VEGF家族及其受体与视网膜新生血管形成

ＶＥＧＦ家族及其受体与视网膜新生血管形成蒋瑶祁，彭辉灿

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Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｉｔｅｍ：ＦｕｎｄｏｆＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＥｄｕｃａｔｉｏｎＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ（Ｎｏ．０５Ｃ４０７）

ＣｅｎｔｅｒｏｆＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎｈｕａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｎｇｙａｎｇ４２１００１，ＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅｔｏ：Ｈｕｉ－ＣａｎＰｅｎｇ．ＣｅｎｔｅｒｏｆＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎｈｕａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｎｇｙａｎｇ４２１００１，ＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ．ｐｅｎｇ＿ｈｕｉｃａｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ

Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２００６－０８－１４Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２００６－０９－２７

Ａｂｓｔｒａｃｔ

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ＪｉａｎｇＹＱ，ＰｅｎｇＨＣ．Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｆａｍｉｌｙ＆ｒｅ－ｃｅｐｔｏｒｓａｎｄｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ．ＩｎｔＪＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ（ＧｕｏｊｉＹａｎｋｅＺａｚｈｉ），２００６；６（５）：１１１３－１１１６

摘要

视网膜新生血管形成是眼部多种疾病共有的病理改变，其造成的眼部广泛损害已成为致盲的重要原因。ＶＥＧＦ家族（包括ＶＥＧＦ－Ａ，ＶＥＧＦ－Ｂ，ＶＥＧＦ－Ｃ，ＶＥＧＦ－Ｄ，ＶＥＧＦ－Ｅ和胎盘生长因子）作为新生血管生成中必不可少的关键因子，通过刺激血管内皮细胞的有丝分裂、迁徙、增加血管的通透性、诱导毛细血管腔的形成。本文对ＶＥＧＦ家族理化特性及受体、在视网膜新生血管形成中的作用和针对其作用机制采取相应防治措施进行综述。

关键词：ＶＥＧＦ；受体；视网膜新生血管

蒋瑶祁，彭辉灿．ＶＥＧＦ家族及其受体与视网膜新生血管形成．国际眼科杂志，２００６；６（５）：１１１３－１１１６

０引言

视网膜新生血管（ｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ，ＲＮＶ）形成是视网膜静脉阻塞、增殖型糖尿病性视网膜病变（ＰＤＲ）、视网膜下新生血管膜（ＳＲＮＭ）、新生血管性青光眼、早产儿视网膜病变（ＲＯＰ）、增生性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）等疾病共有的病理改变，其造成的渗出、出血和增生等病理改变对眼部结构和功能损害，是引起视力障碍的重要原因。研究表明，血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）在视网膜新生血管生成中是必不可少的重要诱导因子［１］。它能刺激血管内皮细胞的有丝分裂、迁徙、增加血管的通透性、诱导毛细血管腔的形成。因此，对血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）与视网膜新生血管形成的基础和临床研究一直为眼科学者所关注。

１ＶＥＧＦ家族理化特性

ＶＥＧＦ是一种与血管增殖密切相关的多肽类生长因子，亦称血管通透因子或血管调理素。Ｆｅｒｒａｒａ等１９８９年从牛脑垂体滤泡星状细胞体外培养液中分离、提纯。ＶＥＧＦ广泛分布于人和动物体内的脑、肾、肝、脾、肺、眼等许多组织，正常眼视网膜色素上皮细胞、血管内皮细胞和周细胞均可产生较低水平的ＶＥＧＦ。人类ＶＥＧＦ基因定位于６号染色体的ｐ１２～ｐ２１，全长２８ｋｂ，由８个外显子、７个内含子组成，编码产物为３４～４５ｋｕ，分子量在４６０００～４８０００的同源二聚体糖蛋白，为血管内皮的强促分裂素。亚基之间通过二硫键相连，该键如被还原，则丧失所有的生物学特性。与经典的多肽类激素不同，ＶＥＧＦ主要是以旁分泌和自分泌的方式起作用。目前发现基因转录的ｍＲＮＡ以不同的剪切方式形成５种ＶＥＧＦ异构体，共同构成ＶＥＧＦ家族６大成员：ＶＥＧＦ－Ａ（即以往发现的ＶＥＧＦ），ＶＥＧＦ－Ｂ，ＶＥＧＦ－Ｃ，ＶＥＧＦ－Ｄ，ＶＥＧＦ－Ｅ和胎盘生长因子（ｐｌａｃｅｎｔａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＬＧＦ）［２］。

