绿藻
绿藻
1、绿藻为浮游生物的一种，即浮于淡水中的无运动性之单细胞植物。换句话说：一个细胞形成一个个体。主要分布于热带和寒带，可以从湖、池、沼等采取，其形状是球状或椭圆形，其大小又依发育的阶段或种而略微不同，直径约一千分之二至一千分之十mm，也可以说，比人的红血球稍微小的个体。
2、绿藻的表面是没有鞭毛的生活阶段，完全以无性生殖。
3、绿藻的叶绿素很多，而光合作用(绿色植物仰赖阳光又配合水分和二氧化碳来合成糖的作用)也比其他植物高，约为数十倍。
4、绿藻以四分裂形式繁殖，分裂时间为20-24小时。不仅是核，甚至叶绿体也四分五裂，这样能产生更多的叶绿精。
绿藻是无农药、无化肥的活性有机绿色食品，能制造我们身体所需要的氧气，含有绿藻精、60%蛋白质、18种氨基酸、16种维生素(含B12)、11种矿物质、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素、碳水化合物、核酸、酵素、胡萝卜素、纤维、奥米加3脂肪酸、糖蛋白、核蛋白、核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)、多种植物荷尔蒙。
绿藻的蛋白质是牛肉的2倍，鸡肉的3倍、鸡蛋的6倍、鲜牛奶的10倍；铁质含量是葡萄的50倍，猪肝的16倍；钙质的含量是牛奶的2.5倍；VA含量是葡萄干的4倍；胡萝卜素是一般植物的100倍；碱性是菠菜的37倍；叶绿素是一般植物的10倍；螺旋藻的3倍；含有比鹅肝更高的B12。
5、利用水和光合作用来培养绿藻，再以绿藻来饲养水蚤(别名微粒子)。水蚤又可饲养Piranha(南美产的小鱼，种类多)，然后利用这种小鱼来饲养鸡，鸡生蛋，人吃蛋。形成良性循环。
6、啤酒酵母在无盐分的环境中发育很好，若添加食盐，则会严重的妨碍这种酵母的发育，但是如果添加了绿藻精，却很微妙的可以去除食盐的妨碍。
即绿藻精能解除高浓度食盐所引起的精神紧张状态。(人的血液中有食盐，对人体健康有效的药剂必须在食盐中发挥其效能状态，而绿藻精在食盐环境中即可发挥其作用)。
7、绿藻的效果：
①将酸性体质改变为弱碱(盐)性体质；使细胞作用活泼；绿藻精使细胞的新陈代谢旺盛。故胃溃疡、糖尿病、香港脚、痛风、情绪不稳会很快消失。
②绿藻精会使专门食细菌和过滤性病毒的网内系细胞之作用旺盛(使其抵抗力加强)，能强化抵抗癌的效果。
③绿藻细胞含有‘酸性多醣体’，可引起体内产生干扰素。干扰素会刺激身体免疫系统，大大增加体内吞噬细胞，吞掉入侵之细菌和病毒，防止疾病产生。
④绿藻具有解毒作用，核苷酸能强化红血球。在镉和ABC中毒的解毒上很有效。
⑤降低血液的胆固醇，加强造血作用，故有益于贫血者。
⑥使肝脏、肾脏机能良好；脂肪代谢作用正常化。
⑦绿藻还有丰富飞奥米加三脂肪酸，是血管、防治血管硬化的‘清道夫’。
⑧绿藻含叶黄素，可防止眼内叶黄素提前老化而损害视力。
⑨绿藻精能使肠内的乳酸菌、双歧杆菌成4倍生长，促进肠内的环境健康。每100g绿藻含4g绿藻精，能提高正常细胞再生能力达25%以上。
⑩绿藻的光合作用能力比一般植物强数十倍，有利于预防感冒和增强精力。
二、医学上有关体质的说明：
1、有体质有关的是电解质，尤其是钾离子。电解质功用：
①水分的出入以及水分的体内分布。②渗透压的维持和平衡。③维持正常肌肉
的被刺激性。④维持身体内的酸碱平衡。(维持一定的PH值)，阴离子和阳离子维持平衡关系。
2、酸血症：依体内血液中的氢离子浓度(H+)的多寡来决定。1公升的血液中，氢离子有0.0000001公克时，相当于PH=7，是中性，超过7为碱性，7以下为酸性。血液的PH正常值：7.2-7.4。生病范围：7.0-7.2，超过这个范围，则无法维持生命，身体能维持生存的氢离子浓度7.0-7.8。健康:7.35-7.45，此为弱碱性状态。若低于7.35，则为酸血症。反之，若大于7.45则为碱血症。
3、酸性体质状态：
细胞中钾离子减少；蛋白质减少；钾离子和蛋白质比例不协调；细胞中氢离子(H+)增加；细胞中的(SO4—) (PO4—)异常。
导致酸性体质原因：
A三餐以肉食(酸性食品)为主，而蔬菜类(弱碱性食品)摄入量少。
B生活规律混乱，有夜生活者。
C精神生活紧张、时时刻刻充满压迫感，肉体上的疲倦。
4、人体控制内脏的自律神经有两种：一种是让血管收缩，提高血压，让血液集中的交感神经，如同汽车的加速结构。另一种是要让身体的紧张松弛的副交感神经，如同汽车的刹车结构。白天由交感神经支配，晚上由副交感神经支配。副交感神经是人睡眠或消化食物时发生作用的神经，若过分使用则会发生胃溃疡、便秘、支气管哮喘等。
5、精神紧张和压迫感使细胞内的蛋白质和钾离子容易排泄于尿中而减少，使身体异常。如果发生在脑细胞，则会造成精神异常、性格变化；在心脏心肌细胞则会使心脏活动受影响；在肝脏，则使肝脏机能下降。
