卫星细胞在骨骼肌修复中的研究进展_董学亮
收稿日期:2010-10-22
作者简介:董学亮(1985-),男,江西九江人,硕士研究生,研究方
向:中医骨伤。通讯作者:成羿(1957-),男,浙江杭州人,主任医师,硕士研究生
导师,
研究方向:骨关节疾病和颈腰椎疾病。4
讨论
面瘫又称
“歪僻”、“口眼歪斜”。中医认为劳作过度,机体正气不足,脉络空虚,卫外不固,风寒或风热之邪乘虚入侵阳明、少阳经脉中面部经络,致气血痹阻,经络失养,筋肉失于约束,导致的以口眼歪斜为主要症状的一种病证[2]
。经常规针刺20 30次,大多数病例即可好转或痊
愈。若病情重,病程长达3个月以上未见明显恢复者,我们称为难治性面瘫[4]
。
面瘫的病机,初起系颜面经络,气机不畅、经络阻滞,以致歪僻、目不合、引颊移口、缓不胜收。难治性面瘫则由于邪气入侵经络日久,治疗失当、津液不行,为雍痰浊。痰瘀
搏结,
久治不愈,形成正虚邪实,虚实夹杂之顽疾[3]
。《金匮要略·中风历节病脉证并治第五》称
:“寸口脉浮而紧,紧则为寒,浮则为虚;寒虚相搏,邪在皮肤;浮者血虚,络脉空虚;贼邪不泻,或左或右,邪气反缓,正气即急.正气引邪,
喁僻不遂。”这说明本病多由络脉空虚,风寒之邪侵袭人
体,逗留于经络之间,阻滞阳明少阳经络气血的循行,而致气血两亏,经脉肌肉失于荣养,经筋失养,纵缓不收,即可发生局部肌肉瘫痪不用的征象。
针刺以阳明经穴为主,加TDP 红外线照射治疗,采用以
循经远刺结合,以温通经络,疏散风寒[1]
,促使气血畅通,增
强神经组织的新陈代谢,减轻水肿,消除炎症和变性,改善和恢复其功能。另外患者病程较长,损气耗血,致使气血亏虚,故温针灸多气多血之腧穴足三里,起到强壮全身,调补气血的作用。气为血帅,血随气行,气得温则疾,气行则血亦行。通过多经穴位透穴,可以使脏腑与经络、经络与经络,腧穴与
腧穴之经气得以沟通交融,
弥补了常规取穴之不足,一针横透二穴,具有取穴少,减少进针疼痛,针感范围大,增强了经
络之间的联系[5-7]
。使多经同时得气,加强祛风活血通络的
作用,有利于祛邪外达,祛风牵正以笔者多年以来治疗面瘫的经验,此症治疗必须及时,治疗愈早效果愈佳。参考文献
[1]常英.针刺配合超短波治疗周同性面瘫48例疗效观察[J ].
新中医,
2003,35(9):41.[2]杜元灏,石学敏.中华针灸临床诊疗规范[M ]
.南京:江苏科学技术出版社,
2007:106.[3]鲍毅梅,刘松雨.针灸穴位透刺配合电针治疗顽固性面瘫30
例[
J ].中华实用医学,2003,5(6):108.[4]叶天申,谢文霞,张劲军.针灸加注射弥可保治疗顽固性面瘫
35例研究[J ].江西中医药,2003,3:40.
[5]陈晓琴,李瑛,赵凌,等.分期针刺治疗贝尔面瘫临床疗效评
价[
J ].辽宁中医杂志,2010,37(5):909-911.[6]苗茂,赵清树.“透刺经筋法”结合中药治疗顽固性面瘫临床
研究[J ].针灸临床杂志,
2004,20(11):35.[7]王珊玺,张卫华,董红凌,等.针刺为主综合治疗周围性面瘫
30例临床分析[J ].辽宁中医药大学学报,2010,12(4):194.
基础研究主页
中
华中医药学刊
卫星细胞在骨骼肌修复中的研究进展
董学亮1,成羿2,章婵娟
2
(1.浙江中医药大学第一临床医学院,浙江杭州310053;2.浙江中医药大学附属广兴医院,浙江杭州310006)摘
要:通过综述国内外肌卫星细胞的研究资料,对肌卫星细胞在骨骼肌修复中作用的总结。肌卫星细胞的
分子标志物的概述,能更好的在研究过程中对卫星细胞的鉴定。肌卫星细胞的特性研究能更有利于进一步研究
肌卫星细胞。探讨肌卫星细胞在骨骼肌修复作用中的激活机制和可能的增殖分化的信号通路,有助于针对性的促进骨骼肌损伤后的修复研究。肌卫星细胞的影响因素的研究中,发现有细胞因子、物理因素、中医药等,其中中医药做为一个积极的影响因子有待于进一步更广泛的展开研究。
关键词:肌卫星细胞;骨骼肌;修复
中图分类号:R285.5
文献标识码:A
文章编号:1673-7717(2011)03-0655-04
Study Progress of Muscle Satellite Cells in the Repair of Skeletal Muscle
DONG Xue-liang 1,CHENG Yi 2,ZHANG Chan-juan 2
(1.First Clinical Medical College of Zhejiang Chinese Meical University ,Hangzhou 310053,Zhejiang ,China ;2Affiliated Guangxing Hospital of Zhejiang Chinese Meical University ,Hangzhou 310006,Zhejiang ,China )
Abstract :Summary of muscle satellite cells by domestic and foreign research data on the muscle satellite cells in skeletal muscle the role of the summary.Muscle satellite cells in an overview of molecular markers can be better in the course of the identification of satellite cells.Characteristics of muscle satellite cells can be more conducive to further stud-y the muscle satellite cells.Of muscle satellite cells in skeletal muscle repair in the activation mechanism and the possible proliferation and differentiation signaling pathways ,contribute to the promotion of targeted repair of skeletal muscle inju-556
中华中医药
学刊
ry.Muscle satellite cells of factors,we found a cell factor,physical factors,Chinese medicine,including Chinese medi-cine as a positive influence on factors need to be further more extensive a study.
