黄酮
第 五 章 黄酮类化合物
第 一 节 概述
一、黄酮类化合物生物合成的基本途径
（一）基本结构；
色原酮 2-苯基色原酮 C 6-C 3-C 6
二、结构分类及其结构类别间的生物合成关系
（1）根据C 3的氧化程度； 黄酮 木犀草素 黄苓素
R 1= R 2= 榕碱 H 异榕碱 H 黄酮醇
O O O O O 1234567812345678O O O O HO OH OH OH O O HO HO OH COOH NH 2COCoA O OH OH HO O A
OH OH OH HO O CHS PAL O O
OH HO R 1R 2N CH 3N CH 3
槲皮素（3-O-云香糖：芦丁）
二氢黄酮
法尔杜鹃素 苦参醇A 二氢黄酮醇
水飞藓素
（2）根据B 环的连接位置；
异黄酮
大豆素 7，4ˊ-二OH 葛根素 7，4ˊ-二OH ，8-O-glc
大豆苷 4ˊ-OH ，7-O-glc
二氢异黄酮 紫檀素R=CH 3 高丽槐素R=H
O O O O HO CH 3OH OH O O Me HO Me OH O O OH HO OH O O CH 2OH OH OCH3O O OH O
O O O RO O O O O OH O O HO OH OH OH OH 87654321O O
高异黄酮
（3）根据C 3链是否成环；若C 3为开环的，称为查尔酮，二氢查尔酮类。
查尔酮 二氢查尔酮
红花苷（无色） 红花苷（黄色）
醌式红花苷（红色）
（4）其它；
花色素类
花青素母核 R=H 矢车菊素
R=OH 飞燕草素
OH
O 2O +124358O HO OH OH OH OR +O O
654321OH O OH O HO HO O glc OH O O HO O O glc OH O O HO HO O glc
儿茶素类 黄烷-3-醇类
（-）表儿茶素 （+）儿茶素 黄烷-3，4-二醇类
R 1=OH ，R 2=H 无色矢车菊素 R 1=R 2=OH 无色飞燕草 R 1=R 2=H 无色天竺葵素
山酮类 异芒果素
橙酮和异橙酮类
紫铆花素 硫磺菊素
O OH H H HO OH OH OH O OH H H HO OH OH OH O O HO HO O OH OH glc O O 12345
67CH
O O HO CH OH OH O O CH O OH H H HO OH OH R 1OH
R 2O O 12345678OH OH HO O -2H
2、双黄酮类；
（1） 5ˊ，8-双芹菜素型 R 1 R 2 CH 3 H 银杏素 H H 白果素 H CH 3 异银杏素
（2）苯醚型；
桧黄素
（3）8，8ˊ-双芹菜素型；
柏黄素
（3）黄酮苷类； 葛根素 牡荆素
O O
R 1O OH OCH 3O O HO OH OR 2O O HO OH O O O HO OH OH O O O O OH HO HO OH OH OH O O glc HO OH OH
O O OH HO OH glc
第二节 黄酮类化合物的性质与颜色反应
（二）碱性氧原子的性质
四、显色反应
2、NaBH 4反应
2
Cl -2+O OH
O O +NaBH O OH HO OH O O HO OH X -
++CHCHCH OH HO CHCHCH OH HO
（二）金属盐试剂络合反应
3
、锆盐，
第 三 节 黄酮类化合物的提取分离
槐花米
水煎煮Ca(OH)2调PH8—9， 趁热过滤 提取液℃，调PH=5 沉淀
水洗，60℃干燥 粗芦丁
水重结晶 芦丁纯品
OH OH
O O OH OH O O O OH O OH OH Zr Cl O O HO OH O OH Rh glc
二、 分离
实例1：从柠檬果皮中分离降压有效成份：
柠檬果皮（2400g ） 搅碎成匀浆，热水提取
滤液
浓缩至小体积，加三倍量乙醇
, 静止
过夜，过滤，滤液浓缩，冷冻干燥 水提取物（183g ），
取179 g ，用500ml 水溶解，过滤
(134.5g) （3．6g ） 溶于1500ml 水中，
加220gPb(OH)(Ac) 饱和溶液 黄色铅盐沉淀 加20gNaHCO 3饱和水溶， 搅拌1小时，静止，过滤 滤液
6mol/L HCl 调PH5.3,
n-BuOH 提取，（500ml ×5） (PH5酸水洗脱部份)（PH7水洗部份） PH9碱水洗脱部份
OH OH O O N H
第 四 节 黄酮类化合物的检识与结构测定
（一）黄酮类化合物在甲醇溶液中的UV 光谱
苯甲酰部分 黄酮（R=H ） 肉桂酰部分 带II ；220-280nm 黄酮醇（R=OH ） 带I ；300-400nm
1、黄酮与黄酮醇
化合物 带I （λmax HOMe ） 3,5,7-三羟基黄酮（高良姜素） 350
3,5,7，4ˊ-；四羟基黄酮（山奈酚） 367
3,5,7，3ˊ，4ˊ-五羟基黄酮 370
3,5,7，3ˊ，4ˊ，5ˊ-六羟基黄酮 374
化合物 带II （λmax HOMe ）
7-羟基黄酮 250
5-羟基黄酮 252
5-羟基黄酮及5，7-二羟基黄酮 262
5,6，7-三羟基黄酮 274
5,7，8-三羟基黄酮 281
。 ++O O R O O -R O O -R Al +3
OH O HO R O
O Al +3O O R HO O O O Al +3AlCl O O R HO HO OH
三、 1
H-NMR 光谱在黄酮类化合物结构测定中的
（一）A 环质子，常见有下列几种情况。 1、 5，7-二OH 取代； 2、 7-OH 黄酮类
（四）Ｂ环质子。常见有下列情况：
1、 4ˊ-氧取代
2、 3ˊ，ˊ4ˊ-二氧取代
3、 3ˊ，4ˊ，5ˊ-
三氧取代： （三） C 环质子
1、 黄酮类，
2、 异黄酮类
3、二氢黄酮
4、二氢黄酮醇
O O HO 856OR OR OR
OR OR OR O O H O O H 8O O OH HO 6
5、查尔酮和橙酮
（四）糖上质子
1、端基质子；
黄酮苷类糖上端基质子信号
化合物 糖上H-1"
黄酮醇3-O-葡萄糖苷 5.7-6.0
黄酮类7-O-葡萄糖苷
黄酮类4ˊ-O-葡萄糖苷 4.8-5.2
黄酮类5-O-葡萄糖苷 黄酮类6-O-葡萄糖苷
黄酮醇3-O-鼠李糖苷 5.0-5.1
二氢黄酮醇3-O-葡萄糖苷 4.1-4.3
二氢黄酮醇3-O-鼠李糖苷 4.0-4.2
化合物 H-1" （δppm ） H-6"ˊ(δppm) 芦丁糖基(glc6-1Rh) 4.2-4.4, d,J=2Hz 0.7-10( 重峰) 新橙皮糖基(glc2-1Rh) 4.9-5.0,d,J=2Hz 1.1-1.3,d
四、 13C-NMR 在黄酮类结构测定中的应用
（一） 骨架类型的判断
13
异橙酮类 黄酮，黄酮醇 二氢黄酮，二氢黄酮醇 C-3 查尔酮，二氢查尔酮 122 .1-122.3(s) C-2 =CH-(ββ 二氢黄酮醇（d ）O O OH O
(d) 黄酮醇（S）
黄酮（S）二氢异黄酮（t）查尔酮 C-α橙酮（S） C-3信号二氢黄酮（d） 116.6-128.1(d)
异黄酮（d）104.7—
黄酮醇异黄酮 =CH-
橙酮二氢黄酮醇
（二）取代图式的确定
1、取代基的影响
X Zi Zo Zm Zp
OH 26.6 -12.8 1.6 -7.1
OCH3 31.4 -14.4 1.0 -7.8
黄酮芫花素
槲皮素芹菜素
