253 许克波 121140066 线虫
线虫观察的结果与结论
253 许克波 121140066
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一、实验内容
1. 倒培养基，细菌涂布，接种线虫；
2. 观察卵、幼虫（L1,L2,L3,L4期）、成虫的形态；
3. 传代：挖2—3mm2的培养基放入新的培养基中；
4. 同步化（去污染）：将一滴消化液滴在平板的边缘，挑取4—5只青年成虫放入消化液中3-4min，消化成虫，只保留虫卵。（注意不要滴消化液滴的过早，消化液会干掉；滴上消化液之后马上挑线虫。）
5. 热激：L4期10只左右放到新平板上，30℃4-8小时。（一般的线虫雄虫的比例大概为2/1000，热激可将这个比例提升到1/100左右。）
6. 杂交：将热激过的线虫从中挑出雌虫和雄虫放入一个平板中；
7. 染色：利用200μL缓冲液冲洗培养基，洗下秀丽隐杆线虫，分别置于1.5 mL 的EP管中，于1 000 r/min离心1 min，弃上清。添加200μL红墨水，混匀，染色30 min。于1000 r/min离心1 min，弃上清。M9缓冲液冲洗、离心，重复3次后，置于体式显微镜下观察并拍照。
8. Dpy-5：验证遗传规律
二、实验结果及结论
正常情况下线虫形态观察:
酒精处理过后的染色结果：
裂解液处理过后的染色结果：
红墨水染色观察：
实验结论及注意事项：
1、接种细菌不要涂满整个平板，因为线虫以细菌为食，涂满的话线虫可能会爬出平板，如果细菌的面积远离平板边缘的话就可以避免这种情况的发生；
2、消化液是极具腐蚀性的，注意操作者不要弄到自己的身上。消化液的消化效果很好，基本上会把所有的虫体消化掉，但是线虫的卵非常的稳定，能够不受消化液的侵蚀。所以消化之后只剩下虫卵；
3、有害的生物染料不能透过细胞膜对活细胞进行染色，而死细胞的细胞膜遭到了损害，失去了选择透过性因此能被染色；
4、Dpy-5遗传规律验证实验因为雄虫没有找出来，所以小组没有结果。
植物线虫病害及防治
植物线虫病害及防治 1、什么是植物寄生线虫？它是什么样子？ 线虫又称蠕虫，是一类较低等的动物，它们在自然界分布很广，种类繁多。在淡水、海水、池沼、沙漠和各种土壤中都有存在，而其中最大量是存活于土壤及水中；也有不少类群寄生在动物上，如常见的蛔虫、钩虫等，对人畜的健康带来很大的危害；还有一些类群寄生在植物上，引起植物发生病害，这些寄生在植物上的线虫、就称为植物寄生线虫。植物寄生线虫是植物侵染性的病原之一，它们广泛寄生在各种植物的根、茎、叶、花、芽和种实上，使植物发生各种线虫病。 植物寄生线虫绝大多数为雌雄同形，即雌雄虫均呈线状，细长透明，虫体很小。一般体长仅1毫米，体宽0.05毫米左右，要借助解剖显微镜才能看清。这类线虫的种类和数量都很多，分布又广泛，凡是有土壤和水的地方都有可能存在。还有少数植物线虫是雌雄不同形状的，雌虫呈梨形、球形或囊状，而雄虫仍呈线状。最常见的如根结线虫、胞囊线虫、肾状线虫等，它们都是最重要的病原线虫。 由于线虫是一种低等动物，虽然个体细小，但肝胆俱全。所以，线虫虫体内部构造既简单又全面，它有发达的消化系统和生殖系统，这样才能从植物体内吸取它所需要的营养，以使自己顺利生长发育和繁衍大量后代，才能生存于自然界中。但神经系统和排泄系统就很简单了，一般要在高倍显微镜下才能看清楚这些内部结构。 2、植物线虫怎样为害植物？有什么危害性？ 植物线虫和其它植物的病原不同之处在于它有主动侵袭寄主和自行移动为害的特点，它们对植物为害，除吸取寄主的营养和对植物组织造成机械损伤外，主要在于植物线虫的食道腺可分泌有毒物质，这些物质是多种消化酶，诱发寄主组织发生各种病理变化，可使植物组织细胞发育过度，形成巨型细胞，或使细胞中胶层溶解引起细胞分解，细胞壁被破坏，造成根部和皮层形成空洞及细胞死亡。 最常见的是植物细胞体积膨大，最典型的就是根结线虫为害植物后所形成的巨型细胞，结果在根上可形成大小不等的瘤叫“根结”；又如穿孔线虫为害柑桔后，使细胞壁分解，结果被害根部的皮层形成典型的空洞，最后导致根腐烂；也有的线虫分泌物则表现强烈的抑制作用，使根停止生长，植物生长受到抑制而表现矮化。以上表现，说明植物线虫分泌物的化学作用能对植物细胞及组织产生的影响，最终使植物生长衰弱，产量降低，品质变劣，甚至死亡。 此外，有的线虫可以传播病毒，而使植物发生某种病毒病，这样，增加和扩大了病毒病的发生，这种危害性也是相当大的。同时，线虫还与其他病原如真菌、细菌互相作用，共同致病，造成复合病害，加重病害的发生。所以，线虫与农业生产关系密切，应引起人们的注意和重视。
植物病原线虫学思考题
植物病原线虫学复习题 一. 填空 1线虫的胚胎发育过程大致可分为、、、四个阶段。 2植物线虫生长发育的过程可分为、和。 3影响线虫孵化的环境因素主要有、和。 4一般线虫的食道可分为4部分，包括、、和。 5线虫分类中纲的划分是以为判别依据。 6雄虫的肛门与共同开口于。 7植物线虫分类鉴定的依据主要包括、、、 和五方面。 8目前植物寄生线虫主要归属于、、和这四大类中。 9线虫的体壁具有性、性和性。 10在线虫背索、腹索内有，侧索内有。 11目前根结线虫（Meloidogyne spp.）共已描述90多种，其中、、、是最常见的根结线虫。 12在引起植物侵染性病害的五大病原中，植物寄生线虫的危害超过和，仅次于真菌病害。 13植物线虫引起的根部症状主要有、、、、五类。 14 1743年，英国T. Needham发现的是最早被发现的植物病原线虫。 15 1943年，美国W. Carter发明杀线虫剂，该项研究奠定了植物线虫化学防治 的基础。 16线虫学研究的代表性期刊杂志有《》、《》、《》等。 17植物病原线虫绝大多数为雌雄同形，呈线状，如、等。少数植物线虫是雌雄异形的，雄虫呈线状，而雌虫呈梨形、球形或囊状，如、等18线虫只有肌而无肌，虫体只能弯曲而不能变粗或变细，只能借助腹肌和背肌的同时收缩，向前呈波浪状蠕动。 19线虫的口针基本上由3部分组成，前端尖锐部分为，中段为，后部为3个膨大的；而齿针分为两部分，包括前段的部和后段的部，在锥体部和膨大部之间有。 20在线虫的食道与肠交界处的瓣膜结构称为，其功能是。 二. 名词解释 1）植物病原线虫 2）植物线虫分类学3）孤雌生殖4）迁徙性外寄生5）线虫的老化 6）假受精生殖7）蜕皮8）植物病原线虫9）过敏性坏死反应10）植物线虫病害防治 三. 简答 1.植物线虫形态分类中雌虫的特征依据有哪些？ 2.根结属鉴定中的主要形态特征有哪些？