１．１ＶＥＧＦ－Ａ人ＶＥＧＦ－Ａ基因位于染色体６ｐ２１．３，ＶＥＧＦ－Ａ基因经过转录水平的剪切，可产生５种ＶＥＧＦ的变异体，根据氨基酸的长短，依次命名为ＶＥＧＦ－Ａ２０６，ＶＥＧＦ－Ａ１８９，ＶＥＧＦ－Ａ１６５，ＶＥＧＦ－Ａ１４５和ＶＥＧＦ－Ａ１２１。ＶＥＧＦ－Ａ２０６和ＶＥＧＦ－Ａ１８９的碱性很强，与肝素有较强的亲和力，是与细胞外基质（ＥＣＭ）中硫酸肝素紧密结合的不溶性蛋

基金项目：中国湖南省教育厅资助课题（Ｎｏ．０５Ｃ４０７）

作者单位：（４２１００１）中国湖南省衡阳市，南华大学附属第二医院

眼科中心

作者简介：蒋瑶祁，男，在读硕士研究生，主要从事视网膜新生血

管形成的机制及防治的临床与基础研究。

通讯作者：彭辉灿．ｐｅｎｇ＿ｈｕｉｃａｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ

收稿日期：２００６－０８－１４修回日期：２００６－０９－２７

?文献综述?

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白；ＶＥＧＦ－Ａ１６５最具特征性，不同的组织含有不同种类、比例的异构体。一般情况下ＶＥＧＦ－Ａ１６５为最主要的异构体，天然的ＶＥＧＦ即表现出ＶＥＧＦ－Ａ１６５的主要特性，ＶＥＧＦ－Ａ１２１缺乏外显子６，７编码的残基，是一酸性多聚肽，不能与肝素结合，所以是游离蛋白；ＶＥＧＦ－１６５和ＶＥＧＦ－Ａ１２１这两种ＶＥＧＦ异构体具有可溶性，可以向周围组织弥散，而ＶＥＧＦ－Ａ１４５比较少见［３］。ＶＥＧＦ－Ａ在正常人和动物的组织中表达较少，在有新生血管生成的组织细胞中有高表达，包括胎儿组织、胎盘、黄体，特别在肿瘤中有高表达。许多因素可以提高ＶＥＧＦ－Ａ的表达，如缺氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１），各种生长因子和肿瘤基因包括ＥＧＦ、ＴＧＦａ／ｂ、角质细胞生长因子，胰岛素样生长因子－１、ＦＧＦ、血小板源生长因子等都可上调ＶＥＧＦ－ＡｍＲＮＡ的表达。其主要生物学功能为：（１）选择性增强血管内皮细胞有丝分裂，刺激内皮细胞增殖并促进血管形成；（２）升高血管尤其是微小血管渗透性，使血浆大分子外渗沉积在血管外的基质中，为新生毛细血管网的建立提供营养。１．２ＶＥＧＦ－ＢＶＥＧＦ－Ｂ又称ＶＥＧＦ相关因子（ＶＲＦ），在大多数组织中与ＶＥＧＦ共同表达。Ｏｌｏｆｆｓｓｏｎ等［１，２］最早从人纤维肉瘤和红白血病肿瘤细胞ｃＤＮＡ文库中及成年鼠的心脏细胞ｃＤＮＡ文库中分别克隆出人和鼠ＶＥＧＦ－ＢｃＤＮＡ。人ＶＥＧＦ－Ｂ基因位于染色体１１ｑ１３上，全长４ｋｂ，有７个外显子，被６个大小分别为５６５ｂｐ，３１２ｂｐ，２４４ｂｐ，７５６ｂｐ，１９７ｂｐ，７００ｂｐ的内含子间隔［３，４］。目前已发现了由于编码ＶＥＧＦ－ＢｍＲＮＡ的两种不同剪接方式而产生的两个不同的转录子，即ＶＥＧＦ－Ｂ１６７和ＶＥＧＦ－Ｂ１８６，分别含１６７，１８６个氨基酸残基。。ＶＥＧＦ－Ｂ具有促进内皮细胞增生的作用，与肿瘤生长也有密切关系，可在局部促进血管生长，从而有利于肿瘤的生长［４］。