Key words:Muscle satellite cells;skeletal muscle;Repair
在生理状况下,骨骼肌是一种非常稳定的组织。当骨
骼肌受到物理损伤或者处于某种特殊疾病状况下,骨骼肌
能够快速地自我修复和再生,这种再生功能主要依赖于卫
星细胞的激活、增殖和分化。当受到损伤等刺激时,处于静
息状态的卫星细胞会被激活,并且最终分化、融合形成多核
的肌管细胞。卫星细胞的增殖和分化不仅能够增加肌纤维
数量,还可以改变肌纤维的类型,而卫星细胞的多潜能性还
可能通过转变为脂肪生成细胞,而增加肌内脂肪的含量,从
而改变肌肉愈合的质量。因此肌卫星细胞的深入研究,对
于肌组织修重建等医学基础研究和临床治疗有重大的意
义,和广阔的前景。
1卫星细胞的起源及其分子标志物
1.1起源在很长一段时间里,人们都认为卫星细胞是骨
骼肌的定向祖细胞,负责骨骼肌的生长与损伤后的再生。
骨骼肌的发生包括肌肉前体细胞的生成和前体细胞的分
化、成熟。肌肉前体细胞存在于体节中;体节为轴旁中胚层
的来源。随着体节的成熟,生肌祖细胞只限于生皮肌节,位
于体节的背外侧。由肌原皮肌节分化成最初的肌纤维,从
而形成了骨骼肌随后,在骨骼肌的发育过程中,生皮肌节的
中央部引起了Pax3和Pax7的表达,并贯穿了胚胎发生的
整个过程[1]。胚胎发育后期,在肌纤维周围的细胞可以表
达Pax7[2]。通过条件性基因敲除(Cre/loxP)实验发现骨骼
肌卫星细胞由体轴下表达Pax3的细胞引起。与此同时,大
量的群旁细胞(side populations,SP)也来自体轴下的体节
并可能与卫星细胞来自于相同的组织[3]。
1.2分子标志物在卫星细胞发现的很多年里,电镜技术
一直是鉴定卫星细胞惟一的权威性的技术,最初鉴定卫星
细胞都通过电镜根据其位于肌纤维的肌膜和基底膜之间这
一特殊的解剖结构进行,这给人们的研究带来极大的不便,
现在可以通过其特有的分子标志对其鉴定。静息期的卫星
细胞表达的pax7,M-cadherin,CD34和低水平的
myf5[4-5],可以对静息期的卫星细胞进行鉴定。在这些分
子之中以pax7最为重要,虽然它的表达对个体出生前的肌
肉的发育和形成并不重要,但对于个体出生后卫星细胞群
的维持却是必须的[6]。卫星细胞同样表达血管细胞粘附
分子VCAM-1,肝细胞生长因子受体c-me,t神经细胞粘
附分子NCAM-1(或CD56),Foxk1,syndecans-3和syn-
decans-4[7-8],均可作为鉴定卫星细胞的分子标记。静止
期的卫星细胞一旦被激活,MyoD的表达便迅速上调,随后
共表达Pax7,M-cadherin和Myf5,接着细胞进入分裂期开
始表达PCNA(增殖细胞核抗原),随着Myogenin的表达,细
胞进入生肌分化阶段,最后骨骼肌结构基因ac-tin和My-
HC的表达[9],标志着生肌分化进入最后时期。上述这些
特异性基因均可作为鉴定卫星细胞增殖期的标志。还有一
些基因仅在体内的卫星细胞中表达,不在体外培养的成肌
细胞表达,如IgSF4,neuritin,Hoxc10,TcR-b,Klra18,Itm2a,
MEGF10和G0S2,可用于体内卫星细胞的鉴定[10]。用于鉴
定鼠的分子标记并不能完全用于鉴定人的卫星细胞,例如,
CD34不能用来标记人的卫星细胞,而M-cadherin用来鉴
定人的卫星细胞其一致性也不如鼠;鉴定人的肌肉卫星细
胞最可靠的分子标志是神经细胞粘附分子(CD56)[11]
2卫星细胞的特性
2.1多向分化性长期以来卫星细胞被认为是单能成肌
细胞,只能朝着骨骼肌的方向分化,但是现在已有大量的证
据表明肌肉干细胞包括卫星细胞具有多向分化潜能。Sac-
co[12]通过利用克隆分析证实卫星细胞的确是干细胞、能够
自我更新,从而澄清了相关问题。他们将一个表达荧光素
酶的卫星细胞移植进了小鼠的肌肉中,发现它能够大量增
殖,有助于肌肉纤维的形成,而且可以被再次移植。王凡
等[13],在SD大鼠骨骼肌卫星细胞的成脂、成骨、成心肌样
细胞的诱导研究中结果表明,骨骼肌卫星细胞具有多向分
化潜能,具有分化为脂肪细胞、成骨细胞、心肌样细胞的特
性,可以做为一种良好的临床组织工程学的种子细胞。
2.2不均一性卫星细胞存在不均一性。Beauchamp
等[14]利用分子标记标记卫星细胞再次验证了年幼小鼠的
卫星细胞群存在不均一性。生肌祖细胞同样在增殖率和克
隆率方面也存在着不均一性。来自不同肌肉组织的卫星细
胞也存在不均一性。比如头部的肌肉其再生能力明显不如
四肢的肌肉。McLoon等[15]研究发现不像四肢肌肉的卫星
细胞那样,只有在受损的情况下才被激活,眼外肌中的卫星
细胞长期处于激活状态,增殖并向未受损的肌纤维提供细
胞核。这种现象可能是由于其处的特殊的环境造成的,但
也有可能因为它们的生肌祖细胞本身就不同,反映出胚胎
期不同的发育过程。但是,即使是同一体节来源的肌肉也
存在不均一性。Relaix等[16]利用在pax3位点携带EGFP
报告基因的基因突变小鼠对此进行研究,提供了当前关于
不同肌肉之间不均一性的最好证据,例如,后肢之中只有股
薄肌含有足够数量的表达EGFP(Pax3)的卫星细胞,而在
上身多数肌肉中都含有大量的表达EGFP(Pax3)的卫星细
胞,这些细胞中的大多数同时表达Pax7。尽管对报告基因
能否能够真实的反映Pax3在成年组织中的表达还存在着
争论,但有一点可以明确的是卫星细胞之间的确存在不均
一性。
3卫星细胞的激活
在成体的肌细胞中,卫星细胞处于静息状态,而不进行
有丝分裂,即使在某些特定的情况下,也只有有限的基因表
达和蛋白合成。然而,当受到外界刺激时,诸如损伤、牵拉
或者肌肉萎缩引起的病变时,卫星细胞却能够被激活[17]。
在静息状态和增殖的过渡时期,到底是什么因素引起了卫
星细胞的激活,至今没有明确的研究结果。细胞内在的信
号可能由细胞膜内的1-磷酸-鞘氨醇(sphingosine\|1\|
phosphate,S1P)引起。S1P是细胞膜磷脂代谢的中间产
物,是卫星细胞进入细胞周期和骨骼肌的再生所必需
的[18]。外界对于肌纤维的机械牵拉会引起大量的细胞内