线虫病
线虫病 1.如何鉴定线虫？ 答：形状：多样性; 颜色：多种。体表: 不分节，虫体表面有纵纹、横纹。大小：1mm-1m。体壁：角质层（参与形成的构造，在分类上有意义）；皮下层；肌层。 线虫头尾端的变化：头：具有三片唇---蛔虫；具有口囊，口囊内有切板---钩虫；有叶冠、头泡、侧翼膜--- 结节虫；头部两侧有一对颈乳突---捻转血矛线虫；头部有头感器---肾虫。 尾端：尾感器，尾乳突。 2.猪如何感染蛔虫的？ 答：雌虫产卵→虫卵→含一期幼虫的虫卵→②幼虫的虫卵→猪吞食→卵壳破裂，幼虫：①大多数钻入肠壁血管随血流到门静脉→肝→肝静脉→后腔静脉→右心→肺动脉→肺毛细血管→肺泡→支气管→气管→咽喉→小肠发育为成虫 ②少数随淋巴液进入乳糜管→肠系膜淋巴结 a. 腹腔→肝→肝静脉→后腔静脉→右心→肺动脉→肺毛细血管→肺泡→支气管→气管→咽喉→小肠发育为成虫。 b. 胸导管→前腔静脉→右心→肺动脉→肺毛细血管→肺泡→支气管→气管→咽喉→小肠发育为成虫。 以上生活史中，在肝蜕皮一次为③幼虫，在肺蜕皮一次为四期幼虫，在小肠蜕皮一次为五期幼虫 3.经皮肤感染线虫有哪些？ 答：牛仰口线虫病；猫犬钩虫病；猪冠尾线虫病；猪兰氏类圆形线虫病； 4.经胎盘感染线虫有哪些？ 答：犊新蛔虫病；犬猫蛔虫病； 5.自愈现象 答： 6.捻转血矛线虫有何危害？ 答： 7.类圆线虫生活史 答：如右图
8.旋毛虫中间宿主和终末宿主各是什么？猪如何感染旋毛虫的？ 9.如何诊断旋毛虫病？ 10.牛羊食道口线虫病临床症状是什么？如何诊断该病？ 11.猪肾虫有何危害？如何诊断该病？ 12.寄生于牛羊肺部线虫往往引起何种症状？
针灸补泻手法
附表1-针灸补泻手法 附表2-艾灸使用 附 表 3-电 针仪使用 波形 机理 功用 类型 补泻名称 操作 提 插 补 泻 补法 针下得气后，先浅后深，重插轻提，提插幅度小，频率慢，操作时间短为补法。 泻法 针下得气后，先深后浅，轻插重提，提插幅度大，频率快，操作时间长为泻法。 捻 转 补 泻 补法 针下得气后，捻转角度小，用力轻，频率慢，操作时间短，拇指向前，食指向后（左转用力为主）者为补法。 泻法 针下得气后，捻转角度大，用力重，频率快，操作时间长，拇指向后，食指向前（右转用力为主）者为泻法。 平补 平泻 补泻 针下得气后，施行均匀的提插，捻转手法。 开阖补泻 补法 针下得气后，快速出针，迅速用棉球按压针孔，为补法 泻法 针下得气后，缓慢出针，摇大针孔，为泻法 疾徐补泻 补法 针下得气后，快速出针为补法 泻法 针下得气后，缓慢出针为泻法 迎随补泻 补法 针下得气后，迎着经脉循行的方向刺入，为补法 泻法 针下得气后，迎着经脉来的方向刺入，为泻法 呼吸补泻 补法 针下得气后，患者吸气的时候进针，为补法 泻法 针下得气后，患者呼气的时候出针，为泻法 分类 灸型 类型 功用 艾炷灸 直接灸 无瘢痕灸 虚寒性疾患 瘢痕灸 哮喘、肺痨、瘰疬等慢性顽疾 间接灸 隔姜灸 因寒而致呕吐，腹痛，风寒鼻痛等 隔蒜灸 清热解毒，杀虫等作用，瘰疬，肺痨及痈疡肿毒初期。 隔盐灸 伤寒阴证，吐泻并作，中风脱证 隔附子饼灸 命门火衰而至阳痿，早泄，疮疡久溃不敛。 艾条灸 悬起灸 温和灸 慢性病 雀啄灸 急性病 回旋灸 急性病 实按灸 太乙神针 风寒湿痹，肢体顽麻，痿弱无力，半身不遂等 雷火神针 温和灸 温灸器灸 灯火灸 适于各科病证治疗。 天灸 白芥子灸 痰饮咳喘，胸肋疼痛，反胃呕吐，中风失语，肢体痹痛麻木，脚气，阴疽，肿毒，跌打损伤等 蒜泥灸 捣敷足心，治霍乱转筋、泄泻暴痢、鼻血不止；敷内关治疟。 斑蝥灸 银屑病、头痛、周围性面瘫、神经性皮炎、关节疼痛、黄疸、胃痛、小儿咳喘、痛经等疗效更务确切。
松材线虫及其相似种形态特征
松材线虫形态特征： 雌雄成虫热杀死后虫体均呈蠕虫状；长1mm左右，头部缢缩；口针细长13μm 左右，基部稍增厚但不形成基部球；中食道球卵圆形，占体宽三分之二以上，食道腺长叶状覆盖在肠背面；排泄孔位于食道和肠交接处，有时位于神经环水平处；半月体在排泄孔后三分之二体宽处。 雌虫：单卵巢，前伸，卵母细胞常单行排列；后阴子宫囊长；阴门约于虫体后部四分之三处，被后伸、宽的阴门盖（阴门前唇）所覆盖；尾部亚圆筒状，末端宽圆，无尾尖突，或末端有尾尖突，但不超过2μm。 雄虫：交合刺大，成对，不愈合，交合刺近端喙突明显，尖细，远端有清晰的盘状膨大（突起），雄虫尾弓状，尾端尖细，侧面观呈爪状，为端生的短卵状交合伞包裹。 拟松材线虫形态特征： 雌虫：虫体向腹面微弯，纤细，表面光滑，有浅环纹，侧线4条，唇区高，缢缩。口针细，基部略膨大，中食道球为典型的滑刃型，占体腔的三分之二以上，瓣门发达；神经环位于中食道球下方；背食道腺开口与中食道球内；后食道腺背侧长覆盖肠，其长大约等于4倍体宽；排泄孔的位置大约于神经环平齐，靠近食道和肠交界处。半月体明显，位于排泄孔后1个体宽处。阴门有前阴门盖；单卵巢前伸，卵母细胞单列；后阴子宫囊长，约为肛阴距的三分之二，常见精子。尾端指状，或圆锥形，有尾尖突，端部尖锐，长度在群体中有差异，通常大于2.5μm。 雄虫：虫体呈“J”形，前部特征和雌虫相似。精巢前伸，不折叠；精子圆形，较大，直径5μm~7μm；交合刺为典型的玫瑰刺形，近基部有明显的喙尖突；尾端有交合伞，交合伞的形状因地区等因素存在种群间差异。 伪伞滑刃线虫形态特征： 雌虫：雌虫虫体较纤细, 大小中等, 缓慢加热杀死后向腹面稍弯曲; 体环细且明显, 侧区有4 条侧线; 头部缢缩, 唇瓣6 片; 口针长12.7- 13.1μm, 针锥细尖, 长度接近口针长的一半, 基杆较粗, 基部略膨大; 食道前体部圆筒形, 长约为中食道球的4倍, 与中食道球连接处无明显缢缩; 中食道球卵圆形, 瓣膜清晰, 位于中食道球中部或稍偏前; 食道腺长叶状, 长度约为体宽的2- 4倍, 覆盖于肠背面; 神经环位于中食道球后,排泄孔位于神经环水平处; 单生殖腺单管, 直、前伸, 长度约为体长的50%; 阴门位于虫体中后部, 前阴唇明显向后伸, 形成大阴门盖; 后阴子宫囊长约为肛阴距的1/2 至3/4, 肛阴距约为尾长的4倍; 尾部亚圆锥形, 尾长为肛门处体宽的3倍; 末端指状, 在近腹面有一尾尖突, 长2.0- 2.5μm，一般不超过3μm。 雄虫：前部与雌虫相似, 尾部弯成钩状, 单精巢、前伸; 交合刺大, 弓状, 成对, 不愈合, 啄突明显, 交合刺远端缢缩后稍为膨大; 尾末端有离肛形交合伞, 交合伞呈圆铲状, 包住尾部1/3- 1/2 ; 尾部有1个肛前乳突、1对肛侧乳突和1对肛后乳
