链球菌鉴定板条中文说明书-2012

微生物实验设计-醋酸菌

实验设计：醋酸菌的分离与纯化 ——生物科学2班秦琬莹辛吉瑀张博文一、实验目的 学习醋酸菌的分离纯化、鉴定的原理。 掌握平板表面涂布法、平板划线法的分离技术。 二.实验原理 1.菌种的分离纯化 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”，防止其他微生物的混入。 2.接种操作方法 涂布平板法：因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。 平板划线法：最简单的分离微生物的方法是平板划线法，其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。 3. 结晶紫 结晶紫是一种碱性染料，也一种极佳的精密酸指示剂，pH 0.5(绿)～2.0(蓝)~弱酸（蓝紫）~中性（紫色）~碱性（赭红色）；所以在醋酸菌分离纯化平板培养基中加入少量的结晶紫溶液，既不会影响醋酸菌的生长，又可根据变色圈的大小很快把产酸高的醋酸菌株分离出来。 二、材料、用品 1.样品：食醋 2.培养基： （1）分离纯化平板培养基 葡萄糖1 g，酵母膏1 g，碳酸钙2 g，琼脂2g，水100mL，121℃灭菌20min，冷却至70℃加入4mL无水乙醇和0.5mL 0.02％结晶紫冰醋酸溶液。 （2）液态发酵培养基 葡萄糖l g，酵母膏1.5 g，磷酸二氢钾0.05 g，硫酸镁0.05 g，水100 mL，pH6.5，灭菌后冷却至60 ℃以下加入无水乙醇3.5mL。 3.器材：接种环、冰箱、试管、培养皿、无菌玻璃涂棒、移液管、恒温培养箱、无菌操作台、高压灭菌锅等。 三、醋酸菌分离纯化流程 样品——醋酸菌发酵液中富集培养——稀释分离——纯化——保藏平板培养基保藏 四、实验步骤方法 1.富集培养 取家用食醋以10％的量接入醋酸菌液态发酵培养基富集培养24h。

题目：乳酸中嗜热链球菌的分离及鉴定

分类号： 2011届本科生毕业论文 题目：乳酸中嗜热链球菌的分离及鉴定 Title：Lactic acid streptococcus thermophilus cultured in the separation and identification 系别：化学与生命科学学院 专业：07级生物技术 学生姓名：邵志国 学号：2007090223 指导老师：郭志华 职称：讲师 2011年4月17号

摘要 [目的]从乳酸中将嗜热链球菌分离出并进行鉴定。[方法] 利用MRS培养基将乳酸中的菌种培养，经过革兰氏染色、镜检分离出嗜热链球菌，最后选出7株，对它进行菌落形态的观察。最后对其进行各种理化鉴定。[结果]镜检结果该菌为革兰氏阳性，经过生化鉴定该菌为嗜热链球菌。 关键词：乳酸；嗜热链球菌；分离；鉴定。

ABSTRACT [objective] the streptococcus thermophilus cultured from lactic acid will isolate and evaluations. [method] Use the media will lactic acid bacteria MRS cultivation, and after gram's staining, isolated anti-bma streptococcus thermophilus cultured, finally chosen for it, seven strains colony morphology observation. Finally the various physical and chemical identification. [result] microscopy results this for gram-positive bacteria, after biochemical identified the bacteria for streptococcus thermophilus cultured. Keywords: lactic acid; Streptococcus thermophilus cultured; Depart; appraisal

微生物实验设计-病原性球菌的鉴定

医学微生物学实验设计 姓名：姚淑宝 学号：2010514349 班级：10级临床十一班

病原性球菌的鉴定 姚淑宝 （石河子大学医学院石河子832000） 摘要：球菌是细菌中的一大类，其中对人类有致病性的球菌包括分属葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属和奈瑟菌属的一些细菌。本次实验设计以掌握病原性球菌的形态和培养特性，熟悉病原性球菌的分离和鉴定程序为目的。对脓汁中的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌进行鉴别。 一、鉴定思想 本次鉴定试验，先将脓汁标本直接镜检，再分离培养，观察镜下菌体的形态特征以及形成菌落的形态特征确定待测菌的菌属。然后，对可疑菌落纯培养，通过不同生化反应对同一菌属中的不同细菌进行区别。（具体见图1-1） 脓汁标本 直接镜检 分离纯化 葡萄球菌属链球菌属奈瑟菌属 血浆凝固酶试验胆汁溶菌试验麦芽糖发酵试验 图1-1 阴 性 — 白 色 葡 萄 球 菌 阳 性 — 金 黄 色 葡 萄 球 菌 阴 性 — 甲 型 溶 血 性 链 球 菌 阳 性 — 肺 炎 链 球 菌 阴 性 — 淋 病 奈 瑟 菌 阳 性 — 脑 膜 炎 奈 瑟 菌