五、质谱在黄酮类化合物结构测定中的应用
（一）EIMS
1、RDA裂解（途径I）
126.3
126.3
131.8
156.3
118.1
133.7
125.2
124.0
178.4
107.6
163.2
O
O
56.0
165.6
98.2157.7
105.0
182.3103.4
121.6
1128.8
116.3
161.8
116.3
128.8
164.6
161.8
92.9
O
O
CH
3
O OH
OH
120.1
160.9
93.5
164.0
89.3
156.2
135.8
103.2
175.9
115.7
147.7
145.1
115.2
122.1
146.9
O
O
OH
HO
HO
OH
OH121.3
128.4
116.0
161.1
116.0
128.4
163.7
98.1151.0
103.7
181.8102.8
164.1
161.5
94.0O
O
HO OH
OH
òòò
ò
+
+
+
+
+
+
B
C
HC
O
C O
1、黄酮类基本裂解：
化合物 A 1+ B 1+
黄酮 120 102
5，7-二羟基黄酮 152 102
5，7，4ˊ-三羟基 152 118
5，7-二羟基，4ˊ-
甲氧基黄酮（刺槐素） 152 132
O C OH +A A 1+H B 1+B C HC òòòò+B 2+B O 2- 28+CO a
M-1+M +ò.+B 2+++B A O 47+O O OCH 3OCH 3OH CH 3O O O OCH 3OCH 3OH CH 3O A O HO CH O O HO +?aCO 28 +- A 1A +C O
3、 黄酮醇类：裂解以途径II 为主。
1+H]
[B 2+] [M +]（R=CH
3或H ） [M-17]+ （R=H ）
[M-31]+ （R=CH 3）
六、 其它（×）
OH COCH 3HO OH +
COOH HO OH COCH 3A B A B HO OH COOH CH 3COOH A B +++M-43
O OH HO O O O OH +O O O O O OH OR B A C O 2C O
七、黄酮类化合物在结构研究中的注意事项
（一）
第五节 结构研究实例
一、苦参醇A 的结构研究
苦参醇A ：浅黄色结晶，mp:172-174℃，[α]-115.6°（C=0.40,MeOH ），
盐酸镁粉反应阳性，——黄酮类化合物。
1、MS:M +:408,结合元素分析，得分子式：C 25H 28O 5，
2、IR ：3600，3200（-OH ），1640（共轭羰基），1605（苯环）
3、UV ：295，340，加NaOAc 带Ⅱ向红移了39mm ，可说明该化合物是7-位有游离酚羟基的二氢黄酮（醇），
4、1H-NMR ：2.64—3.18 (5H,m), 5.00 (1H,br,t,J=7.0Hz),
1.48 (3H,s),
1.56(3H,s),1.66(3H,s),4.60(1H,br,s),1
2.56(1H,s,5-OH),6.92—7.61(4H,m,芳香质子)，
5.74(1H,dd,J=12.0,4.5Hz,2-H), 3.20 (1H, dd , J=1
6.0,12.0Hz,3-Ha), 2.88(1H,dd,J=16.0,4.5Hz,3-Hb),得该化合物为5，7-位有游离酚-OH 的二氢黄酮，
5、质谱：m/z ：120（A +），说明B 环上只有一个酚-OH 取代，而lavandulyl 应在A 环上。最后通过二维核磁共振技术确定其结构。见P208。
二、柚皮素的结构测定：
白色针晶（I），mp:247-248℃,Mg-HCl反应显紫红色，示黄酮类，FeCl3反应显紫黑色，示酚-OH。
IR（cm-1）：3400(-OH),1650(Ar-CO)，1610，1505（苯环） UVλmax nm：
MeOH：287，324（sh），带II为主峰，示异黄酮或二氢黄酮，但异黄酮的带II一般在245-270，因此，应为二氢黄酮类。
NaOMe：243，322.2↑，红移35 nm示二氢黄酮，
AlCl3：307.6,372.2,带II红移20nm示有5-OH，
AlCl3/HCl：307.6,374.2,与AlCl3无明显差异，示结构中无邻二酚-OH。
NaAc：323.2红移35nm，二氢黄酮类红移35 nm 示5,7-二OH二氢黄酮或二氢黄酮醇。
NaAc/H3BO3：290.2,332.0(sh)，与MeOH中图式无明显差异，示无邻二酚-OH，与AlCl3/HCl中结果一致。
以上数据提示，该化合物应是二氢黄酮类。
1HNMR（丙酮）δppm：
其中，2.74(1H,dd,J=2.9,17.0Hz)和
3,19(1H,dd,J=12.9,17.0Hz)为二氢黄酮C-3上的两个质子，（C=O的α-碳上质子）3e-H,3a-H。
5.46(1H,dd,J=2.9,12.9Hz)为H-2（含氧C-H）。
从上述三个质子信号的J值看，系一组偶合体系，为二氢黄酮上C-2，C-3上的质子。
5．95（1H，d,J=2.2Hz）及5.96(1H,d,J=2.2Hz),从J值看，应为间位偶合，为H-6及H-8。
6.90(2H,d,J=8.4Hz)和
7.40(2H,d,J=
8.40Hz),系邻位偶合，应为H-3ˊ，5ˊ和H-2ˊ，6ˊ，证明在C-4ˊ上有-OH 取代。
12.19（1H，s）为5-OH信号。
从上面的UV，IR，1HMR可以推测该化合物为5，7，4ˊ-
三羟基黄酮。
质谱也进一步证实上述推测：
M+274与分子量相符。
RDA裂解：得到A1+152，[A1++1]153，证实A环上有两个-OH。
B1+120，说明B环上有一个-OH。则确定该化合物结构如下式：
（二）asiaticatin(I)的结构测定
黄色结构晶，FeCl3反应绿色，mg-HCl反应紫红色，示为黄酮类化合物。
由元素分析得分子式为C21H20O11。
UVλmax nm：
MeOH：267(示5或5，7-二OH)，352示有三个-OH。
NaOMe：275,326(7-OH 游离)，402↑，（红移50nm 示4ˊ-OH游离）
AlCl3：274,301,352,398(带I红移46nm)，
AlCl3/HCl：267，303，347，400（带I，红移48nm），
AlCl3和AlCl3/HCl的图式无明显差异，示无邻二酚-OH。且带I分别移动了46和48nm示有5-OH游离。
NaAc：275（红移8nm 示7-OH游离）305（sh），372，
NaAc/H3BO：266，300（sh），353，带I，和带II均无明显变化，示无邻二酚-OH。
以上数据显示：该化合物应为5，7，4ˊ三羟基黄酮-3-O-取代。
IR (cm-1): 3401（OH），1655（C=O），1606，1504（芳环）。
1HNMR （DMSOd 6）δppm ：
3.2-3.9(6H,m,糖上的六个H)，
3.9-5.1(4H,加水后消失，为糖上的个-OH 质子)，示糖上四个-OH 都游离。
5.96 (1H,d,J=8.0Hz)为糖上端基质子，根据其化学位移，示该糖连在3-位上，其它一般都小于5.2ppm 。
6.12 (1H,d,J=2.0Hz)为A 环6-H ，
6.42 (1H,d,J=2.0Hz)为A 环8-H ，由δ值和J 值确定。