植物线虫考试复习题
一、名词解释（15分，每个3分） 1、口针：植食性线虫口腔中常有一个中空的针，用于穿刺植物组织，吸取汁液。 2、会阴花纹：根结线虫雌虫阴门周围角质膜形成的特征性花纹，是根结线虫属下 “种”分类鉴定的重要依据。 3、线虫生活史：线虫从卵开始到又产生卵的过程，包括卵、幼虫、成虫三个虫态， 幼虫又分为4个龄期。 4、迁移性内寄生线虫：线虫虫体进入植物组织后不是固定不动，而是在组织内移 动，最后造成大范围根组织坏死，如短体线虫属。 5、连作障碍：同一作物或近缘作物连续多年种植后，即便在正常的管理条件下， 作物的生长发育缓慢或者病虫害发生越来越严重，最终导致产量降低、品质下降的状况。 6、交合伞：在线虫的雄虫尾部侧面常有透明的膜状结构，又称抱片，交配时起定 向和固定的作用。 7、泄殖腔：是雄虫的特殊结构，雄虫的消化管和生殖管共同开口在泄殖腔中。泄 殖腔内有一对交合刺，有的还有引带和交合伞等附属器官。 8、德曼（氏）公式：依据显微测定的线虫形态学特征，所制定的一套线虫分类鉴定的指标体系。 二、翻译拉丁学名成中文属名(十选五，10分，每个2分) Meloidogyne 根结线虫属Heterodera 孢囊（异皮）线虫属 Bursaphelenchus 伞滑刃线虫属Xiphinema 剑线虫属 Radopholus 穿孔线虫属Ditylenchus 茎线虫属 Aphelenchoides 滑刃线虫属Tylenchorhynchus 矮化线虫属 Anguina 粒线虫属Pratylenchus 短体线虫属
三、判断题（20分，每小题2分，正确划√，错误划×） 1、只有孢囊线虫是雌雄异型，其他线虫雌雄虫均为线形。（×） 2、只有极少部分的植物病原线虫生活在土壤中或寄生植物根部。（×） 3、根结线虫繁衍后代的方式既有两性生殖，又可进行孤雌生殖。（√） 4、阴门锥是鉴定根结线虫“种”的重要依据。（×） 5、植物病原线虫的侵染期虫态为3龄幼虫。（×） 6、茎线虫能够传播烟草环斑病毒，因为它是外寄生线虫。（×） 7、线虫头部的唇区能够感觉植物根系分泌物的化学刺激。（√） 8、甘薯茎线虫是在20世纪有日本传入我国的。（√） 9、我国是香蕉穿孔线虫病的主要疫区之一。（×） 10、甜菜孢囊线虫病在欧洲的爆发流行直接推动了植物线虫学的发展。（×） 11、顾名思义，所有植物“线虫”均为线形。（×） 12、植物根结线虫的侵染期虫态为2龄幼虫（J2）。（√） 13、植物线虫病害常常被称为“隐蔽性敌害”。（√） 14、植物线虫的长距离传播是主动移动的结果。（×） 15、水稻干尖线虫、柑橘根结线虫均为迁移性内寄生线虫。（×） 16、美洲剑线虫是内寄生线虫，能够传播烟草环斑病毒。（×） 17、水稻干尖线虫病在20世纪由日本传入我国，并首次在天津被发现。（√） 18、线虫头部的口针能直接分泌含有酶类的消化液，从而使植物致病。（×） 19、中国是香蕉穿孔线虫病非疫区，该病原被我国列为一类检疫对象。（√） 20、大豆胞囊线虫病在欧洲的爆发流行直接推动了植物线虫学的发展。（×） 四、填空题（20分，每空2分）
寄生虫复习要点
寄生虫复习要点 一、中间宿主和终末宿主 白蛉：利什曼原虫 中间宿主：猪和人；终末宿主：人。猪囊尾呦 湖北钉螺：日本分体吸虫 蚊：马脑脊髓丝虫、犬心丝虫 虻及吸血蝇：伊氏锥虫 蚯蚓：后圆线虫 扁卷螺：猪姜片吸虫 中间宿主：草食动物；终末宿主草食动物：肉孢子虫 淡水螺（第一中间宿主）：华支睾吸虫，淡水鱼和虾(第二中间宿主) ↖前殖吸虫，蜻蜓稚虫和成虫(第二中间宿主) 金龟子(甲虫)：猪棘头虫 微小牛蜱：又芽巴贝斯虫。蜱：犬巴贝斯虫、马巴贝斯虫、泰勒虫（第一中间宿主：残缘璃眼蜱；第二中间宿主：蜱） 椎实螺：片吸虫 纹绍螺（第一中间宿主）麦穗鱼(第二中间宿主)：后睾吸虫 地螨：莫尼茨绦虫 蜗牛（第一中间宿主）；蚂蚁(第二中间宿主)：歧腔吸虫 ↖鸡绦虫中的四角赖利绦虫、棘沟赖利绦虫 蚋：沙氏住白细胞虫； 蠓：卡氏住白细胞虫、脑脊髓丝虫、混睛虫 二、寄生部位 寄生于红细胞及造血器官、血液、吞噬细胞：弓形虫、利什曼原虫（单核吞噬）、伊氏锥虫、巴贝斯虫、泰勒虫、住白细胞虫。 寄生于肝门静脉和肠系膜静脉：日本分体吸虫 寄生于肺：肺线虫（网尾科、原圆科线虫） 寄生于肝、胆管内：棘球蚴（包虫：寄生于肝肺）、华支睾吸虫、片形吸虫、歧腔吸虫、组织滴虫（黑头病：寄生于肝盲肠）、后睾吸虫、肝片吸虫、兔肝球虫。 寄生于真胃：捻转血矛线虫 寄生于小肠：类圆线虫、姜片吸虫、蛔虫、蛭形巨吻棘头虫、曲子宫绦虫、无卵黄腺属绦虫、仰口线虫(钩虫)、马大裸绦虫、犬复孔绦虫。 寄生于大肠：毛尾线虫、食口线虫(结节虫)、莫尼茨绦虫（长度单位m）、圆线虫。 寄生于肌肉：猪囊尾蚴（成早为猪带绦虫）、旋毛虫、肉孢子虫 寄生于生殖器官：马媾（gou）疫锥虫 寄生于胎盘传播：犬新孢子虫 寄生于脑、脊髓内：脑多头蚴虫（成虫多头绦虫） 寄生于输卵管、泄殖腔：前殖吸虫 寄生于右心室和肺动脉：犬恶丝虫 寄生于蜜蜂中肠：蜜蜂孢子虫；寄生于成年蜂马氏管内：蜜蜂马氏管变形虫。 三、寄生虫发育史： 日本分体吸虫：虫卵→毛蚴→母胞蚴→子胞蚴→尾蚴（对畜禽感染阶段）→成虫。 疥螨和蜱发育为不完全变态：卵→幼虫→若虫→成虫。 牛皮蝇蛆、蚤：卵→幼虫→蛹→成蝇
绵羊混合感染捻转血矛线虫和美丽筒线虫的诊治