二、鉴定方法 （一）直接镜检 将脓汁标本涂片进行革兰染色，然后在显微镜下观察细菌菌体的形态、排列、染色性并作出初步诊断。 葡萄球菌属：革兰染色阳性，球形，无芽胞、无鞭毛，呈葡萄串状排列。 链球菌属：革兰染色阳性，球形或椭圆形，无芽胞、无鞭毛，呈链状或成双排列。肺炎链球菌具有荚膜双球的典型形态。 奈瑟菌属：革兰染色阴性，无芽胞、无鞭毛，常成双排列。脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌大多于中性粒细胞内外分布。 通过直接镜检可以确定脓汁标本中细菌的菌属。在确定菌属的基础下再对脓汁标本中的细菌分离纯化，然后挑取可以菌落通过再次涂片染色镜检、致病物质检查、生化反应、血清学鉴定等方法进行菌属内的区别。 （二）分离纯化 用分区划线法将脓汁中的细菌接种在血琼脂平板培养基或巧克力色培养基上并在5%二氧化碳、37℃的条件下培养18~48小时。观察菌落的形态。 葡萄球菌属：在血平板上形成圆形凸起、表面光滑、润湿、边缘整齐、不透明的菌落。形成金黄色、白色和柠檬色脂溶性色素，多数金黄色葡萄球菌菌落周围有β溶血现象。 链球菌属：在血平板上形成灰白色、圆形凸起、半透明或不半透明的细小菌落。不同类群有不同的溶血现象，包括α、β、γ三种。肺炎链球菌在血平板上形成灰白色、略扁平、半透明的细小菌落，菌落周围有α溶血现象。培养时间超过48小时，菌落中央会出现脐状下陷。 奈瑟菌属：脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上，形成无色、圆形、凸起、光滑、透明似露滴状菌落，培养时间超过48小时常死亡。淋病奈瑟菌在巧克力琼脂平板上培养48小时，形成灰白色、圆形、凸起、表面湿润有光泽的细小菌落。 通过在血平板上形成的菌落的不同，可以做出进一步诊断。并可挑取可疑菌落再次镜检，无杂菌后进行纯培养再通过生化反应鉴别。 （三）生化反应 1、血浆凝固酶试验 血浆凝固酶是致病性葡萄球菌产生的，可使含有肝素或枸椽酸钠抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质，是判断葡萄球菌致病性的最重要指标。游离凝固酶用试管法检测，结合凝固酶用玻片法测试。通过血浆凝固酶试验可以对葡萄球菌属的纯培养物做出鉴别。 【材料】 被测菌培养物；加抗凝剂的1:2稀释的人或兔血浆；载玻片、接种环、小试管等。 【方法】 试管法：在盛有血浆0.5ml的试管中，接种被测菌培养物，置于温箱内1~4小时后，观

醋酸菌的分离鉴定和发酵条件研究

第2章醋酸菌的分离鉴定和发酵条件研究 2.1引言 醋酸菌包括醋酸杆菌属和醋酸单胞菌属[30]，又名醋酸细菌。醋酸菌的细胞一般为杆状、直或者稍弯，也有少部分像椭圆形，由单个、成对或者成链状排列的，大小一般在0.6～0.8×1.0～3.0 μm。醋酸菌没有芽胞是革兰氏阴性菌，它有的细胞是周生鞭毛种类，一般在液面上生长会形成较厚的菌膜。黑色醋酸杆菌等为另一些种类的醋酸菌细胞是端生鞭毛。醋酸菌的分布广泛，在未灭菌的醋、啤酒、黄酒中果酒，以及在果园的土壤中、葡萄或酸败食物表面中都有生长[31]。醋酸菌是酿醋过程中不可缺少的。醋酸菌在发酵过程中，会产生大量的醋酸和其他有机酸，而且还有醇类[32]。 本章节研究醋酸菌的分离鉴定和发酵条件，通过平板分离、革兰氏染色、产醋酸实验，并经生理生化鉴定和查阅伯杰氏手册，做出进一步鉴定。 2.2实验材料与方法 2.2.1材料与仪器 分离样品：取自湖北某果醋厂发酵的醋醅。 试验主要仪器设备型号及产地如表2.2.1.a。 表2.2.1.a主要仪器设备 Tab 2.2.1.a Main instrument equipment 主要仪器型号厂家 生化培养箱 双目生物显微镜 分析天平 手提式不锈钢蒸汽灭菌锅 超净工作台 精密数字式酸度计 PYX-250S-A BME（BA/E3） BS224S DSX-280B SW-CJ-1FD pHS-3C 长沙科技 科力仪器 德国莱卡 北京化丰 上海南鹏 上海科技

试验试剂：葡萄糖、酵母膏、甘油、无水乙醇(95%)、CaCO3、(NH4)2SO4、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、FeCl3、乙酸钙、乳酸钙、浓硫酸均为分析纯；琼脂食用级。 2.2.2培养基[33-37] 表2.2.1.ｂ培养基成分表 Tab 2.2.1.ｂMedium composition 名称葡萄 糖 酵母 膏 无水乙醇 (v/v) 琼 脂 CaCO3备注 ⑴基础发酵培养基1%1%3%pH 4. 5 ⑵分离培养1%1%3%2%2%pH自然 ⑶斜面保藏培养基1%1%3%2%1%pH自然 ⑷液体保藏培养基1%1%1%pH自然 ⑸改进后的斜面液体 保藏培养基 1%1%3%2%1%pH自然 ⑹发酵培养基1%1%7%pH 4. 5 ⑺Horyer-Frateur培养 基 3%pH自然 ⑻GYC培养基10%5%2% 2. 5%pH自然 ⑼高糖培养基30%1%2%2%pH自然⑽生酮培养基3%2%甘油3% ⑾产5-酮基葡萄糖酸 盐培养基 3%1%2%2%pH自然 ⑿氧化乙酸培养基1% 1% 2% 乙酸钙1% pH 7.2 ⒀氧化乳酸培养基1% 1% 2% 乳酸钙2% pH7.0-7.2 ⒁乙醇培养基1% 3% 2% pH自然注：培养基⑸在斜面保藏培养基⑵上，30℃培养24 h，加入无菌碳酸钙，灌入并液体培养基到斜面上，至离管口2cm处，密封冷藏；培养基⑺其他成分有(NH4)2SO40.1%，K2HPO40.1%，KH2PO40. 01%，0.025%，FeCl30. 0005%；以上培养基均以121℃灭菌20 min。 2.2.3醋酸菌的分离纯化 2.2. 3.1分离纯化实验 称取醋醅样品5g，液态增殖培养48h后，按照浓度梯度10-6、10-7和10-8，

链球菌和葡萄球菌分离鉴定

青岛农业大学 兽医微生物学课程论文 题目：链球菌和葡萄球菌分离鉴定 姓名： 学院：动物科技学院 班级：马业科学1201 学号： 2012 任课教师：温建新 二0一四年四月十二日