１．３ＶＥＧＦ－ＣＶＥＧＦ－Ｃ又称ＶＥＧＦ相关蛋白（ＶＲＰ）。人ＶＥＧＦ－Ｃ基因位于染色体４ｑ３４上，ＶＥＧＦ－Ｃ在许多正常组织都有表达，包括：心肌、骨骼肌、肺脏、肾脏。ＶＥＧＦ－Ｃ可以自由分泌到细胞外，其分泌形式是同源二聚体，大多数分泌型ＶＥＧＦ－Ｃ是其多肽蛋白前体的水解产物。ＶＥＧＦ－Ｃ是第一个被发现的淋巴管生成因子，它可以诱导淋巴内皮细胞增殖、迁移，并形成淋巴窦［３，５］。它可选择性地诱导淋巴管的增生，在调节血管生成方面与ＶＥＧＦ－Ａ有相同的作用。

１．４ＶＥＧＦ－Ｄ人ＶＥＧＦ－Ｄ基因位于染色体Ｘｐ２２．３１，ＶＥＧＦ－Ｄ蛋白含有３５４个氨基酸，ＶＥＧＦ－Ｄ可在许多正常组织大量表达，包括：心、肺、骨骼肌、结肠和小肠。ＶＥＧＦ－Ｄ是在计算机进行同源搜索时发现的，在结构和功能上均与ＶＥＧＦ－Ｃ相似。初步发现ＶＥＧＦ－Ｄ可促进血管内皮细胞分裂，据推测ＶＥＧＦ－Ｄ可能会在血管生成和淋巴管生成方面与ＶＥＧＦ－Ｃ协同作用［６］。

１．５ＶＥＧＦ－ＥＶＥＧＦ－Ｅ是ＶＥＧＦ家族另一新成员，是从羊口疮病毒染色体组被分离出来，分子量为２０ｋｕ，与ＶＥＧＦ－Ａ１２１在氨基酸水平有２５％同源性，缺乏碱性区和肝素结合区。它仅与ｆｌｋ－１结合，与ＶＥＧＦ－Ａ１６５的生物学作用和效能相似［３］。

１．６ＰＬＧＦＰＬＧＦ基因位于染色体２ｐ１６－２１，其氨基酸序列与ＶＥＧＦ－Ａ有５３％的同源性，已发现ＰＬＧＦ有３个异

构体，即ＰＬＧＦ－１，ＰＬＧＦ－２和ＰＬＧＦ－３。与ＶＥＧＦ－Ａ不同的是，ＰＬＧＦ的表达只限于血管生成活跃的组织，如胎盘组织（由血管内皮细胞表达）和肿瘤组织（由肿瘤细胞表达），并不见于已分化成熟的细胞［７］。主要功能为诱导内皮细胞分化增殖。