绵羊混合感染捻转血矛线虫和美丽筒线虫的诊治 摘要:2008年11月以来河北北方学院动物科技学院病理实验室先后接到张家口坝上地区养羊户送来的以贫血?渐进性消瘦为主要特征的病羊,剖检发现其真胃内有捻转血矛线虫寄生,最多达2 120条?另在其食道黏膜内发现细长?乳白色的美丽筒线虫,共14条?漂浮法粪便检查时发现2种虫卵?一种虫卵内含16~32个胚细胞,卵壳薄,光滑稍带黄色,虫卵大小为(75~95)μm×(40~50)μm;另一种虫卵内含有幼虫,虫卵大小为(50~70)μm×(25~37)μm?经诊断为羊混合感染捻转血矛线虫和美丽筒线虫病?对羊群普遍用左旋咪唑片和丙硫咪唑口服驱虫,2周后羊群症状消失,病情得到控制? 关键词:绵羊;混合感染;捻转血矛线虫;美丽筒线虫 The Diagnosis and Treatment on the Sheep Mixed Infected with Haemonchus contortus and Gongylonema pulchrum Abstract: Since November 2008, pathological laboratory received some sick sheep with the main symptoms of anemia and progressive angular from Zhangjiakou area. The necropsy results showed that a kind of nematode parasitized in the abomasums and the number was up to 2 120. Another kind of nematode was also found in the esophageal mucosa and the number was 14. Two kinds of parasitic ovum were found in the sheep faeces by floating method. One kind of the parasitic ovum contained 16~32 embryonic cells. It’s ovi testa was thin, smooth and slightly yellow. The ovum size was (75~95)μm×(40~50)μm. Another kind of parasitic ovum with the size of (50~70)μm×(25~37)μm contained larva. Through the clinical symptoms, pathological changes and laboratory examination, it could be diagnosed that the sheep were mixed infected with Haemonchus contortus and Gongylonema pulchrum. The symptoms in the herd could disappear after two weeks when Levamisole and Albendazole were used. Key words: sheep; mixed infection; Haemonchus contortus; Gongylonema pulchrum 羊捻转血矛线虫病,是由血矛线虫属的捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)寄生于山羊?绵羊?黄牛?鹿及骆驼等反刍动物的第四胃引起的一种危害严重的疾病,成虫以宿主的血液和黏膜为食,可引起宿主动物严重的腹泻?贫血?消瘦,导致其生长发育不良?体重减轻,严重感染时可造成其死亡[1]?美丽筒线虫(Gongylonema pulchrum)为一种人兽共患寄生虫病,对人的病例报道较多,但对动物的病例报道较少?2008年11月以来河北北方学院病理实验室先后接到张家口坝上地区养羊户送来的以贫血?渐进性消瘦为主要特征的病羊?经临床症状观察?病理剖检和实
试验八动物线虫病常见病原的形态学观察
实验八动物线虫病常见病原形态学观察（一） 一、实验目的及要求 熟悉线虫的基本构造，掌握动物常见线虫的主要形态特征。 二、实验器材 1．器械。光学显微镜、手持放大镜、镊子、解剖针、平皿、载玻片与盖玻片等。 2．试剂。乳酸酚透明液等。 3．标本。 （1）浸渍标本。 网尾科线虫：丝状网尾线虫、鹿网尾线虫和胎生网尾线虫等。 原圆科线虫：毛样缪勒线虫、柯氏原圆线虫和肺变圆线虫等。 后圆科线虫：野猪后圆线虫和复阴后圆线虫等。 毛圆科线虫：捻转血矛线虫、奥斯特属线虫等。 钩口科线虫：羊仰口线虫、牛仰口线虫、长尖球首线虫、萨摩亚球首线虫和椎尾球首线虫。 盅口科线虫：哥伦比亚食道口线虫、辐射食道口线虫、微管食道口线虫、粗纹食道口线虫、有齿食道口线虫、长尾食道口线虫和短尾食道口线虫等。 冠尾科线虫：有齿冠尾线虫。 圆线科线虫：马圆线虫、无齿圆线虫和普通圆线虫等。 毛尾科线虫：猪毛尾线虫、绵羊毛尾线虫（T.ovis）、球鞘毛尾线虫及斯氏毛尾线虫等。 毛形科线虫：旋毛虫等。 颚口科线虫：刚棘颚口线虫和陶氏颚口线虫。 吸吮科线虫：罗氏吸吮线虫和丽嫩吸吮线虫等。 丝状科线虫：马丝状线虫、鹿丝状线虫和指形丝状线虫等。 尖尾科线虫：马尖尾线虫。 （2）封片标本。动物横纹肌中的旋毛虫幼虫、颚口线虫的中间宿主（剑水蚤）等。 （3）病理标本。后圆线虫引起猪支气管堵塞、食道口线虫幼虫引起动物肠道的结节病变、毛尾线虫头部钻入动物肠壁、钻入动物胃壁的颚口线虫等病理标本。 三、实验方法、步骤和操作要领 1．挑取捻转血矛线虫或粗纹食道口线虫的雌雄虫各一条，分别放在两张载片上，滴加乳酸酚透明液1-2滴，盖上盖片，在光学显微镜下观察透明虫体的详细构造。 2．在光学显微镜下观察封片标本的形态构造。 3．用肉眼或借助手持放大镜观察虫体浸渍标本及病理标本。 四、实验注意事项 1．乳酸酚透明液具有一定的腐蚀性，因此不宜滴加太多，以防溢出载玻片之外而腐蚀光学显微镜的载物台。 2．虫体在滴加乳酸酚透明液后，应尽快放到光学显微镜下进行观察，若虫体透明过度，则不利于虫体内部形态构造的观察。 3．雄虫尾端交合伞常包裹在一起，可用解剖针轻轻移动盖玻片，让交合伞展开便于观察交合伞内肋的形态。