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中
华中医药学刊
信号转导,包括NO 的合成,继而引发了肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor ,HGF )的释放,从而引起了卫星细胞的激活,这意味着HGF 的受体c \|met 可能是卫星细胞
激活早期的表达基因[19]
。NO 还促进了雌激素抑制剂(Follistatin )的表达[20],而Follistatin 可能导致卫星细胞退出静息状态。细胞微环境中的生长因子是第三类激活卫星细胞的因素。事实上,成纤维细胞生长因子(fibroblast-growth factor ,FGF )能够引发MAPK 信号转导,而p38α/βMAPK 信号可以激活卫星细胞并调节卫星细胞的静息状
态
[21]
。4卫星细胞增殖分化的信号通路
参与骨骼肌损伤修复的卫星细胞增殖/分化的正确调
控对创伤修复有重要意义。多种信号转导通路在此过程中发挥作用,不同的生长因子通过不同的信号转导通路抑制或诱导成肌细胞的定向分化。胚胎期和成人期肌肉的形成过程非常相似,
当卫星细胞受到负重和创伤等外界因素的刺激后便会进入细胞周期。对胚胎时期肌肉形成起关键作用的信号调节通路像Wnt 、
Notch 和Myostatin 就会像在胚胎时期那样重新调节出生后肌肉的形成。4.1
Wnt 信号通路
Polesskaya 等[22]研究发现在受伤后
再生的骨骼肌组织中可以检测到wnt 成形素的转录物,卷
曲形受体和wnt 信号通路的对抗物Sfrp (secreted frizzled -related proteins )的存在。ThomasRando 的研究团队一直从事于年龄影响受损肌肉再生能力的机制的研究工作,发现小鼠随年龄的增长其生肌能力的下降与wnt 信号通路水平的提高有关,而通过抑制Sfrp3或dickkopf1(potent inhibitor-sofWntcanonicalsigna -ling )的表达进而抑制wnt 信号通路
可以使随年龄的增长丧失的肌肉再生能力得到恢复[23]
。CharlottePeterson 通过研究发现敲除wnt10b 基因的小鼠的成肌细胞成肌分化能力增加,并通过进一步的研究发现其原因归于敲除wnt10b 后wnt7b 的补偿性增加,而且这种补偿性增加激活了Creb 蛋白可能参与的非经典的wnt 信号通路[24]
。
4.2Notch 信号通路
Notch 信号通路是调节胚胎期和出
生后卫星细胞的激活与增殖的一个重要的信号通路。Con-boy [25]通过研究发现,随年龄的增长Notch 信号通路调节水平的降低是导致卫星细胞再生能力降低的重要原因。Reshma Taneja 指出在鼠的卫星细胞中bHLH 转录因子Stra13(stimulated by retinoic acid 13)可以对抗Notch 信号通
路并调节肌肉再生期增殖与分化间的平衡[26]
。Addolorata Pisconti [27]则指出syndecan3(Sdc3)作为一个新的调节因子参与Notch 信号通路的调节,缺失Sdc3基因可以诱导小鼠成肌祖细胞定型与分化的提前。而关于Sdc3基因在Notch 信号通路中的具体作用仍有待于进一步的研究。4.3
Myostatin
Myostatin 属于转移生长因子(transforming
growthfactorb ,TGFb )家族的一员,可通过限制卫星细胞的增殖与分化来对抗肌肉的再生。Victoria Siriett 和RaviKam-badur 认为可以利用Myostatin 的拮抗物Mstn -ant1来对抗Myostatin 在小鼠生肌过程中的抑制作用。使用Mstn -ant1可以增加受激活的卫星细胞的数量和提高它们的转移潜
力,同时调节pax7基因的表达[28]
。而拮抗Myostatin 基因
给少肌症的治疗提供了一个策略:可以通过拮抗Myostatin 基因治疗临床由于年龄增长导致的少肌症。5影响卫星细胞的因素5.1
影响因子
调节肌卫星细胞激活、增殖、分化的生长
因子主要有胰岛素样生长因子1(insulin \|like growth fac-
tor1,IGF \|1)、成纤维生长因子(fibroblast growth fac -tor ,FGF )、生肌调节因子(myogenic regulatory factors ,MRFs )、表皮生长因子(Epidermal growth factor ,
EGF )、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor ,HGF )、血小板源性生长因子
(Platelet derived growthfactor ,PDGF )、转化生长因子(Transforming growthfactor ,TGF )等。IGF \|1不仅可促使细胞分裂增殖,进而修复损伤部位,还可影响生肌调节因子的功能,从而在肌肉修复中起着重要作用。给细胞注射IGF \
|1,可引起卫星细胞增殖的提高和肌肉数量的增加[29]
。FGF 是由发育中的组织细胞自身表达的,对卫星细胞的增殖能力最强,且表明其增殖能力在达到最佳状态后保持不
变,
并不随浓度的增加无限增大[30]
。HGF 是卫星细胞有力的促分裂剂和趋化剂。它可以促进DNA 的合成、抑制细胞的分化;从而引起细胞群形状的改变,最终导致更多肌纤维的形成。PDGF 是血清中一种主要的有丝分裂原,能促进肌卫星细胞的分化。TGF \|β可能会抑制骨骼肌卫星细胞的增殖,抑制成肌细胞分化。这些生长因子可以通过不同的途径促进肌卫星细胞分裂增殖,引起肌肉肥大。生肌调节因子(myogenic regulatory factors ,MRFs )是肌肉形成的主要调节因子,可以使胚胎干细胞向成肌细胞方向分化,调节整个生肌程序的基因表达。MRFs 在成肌细胞增殖与分化过程中的重要作用已被肯定,但它们在体内的信号途径还不十分清楚,最近的研究揭示了MyoD 作为主控基因启动