２ＶＥＧＦ家族的受体

ＶＥＧＦ必须同受体结合才能实现其作用，研究已证实视网膜毛细血管内皮细胞存在ＶＥＧＦ受体，而且ＶＥＧＦ受体数目较其它组织内皮细胞多。目前较肯定的ＶＥＧＦ家族受体共有：ＶＥＧＦＲ－１（ｆｌｔ－１），ＶＥＧＦＲ－２（ＫＤＲ／ｆｌｋ－１），ＶＥＧＦＲ－３（ｆｌｔ－４），神经纤维网蛋白－１（ｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎ－１，ＮＲＰ－１），神经纤维网蛋白－２（ｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎ－２，ＮＲＰ－２）［８，９］。前三者都是跨膜酪氨酸激酶受体，都有７个免疫球蛋白样的细胞外区域、跨细胞膜区域以及一个含有酪氨酸激酶的细胞内区域。ＶＥＧＦＲ－１和ＶＥＧＦＲ－２主要分布于血管内皮细胞；ＶＥＧＦＲ－３在胚胎发育期静脉和淋巴内皮中表达，而在成年期只限于淋巴内皮细胞；ＮＲＰ－１和ＮＲＰ－２分布于神经轴突及血管内皮细胞。ＶＥＧＦＲ－１其生物学效应表现为诱导内皮细胞的迁移，而无促内皮细胞分裂增殖作用；ＶＥＧＦＲ－２主要介导ＶＥＧＦ－Ａ促有丝分裂，新生血管形成和血管通透性增加效应的受体；ＶＥＧＦＲ－３与其特异的配体ＶＥＧＦ－Ｃ、ＶＥＧＦ－Ｄ结合可以引起内皮细胞的增殖和迁移，调控血管及淋巴管内皮细胞的新生，对胚胎发育及肿瘤的生长和转移起重要调控作用［１０］。ＶＥＧＦ－Ａ主要结合在ＶＥＧＦＲ－１和ＶＥＧＦＲ－２上，还可与受体Ｎｅｕ－ｒｏｐｉｌｉｎｓ（ＮＲＰ－１／ＮＲＰ－２）结合。研究表明在ＶＥＧＦＲ－２与ＮＲＰ－１共表达的细胞上，ＮＲＰ－１可以增强ＶＥＧＦＲ－２介导的信号通路的有效性，所以可以结合ＮＲＰ－１的ＶＥＧＦ－Ａ１６５比不能与之结合的ＶＥＧＦ－Ａ１２１促有丝分裂活性高。但目前还未找到结合ＶＥＧＦ－Ａ１６５后ＮＲＰ－１／ＮＲＰ－２介导的信号通路［３，１０］。

３ＶＥＧＦ家族与视网膜新生血管形成

视网膜新生血管形成是一个极其复杂的过程，首先发生血管扩张及通透性增加，然后经过血管壁基底膜酶的降解，内皮细胞的趋化、迁移、有丝分裂，和周细胞的相互作用，血管腔形成［１１］。这其中涉及多种细胞因子的参与，特别是一些血管生成因子包括碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、血小板衍生的生长因子（ＰＤＧＦ）［１２］、表皮生长因子（ＥＧＦ）［１３］、肝细胞生长因子（ＨＧＦ）［１４］、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、ＶＥＧＦ等，而ＶＥＧＦ被认为是最重要的血管生长因子［１５］。

由缺氧缺血所导致的视网膜新生血管形成被认为主要是由ＶＥＧＦ增加引起的，它是新生血管形成和血管渗漏有效的诱导剂，缺氧刺激引起多种细胞分泌ＶＥＧＦ［１］。研究认为缺氧在新生血管形成初始可能起双重作用。一方面在分子水平，视网膜内层缺氧引起血管生长因子ＶＥＧＦ的表达，视网膜生成的ＶＥＧＦ不断的上调引起其在视网膜和玻璃体液中积聚，可能为新生血管形成做准备。将暴露到高氧环境中６ｈ小鼠，其视网膜上ＶＥＧＦ表达下降，而且在高氧期间始终保持下降，回到正常氧环境当中６～１２ｈ，视网膜上的ＶＥＧＦ表达增加达到高峰，之后ＶＥＧＦ表达有所下降，但ＶＥＧＦ水平仍高于正常对照组，并持续数

１１１４

天随着新生血管的萎缩，ＶＥＧＦ水平下降至正常水平。因此，ＶＥＧＦ在视网膜病变当中可能起双重作用：高氧下调ＶＥＧＦ引起血管退化，而随后的ＶＥＧＦ上调导致视网膜新生血管形成。另一方面是在细胞水平，缺氧可能是星状细胞变性当中的一个因素。视网膜血管的正常发育与星状细胞有着密切的关系，如果这种关系被打破，视网膜前血管可能生长或长入玻璃体。星状细胞在使视网膜血管附着于视网膜并保持它们的完整性方面起重要作用。视网膜的星状细胞从视神经移入视网膜，作为视网膜形态血管，通过局部释放的ＶＥＧＦ，星状细胞刺激和控制血管生长的方向，星状细胞也向发育中的视网膜内丛状层和内核层中生长，刺激未成熟的血管生长。一旦血管发育到成熟阶段，星状细胞被认为是血管壁内周细胞，失去了对ＶＥＧＦ的反应。只要毛细血管神经胶质界膜保持完整，毛细血管依然保持在视网膜内生长，但是，如果血管生长超过它们的星状细胞表面或形成神经胶质膜的星状细胞变性，血管壁内皮细胞接触玻璃体中的ＶＥＧＦ，则向玻璃体内生长形成微动脉瘤和视网膜前新生血管［１６，１７］。１９９６年Ｐｅｔｅｒ用杂交技术研究发现ＶＥＧＦ在病变视网膜表达有一定层次，与缺氧部位有关，与导致缺氧的疾病无关，认为低氧是诱导视网膜ＶＥＧＦ表达的共性因子。另外，缺氧情况下ＶＥＧＦ的受体在与ＶＥＧＦ的亲和力不变的情况下数量增加５０％，也表明了ＶＥＧＦ在与缺氧相关的眼内新生血管化过程中起着关键作用。