捻转血矛线虫(参考资料)
疫病名称：捻转血矛线虫病疫病类型：□细菌□病毒□中毒 寄生虫□其他 病原：捻转血矛线虫 传播途径：消化道感染易感动物：反刍动物（牛、羊） 发育过程：成虫寄生于皱胃虫～卵随粪便排出体外～发育为披鞘L3幼虫（1周）～反刍动物摄食L3而被感染～幼虫在瘤胃脱鞘～到达皱胃后钻入粘膜进行发育～后返回皱胃内发育为成虫，寿命不超过1年 发病季节：夏、秋（4～10月份）7月份发病可略减少发病高峰期：5～6月/8～10月 流行方式：地方性流行（潮湿多水、沟壑较多） 羔羊和青年羊发病率及死亡率最高，成年羊抵抗力较强，被感染羊有“自愈”现象。低湿的草地有利于本病的传播；在露水草和阴天、小雨后放牧，最易感染本病。 临床症状、病理变化 临诊： 急性型：肥羔羊突然死亡。可视粘膜苍白、贫血。亚急性型：渐进性消瘦、贫血、可视粘膜苍白、下颌和下腹部水肿，腹泻与便秘交替。精神沉郁、食欲不振，最后可因衰竭死亡。死亡多发生在春季。 慢性型：症状不太明显，病程可达1年以上。 病理： 1.吸血引起贫血：2000条捻转血矛线虫，每天可吸血达30ml。毒素作用也可干扰宿主的造血功能，使贫血更加严重。 2.成虫和幼虫寄生引起胃炎：虫体吸血时或幼虫在胃肠粘膜内寄生时，损伤胃粘膜，引起胃炎和水肿。剖检于皱胃及其内容物中见大量虫体寄生。 3. 病死羊尸体消瘦，尸僵不全，血液稀薄，呈淡红色不易凝固 4. 胸、腹腔内常有中等量积水，肝、肾、脾等实质脏器质地松软，色较淡 防治措施 预防： 症状以贫血、衰弱和消化紊乱为主 1 加强饲养管理，提高营养水平，提高畜 体自身的抵抗力，尤其在冬春季节 2 注意饲料、饮水的清洁卫生。 3 放牧时应尽可能避开潮湿地带，尽量避 开幼虫活跃的时间，以减少感染机会。 4 进行计划性驱虫。在春、秋各进行一次。 驱虫后的粪便集中管理，采用生物热发 酵。 治疗： 1 阿维菌素/伊维菌素/多拉菌素/乙酰氨基 阿维菌素(0.2mg/kg体重，一次口服或皮下注射) 2 丙硫咪唑/抗蠕敏(10-15mg/kg体重，一次口 服) 3 枸橼酸哌嗪 4 左旋咪唑/噻苯咪唑/芬苯哒唑(牛、羊按 6-10mg/kg体重，一次口服) 检测方法
中医针灸之针刺手法
中医针灸之针刺手法 针灸作为中医的一部分，它脱离不了整个中医的理论体系，如果你只是想学点皮毛，那么可以只看针灸方面的书，比如《针灸学》教材、《针灸大成》之类，还有《马丹阳天星12穴》、《玉龙赋》、《标优赋》等歌诀。学完这些你只能治好别人都能治好的病和书上描述过的病，要想兵来将挡，还得学习中医基础理论和中医诊断学。针灸，是针法和灸法的合称。是研究各种刺法和灸法的操作方法、临床运用及作用原理的一门学科。我们本次主要讲的是针刺手法即针法。针法：又称刺法，指采用针具，运用手法，刺激人体一定部位（一般是腧穴），以疏通经络，调和气血，从而防治疾病的方法。一、针刺进针法（1）单手进针法： 操作：单手进针法：术者以拇指、食指持针，中指端紧靠穴位，指腹紧靠针身下段。当拇、食指向下用力按压时，中指随之屈曲，将针刺入，直刺至所要求的深度。 适用：短针进针。（2）双手进针法：①指切进针法 操作：用左手拇指或食指或中指的爪甲切按在腧穴位置上，右手持针，紧靠左手指甲面将针刺入腧穴。 适用：短针进针。②舒张进针法 操作：用左手食、中二指或拇、食二指将所刺腧穴部位的皮肤向两侧撑开，使皮肤绷紧，右手持针，使针从左手食、中
二指或拇、食二指的中间刺入。 适用：皮肤松弛部位得腧穴。③夹持进针法 操作：左手拇食二指持捏消毒的干棉球，夹住针身下端，露出针尖，将针尖固定于针刺穴位的皮肤表面位置，右手持针柄，使针身垂直，在右手指力下压时，左手拇食二指同时用力，两手协同将针刺入穴位皮肤。 适用：此法适用于长针的进针.④提捏进针法 操作：左手拇、食二指将所刺部位的皮肤捏起，右手持针，从捏起的上端将针刺入。适用：适用于皮肤浅薄部位（如印堂、列缺）的进针。二、行针手法 行针又名运针，是指将针刺入腧穴后为使之得气，调节针感和进行补泻而施行的各种针刺手法。行针基本手法：提插法、捻转法。行针辅助手法：循法、弹柄法、刮柄法、摇柄法、挫柄法、震颤法。（1）提插法： 操作：将针刺入腧穴一定深度后，施以上提下插动作的操作手法。（这种使针由浅层向下刺入深层的操作谓之插，从深层向上引退至浅层的操作谓之提，如此反复地上下呈纵向运动的行针手法，即为提插法）。 要领：使用提插法时的指力要均匀一致，幅度不宜过大，一般以3～5分为宜，频率不宜过快，每分钟60次左右，保持针身垂直，不改变针刺角度、方向和深度。（2）捻转法： 操作：将针刺入腧穴一定深度后，施以向前向后捻转动作的
捻转血矛线虫备课讲稿
捻转血矛线虫
羊的捻转血矛线虫病的危害及防治 捻转血矛线虫病又称捻转胃虫病，它是由寄生于羊、牛及反刍动物真胃为主的捻转血矛线虫所引起。此病遍及全国各地，由于人们对此病缺乏认识和了解，常造成高死亡、低繁殖、无收益，甚至经济亏损的局面。 一、虫体形态及生活史 捻转血矛线虫是一种纤细柔软淡红色线虫。雄虫长15～19毫米，呈淡红色。雌虫长27～30毫米，它白色的生殖器官环绕于因含血液而呈红色的肠道周围，形成红白二线互相捻转的外观，所以称为捻转血矛线虫或捻转胃虫。捻转血矛线虫的虫卵随粪便排出体外，在适宜的条件下，经4～5天孵出幼虫，再经4～5天幼虫脱皮两次成为感染性幼虫，感染性幼虫在潮湿的环境中离开粪便，群集在草上，当羊、牛吃草时呑食了感染性幼虫而被感染，幼虫在胃内经两次脱皮，过2～3周发育为成虫。 二、流行特点 捻转血矛线虫在同属线虫中的致病力最强，反刍动物的肠道线虫主要是血矛线虫。捻转血矛线虫比其它肠道线虫产卵多，雌虫一天可产卵5000～10000个。虫卵对外界抵抗力较强，适宜的发育温度是20～30℃，4℃以下虫卵停止发育，1℃以下或60℃以上可致死亡，但虫卵对一般消毒药抵抗力较强。 羔羊和青年羊发病率及死亡率最高，成年羊抵抗力较强，被感染羊有“自愈”现象（有虫体被排除或不发生再感染的情况）。低湿的草地有利于本病的传播；在露水草和阴天、小雨后放牧，最易感染本病。羊的发病多在4～10月份，尤以5～6月份和8～10月多发，7月份发病可略减少，冬季极少有发病。 三、危害 1．虫体寄生于真胃，以虫体的前端刺入胃黏膜引起损伤，造成真胃炎症和出血。该虫体寄生在真胃黏膜时，往往有数千条以上，在2000条时，每天吸血可达30毫升，而且在虫体离开后仍继续流出血液。 2．虫体寄生时，除直接吸血和因胃壁创伤持续出血造成失血引起贫血外，还因分泌毒素影响造血功能、消化液的分泌紊乱和对饲料的消化吸收障碍，使病羊呈现营养不良等一系列的症状。