链球菌和葡萄球菌分离鉴定 班 2012 指导教师温建新 摘要：为了鉴别致病性葡萄球菌和链球菌，我们将用过氧化氢试验，甘露醇试验，凝固酶试验等方法进行鉴别，并根据他们的不同性质出现不同的结果，得出菌的种类。 关键词：葡萄球菌；链球菌 引言：葡萄球菌是一群革兰氏染色阳性球菌【1】，因常常堆聚成葡萄串状而得名。多数葡萄球菌为非致病菌，少数可致病。代表种有金黄色葡萄球菌。白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌等。典型的葡萄球菌为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，革兰氏染色阳性，无鞭毛，无荚膜，不产生芽胞，呈球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。易被常用的碱性染料着色，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧【2】., 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。致病性菌株能分解甘露醇. 链球菌是一类球形的革兰氏阳性细菌【2】，属于厚壁菌门的一个属。这些细菌细胞分裂时总是沿一个轴，所以通常成对或者链状的。因为这些特征，他们被称作“链球菌” . 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，多数呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。链的长短与菌种及生长环境有关，在液体培养基中形成链状排列比在固体培养基中形成的链长。幼龄菌大多可见到透明质酸形成的荚膜，如延长培养时间，荚膜可被细菌自身产生的透明质酸酶分解而消失。无芽胞，无鞭毛，有菌毛样结构，含M蛋白，革兰氏染色阳性。能发酵简单的糖类，产酸不产气, 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高。【1】普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。血琼脂平板上形成灰白色、有乳光、表面光滑、边缘整齐、直径0.5—0.75mm的细小菌落，不同菌株有不同溶血现象。肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌均产生α溶血环【3】。

猪链球菌病

一、概念 猪链球菌病是由多种不同群的致病性链球菌引起的一种人畜共患的急性、热性传染病。是一种多型性疾病，主要表现为急性出血性败血症、心内膜炎、脑膜炎、关节炎、哺乳仔猪下痢和孕猪流产等 二、病原 链球菌(stroptococcus)属于G+ 球菌,种类很多，现已分离出35个菌株，分为32个荚膜型，其中9—14亚型可引起仔猪发病。 生物学性状: （一）形态染色 球形或卵圆形，直径0.6～1.0um，呈链状排列，短者4～8个细菌组成，长者有20～30个细菌组成。幼龄培养物大多可见到透明质酸形成的荚膜。无芽胞，无鞭毛，革兰氏染色阳性。（但在陈旧培养基或脓液标本中常呈阴性） （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，有些为厌氧菌。营养要求较高，普通培养基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生长。最适温度37℃，最适PH7.4～7.6，血琼脂平板上形成灰白、光滑、圆形突起小菌落，不同菌株有不同溶血现象。 (三)、生化反应 能发醇简单的糖类，产酸不产气。一般不分解菊糖，不被胆汗或1%去氧胆酸钠所溶解。这两种特性用来鉴定甲型溶血型链球菌和肺炎球菌。（四）抗原结构 主要有三种： 1．核蛋白抗原:或称P抗原，无特异性，各种链球菌均同，与葡萄球菌有交叉。 2．群特异性抗原：多糖抗原或称C抗原系统族特异性抗原，是细菌壁的组成成份。对人致病的90%属于A族，其次为B族，其它族少见。 3．型特异性抗原：蛋白质抗原或称表面抗M、R、T、S等四种不同性制质的抗原组份，具有型特异性。是链球菌细胞壁的蛋白质抗原，位于C抗原外层，同族链球菌可根据表面抗原不同进行分型，如A族链状菌可据此分为60多型。 （五）分类 1．根据对红细胞的溶血能力 （1）甲型溶血性链球菌（α-Hemolytic streptococcus）,菌落周围有1～2mm宽的草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。这类链球菌亦称草绿色链球菌（Streptococcus viridans）。此类链球菌为条件致病菌。 （2）乙型溶血性链球菌（β-Hemolytic streptococcus）菌落周围形成一个2～4mm 宽，界限分明、完全透明的溶血环，完全溶血，称乙型溶血或β溶血。这类细菌又称溶血性链球菌(Streptoccus hemolyticus)，致病力强，引起多种疾病。 （3）丙型链球菌（γ-Streptococcus），不产生溶血素，菌落周围无溶血环，故又称不溶血性链球菌(Streptococcus non-hemolytics)，一般不致病。 2．根据抗原结构分类 按C抗原不同可分类A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T 等18个族。对人致病的大多属于A族。A族又称为化脓性链球菌（Pyogenic streptococcus）。 3．根据对氧需求分类又可分为需氧、兼性厌氧和厌氧三大类链球菌。（六）抵抗力

