黄芪多糖对非肥胖糖尿病鼠胰岛超微结构及氧化凋亡因子表达的影响
复旦学报(医学版)
F udan U niv J M ed Sci 2007Mar,34(2)
黄芪多糖对非肥胖糖尿病鼠胰岛超微结构及
氧化凋亡因子表达的影响
陈 蔚 俞茂华 李益明
v
(复旦大学附属华山医院老年科 上海 200040)
【摘要】 目的 探讨黄芪多糖(A P S)对非肥胖糖尿病(NO D)小鼠1型糖尿病(DM )免疫干预的分子机制。方法 20只N OD 小鼠随机分为A PS 干预组和生理盐水(NS)对照组,观察两组N O D 鼠DM 发生率和胰岛电镜超微结构,应用RT -CPR 检测两组小鼠胰腺内F as 、iNO S 、Bc-l 2、SOD mRN A 的表达水平。结果 A PS 组1型DM 发生率较对照组明显降低(AP S 组:3/10,30%;N S 组:9/10,90%),平均发病时间也明显延缓[A PS 组(26.25?5.68)周,NS 组(21.8?6.78)周,P <0.05]。A SP 组胰岛超微结构保存完好,B 细胞胞核、核膜完整,内质网无扩张、线粒体无增多,分泌颗粒丰富。RT -P CR 结果显示,A PS 组F as 、iNO S 的mRN A 表达水平明显下调,Bc-l 2、SOD 的mRN A 表达水平明显上调。结论 A PS 能纠正NO D 小鼠氧化或凋亡的免疫失衡状态,预防或延缓1型糖尿病的发生。
【关键词】 黄芪多糖; 1型糖尿病; 免疫; 细胞因子; 胰岛; 超微结构【中图分类号】 R 587.1 【文献标识码】 A
上海市卫生局中医药科研基金项目(982029)
v
通讯作者 E -mail:yim ingli @https://www.360docs.net/doc/512084776.html,
Effects o f a stragalus po lysacch arid es o n u ltrastru ctu re and oxid atio n/apo ptosis
related cytok ines c gene exp ression of n on -obese diab etic mice c s islets
CH EN Wei,YU M ao -hua,LI Y-i m ing
v
(Department of Geriatrics,H uashan H ospital,Fudan Univ ersity ,S hanghai 200040,China)
【Abstract 】 Pur pose Purpose T o investigat e t he molecular mechanism of the prevent ive eff ect s of as -tragalus polysaccharide(A PS)on t he onset of type 1diabetes mellit us (DM )in non -obese diabet ic (N OD)mice. Methods T wenty NOD mice w ere divided int o t wo groups,t reat ed with A PS and NS,respectively.Blood glucose w ere measured,and t he ult rast ructure of islet beta cells was also observed with elect ron microscope.T he mRN A expression of Fas,-i NO S,Bc -l 2and SOD in islet cells of t wo groups was t est ed w ith RT -PCR. Results Compared w ith the control group,the incidence of DM in APS group was lower (APS group:3/10,30%;N S group:9/10,90%),and the onset of illness was postponed [APS group:(26.25?5.68)weeks,NS group (21.8?6.78)weeks,P <0.05].U ltra -struct ure of islet s was well prot ect ed in APS group.T here were int egrity of cell membrane and karyot heca,increase of secret ory granules,no increase of mit ochondria or dilat alt ion of endoplasmic re -ticulum,and no vacuoles.As compared t o NS group,t he mRN A expression of Fas,iNOS was lower in islet cells of APS group,while t he mRN A ex pression of Bc-l 2,SOD was higher in APS group. Conclusions Ast ragalus polysaccharide decreases the incidence of t ype 1DM in N OD mice by correc -ting the imbalance of oxidation /apoptosis relat ed cytokines.
【Key words 】 astragalus polysaccharide; type 1diabet es; immune; cyt okines; islet; ultra -struct ure
1型糖尿病(diabete mellitus,DM )是一种在遗传基础上由环境因素触发的慢性自身免疫性疾病,
其发病与机体氧化/凋亡反应的免疫失衡密切相关。黄芪多糖(astrag alus poly -saccharide,APS)是黄芪
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的主要有效成分,对细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能及细胞因子的活性均有调节作用。非肥胖糖尿病(non-fobes diabetic,N OD)小鼠是模拟人类的可自发出现由T淋巴细胞介导的胰岛B细胞破坏而发生1型DM的动物模型。本研究拟通过应用APS预先免疫NOD小鼠,观察其对NOD鼠胰岛细胞电镜超微结构及氧化/凋亡反应相关细胞因子mRNA的表达水平的影响,以探讨A PS对NOD鼠1型DM免疫干预的分子机制。
材料和方法
材料NOD小鼠购自上海中国科学院实验动物研究所;A PS由上海中国科学院生理所提供; TRIzol总RNA提取试剂盒购自Gibco BRL公司; RT-PCR试剂盒购自Pro mega公司;引物由上海生工服务公司合成提供;其他试剂购自T aKaRa公司; PCR扩增仪、分光光度计、凝胶成像分析仪购自Bio-Rad公司;戊二醛溶液、电子显微镜由复旦大学上海医学院电镜室提供。
动物实验雌性4周龄NOD小鼠20只,随机进入各组实验:(1)APS处理组(10只),APS2g/ kg#d,口服(插胃管灌入)2月;(2)N S对照组(10只),等量生理盐水(NS),口服(插胃管灌入)2月。每周测定3次体重、血糖,观察至鼠龄40周;处死小鼠;新鲜胰腺组织依次固定、脱水、包埋、切片、染色,在透射电镜下观察、摄片;RT-PCR法检测所有小鼠胰腺的4种细胞因子mRNA表达。
总RNA提取抽提两组小鼠胰腺总RNA,按说明书操作,作纯度鉴定。
引物序列设计-i N OS、SOD、Fas、bc-l2、B-actin的引物序列分别见表1。
RT-PCR按逆转录试剂盒说明书操作。逆转录反应体系42e反应60m in,99e加热5min,冰浴10min;PCR反应体系在基因扩增仪上进行PCR 反应;不同的基因扩增时运用不同的循环数及Tm 值;每批模板均同时进行B-actin mRNA扩增作为内对照。凝胶电泳、扫描,用各细胞因子吸光度/B-actin吸光度之比表示各细胞因子mRNA的量。