视网膜新生血管是非自限性的，存活的视网膜、低氧分压以及静脉引流等因素的存在，是新生血管产生的前提。在糖尿病视网膜病变中，慢性高血糖症可引起氧化作用受损、微血栓形成、细胞黏附分子活化、白细胞停滞以及细胞因子的活化，特别是ＶＥＧＦ的高表达［１８］。研究显示，伴有新生血管的ＰＤＲ患者的玻璃体内及房水内ＶＥＧＦ含量明显高于不伴有新生血管的ＰＤＲ患者；此外，ＰＤＲ患者的玻璃体内和房水内高浓度ＶＥＧＦ不受血清浓度的影响［１９］。Ｓｙｄｏｒｏｖａ等［２０］收集１５个ＰＤＲ、１８个ＰＶＲ和２０个对照的患者的静脉血和玻璃体液，用ＥＬＩＳＡ法定量检测血清和玻璃体中ＶＥＧＦ的浓度水平，结果显示在ＰＤＲ患者血清和玻璃体中ＶＥＧＦ表达在相似的水平，而其在血清中ＶＥＧＦ明显高于ＰＶＲ患者。提示ＶＥＧＦ为眼内合成，在ＰＤＲ新生血管形成过程中起着重要作用。Ｏｈｎｏ－Ｍａｔｓｕｉ等［２１］在用视紫红质启动子启动的ＶＥＧＦ转基因鼠研究中，发现ＶＥＧＦｍＲＮＡ和蛋白分子高水平表达，能引起成年大鼠明显视网膜新生血管生成和牵拉性视网膜脱离。ＶｉｌｌｅｇａｓＢｅｃｅｒｒｉｌ等［２１－２３］研究发现早产儿视网膜病变患者，血管形成活跃的第Ⅳ期中，视网膜下液ＶＥＧＦ明显高浓度表达。Ｌｅｓｋｅ等［２４］在用酸中毒诱导的新生斯普拉－道来（氏）大鼠的ＲＯＰ模型中，通过ｑＲＴ－ＰＣＲ可以检测到在新生血管化过程中ＶＥＧＦｍＲＮＡ的表达，这些均表明ＶＥＧＦ在视网膜新生血管过程中相关性较强。

应用多、单克隆抗体进行原位杂交和免疫组化实验发现正常人视网膜有ＶＥＧＦ－Ａ、ＶＥＧＦＲ－１、ＶＥＧＦＲ－２、ＶＥＧＦＲ－３的ｍＲＮＡ和蛋白质表达，同时在非血管细胞有３种受体存在。ＶＥＧＦ与ＶＥＧＦＲ结合后，ＶＥＧＦＲ首先自磷酸化，继而激活磷脂酰胆碱特异性磷脂酶Ｃ（ＰＬＣｒ），

水解磷脂酰肌醇二磷酸（ＰＩＰ２），产生二脂酰甘油（ＤＡＧ）和肌醇三磷酸（ＩＰ３），其中ＤＡＧ可激活胞质中蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）β，并固定于膜上，然后诱导内皮细胞生长，增加血管渗透性。Ｗｉｎｔｍｅｒ等［２５］体内研究发现，ＶＥＧＦＲ－１定位于内界膜、视网膜毛细血管周细胞基底膜等细胞外基质；ＶＥＧＦＲ－２主要定位于视网膜渗漏区血管细胞，与血管渗漏有关；ＶＥＧＦＲ－３与ＶＥＧＦＲ－２十分相关，主要定位于视网膜深层毛细血管，伴随ＶＥＧＦ－Ａ和ＰＡＬ－Ａ缺血区的过高表达和过早出现，因而可认为ＶＥＧＦ－Ａ诱导ＶＥＧ－ＦＲ－２、ＶＥＧＦＲ－３在缺血区表达，导致视网膜渗漏产生，从而促进新生血管形成。