猪放线菌病的病原及鉴别诊断

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/4313605275.html, 猪放线菌病的病原及鉴别诊断 作者：卜秋实 李海洋 来源：《现代畜牧科技》2015年第04期 猪放线菌病是由猪放线菌所引起的一种慢性非接触性传染病。为革兰氏染色阳性、不运动、不形成芽孢、非抗酸性的兼性厌氧菌。菌体呈纤细丝样，有真性分支，故与真菌相似。病原在病灶内常形成菊花形或玫瑰花形的菌块，外观似硫磺颗粒。该病的主要临诊特征为败血症、肺炎、肾炎、关节炎、尿道炎、膀胱炎、输尿管炎等尿道疾病，流产和心内膜炎，患病动物的皮肤、黏膜或其他组织形成明显的肉芽肿或脓肿。 1 病原 猪放线杆菌为小杆菌，革兰氏阳性杆菌，长2～3 m，宽0.3～0.5 m。在组织和培养基上呈丛状或栅栏样，不运动，不形成芽孢，无荚膜。在动物组织中能形成带有辐射状菌丝的颗粒状聚集物，外观似硫磺颗粒，呈灰色、灰黄色或微棕色，大小如别针头状，质地柔软或坚硬。组织压片经革兰氏染色，其中心菌体为紫色，周围辐射状的菌丝呈红色。猪放线杆菌可在麦康凯培养基上生长，在血琼脂上厌氧培养时，该菌生长良好，48h可见到直径2～3mm的菌落，继而长成扁平干燥、灰色、表面不透明、边缘呈锯齿状的大菌落，不太黏稠，呈β溶血。在血清肉汤培养基生长可形成黏稠的沉淀物。猪放线杆菌对外界的抵抗力不强，一般消毒药均可迅速将其杀灭。对青霉素、链霉素、四环素、林可霉素和磺胺类等药物敏感。流行病学患病猪和带菌猪是该病的主要传染源。猪放线杆菌常存在于各种年龄健康猪的扁桃体、口腔和健康母猪的阴道。另外，猪的上呼吸道、消化道和皮肤，污染的土壤、饲料和饮水也存在该菌。猪放线杆菌属于条件性致病菌，主要通过损伤的黏膜或皮肤感染。大部分6月龄或更大的公猪在包皮的憩室部位存在有猪放线菌，可能是在几周龄时猪放线菌就定植在这个部位。新生仔猪、哺乳仔猪和断奶猪常出现临诊发病，而母猪和成年猪发病少见。 2 鉴别诊断 根据临床症状和肺脏的病理变化，可做出初步诊断，确诊需做细菌学检查与病原分离。可用血琼脂平板进行细菌分离培养，观察菌药的溶血现象。 急性咽喉型炭疽。主要侵害颌下、咽后及颈前淋巴结，而肺没有明显的发炎病变。最急性猪肺疫的咽喉部肿胀是咽喉部周围组织及皮下组织的出血性浆液性炎症，肺有急性肺水肿变等病变。涂片用碱性美蓝液染色后镜检，炭疽可见到带红色荚膜的大杆菌，猪肺疫可见到两端浓染的长椭圆形小杆菌。 猪气喘病。患猪主要症状是气喘、咳嗽，体温不高，其全身症状轻微。肺炎病变呈胰样或肉样，界限明显，两侧肺叶病变对称，无化脓或坏死趋向。

醋酸菌

葡萄酒与醋酸菌 梁曼发酵工程2011050783 摘要：葡萄酒是一种成分复杂的胶体溶液，从葡萄汁酿成葡萄酒以后，不管是在酒厂的贮藏阶段，还是装瓶以后，它总是在一刻不停地变化着。由于各种微生物在葡萄酒中的生长繁殖，使得葡萄酒失去了原有的风味，这种现象称为葡萄酒的病害。在酿酒学领域，醋酸菌几乎不受关注，可能是因为醋酸菌是严格好氧菌，因此人们认为该类菌在葡萄酒中不能生存，除了葡萄酒表面能够永久的与空气接触。醋酸菌是葡萄酒酿造中的大敌。凡是有酒花生长之处，就有醋酸菌在一起繁殖；一旦条件具备，会迅速把酒精氧化变成醋酸，使葡萄酒产生醋酸气味，有刺舌感，严重破坏酒质。在发酵过程中，可通过合理措施来防治醋酸菌的污染。 关键词：醋酸菌；醋酸菌污染；防治措施 1葡萄和葡萄酒相关的醋酸菌 1.1醋酸菌的分类 醋酸菌是能够将酒精氧化成醋酸的一类微生物的总称。醋酸菌是多种形态，细胞椭圆到杆状，0.5-0.8×0.9-4.2微米。单个，成对或成链，不形成孢子。革兰氏染色阴性。醋酸菌是专性好氧菌。有的醋酸菌不会运动，也有具极生或周生鞭毛的运动型。 醋酸菌被分为醋杆菌属（Acetobacter）、酸单胞菌属(Acidomonas)、葡糖醋杆菌（Gluconobacter）、葡糖酸醋酸杆菌（Gluconacetobacter）( Ruiz et al., 2000)。其中关于各属醋酸菌间的不同（表1），主要区别是葡糖杆菌不能将乙醇最终氧化生成CO2和H2O，而其他属均可。 1.2与葡萄和葡萄酒相关的醋酸菌 与葡萄和葡萄酒相关的醋酸菌一般有下列几种：氧化葡糖杆菌、纹膜醋杆菌、巴士醋杆菌、Gluconacetobacter liquefaciens（原来一直被认作是液化醋杆菌）、Gluconacetobacter hansenii（以前一直被认作汉生醋杆菌）。 在未损坏葡萄上发现的醋酸菌主要是氧化葡糖杆菌，菌体数量一般为 102-105cells/mL( Du Toit and Lambrechts, 2002)。人们认为氧化葡糖杆菌低耐酒精能力，所以在酒精发酵过程中很快就死了，在酒中分离得到其细胞数量为104cells/mL(Drysdale and Fleet, 1985)。一般在酒精发酵结束后其细胞数目会减少，为0-102cells/mL( Du Toit and Lambrechts, 2002)。 腐烂或感染灰霉菌的葡萄上醋酸菌数量会大幅度增加，细胞数目由每毫升很少到106cells/mL(Barbe et al., 2001)。葡萄刚污染醋酸菌时，醋杆菌属为优势菌。可能是由于受损葡萄污染了的野生酵母产生的酒精的原因，醋杆菌属能够优先利用酒精作为碳源。 当压榨完的葡萄带皮在较低温度下放置几天，冷浸渍用来在酒精发酵开始前浸提更多色素(Ribéreau-Gayon et al., 2000)。在这段时期内，发酵液的微生物学状态会发生变化，尽管会添加SO2来防止危害酵母菌和细菌的生长。在该过程中，发酵液的pH也会影响醋酸菌的数量：较高pH，细菌数量增加，在这种状况下，较少SO2会产生抗菌作用，而是在较低pH下（pH＜3.5）保持最初的浓度(Du Toit and Lambrechts, 2002)。 由于对酒精耐受力和把酒精作为碳源和能源的偏好的不同，多种醋杆菌经常从葡萄酒中分离得来，而葡糖杆菌常从葡萄汁中分离得到。氧化葡糖杆菌是葡萄与葡萄汁的混合液中主要的菌种。汉生醋杆菌和液化醋杆菌最近被重新指定为汉生氧化葡糖杆菌和液