统计学分析采用t检验。
表1基因的引物序列
Fig1Primer sequence of cytokines Cytokine Primer s equence
iNOS(512bp)F5c-GT G T CC CAC C AG GAG AT G T TG-3c R5c-CTC CT G CCC ACT GAG T TC GTC-3c
Fas(1143bp)F5c-TGG GCT T T G T CC AT G T AC TCC T TCT-3c
R5c-GT T T CA CGA CT G GAG GT T GT A GAT TCA T GA-3c
bc-l2(386bp)F5c-ATC T TC T CC T TC CAG CCT GA-3c R5c-TCA GAC AT C CAC AGA GCG AT-3c
SOD(399bp)F5c-GC T ATT CAC T T C GAG CAG AAGG-3c R5c-GCG AAC GAA CAC CAC ACT AA-3c
B-actin(318b p)F5c-ATC AT G T TT GAG ACC T T C AACA-3c R5c-CAT CT C T T G CT C GAA GT C CA-3c
F-forw ard,R-reverse
结果
1型糖尿病发病率和发病时间以血糖\13.3 mmo l/L且持续一周以上诊断为DM,统计DM发病率和发病时间。40周观察期内,APS组小鼠仅有3例发生DM,总患病比率为30%,小于对照组的患病比率(9/10,90%),差别有显著性(P<0.05)。APS组的平均发病时间为(26.25?5.68)周,比NS 组的(21.8?6.78)周延缓,差别有显著性(P< 0.05)。各组小鼠随着观察期的延长DM发生率变化见图1,表明APS有预防和延缓NOD小鼠DM 发生的作用。
胰岛B细胞超微结构的影响在透视电镜下将胰腺组织放大5000~10000倍后观察胰岛周围和内部超微结构,可以看到:①对照组的糖尿病NOD 小鼠未找到胰岛,即使未发病的NOD小鼠,也难以找到胰岛,其残存胰岛的B细胞内部有胞核核膜扩张,胞质中有大量内质网扩张及其内部核糖体脱颗粒,且线粒体含量增多,分泌颗粒数量减少,分布紊乱,且发生空泡样变等异常变化;B细胞边缘有淋巴细胞存在,且其膜足突已伸入B细胞膜,使B细胞膜受到部分损害而不完整,有的淋巴细胞已邻近B细胞胞核。②A PS预免疫组的未发病NOD小鼠胰岛B细胞内部,胞核核膜完整,无扩张变化;胞质中内质网无扩张及脱颗粒,线粒体无增多;分泌颗粒较对照组多,无异常空泡样变化;B细胞边缘包膜结构
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陈蔚,等.黄芪多糖对非肥胖糖尿病鼠胰岛超微结构及氧化凋亡因子表达的影响
完整,无淋巴细胞出现。APS 组的发病鼠胰岛超微结构受损程度也较对照组明显减轻(图4)
。
图1 APS 和NS 对照组NOD 鼠糖尿病发生率
Fig 1 Disease ratio of DM in NOD mice
tolerized with APS &NS
凋亡或氧化反应相关细胞因子的mRNA 表达
与对照组相比,APS 处理组小鼠胰岛的诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric -ox ide synthase,iN OS)、促凋亡基因(Fas)的m RNA 表达水平明显下降,而抗凋亡基因(bc-l 2)、过氧化物歧化酶(su -perox ide dismutase,SOD)的mRNA 表达水平明显上升,差异均有统计学意义(图2、3)
。
图2 RT -PCR 产物的凝胶电泳
Fig 2 Integrity of mRNAs on gel
electopphoresis
图3 APS 对iNOS 、F as 、bc-l 2、SOD mRNA 表达的影响F ig 3 Effect of AP S on iNOS,F as,bc -l 2,SOD mR NA expression
图4 胰岛细胞电镜超微结构
Fig 4 Ultrastructure of islet beta cells with electron microscope
A:NS control group (@7500):Nucleolus of B cell.It show s th e dilataltion or dis appearance of karyotheca,pykn os is of nucleolus ,aggregation of heterochromatin,decrease disappearance of organells,and secretory granules tran sform ing to vacuoles m embrane is des tru cted and is extended by pseudopodium of infiltrated lymph ocytes;B:NS con trol gr ou p (@4000):B cells.Five des tructive B cells are show n.T w o cells h ave only gathered h eter ochromatin an d vacu oles ,with no karyotheca or nuclei or cell mem -brane or oth er organells.Th ree cells are totally des tr ucted,w ith no organ ells or n uclei.Around are many infiltrated lymphocytes;C:APS group (@7500):Nu cleolus and secretory granules of B cell.It s how s the in tegrity of cell m emb rane and karyotheca,increas e of secretory granu les ,no increase of mitochondria or dilataltion of endoplasm ic reticulum ,no vacuoles;D:APS group (@4000):B cells.Thr ee B cells w er e s howm.It s how s th e integrity of cell mem brane and karyotheca,increas e of secretory granules,n o in -crease of mitoch on dria or dilataltion of endoplasmic reticu lum,no vacuoles.T here is n o infiltr ated lym -phocyte around
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讨论
1型DM是具有一定遗传基础、在多种环境因子触发下由T细胞介导的器官特异性的自身免疫性疾病。当机体对胰岛多种抗原成分失去耐受后,主要组织相容性复合物(M H C)-Ⅱ类分子与其处理的B细胞抗原共同激活辅助性T淋巴细胞(T h)中的Th1亚群,抑制T h2亚群,造成Th1/Th2型细胞因子的不平衡;进而激活细胞毒性T细胞(T CL)、巨噬细胞(M5)、自然杀伤细胞(NK),从而产生氧自由基、一氧化氮(NO)、细胞因子(IL-1、TNF A/B、IFN-C)等,对胰岛B细胞产生直接毒性,导致自身免疫性胰岛炎的发生。