6.86 (2H,d,J=9.0Hz) H-3ˊ,5ˊ，
8.06(2H,d,J=9.0Hz)H-2ˊ,6ˊ,
由以上结果可以推测其结构如下式：
O O HO OH O C 6H 12O 6
天然黄酮类化合物的药理活性及分离提取
黄酮类化合物是自然界广泛存在的一类化合物，在高等植物体内分布较多。本文对黄酮类化合物的结构与药理活性、提取分离方法等研究进展进行了综述，并对该领域的研究热点进行了展望。 １黄酮类化合物结构特点及分布 黄酮类化合物是一类自然界中广泛分布的多酚类物质。现泛指具有１５个碳原子的多元酚类化合物，其中2个芳环（Ａ环、Ｂ环）之间以一个三碳链（Ｃ３）相连，其骨架可用Ｃ６鄄Ｃ３鄄Ｃ６表示。 由于分子中有一个酮式羰基，故第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，天然黄酮类化合物母核上常含有羟基、甲氧基、异戊烯氧基等取代基。这些助色团的存在，使该类化合物多显黄色，故称黄酮或黄碱素［１］。 根据三碳链结构的氧化程度以及Ｂ环的连接位置等特点，黄酮类化合物可分为：黄酮和黄酮醇；异黄酮；异黄烷酮（又称二氢异黄酮）；黄烷酮（又称二氢黄酮）和黄烷醇（又称二氢黄酮醇）；橙酮（又称澳咔）；查耳酮；二氢查耳酮；黄烷和黄烷醇；黄烷二醇（３，４）（又称白花色苷元）［２］。黄酮类在植物体内大部分与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用［３］。主要存在于桦木科、芸香科、樟科、唇形科、石楠科、玄参科、豆科、苦苣苔科、杜鹃科和菊科等高等植物中［４］。 ２黄酮类化合物的药理活性 现已发现数百种不同类型的黄酮类化合物具有广泛的生物活性和药理活性。大量研究表明，黄酮类化合物具有清除自由基、抗氧化、抗突变、抗肿瘤、抗菌、抗病毒和调节免疫、防治血管硬化、降血糖等功能。黄酮类化合物以纯天然、高活性、见效快、作用广泛等特点日益受到人们的关注［５］。２．１抗氧化及抗自由基作用：自由基性质活泼，有极强的氧化反应能力，对人体有很大的危害。体内脂质和自由基过氧化作用导致细胞结构改变及功能破坏而引起癌症、衰老及心血管等退变性疾病［６］。有些黄酮类化合物能够直接保护细胞抗氧化，有的则通过诱导保护细胞抗氧化损伤的酶，还有的既可直接保护细胞不被氧化又可以诱导产生抗氧化酶。羟基黄酮被证明有直接抗氧化活性，但是不能有效诱导保护细胞的酶；能够有效地诱导细胞保护酶的甲氧基黄酮类化合物能够以最小毒性保护正常细胞。Ａ环５位被甲氧基化的黄酮类化合物能够最有效地诱导细胞保护酶，其余同等效果的黄酮类化合物细胞毒性都很大［７］。王毅红等［８］通过对石松黄酮类化合物抗氧化的研究表明：石松黄酮类化合物能显著清除羟基自由基和超氧阴离子自由基，其黄酮类化合物抗氧化性能呈量鄄效相关。 ２．２抗肿瘤作用：黄酮类化合物的抗癌机制主要与其抑制癌细胞增殖并诱导凋亡、抑制新生血管形成、抑制癌细胞迁移、抗氧化、抗炎症和提高机体免疫力这几个方面有关［９］。肿瘤细胞的一个显著特点：细胞不受控制的快速增殖。如何能够有效抑制肿瘤细胞的增殖是抗肿瘤的根本。许多黄酮类化合物已被证明能够干扰三磷酸腺苷（ＡＴＰ）依赖性的药物流出转运蛋白，这些转运蛋白通过不同的细胞抑制药物在对抗癌细胞中起到很大的作用，这使在肿瘤治疗中克服多药耐药性成为可能［１０］。黄酮化合物对人体的正常细胞低毒甚至无毒，而对肿瘤细胞有细胞毒性和治疗作用，因此黄酮化合物被认为是颇具有应用前景的新抗癌药或抗癌辅助药。 ２．３抗人类免疫缺陷病毒：很多黄酮类化合物能够抑制ＨＩＶ病毒与宿主细胞的融合，并且能够抑制逆转录酶和蛋白酶的活性。染料木黄酮被发现能够干扰基质细胞衍生因子（ＳＤＦ）鄄１和艾滋病介导的ＣＤ４+Ｔ细胞的肌动蛋白动力学，肌动蛋白活性的降低与染料木黄铜介导的病毒ＤＮＡ在静止的ＣＤ４+Ｔ细胞中积累抑制有关，分别给3只恒河猴单剂量口服１０、１１、１２ｍｇ/ｋｇ，没有发现明显不良反应［11］。黄芩苷是一种黄酮类化合物，其能够与艾滋病毒竞争靶细胞结合位点，并且ＨＩＶ鄄１入侵细胞初期，黄芩苷能够抑制其自我复制过程。 ２．４抗炎及抗免疫作用：对金樱子果实提取物对缺血再灌注损伤的研究表明，口服金樱子果实提取黄酮类物质能够明显改善存活率，并且能够预防Ｉ/Ｒ诱导的组织损伤。进一步研究表明这些天然产物具有很好的抗氧化活性，能够显著降低ＤＮＡ断裂。由于其抗氧化活性、抗细胞凋亡、抗炎等功能，对缺血性脑卒中具有潜在的治疗活性［１2］。黄敬群等［１3］研究发现槲皮素呈剂量依赖性抑制急性痛风性关节炎模型大鼠的距小腿关节肿胀程度并且能够明显改善模型大鼠距小腿关节炎的病理改变。说明槲皮素可通过减轻炎症反应治疗急性痛风性关节炎。 DOI：10.11655/zgywylc2014.05.023 基金项目：山西医科大学科技创新基金（C01201005） 作者单位：０３０００１太原，山西医科大学药学院（刘星雨、周敏），基础医学院（孙体健） 通信作者：孙体健·讲座· 天然黄酮类化合物的药理活性及分离提取 刘星雨周敏孙体健
黄酮的研究
黄酮的提取 指导老师：郁建平 作者：徐敬友 学号：0907040256 专业：制药工程 院系：贵州大学生命科学学院 摘要：黄酮类化合物广泛存在于自然界，是一类重要的天然有机化合物。其不同的颜色为天然色素家族添加了更多的色彩。这类含有氧杂环的化合物多存在于高等植物及其他海洋生物中。黄酮类化合物的存在形式既有与糖结合成苷的，也有游离体。在花、叶、果等组织中，一般多以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，刚多为游离苷元形式存在。黄酮类以极性稍大的苷元，一般可用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇-水（1：1）甲醇。一些多糖苷类则可以用沸水提取。本文阐述了黄酮的提取方法，包括热水提取法、碱液提取法、丙酮提取法、乙醇浸提法、微波萃取法、超声波法、酶解法、大孔树脂吸附法、超滤法等方法，从而为黄酮类化合物在各行业的应用开辟了一条可靠的途径. 关键字：黄酮、提取 前言： 黄酮类化合物( Flavonoids)是植物经光合作用产生的一大类化合物，其结构母核是以C6-C3-C6为骨架苯2-苯基色原酮。它的存在形式有两种，一种是游离的苷元，另一种是与糖等结合的苷。黄酮类化合物在植物界分布很广泛，如银杏叶、山楂、沙棘、蔷薇果、枸杞、杜仲、茶叶等。到目前为止，已发现有5000多种植物中有黄酮类和异黄酮类物质。它们包括黄烷酮、异黄烷酮、黄酮醇、黄烷酮醇、双黄酮及其衍生物。黄酮作为一种功能成分，其主要作用有：抗肿瘤，延缓