实验 金黄色葡萄球菌的分离和鉴定

实验题目金黄色葡萄球菌的分离和鉴定 一、实验目的 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害，我们要分离出它们并研究。 二、实验原理 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8um左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1—2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10—15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，V—P反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 三、实验材料和设备 1.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（13%NaCl）：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠130g，琼脂15g，蒸 馏水1000ml，121℃灭菌20min后倒平板。 肉汤培养基：酵母膏5g，蛋白胨10g，氯化钠10g，蒸馏水1000ml，121℃灭菌20min。 甲苯胺兰-DNA平板 2.试剂 磺胺类药物、革兰氏染液 3.仪器和设备 显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。 四、实验方法 金黄色葡萄球菌的分离： 1.称取5g土样，在无菌条件下放入灭菌的锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，再加入200ul 磺胺类药物，振荡10min，使土样充分混匀。利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。 2.从上述锥形瓶中取5ml上清液放入一只干净的试管中，30℃，200rpm，24h。 3.取培养好的菌液，按梯度稀释法稀释土壤悬液，依次制备成100、1000、10000、100000倍悬液后，分别取200ul涂布于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，置于37℃培养箱中培养24h。利用高盐培养基抑制其他细菌的生长，从而分离金黄色葡萄球菌。 金黄色葡萄球菌的鉴定： 1.菌落形态：菌落较小，较湿，较透明，边缘整齐，隆起。

链球菌病

链球菌病-常见的病原 Sandy Amass and Gottschalk 链球菌感染是复杂的，因为有很多不同的血清型或菌株常存在于猪的扁桃体和鼻腔中。有必要对特殊的可引起明显临床症状的菌株进行流行病学的研究。用于比较同一血清型不同菌株的新的强有力的分子生物学技术将有利于我们了解这种疾病。 几乎所有猪的上呼吸道中都携带链球菌。实际上，链球菌可以看作猪扁桃体和鼻腔中的正常菌群，并且甚至可从健康猪肺脏中分离到。致病菌株并不存在于所有猪体内，因此，从猪的上呼吸道中分离到链球菌，不应该诊断为疾病。一头猪体内可以携带不同血清型的，甚至同一血清型中的不同菌株。 因为很多链球菌菌株的毒力并不知道，有必要对某些引起临床疾病的菌株进行流行病学调查。例如，在大量猪体内或支气管肺炎的纯培养物中分离到的链球菌，只能看作肺脏潜在的病原。 感染的日龄 通常认为，最危险的时期是在5-10周龄之间，每一猪场都有特定的发病时期。 链球菌的水平传播常在断奶后立即发生，此时小猪会打架，通过咬出来的伤口，混合感染性的唾液和血液。但是，在打架的育肥猪舍内也可能因此发生损失，通常在育肥的初期阶段到60千克时发生。 老母猪有可能感染新引进的后备母猪。实际上，母猪通常扮演病原储存宿主的角色。链球菌不仅能够存在于上呼吸道，而且可以存在于生殖道。这是非常重要的，因为有些新生仔猪可以在分娩时感染（垂直传播）。 为什么一窝里仅有部分仔猪受到感染，其它猪没有问题，到现在还没有搞清楚。主要是由于现有设备的敏感性不能进行准确地诊断。最近开发的试验（选择性分离、检测特异血清型DNA的分子试验）将会很快提高我们有关本阶段和以

有关外，影响较大猪发病的因素同样没有弄清。 II型链球菌引起的脑膜脑炎，神经症状、划船样动作、耳直立、眼睛上翻 应激反应刺激的表现 在生产到肥育系统中，临床症状的突然爆发并不说明感染是最近才引进猪场的。有可能细菌在很早以前就存在，而且没有临床症状。 可以认为很多饲养条件能增加疾病爆发的危险性。这些因素包括：过度拥挤、与通风不足（氨气、CO2、灰尘浓度或湿度过高）有关的高温、温度的波动和以不同日龄的猪和粪尿污染严重（仔猪周围和下面）为特征的饲养管理不良等。 在全进全出饲养系统中，因为与其它病原的感染一样，这一系统变化的突然性和严重感染猪与易感仔猪混合，有致病力的链球菌可快速致病。 临床诊断 Lisa Tokach, Steve Henry and Enric Marco 感染日龄和发病症状随猪场不同而不同，但对特定猪场来讲是相对固定的。断奶仔猪的链球菌病通常根据以下一项或更多的临床症状做出初步诊断：急性死亡、脑膜脑炎、发热（40-42°C）和关节炎, 潜伏期极短（＜24小时）。因此，在急性爆发时，最早的症状可能仅仅是发现一头或几头死猪。 有时，链球菌发病不是很快，因此有可能观察到关节炎。有些结局，如在恢复的仔猪可以见到瞎眼和头部姿势异常（容易与中耳感染混淆）。 很少发生于哺乳仔猪

醋酸菌分离及鉴定

醋酸菌分离及鉴定 一、培养基 1、分离培养基（溴甲酚紫显色平板）:葡萄糖1%、酵母膏1%、无 水乙醇3%（体积分数）、0.04%溴甲酚紫5%（体积分数）、琼 脂1.8%、水100 mL，0.1 Mpa 灭菌20 min，无水乙醇在灭菌 后培养基温度降到75 ℃左右时加入。 2 、保藏培养基: 葡萄糖1%、酵母膏0.5%、琼脂2%、丙三醇2.5% （体积分数）、水100 mL，121℃灭菌20 min 备用。 3、液体培养基:葡萄糖1%、酵母膏0.5%、丙三醇2.5%（体积分 数）、水100 mL，调节pH 至6.30，121 ℃灭菌20 min 备用。 二、醋酸菌分离纯化流程 样品→醋酸菌发酵液中富集培养→稀释分离→纯化→斜面试管 保藏→产醋酸定性测试。 三、步骤 1 、菌株分离 取1g 醋醅样品置入无菌试管，装入9 mL 无菌水，振荡均匀后得到10-1 的稀释液，之后10 倍梯度稀释直到10-6 稀释度。取 10-2至10-6 稀释度的样品稀释液分别涂布溴甲酚紫显色平板，每个稀释度涂布2 个平板，每个平板涂布0.2 mL 的样品稀释液，涂布完成后30 ℃倒置培养48 h左右。选取菌落数在30~50 个左右的平板，挑取该平板上的所有单菌落转入斜面保藏培养基中， 30 ℃培养24 h 左右后保存于4 ℃冰箱。