APS是黄芪水提取液中的均一多糖部分,为主要的活性成分之一,由APSⅠ、Ⅱ组成。A PSⅠ是杂多糖,由D-葡萄糖、D-半乳糖和L-阿拉伯糖组成; APSⅡ为葡聚糖,由A-(1→4)-D-糖苷键连接而成;对细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能及细胞因子的活性均有调节作用,对氧自由基和凋亡也有一定的影响[1]。我们的前期研究发现,APS预处理NOD小鼠,可以明显降低其DM发病率,延缓发病时间,提高血清C-P水平,减轻胰岛炎症程度,下降甚至倒转其胰岛炎症细胞及脾脏中的CD4/CD8亚群比例,并影响其胰岛细胞的基因表达谱[2,3]。本研究显示,给予APS免疫干预后,NOD小鼠DM的患病比率较对照组明显降低、发病时间明显延缓;电镜观察显示,用APS预免疫后,胰岛B细胞的胞核、核膜、内质网、分泌颗粒和细胞膜等超微结构均得到了保护,而对照组B细胞则出现核固缩、核膜破坏消失、内质网扩张、分泌颗粒减少并空泡样变、胞膜受淋巴细胞侵入破坏等异常变化。上述结果提示,早期应用APS预免疫可以保护B细胞的超微结构,防止和延缓自身免疫性胰岛炎的发生和发展。
近年来研究表明,胰岛B细胞的损伤机制涉及细胞凋亡、脂质过氧化及氧自由基。由Fas介导的凋亡在胰岛B细胞破坏中起了重要作用;当CD4+T 淋巴细胞在胰岛大量浸润,可产生IL-1B、T NF-A、INF-C等炎性细胞因子,使胰岛的Fas表达上调,炎症效应细胞在识别表达Fas的B细胞后即表达FasL,通过Fas/FasL相互作用选择性的破坏胰岛细胞。Bc-l2是Bcl家族蛋白成员中主要的抗凋亡因子;它能通过将凋亡关键酶caspases移至细胞内膜从而阻止其活性进而维持细胞存活;同时还能下调线粒体中的一些caspases活化剂(如细胞色素C)的释放,以阻止线粒体启动caspases而引发的细胞凋亡[4~6]。本研究显示,APS预免疫能明显下调NOD小鼠胰岛中Fas基因的表达水平,同时上调胰岛中Bc-l2基因的表达水平,提示APS可以阻断Fas/FasL介导的胰岛B细胞凋亡,促进Bc-l2对B 细胞的保护作用。
有研究表明,NO是破坏胰岛B细胞的重要炎性因子之一;IL-1B、TNF-A、INF-C等细胞因子可诱导NO合成酶(iNOS)的高度表达,产生大量NO;后者通过cGM P和蛋白激酶G对胰岛细胞产生毒性,还可通过Fas途径诱导B细胞凋亡。SOD是生物体防御过氧化损伤的关键酶类,主要功能是清除体内有氧代谢所产生的超氧自由基(O2-)[7~9]。本研究中,APS预免疫能明显下调NOD小鼠胰岛中iN-OS基因的表达水平,同时上调胰岛中SOD基因的表达水平,提示APS预免疫可以直接调节胰岛iN-OS、SOD的基因表达,以阻止NO、O2-的产生及其对胰岛B细胞的毒性作用,从而预防自身免疫性胰岛炎的发生。
综上所述,APS可以纠正NOD小鼠氧化/凋亡反应的失衡状态,保护胰岛B细胞的超微结构,从而起到预防或延缓NOD小鼠1型DM的作用。A PS 因其天然性、低毒性、来源广泛、制备方便,有望成为1型DM免疫干预的新型药物。
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(收稿日期:2006-08-09;编辑:沈玲)
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中国肥胖及2 型糖尿病外科治疗指南(2019 版)
中国肥胖及2型糖尿病外科治疗指南 (2019版) 郴州市第一人民胃肠外科 汇报人:赵玉国
c o n t e n t s 目录手术适应证及禁忌证 手术方式的选择 术后随访监测术后并发症及处理 围手术期管理
PART 01手术适应证及禁忌证
BMI BMI≥37.5,建议积极手术; 32.5≤BMI<37.5,推荐手术; 27.5≤BMI <32.5,经改变生活方式和内科治疗难以控制,且至少符合2项代谢综合征组分,或存在合并症,综合评估后可考虑手术。 腰围 男性腰围≥90cm 、女性腰围≥85cm ,参考影像学检查提示中心型肥胖,经多学科综合治疗协作组(MDT )广泛征询意见后可酌情提高手术推荐等级 年龄 Surgical indications and contraindication 建议手术年龄为16~65岁。 单纯肥胖病人手术适应证
1 2 3 4 对于年龄<16岁的病人,须经营养科及发育儿科等MDT 讨论,综合评估可行性及风险,充分告知及知情同意后谨慎开展,不建议广泛推广; 对于年龄>65岁病人应积极考虑其健康状况、合并疾病及治疗情况,行MDT 讨论,充分评估心肺功能及手术耐受能力,知情同意后谨慎实施手术。 T2DM 病人仍存有一定的胰岛素分泌功能。 BMI≥32.5,建议积极手术;27.5≤BMI <32.5,推荐手术;25≤BMI<27.5,经改变生活方式和药物治疗难以控制血糖,且至少符合2项代谢综合征组分,或存在合并症,慎重开展手术。 对于25≤BMI<27.5的病人,男性腰围≥90cm 、女性腰围≥85cm 及参考影像学检查提示中心型肥胖,经MDT 广泛征询意见后可酌情提高手术推荐等级。 建议手术年龄为 16~65 岁。 T2DM 病人手术适应证 Surgical indications and contraindication
胰岛功能
胰岛功能测定及临床意义 —、胰岛功能检查包括胰岛素释放试验、C肽释放试验、胰岛素抗体和血糖测定 试验。 二、试验方法及注意事项 1 )方法:在早晨空腹的情况下,进食75g葡萄糖或100g面粉的馒头前后分别于空腹,餐后0.5小时,1小时,2小时,3小时抽静脉血测定五个时间点的血糖,胰岛素释放,C-肽释放值。 2)注意事项:应禁食一夜后次日清晨空腹状态下采血。许多生理和药物因素影响血糖值、胰岛素和C肽的分泌,如做试验时的情绪、禁食时间的长短等;另外有些药物(如氨茶碱类,阻滞剂、糖皮质激素、口服避孕药等)应停服3天后再进行试验。三、胰岛素释放试验 1概述 胰岛素是由胰岛B细胞合成其前体胰岛素原,经生化过程形成的一种降低血糖的激素,主要作用是促进葡萄糖的转化和糖原,抑制糖原异生,从而维持血糖的恒定。胰岛素缺乏时,血糖浓度升高,可超过肾糖阈,发生胰岛素依赖型。血清或血浆胰岛素定量的测定,主要用于胰岛B细胞的分泌功能和糖尿病的研究,确定糖尿病的类型,对于的诊断,探讨机理,研究某些药物对糖代谢的影响以及内分泌紊乱疾病等都有一定的意义和价值。 2临床意义 胰岛素释放试验是让患者口服葡萄糖或用馒头餐使血糖升高而刺激胰岛 B -细胞分泌胰岛素,通过测定空腹及餐后0.5小时、餐后1小时、2小时、3小时的血浆胰岛素水平,了解胰岛B-细胞的储备功能,从而有助于糖尿病的早期诊断、分型和指导治疗。 3糖尿病患者的胰岛素释放试验曲线可分以下3种类型: (1)胰岛素分泌不足型:为试验曲线呈低水平状态,表示胰岛功能衰竭或遭到严重破坏,说明胰岛素分泌绝对不足,见于胰岛素依赖型糖尿病,需终身胰岛素治疗。(2)胰岛素分泌增多型:患者空腹胰岛素水平正常或高于正常,刺激后曲线上 升迟缓,咼峰在2小时或3小时,多数在2小时达到咼峰,其峰值明显咼于正常值,
新诊断2型糖尿病患者补充阿法骨化醇对血糖控制及胰岛功能的影响
新诊断2型糖尿病患者补充阿法骨化醇对血糖控制及胰岛功能的影 响 目的觀察新诊断2型糖尿病(T2DM)患者维生素D(VitD)缺乏的比例及补充阿法骨化醇对新诊断T2DM患者血糖控制及胰岛功能的影响。方法选取2015年6月—2016年6月于汉中市中心医院就诊的新诊断T2DM患者150例检测25-羟维生素D(25(OH)D)水平,将25(OH)D水平不足及缺乏的114例作为治疗组,抽取未检测25(OH)D水平的新诊断T2DM患者80例作为对照组。两组患者均接受口服降糖药物治疗,治疗组额外添加阿法骨化醇0.25 μg,1次/d,口服。治疗3个月时观察两组血糖控制情况;6个月时再观察两组血糖控制情况及空腹胰岛素(FINS)、血钙(Ca2+)、血磷(P)水平,通过稳态模型计算β细胞功能指数及胰岛素抵抗指数并与基线情况比较。结果新诊断T2DM 患者维生素D不正常的比例达76%(VitD不足24.7%,VitD缺乏51.3%)。观察3个月时,治疗组2 hPG和HhA1c下降程度大于对照组;6个月时,2 hPG、HhA1c 两组间差异有统计学意义;治疗组HOMA-β指数较基线升高;胰岛素抵抗指数降低,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组血Ca2+、血P水平差异无统计学意义。结论新诊断T2DM人维生素D缺乏及不足达76%,小剂量补充阿法骨化醇,可改善新诊断T2DM人胰岛β细胞功能、降低胰岛素抵抗,有助于血糖控制,临床使用安全。 