衰老，增强心血管功能，治疗慢性前列腺炎，增强免疫力，调解内分泌系统，护肝，抗炎、抗过敏，抑菌、抗病毒等。 目前国际上对黄酮类化合物的研究开发十分活跃，其产品的种类很多，在国际上的销售额已达10亿美元以上。国内外相继开发出天保宁、银杏叶片、银杏叶袋泡茶、山楂叶冲剂、黄酮类口香糖、黄酮类牙膏等多种药品和保健品。所以对黄酮提取工艺的研究意义重大。 1 提取工艺 1.1 热水提取法 由于黄酮苷类物质易溶于水，所以对黄酮苷类含量较高的原料可以采用热水提取法。例如，从荷叶中黄酮提取时，采用提取水量30倍，提取温度80℃，提取时间1.5h，可得较好结果。此工艺成本低、安全，适合工业化大生产。但由于水的极性大，易把蛋白质、糖类等溶于水的成分浸提出来，从而使提取液存放时，易腐败变质，为后续的分离带来困难，但如果直接用提取液作原料生产制剂或饮料等，因消耗溶剂的费用比其他方法低，仍为一种可取的提取方法。 1.2碱液提取法 黄酮类物质是以2-苯基色原酮为母核的多羟基化合物，当在碱性条件下，其苯基色原酮的1，2碳之间的C-O键打开成查耳酮型结构，此物可溶于水，当在酸性条件下，查耳酮又恢复了闭环结构，所以可用碱水提取。主要用的碱性溶液是稀氢氧化钠和石灰水（氢氧化钙水溶液）。氢氧化钠水溶液的浸出能力高，但杂质较多不利于纯化。石灰水可以使一些质或水溶性杂质沉淀生成钙盐沉淀，有利于浸液纯化，但是浸出量不如氢氧化钠水溶液好，同时有些黄酮类化合物能与钙结合成不溶性物质，不被溶出。不同的原材料使用不同的碱性溶液。例如从菊花中提取黄酮类物质时，用PH10的氢氧化钠溶液浸出效果较好；而从槐米中提取芦丁，则应用碱性较强的饱和石灰水作溶剂，这样则有利于芦丁成盐溶解。值得注意是：用碱水提取时，所用碱的浓度不宜过高，以免在强碱条件下加热破坏黄酮类化合物的母核。 1.3丙酮提取法 丙酮是一种较好的有机溶剂，主要用于提取脂溶性基团占优势的黄酮类物质，比热水提取和碱液提取得率要高，且提取液的过滤、回收溶剂、干燥等过程易于进行，此工艺简单，易于工业化生产。若将提取物直接作为药剂和保健食品的原料，这种方法不失为一种理想的方法，例如，在对柚皮中黄酮的提取时，当用60%的丙酮，固液质量比1:6，在60℃下提取180min，可得较好结果。
穿心莲生产实用技术
穿心莲生产实用技术 第一章概况 穿心莲[Andrographis paniculata(Burm. f.) Nees]是一种一年生草本植物，以叶或全草入药，具有清热解毒、凉血、消肿等作用，是中医临床应用较多的药材，也是许多中成药的重要原料。穿心莲原产亚洲热带地区，分布于印度、泰国、斯里兰卡和印尼等很多亚洲平原。中国最初引种于广东和福建南部，现长江以南各省以及山东、北京、陕西等地均有栽培。主产于广东、广西、福建、江西等省，湛江是广东的主要产地，全国最高年产量约为8000吨，其中湛江约为800～1000吨。 20世纪50年代，穿心莲在国内大种中草药的热潮中曾被广泛种植，穿心莲作为中草药中的天然消炎药物被开发为“穿心莲片”，并畅销国内大江南北，当时位居中草药制剂的前列。此后，随著20世纪70、80年代，我国抗生素工业的迅速发展壮大及庆大霉素、螺旋霉素、麦白霉素、小诺霉素、半合成青霉素与头孢菌素等产品的陆续上市，作为天然消炎药物的穿心莲片很快就被冷落，其销量一落千丈，到20世纪80年代后期已很少有人问津。进入20世纪90年代后，由于抗生素的耐药性问题日趋严重，以及新型抗生素价格昂贵，病人越来越难以承受等原因，人们又开始怀念20世纪50～60年代开发上市的中药消炎药穿心莲片，穿心莲等中草药再度成为制药厂家的研究重点。 作为一种支持免疫系统的药物，穿心莲在中国和印度已经被使用了几百年。近十多年来的研究已经证实穿心莲对于各种各样人体功能和疾病的积极作用，从普通的感冒和发烧到扁桃体炎、肺炎、肺结核、咽喉炎、上呼吸道感染、细菌性痢疾和腹泻都表现出显著的疗效。最新科学研究表明，穿心莲的主要活性成分包括内酯类物质、黄酮类和甾醇等。其中新穿心莲内酯在 20世纪90年代已被国内厂家开发成为新型植物注射剂（如莲必治、穿琥宁和新炎平等），这些产品的年销量均超过1千万支。至于含穿心莲成分的中成药则更多。近年来国内外医药研究人员对穿心莲另一主要成分——黄酮亦进行了深入研究，并发现穿心莲对多种常见心脑血管疾病（包括高血脂、血管栓塞、心肌梗塞、脑动脉硬化、血小板聚集等等）均有防治作用。国内已有厂家据此开发出“穿心莲黄酮片”。经临床验证，该药片对防治脑缺血的总有效率高达82%，几乎与西药相当。有人认为中药“穿心莲黄酮片”有望成为继银杏叶片以后又一种畅销国际市场的天然心血管病药物。 更令人振奋的是，1997年香港中文大学的Collins教授等人在调研19种中草药的抗爱病病毒（即HIV-1）作用时发现，黄芩、金银花、穿心莲，板蓝根和胡黄连等中草药的30%水提取液对HIV-1的抑制作用最为显著。1999年加拿大蒙特利尔大学的研究人员通过自行设计的药理试验进一步提示，穿心莲的主要成分———新穿心莲内酯，只需很小剂量即能有效地抑制类蛋白转换。说明新穿心莲内酯有望成为一种全新抗爱滋病药物的天然原料，其意义决不亚于银杏内脂与黄酮。因为目前全球至少已有数千万HIV-1携带者，其中绝大多数为无钱治疗的穷人（分布在非洲南部与东南亚国家）。尽管不少国家（如泰国、马来西亚、斯里兰卡、印度以及巴基斯坦）也有穿心莲资源分布，但我国
18种黄酮化合物
1. 儿茶酸 【中文名称】儿茶酸 【英文名称】Catechin 【用途】：可用作抗氧化剂。与维生素E、山梨酸、L-抗坏血酸有协同的抗氧化效果，宜配合使用。 【物化性质】：淡黄色至淡褐色非结晶粉末。对热稳定。分d、L两种异构 体，混合熔点132℃。溶于水、乙醇、丙二醇、甘油等强极 性有机溶剂，不溶于油脂。在碱性介质中易被氧化。L型的 熔点为175～177℃，比旋光度[α]D20为-16.8。。d型的熔 点为175～177℃，比旋光度[α]D20为+16.8。 2. 表儿茶素 【中文名称】表儿茶素 【英文名称】Epicatechin 【别名】EC, Epicatechol 【分子式】C15H14O6 【分子量】290.26806 【化学分类】Catechins,Tannins 【性状】白色粉末 3. 葛根素 【中文名称】葛根素 【英文名称】Puerarin 【别名】葛根黄素,葛根黄酮,黄豆甙元8-C-葡萄糖甙 【化学名】8-beta-D-葡萄吡喃糖-4',7-二羟基异黄酮;4,7－二氢基－8β－D葡萄糖基异黄酮 【分子式】C21H20O9
【分子量】416.38 【来源】为豆科植物葛Pueraria lobata（Willd．）Ohwi 根，野葛P. thunbergiana Benth．根。 【物理性质】低含量的为棕色粉末，高含量为白色针状结晶粉末, mp 187℃。甲醇中溶解,乙醇中略溶,水中微溶,氯仿或乙醚中不 溶。如果是针剂现在基本为要求99.5％以上的含量，而且有 要求相关物质。 4. 杨梅黄素（myricetin） 5. 葡糖苷（glucoside） 【中文名称】葡糖苷 【英文名称】glucoside 【简介】一种以葡萄糖作为糖成分的配糖体。是具有各种配质与葡萄糖还原基结合的结构，这类化合物总称为葡糖苷。作为配质的有醇（例 如山萝卜叶片的甲基萄糖苷）；酚（Vaccinium oxycoccus叶 片的氢醌葡糖苷）；异硫氰酸[例如芥（Brassica cernuaHemsl 种子和山萮菜根茎的黑芥子硫苷酸钾（sinigrin）]；香豆素；黄 酮 6. 异槲皮素 【中文名称】异槲皮素 【英文名称】isoquercetin 【物化性质】：又称异槲皮素，罗布麻甲素。黄色针状结晶(水)，熔点225～227℃，几乎不溶于冷水，微溶于沸水，溶于碱溶液显深黄 色。黄色结晶)，熔点206～208℃和232～236℃。淡黄色针 晶，熔点220～222℃(分解)。结晶(热水)，熔点230℃。存 在于锦葵科植物草棉(Gossypiumherbaceum L.)的花，夹竹 桃科植物红麻(Apocynum lanci-folium Rus.)的叶中，也可 化学合成制得。动物实验具有降血压作用。毛细血管渗透性 等试验表明具有抗炎作用。对棉蛉芽虫的幼虫有毒杀作用。 具有降酶作用，为田基黄治疗肝炎的有效成分。