2 、菌株纯化将试管斜面中的菌株平板划线分离后再转接试管斜面， 4℃冰箱保存。 3、菌株归类以上述各菌株划线分离的平板为基准，将形成菌落极 其相似的菌株归为一大类。 4 、菌悬液的制备用接种环挑取新鲜培养的斜面菌株半环，溶于 装有200 μL 无菌超纯水的Eppendorf 管中，于试管振荡器上 混匀后得到菌悬液。 四、鉴定 1、菌株形态特征:镜下细胞呈短杆状,革兰阴性,无芽胞,单个或成 对、成链排列,个体大小为（0.5～0. 7)μm ×(1. 0～1. 5)μm。 2、培养特征:在葡萄糖、酵母膏、乙醇、CaCO3平板培养基上生 长旺盛,菌落圆形、油脂状,表面光滑、凸起,边缘整齐,培养2 d能 产酸,使CaCO3 溶解形成透明圈,继续培养将乙酸氧化分解产生 CO2 和水,菌落周围出现白色透明圈。在斜面培养基上生长良好, 培养2 d后呈油脂状,并产酸。在10% ( v / v)乙醇的培养基上、 Hoyer2Frateur培养液中、30%葡萄糖培养基上均不生长。 五、测试 1、产酸量的测定方法取1 mL 发酵液, 加入10 mL 蒸馏水, 3 滴～ 5 滴0.02 %酚酞酒精溶液, 用标定的0.1 mol/L NaOH 溶液滴定 至浅粉色。由所耗的NaOH 溶液的量来计算样品中的含酸量(以 醋酸计)。 产酸量( %) =( V- V0) ×CNaOH×0.06×100 %

病原微生物第9章 球菌习题与答案

第 9章球菌 一、选择题 【A型题】 1．SPA存在于： A．所有的葡萄球菌表面 B．化脓性球菌表面 C．90％以上金黄色葡萄球菌表面 D．表皮葡萄球菌表面 E．产肠毒素的葡萄球菌表面 2．鉴定葡萄球菌致病性的重要指标是： A．产生溶素 B．产生血浆凝固酶 C．产生色素 D．具有SPA E．发酵葡萄糖 3．关于SPA，下列哪一项是错误的? A．为金黄色葡萄球菌表面的蛋白质抗原 B．为所有的葡萄球菌都具有的一种结构 C．能与人类IgG的Fc段结合 D．具有抗吞噬作用 E．与协同凝集相关 4．葡萄球菌引起化脓性炎症，其脓汁黏稠、局限，与下列哪种因素有关? A．溶素 B．杀白细胞素 C．血浆凝固酶 D．透明质酸酶 E．链激酶 5．葡萄球菌溶素对人类有致病作用的主要是： A．a B．β C．γ D．δ E．ε 6．葡萄球菌肠毒素的主要作用是： A．直接损伤肠黏膜细胞，导致腹泻 B．直接损伤胃黏膜细胞，导致呕吐 C．直接毒害中枢神经系统，引起昏迷 D．通过刺激呕吐中枢而导致呕吐 E．直接毒害肠黏膜血管，导致出血性肠炎 7．引起亚急性心内膜炎常见的细菌是： A．甲型溶血性链球菌 B．乙型溶血性链球菌 C．金黄色葡萄球菌 D．肺炎链球菌 E．脑膜炎奈瑟菌 8．各型链球菌中，致病力最强的是： A．甲型溶血性链球菌 B．乙型溶血性链球菌 C．丙型链球菌

D．B群链球菌 E．D群链球菌 9．测定SLO抗体，可协助诊断： A.风湿热 B．肠热症 C．类风湿性关节炎 D．猩红热 E．红斑性狼疮 10．链球菌分类的依据是： A．形态特征 B．菌落特征 C．生化反应 D．溶血性 E．致病性 11．脑脊液离心后取沉淀物涂片染色，镜检发现中性粒细胞内外有革兰阴性双球菌，该病人可诊断为： A．结核性脑膜炎 B．流行性乙型脑炎 C．流行性脑脊髓膜炎(流脑) D．新生隐球菌性脑膜炎 E．脱髓鞘脑脊髓膜炎 12．脑膜炎奈瑟菌主要的致病物质是： A．外毒素 B．内毒素 C．自溶酶 D．溶素 E．杀白细胞素 13．肺炎链球菌致病与否主要依赖于： A．内毒素 B．外毒素 C．侵袭性酶类 D．荚膜 E．芽胞 14．奈瑟菌属包括： A．脑膜炎球菌 B．肺炎球菌 C．白假丝酵母菌 D．新生隐球菌 E．腐生葡萄球菌 15．淋病奈瑟菌的主要致病因素是： A．内毒素 B．外毒素 C．侵袭性酶 D．菌毛 E．荚膜 16．关于流脑的叙述，下列哪一项是错误的? A．主要致病因素为内毒素 B．95％以上由B群脑膜炎球菌引起 C．人类为唯一的传染源 D．主要通过飞沫传播 E．暴发型以儿童为主