标签:糖尿病2型;阿法骨化醇;血糖控制;胰岛功能 [Abstract] Objective To observe the insufficiency proportion of vitamin D in newly diagnosed type 2 Diabetes (T2DM)Patients and the effect of supplement of alfacalcidol on the islet - βcell function and glycemic control of T2DM patients. Methods From June 2015 to June 2016,150 newly diagnosed T2DM patients were enrolled to test 25(OH)D in the Hanzhong Central Hospital. 114 patients who lack of 25(OH)D were taken as treatment group and 80 newly diagnosed T2DM patients who did not test 25(OH)D were regarded as a contrast group. Both of the groups received orally - taken Hypoglycemic Agent,and the treatment group was orally given 0.25 μg alfacalcidol once a day. In the third month of the intervention,the level of glycemic control were tested. In the sixth month of the intervention,FBG,2 hPG,HbA1c,fasting Insulin (FINS),serum calcium(Ca2+),and serum phosphorus(P)were test. The index of HOMA-βcell and the insulin resistance were calculated through the Homeostasis model,and then compared with the baseline. Results The percentage of abnormal level of Vitamin D in Newly diagnosed type 2 Diabetes Patients reached to 76%(inadequate incidence of 24.7% and deficiency incidence of 51.3%). In the third month of the intervention,2 hPG、HbA1c more percentage in the treatment group decreased than the contrast group. In the sixth month of the treatment,the level of 2 hPG、HbA1c of two groups of patients still has statistical significance;the HOMA-βcell function index of treatment group was ascending above the baseline,and insulin resistance index was declining,with a
糖尿病动物模型简介
糖尿病动物模型 转载请注明来自丁香园 发布日期: 2006-07-10 19:22 文章来源: 丁香园 关键词: 糖尿病糖尿病动物模型 2.7 db/db小鼠 db/db小鼠糖尿病发病系瘦素受体突变所致,呈常染色体隐性遗传。该鼠在10~14日龄时就出现多食、高胰岛素血症,但4周龄时血糖仍维持正常,随后该鼠体重逐渐增加,出现高血糖。2~3月龄时尽管胰岛素水平为正常时的6~10倍,但血糖水平可达22~33mmol/L;约3~6月龄时胰岛素水平逐渐下降至低于正常水平,该期小鼠体重明显下降,并出现酮症,组织学显示显著的β细胞坏死,如缺乏胰岛素治疗,该小鼠存活不超过10月。db/db小鼠另一个特点为:其血清胰高糖素的水平较正常对照升高2倍以上[22.23]。db/db小鼠是适用于研究2型糖尿病发病机制的动物模型。 2.8 ob/ob小鼠 ob/ob小鼠为2型糖尿病动物模型,属常染色体隐性遗传。ob/ob小鼠糖尿病发病是由于ob基因突变,造成其编码的蛋白leptin缺乏,引起肝脂肪生成和肝糖原异生显著增加,高血糖又刺激胰岛素分泌,引起胰岛素抵抗,刺激脂肪的形成,ob/ob小鼠体重可达90克之多。ob/ob小鼠症状的轻重取决于遗传背景,纯合体动物表现为肥胖,明显的高血糖及高胰岛素血症,而ob/ob/6J小鼠胰岛素水平可达正常小鼠的10~50倍,但其血糖常只有轻度的升高。组织学显示ob/ob小鼠胰岛β细胞显著增生、肥大,而胰岛A细胞、D细胞及PP细胞数量明显减少[24.25]。 2.9 KK鼠 KK小鼠是日本学者培育的一种轻度肥胖型2型糖尿病动物,后与C57BL/6J小鼠杂交,并进行近亲繁殖,得到Toronto-KK(T-KK)小鼠。将黄色肥胖基因(即Ay)转至KK小鼠,得KKAy鼠,与KK小鼠相比,KKAy鼠有明显的肥胖和糖尿病症状。KK小鼠有明显的多食,从5周龄起,血糖、血胰岛素水平逐步升高,至5月龄时体重可达50克,非空腹血糖常低于17mmol/L,非空腹血胰岛素可达1200ug/mL,1岁龄时,多食、高血糖、高胰岛素血症、肥胖及肝脏对胰岛素的敏感性可自发恢复正常,但糖尿病KK小鼠生命常明显缩短。此外,KK小鼠空腹胰高糖素水平升高,且不受葡萄糖抑制。组织学显示B细胞有脱颗粒和糖原浸润,随后出现胰岛肥大和肝脂肪化和脂肪组织增多[26.27]。 【其他DM动物模型】 1.激素性DM动物模型:注射垂体前叶提取物、生长素、肾上腺皮质激素、甲状腺素或胰高血糖素均可直接或间接产生DM。 2.病毒性DM动物模型:利用脑-心肌炎病毒(EMC-M病毒)和柯萨基病毒等使某些种属的小鼠胰岛β细胞脱颗粒、坏死,导致胰岛β细胞破坏,产生类似的1型DM。 3.免疫性DM动物模型:静脉注射抗胰岛素抗体或用同种或异种胰岛素的弗氏佐剂复合物及抗血清免疫;或用同种或异种胰腺+弗氏佐剂免疫动物均可在数小时后产生一过性高血糖。其机制是内源性胰岛素与输入的抗体结合导致内源性胰岛素降低而致DM。 4.下丘脑性DM动物模型:用电凝法或注射硫代葡萄糖金损伤丘脑下部腹内侧核(VMH)饱中枢,可使成熟动物产生过度摄食、肥胖,直至产生DM。
胰岛功能衰竭期2型糖尿病药物干预
克萨斯大学的Julio Rosenstock教授曾介绍进行胰岛素治疗时需要遵循的基本原则:①“治疗达标”的原则;②胰岛素治疗应尽可能恢复生理性胰岛素分泌模式;③T2DM的胰岛素治疗方案应简便易行,克服传统方案的复杂性;④正确掌握开始胰岛素治疗的时机;⑤通过选择适当的胰岛素制剂和方案最大限度地避免低血糖;⑥要让患者自身在糖尿病管理的综合团队中发挥重要作用;⑦制订有效的胰岛素剂量调整方案。 总之,2型糖尿病β细胞功能衰竭是一个渐进的过程,无论其最初的缺陷如何发生,都会随着时间的延长进行性恶化。长期高血糖抑制胰岛素的分泌。对于新诊断2型糖尿病β细胞功能损害的患者,可以早期应用胰岛素,是一个改善胰岛β细胞分泌功能的绝好机会。个体化治疗是糖尿病治疗必须遵从的一个重要原则,针对不同阶段2型糖尿病患者,其病程长短、肝肾功能、并发症的情况以及血糖谱特点等均不相同,因此,要综合考虑,科学选择方案。 参考文献 1.杨文英.有关胰岛素在糖尿病治疗中应用的几点看法.中华全科医师杂志2003;2(3):173-175. 2.Ilkova H,Glaser B,Tunckale A,et al.Induction of long-term glycemic control in newly diagnosed type2diabetic patients by transient intensive insulin treatment.Diabetes Care1997;20(9):1353-6. 