４ＶＥＧＦ家族在视网膜新生血管防治中的意义

研究ＶＥＧＦ家族在视网膜新生血管形成的作用有助于针对其机制采取相应的防治。应用抗ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦＲ的单克隆抗体，可封闭已分泌的ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦＲ，阻断ＶＥＧＦ诱发的内皮细胞信号传导，抑制新生血管的形成。Ｏｚａｋｉ等［２６］在动物实验研究中发现，对ＶＥＧＦ及受体的抑制明显使眼新生血管回退。同时，ＶＥＧＦ与细胞膜上的受体结合，需通过一系列细胞内信号系统，特别是ＰＫＣ的活动才能发挥作用，因而可以应用某些药物阻断该信号转导，抑制内皮细胞的生长和血管渗透性的增加。在猪视网膜分支静脉阻塞模型中，口服ＰＫＣ抑制剂ＬＹ３３３５３１可有效地抑制视网膜前和视盘上新生血管形成。基因治疗是当前的一个热点，在基因水平用反义寡核苷酸抑制基因的准确表达是首选的手段，研究已证实用ＶＥＧＦｍＲＮＡ反义核苷酸能成功阻止视网膜新生血管的形成。

５问题和展望

近些年来，对于ＶＥＧＦ家族的基础和临床研究已取得了较大的进展，ＶＥＧＦ家族的表达与视网膜新生血管形成存在密切对应关系。在视网膜静脉阻塞、增殖型糖尿病性视网膜病变，早产儿视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变等新生血管生成相关性疾病中，通过抑制ＶＥＧＦ家族，减少新生血管形成，以达到控制疾病的发展。最新研究表明，视网膜新生血管的发生与视网膜内各种血管促进因子和抑制因子的失衡有关，其中ＶＥＧＦ家族已被认为是新生血管形成的关键因子，但不是唯一因子，并且与其他因子相互关系目前尚不十分清楚。同时，由于ＶＥＧＦ家族不仅存在于病理性新生血管形成过程中，而且还在正常血管发育及其他生命活动中起作用。因此，特异性针对ＶＥＧＦ的抑制性治疗势必会影响到人体正常的生理功能。所以，对于ＶＥＧＦ家族及受体需要进一步做深入的研究证明其安全性和有效性，为视网膜新生血管发病机制、预防及治疗等提供充分的理论依据。

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８ＲｏｂｉｎｓｏｎＧＳ，ＪｕＭ，ＳｈｉｈＳＣ，ＸｕＸ，ＭｃＭａｈｏｎＧ，ＣａｌｄｗｅｌｌＲＢ，ＳｍｉｔｈＬＥ．Ｎｏｎ－ｖａｓｃｕｌａｒｒｏｌｅｆｏｒＶＥＧＦ：ＶＥＧＦＲ－１，２ａｃｔｉｖｉｔｙｉｓｃｒｉｔｉｃａｌｆｏｒｎｅｕｒａｌｒｅｔｉｎａｌｄｅｖｅｌｏｐ－ｍｅｎｔ．ＦＡＳＥＢＪ，２００１；１５（７）：１２１５－１２１７

９ＩｓｈｉｈａｍａＨ，ＯｈｂａｙａｓｈｉＭ，ＫｕｒｏｓａｗａＮ，ＫｉｔｓｕｋａｗａＴ，ＭａｔｓｕｕｒａＯ，ＭｉｙａｋｅＹ，ＭｕｒａｍａｔｓｕＴ．Ｃｏｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎ－１ａｎｄＦｌｋ－１ｉｎｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａ－ｔｉｏｎｉｎａｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．ＩｎｖｅｓｔＯｐｈｔｈａｌｍｏｌＶｉｓＳｃｉ，２００１；４２（６）：１１７２－１１７８

１０ＴａｋａｈａｓｈｉＨ，ＳｈｉｂｕｙａＭ．Ｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）／ＶＥＧＦｒｅｃｅｐｔｏｒｓｙｓｔｅｍａｎｄｉｔｓｒｏｌｅｕｎｄｅｒｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ＣｌｉｎＳｃｉ（Ｌｏｎｄ），２００５；１０９（３）：２２７－２４１