“沙棘”之综述及临床疗效概要
“沙棘”之综述及临床疗效概要 李春兴医学博士 台湾中西整合医学会秘书长 【摘要】 沙棘之有关本草学、生药学、生物化学、药理学、药效药剂学、药品鉴定学、临床药学及临床疗效观察等文献资料之系统考察摘要整理。 关键词 : 沙棘、临床疗效、系统考察。 【前言】 沙棘自古以来系藏族、蒙古族常用药材，近年来由苏联开发成功及大陆将其收载入药典并列为重点研发项目后，渐成为国际医药界所注目之焦点，是21世纪最有希望之保健品，虽然沙棘业已完成有关本草学、生药学、生物化学、药品鉴定学、药剂学、药理学、药效学等药品所具备之完整基础、临床研究等文献资料及近期中所发表之人体临床疗效数百篇报告，更弥显其珍贵，但上述资料零散各处，为了让读者能一窥全貌，作者将上述数据作重点系统考察，摘要整理出本论文。 沙棘(醋柳) ShajiHippophae rhamnoides L. 【异名】醋柳、醋刺柳、酸刺、黑刺、沙枣、大尔卜兴。 【基源】沙棘为胡颓子科植物。 沙棘Hippophae rhamnoides L.及其同属植物干燥果实。 秋季果实成熟时或冬季冰冻时采收，除去杂质，干燥或蒸后干燥。【种类】 （1）西藏沙棘Hippophae tibetana Schlecht.：枝顶端成刺状，叶具鳞片，三叶轮生或对生。果实大，椭圆形，多汁，成熟时褐黄色，顶端有六条黑色放射状条纹。 （2）云南沙棘H. rhamnoides L. subsp.yunnanensis Rousi.：具棘刺，小枝褐绿色，老枝灰黑色，单叶互生，狭披针形或长圆状披针形。果实圆球形或卵状圆球形，橙黄色，均可做沙棘入药。
（3）肋果沙棘（Hippophae neurocarpa s.w.Liuet T.N.He） （4）柳叶沙棘（Hippophae salicifolia D.Don） 【原植物】灌木或小乔木，一般高1.5~10m，在3200m以上的高山上则成矮小灌木，高仅10cm左右。小枝灰色，通常有针刺，叶互生，线形或线状披针形，长1.5~3cm，宽3~4mm，先端渐尖，全缘，无柄或近于无柄，两面均被银白色鳞片。雌雄异株，花先于叶开放；雄花小，无柄，直径3~4mm；花萼具极短的筒及2镊合状萼片，膜质，卵圆形，长与宽近相等；雄蕊4，花丝短，包于萼片内，花药长卵形，中央有紫色带，两侧黄色；雄花具短柄，黄色，花萼筒短，2裂，裂片长椭圆形，长约3mm，包被子房，核果卵形或卵圆形，直径6~9mm，橘黄色，有强烈酸味；种子1，卵形，有黑褐色光泽，生于海拔1800~4000m的河漫滩，河谷低阶地和山坡。 【性状】沙棘果呈类球形或椭圆形，有的数个粘连，单个直径5～8mm。表面橙黄色或棕红色，皱缩，顶端有残存花柱，基部具短小果梗或果梗痕，果肉油润，质柔软；种子斜卵形，长约4mm，宽约2mm；表面褐色，有光泽，中间有１纵沟；种皮较硬，种仁乳白色，油性，气微，味酸、涩。 【药材鉴别】果皮表面观：果皮表皮细胞多角形，垂周壁稍厚，表皮上鳞毛较多，由100多个单细胞毛毗连而成，末端分离，单个细胞长80～220μm，直径约5μm，毛脱落后的疤痕由7～8个圆形细胞聚集而成，细胞壁稍厚。果肉薄壁细胞含多数橙红色或橙黄色颗粒状物，鲜黄色油滴甚多。 【定性】取沙棘果粉末1g，加乙醇10ml，加热回流10分钟，滤过。取滤液点于滤纸上，喷以三氯化铝试液，干后，置紫外光灯(365mm)下观察，显黄绿色荧光。另取滤液1ml，加镁粉少量及盐酸3～4滴，必要时置水浴上稍加热，显红色。 【性味】中医：性：温。味：酸、涩。 藏医：性：凉、锐、轻。味：酸。
提取黄酮
香茅草中黄酮类化合物提取工艺研究 摘要：香茅草作原料，乙醇浸提的方法浸提其中的黄酮类化合物并计算出其得率，首先进行黄酮类化合物的定性检验，观察提取液与显色剂的显色现象和黄酮类化合物的相吻合，就能确定该提取液中含有实验黄酮类化合物，然后通过多种单因素实验得出每种单因素的最好条件来设计正交实验，就能得到本实验所要提取的物质的一组最好的综合条件。参照芦丁标准品绘制出的线性回归方程，把得出的数据代入线性方程就能算出黄酮类化合物的量然后计算提取液中黄酮的得率，实验结果表明:最佳的乙醇的浓度是60%，最好的料液比是 1.5:35（g/mL），最适合的浸泡提取温度为70℃，最有效果的浸泡提取时间是1.0h。在这种条件下的黄酮的得率可达2.27%。 关键词：香茅草；提取；黄酮：正交试验
Study on the extraction process of Flavonoids from Cymbopogon Abstract：With Cymbopogon asrawmaterial,the flavonoids extracted with the use of ethanol extraction and calculate the rate. First, the qualitative test of flavonoids was observed and shows that the substance contains flavonoids, through the single factor experimentto get the best condition and orthogonal experiment to get the best integrated condition of extraction of flavonoids. With rutin as a standard for control,the yield of flavonoids in the extract was calculated. The experimental results show that, optimum conditions:The concentration of the best,was60%,the bestfeedliquidfor 1.5:35 (g/mL),The heat of the best is 70℃, and1.0h is the best soak extraction timer.In this case , the yield can reach 2.27%. Key words：Cymbopogon;extract; flavonoids; orthogonal test
大豆异黄酮片和大豆异黄酮的区别