生肌分化程序的调控机制[31]
。生肌调节因子是调节肌细胞生成最重要、
最关键的调控因子,它们在体内受多种因素影响,同时也通过对其他因子的调节指导肌细胞的生长,其分子调控机制仍是今后研究的重点
5.2物理因素罗丽[32]等观察低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠肌卫星细胞增殖活性的影响研究中显示低功率激光能增强急性骨骼肌顿挫伤大鼠肌卫星细胞增殖活
性,
从而加速骨骼肌的再生,促进损伤修复。危小焰等
[33]
不同频率张应变刺激对骨骼肌卫星细胞
生长的影响研究中表明
:“机械张应变刺激促进骨骼肌卫星细胞的增值能力和MGF mRNA 的表达,
且与张应变刺激频率有关,其中1HZ 的刺激频率最适宜。”卫星细胞影响因素的研究,可以更有效的了解卫星细
胞的生物特性,更好的利用影响因素指导临床对骨骼肌损伤的研究。但是能够促进骨骼肌愈合的中医药对卫星细胞的影响研究尚处于研究的开始阶段,有着广阔的前景,可以为以后临床应用治疗软组织损伤的中医药开发提供科学研究的基础。6
总结与展望
最近十多年,随着细胞生物学和分子生物学的发展,新的试验工具的不断出现,该领域的研究得到了飞速的发展,不断有新的理论和研究成果出现,同时也对一些传统的观点和看法提出了挑战,对卫星细胞的不均一性等问题,仍需
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中华中医药
学刊要更深的研究。(1)卫星细胞的激活增殖成肌的研究进展
进入了空前的水平,对其机制有了初步的认识,信号通路有
待进一步更深入的研究。为今后进一步诱导肌卫星细胞进
行修复软组织提供理论依据。(2)卫星细胞的影响因素能
够更好的指导我们了解并应用卫星细胞于临床和研究,卫
星细胞的影响因素包括细胞因子、物理因素、中医药等,而
传统中医药对肌卫星细胞的作用机制和影响水平的研究处
于研究的起始阶段,有待进一步更深入的展开。
参考文献
[1]Gros J,ManceauM,Thome V,et al.A common somitic origin
forembryonicmuscle progenitorsand satellite cells[J].Nature,
2005,435:954-958.
[2]Relaix F,RocancourtD,Mansouri A,et al.A Pax3/Pax7\|de-
pendent population of skeletalmuscle progenitor cells[J].Na-
ture.2005,435:948-953.
[3]Schienda J,EnglekaKA,Jun S,etal.Somitic origin of limbmus-
clesatellite and side population cells[J].Proc NatlAcad Sci-
USA,2006,103:945-950.
[4]Seale P,Sabourin LA,Girgis-Gabardo A,et al.Pax7is required
for the specification of myogenic satellite cells[J].Cell.2000,
102(6):777-786.
[5]Zammit PS,Partridge TA,Yablonka-Reuveni Z.The skeletal
muscle satellite cell:the stem cell that came in from the cold
[J].Histochem Cyto-chem,2006,54(11):1177-1191.
[6]Relaix F,Montarras D,Zaffran S,et al.Pax3and Pax7have dis-
tinct and overlapping functions in adult muscle progenitor cells
[J].CellBiol,2006,172(1):91-102.
[7]Garry DJ,Yang Q,Bassel-Duby R,et al.Williams RS.Persis-
tent expression of MNF identifies myogenic stem cells in postna-
tal muscles[J].Dev Biol,1997,188(2):280-294.
[8]Cornelison DD,Filla MS,Stanley HM,et al.Syndecan-3and
syndecan-4specifically mark skeletal muscle satellite cells and
are implicated in satellite cell maintenance and muscle regenera-
tion[J].Dev Biol,2001,239(1):79-94.
[9]Zammit PS,Golding JP,Nagata Y,et al.Muscle satellite cells a-
dopt divergent fates:a mechanism for self-renewal?[J].Cell
Biol.2004,166(3):347-357.
[10]Seale P,Ishibashi J,Holterman C,et al Muscle satellite cell-
specific genes identified by genetic profiling of Myo D-defi-
cient myogenic cell[J].Dev Bio,l2004,275:287-300.
[11]ThornellLE,LindstromM,RenaultV,et al.Satellite cells and train-
ing in the elderly[J].Scand J Med ccisports,2003,13:48-55.