3.祝方,纪立农,韩学尧,等.短期胰岛素强化治疗诱导初诊2型糖尿病患者血糖长期良好控制的临床试验.中国糖尿病杂志2003;11(1):5-8. 4.李延兵,翁建平,许雯,等.短期持续胰岛素输注治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响.中国糖尿病杂志2003;11(1):10-15. 5.李光伟.对2型糖尿病β细胞功能衰竭和胰岛素治疗思考.国外医学内分泌学分册2004;24(4):271-273. (2011—03—18收稿) 胰岛功能衰竭期2型糖尿病药物干预中南大学湘雅二医院内分泌科(41001)邓小戈 美国最新资料显示[1],2010年美国糖尿病患病人数2600万,总人口患病率8.3%,20岁以上人群中患病率为11.3%,糖尿病是导致肾衰、非外伤性下肢截肢、新发失明等的罪魁祸首,同时也是心脏病和中风的主要原因,是美国排名第7位的死因,年总费用达1740亿美圆。据世界卫生组织估计2005到2015年,中国因糖尿病及相关心血管疾病的经济损失将达5577亿美圆[2]。 这些数据说明,人类还不能很好的控制糖尿病的发生、发展和预后。单是糖尿病分型,其复杂程度就远远超出了人们的想象。多家权威机构在指南中不得不指出,在糖尿病分型困难时,可先不分型,先把血糖控制好[2-4]。那么,能不能通过分期来指导用药呢?有人根据糖尿病从轻到重、并发症从无到有的特点,将之简单地分为糖尿病早期和晚期,并认为[5]葡萄糖刺激胰岛素释放试验(GSIS)的急性反应(早期相胰岛素分泌,即葡萄糖刺激后3 10分钟的胰岛素释放)消失,属于早期阶段,因为到晚期的时候,不但长期高糖的毒性作用会阻碍胰岛素释放、甘油三酯沉积也会损害胰岛功能[6]和促进细胞凋亡[7],再加上淀粉样变等进一步损害胰岛功能,最终导致胰岛素分泌水平显著降低[8-9]。但分两期,对糖尿病治疗用药的指导意义并不大。因此,也有人根据胰岛?细胞数量、功能等,将之分为5个阶段(five stages)或者5期[10]。第一阶段血糖正常。这是通过增加胰岛素分泌而维持血糖正常的,一般有胰岛素抵抗和/或胰岛?细胞数量增加,GSIS的急性反应正常。第二阶段的特点是胰岛?细胞的功能已不能维持血糖完全正常,空腹血糖水平升高到5.0 6.5mmol/L左右,但相对稳定,可持续数年,GSIS急性反应消失,可表现为葡萄糖耐量低减(IGT)。第三阶段的特点是不稳定,失代偿,在某种加重胰岛β细胞负荷的作用下,空腹血糖水平会快速地升高到7.3mmol/L(130mg/dL)以上,甚至达到第四阶段的16 20mmol/L(285 350mg/dL)水平,临床表现可有可无。第四阶段的特点是稳定的失代偿,临床表现为典型的2型糖尿病,但没有酮症,病情相对稳定,可以持续终生。第五阶段的特点是严重失代偿,血糖水平多>22mmol/L(350 mg/dL),且需要胰岛素维持生命,常有酮症。其中,第四阶段可因治疗而改善转到第三阶段或第二阶段;第三阶段也可以转到第二阶段。遗憾的是目前对终末期2型糖尿病的病理生理改变尚知之甚少[3-5]。 这里,我们要讨论的“胰岛功能衰竭期”,大致相当于上述第四、五期,因为第三期很不稳定,要么转成第二期,要么转成第四期。这种状态出现的机理,虽然与糖毒性和脂毒性等引起的?细胞凋亡、坏死、萎缩等密切相关,但其实非常错综复杂,目前尚无定论[9-10]。例如,有作者[11]观察了胰岛?细胞株在高、低浓度葡萄糖条件下胰岛素基因表达以及胰岛功能衰竭的情况。作者发现,长期高糖的毒性作用,并不会随血糖下降而马上消失;并且高糖毒性也不只是简单地引起胰岛功能衰竭,还会造成二次伤害,即胰岛素基因表达出现缺陷,从而加重高血糖。其他方面的研究发现[12],ATP结合部转运体亚族A成员1(ATP-binding cas-sette transporter,subfamily A,member1,ABCA1)在胰岛细胞有高表达,属于细胞内胆固醇转运体,可预防脂肪堆积在胰岛。灭活小鼠ABCA1在胰岛细胞的表达,会导致GSIS 分泌减少和糖耐量低减。而最新的临床研究还发现,摄入植物纤维、镁可以预防糖尿病的发生,机理可能与植物纤维富含镁,而镁是糖代谢所必需酶类的辅酶,对胰岛素的作用和稳定血糖内环境有重要作用[13]。更有甚者,对于“胰岛功能衰竭期”(islet beta-cell exhaustion)的称呼,是用“ex-haustion衰竭”?还是用“toxicity毒性损害”?还是用“de- · 7 · 实用糖尿病杂志第7卷第5期 JOURNAL OF PRACTICAL DIABETOLOGY Vol.7No.5
保护胰岛功能
一、胰岛b细胞功能保护因素 由于胰岛B细胞合成、存储、释放胰岛素功能在调节机体物质代谢稳态中具有重要生理意义,因此保护B细胞功能对糖尿病的治疗具有重要理论及实际意义。研究认为,免疫机制、细胞因子、胃肠激素、胰岛素、胰岛素增敏剂等多种因素可对B细胞具有保护作用,故将从这几个方面论述口细胞功能保护取得的进展。 1、免疫机制 提到免疫机制与糖尿病,更多的会令人想到1型糖尿病。的确,这种由T细胞介导胰岛b细胞损伤的糖尿病是自身免疫性疾病,与免疫机制密不可分。糖尿病的发展受到有共同表现型TH 细胞的THI和TH2的作用,二者相对抗,THI细胞促进糖尿病发展,而TH2细胞具有保护作用。通过逆向调节THl细胞,改变THI/TH2的平衡,使B细胞的免疫破坏得到抑制。环孢菌素(CyA),硫唑嘌呤(Azathioprin,A)等免疫抑制剂对胰岛B细胞有保护作用,可有效预防和治疗糖尿病。 2、干预细胞因子 细胞因子作为免疫调节因子对B细胞的损伤和破坏,具体机制尚不清楚。但是,减少细胞因子的毒性作用的途径可对b细胞保护及糖尿病治疗发挥作用。其机制为减少细胞因子介导的介子NO对细胞的破坏。减少NO生成,可降低对胰岛细胞60%的毒性作用。氨基胍(AG)作为有效治疗药已被证实。 3、胰岛素基础 研究表明,胰岛素治疗可以通过改善脂肪细胞的功能(抑制脂肪分解,增加脂联素分泌),减轻脂毒性,减轻糖毒性,抑制活化的核转录因子炎症通路,最终改善胰岛素抵抗和恢复b细胞功能。 4、胃肠激素 这里主要论述肠激素胰高血糖素多肽(GLP-I)和肠抑胃肽(GIP)对胰岛B细胞的保护作用,GLP-I是由肠道L细胞分泌的肠降血糖素之一,能促进口细胞分泌胰岛素。肠激素胰高血糖素多肽(GLP-I)具有有效的胰岛素活性,能提高b细胞对葡萄糖刺激胰岛素的敏感性,延缓葡萄糖耐受。GIP也称葡萄糖依赖性胰岛素释放肽,为十二指肠和空肠黏膜细胞分泌的42个氨基酸的多肽。其重要生理功能在于促进b细胞分泌胰岛素,这种效应只在高糖情况下出现。GIF 促胰岛素分泌作用与血糖水平密切相关,有研究证实,血糖浓度大于6.Ommmol/L时,GIP 才会发挥较强的促胰岛素分泌作用。如上所述,胰岛素可以减轻脂毒性和糖毒性,抑制活化的核转录因子炎症通路,改善胰岛素抵抗,从而恢复胰岛b细胞功能。 5、胰岛素增敏剂 胰岛素增敏剂即噻唑烷二酮类,常用为罗格列酮和吡格列酮。罗格列酮为有效的核转录因子过氧化酶体增殖激活受体7(PPAR-T)的选择性激动剂,罗格列酮可保护b细胞功能,抑制p 细胞凋亡以防止其数量减少。吡格列酮(PGZ)作用途径为抑制炎症因子对b细胞的损伤,避免其凋亡。 二、保护剩余胰岛功能 1、早起干预治疗 研究表明,糖尿病早期b细胞仅有部分的功能受损,且是可逆的,此时应不失时机的采取控制饮食、适当运动等生活方式干预和必要的药物治疗,使血糖控制达标,从而使b细胞功能得到最大程度的恢复。 2、根据病因和自然病程不同阶段合理用药 如2型糖尿病早期体胖。血脂异常、胰岛素抵抗,宜选用改善胰岛素抵抗和减轻脂毒性药物
中国肥胖及2型糖尿病外科治疗指南(2019版)