大豆异黄酮片和大豆异黄酮的区别 目前，市面上的大豆异黄酮大概可分为大豆异黄酮片、大豆异黄酮软胶囊，很多消费者不知道该如何选择。由于大豆异黄酮的作用很多，所以补充大豆异黄酮的朋友也越来越多，那么倍受青睐的大豆异黄酮哪种最好呢？临床验证表明，大豆异黄酮片比大豆异黄酮软胶囊好！ 不建议大家选择大豆异黄酮胶囊的理由 第一，因为大豆异黄酮原料是粉状的，水溶性和脂溶性都不好，所以选择液态溶剂本身就不科学； 第二，软胶囊是用于保护易氧化、易发生变质药品或者保健品的，大豆异黄酮的稳定性很好，不容易氧化和变质，所以没有必要采取软胶囊包装； 第三，软胶囊的包装费用高于硬胶囊和片剂，所以软胶囊的成本高。不具有竞争力，如果软胶囊产品销售的很便宜，值得怀疑； 第四，目前市面上的大豆异黄酮软胶囊都不是透明的胶囊。或者粉色，或者灰色等等，为什么不透明（类似于鱼油那样的产品），就是因为透明了会暴露产品缺陷。所以不建议大家购买软胶囊，而且很多软胶囊产品的有效成分含量令人怀疑。大豆异黄酮还是硬胶囊和片剂比较好。如果胃肠道功能比较好的人，可以选择胶囊和片剂，如果胃肠道功能不好的人，最好是选择片剂产品。 力荐大豆异黄酮片的优势 1、玛丽安娜大豆异黄酮片，以东北绿色非转基因大豆提取的大豆异黄酮为主，每片含量高达50mg，添加进口胶原蛋白和其他维生素，效果更更显著，不摄入其他不明成分。 2、其他片剂、硬胶囊、软胶囊，有效成分含量低，每天需要服用2-3片（粒），每天服用成本升高。 3、其他片剂、硬胶囊、软胶囊，辅料都以淀粉和植物油为主，辅料品质鱼龙混杂，存在风险，每天服用2-3片，由于有效成分含量低，辅料的摄入量非常高，特别是过多摄入植物油对健康造成高风险。 4、其他硬胶囊、软胶囊，都含有明胶硬壳和软胶囊壳，品质有隐形风险，口感也欠佳。 5、玛丽安娜大豆异黄酮片，明确标示大豆异黄酮净含量最高为50mg，国内一些厂家模糊概念，标示为大豆异黄酮粉的添加量，而不是大豆异黄酮的净含量。国外品牌都标示明确的大豆异黄酮的净含量。 6、玛丽安娜大豆异黄酮片，净含量为最高，而每天服用成本很低，可以参考上表，其中大豆异黄酮每mg的单位成本是最低的，是市面上性价比最高的大豆异黄酮产品。 7、玛丽安娜大豆异黄酮片生产条件完全符合GMP国际质量标准，且全部在从德国、美国、瑞士进口的设备上完成，产品质量高保证。
黄酮显色
（一）还原反应 1、盐酸-镁粉（或锌粉）反应： 多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显橙红~紫红色，花色素及部分查耳酮、橙酮等在单纯浓盐酸酸性条件下颜色也会发生变化，故须先做空白对照。 A:样品的乙醇溶液1 mL，加少量镁粉/锌粉，加浓盐酸4-5滴，沸水浴2-3 min， B:样品乙醇溶液1 mL，加浓盐酸4-5滴，沸水浴2-3 min， A.B 均显红色，则有花色素（橙酮，查耳酮）。继续加碳酸试液，红色转变为紫色进而变为蓝色即证明含有花色素。 A红色或紫色（个别为淡黄色、橙色、紫色、蓝色） PS：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇橙红——紫红，少数显紫~蓝色，B环有-OH 或OCH3取代时，颜色随之加深。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。 2、四氢硼钠反应二氢黄酮(醇) 样品的乙醇溶液0.1 mL，加入0.1 mL2%四氢硼钠的甲醇液，1 min后加入数滴浓盐酸/浓硫酸，生成紫色或紫红色。二氢黄酮(醇)类专属反应，其他黄酮均不反应 二、与金属盐类试剂的络合反应 分子中具有3-羟基，4-羰基或5-羟基，4-羰基或邻二酚羟基 (1)三氯化铝显色 1%三氯化铝或硝酸铝，鲜黄色荧光 样品的乙醇溶液点于滤纸上（干后再点1次，浓度适中），干后，喷雾1%ALCL3乙醇溶液，紫外灯下观察，黄色、绿色、橙色均为黄酮类；天蓝色或者黄绿色为二氢黄酮。 4′━羟基黄酮醇或7， 4′━二羟基黄酮醇显天蓝色荧光 硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色. 它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的
雌激素药物
雌激素药物进入花样年华 2007-03-09 来源：中国医药经济信 息网 大 | 中 | 小 核心提示: 在我国，许多中老年人均有不同程度的骨质疏松，在男性中的发生率约占15%，而在女性中则远远高出这个比率，已达到了40%。这一点，随着老龄化社会加剧、妇女尤其是更年期妇女生活质量逐渐得到社会关注，日益受... 在我国，许多中老年人均有不同程度的骨质疏松，在男性中的发生率约占15%，而在 女性中则远远高出这个比率，已达到了40%。这一点，随着老龄化社会加剧、妇女尤其是更年期妇女生活质量逐渐得到社会关注，日益受到了重视。 更年期妇女随着更年期卵巢功能的渐近衰退以及生育功能的丧失，内分泌系统失衡， 多会出现轻重不同的综合征，骨质疏松症即是常见病之一，直接影响着这一群体的生活自 理和生存质量。 我国更年期妇女大约有1.2亿人，近两年，在生活水平提高和消费观念转变后，人们 对健康投资的比重不断上升，因此加快了更年期药物市场的增长速度，从而也推动了骨质 疏松药品市场的发展。2004年，国内骨质疏松药品的市场销售总规模约为50亿元，2005 年又比上一年增长了27.96%，达到了64.94亿元，预计2006年将突破75亿元的市场 规模。其中，雌激素及其受体调节剂在抗骨质疏松药市场所占的比重略小，约在3%~5% 左右。 新型仿性腺甾体激素、雌激素和选择性雌激素受体调节剂是这一类药物中的主要品种。 该类药可通过雌激素受体对骨骼的作用，增加绝经后妇女降钙素的分泌，促使维生素D3 的生成后抑制骨质吸收，已成为国外补充雌激素、防治骨质疏松症的有效途径。而国内这 一市场正处于起步阶段。临床应用的是结合雌激素、替勃龙、雷洛昔芬、他莫昔芬和依普 黄酮等，与此同时，也开发了一些植物雌激素、植物提取物药物，推动了这个市场的发展。
黄酮的理化性质
黄酮类化合物理化性质 不论在黄酮类化合物的提取分离方面还是在其结构测定的研究方面，黄酮类化合物的理化性质及其显色反应都发挥着谱学技术所替代不了的作用。下面仅就其与分离和结构测定密切相 关的性质进行简要介绍。 一、性状 黄酮类化合物多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末。游离的各种苷元母核中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有族光性外，其余则无光学活性。苷类由于在结构中引入糖的分子，故均有旋光性，且多为左旋。黄酮类化合物的颜色与分子中是否存在交叉共轭体系及助色团（－OH、－OCH3等）的种类、数目以及取代位置有关。以黄酮为例，其色原酮部分原本元色；但在2位上引入苯环后，即形成交叉共轭体系，并通过电子转移、重排，使共轭链延长，因而显现出颜色。一般情况下，黄酮、黄酮醇及其苷类多显灰黄～黄色，查耳酮为黄～橙黄色，而二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮类，因不具有交叉共轭体系或共轭链短，故不显色（二氢黄酮及二氢黄酮醇）或显微黄色（异黄酮）。显然，在上述黄酮、黄酮醇分子中，尤其在7位及4’位引入－OH及－OCH3等助色团后，则因促进电子移位、重排，而使化合物的颜色加深。但－OH、－OCH3，引入其他位置则影响较小。 花色素及其苷元的颜色随pH不同而改变，一般显红（ pH ＜ 7）、紫（ pH＝ 8．5）蓝（ pH ＞ 8．5）等颜色。 二、溶解性 黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷和苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异。一般游离苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醇等有机溶剂及稀碱水溶液中。