链球菌的分离鉴定及药敏试验

链球菌的分离鉴定及药敏试验 摘要为分离和鉴定疑似链球菌感染病料，该试验采用革兰氏阳性菌选择性培养基进行分离培养，并进行生化试验鉴定及药敏试验。结果表明：6份病料中分离出6株链球菌菌株，根据生化试验鉴定表推断出，有4株为C群，1株为D 群，1株为E群。药敏试验结果表明，先锋必和青霉素对链球菌有较好的抑制作用，此结果为链球菌病的研究和防治提供一定的理论依据。 关键词链球菌；分离鉴定；药敏试验 链球菌（Streptococcus）广泛存在于自然界，水、尘埃、动物体表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等都有存在，大多数不致病。医学上重要的链球菌主要有化脓性链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌、羊链球菌等，有些可致人和动物各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。近段时间，楚雄州部分羊场发生羊急性死亡病例，该试验通过对部分羊场送检的7份病料进行分离鉴定与药敏试验，了解各地羊发病的原因，从而为该病的预防和用药提供一定的理论基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 病料来源。各地送检的疑似链球菌病引起的病变组织，共7份，保存于4 ℃冰箱。 1.1.2 试验试剂。牛心浸液、兔子全血、牛肉浸膏、琼脂粉、血清、蛋白胨、磷酸二氢钠、氯化钠、无水磷酸氢二钠、蒸馏水、乙醇、氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钾、酵母金粉、胰胨、L-精氨酸盐盐酸、柠檬酸铁、0.5%酸性复红、精氨酸、马尿酸钠、七叶苷、淀粉酶、甘露醇、乳糖、棉子糖、山梨醇、菊糖、水杨苷、海藻糖、伯胶糖等，均来自于传染病实验室。 1.1.3 培养基。叠氮钠血琼脂、营养琼脂、牛心浸液培养基、马丁肉汤培养基、6.5% NaCl生长培养基、血清糖发酵培养基、精氨酸培养基、3-羟基丁酮培养基、马尿酸盐培养基、七叶苷培养基、葡萄糖培养基、蔗糖培养基、海藻糖培养基等培养基均按照陈天寿《微生物培养基的制造与应用》[1]中的方法配制。 1.1.4 药敏片。青霉素、红霉素、万古霉素、卡那霉素、氟哌酸、先锋必、复方新诺明。 1.2 试验方法 1.2.1 病原分离培养。将病料从横断面剪开，露出新鲜的组织液，在叠氮钠血液培养基上涂抹一点后，做常规划线分离。37 ℃培养24～48 h，挑取可疑菌落做纯培养后，进行生化试验鉴定。

检测肺炎链球菌分布病原分离鉴定和耐药

检测肺炎链球菌分布病原分离鉴定和耐 药 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 肺炎链球菌是一种可以引起人类患病的条件致病菌,该菌属于链球菌科的链球菌属,又称肺炎链球菌。肺炎链球菌主要寄生于人类上呼吸道的口腔鼻咽部,作为正常菌群存在爿:不引起疾病,当机体免疫力下降时,可引起大叶肺炎化脓性脑膜炎中耳炎+心内膜炎等甚至败血症。肺炎链球菌引起的脑膜炎在细菌性脑膜炎中死{:率最高,为19%，是常见的机会致病芮。长期以来,由于肺炎链球菌生存条伺:较高，属兼性厌氧菌,又可产生自溶酶,菌落形态与甲型链球菌相似，因此检测时有误检和漏检现象。近年来,随着分离和鉴定技术的不断完善,对肺炎链球菌的检出卒逐年提高,而且耐药率也逐年上升,这与肺炎链球菌的分离鉴定刀:平及滥用抗生素有关，现将我院检出的肺炎链球苗185株的分布病原分离鉴定及耐药性分析如下： 1临床资料 1.1发病情况标本来源于吉林大学白求恩医学院附属医院，门诊及住患者185株肺炎链球菌阳性标本，年龄最小2岁，最大71岁，

平均年龄37岁，以儿童及老年人居多。其中痰培养108株(58%)，脑脊液培养23抹(1:%)，其他部位脓性分泌物49株(30%)，全部病两均川1—2种厂·谱抗生素治疗，同时配合辅助使用过糖皮质激素。 1.2临床表现及实验室检测患者均有化脓性感染病灶,高热.体温28—40T;白细胞数，12-23×109/L，分类:中性粒细胞60%—90%，有呼吸道症状感染者,咳铁锈包痰或黄色脓性痰，化脓性脑膜炎患者脑脊液呈黄色,潘氏反应(++++)，细胞数，1000×106/L:分类:中性粒细胞80%—90%，葡萄粮降底,1.5mmom/L。 1.3仪器和试剂微生物分析仪为生物梅里埃生产的Vitek-2，乏敏培养基及药敏纸片坫由北京药物技术开发部提供CO2培养箱由上海一恒科技有限公司生产血液分析仪为日本生产的Sysmex-XT-2000全自动血液分析仪生化分析仪为日本生产的AU640 2实验室检查 2.1镜检取纯培养物涂片革兰氏染色及荚膜染色镜检发现:该菌为革兰氏阳性球菌成双排列,呈矛头状,钝端相对,尖端相背,有较宽的荚膜可初步报告找到革兰氏阳性双球菌,疑似肺炎链球菌 2.2荚膜肿胀试验先将痰液置于盐水中洗涤,以除去唾液,脓液或脑脊液可直接进行试验,直接涂片发现有疑似肺炎链球菌时,可将标本少许置于玻片上,加少量未稀释的肺炎链球菌抗血清混匀,再滴加少量美蓝混合,口盖玻片,以油镜检查，若荚膜显著肿大,菌体周围有一无色宽的环状带,菌体无变化,且染成蓝色,此即荚膜肿胀试验阳性,可初

醋酸菌菌种分离筛选方法

醋酸菌菌种分离筛选方法 醋酸菌的细胞为椭圆至杆状，单个成双或成链，鞭毛周生或端生，运动或不运动，革兰氏阴性菌，好氧菌，一般在乙醇或其他可氧化物的酵母煮液或酵母消化液培养基生长旺盛。 醋酸的钠盐和钙盐与三氯化铁共热，生成红褐色沉淀，原液变成无色。 可进行分离菌鉴别。 1.培养基： 1.1米曲汁乙醇碳酸钙培养基：米曲汁（10-12BX）1000mlCaCO 310-15g95℅乙醇30-40ml（灭菌后加入）PH自然 1.2葡萄糖碳酸钙培养基：葡萄糖15g/L酵母膏10g/L CaCO 315g/LPH 6.8 1.3乙醇30mL/L酵母膏10g/L葡萄糖10g/L CaCO 310-15g/L（常规筛选培养基）PH 6.8-7.0注：常规培养基中的碳酸钙易沉淀，平板不易观察到透明圈，选择米曲汁乙醇碳酸钙培养基为好。 1.4醋酸菌保存培养基：酵母膏15g/L葡萄糖10g/L CaCO 315-20g/L琼脂15-20 g/L 3-4滴乙醇/试管。 1.5液体种子和发酵培养基：乙醇30-35mL/L膏酵母10g/葡萄糖10g/L KH 2PO 40.5g/L MgSO 40.5g/L PH 6.5-6.8 2.菌种筛选：