中国肥胖及2型糖尿病外科治疗指南(2019版) 中国医师协会外科医师分会肥胖和糖尿病外科医师委员会 (Chinese Society for Metabolic & Bariatric Surgery,CSMBS)于2014年组织国内减重代谢外科及内分泌科专家共同制定了我国首个减重代谢外科指南——《中国肥胖和2型糖尿病外科治疗指南(2014)》[1]。在该指南的指导和规范下,尤其在中华医学会外科学分会甲状腺及代谢外科学组成立后,我国的减重代谢外科取到了长足的发展,特别是全国各地区相继建立了临床研究中心,并开展了多中心合作,不断积累详实的多中心临床数据。我国减重代谢手术已经由2014年的4000例增长到1万例以上,术式方面也与欧美等发达国家没有明显差异[2-3]。2017年,美国和欧洲肥胖代谢外科指南进行了相应更新,包括胃束带手术(AGB)等治疗方式基本退出历史舞台[4-5]。鉴于此,中华医学会外科学分会甲状腺及代谢外科学组联合CSMBS组织专家对2014年版指南进行修订和更新,参考西方国家指南及立场声明更新,并采纳我国近5年的临床数据及相关文献,在适应证和禁忌证、手术方式的合理选择、术前评估与准备、术后并发症以及围手术期管理等方面进行阐述说明,以更好地适应减重代谢外科的发展,规范疾病的治疗,共同推进学科健康快速发展。 1 手术适应证及禁忌证 1.1 手术适应证 单纯肥胖病人手术适应证:(1)BMI≥37.5,建议积极手术;32.5≤BMI<37.5,推荐手术;27.5≤BMI<32.5,经改变生活方式和内科治疗难以控制,且至少符合2项代谢综合征组分,或存在合并症,综合评估后可考虑手术[6-7]。(2)男性腰围≥90cm、女性腰围≥85cm,参考影像学检查提示中心型肥胖,经多学科综合治疗协作组(MDT)广泛征询意见后可酌情提高手术推荐等级[8]。(3)建议手术年龄为16~65岁。 注:(1)代谢综合征组分(国际糖尿病联盟定义)包括:高三酰甘油(TG,空腹≥ 1.70mmol/L)、低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-ch,男性空腹<1.03mmol/L,女性空腹<1.29mmol/L)、高血压(动脉收缩压≥130mmHg或动脉舒张压≥85mmHg, 1mmHg=0.133kPa)。(2)合并症包括糖代谢异常及胰岛素抵抗,阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、内分泌功能异常、高尿酸血症、男性性功能异常、多囊卵巢综合征、变形性关节炎、肾功能异常等,尤其是具有心血管风险因素或2型糖尿病(T2DM)等慢性并发症。(3)对BMI为27.5~<32.5的病人有一定疗效,但国内外缺少长期疗效的充分证据支持,建议慎重开展。(4)如双能X线吸收法测量Android脂肪含量与腹部脂肪及内脏脂肪分部相关,如Android脂肪含量显著升高提示中心型肥胖。或MRI对腹部内脏脂肪含量进行评估
小鼠糖尿病模型建立的实验设计
发育生物学课程设计 北方民族大学 小鼠糖尿病模型实验设计方案 姓名:徐飞 学号:20103465 生物技术102班
小鼠糖尿病模型实验设计方案 徐飞 (北方民族大学生物科学与技术学院,生物技术,20103465) 【摘要】糖尿病是一种常见的具有遗传倾向的葡萄糖代谢和内分泌障碍,是由于绝对性或相对性胰岛素分泌不足引起的,近半个世纪来,糖尿病患病率和死亡率有明显上升趋势,在我国已成为继心血管疾病、肿瘤之后列第三位的常见病、多发病和慢性非传染性疾病。【关键词】糖尿病;动物模型;实验设计 【Abstract】Diabetes mellitus is a common genetic glucose metabolic and endocrinal disturbance caused by insulindeficiency absolutely or relatively. In the last half century, diabetes has the increasing rates of morbidity and mortality, and has become the third common, frequently occurring and chronic noninfectious disease after cardiovascular disease and cancer. 【key words】Diabetes; Models, animal; Experimental design 引言 糖尿病(diabetesmellitus,DM)属中医学“消渴”范畴,是以多饮、多食、多尿、身体消瘦,或尿浊、尿有甜味为特征的疾病。现代医学认为,糖尿病是一种由多种病因引起的慢性代谢性疾病,是由于体内胰岛素缺乏,或拮抗胰岛素的激素增高,或胰岛素在靶细胞内不能发挥正常生理作用而引起葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的综合征。为探清糖尿病病因,建立理想的DM动物模型是十分必要的,动物模型也可以筛选降糖药物,可以为中医药治疗糖尿病提供实验依据。 动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂,以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制,推动医药学的发展来之缓慢,临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性,而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究,可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素,以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究,有助于更方便,更有效地认识人类疾病的发生发展规律,研究防治措施。 糖尿病模型的建立方法很多,如手术法、药物法、自发性DM、转基因动物法等。国外多
II型糖尿病(E11)
II型糖尿病 归属于糖尿病 (E10-E14) E11 非胰岛素依赖型糖尿病包括:糖尿病(非肥胖型)(肥胖型):成人发作、成年糖尿病发作、非酮性的、稳定的、II型糖尿病、年轻人非胰岛素依赖型糖尿病。 II型糖尿病也叫成人发病型糖尿病,多在35~40岁后发病,占糖尿病患者90%以上。2型糖尿病病友体内产生胰岛素的能力并非完全丧失,有的患者体内胰岛素甚至产生过多,但胰岛素的作用效果却大打折扣,因此患者体内的胰岛素是一种相对缺乏。可以通过某些口服药物刺激体内胰岛素的分泌。但到后期仍有部分病人需要像1型糖尿病那样进行胰岛素治疗。 II型糖尿病的病因 2型糖尿病是一种多基因遗传性疾病,一般认为,T2DM的发生是多源性的,是环境因素和遗传因素共同作用的结果。病因与胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足有关。 II型糖尿病的症状 2型糖尿病中一部分病人以胰岛素抵抗为主,病人多肥胖,因胰岛素抵抗,胰岛素敏感性下降,血中胰岛素增高以补偿其胰岛素抵抗,但相对病人的高血糖而言,胰岛素分泌仍相对不足。此类病人早期症状不明显,常在明确诊断之前就可发生大血管和微血管并发症。饮食治疗和口服降糖药多可有效。另一部分病人以胰岛素分泌缺陷为主,临床上需要补充外源性胰岛素。 2型糖尿病的诊断:糖尿病诊断标准。 1980年及1988年世界卫生组织WHO关于糖尿病的诊断标准如下: 1、有糖尿病症状。?具备下列任何一项即可诊断为糖尿病:a?、空腹血糖≥?7.8mmol/L;b、一日中任何时间血糖≥11.1mmol/L;c、空腹血糖〈7.8mmol/L,?但口服75%葡萄糖耐量试验二小时血糖≥11.1mmol/L。 2、无糖尿病症状。具备下列任何一项即可诊断为糖尿病:a、两次空腹血糖≥7.8mmol/L;b、第一次口服75g葡萄糖耐量试验的1及2小时血糖均≥11.1mmol/L,重复一次葡萄糖耐量试验二小时血糖≥11.1mmol/L 或重复一次空腹血糖≥7.8mm ol/L。 3、糖耐量减低。空腹血糖〈7.8mmol/L,口服75g葡萄糖后二小时血糖在7.8-11.1mmol/L之间者。 妊娠糖尿病诊断参照上述标准。 IDF1997年建议的分型方案 1997年7月国糖尿病协会提出了新的糖尿病诊断和分类标准。 1、有糖尿病症状,并且随机血糖≥11.1mmol/L。随机血糖是指就餐后任意时间的血糖值,典型的糖尿病症状包括多尿、烦渴和无其它诱因的体重下降。 2、空腹血糖≥7.0mmol/L,空腹状态定义为至少8小时内无热量摄入。 