兽医寄生虫复习资料
兽医寄生虫复习资料 兽医寄生虫学：研究家畜家禽伴侣动物和其他动物的各种寄生虫所引起疾病的科学。 胎生：雌虫受精后不产卵而直接经发育产出幼虫， 卵生：产出的虫卵内胚胎尚未分裂或胚胎处于分裂状态的繁殖方式。 宿主：是指为寄生物包括寄生虫,病毒等提供生存环境的生物。 终末宿主：指寄生虫成虫或有性生殖阶段所寄生的宿主 带虫宿主：宿主被感染后处于隐形感染状态，体内有一定数量的虫体，也称为带虫宿主。 卵胎生：雌虫在终末宿主体内直接产出含幼虫的卵，随即在外界环境中孵出第一期幼虫。 带虫免疫现象：寄生虫在宿主体内保持一定数量时，宿主对同种寄生虫的再感染具有一定的免疫效力，一旦宿主体内的虫体完全消失这种免疫力也随之结束。 媒介：指脊椎动物宿主之间起传播寄生虫病作用的低等动物，尤其指传播血液寄生虫病的吸血节肢动物。生物性传播者：某种生物在传播病源过程中，病源体在其体内进行一段时间发育起到既是宿主又是传播媒介的作用。 感染性虫卵：幼虫发育到感染阶段，仍留在卵壳内不孵出。 感染性幼虫：幼虫发育到感染阶段即对宿主具有感染力时已从卵内孵出。 细颈囊尾蚴病： 不完全变态：昆虫的生长发育中，经卵幼虫，若虫，成虫四个阶段，各发育阶段虫体的形态和生活习性相似，只是发育程度不同，称为不完全变态。 变态：寄生虫的虫卵到成虫的发育过程中，在形态和生活习性上发生很大变化，这种变化就叫变态。 一宿主蜱：幼蜱若蜱成蜱在同一宿主体上完成二次蜕变及三个吸血活跃期，成虫饱血后才离开宿主落地产卵的蜱。 而宿主蜱：发育在两个宿主体内完成，即幼虫寻得宿主吸血，蜕变成若虫；若虫饱血后落地蜕变成成虫，成虫再爬到同种或不同种的另一宿主体吸血，交配后落地产卵。这种蜱成为二宿主蜱。 三宿主蜱：幼蜱若蜱成蜱三个阶段分别在三个宿主体吸血，饱血后都需要离开宿主落地脱皮产卵的蜱。蜕化：
区分松材线虫和拟松材线虫的生化及分子鉴别方法
根据上述形态观察和测量,初步鉴定为 草莓滑刃线虫,并经浙江大学郑经武教授复核确认。3 讨论 草莓滑刃线虫是一种叶和芽寄生线虫,可引起草莓春矮病(Spring Dwarf Disease ),还可侵染蕨类、百合科等47个科250多种植物。该线虫危害草莓时,在草莓芽和叶片表面取食,造成植株发育不良,叶片发红或叶片卷曲皱缩,芽和花畸形,影响产量。危害百合引起百合黑死病,线虫侵染导致叶片从茎基部自下而上枯死。幼嫩梢被侵染时,线虫在生长点取食,使新梢矮缩、扭曲,不能开花。 滑刃属线虫主要特征如下:体长014～112mm ,头部通常略缢缩,口针长度10～12 μm ;食道前体部圆柱形,中食道球及中食道球瓣发达,后食道腺叶发达、覆盖肠的背面;雌虫阴门位于虫体的60%～75%;后阴子宫囊通常存在并含有精子;尾圆锥形,尾端 及尾尖突形态多样。雄虫尾圆锥形,向腹面弯成钩状;交合刺玫瑰刺形,基顶及基喙通常发达;无交合伞。 Shahina 提出,按尾尖突形状及有无将滑刃属线虫分为4组:11尾简单,无尾尖突;21尾具1～2个尾尖突;31尾尖突四叉或星形;41尾尖突为其他形状。草莓滑刃线虫被分在第2组,具有1个尾尖突。而其他文献一般称草莓滑刃线虫尾为钝穗状或钝钉状,无任何附属物。此次观察到的草莓滑刃线虫雌虫和雄虫均有一尾尖突。致谢 承蒙浙江大学郑经武教授复核鉴定草莓滑刃线虫标本并提供资料,特此感谢!参考文献 1 谢辉编著1植物线虫分类学1合肥:安徽科学技术出版 社,2000 2 刘维志主编1植物病原线虫学1北京中国农业出版社, 2000 3 Shaniha F 1A Diagnostic C ompendium of The G enus A phelen 2 choides Fischer ,1894W ith S ome New Records of The group From Pakistan 1Pak 1J 1Nematol ,1996,14(1):1～32 区分松材线虫和拟松材线虫的 生化及分子鉴别方法 Ξ 蒋立琴 郑经武ΞΞ (浙江大学农业与生物技术学院植物保护系,杭州310029) 摘要 本文从蛋白质、激素、脂类及核酸等不同的角度,概述了松材线虫和拟松材线虫的 一些生化和分子鉴别方法及其优缺点。其中以DNA 为基础的分子诊断技术(如对rDNA 中ITS 区的PCR -RFL P 等)系目前较稳定可靠的鉴别方法;而以蛋白质为基础的单克隆抗体技术对于正确、快速地鉴别两种线虫也有极大的潜力。 关键词 松材线虫 拟松材线虫 诊断方法 — 78—ΞΞ联系作者 收稿日期:2002-09-13 浙江省自然科学基金项目(300267)和浙江省科技厅项目(2002C34003)资助
捻转血矛线虫
疫病类型：□细菌□病毒□中毒 寄生虫□其他
羊的捻转血矛线虫病的危害及防治 捻转血矛线虫病又称捻转胃虫病，它是由寄生于羊、牛及反刍动物真胃为主的捻转血矛线虫所引起。此病遍及全国各地，由于人们对此病缺乏认识和了解，常造成高死亡、低繁殖、无收益，甚至经济亏损的局面。 一、虫体形态及生活史 捻转血矛线虫是一种纤细柔软淡红色线虫。雄虫长15～19毫米，呈淡红色。雌虫长27～30毫米，它白色的生殖器官环绕于因含血液而呈红色的肠道周围，形成红白二线互相捻转的外观，所以称为捻转血矛线虫或捻转胃虫。捻转血矛线虫的虫卵随粪便排出体外，在适宜的条件下，经4～5天孵出幼虫，再经4～5天幼虫脱皮两次成为感染性幼虫，感染性幼虫在潮湿的环境中离开粪便，群集在草上，当羊、牛吃草时呑食了感染性幼虫而被感染，幼虫在胃内经两次脱皮，过2～3周发育为成虫。 二、流行特点 捻转血矛线虫在同属线虫中的致病力最强，反刍动物的肠道线虫主要是血矛线虫。捻转血矛线虫比其它肠道线虫产卵多，雌虫一天可产卵5000～10000个。虫卵对外界抵抗力较强，适宜的发育温度是20～30℃，4℃以下虫卵停止发育，1℃以下或60℃以上可致死亡，但虫卵对一般消毒药抵抗力较强。 羔羊和青年羊发病率及死亡率最高，成年羊抵抗力较强，被感染羊有“自愈”现象（有虫体被排除或不发生再感染的情况）。低湿的草地有利于本病的传播；在露水草和阴天、小雨后放牧，最易感染本病。羊的发病多在4～10月份，尤以5～6月份和8～10月多发，7月份发病可略减少，冬季极少有发病。 三、危害 1．虫体寄生于真胃，以虫体的前端刺入胃黏膜引起损伤，造成真胃炎症和出血。该虫体寄生在真胃黏膜时，往往有数千条以上，在2000条时，每天
