恒重的基准试剂重铬酸钾,称准至0.001g,置于500ml碘量瓶中,溶于25ml水中,加2g 碘化钾及20 ml 硫酸溶液(20%),摇匀,于暗处放置10分钟加150ml水,用配好的硫代硫酸钠溶液滴定,近终点时加3ml淀粉指示剂,继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色,同时作空白试验。 3.5.3 计算 硫代硫酸钠标准溶液浓度按下式计算: C(NaS 2O 3 )= m/(V1-V2)*0.04903 式中: V1---硫代硫酸钠溶液之用量,ml V2---空白试验硫代硫酸钠溶液之用量,ml C(NaS 2O 3 )---硫代硫酸钠标准溶液之物之的量浓度,mol/L m---称取重铬酸钾的量,g 0.04903---重铬酸钾,1/6 重铬酸钾之毫摩尔质量,g/m mol 3.5.4 标定允差,平行测定不得少于四次,四次平行测定值的极差不大于0.0001 mol/L时取平均值。 注:也可以准确称取5g烘至恒重的重铬酸钾溶于1000ml容量瓶中,在此准确量取30ml重铬酸钾标准溶液用以标定硫代硫酸钠溶液。

油脂碘值的测定方法研究

油脂碘值的测定方法研究 钟国清 (西南科技大学材料科学与工程学院,四川绵阳 621002) 摘 要:报道了一种测定油脂碘值的新方法,不改变Hanus法操作步骤,只需在测定过程中加入催化剂醋酸汞。与Hanus法测定碘值相比,测定反应由30min缩短为4min即可完成,本法相对误差小于0.5%,变异系数小于0.2%。 关键词:油脂碘值;醋酸汞催化法;Hanus法 中图分类号:TS227 文献标识码:B 文章编号:1007-7561(2004)01-29-02 Study on determination method of Iodine value of oil and fat Z HONG Guo qing (Colle ge of Ma terials Science and Engineering,South West University of Science and Technology,Sichuan 621002) Abstract:A ne w method for determining the iodine value of oil and fat is reported.The method only requires to add the catalyst mercurit acetate in the process of determination without changing the operational procedure of the Hanus method.C ompared with the Hanus method in which it will take at least30minutes to finish it,this method can make the determination reaction finished in4minutes.The experimental results indicate that the relative er ror is lower than0.5%and coefficient of variation is lower than0.2%. Key words:oil and fat;iodine value;determination;method of catalyst mercuric acetate;Hanus method 碘值(100g脂肪在一定条件下所吸收碘的克数)是鉴别油脂的重要参数,常用哈纳斯(Hanus)法和魏吉斯(Wijs)法测定[1]。Hanus法的测定反应是在多相体系中进行的,溴化碘与脂肪的加成反应速度较慢,一般完成测定反应需要30min[2]。为提高碘值的测定速度,本文采用醋酸汞作催化剂,使碘值测定反应在4min内即可完成,测定结果与Hanus法吻合,精密度和准确度高,方法快速、简便。 1 实验 1.1 实验材料及试剂 油样:菜籽油,花生油,棉籽油,玉米油,葵花籽油。 Hanus试剂:将13.2g碘溶于1L冰乙酸中,冷却时加入3mL液溴,混匀; 0.1mol/L Na2S2O3标准溶液;2.5%酯酸汞的冰乙酸溶液;10%KI溶液;1%淀粉溶液;四氯化碳。所有试剂均为分析纯。 1.2 测定方法 收稿日期:2003-09-25 作者简介:钟国清(1965 ),男,四川内江人,教授.用分析天平准确称取油样0.2~0.5g(精确至0. 0001g)至干燥的碘量瓶中,加入四氯化碳10mL,轻轻摇动,使试样全部溶解,用移液管准确加入Hanus 试剂25mL,再加入2.5%醋酸汞的冰乙酸溶液10mL,立即塞好瓶塞。在瓶塞与瓶口之间加数滴10%KI溶液封闭缝隙,以防止碘挥发而造成测定误差,在20 ~30 暗处放置4min,小心打开瓶塞,使瓶塞旁KI溶液流入瓶内,并用10%KI溶液10mL和蒸馏水50mL把瓶塞和瓶颈上的液体冲入瓶内,摇匀后用0.1mol/L Na2S2O3标准溶液迅速滴定至浅黄色,加入1%淀粉溶液1m L,继续滴定,接近终点时用力振荡,使碘由四氯化碳全部进入水溶液中,再滴定至蓝色消失为止,记录所消耗的硫代硫酸钠标准溶液的毫升数。 另做空白对照试验,除不加试样外,其余操作同上。按下式计算碘值: 碘值= c(V0-V) 126.9 1000 G 100=c(V0-V) 126.9 G 式中:V0 滴定空白所耗Na2S2O3标准溶液体积,mL; V 滴定试样所耗Na2S2O3标准溶液体 积,m L; 粮油食品科技第12卷2004年第1期质量控制

醋酸电离常数的测定实验报告

醋酸电离常数的测定实验报告 篇一:实验四醋酸解离常数的测定 实验四醋酸解离常数的测定 (一) pH法 一. 实验目的 1. 学习溶液的配制方法及有关仪器的使用 2. 学习醋酸解离常数的测定方法 3. 学习酸度计的使用方法二. 实验原理 醋酸(CH3COOH,简写为HAc)是一元弱酸,在水溶液中存在如下解离平衡: HAc(aq) + H2O(l) ? H3O+(aq) + Ac- (aq) 其解离常数的表达式为 [c (H3O+)/cθ][c(Ac-)/ cθ] Kθa HAc(aq) = —————————————c(HAc)/ cθ 若弱酸HAc的初始浓度为C0 mol?L-1,并且忽略水的解离,则平衡时: c(HAc) = (C0 – x)mol?L-1 c (H3O+) = c(Ac-)= x mol?L-1 x Kθa HAc = ———— C0– x 在一定温度下,用pH计测定一系列已知浓度的弱酸溶液的pH。根据PH = -㏒[c (H3O+)/cθ],求出c (H3O+),

即x,代入上式,可求出一系列的Kθa HAc,取其平均值,即为该温度下醋酸的解离常数。 实验所测的4个p Kθa(HAc),由于实验误差可能不完全相同,可用下列方式处理,求p Kθa(HAc)平均和标准偏差s: n ∑ Kθai HAc i=1 θ Ka HAc = ———————— n S = 三.实验内溶(步骤) 1.不同浓度醋酸溶液的配制 2.不同浓度醋酸溶液pH的测定四.数据记录与处理 温度_18_℃ pH计编号____标准醋酸溶液浓度_0.1005_mol?L-1 实验所测的4个p Kθa(HAc),由于实验误差可能不完全相同,可用下列方式处理,求p Kθa(HAc)平均和标准偏差s: n ∑ Kθai HAc i=1 Kθa HAc = ————————

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