3、OGTT时二小时血糖≥11.1mmol/L。OGTT仍然按WHO的要求进行。 符合上述标准之一的患者,在次日复诊仍符合三条标准之一者即诊断为糖尿病。 在新的分类标准中,?糖尿病和葡萄糖耐量受损(IGT)及空腹葡萄糖受损(IFG)共属高血糖状态,与之相应的为葡萄糖调节正常的正常血糖状态。IGT?的诊断标准为:OGTT时二小时血糖≥7.8mmol/L,但〈11.1mmol/L,IFG?为空腹血糖≥?6.1mmol/L但〈7.0mmol/L。 II型糖尿病的诊断 II型糖尿病的检查化验 2型糖尿病是胰岛素不能有效发挥作用(与受体结合含量少)所致,因此不仅要检查空腹血糖,而且要观察餐后2小时血糖,特别应做胰岛功能检查。 具体数值如下:正常人空腹血糖:3.9-6.1mmoL/L,餐后2小时血糖7.8-8.9mmoL/L。如空腹血糖≥7.0mmoL/L,餐后2小时血糖≥11.1mmoL/L就可诊断糖尿病。如空腹血糖在6.1-7.0mmoL/L,餐后2小时血糖在7.0-11.1mmoL/L之间为糖耐量异常,是早期糖尿病的表现。而尿糖检查仅供参考,不能做为回头用药的依据。 胰岛功能检查:验者口服100克馒头或服含75克糖水300mL后观察血糖、胰岛素、C肽变化。 II型糖尿病的鉴别诊断 1、有糖尿病症状。?具备下列任何一项即可诊断为糖尿病:a?、?空腹血糖≥?7.8mmol/L;b、一日中任
2型糖尿病动物模型研究概况
2型糖尿病动物模型研究概况高秀娟马会霞江春花 (华北煤炭医学院中医学系河北唐山063000) [关键词]2型糖尿病动物模型研究进展 [中图分类号]R25[文献标识码]A [文章编号]1008-6633(2009)06-783-03 糖尿病是一种慢性代谢紊乱疾病,世界范围内约有1.7亿患者,其中2型糖尿病(T2D M)占整体糖尿病的90%以上,可靠的动物模型是研究T2D M发生机制及新的干预措施的重要手段。目前制备T2D M模型应用的动物种类多种多样,动物种属的选择非常重要,其中鼠科动物由于具有体积小,生殖周期短,容易通过饲料、药物处理或遗传方法诱导疾病等优势,被广泛的应用于T2D M模型的制备中,它是人类研究T2D M的强有力的工具。下面就应用鼠科动物制备T2D M模型的研究进展作一综述,仅供参考。 1自发性动物模型 1.1自发性2型糖尿病大鼠主要包括G/K大鼠(Goto-K ak2 izaki R at)、OLETF大鼠(O tsuka Long Evans To kushi ba F atty R at)、Z DF大鼠(Zuke r d i abe ti c fatty R a t)等,这类动物多数肥胖,有明显的高胰岛素血症,类似人类2型糖尿病的发病特征,国外研发口服抗糖尿病及并发症的新药多选用这类动物[1]。 1.1.1G/K大鼠。G/K大鼠是日本的一大鼠品系,是一种常用的自发性非肥胖型T2D M实验动物模型,其特点是高血糖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗出现早[2]。其发病机制可能是骨骼的糖元合成酶不能有效地将多余的葡萄糖转化为糖元贮存起来,从而使动物出现高血糖。G/K大鼠的特征有,葡萄糖刺激的胰岛素分泌受损,B细胞数目减少,肝脏对胰岛素的敏感程度降低导致肝糖生成过多等,此外具有与人类T2D M微血管并发症相似的改变。骨组织形态学和生物力学分析显示,非肥胖的2型糖尿病G/K大鼠有明显的骨代谢紊乱,骨强度明显降低[3]。近来的研究表明G/K大鼠子一代的胰岛及胰腺血流量的增加有赖于迷走神经[4]。G/K大鼠子一代轻度高血糖、葡萄糖耐受受损伤。在病理性的腹腔葡萄糖耐量出现后一周测其胰岛及整个胰腺的血流量,发现其血流量增加、胰岛所占胰腺血流量增加,切断腹腔双侧迷走神经,胰岛及胰腺血流量降低。 Pa rt haB认为G/K是研究糖尿病最好的动物模型,但是其发病过程中B细胞数目降低后有一个增殖的过程,这与人类发病情况有很大不同,也是限制G/K大鼠应用的关键[5]。 1.1.2OL ETF大鼠。OLETF大鼠是最近常用的T2D M动物模型。其特点是:轻度肥胖、高胰岛素血症、高甘油三酯血症。史红莉等[6]研究发现14周的OL ETF大鼠已存在胰岛素抵抗,体重和腹内脂肪重量增加,同时存在三酰甘油和胆固醇的增高。大鼠在24周龄时发病率为100%。组织学研究发现此种大鼠胰腺呈进行性纤维化,并可出现肾脏并发症,其与T2D M患者的病理变化极为相似。 1.1.3Z DF大鼠。Z DF肥胖T2D M大鼠是良好的肥胖型T2D M 的动物模型。该动物易发展为肾微血管病变。此种大鼠由于瘦素受体突变导致多食、肥胖,同时伴有高血糖、高胰岛素血症、高脂血症、中度高血压,较接近于人的胰岛素抵抗同时伴有高血压的患者,可作为胰岛素抵抗的动物模型。一般8~10周出现糖尿病,有糖尿病的典型症状如多饮、多尿、体重增加缓慢等,并可出现神经病变[7]。对fa/fa ZDF的胰岛分离,测其磷酸肌酐(P I)水解及胰岛素分泌反应,结果磷酸脂酶C调节的胰岛P I水解和高血糖刺激的胰岛素释放增加,这二者的增加能先于糖尿病被检测出来。因此P I水解的变化可能是Z DF大鼠胰岛素抵抗的原因[8]。 1.1.4肥胖。W istar糖尿病大鼠(o beseW i star fa tty rats)该品系动物T2D M实验动物模型的特征为甘油三酯生成过量,但机体对其分解的能力却受到了损伤,这种损伤是因低密度脂蛋白不易移去甘油三酯和机体不易移去低密度脂蛋白-甘油三酯,另外果糖能够进一步增加肝甘油三酯产生,导致高甘油三酯恶化[9]。 1.2自发性T2D M小鼠主要包括D i abetes(DB)小鼠、Obese (OB)小鼠、Toronto-KK(T-KK)小鼠、Nagoya Shi bata Yasuda (NS Y)小鼠等。 1.2.1db小鼠。db小鼠是l epti n受体基因缺陷导致的先天肥胖性T2D M小鼠,其发病过程与人T2D M非常相似,是国际上广为采用的研究T2D M的动物模型[10]。其瘦素受体基因失去功能,在出生后2周内就发生高胰岛素血症,3~4周发展为肥胖,4 ~8周后就发展为非常严重的高血糖症,其间有胰岛素抵抗发生,B细胞功能衰竭,一般在10个月内死亡,可发生明显的肾病。 1.2.2ob小鼠模型。o b小鼠模型是一种瘦素受体与瘦素基因均发生变异的模型,属常染色体隐性遗传,表现为饮食过量,3~ 4周发展为高胰岛素血症伴发胰岛素抵抗,最后发展为非常严重的糖尿病。 1.2.3KK糖尿病小鼠。1941年K#Ko ndo用日本商人的小鼠原种(Kansukabe群)培育而成的,该动物对胰岛素不敏感,对葡萄糖耐量小,糖尿病发病率高,以具有轻度肥胖、高胰岛素抵抗和高血糖症的特征。KK小鼠对胰岛素有轻度抗性,易于出现类似糖尿病肾病的肾脏损害[11]。 1.2.4NSY小鼠(Nagoya-sh i bata-yas uda)。NS Y小鼠发展为糖尿病的速度相对较为缓慢,具有年龄依赖性,年龄在糖尿病的发展过程中占有重要作用,12周龄后,胰岛素抵抗也不是很明显,其与人类疾病情况相似,减肥食谱的摄入能减轻其疾病状态,高脂食品能够加速疾病的发生过程,并且会出现胰岛素分泌不足及胰岛素作用受损现象[12]。胰岛素含量36周龄后显著增加,NS Y小鼠将有助于人们对T2D M遗传学倾向及病理发生的进一步研究。 2诱发性动物模型 2.1高脂饲料喂养近年来实验研究发现高脂膳食可诱发T2D M,为深入研究T2D M的发病机制,阐明营养因素与糖尿病的关系提供了重要线索及实验依据,也为广泛开展T2D M的实验研究提供了良好的动物模型。高脂饮食可诱发糖尿病的报道
胰岛素强化治疗对初发2型糖尿病胰岛功能的影响评价