植物病原线虫的分离方法及形态观察实验
植物病原线虫的分离 一、目的要求 了解从土壤和植物组织中分离线虫的基本原理，掌握从土壤和植物组织中分离线虫的常用方法。学习在解剖镜或扩大镜下用镊子、竹针、毛针、毛笔等工具从水中和滤纸上挑取线虫的方法。 二、基本原理 植物寄生线虫主要存在于土壤和植物组织中，分离线虫的方法有许多，要根据线虫的种类、研究目的等来选择适宜的方法。植物寄生线虫的个体很小，除极少数可从植物组织中直接挑出以外，绝大多数需借助特定的工具和方法才能完成。线虫的分离主要是利用它的趋水性、大小、比重以及与其他杂质的差异，采用过筛、离心、漂浮等措施，将线虫从植物组织、土壤中分离出来。 三、材料、试剂与仪器 1．实验材料感染根结线虫病的植物病根、病土、感染大豆孢囊线虫或其它孢囊线虫的病土、感染甘薯茎线虫的病薯块等。 2．仪器或实验用具解剖镜、漏斗分离装置、漂浮分离装置、浅盘分离装置、纱布或铜纱、记数皿或平皿、小烧杯、小玻管、旋盖玻璃瓶、
40目和325目网筛、线虫滤纸、餐巾纸、挑针、竹针、毛针、毛笔等。 3．试剂线虫固定液。 四、实验操作 1．直接观察分离 对于个体较大的线虫如根结线虫、孢囊线虫、粒线虫的雌虫等，可直接用挑针从植物组织中挑取，也可在解剖镜或扩大镜观察下直接挑取，对于虫体稍小的线虫如茎线虫、粒线虫的雄虫和幼虫等，需在解剖镜下，用竹针或毛针直接挑取。 取感染根结线虫的植物病根材料（若是干材料需用水浸泡过夜），剥开皮层，观察里面是否有针头大小、乳白色发亮的颗粒状物。用挑针挑取，置凹玻片上水滴中，在解剖镜或显微镜下观察是否为根结线虫雌虫。 2．漏斗分离法 该方法操作简单，是目前从植物材料中分离线虫较好的方法。其装置是将直径10~ 15cm 的玻璃漏斗架在铁架上，下面接一段约 10 cm 的橡皮管，橡皮管上装一个弹簧夹。
绦虫、线虫
绦虫病 1、简述绦虫的形态和构造? 外部形态：扁平、带状、分节、雌雄同体，由头节、颈部、链体组成。（1）头节——为吸附器官，半圆形、方形、菱形，长为1~2mm，根据头节上吸盘 的不同分为三种类型： ①吸叶型：在前端具有四个叶状结构，附在可弯曲的小柄上 或直接长在头节上 ②吸槽型头节：在背腹面各有一沟样的吸盘 ③吸盘型头节：具有四个圆形吸盘，位于头节前端侧面， 有的绦虫在头节顶端、中央有顶突，其上还有一排 或数排小钩 （2）颈部——位于头节之后，不分节，由颈节长出下面的节片， 所以又称生长节。 （3）链体：根据发育阶段不同分为：未成熟节片：简称幼节 成熟节片：简称成节 孕卵节片：简称孕节 内部构造：绦虫无体腔，无消化道，靠体表吸收营养物质 （1）体壁：皮层、肌层 （2）神经系统：梯形神经系统 （3）排泄系统：原肾系统，焰细胞、细管、排泄管、排泄囊、排泄孔 （4）生殖系统：雌雄同体，在每一成熟节片里有1~2组雌雄生殖器官
①圆叶目绦虫：子宫盲囊，不向外开口，虫卵不能从子宫排出，到体节脱落 后随粪便排出体外 ②假叶目绦虫：生殖孔开口于节片腹面中央，有子宫孔、雌性生殖孔、雄性 生殖孔，虫卵从子宫孔排出，所以子宫不如圆叶目绦虫发达。 2、什么叫中绦期或绦虫蚴？绦虫蚴可分哪几大类？举例说明？ 1、中绦期（绦虫蚴）：绦虫的幼虫发育阶段或在中间宿主体内的发育阶段 绦虫发育包括虫卵、中绦期或绦虫蚴、成虫三个发育阶段2、类型：体为实心结构的有原尾蚴、实尾蚴； 体为囊状结构的有囊尾蚴型、似囊尾蚴型 （1）原尾蚴：出现在假叶目绦虫生活史，体为实心结构，在体后端有三对小钩；（2）实尾蚴：又称条带或裂头蚴 a、含原尾蚴的剑水蚤被第二中间宿主吞食后，逐渐发育为实尾蚴 b、实尾蚴已无小钩，具有成虫样头节，但链体及生殖器官尚未发育 c、成熟的实尾蚴被终末宿主吞食后发育为成虫 （3）囊尾蚴型： a、为一个半透明囊体，囊壁的外表为角质层，内为生发层，在囊壁凹入处 含有一个头节，囊腔内充满液体 b、囊尾蚴型寄生在脊椎动物中间宿主体内 c、寄生部位随绦虫的种类不同而不同，常见的寄生部位有肝、腹腔、肌肉、 脑及眼
《黄帝内经》论针刺补泻
《黄帝内经》论针刺补泻 针刺补泻是影响治疗效果的重要因素之一。《黄帝内经》对针刺补泻问题非常重视，并有较详尽的论述。本文就其基本内容归纳如下，以期对当今针灸临床提供参考。 1制定针刺补泻原则 《灵枢·九针十二原》日:“凡用针者，虚则实之，满则泄之，宛陈则除之，邪胜则 虚之。”又曰:“虚实之要，九针最妙，补泻之时，以针为之。”《灵枢·经脉》曰:“盛 则泻之，虚则补之，热则疾之，寒者留之，陷下则灸之，不盛不虚，以经取之。”补虚 泻实是《黄帝内经》针灸治疗原则。虚实补泻要妙，以九针针具最为理想，补泻的功效取得，可以用针刺手法来解决。《黄帝内经》制定的针刺补泻原则，为后世针灸医学家 所竭力遵循。 2创立多种补泻手法 2. 1迎随补泻 《灵枢·小针解》:“迎而夺之者，泻也。追而济之者，补也。”《灵枢·九针十二原》曰:“逆而夺之，恶得无虚?追而济之，恶得无实?迎之随之，以意和之，针道毕矣。” 《灵枢·终始》也说:“泻者迎之，补者随之，知迎知随，气可令和。”指出迎着经气循 行的方向而针刺，是泻法，顺着经气循行的方向而针刺，是补法。 2. 2徐疾补泻 《灵枢·九针十二原》:“徐而疾则实，疾而徐则虚。”《灵枢·小针解》解释说:“虚 而疾则实者，言徐内而疾出也。疾而徐则虚者，言疾内而徐出也。”这是以进针、出针 过程的快慢来区分补泻。慢进针而快出针，为补法;快进针而慢出针，为泻法。 2. 