浅谈小麦发芽试验技术

湖北农业科学2009年第48卷第12期

2009年12月

湖北农业科学

H ubei

A gricultural S ciences Vol.48No.12

Dec .,2009

收稿日期:2009-07-14

基金项目:湖北省农业科技创新中心资助项目(2007-620-001-03)

作者简介:赵翠荣(1975-),女,湖北随州人,助理研究员,研究方向为生物技术在小麦遗传育种中的运用,(电话)0710-3821627

(电子信箱)nkyzhaocr.2007@163.com 。

按照国家标准《GB /T 3543.1-1995农作物种子检验规程》规定,种子的纯度、净度、发芽率、水分含量4项质量指标是种子质量监督检验的必检项目,其质量指标执行的是国家强制性标准,种子质量4项指标中任何1项达不到国家规定的标准即为不合格种子。

在种子的4项强制性质量指标中,通过发芽试验测定的发芽率是非常重要的一项指标,以在规定的条件和时间内,长成的正常幼苗数占供检种子数的百分率表示。发芽试验的目的是为了测定所代表种子批的发芽潜力和成苗能力,以确定该批种子的使用价值大小及播种品质。发芽试验结果的准确性直接影响着对种子质量等级的评判,同时影响着种子经营者和使用者根据所测出的发芽率计算的播种量,进而影响种子生产者、经营者和使用者的切

身利益。小麦种子发芽试验如果不严格操作,试验结果就会出现较大误差,甚至使发芽试验报废。

为了确保小麦种子发芽试验结果的准确性、可靠性和可重复性,检验工作者必须严格按照文献[1]中关于发芽试验的要求程序进行发芽试验,不断积累经验,掌握正确的操作技术方法,减少发芽试验误差或失误。笔者就在做发芽试验过程中总结的方法与步骤报道如下。

1

试验材料

用于发芽试验的种子必须干净、无杂质,且有

代表性。对需进行测定的小麦种子,扦取具有代表性的种子样品,经过净度检验后充分混合均匀,摊平成一薄层,然后随机准确地数取试样4份,每份

100粒。

浅谈小麦发芽试验技术

赵翠荣1,郭自国2,王立峰1,彭

萍1,陈科海1

(1.湖北省襄樊市农业科学院,湖北襄樊

441057;2.湖北省农产品质量安全检测中心,武汉

430070)

摘要:种子4项质量指标(纯度、净度、发芽率、水分含量)中任何1项达不到国家规定的标准即为不合格种子。为了确保小麦种子发芽试验结果的准确性、可靠性和可重复性,检验工作者必须严格按照《GB /T

3543.1-1995农作物种子检验规程》中关于发芽试验的要求程序进行发芽试验,不断积累经验,掌握正

确的操作技术方法,减少发芽试验误差或失误。总结了小麦发芽试验的方法和步骤。关键词:小麦;发芽试验;解除休眠;发芽床;发芽率中图分类号:S512.1.043

文献标识码:B

文章编号:0439-8114(2009)12-2956-03

Discussion on the Technique of Wheat Germination Test

ZHAO Cui-rong 1,GUO Zi-guo 2,WANG Li-feng 1,PENG Ping 1,CHEN Ke-hai 1

(1.Xiangfan Academy of Agricultur al Science s ,Xiangfan 441057,Hubei ,China ;

2.Agricultural Product Quality and Safety Testing Center in Hubei Province ,Wuhan 430070,China )

Abstract :Purity ,clarity ,germination rate and moisture content are four indicators of seed quality.No matter which of them is not up to the national standards ,the seed will be clarified to unqualified seed.To ensure accurate ,reliable and repeatable results of wheat germination test ,we must follow the germination test procedures requested in “GB /T 3543.1-1995

Inspection Regulations of Crop Seed ”,and use operation experiences to reduce error or failure during the germination test.

Methods and steps of wheat germination test were summarized in this article.