6、人受到精神紧张和压迫时，会由副肾皮质的细胞分泌荷尔蒙来调整。若副肾皮质的细胞缺钾和蛋白质时，则荷尔蒙的分泌也会异常。例如：手术后，尿液减少，此时由副肾皮质的细胞来调整，将水分留在体内。手术后第三、四天发挥最大。
人体水分之40-50%在细胞内(血液是全水分的5%)，由于精神紧张和受到压迫感，细胞中的钾和氮会由尿中排出。适应紧张和压迫而副肾发生作用，使尿液减少(换句话说，要留住水分，此作用为防止钾和氮减少的一种防御力量)。
对人体动手术产生的紧张、压迫愈大，则愈使副肾的调整机能忙碌，超过调整机
能时，人体会受到很大影响。
7、绿藻是碱性食物的代表
蓄积太阳能比率：米0.1% 牛奶0.04% 猪肉0.015% 绿藻3.5%。
8、人的血液之祖先是叶绿素。
人的血液成分最重要的是红血球，组成成分为血红素，能从肺吸收氧气而供应于身体各个角落。血红素和叶绿素的构造相同。只有中心的元素不同，血红素是铁，叶绿素是镁。
绿藻是很有用的线粒体，线粒体是存在于细胞中，能产生能量的一种小器官。其作用：
①促进细胞中的线粒体形成和再生，使能量的生产更顺利。吸收太阳能效果好.
②把钾采取到细胞内来，而且能留存。
③把蛋白质采取到细胞内正常作用(使蛋白质的代谢作用圆滑)
④维持身体PH值。
9、绿藻含有很多叶绿素/清除自由基。
绿藻含丰富SOD(抗氧化剂)，清除自由基，保护细胞DNA不因自由基氧化而受损。
藻类的分离和培养
藻类的分离和培养 微型藻类的分离和培养方法基本上与菌类的方法相似，但还需加上光照条件，并以液体培养为主。在大量培养时，可不必考虑无菌条件。 一、目的 学习藻类的分离和培养方法 二、药品、材料和用具 水生生物培养槽，玻璃片（面积稍大于培养槽），橡皮管，显微镜，三角烧瓶，试管，筛绢，棉塞，微吸管，凹玻片，灭菌锅，载玻片，吸管，培养皿，人工光源，木盆（或小型实验池），充二氧化碳气钢瓶，抽气泵，离心机。 土壤抽出液，青霉素，链霉素，琼脂，硝酸钙，磷酸二氢钾，磷酸氢二钾，过磷酸钙，硫酸镁，氯化钾，碳酸钠，三氯化铁，硅酸钠，葡萄糖，蛋白胨，硫酸铵，硝酸铵，氯化钙，碳酸氢钠，钼酸，氯化钠，柠檬酸铁，硫酸锰，人尿，海泥抽出液，食盐。 三、操作 生长在静水或水流缓慢河流中的藻类，培养比较容易。取到实验室后，要立刻从材料瓶中移到宽大的水生生物培养槽内。为了培养大的丝状藻，要利用宽的、不高的容器。这些容器要用玻片盖住，以防止培养物受灰尘沾污。倒入容器的水要达到容器高度的一半，或稍多些，使水面上还有充分空气。在容器边缘，要用一小块纵切橡皮管垫住，可使玻片不致紧贴容器，空气才能进入容器中。细微的藻类如团藻目、硅藻门能很好地生活于培养皿中。很多藻类如颤藻属、水绵属的若干种、轮藻属等可在实验室中保存很多年。 在迅速流动水中生长的藻如丝藻属、毛枝藻属等比较难于培养，因为它们要求经常输入氧气。在水层较高水中，在高容器中，这些藻类迅速地死亡。为了把这些藻类保存到实验时，应当把它们分成一些小部分，放在水层较薄的、宽的容器内，并须常常换水，把空气吹入水中。还可以用橡皮管把水生生物培养槽和水龙头连结起来，建立有流水的水生生物培养槽。 在水生生物培养槽中培养藻类时，应尽可能创造和保持藻类天然生存条件。把藻类培养在从采集藻类那一水域取来的水中，或其他天然水（尤其不能用自来水，因其中含很多氯气，必要的话，也须置较长时间，或加以煮开），或在水中加入混合养料，这些养料是由制造有机物质所必需的矿质盐构成。
(完整版)实验3藻类培养2014.111.10
实验3淡水藻类植物的采集和培养 一、实验目的 1 藻类植物的分布很广，种类也很多，学生通过对淡水生藻类植物进行调查、采集和培养，可以增加学生藻类植物工作的经验，培养学生参加科研工作的积极性，提高学生科研工作的能力。 2 学生在课前必须大量阅读与藻类植物相关的知识，特别是淡水藻类的一些知识。 二、实验原理 藻类植物是自然界中非常重要的一大类生物类群，它们不仅是用于科学研究的良好材料，在医药、食品、精细化工、环境保护、水产养殖等方面都有着广泛的应用。研究观察藻类不但有一定的理论意义，也具有重要的应用价值。淡水藻类以其生长环境不同可分成两类：一类是水生藻类；一类是气生藻类。 三、实验材料、试剂与仪器设备 显微镜、显微图像采集系统、采集瓶、培养瓶、吸管、镊子、刀、标签、记录本、浮游生物网等，相关工具书；4％的甲醛溶液、碘液 四、实验步骤 1 淡水藻类标本的采集方法 (1) 水生藻类标本的采集 水生藻类依其形体大小可分为丝状种类和微小浮游种类。丝状种类可用镊子采集。对固着于石块等物体上的藻可用刮刀将藻从基部刮下或连同附着物一起采集。将采集到的标本放入标本瓶中并加入一些水，但水不要加得太满，应留有一定的空间，标本瓶盖应注意密封，防止样品流失。标本瓶上要贴上标签，标签上须用铅笔注明该标本采集的地点、日期和采集者。 浮游种类要用专用的浮游生物网采集，如无专用工具，也可用市售的300目尼龙筛绢对水体进行过滤，滤出的藻体可用少量水冲洗入标本瓶中。 标本采集时还应用记录本记下各标本的采集环境、气温、水温、pH值、藻的附着基质、水体透明状况、藻体的手感是否滑腻等，这些都是鉴定藻类的参考条件。因此应注意详细记录。 新鲜的藻标本不宜久存，应尽快对标本进行观察鉴定，好的标本可用4％的甲醛溶液（福尔马林溶液）固定保存。 (2) 气生藻标本的采集 气生藻类多生长在阴湿的地面、墙壁以及树干的背荫面。这类藻可用小铲刀采集，用牛皮纸包好，风干后保存。对气生藻进行观察时，可用镊子镊取少许藻体，放在载玻片上，滴一小滴水浸润后在显微镜下观察形态。 2 几种常见藻类的采集、观察和保存 (1) 水绵在春秋季较清洁的水体中较常见，用手指捻摸有滑腻感，在显微镜下观察藻丝无分枝，叶绿体呈典型的螺旋带状，如在样品上加一点碘液（或碘酒）可见排列于叶绿体上的淀粉颗粒染成深褐色。鞘藻和刚毛藻也是很常见的丝状绿藻，与水绵不同的是这两种藻多生长于污染水体中。鞘藻不分枝但手摸无滑
藻类的培养
一、藻种的两种培养类型 一般藻种的培养有两种方式：一种是长期保存所需要的培养方法，一种是以实验为目的，短期内保藏藻种的培养方法。 长期培养最主要的问题是选择一种合适的培养基，可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。最适合长期培养藻种的培养基是agar（固体琼脂培养基），但是使用agar有一个弊端，即培养物保持无菌的问题；我们可以加一层蒸馏水（咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水）在agar上，这种做法可以保证在长期保种的过程中减少agar水分和营养的流失。长期保种使用的培养基，不要选择营养过于丰富的，因为多数的藻，尤其是丝状藻，在营养丰富的环境生长，会发生形态结构上的变化，如果要做生理生态方面研究，实验材料的形态结构是不能异常的。 适合长期保种的贫营养的培养基有这些：Bold’s基础培养基，以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的agar，适合长期培养绿藻；Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻；土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。对于我库提供的藻种，由于藻种长期习惯的原因，建议使用我们提供的原配方来培养，在长期培养的时候，可以适当稀释原培养基，在藻种培养过程中，生长速率会变慢，可以保持其形态结构不变。 另外，长期培养的时候，除了选择适当的培养基，还可以降低温度5～8C（降温的过程最好能循序渐进，突然改变环境温度，可能会导致藻种不适应而死亡）。光照强度可以减小为原先的一半。在实验之前3到4周，将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基中（培养基必须灭菌），按照我们给予的培养条件培养，在实验前6天左右，再次接种。 短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。由于试验的需要，常常要求在短期时间内获得大量的培养物，我们可以采用通气培养和摇床培养。通气培养可以通CO2或洁净的空气，视培养物的多少来决定通气泵的大小，在通气的硅胶管中设置一个缓冲瓶，塞上灭菌后的脱脂棉，帮助净化空气，如果对通气有更高的要求，可以在通气管中加上一层滤膜。使用摇床培养，需要注意藻种的生理周期。 二、培养基的选择和配制 1、培养基的选择 ①BG11是我库培养蓝藻使用最广泛的培养基。除了极少部分蓝藻，大部分都使用BG11。按照我们给的配方配制好后 高压灭菌，BG11经常会产生絮状沉淀。这是因为其中有Ca+和CO32???-,我们可以在灭菌后再超净台上用灭菌过的注射器来加两者之中的另外一种。通常我们建议将氯化钙的母液单独灭菌后在无菌室保存，在配置好BG11的工作液并灭菌之后，在超净台上用注射器将氯华钙加入。 ②SE是我库用来培养常见的绿藻所使用的培养基。一般来说，如果配制了母液，用母液来配培养基，灭菌后是不会产生 沉淀的。配置的时候注意先将所需要的蒸馏水准备好，将需要的药品逐个加入，等到一种药品充分溶解之后再加入第二种。 另外，土水在蒸馏过滤后，是不需要灭菌的，因为高压灭菌的过程会让其中的一些营养成分损失。 ③水是培养基成分中很重要的一个方面。配培养基，可以取蒸馏水、自来水、去离子水，也可以取藻种采集地的水。使
藻类培养与利用研究进展
Journal of Water Resources Research水资源研究, 2013, 2, 76-83 doi:10.12677/jwrr.2013.21012 Published Online February 2013 (https://www.360docs.net/doc/539908371.html,/journal/jwrr.html) Research Progress of Algae Cultivation and Utilization* Buhui Chang, Lan Li, Lei Yao School of Water Resources and Hydropower Engineering, Wuhan University, Wuhan Email: changbuhui@https://www.360docs.net/doc/539908371.html, Received: Dec. 7th, 2012; revised: Dec. 24th, 2012; accepted: Dec. 29th, 2012 Abstract: More than half a century, with the development of various of biological cultivation system, people have done a lot of improvements and structural innovation around the process of using the bioreactor to optimize the environments of biological reaction processes. There are also have a lot of breakthroughs in the development of special reactors on the basis of the existing reactor structure. This article mainly focuses on the structure and the advantages and disadvantages of the closed and open cultivation system at home and abroad, meanwhile, achieve the cultivation of bio-energy biomass. Summarized the utilization of algae, provided the necessary reference for the future realization of the ecological chain cycle, waste water, waste gas-algae absorption and utilization-algae reuse. Keywords: Closed Algae Cultivating System; Open Algae Cultivating System; Algae Utilization 藻类培养与利用研究进展* 常布辉，李兰，姚磊 武汉大学水利水电学院，武汉 Email: changbuhui@https://www.360docs.net/doc/539908371.html, 收稿日期：2012年12月7日；修回日期：2012年12月24日；录用日期：2012年12月29日 摘要：半个多世纪以来，随着各类生物培养系统的发展，人们紧紧围绕着生物反应器为生物过程提供最优化反应环境而对其进行了大量的改进和结构上的创新，在现有反应器结构基础上开发特殊的反应器也取得了一定的突破。本文重点介绍了国内外密闭式与开放式培育系统的结构与优缺点，同时实现生物能源生物质的培育。对藻类利用进行了总结，为将来实现以废水、废气–藻类吸收利用–藻类再利用为循环的生态链条的实现提供必要的参考。 关键词：密闭式藻类培育系统；开放式藻类培育系统；藻类利用 1. 前言 随着社会经济与科技的发展、人口的增加、资源的枯竭、环境与气候的恶化，人类社会面临着前所未有的难题——资源、能源、人口、环境、土地等的压力日益加剧。为了满足日益增长的各方面的需求，人们加大了在能源、食物等方面的研究。藻类以其独特的生态特征和生活习性成为了研究的热点，人们针对其不同的用途进行了大量的研究，并取得了丰富的成果。 藻类分布的范围非常广，生长繁殖快，对环境的要求不严，适应性极强。从热带到两极，从积雪的高山到温热的泉水，从潮湿的地面到不很深的土壤内，几乎到处都有藻类分布。另外藻类中含有大量的蛋白质、油脂、糖类、色素以及各种维生素等，具有很大的应用前景。 *基金项目：水利部“948”项目：日本碳素纤维生态草河湖直接净化技术的引进及研发(编号：201112)。 作者简介：常布辉(1986-)，男，硕士研究生，研究方向：水资源水环境。
藻类的实验室培养
微藻的实验室培养 学生：林晓生学号：2120180414导师：杨缜教授 一、藻类的概述 藻类是原生生物界一类真核生物(有些也为原核生物，如蓝藻门的藻类）。主要水生，无维管束，能进行光合作用。藻类植物共约为2100属,27000种。根据所含色素、细胞构造、生殖方法和生殖器官构造的不同，分为绿藻门、裸藻门、轮藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、甲藻门、蓝藻门、褐藻门和红藻门。色素的颜色划分，藻可分为3类：绿藻、褐藻和红藻。 由于单胞藻具有利用太阳光能效率高、营养丰富、生长繁殖迅速、对环境的适应性强和容易培养等重要特性，因而受到重视。微藻是一类在陆地、海洋分布广泛，营养丰富、光合利用度高的自养植物，细胞代谢产生的多糖、蛋白质、色素等，使其在食品、医药、基因工程、液体燃料等领域具有很好的开发前景。 二、微藻的营养模式和生长模式 （二）、微藻的生长模式 藻类在培养过程中，生长繁殖的速度，出现一定的起伏，这种生长模式可划分为五个时期（延缓期、指数生长期、相对生长下降期、静止期、死亡期）。
三、培养按培养的场所分室内培养和室外培养 1）按培养基的形态分固体培养和液体培养 2）按培养的纯度分纯种培养和单种培养3）按藻液的流动情况分静止培养和循环流动水培养 4）按气体交换情况分充气培养和不充气培养 5）按藻液与外界接触程度分封闭式培养和开放式培养6）按培养规模和目的分小型培养、中继培养和大量培养方式 简单介绍其中的四种方式： （1）纯培养和单种培养 纯培养（axenic culture）：是无菌培养，指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。纯培养操作要求十分严格，要求有无菌室、超净台等设备，容器、工具、培养液等均须彻底灭菌。培养成功率很高，是进行科学研究不可缺少的技术。 单种培养（single-species culture）：指区别于纯培养的不排除细菌存在的培养（可以是生产性的，也可以是非生产性的） （2）封闭式培养和开放式培养 封闭式培养（closed culture）：指把培养液密封在透明的容器中，与外界空气隔离，暴露在阳光中，CO2完全采用人工供给的方法。各种反应器等 开放式培养：指把藻类培养在开敞容器中，如广口玻璃瓶、水族箱、玻璃钢水槽、水泥池等。 （3）小型培养、中继培养和大量培养封闭式塑料薄膜袋培养，方法简单，成本低、培养的藻细胞密度大，不易污染且生产周期短，效果很好。
绿藻栅藻培养
绿藻栅藻培养 藻类，特别是单细胞藻类的营养丰富，含有动物和人生长发育所必需的营养物质。自上世纪四十年代以来,各国学者都试图用藻类这一资源解决人类食物和动物饵料的缺乏问题。另一方面，藻类可直接或间接的作为鱼类及其他水生动物的饵料。 1 藻类的培养方式 藻类的培养方式，以藻类培养的目的要求而各种各样。但可分为密闭式培养和开放式培养两大类。 1.1密闭式培养 密闭式培养的目的是不使外界杂藻、菌类及其他有机体混入培养物中。将培养液密封在与外界完全隔离的透明容器中，由此通气，搅拌，输送培养液及调节水温和取样等设备，也都要与外界隔离。培养容器多为管状，也有池状，用有机玻璃或透明的聚乙烯所料做成水平管道，直立或斜立在地上，暴露阳光或人工光照下。这种培养方式，成本高，好控制，产量亦稳定。 1.2开放式培养 将藻类培养于敞开的容器(如水泥池、管道、木盆等)中。方法设备较简便，可进行小量或大面积的培养。该法培养物中易发生敌害生物污染，但成本低，使用较普遍，也是今后藻类培养所应采取的方式。开放式可分如下几种类型： (1) 开放循环培养：其特点式培养液借助循环水泵而不断循环流动。培养物能循环，就可省却搅拌工作。 (2) 开放非循环培养：其特点是培养液不循环流动，而定时由小管通入CO2和空气到培养液中；同时也起搅拌作用。此法在大面积培养中使用较普遍。优点是设备简单，无需动力，水泵及大量的CO2及通气设备。 (3) 半开放循环培养：半开放培养是指培养容器或池，槽等场所虽仍敞开，但有些部分密闭，或用塑料布覆盖。这种培养方式，利用管道，依靠动力，使培
养液流动和通入含二氧化碳的空气。该方式设备复杂，但效果较好。 2 藻种的分离 为了要进行某种藻类的科学研究活大量培养，有必要把某种藻类与其他生物分离。分离培养藻种，可分为两大类，一为单种培养，即藻类虽只有一种，但还混杂细菌。另一为纯培养，即不仅藻类只有一种，亦无其它任何生物。纯培养比较困难，一般的分离培养往往只能做到单种培养。 主要根据培养的目的要求，及某一种类的生物学特征。藻类的分离主要有以下几种常用方法。 2.1 离心法 将混合液用离心机离心，水中不同藻体及细菌就以不同的速度下沉，因此得以分开。这样将不同时间下从导管底的藻体取出，经镜检选定某种藻类最多的沉积物，再加清水，继续离心，如此反复就可得到比较单纯的藻体，在接种相应培养液中培养。该法可消除细菌，并增加纯粹分离的可能性，至少可作为藻种平板培养的准备工作。另外，在水液中藻体含量较少时，可用此法集中藻体。但此法不能做到使不同藻类完全分离。 2.2 稀释法 该方法用已消毒试管5只，在第一管盛蒸馏水10mL，第2～5管都装5mL，用高压蒸汽消毒，待冷却后，第1管用滴管滴入混合藻液1～2滴，充分振荡，使均匀稀释。每次用消毒吸管，从第1管中吸取5mL滴入第二管中如前振荡，使均匀稀释。以后依次同样滴入第3～5 管，并都充分均匀稀释。然后把五个已盛又消毒的琼胶培养基培养皿，加热使之溶解，待冷却而尚未凝固时，分别滴入五个试管的藻液各一滴，用力振荡，使藻液充分混乳培养基中。待冷凝后，把五个培养皿放在受着漫射光窗口，一直到出现藻群时为止，在20℃左右时，约10天即出现藻群。用消过毒的白金丝取些藻群，进行琼胶固体培养基的不通气培养。此过程反复多次，直至得到完全分离的纯藻种群为止。此法稀释要使用较多容器分组培养，比较麻烦，但较易成功。
藻类的实验室培养方法优化-1
藻类的实验室培养方法优化
第1章绪论 1.1 研究背景及目的 由于水体富营养化加重，河流、湖泊（水库）中火量藻类繁殖，直接影响了人们的饮用水安全。为了有效控制藻类的生长，对藻类的研究是非常必要的。众所周知，富足的氮、憐等营养物质，缓慢的水流速度，适宜的气候条件包括水湿、光照等是特定优势藻生长繁衍所必需的环境条件。目前人们对于富营养化水体中藻类的研究主要集中在温度、光照、营养盐水平下的藻类生长，并且找出了藻类生长与温度、光照、营养盐等之间的对应关系。但是水体中浮游生物的种群交替和生物量的变化，不仅与水体的温度、光照周期、营养物质及生物自身的生理状态相关，还受到水体流动的影响。 本实验分别以实验室培养铜绿微囊藻为实验对象，参照藻类生长的最适宜环境条件，在温度、光照、pH值及营养盐条件一定的条件下，研究影响藻类生长的规律，为生态调水、生态河道设计流速的确定提供理论依据，控制或减少水体富营养化现象的发生。 1.2 藻种的分类 藻类植物并不是一个单一的种群，它的分布范围极广，对环境条件要求不严，适应性较强。有些种类的水藻在极低的营养浓度、极微弱的光照强度和相当低的温度下也能生活。不同研究系统对藻类的分类方法各不相同，常用的分类系统，如，根据藻类的结构特征和藻细胞的生理生化特点，将藻类分为蓝藻门、硅藻门、黄藻门、绿藻门等共十一门，引起水体富营养化的藻类植物主要为蓝藻门和绿藻门；根据藻类在水中生长的位置，将藻类分为浮游藻类、飘浮藻类和底栖藻类。硅藻门、甲藻门和绿藻门的单细胞种类以及蓝藻门的一些丝状的种类浮游生长在海洋、江河、湖泊，称为浮游藻类。一下简要说明蓝藻和绿藻的种类、分布、形态和繁殖特征。引起水体富营养化的藻类植物主要为蓝藻门和绿藻门。 1.2.1 蓝藻 在中国，蓝藻是有毒有害性最强、分布范围最为广泛的一类淡水藻。有毒的蓝藻藻种有：铜绿微囊藻，泡沫节球藻，水华鱼腥藻，阿氏颤藻，水华束丝藻等。蓝藻是广适性藻类，分布十分广泛。蓝藻的主要生存环境为淡水和海洋，它们能在 咸水、咸淡水、淡水、冰冷和沸腾的泉水中生存，但大多数生活在淡水，少数生活在海洋。蓝藻的抗逆性很强，能在其它藻类无法生存的环境中繁衍。例如，有些蓝藻能在60-85℃的温泉中生长繁殖；有的在54℃条件下还能生长、固氮；有的可-35℃的低温（如地木耳）；有一些在过饱和盐水中也可生长。蓝藻还具有
藻种培养方法
藻种培养方法 一、藻种的两种培养类型 一般来说藻种的培养有两种方式：一种是长期保存所需要的培养方法，一种是以实验为目的，短期内保藏藻种的培养方法。 长期培养最主要的问题是选择一种合适的培养基，可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。最适合长期培养藻种的培养基是agar（固体琼脂培养基），但是使用agar有一个弊端，即培养物保持无菌的问题；我们可以加一层蒸馏水（咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水）在agar上，这种做法可以保证在长期保种的过程中减少agar水分和营养的流失。长期保种使用的培养基，不要选择营养过于丰富的，因为多数的藻，尤其是丝状藻，在营养丰富的环境生长，会发生形态结构上的变化，如果要做生理生态方面研究，实验材料的形态结构是不能异常的。 适合长期保种的贫营养的培养基有这些：Bold’s基础培养基，以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的a gar，适合长期培养绿藻；Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻；土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。对于我库提供的藻种，由于藻种长期习惯的原因，建议使用我们提供的原配方来培养，在长期培养的时候，可以适当稀释原培养基，在藻种培养过程中，生长速率会变慢，可以保持其形态结构不变。 另外，长期培养的时候，除了选择适当的培养基，还可以降低温度5～8C（降温的过程最好能循序渐进，突然改变环境温度，可能会导致藻种不适应而死亡）。光照强度可以减小为原先的一半。在实验之前3到4周，将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基中（培养基必须灭菌），按照我们给予的培养条件培养，在实验前6天左右，再次接种。 短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。由于试验的需要，常常要求在短期时间内获得大量的培养物，我们可以采用通气培养和摇床培养。通气培养可以通CO2或洁净的空气，视培养物的多少来决定通气泵的大小，在通气的硅胶管中设置一个缓冲瓶，塞上灭菌后的脱脂棉，帮助净化空气，如果对通气有更高的要求，可以在通气管中加上一层滤膜。使用摇床培养，需要注意藻种的生理周期。 二、培养基的选择和配制 1、培养基的选择 ①BG11是我库培养蓝藻使用最广泛的培养基。除了极少部分蓝藻，大部分都使用BG11。按照我们给的配方配制好后高压灭菌，BG11经常会产生絮状沉淀。这是因为其中有Ca+和CO32-,我们可以在灭菌后再超净台上用灭菌过的注射器来加两者之中的另外一种。通常我们建议将氯化钙的母液单独灭菌后在无菌室保存，在配置好BG11的工作液并灭菌之后，在超净台上用注射器将氯华钙加入。 ②SE是我库用来培养常见的绿藻所使用的培养基。一般来说，如果配制了母液，用母液来配培养基，灭菌后是不会产生沉淀的。配置的时候注意先将所需要的蒸馏水准备好，将需要的药品逐个加入，等到一种药品充分溶解之后再加入第二种。另外，土水在蒸馏过滤后，是不需要灭菌的，因为高压灭菌的过程会让其中的一些营养成分损失。 ③水是培养基成分中很重要的一个方面。配培养基，可以取蒸馏水、自来水、去离子水，也可以取藻种采集地的水。使用经过处理的水，如双蒸水、去离子水，有时候并不合适培养，因为仪器在处理过程中会带入微量的有毒物质。采集藻种采集地的水来培养是最理想的，但是需要经过一些处理，处理的手段和过程要尽可能保持其营养成分不变。如果是咸水或者海水的藻类采集地采集的水，应将其置于5℃的黑暗中，保持6个月。如果是泉水或者湖水等淡水的水源，水样置于20℃的室温，立即通过活性炭方法处理：每升水加2g活性炭，搅拌一小时后，过滤，并重复此过程3～4次。 ④咸水和微咸水的藻类需要的人工咸水的合成效果关键在于如何蒸馏；还有一些水华蓝藻难以培养，主要原因是因为在野外生长时，通常底泥提供的营养元素可以溶在水中，但是在实验室培养，经过高压灭菌，
绿水的培养
绿水的培养 最重要的是藻种的取得，这个就要看个人所需来培养了，一般来说，藻类可以分淡水以及海水，通常淡水以绿藻以及蓝绿藻最多，培养方式如下: 1.采集：可以利用10 Micro的浮游生物网,或者是筛网等来捞取采集,也可以使用马达来抽水过滤.。 2.分离并纯化藻种：纯化藻种就是把单一的藻类分离出来。可以在大量稀释后用毛细管来挑选所需的藻种做纯化培养,也可以先培养在洋菜培养基上来挑选所需的藻种做纯化培养.。 3.培养： (1)必须先从小量培养开始，所谓的小量培养，就是在纯化藻种后先以小烧杯做培养，等到培养到一定数量时，再依次放到更大的容器培养。 (2)培养时必须添加营养盐，营养盐可以用鸡粪、猪粪等等发酵后使用，另外有一种比较卫生的方法，就是用台肥加黑糖经过发酵后使用。 (3)照光：每日应固定时间照光约10~12个小时。 (4)控制温度:温度应该控制在26度C上下。 (5)定期抽换一半的绿水,并且添加营养盐。 还有一种更简单的培养方式，但培养出来的藻种会不纯,方法如下: 1.将饲料洒在水中； 2.添加硝化菌类以增加水中的营养盐； 3.照太阳光； 4.其它的条件如同第一个方法所示。 经过一段时间后,就可以看到水中已经出现绿藻了。老绿水又称“肥水”，水质不透明，能见度仅为3～4Cm，初形成时呈鲜艳绿色，看上去油绿油绿的十分舒服，一段时间后变为黄绿色，水中藻类异常丰富，发展到了顶峰阶段，但到达顶峰的同时水质败坏的过程也已经开始，此时必须加大换水量防止崩溃“返青”（水突然变的清澈透底，绿藻变绿藻渣子，透着腥味，这时就该大量换水了）。透明的嫩绿水在春夏秋三季很容易转化为老绿水，如果已经转化，通过大量换水是难以使水变回清澈的，只能维持不“返青”即可。 现在用玻璃缸在室内养鱼的鱼友越来越多，要求水质清澈，故老绿水多用于露天渔场、庭院、阳台养鱼的场合。老绿水是传统养法的最佳用水之一，但这种水具有两面性。如果你的水已经成为或有可能成为老绿水，劝你了解一下。 老绿水的优点这种水中的藻类含量很多，在白天进行光合作用，产生氧，并分解粪便等污物，形成良性循环，作用类似于西方养鱼理论中的硝化菌。绿水中含有丰富的增色物质，对改善鱼体的色泽很有好处。金鱼在冬天停止生长，利用这段时间，将其养在老绿水中，称为“澄鱼”。经过一冬，虽然鱼没长大，但鱼体内的色素颗粒积累量大大增加，色泽更为鲜艳。而且绿水中的浮游绿藻也是金鱼很好的辅助饲料，有利于丰富鱼儿摄入的营养，有利于提高开春的繁殖质量。养在绿水中的鱼通常体质较好，粪便呈黑绿色。 虽然如此，但老绿水是一把不折不扣的双刃剑，把握不好，鱼会饱受其害甚至全军覆没。原因如下，水中的藻类在白天产生氧，在夜晚却消耗氧，再加上鱼儿本身耗氧，水体经过一夜，含氧量在黎明时达到最低点，鱼儿轻则浮头，天亮藻类能产生氧气时自然缓解，重则“泛盆”死亡是常有的事。用绿水养鱼要求夜间充氧、凌晨查看，就是专门针对此点的。但错误人人都犯，庭院养鱼又不可能象渔场一样措施严密。由于我爱用绿水养金鱼，又不打氧，密度虽小仍然经常缺氧死鱼。此为老绿水坏处之一。其二，金鱼易患烫尾病，夏季光线强烈，水中藻类生长迅速，光合作用旺盛，不断产生气泡，如果未能及时喂食或投食不足，鱼会四处游动觅食，气泡会不断粘附到鱼尾、鱼鳍，从而使尾鳍浮于水面，头部向下，再经烈日曝
藻类培养
一、基本培养方式 （一）纯培养和单种培养（据种的纯度） 1、纯培养（axenic culture）纯培养即无菌培养，是指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。纯培养要求有无菌室、灭菌锅、超净工作台等设施，容器、工具、培养液等彻底灭菌，操作严格，培养成功率高，是进行生物科学研究不可缺少的环节。 2、单种培养（unialgal culture）在生产性培养中不排除细菌存在而有别于纯培养的一种培养方式称为单种培养。 （二）一次性培养、连续培养和半连续培养 1．一次性培养（batch culture）在各种容器中，配制培养液，把少量的藻种接种进去，在适宜的环境下培养，经过一段时间（一般5~7 d），藻细胞生长繁殖达到较高的密度，一次全部收获。一次性培养是微藻培养最常用的方法。 2．半连续培养（semi-continuous culture）半连续培养是在一次性培养的基础上，当培养的藻细胞达到或接近收获的密度时，每天收获一部分藻液并补充等量的培养液，继续培养。半连续培养也是微藻饵料生产性常用的培养方法，每天的收获量根据育苗的需要来确定。 微藻培养的工艺流程包括： 工具、容器、水的消毒 培养液的制备 接种 培养过程的管理 采收等主要环节 一、容器、工具的消毒 （一）物理消毒法 1．加热消毒法 加热消毒法是利用高温使蛋白质变性以杀死微生物的方法。不能耐高温的容器和工具，如塑料、橡胶制品等不能用此法消毒。 （1）直接灼烧灭菌接种环、镊子等金属小工具，试管口、瓶口等可以直接在酒 精灯火焰上短暂灼烧灭菌。载玻片、小刀等则最好先蘸酒精，然后在酒精灯火焰上点燃，等器具上的酒精烧完，也就完成了灭菌工作。该方法可以直接把微生物烧死，灭菌彻底。优点是简单、方便、快速、高效，但只适用于小型金属或玻璃工具。 （2）煮沸消毒把容器和工具用纱布包好，放入锅中，加水煮沸消毒，一般约煮沸
(完整版)绿藻鉴定图谱
绿藻门 Chllorophyta 形态构造 除少数种类原生质体裸露、无细胞壁外，绝大多数都有细胞壁。细胞壁内层为纤维素，外层为果胶质，表面平滑，或具颗粒、孔纹、瘤、刺毛等构造。细胞核一个，少数种类多个，具核仁和核膜。 运动的细胞常具二条顶生，等长的鞭毛，少数为4条，极少数为1、6或8条，有的生殖细胞具一轮顶生的鞭毛。在鞭毛着生的基部，一般都具有二个伸缩泡。眼点一个，粉红色，位于细胞的前部侧面。 绿藻体型：(1)单细胞类型(2)群体类型(3)胶群体类型 (4)丝状体类型(5)膜状体类型(6)异丝体类型(7)管状体类型
绿藻门分为绿藻纲、接合藻纲 （一）绿藻纲 1 团藻目植物体为运动单细胞，或呈一定形状的多细胞的运动群体。群体细胞为2的倍数。 衣藻细胞的形态构造模式图
衣藻属Chlamydomonas 单细胞具两条鞭毛的运动个体。细胞长度不超过宽的三倍。横切面圆形。色素体杯状、片状、星状等。蛋白核一个，位于增厚的后端或侧面，或多数散布在色素体内。
扁藻属Platymonas 单细胞，纵扁。正面观椭圆形、心形或卵形；侧面观对称或不对称，狭卵形或狭椭圆形；垂直面观椭圆形或近长圆形。细胞壁薄而平滑。细胞前端中央具4条等长的鞭毛，色素体大型，杯状，完全或前端呈4个分叶。淡水、海水中都有分布， 盐藻属Dunaliella 单细胞。具2条等长顶生的鞭毛。色素体杯状，近基部有一个较大的蛋白核。一个大的眼点，位于细胞前端。因无纤维素细胞壁，在运动时，形状为梨形。 盐藻D. salina 为我国沿岸习见种类，是经济动物幼体的饵料。也是未来工业上提取光合色素和糖蛋白的理想种类。