其中黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，因分子与分子间排列紧密，分子间引力较大，故更难溶于水；而二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因系非平面性分子，故分子与分子间排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入，溶解度稍大。 至于花色苷元（花青素）类虽也为平面性结构，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲 水性较强，水中溶解度较大。 黄酮类苷元分子中引入羟基，将增加在水中的溶解度；而羟基经甲基化后，则增加在有机溶剂中的溶解度。例如，一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，故可与脂溶性杂质分开，但川陈皮素（5，6，7，8，3’，4’－六甲氧基黄酮）却可溶于石油醚。 黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水中溶解度即相应加大，而在有机溶剂中的溶解度则相应减小。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中；但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶 剂中。糖链越长，则水中溶解度越大。 另外，糖的结合位置不同，对苷的水中溶解度也有一定影响：以棉黄素（3，5，7，8，3’，4’－六羟基黄酮）为例，其3－O－葡萄糖苷的水中溶解度大于7－O－葡萄糖苷。 三、酸性与碱性 （一）酸性
黄酮实验报告
学院：化学化工学院 专业：生物工程 学生姓名：张文实 目录 摘要 (2)
1 绪论 (3) 2 实验原理 (3) 3 实验仪器和药品 (4) 3.1 实验仪器 (4) 3.2 实验药品 (4) 4 实验过程 (4) 4.1 侧柏叶中黄酮的提取及定性分析 (4) 4.2 侧柏黄酮洗发香波的配制及性能定 (6) 4.3 侧柏黄酮雪花膏的配制及性能测定 (7) 5 结果与讨论 (7) 5.1 侧柏叶中黄酮的含量 (7) 5.2 侧柏叶黄酮提取物的紫外—可见分析 (8) 5.3 洗发香波和雪花膏的性能测定 (9) 6 结论 (10) 参考文献 摘要
采用超声波法和索氏提取法从侧柏叶中提取黄酮类化合物。芦丁中也含有黄酮类化合物，根据不同溶度的黄铜提取液对应不同的吸光度，作出标准曲线，得出吸光度关于浓度的方程，然后再测得侧柏提取液的吸光度，根据方程计算黄酮类化合物的含量。黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用。去屑止痒的机理在于抑制头发表皮细胞蜕化的速度，延迟脱落，减少脂溢性皮肤病的产生。因此，广泛应用于洗发香波的制备中。同时它还有很好的美白效果，可添加到雪花膏中。 关键词：侧柏；黄酮类化合物；洗发香波；雪花膏 1 绪论
侧柏(Platycladus orientalis)系柏科侧柏属常绿乔木，别名扁柏、香柏、片柏、片松。喜生于湿润肥沃的山坡[1]，分布于全国大部分地区。现代医学研究证明，侧柏叶对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、宋内氏痢疾杆菌有明显的抑制作用，能缩短出血和凝血时间，对肺炎、痢疾、高血压等多种疾病有一定的疗效。侧柏叶的疗效作用主要是通过存在其中的黄酮类物质起作用的。 黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。最初，这类物质的粗制品仅作为染料应用，20世纪20年代，国外把槲皮素、芦丁用于临床后，才引起人们的关注。60年代末，人们发现黄酮类化合物有抗炎、抗病毒、利胆、强心、镇静和镇痛等作用。到70年代，又发现它们有抗氧化、抗衰老、免疫调节和抗肿瘤等作用。 此外，黄酮还有明显的美白功效，其美白功效的药理作用主要在于抑制酪氨酸酶的活性，从而抑制黑色素的合成。侧柏叶总黄酮作为美容护肤化妆品的添加剂，具有药性稳定，药力持久，对皮肤作用温和、刺激性小、安全性高、疗效显著等特点。将其制成水包油型的乳化产品，安全性好，使肌肤自然、美白亮泽[2]。且成本低廉，原料易得，又不会产生副作用，顺应了国际化妆品天然化、营养化、疗效化的发展趋势，具有广阔的市场前景。在雪花膏中加入侧柏叶提取液组分，与表面活性剂等配制成美白雪花膏，是一种兼具美白、保湿功效和调理性能的天然植物功能性雪花膏。同时，黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用[3]。广泛用于洗发香波的生产中。 2 实验原理
山楂药理与临床研究进展
综述 【基金项目】国家自然科学基金资助项目(30472161);江西省自然科学基金资助项目(0640163) 【收稿日期】2008-06-09;【修回日期】2008-11-03 【作者简介】江爱龙(1965-),男,籍贯江西省进贤县,本科,主管药师,主要从事药物分析工作。 【通讯作者】刘荣华(1964-),男,籍贯江西省永新县,副教授,博士,研究方向为中药活性物质基础及中药质量评价。E -mail : rhliu @1631com 。 山楂药理与临床研究进展 Pharmacology and clinical study on Crataegus L 江爱龙1,刘荣华2,陈兰英2,唐慧英2,邵 峰2,马志林 2 (11武警江西总队医院医学工程科,江西南昌330030;21江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西南昌 330004) 关键词:山楂;药理作用;临床研究;不良反应 【文章编号】 100825041(2009)022******* 【中图分类号】 R73513 【文献标识码】 B 山楂(Crataegus L 1)为蔷薇科(R osaceae )山楂属植物,落叶稀半常绿灌木或小乔木,全球大约有250种[1]。主要分布于北温带大约在北纬30度到50度之间的东亚、欧洲和北美洲等地[2]。我国约有16种,其中山里红Crataegus pin 2 natifida Bge var 1major N 1E 1Br 1、山楂Crataegus pinnatifida Bge 及野山楂Crataegus cuneata S ieb 1&Zucc 1最为常见。前两种习称“北山楂”,后者习称“南山楂”。此外,尚的云南山楂(Crataegus scabrifolia (Franch 1)Rehd 1)、湖北山楂(Cra 2 taegus hupehensis Sarg 1)和辽宁山楂(Crataegus sanguinea Pall 1)等果实均作药用。山楂性温,味酸、甘,归脾、胃、 肝经,具有消食化积、活血化瘀之功效,临床用于食滞不化及产后瘀阻腹痛[3]。近年来临床也常用于心衰、冠心病及高脂血症等疾病的治疗。目前国内外对山楂果、叶、花及根等进行了广泛研究,在其药理作用、临床应用及不良反应等各方面都取得了可喜的成果。 1 药理作用与临床应用111 对心血管系统的作用 11111 抗心肌缺血及再灌注损伤:(1)山楂叶总黄酮及低 聚花青素对心肌缺血具有保护作用,能对抗异丙肾上腺素所致的大鼠急性心肌缺血,缩小心肌梗塞范围。