3呼吸补泻 《素问·离合真邪论》云:“吸则内针，无令气怜;静以久留，无令邪布;吸则转 针一，以得气为故;候呼引针，呼尽乃去;大气皆出，故名曰泻。”“呼尽内针，静以久留，以气至为故……候呼引针，气不得出;各在其处，推阖其门，令神气存，大气留止，故 命曰补。”这是在进针出针时配合患者呼吸来区分补泻。患者吸气时进针，呼气时出针 为泻，呼气时进针，吸气时出针为补。 2. 4提插补泻 《灵枢·官能》曰:“泻必用员，切而转之，其气乃行，疾而徐出，邪气乃出，伸 而迎之……补必用方，外引其皮，令当其门，左引其枢，右推其肤，微旋而徐推之……”《灵枢》中没有出现“提插”二字，但上文中所说“伸”即提之意，“推”乃插之意， 这就是说泻法以向外提引为主，补法以向内按纳为主。 2. 5捻转补泻 《灵枢·官能》说:“泻必用员，切而转之……补必用方……微旋而徐推之……” 这是以针的捻转方法不同来区分补法和泻法。泻法用力较重，捻转幅度大，频率快，补法用力较轻，捻转幅度小，频率慢。 2. 6开阖补泻 《灵枢·官能》云:“泻必……摇大其穴，气出乃疾。补必……气下而疾出之，推 其皮，盖其补门，真气乃存。”《灵枢·终始》又曰:“一方实，深取之，稀按其清， 以极出其邪气;一方虚，浅刺之，以养其脉，疾按其清，无使邪气得入。”是说出针后 速按针孔为补法:出针后摇大针孔或不立即揉按为泻法。 2. 7导气补泻 《灵枢·五乱》:“徐入徐出，谓之导气，·补泻无形，谓之同精。是非有余不足也，乱气之相逆也。”导气补泻又称导气法，是慢进针，慢出针，以导引逆乱的经气，使其 恢复正常。这种补和泻，手法轻巧无形，其月的在于调和精气。因为这类病证，并不属
植物线虫的分泌蛋白质及其功能研究进展
长江大学学报（自科版）农学卷２００７年９月第４卷第３期 ＪｅｅｒｎａｔｏｆＹａｎｇｔｚｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔＳｏｌＥｄｉｔ）ＡｇｒｔＳｏｌＶＳｅｐ．２００７。ＶｏＬ４Ｎｏ．３ 植物线虫的分泌蛋白质及其功能研究进展 应喜娟，刘丽娟，柳宇琰。罗大民（厦门大学生命科学学院．福建厦门３６１００５） 罗云（华中师范大学医学院。湖北武汉４３００７０） ［摘要］植物体内寄生的植物线虫必须寄生于宿主体内并获取充足的营养才能完成完整的生活史。植物线 虫的寄生过程主要是依靠线虫分泌蛋白质的作用来完成。近年来。对植物线虫分泌蛋白质的研究取得了重 大进展。分离出一系列由线虫表皮、侧器、食道腺等分泌的蛋白质．这些蛋白在线虫与植物相互作用的过程 中起重要的作用ｚ破坏宿主细胞壁．影响宿主细胞周期．改变宿主细胞代谢过程和传导信号．选择性蛋白质 降解、抵抗宿主细胞对线虫的防御等。 ［关键词］植物线虫Ｉ植物线虫一宿主互作，分泌蛋白 ［中圈分类号］￥４３６．４１２．２９；Ｑ７１［文献标识码］Ａ［文章编号３１６７３—１４０９（２００７）０３一．￥００５一０４ 植物线虫危害遍布世界各地，每年造成的农业经济损失超过７７０亿美元Ⅱ］．。植物线虫从植物获取营养的方式主要有非固定和固定性取食２种。非固定取食的线虫在一个取食位点仅停留一段时间，而固定取食的线虫，如根结线虫（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｓｐｐ．）和胞囊线虫（Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａｓｐｐ．ａｎｄＧｌｏｂｏｄｅｒａｓｐｐ．）等，它们侵入根部并诱导根部细胞分化形成特殊的取食结构——巨型细胞，作为线虫发育和繁殖的持续营养源［－２，３］。植物线虫分泌的蛋白质一直都是线虫研究的热点，这些从线虫表皮、侧器、食道腺分泌出来的蛋白质与线虫寄生生活密切相关，并具有不同的功能，在线虫的寄生过程中，扮演不同的角色。它们破坏宿主细胞的细胞壁结构，使线虫能够入侵宿主；重新启动宿主细胞的细胞周期和再次分化，最终诱导形成巨型细胞；改变宿主细胞新陈代谢过程，为线虫提供其所需的营养物质；结合植物细胞信号传导途径受体，改变宿主细胞的生理活动；抵抗宿主细胞的免疫反应，保护线虫不受侵害。这类与线虫寄生密切相关的蛋白质是植物线虫最为有利的进化特征Ｈ～８］。 植物寄生线虫所分泌的蛋白质是线虫得以完成寄生生活的关键因素，是研究植物线虫寄生机制并从中寻求防治线虫危害的重要环节。目前，对这类蛋白质的研究主要通过分离分泌蛋白质、克隆与寄生有关的ｃＤＮＡ来进行［ｇ“０３。此外，抗原抗体特异识别反应、ＨＰＬＣ及二维聚丙烯酰胺凝胶电泳在分泌蛋白质的研究也得到了广泛的应用。指纹图谱技术与基因芯片技术用于比较线虫不同生活时期及不同组织ｍＲ－ＮＡ的表达情况，并从中筛选与寄生相关的基因；鸯立线虫食道腺ｃＤＮＡ文库、ＥＳＴ—ｃＤＮＡ文库，通过对同源基因的筛选、核酸杂交技术、抗体识别表达ｃＤＮＡ文库来分离与线虫寄生相关的基因都是该领域常见的研究方法。ＲＮＡｉ技术也是研究基因功能的有力手段，已越来越多的应用到寄生相关基因的研究中［１１～１３Ｊ。 １表皮因子 线虫表皮具有复杂的细胞外结构，它对线虫形态维持、蜕皮及保护线虫不受体外环境侵害有重要作用。由真皮细胞表达并分泌至表皮的蛋白质不仅有构成线虫外骨骼的重要组分胶原蛋白，还具有能使线虫免受宿主防御系统伤害的蛋白埙。研究发现用单克隆抗体与线虫表皮蛋白质结合后，能抑制线虫在宿主组织中的迁移口‘１。在马铃薯金线虫（Ｇｌｏｂｏｄｅｒａｒｏｓｔｏｃｈｉｅｎｓｉｓ）表皮发现的过氧化物还原酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ［收稿日期］２００７—０６—０１ ［基金项目］围家基础科学人才培养基金项Ｉ三１（Ｊ０６３０６４９）；ｔ－海市科学技术委员会资助项目（０６ＤＺ２２１１０） ［笼一作者简介］应喜蝎（１９８３０７女，福建南平市人，硕士研究生，研究方向为植物线虫与植物间的互作． ［通讯作者］罗大民（１９６２－），教授。主要从事动植物寄生线虫学研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｍｌｕｏ＠ｘｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ．