食用菌液体菌种发酵罐专用母种制作方法

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食用菌液体菌种发酵罐专用母种制作方法

作者:白胡木吉力图白福林哈斯图力古尔刁雅娟钱丹珠

来源:《农业与技术》2016年第08期

摘要:本文介绍了液体专用母种的制作过程、培养终点及质量好坏的判断、液体专用母

种生产中应注意的问题等内容。

关键词:液体菌种;培养器;母种

中图分类号:S646 文献标识码:A DOI:10.11974/nyyjs.20160432006

在液体菌种培养器的使用越来越普及时种植户遇到了不会制作液体菌种培养器专用母种的难题,影响了种植户使用液体菌种培养器这种先进设备的积极性。本文介绍其制作方法如下:

1 液体专用母种的制作过程

1.1 试管斜面种的制作

采用PDA综合培养基。另外,根据不同需要可以采用营养加富培养基,即在上述配方外加入20g麸皮或0.5g蛋白胨;用漏斗将培养基分装至试管1/5~1/4处,试管口壁不粘培养

基;梳棉制作大小合适的棉塞,松紧适度,塞入试管内1.5 ~2.0cm,外露0.5 ~1.0cm7支或10支捆成1捆,管口用牛皮纸包好,直立于灭菌锅内,准备灭菌;121~126℃(0.11 ~

0.15MPa)的条件下灭菌30min,将培养基冷却至60~70℃时将灭好菌的培养摆成斜面,冷却备用;当培养基温度降至30℃以下时,无菌室内将菌种用接种钩接入空白培养基上,动作迅速、准确;根据不同的品种选择其适宜的温度避光培养,常规品种22~26℃,高温品种29~31℃,一般7~11d即可长好,菌丝生长健壮、洁白、均匀、无任何杂菌污染的菌种为优良菌种。

1.2 摇瓶种的制作

按液体培养基的配料办法按一定的配比制作培养基(土豆20%、麸皮45%~5%、红糖

1.2%~5%、葡萄糖1.5%、KH2PO40.2%、MgSO40.1%、蛋白胨0.3%、VB120mg/L);每瓶

装料系数为20%~40%,即1000mL的锥形瓶装料约200~400mL;棉塞外包1层纱布,大小要合适,上面加盖1层牛皮纸,用线绳绑好。

121~126℃(0.11MPa~0.15MPa)的条件下灭菌30min;每瓶接入2~3块0.5cm2~1cm2的菌块,使菌块尽量漂浮在液面上;把接好种的锥形瓶置摇床上(或静置24h后),在23~25℃的条件下振荡培养,一般7~10d即可长好。可以看见,瓶里有大量基本均匀、活力旺盛的菌球;菌球形态应大小均匀、活力旺盛、毛刺明显,静置5min后菌球占菌液浓度的80%以上或不分层。菌液由前期的微浑浊变得澄清透明,多数是浅黄色或橙黄色;若变得浑浊不清,

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