１１ＤｉｓｔｌｅｒＨ，ＨｉｒｔｈＡ，Ｋｕｒｏｗｓｋａ－ＳｔｏｌａｒｓｋａＭ，ＧａｙＲＥ，ＧａｙＳ，ＤｉｓｔｌｅｒＯ．Ａｎｇｉｏ－ｇｅｎｉｃａｎｄａｎｇｉｏｓｔａｔｉｃｆａｃｔｏｒｓｉｎｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｏｎｔｒｏｌｏｆａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ．ＱＪＮｕｃｌＭｅｄ，２００３；４７：１４９－１６１

１２ＨｅｌｄｉｎＣＨ．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｅｃｌｉｎｉｃａｌｕｓｅｏｆａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓｆｏｒＰＤＧＦａｎｄＴＧＦ－ｂｅｔａ．ＵｐｓＪＭｅｄＳｃｉ，２００４；１０９：１６５－１７８

１３ＬｅｅＹＭ，ＢａｅＭＨ，ＬｅｅＯＨ，ＭｏｏｎＥＪ，ＭｏｏｎＣＫ，ＫｉｍＷＨ，ＫｉｍＫＷ．Ｓｙｎｅｒｇｉｓ－ｔｉｃｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｉｎｖｉｖｏａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｂｙｔｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃ－ｔｏｒ－Ⅱａｎｄｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ．ＯｎｃｏｌＲｅｐ，２００４；１２：８４３－８４８

１４ＣａｎｔｏｎＡ，ＢｕｒｇｏｓＲ，ＨｅｒｎａｎｄｅｚＣ，ＭａｔｅｏＣ，ＳｅｇｕｒａＲＭ，ＭｅｓａＪ，ＳｉｍｏＲ．Ｈｅｐ－ａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｉｎｖｉｔｒｅｏｕｓａｎｄｓｅｒｕｍｆｒｏｍｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．ＢｒＪＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ，２０００；８４：７３２－７３５

１５ＹｉＷＨ，ＷｅｉＲＬ，ＣａｉＪＰ，ＬｉＹＬ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＶＥＧＦａｎｄＴＧＦ－β，ｉｎｏｒｂｉｔａｌｃａｖｅｒｎｏｕｓｈｅｍａｎｇｉｏｍａ．ＩｎｔＪＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ（ＧｕｏｊｉＹａｎｋｅＺａｚｈｉ），２００４；４（４）：２４７－２４９

１６ＷａｔａｎａｂｅＤ，ＴａｋａｇｉＨ，ＳｕｚｕｍａＫ，ＳｕｚｕｍａＩ，ＯｈＨ，ＯｈａｓｈｉＨ，ＫｅｍｍｏｃｈｉＳ，ＵｅｍｕｒａＡ，ＯｊｉｍａＴ，ＳｕｇａｎａｍｉＥ，ＭｉｙａｍｏｔｏＮ，ＳａｔｏＹ，ＨｏｎｄａＹ．ＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒＥｔｓ－１ｍｅｄｉａｔｅｓｉｓｃｈｅｍｉａ－ａｎｄｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－ｄｅｐｅｎ－ｄｅｎｔｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ，２００４；１６４（５）：１８２７－１８３５

１７Ｏｈｎｏ－ＭａｔｓｕｉＫ，ＨｉｒｏｓｅＡ，ＹａｍａｍｏｔｏＳ．Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎ－ｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｉｎａｄｕｌｔｍｉｃｅｃａｕｓｅｓｓｅｒｅｖｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙａｎｄｒｅｔｉｎａｌｄｅｔａｃｈｍｅｎｔ．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ，２００２；１６０（２）：７１１－７１９

１８ＧｒａｎｔＭＢ，ＡｆｚａｌＡ，ＳｐｏｅｒｒｉＰ，ＰａｎＨ，ＳｈａｗＬＣ，ＭａｍｅｓＲＮ．Ｔｈｅｒｏｌｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎＩｎｖｅｓｔｉｇＤｒｕｇｓ，２００４；１３：１２７５－１２９３