[12]Sacco肌肉卫星细胞被证实是干细胞[J].生物学通报,
2009,44(1):5-6.
[13]王凡,石钊,SD大鼠骨骼肌卫星细胞的成脂、成骨、成心肌
样细胞的诱导[J].RegionalAnat&Operative Surg,2009,18
(6):442-442.
[14]Beauchamp JR,Heslop L,Yu DS,et al.Expression of CD34
and Myf5defines the majority of quiescent adult skeletal muscle
satellite cells[J].CellBiol,2000,151:1221-1234.
[15]McLoon LK,Rowe J,Wirtschafter J,et al.Continuous myofiber
remodeling in uninjured extraocular myofibers:myonuclear turn-
over and evidence for apoptosis[J].MuscleNerve,2004,29
(5):707-715.
[16]Relaix F,Montarras D,Zaffran S,et al.Pax3and Pax7have
distinct and overlapping functions in adult muscle progenitor
cells.[J].CellBiol,2006,172(1):91-102.
[17]Charge SB,RudnickiMA.Cellular andmolecular regulation of-
mus-cle regeneration[J].PhysiolRev,2004,84:209-238.
[18]NagataY,PartridgeTA,MatsudaR,etal.Entry ofmuscle satellite-
cells into the cell cycle requires sphingolipid signaling[J].
JCellBiol,2006,174:245-253.
[19]Wozniak AC,Anderson JE.Nitric oxide\|dependence of satel-
litestem cell activation and quiescence on normal skeletalmuscle
fibers[J].DevDyn,2007,236:240-250.
[20]PiscontiA,Brunelli S,DiPadovaM,etal.Follistatin induction
bynitric oxide through cyclicGMP:a tightly regulated signaling
pathwaythat controlsmyoblast fusion[J].CellBiol,2006,172:
233-244.
[21]Perdiguero E,Ruiz\|BonillaV,Gresh L,etal.Genetic analysis
ofp38MAP kinases inmyogenesis:fundamental role ofp38alpha
in ab-rogatingmyoblastproliferation[J].Embo J,2007,26:
1245-1256.
[22]PolesskayaA,Seale P,Rudnicki MA.Wnt signaling induces the
myogenic specification of resident CD45+adult stem cells dur-
ing muscle regeneration[J]Cell,2003,113(7):841-852.
[23]Brack AS,Conboy MJ,Rando TA,et al.Increased Wnt signaling
during aging alters muscle stem cell fate and increases fibrosis
[J]Science,2007,317(5839):807-810.
[24]VertinoAM,Taylor-Jones JM,LongoKA,et al.Wnt10b defi-
ciency promotes coexpression of myogenic and adipogenic pro-
grams in myoblasts[J].MolBiolCell,2005,16:2039-2048.
[25]Conboy IM,Conboy MJ,Wagers AJ,et al.Rejuvenation of aged
progenitor cells by exposure to a young systemic environment
[J].Nature,2005,433:760-764.
[26]Sun H,Li L,Taneja R,et al.Stra13regulates satellite cell acti-
vation by antagonizing Notch signaling[J].CellBiol,2007,177
(4):647-657.
[27]Pisconti A,Brunelli S,Di Padova M,et al.Follistatin induction
by nitric oxide through cyclic GMP:a tightly regulated signaling
pathway that controls myoblast fusion[J].CellBiol,2006,172
(2):233-44.
[28]SiriettV,KambadurR,SharmaM,et al.Antagonism of myostatin
enhances muscle regeneration during sarcopenia[J].MolTher,
2007,15:1463-1470.
[29]Bowers DC,Fan S,Walter KA,et al.Scatter factor/hepatocyteg-
rowth factor protects against cytctoxic death in human glioblas-
tomavia phosphatidylinositol3kinase andAKT dependentpath-
ways[J].CancerRes,2000,60(15):4277-4283.
[30]邵素霞,马洪骏,赵春芳,等.EGF、BFGF、PHGF对大鼠骨骼
肌卫星细胞增殖的影响[J].细胞生物学杂志,2004,26(4):
425-427.
[31]Keren A.Tamir Y,Bengal E.The p38MAPK signaling path-
way:a major regulator of skeletal muscle development[J].Mol
Cell Endocrinol,2006,252(1-2):224-230.
[32]罗丽,张林,董宇.观察低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫
伤大鼠肌卫星细胞增殖活性的影响[J].体育科学,2007,27
(7):55-58.
[33]危小焰,史仍飞等不同频率张应变刺激对骨骼肌卫星细胞
生长的影响[J]体育科学,2008,28(6):52-56.