可能是由于黄酮降低血压,减慢心率和提高心肌代谢所致,在实验所用剂量条件下,山楂聚合黄酮与羟乙基芦丁有与心得安 相似的抗心肌梗塞作用,但作用强度稍逊于心得安[4]。(2)山楂叶总黄酮对缺血缺氧损伤后心肌细胞具有明显的保护。山楂叶总黄酮能减轻缺血缺氧损伤后心肌细胞心率失常的程度,推迟心肌细胞的停搏时间,减少心肌细胞LDH 的释放量,降低M DA 含量并提高细胞内S OD 酶的活力和NO 的含量[5]。另外,研究发现山楂提取物原花青素可能依赖内皮素,通过NO 的介导而使离体大鼠的主动脉舒张,也可能通过激活四乙胺敏感的K +通道所致[6]。(3)锐刺山楂根、叶和花的甘油2乙醇提取物,甘油2水提取物和水2乙醇提取物能影响离体灌流兔心的心率,收缩力和冠脉流量,而其中幼根的甘油2乙醇提取物活性最强,并具有正性肌力作用和增加冠状动脉循环[7]。随着心脏缺血时间延长,乳酸脱氢酶LDH 的活性将增加,锐刺山楂能明显减少离体大鼠心脏缺血再灌过程释放的乳酸脱氢酶LDH 的释放,可能是由于山楂对心肌细胞膜保护并减少心肌损伤作用所致[8]。研究不同剂量的北山楂水煎醇沉液对家兔急性心肌缺血的保护作用,结果表明,北山楂对S 2T 段增幅、心率、Q 2T 期间延长等均具有明显的改善作用[9]。 11112 抗冠心病、心绞痛:利用山楂黄酮类化合物治疗冠 心病、心绞痛219例,结果表明其具有改善冠脉供血,改善心肌代谢,抗心律失常,改善微循环等作用[10]。另有报道用益心酮(山楂提取物)随机双盲疗法治疗48例冠心病、心绞痛患者,症状总有效率为84%,心电图改善有效率为60%[11]。 11113 增加冠脉流量:犬口服山楂提取物原花色素低聚物 后,心肌血流量呈剂量依赖性增加并能维持数小时,如果口服几天后,心肌血流量将持续增加直到最大值,同样静脉注射山楂提取物给麻醉猫,也引起心肌血流量呈剂量依赖性增加,5min 后达最大值,可能由于冠状血管舒张引起心肌血流量增加[12]。
植物黄酮类物质基因工程
植物黄酮类物质基因工程应用研究进展 摘要：黄酮类次生代谢产物基因工程是指通过基因工程的手段有目的地修饰一 个物种中某一代谢途径，或引入一新的代谢途径，以达到提高或降低黄酮类代谢产物的合成水平，或使被修饰物种产生某种新的次生代谢产物的操作。黄酮类次生代谢物的基因工程包括基因添加，基因剔除，基因的协同转化，调控因子等在代谢途径上的调控。 关键字：黄酮类物质基因工程进展 Abstract Flavonoid secondary metabolites by genetic engineering, genetic engineering is a means of purposeful modification of a metabolic pathway in a species, or introduce a new metabolic pathways to achieve the increase or decrease the synthesis of flavonoid metabolite levels, or to some new species have been modified secondary metabolites operation. Secondary metabolites of flavonoids, including genetic engineering, gene added, gene knockout, gene co transformation, and other regulatory factors on the regulation of the metabolic pathways. Keywords: Flavonoids Advances in genetic engineering. 1.引言 黄酮类物质，是一类在植物界广泛存在的低分子量的多酚类次生代谢产物，从苔藓植物到被子植物都含有这类物质。在自然界中，类黄酮与许多的功能都有关，类黄酮物质是花，果实和种子颜色的主要显色物质，能够保护植物抵御紫外线和防止病源微生物侵袭，能够提高农作物产量，调节植物生长素的运输，在植物和细菌的相互作用中作为信号分子，促进花粉萌发并且和花粉的育性直接相关。同时，黄酮类化合物是一类生物活性很强的化合物，是一种天然的抗氧化剂，具有降低心肌耗氧量、防治血管硬化等作用，具有抗衰老、增强机体免疫力、抗癌防癌的功效[1]。在医药、食品等领域具有广阔的应用前景。在植物次生代谢中，类黄酮的生物合成是目前研究最为深入的次生代谢途径。 植物类黄酮生物合成途径主要由两类基因控制：结构基因和调节基因。其中，结构基因直接编码与类黄酮次生代谢生物合成有关的各种酶类，而调节基因则是控制结构基因表达强度和表达方式的一类基因。目前与类黄酮生物合成的主要结构基因和调节基因在多种植物中被克隆，主要结构基因编码的酶的生化作用机制也已被阐明[2]。尽管已有学者利用转基因技术，将控制类黄酮次生代谢的关键酶基因或其反义序列导入植物，通过促进或抑制该基因的表达，改变了类黄酮次生代谢途径，然而植物类黄酮生物合成途径是非常复杂的，涉及到的酶种类繁多，有时并不是一两个关键酶所能控制。通过转录因子作用，有可能激活类黄酮次生代谢途径中多个结构基因的表达，达到的效果将比导入某个结构基因的作用更明显。例如，黄酮醇的形成需要CHS，CHL F3H和FLS等基因的表达，要提高植物中该物质的含量，通过导入某个酶基因是很难实现的，Bovy[3]等(2002)在番茄果肉中表达玉米转录因子基因Lc和CJ，结果与黄酮醇相关酶基因的表达含量显著提高，同时在转基因番茄果肉中，黄酮醇含量大概是对照的20倍。 2.黄酮类生物合成途径 2.1 生物合成基因 黄酮类化合物是一种小分子酚类物质，广泛存在于植物界，具有多种生物功能，如：调节
黄酮含量的测定方法
黄酮含量的测定方法 1、对照法 1） ①对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙 醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。 ②样品溶液制备 精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。 ③标准曲线的制备 精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml 置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。 2） ①样品溶液的制备： 分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。 ③标准曲线的制定： 精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。 ④含量测定结果： 分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。 计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。 注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。