１９ＳｈｉｎｏｄａＫ，ＩｓｈｉｄａＳ，ＫａｗａｓｈｉｍａＳ，ＷａｋａｂａｙａｓｈｉＴ，ＭａｔｓｕｚａｋｉＴ，ＴａｋａｙａｍａＭ，ＳｈｉｎｍｕｒａＫ，ＹａｍａｄａＭ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｎｄｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｉｎａｑｕｅｏｕｓｆｌｕｉｄａｎｄｓｅｒｕｍｗｉｔｈｇｒａｄｅｓｏｆｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ．ＢｒＪＯｐｈｔｈａｌｍｏｌ，１９９９；８３：８３４－８３７２０ＳｙｄｏｒｏｖａＭ，ＬｅｅＭＳ．Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｌｅｖｅｌｓｉｎｖｉｔｒｅｏｕｓａｎｄｓｅｒｕｍｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｉｔｈｅｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔ－ｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．ＯｐｈｔｈａｌｍｉｃＲｅｓ，２００５；３７（４）：１８８－１９０

２１ＶｉｌｌｅｇａｓＢｅｃｅｒｒｉｌＥ，ＧｏｎｚａｌｅｚＦｅｒｎａｎｄｅｚＲ，ＦｅｒｎａｎｄｅｚＭｏｌｉｎａＦ，ＧａｌｌａｒｄｏＧａｌｅｒａＪＭ．ＧｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｌｅｖｅｌｓａｎｄＲＯＰ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，２００５；１１２（１２）：２２３８

２２ＬａｓｈｋａｒｉＫ，ＨｉｒｏｓｅＴ，ＹａｚｄａｎｙＪ，ＭｃＭｅｅｌＪＷ，ＫａｚｌａｕｓｋａｓＡ，ＲａｈｉｍｉＮ．Ｖａｓ－ｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｎｄｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｌｅｖｅｌｓａｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｌｅｖａｔｅｄｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｄｖａｎｃｅｄｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ，２０００；１５６：１３３７－１３４４２３ＳｈｉｈＳＣ，ＪｕＭ，ＬｉｕＮ，ＳｍｉｔｈＬＥ．ＳｅｌｅｃｔｉｖｅｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｏｆＶＥＧＦＲ－１ｐｒｅｖｅｎｔｓｏｘｙｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｔｉｎａｌｖａｓｃｕｌａｒｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ．ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ，２００３；１１２（１）２７－２９

２４ＬｅｓｋｅＤＡ，ＷｕＪ，ＭｏｏｋａｄａｍＭ，ＣｈｅｎＹ，ＦａｕｔｓｃｈＭＰ，ＨｏｌｍｅｓＪＭ，ＬａｎｉｅｒＷＬ．ＴｈｅＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｏｆＲｅｔｉｎａｌＶＥＧＦａｎｄＲｅｔｉｎａｌＩＧＦ－１ｍＲＮＡｗｉｔｈＮｅｏｖａｓｃｕｌａｒ－ｉｚａｔｉｏｎｉｎａｎＡｃｉｄｏｓｉｓ－ＩｎｄｕｃｅｄＭｏｄｅｌｏｆＲｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆＰｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ．ＣｕｒｒＥｙｅＲｅｓ，２００６；３１（２）：１６３－１６９

２５ＷｉｔｍｅｒＡＮ，ＢｌａｍｗｇｅｅｒｓＨＧ，ＷｅｉｃｈＨＡ．ＡｌｔｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆＶＥＧＦ－ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｈｕｍａｎｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎａａｎｄｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＶＥＧＦ－ｉｎｃｌｕｄｅｄｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｉｎｍｏｎｋｅｙ．ＩｎｖｅｓｔＯｐｈｔｈａｌｍｏｌＶｉｓＳｃｉ，２００２；４３：８４９－８５７

２６ＯｚａｋｉＨ，ＳｅｏＭＳ，ＯｚａｋｉＫ，ＹａｍａｄａＨ，ＹａｍａｄａＥ，ＯｋａｍｏｔｏＮ，ＨｏｆｍａｎｎＦ，ＷｏｏｄＪＭ，ＣａｍｐｏｃｈｉａｒｏＰＡ．Ｂｌｏｃｋａｄｅｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｓｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔｔｏｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙｐｒｅｖｅｎｔｒｅｔｉｎａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ，２０００；１５６：６９７－７０７

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