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骨骼肌卫星细胞的研究现状
骨骼肌卫星细胞的研究现状 阎振鑫S111666(四川大学生命科学学院细胞生物学专业成都) 摘要:肌卫星细胞是目前公认的骨骼肌干细胞,负责骨骼肌生长和损伤修复。干细胞研究 成为医学研究领域的热点,肌卫星细胞移植成为治疗骨骼肌损伤萎缩和心肌坏死的新的治疗方案,具有广阔的前景。肌卫星细胞的体外培养中大多采用胰酶胶原酶两步消化法得到细胞悬液。在原代培养中最关键的是细胞的纯化。防止成纤维细胞的污染,主要是采用查速铁壁的方法将细胞分离。胰岛素多肽家簇、MyoD转录因子家族和MEF2家族等对肌肉的形成起重要的调控作用。 关键词:骨骼肌卫星细胞体外培养干细胞移植 肌卫星细胞是小的单核梭形细胞,是源于胚胎中胚层的干细胞,在正常骨骼肌中,它位于基底膜与肌纤维浆膜之间,处于静止状态。当受到外界刺激,在应激状态下可以分裂、增生,形成新的肌纤维,是骨骼肌再生的储备力量,负责骨骼肌的生长和损伤修复。因此,肌卫星细胞特有的成肌能力倍受重视[1-4]。目前,干细胞研究成为医学领域研究的热点,肌肉干细胞因直接参与分化骨骼肌而受世人关注。胚胎和成体内都存在肌肉干细胞,成人体内存在两类具有干细胞样特性的细胞,一类称为卫星细胞(Satellite Cells,SC)也叫成肌祖细胞(Myogenic Progenitor Cell,MPC),另一类称为肌源干细胞(Muscle Derived Stem Cell,MDSC),也叫群旁细胞(Side Population S,SP),后者在数量上远少于前者。目前公认的肌肉干细胞主要是指肌肉卫星细胞[5]。 近年来,国外有报道将肌卫星细胞移植到冻伤的骨骼肌中,可改善肌肉功能[6]。组织缺损或器官功能障碍是人类保健中发生频繁、危害性大、花费高的问题之一。近年来随着组织工程技术的发展,应用肌组织工程技术,进行骨骼肌再生代替以往的手术方法修复动力性瘫痪,以其特有的优点避免了以往手术的缺陷,为瘫痪肌肉的动力修复开创了一个崭新的研究前景。另外,骨骼肌可能会通过分泌低分子量细胞因子即骨骼肌源性抑瘤物显著抑制肿瘤细胞生长[7-10]。现就肌卫星细胞的研究现状作一综述。 1肌卫星细胞的体外培养 1961年Mauro首先发现了肌卫星细胞,并推测肌卫星细胞实质上是一种处于休眠状态下的成肌细胞[11],是肌细胞核的一种来源。肌卫星细胞作为肌组织工程技术的种子细胞,它的体外培养、鉴定及生物学特性已有大量实验研究,取得了显著的成果[ 12 ]。培养肌卫星细胞的材料来源,目前多数取自兔、鼠、犬、鸡等的肌肉组织,人体肌卫星细胞的培养已有报道,培养方法多采用胰酶、胶原酶分步消化,分离出单个成肌细胞,通过差速贴壁法去除混杂的成纤维细胞,再进行单层细胞培养。在这些步骤中纯化卫星细胞防止纤维细胞的污染是关键,在这个步骤中较好的做法是:采用PrePlate差速贴壁法进行细胞纯化,去除杂质细胞的污染。将细胞接种于明胶包被的培养瓶中培养2h,贴壁细胞为P1P;未贴壁细胞悬液转皿培养12h,贴壁的细胞为P1P2;未贴壁细胞悬液再转皿培养24h,贴壁的细胞为P1P3,未贴壁细胞悬液转皿培养24h,贴壁的细胞为P1P4;再次将未贴壁的细胞悬液转皿培养24小时,贴壁的细胞为P1P5。P1P5培养3d后换液,以后隔天换液1次,倒置显微镜下观察,
肌肉卫星细胞
肌肉卫星细胞是骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间的具有增殖分化潜力的肌源性细胞。它们在一般情况下是处于静息状态的,当被激活后,具有增殖分化、融合成肌管、再形成肌细胞的能力。在那里它们通过形成与肌肉纤维融合的先驱细胞来对损伤做出反应。有研究报告说,它们能充当干细胞,但卫星细胞群的混合性质意味着,它们的干细胞身份难以证明。” “最新一期Nature刊登由美国斯坦福大学医学院的Sacco等人的研究结果:研究小组通过利用克隆分析证实卫星细胞的确是干细胞、能够自我更新,从而澄清了相关问题。他们将一个表达荧光素酶的卫星细胞移植进了小鼠的肌肉中,发现它能够大量增殖,有助于肌肉纤维的形成,而且可以被再次移植。因此断定肌肉卫星细胞也是一种干细胞。” 肌肉中肌肉卫星细胞非常多。我们在进行性肌营养不良的肌肉病变中很容易发现大量的由卫星细胞分化而来的再生细胞。然而,这些干细胞中缺乏、缺损某些膜蛋白基因。因此,即使发生再生,也只能再生膜功能缺损肌纤维,免不了肌纤维变性坏死的命运。 我们实验室的研究重点是,如何保护膜蛋白缺损的肌纤维,而不是通过基因治疗,如何根治肌营养不良。因为目前世界上哪一个实验室也做不到这一点,某些研究成果,即使在动物身上似乎有效,但人身上还是没有得到证实。 在肌肉修复功能 当肌肉细胞进行损伤,静止卫星细胞从基底膜下方的释放。他们被激活,并重新进入细胞周期。这些分裂的细胞被称为“过境放大池”前接受生肌分化,形成新的肌管(有丝分裂后)。也有证据表明这些细胞能够与现有的肌纤维融合,促进生长和修复。 肌肉再生的过程,涉及相当大的重塑细胞外基质,并发生了广泛的破坏,是不完整的的。肌肉存款瘢痕组织成纤维细胞内,这可能削弱肌肉的功能,是一个的重要组成部分肌营养不良症的病理。 卫星细胞增殖肌肉损伤(西尔,等,2003),并形成新的肌纤维,通过对胎儿肌肉的发育(帕克等人,2003年)的过程类似。经过多次细胞分裂,卫星细胞开始与周边核保险丝损坏的肌管,并进行进一步的分化和成熟,作为标志(帕克等,2003)。 IGF - 1所描述的第一个角色之一是其在卫星细胞的增殖和分化的参与。此外,骨骼肌中IGF - 1的表达能力扩展激活卫星细胞的增殖(Charkravarthy,等,2000),增加和延长beneficaleffects老化的肌肉。 评述:Mourkioti和Rosenthal(2005),免疫学的发展趋势,第26卷,第1 号霍克和加里(2001),应用生理学杂志,19卷,第534-551 可塑性和治疗中的应用卫星细胞在体外或体内最小的刺激后,将经历一个生肌分化。