Key words :wheat (Triticum aestivum L.);germination test ;breaking dormancy ;germination shed ;germination percentage

第12期

这与第一个试验处理的结论是完全不同的。

2.2选用适宜的发芽床

小麦种子发芽试验通常选用纸质或沙质发芽床。纸床最好选用具有一定强度、质地好、吸水性强的专用的种子发芽纸或高质量的滤纸、无菌卫生纸。笔者在试验中采用消毒纱布做发芽床,效果也相当不错。

纸床可用2~3层,使用前先高温(120℃)烘烤灭菌。尔后充分湿润,再放入发芽盒中,沥去多余水分(至纸床滴水不成线),注意排净底部气泡,以免影响种子吸水和着床。纱布发芽床的制作方法同纸床的制作方法。沙床应选0.05~0.08mm大小的干净的细沙,经过高温消毒后喷水制成含水量饱和(约60%)的沙床(手握能成团,不滴水,一触即散为度)。2.3种子置床

种子置床时,将数好的样品种子用事先消过毒的镊子夹住逐粒均匀置床。置床时胚部向上并朝向发芽盒的同一侧,将饱满子、健康子与瘦瘪子、破损子、霉变子、穗发芽子各置一端,防止交叉感染,也方便计数。种子置床完毕后,用喷壶在盒内均匀喷洒少许无菌水,使种子与发芽床接触良好,倾倒发芽盒沥去多余水分(以可见水珠但流不出为度)。用纸床或纱布床培养时,可盖一层或不盖纸或纱布,沙床培养时要加盖10mm以内厚度的松散湿沙,并盖上盒盖,粘贴标签,根据文献[1]规定的发芽温度(20℃)进行发芽培养。标签应根据需要注明品种、产地、批次、重复次序、置床日期等。

2.4环境条件的控制和观察管理

2.4.1环境病菌的影响培养时注意避免环境污染,尽量保持少菌的环境,笔者在试验过程中做过少菌环境与多菌环境的对比试验,结果如表2。从表2可以看出,环境病菌严重影响发芽试验的准确度,进而影响种子的使用价值评价与用种量。

2.4.2湿度、温度、光照的控制发芽试验期间要保证发芽床始终保持湿润,温度保持在20~24℃范围内[4],每天掀开盖子检查1次,这样可以及时发现水分是否短缺、是否产生霉变等问题,同时有利于通风供氧。在试验进行到第2~3天时应将覆盖的滤纸或纱布抽去,并适当进行光照,这样既可加速幼苗的光合作用,又可起到杀菌的作用。

水分不能过多也不能过少,水分过多会导致缺氧,造成胚根发育迟缓,应及时沥去;水分过少则会

2方法与步骤

2.1试验前的准备

所有用于发芽试验的水应为经过高温高压消毒的无菌水(条件不具备时,可用凉开水代替),水质应纯净、无毒无害,pH值为6.0~7.5[1]。发芽盒要求透光性、密封性好(不变形),用时洗净烘干并用75%的乙醇擦拭内外表面[2]。

新收获的小麦种子因品种不同,可能存在着休眠现象。处于休眠状态的种子即使给予适宜的萌发条件也不能正常萌发,必须度过休眠期才能发芽。这时应解除休眠再做发芽试验。用下面的几种方法进行处理,可测得休眠期小麦种子的真实发芽率:4~12℃低温处理法、切胚发芽法、1%双氧水浸种法、0.05%赤霉素溶液湿润发芽床催芽法、35℃高温干燥法、四氮唑染色法[3]。以4~12℃低温处理法、35℃高温干燥法、0.05%赤霉素溶液湿润发芽床等打破休眠的催芽法最为可靠和常用。

笔者在试验过程中采用先晒种,然后将干种子置于4℃条件下冷处理3~4d的预处理方法,并以收获后不做处理的试样进行对比试验,结果如表1。由表1可以看出,试验用水和试验前处理对发芽试验的影响很大,同时也表明了发芽试验方法的规范化对使用价值与种子等级评价的重要性。经晒种和冷藏处理并用无菌水供发芽用水的试样,4d时达到最大发芽率,种子发芽势最强,以后发芽数基本趋于稳定。而未经晒种和冷藏处理、并以自来水供发芽用水的试样,发芽势很弱,发芽率也极不稳定。事实上,单从第二个试验处理得到的发芽率来看,此批种子是不合格的种子,是不能进入市场销售的,

试验前预处理

经晒种和冷藏处理的试样,试验用水为无菌水没经晒种和冷藏处理的试样,试验用水为自来水

穗发芽数//%

9

13

4d

86

62

5d

84

64

种子数量//粒

100

100

6d

85

65

7d

83

67

表1试验用水与试验前处理对发芽试验的影响

注:表中数据为4次重复的平均数。表2同。

种子发芽率//%

试验环境

无菌发芽室中病菌培养实验室中

穗发芽数//%

17

16

4d

83

83

5d

83

79

种子数量//粒

100

100

6d

85

74

7d

85

73

表2环境病菌对发芽试验的影响

种子发芽率//%赵翠荣等:浅谈小麦发芽试验技术2957

湖北农业科学2009年

限制胚芽的生长,用喷壶喷1遍清水即可。注意补水用的水应与发芽盒放在相同的温度条件下,避免温度过高或过低对新芽造成伤害。补水的同时应观察是否有发芽迟缓的种子,如有,则可挑出放于盒内一端继续观察。对于无胚的种子,建议立即淘汰,并随时增加计数。