2.1集菌：1-2g（5ml）样品，在无菌下加入30-50ml/250ml米曲汁乙醇液体培养基（0.5ml 0.02℅结晶紫醋酸溶液/100ml培养液）中， 130-33℃震荡培养24-48h，集菌液PH明显下降，有醋味，镜检细胞革兰氏染色阴性。形态与醋酸菌相符即可分离。 2.2混菌法分离：（分离及初筛） 适度稀释10-5、10-6、10-7取1.0ml菌液置于无菌平板或涂布中，每个梯度平行两次，米曲汁乙醇碳酸钙培养基倒平板，30℃24-48h，观察有小菌落出现，菌落周围形成透明圈，圈的大小因菌而异。挑透明圈出现早且菌落丰厚，边缘整齐，生长旺盛不同的菌落转接于曲汁乙醇碳酸钙斜面，30-33℃24-48h。根据菌落周围溶解透明圈大小初步筛选出产酸高的菌种。 2.3性能测定：（复筛） 不同菌落接种于液体曲汁乙醇培养基（30-50ml/250ml）中，30℃震荡培养24-48h。2.3.1镜检：染色镜检细胞整齐，椭圆或短杆状，革兰氏阴性菌。 2.3.2性能测定： 醋酸定性分析：取发酵液（离心去菌体）5.0ml于洁净试管中，用10℅氢氧化钠中和PH至7.0，加入1℅三氯化铁溶液2-3滴，摇匀，观察溶液是否变黄褐色，加热共沸，形成红褐色沉淀，原液变无色者为产醋酸细菌。 生酸量测定：1.0ml发酵液于150ml三角瓶中，加中性蒸馏水10-20ml，酚酞指示剂2滴，用0.1mol/l氢氧化钠滴定至微红色。 醋酸量（g/100mL）=氢氧化钠摩尔浓度.Vx60.06x10-3/样品毫升数x100 2同时，进行单因素试验，分别考察醋酸速度，耐高温，耐酒精度，耐低酸度等主要生产性能，选择优势菌株。 3

优势醋酸菌的分离筛选

优势醋酸菌的分离筛选 焦文娟王花秀李鲜鲜彭浩然焦晓阳 周口师院07生物工程（2）班 摘要:利用液醋分离筛选出2株较优醋酸菌,同时对这2株醋酸菌的 产酸速度、耐酒度、耐温度、耐食盐能力、酒精转化率等性能及果汁发酵产生果醋进行了研究。结果表明: 2株醋酸菌产酸速度均较快, 最适发酵温度均为30℃左右;酒精转化率醋酸菌28号为89.0% ,醋酸 菌36号为92.8% ,醋酸菌36号要比醋酸菌28号更耐高浓度酒精;用醋 酸菌36号纯种进行果汁发酵产生果醋,其总酸为42.7g/ L 。 关键词醋酸菌;果醋;耐酸度;耐温度 （-）研究的意义及现在的进展： 果醋作为一种酸性发酵健身饮料,含有丰富的维生素、无机盐、氨基酸和有机酸类,且风味独特,因而深受广大消费者欢迎。在果醋生产中,醋酸菌的性能对产品质量、发酵效率有很大影响。所以,选育产酸快、耐酒度、耐高温、耐食盐、酒精转化率高、适合果醋生产的醋酸菌是一项十分重要的工作。此外，因醋酸菌的活动将乙醇氧化为乙酸，即醋酸，可用于食品酿造中。食醋的酿造大体上可分为表面发酵法和深层发酵法仁忍。这两种发酵方法主要都是依靠醋酸菌的活动将乙醇氧化为乙酸即醋酸。国外对醋酸菌优质菌株的选育和醋酸发酵机理的 研究非常重视, 做了大量工作。国内对醋酸菌优良菌种的应用也日益重视起来, 并积累了不少有关醋酸菌分类鉴定及性能研究的资料。目前我国应用于液体醋生产的醋酸菌有工恶臭醋酸杆菌混浊变种普遍

应用于酿醋生产。最适培养温度28到30度。最适pH值3.5到6.0耐乙醇能力小于0.08, 最高产酸量70到90g/l。能进一步将醋酸氧化为二氧化碳和水过氧化反应。沪酿1.01:罗旺醋酸杆菌,是上海醋厂从丹东速酿醋中分离到的一株优良醋酸菌, 也是我国酿醋行业普遍使用的菌种。沪酿1.079:是1984年从上海醋厂老法发酵醋酷中分离到的一个新菌株。在0.1乙醇时产酸达到63.6g/l, 而且耐乙醇能力达到0.17乙醇时仍能产酸。 （二）材料与方法 1 实验材料 液醋:由大连调味食品厂提供;浓缩苹果汁:由大连真爱果汁公司提供。葡萄酒酵母:由大连轻工业学院微生物教研室提供。 2 实验方法 培养基的制作、酸度测定、醋酸定性试验. 一基础培养基 1%酵母膏,1%葡萄糖。pH 4.5,50000Pa 灭菌30min。使用前加入0.03无水乙醇。 二产酸试验培养基 1’基础培养基临用前加入0.07无水乙醇, 分 装于500ml三角瓶, 每瓶50ml;2’酵母膏1%,pH4.5 使用前按需要量加入无水乙醇, 分装于500ml三角瓶, 每瓶70ml。以上培养基用冰乙酸调pH值。 三分离和斜面保藏培养基 100ml基础培养基中加入2%琼脂, 灭菌 后加入5%无菌碳酸钙和0.03无水乙醇, 为分离培养基。分装试管,灭菌后摆成斜面即为保藏培养