试验一细胞和组织的适应损伤与修复
实验一 细胞和组织的适应、损伤与修复 一、实验目的 1. 掌握细胞水肿、脂肪变性、玻璃样变性的大体和镜下标本的病变特征 2.掌握不同类型坏死的大体表现 3. 掌握肉芽组织的形态、结构 二、实验内容 (一)大体标本观察 1.脑萎缩:脑体积缩小、重量减轻,脑回变窄,脑沟变宽。 2.心脏萎缩:心脏体积缩小,重量减轻,呈深褐色或棕褐色。心脏表面的冠状动脉呈蛇行状迂曲,切面心壁变薄。 3.心脏肥大:高血压性心脏病时,心脏重量增加,左心室心肌代偿性肥大,左心室壁增厚,可达2.0cm ,乳头肌、肉柱增粗。 4. 肾细胞水肿:肾脏肿胀,包膜紧张,重量增加;切面隆起,边缘外翻;灰白混浊,失去正常光泽,似沸水烫过。 5.肝脂肪变性:肝脏增大,边缘钝圆,包膜紧张;切面稍隆起,边缘外翻;色淡黄、质软、有油腻感。 6.脾凝固性坏死:脾的近表面区域见一个或多个边界清楚、锥体形的梗死区(凝固性坏死),锥体的底位于脾表面,稍凹陷,尖端指向脾门。切面见呈梗死灶呈楔形,土黄色或灰白色,均匀一致,质致密而干燥。 7. 淋巴结干酪样坏死:淋巴结体积增大,切面正常淋巴结结构消失。新鲜干酪样坏死为淡黄色,质地松软、细腻,状似干奶酪样或豆腐渣样(固定后及陈旧性干酪样坏死呈灰白色)。 脑回变窄 脑沟变宽
8.足干性坏疽:足自其远端起始发生凝固性坏死,坏死组织干固皱缩,呈黑褐色,与周围健康组织之间有明显的分界线。 9.足湿性坏疽:足明显肿胀,湿润。呈暗绿或污黑色,与正常组织间无明显分界线。 10.肺脓肿(液化性坏死):肺切面可见单房之脓肿,脓液已流失,腔较大,边界清楚,有一较厚的脓肿壁,由灰白色的纤维结缔组织构成。 (二)病理切片观察 1. 肾细胞水肿:首先找到肾小体,区分肾小体周围的近曲小管和远曲小管。观察:近曲小管上皮细胞体积增大,细胞界限不清,凸出于腔内,以致管腔狭小而不规则;胞浆内有伊红染色的颗粒,颗粒细小,大小较一致。部分胞浆已崩解脱落入管腔,细胞核清晰。肾间质中毛细血管受挤压。 2.肝细胞水肿:此为急性普通型病毒性肝炎之切片。肝细胞因胞浆内水含量增多而明显变大,胞浆淡染,称胞浆疏松化;有的肝细胞胞浆透明,称气球样变。肝细胞核的形态大致正常。肝窦受压变狭窄。 3. 肝脂肪变性:肝小叶的结构尚存在(肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列)。肝细胞体积增大、变圆,胞浆内出现了大小不等、边界清楚的脂肪滴空泡(该空泡处原为脂滴,制作石蜡切片时被有机溶剂溶去)。有的空泡细小、量多,分布在核周围,有的融合成一个大脂滴空泡,将肝细胞核压向边缘,形似脂肪细胞。肝窦受压、变狭窄。 4.肉芽组织:肉芽组织内有大量新生的毛细血管,内皮细胞肿胀;毛细血管之间为纤维母细胞和各种炎细胞,纤维母细胞胞体呈圆形、椭圆形或星芒状,胞浆丰富,略显嗜碱性,胞核体积大,染色淡,可有1~2个核仁;炎细胞以巨噬细胞为主,也有多少不等的中性粒细胞及淋巴细胞。 5. 结缔组织玻璃样变:玻璃样变性的结缔组织,纤维细胞明显减少,胶原纤维变粗,彼此融合,形成均质的梁状或片状粉染、半透明的玻璃样物质。 6. 血管壁玻璃样变:常见于高血压病时的细动脉,如脾中央动脉、肾入球小动脉等。此为血浆蛋白渗入内膜,在内皮下凝固,形成均匀红染的无结构状物质,使血管壁增厚、变硬,管腔狭窄甚至闭塞,又称细动脉硬化, 7.宫颈腺体鳞状上皮化生:宫颈管粘膜部分粘液腺泡腺腔尚可辩认。部分宫颈管粘膜固有的柱状上皮被复层鳞状上皮取代,鳞状细胞分化成熟,腺泡腔消失,细胞团周围有完整基底膜。腺泡之间结缔组织内有慢性炎细胞浸润。
细胞组织的适应、损伤与修复
怀化医专《病理学与病理生理学》教案编号
第一章细胞、组织的适应、损伤与修复 概念: 适应(adaptation): 指细胞或由其构成地组织、器官能够耐受内、外环境中各种有害因子的刺激作用而得以存活的过程。形态上表现为萎缩、肥大、增生、化生。 损伤(injury): 指细胞和组织遭受内、外环境不能耐受的有害因子的作用时即可发生损伤。分为可复性损伤和不可复性损伤。 引起变性或死亡与有害因子的强度和性质及受累组织和细胞的种类有关。常温下大脑缺氧后能复苏的时间为5~10分钟,肝:30~35分钟,肺:60分钟,肾:60~180分钟。 第一节细胞和组织的适应与损伤 一、细胞和组织的适应。 (一)肥大(hypertrophy) 细胞、组织和器官的增大。可分为生理性肥大和病理性肥大。 1.代偿性肥大细胞肥大及其组成的组织和器官体积增大,重量增加,功能增强。
2.内分泌性肥大由激素引发的肥大称内分泌性肥大。如:妊娠期子宫和哺乳期乳腺的肥大。 代偿而肥大的器官超过其代偿限度时便会失代偿。如:肥大心肌的失代偿→心衰。 假性肥大:组织、器官的细胞(实质)萎缩时,常继发其间质(主要是脂肪组织)增生,有时使组织、器官的体积比正常还大,称假性肥大。 发育不全(hypoplasia): 器官先天的部分性和完全未发育所致的体积小分别称为发育不全和不发育(agenesis)。 (二)增生(hyperplasia) 指实质细胞数目增多。分为代偿性增生(如:低钙血症引发的甲状旁腺增生);内分泌性增生(如:妊娠期的子宫,哺乳期的乳腺);再生性增生。 受机体调控的细胞增生在引发因素去处后便可停止,而肿瘤细胞属于失控性增生,但是过渡增生的细胞有可能演变为肿瘤性增生。(如:宫颈上皮非典型增生)。 (三)萎缩(atrophy)
细胞和组织的适应、损伤与修复