发现有霉菌感染的种子应及时取出洗涤去霉,当发霉种子超过5%时应调换发芽床,以防止霉菌传播。如发现腐烂死亡的种子,应及时将其除去并计数。

3幼苗鉴定

当小麦幼苗生长到根和芽长度近似相等时才可进行幼苗鉴定。要把每株幼苗分别拣出,逐株鉴定,对小麦根系、叶进行观察,按正常幼苗、不正常幼苗鉴定标准进行判定。对正常幼苗、畸形幼苗、感病幼苗、残缺幼苗应正确鉴别,分别计数,并计算出该批种子的发芽率。需要注意的是,小麦种子根系较为发达,往往在发芽盒内相互缠绕不易挑出,若挑出则很可能损伤到其他正在观察中的幼苗,因此可留在发芽盒内到试验终止时进行计数。

正常发芽的幼苗特征[2]是:幼苗匀称健壮,根系生长良好,胚根伸长,根尖有白色根毛,有发育良好的中胚轴,有一个发育好、直立的芽鞘,其中包着一片绿叶延伸到顶端,最后从芽鞘中伸出。

以下几种情况应视作正常苗[5]:①双生苗;②次生感染的幼苗;③人为损伤的幼苗;④受覆盖的滤纸影响产生轻度弯曲的幼苗。小麦种子发芽试验中常出现的不正常幼苗有以下几种情况:①有芽无根;②有根无芽;③胚芽鞘畸形;④胚芽鞘裂缝长度超过从顶端量起的1/3;⑤子叶在胚芽鞘内延伸长度不及胚芽鞘的1/2;⑥子叶撕裂呈麻状;⑦胚芽粗短,停滞或纤细;⑧种子根生长停滞。

4试验结果统计与分析

1)小麦种子发芽试验持续时间为4~8d,4~5d 计算发芽势,7d计算发芽率。一般以发芽率稳定时为试验终止时间。

2)当试验出现下列情况时,应重新试验。怀疑种子有休眠(即有较多的新鲜不发芽种子)时,可采用前述打破种子休眠的方法处理种子后重新进行试验,填报得到的最佳结果,并注明所用的方法。由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时,可采用沙床或土壤进行试验,如有条件的可增加种子之间的距离。

3)当正确鉴定幼苗数有困难时,可采用1种或几种方法在沙床或土壤上进行重新试验。

4)当发现试验条件、幼苗鉴定或计数有差错时,应采用同样的方法重新进行试验。

5)当试验重复之间的差距超过表3最大容许差距时,应采用同样的方法重新进行试验。如果第二次结果与第一次结果一致,即其差异不超过表3中所示的容许差距,则将两次试验的平均数填报在结果单上。如果第二次结果与第一次结果不相符合,其差异超过表3所示的容许差距,则采用同样的方法进行第三次试验,填报符合要求的结果平均数。

通过试验,探讨了小麦发芽试验的方法与步骤,强调了发芽试验的用水和发芽床应经消毒处理,试验环境应尽量减少杂菌污染,试验期间应保证适宜温度和湿度条件,试验过程中应勤观察,用于补充的水应与试验处理放在相同的温度条件下,种子萌动后应适量增加光照以利于壮苗和增强对病菌的抵抗力。

参考文献:

[1]GB/T3543.1-1995,农作物种子检验规程[S].

[2]谢迎兰,冯劲松.小麦种子发芽试验中应注意的问题[J].现代种业,2009(1):34.

[3]徐建国.休眠期的小麦种子发芽率测定方法[J].种子科技,2003(3):167.

[4]赵娟.小麦种子发芽实验中应注意的问题[J].农业科技通讯,2008(11):125.

[5]马吉坡,刘杰,王清华.用纸床做小麦种子发芽实验应注意的问题[J].中国种业,2007(11):86.

表3同一发芽试验4次重复间的最大容许差距[1]

平均发芽率50%以上

%

99

98

97

96

95

93~94

91~92

89~90

87~88

84~86

81~83

78~80

73~77

67~72

56~66

51~55

平均发芽率50%以下

%

2

3

4

5

6

7~8

9~10

11~12

13~14

15~17

18~20

21~23

24~28

29~34

35~45

46~50

最大容许差距

%

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

(责任编辑昌炎新)

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