胰岛素强化治疗对初发2型糖尿病胰岛功能的影响评价 目的分析与探究胰岛素强化治疗对初发2型糖尿病胰岛功能的影响。方法选取该院2017年6月—2018年6月收治的88例初发2型糖尿病患者为研究对象,按照随机分组为对照组与研究组;给予研究组患者胰岛素强化治疗,对照组则行常规口服降糖药治疗,对比观察两组患者胰岛功能变化情况。结果经治疗后,研究组患者FPG、2 hPBG、HbA1c水平均明显低于对照组,FINS、Homa-β水平高于对照组,而HOMA-IR则低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素强化治疗有助于控制初发2型糖尿病血糖水平,改善患者胰岛功能,具有一定的应用价值。 标签:初发2型糖尿病;胰岛素强化治疗;胰岛功能;胰岛素 2型糖尿病的发生与病情的发展主要与胰岛素抵抗以及胰岛B细胞功能减退造成胰岛素分泌缺陷有关[1]。对于初发的2型糖尿病患者,通常早期已经出现胰岛B细胞功能减退,但其血糖并不一定升高,而是随着胰岛素抵抗的加重、胰岛细胞功能的不断衰退,最终导致代谢异常而造成血糖升高[2]。从而有研究提出[3],保护患者胰岛B细胞功能,对于控制患者病情的发展、维持血糖的良好控制效果具有积极意义。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取该院收治的88例初发2型糖尿病患者为研究对象,纳入患者均满足WHO对2型糖尿病的诊断标准;均未接受过降糖药物治疗;排除合并重症心、肝、肾等器质性病变,或合并精神疾病及有精神病家族史的患者。在纳入患者知情同意前提下,按照随机分组,将其分为对照组与研究组,每组44例。其中,对照组患者,男性25例、女性19例,年龄为33~68岁,平均(52.34±4.76)岁,体重指数为(25.41±2.43)kg/m2;研究组患者中,男性26例、女性18例,年龄为31~71岁,平均(53.26±4.68)岁,体重指数为(24.87±2.51)kg/m2。两组基线资料对比差异并无统计学意义(P>0.05);研究在该院伦理委员会批准下开展。 1.2 方法 两组患者均给予常规饮食指导、运动指导以及健康宣教等护理干预,在此基础上,给予对照组患者常规口服降糖药治疗,即按照个体化原则,以FPG≤7.0 mmol/L、2 hPBG≤11.1 mmol/L为标准,给予患者相应剂量的二甲双胍、磺脲类药物治疗。研究组患者则在常规护理基础上,给予其胰岛素强化治疗,即采用“4针方案”,于患者三餐前5 min,给予其短效胰岛素类似物(门冬胰岛素)皮下注射,并于患者睡前(约晚22:00)给予其长效胰岛素类似物(甘精胰岛素)皮下注射,在血糖达标后,继续维持胰岛素治疗2周后停止胰岛素治疗,改用口服
初诊肥胖与非肥胖2型糖尿病患者短期胰岛素泵强化治疗效果比较
初诊肥胖与非肥胖2型糖尿病患者短期胰岛素泵强化治疗效果比较 发表时间:2013-03-04T15:33:10.437Z 来源:《中外健康文摘》2012年第48期供稿作者:黄丹张冲胡晓燕[导读] 目的对肥胖与非肥胖的初诊2型糖尿病(T2DM)患者短期素岛素泵强化治疗后效果比较。黄丹张冲胡晓燕(南京医科大学附属江宁医院糖尿病中心江苏南京 211100)【中图分类号】R781.6+4 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)48-0224-02 【摘要】目的对肥胖与非肥胖的初诊2型糖尿病(T2DM)患者短期素岛素泵强化治疗后效果比较。方法将100例初诊2型糖尿病患者按照BMI≥25kg/m2分为肥胖组(OB组)与非肥胖组(NOB组),每组50例。两组均进行2周的胰岛素泵强化治疗,检测入院时空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)和C肽(FCP),餐后2小时血糖(2hPG),糖化血红蛋白(HbA1c),计算腰臀比(WHR),比较胰岛素泵强化治疗前后两组FBG、2hPG,血糖达标天数及达标时胰岛素日用量的差异。结果 OB组较NOB组WHR、BMI、FINS、FCP差异有统计学意义(P<0.01),胰岛素泵强化治疗后均可使两组血糖达标,OB组较NOB组达标时间明显缩短(P<0.01),但OB组胰岛素用量高于NOB组(P<0.05)。结论初诊肥胖型T2DM患者胰岛素分泌及储备功能较好,经短期胰岛素泵强化治疗后,较非肥胖型T2DM 能在较短时间内将血糖控制在理想的范围。 【关键词】 2型糖尿病体质指数胰岛素泵2型糖尿病(T2DM)由多基因遗传和环境因素共同促发,胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能缺陷是T2DM发生发展的两大基本原因。而不同体质指数(BMI)的2型糖尿病患者不仅胰岛素抵抗程度不同,而且胰岛素分泌状况也存在明显差异。非肥胖患者以胰岛分泌功能减退为主要特征;肥胖患者的胰岛素抵抗更加严重,对外源性胰岛素需要量较大,这可能会导致高胰岛素血症并使体重增加[1]。研究证实,胰岛素泵在肥胖的2型糖尿病患者中对控制血糖,改善胰岛功能可能是一种有效的治疗方法。本研究通过对不同BMI的T2DM患者短期持续皮下胰岛素注射(CSII),观察这两种人群CSII临床应用的差异,并分析影响胰岛素用量的因素。 1 对象与方法 1.1 研究对象 本院2010年5月至2012年8月住院的初诊T2DM患者100 例,均符合1999 年WHO制定的T2DM 诊断标准。排除标准:①严重感染及应激状态;②糖尿病酮症酸中毒;③心肝肾功能衰竭;④恶性肿瘤。按2000年WHO亚太地区肥胖诊断标准(BMI≥25kg/m2)分为OB组与NOB组(18.5<BMI<25kg/m2)。其中OB组50例,男38例,女12例,年龄30~66岁,平均(48±10)岁;NOB组50例,男29例,女21例,年龄34~63岁,平均(47±9)岁。 1.2 治疗方法 两组患者入院后予胰岛素泵强化治疗2周,使用优泌乐作为泵用胰岛素,用量根据病史、体重及饮食习惯等评估。初始量按0.5~0.7U /(kg·d),其中50%为基础量,另50%为餐前大剂量。入院后测定空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)和C肽(FCP),餐后2小时血糖(2hPG),糖化血红蛋白(HbA1c),计算腰臀比(WHR)。血糖监测:治疗过程中采用ACCU-CHEK血糖仪(德国罗氏公司)测定手指末梢血糖,每天监测8次:三餐前、三餐后2h、睡前、凌晨03:00,根据血糖变化调整各时段胰岛素的基础量和餐前量,直至血糖控制达标(FBG<7mmol/L,2hPG<9mmol/L,睡前血糖<8mmol/L)。记录血糖达标时间和达标时胰岛素用量。 1.3 统计学分析 数据采用SPSS13.0软件处理。计量数据以均数±标准差(x-±s)表示,组内治疗前后比较用配对t检验,组间比较行成组t检验。 2 结果 2.1临床特征两组FBG、2hPG、HbA1c差异均无统计学意义(P>0.05),OB组的BMI、WHR、FINS与C肽水平明显高于NOB组(P<0.01)。见表1。 表1治疗前两组临床特征比较(x-±s)组别 BMI WHR HbA1C FBG 2hPBG FINS FPC (kg/m2) (%) (mmol/l) (mmol/l) (pmol/l) (nmol/l) OB组 28.2±1.5 0.96±0.05 10.2±1.58 12.65±2.88 23.10±2.89 63.94±32.9 0.87±0.34 NOB组 23.0±1.42* 0.90±0.04* 11.0±1.92 12.92±2.80 24.72±4.39 35.36±21.38* 0.59±0.20* *与OB组比较:P<0.01 2.2 两组治疗后FBG及2hPG比较 两组治疗后FBG及2hPG均较治疗前显著下降(P<0.01),但组间比较无统计学意义(P >0.05)。见表2。 表2两组治疗后FBG及2hPG比较 组别n FBG 2hPG 治疗前治疗后治疗前治疗后 OB组 50 14.65±2.88 6.24±0.68* 25.50±2.89 8.87±0.84* NOB组 50 13.92±2.80 5.95±0.61* 24.72±4.39 8.49±1.15* *与OB组比较:P<0.01 2.3 血糖达标时间及胰岛素用量OB组血糖达标时间(4.19±0.51)d,NOB组(5.33±0.65)d,OB组达标时间早于NOB组(P<0.01),胰岛素用量OB组明显高于NOB组(P<0.05)。见表3。 表3治疗后两组血糖达标时间及达标时胰岛素用量比较组别n血糖达标时间(d)达标时胰岛素用量[U/(kg?d)] OB组 50 6.19±2.12 0.56±0.08 NOB组 50 6±0.65② 0.51±0.07①与OB组比较:①P<0.05;②P<0.01 3 讨论