细胞和组织的适应、损伤与修复 第一节适应 在环境发生变化时,机体的细胞和组织为了避免损伤,可通过改变自身的代谢、功能和形态结构以适应变化的环境,与之协调的过程称为适应。在形态学上的改变表现为萎缩、肥大、增生和化生。 (一)萎缩 1.概念发育正常的器官、组织体积变小称为萎缩。通常是由于该器官的实质细胞体积缩小所致,有时也可因细胞数目减少引起,或二者兼有。萎缩有生理性和病理性之分。病理性萎缩有的表现为全身性萎缩,如消化道慢性梗阻;有的表现为局部组织器官萎缩,如动脉粥样硬化引起心、脑、肾等器官萎缩。此外,萎缩又可分为:①营养不良性萎缩;②废用性萎缩;③压迫性萎缩;④神经性萎缩;⑤内分泌性萎缩等。 2.病变萎缩的器官体积变小、重量减轻、颜色变深、质地变韧、包膜增厚。光镜下萎缩的细胞体积变小或数目减少,或两者兼有。胞浆常深染,核浓缩。心肌萎缩时,其胞浆内可出现脂褐素。 3.后果萎缩一般是可复性的,如原因持续存在,萎缩的实质细胞最后消失。 (二)肥大 概念:细胞体积增大,使该器官、组织体积增大,称为肥大。 一般可分为生理性肥大和病理性肥大两类。病理情况下,例如高血压病,左心负荷加重,心肌纤维体积增大,属代偿性肥大。肥大有时需与实质细胞萎缩、间质增生引起的假性肥大区别。 (三)增生 概念:细胞数量增多,使该组织、器官体积增大,称为增生。 增生也有生理性增生和病理性增生之分。肥大和增生常同时存在,也可单独存在。 (四)化生 1.概念化生是指一种已分化成熟的组织细胞,转化为另一种相似性质的、分化成熟的组织细胞的过程。化生是一种可复性病变,原因去除后大多可恢复。 2.类型 (1)鳞状上皮化生:气管及支气管的假复层柱状纤毛上皮、胆囊粘膜上皮、宫颈粘膜上皮、肾盂的移行上皮等在慢性炎症时转化为鳞状上皮。 (2)肠上皮化生:慢性胃炎时,部分胃粘膜上皮转化为肠粘膜上皮,出现杯状细胞、潘氏细胞及具有纹状缘的吸收上皮甚至形成小肠绒毛。如果一种腺上皮转化为另一种腺上皮,则称为腺性化生。 (3)结缔组织和支持组织化生:如间叶组织化生为脂肪组织或透明软骨。 3.意义化生对机体是有利的,但也有其局限性和不完善性。
小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定_代阳
第21卷 第1期 天 津 农 学 院 学 报 V ol. 21,No. 1 2014年3月 Journal of Tianjin Agricultural University March ,2014 收稿日期:2013-12-19 基金项目:国家自然科学基金项目“牛骨骼肌卫星细胞成肌分化相关miRNAs 的鉴定和功能研究”(31201021);天津市自然科学基金项 目“microRNA-1对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的调控作用研究”(13JCQNJC14600) 作者简介:代阳(1988-),女,内蒙古通辽人,硕士在读,研究方向为动物胚胎与转基因工程。E-mail: aq19881209@https://www.360docs.net/doc/6e15557021.html,。 文章编号:1008-5394(2014)01-0001-04 小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定 代阳1 ,王轶敏 1,2 ,刘新峰1,樊晗璐1,李吉霞1,郭宏1,丁向彬 1,通信作者 (1. 天津农学院 动物科学与动物医学学院,天津 300384;2. 西北农林科技大学 生物工程研究所,陕西 杨凌 712100) 摘 要:采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离小鼠骨骼肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化, 并利用RT -PCR和免疫荧光染色方法对分化前后细胞的标志基因进行鉴定。结果显示:分离出的肌卫星细胞生长状态良好,RT -PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,诱导分化形成肌管后,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究成功从小鼠肌肉组织中分离出了肌卫星细胞,并具有很好的体外分化能力,可以为肌肉的发育分化和损伤修复研究提供良好的细胞模型。 关键词:小鼠;骨骼肌卫星细胞;细胞培养;鉴定 中图分类号:Q813.1 文献标识码:A Isolated Culture and Identification of Mouse Skeletal Muscle Satellite Cells DAI Yang 1 , WANG Yi-min 1,2 , LIU Xin-feng 1, F AN Han-lu 1, LI Ji-xia 1, GUO Hong 1, DING Xiang-bin 1,Corresponding Author (1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China; 2. Institute of Bioengineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, Shaa n xi Province, China ) Abstract: In this study, mouse skeletal muscle satellite cells were isolated by collagenase and trypsinase digestion method. Then the satellite cells were purified and induced to differentiate into myotubes, and the marker genes of the cells before or after the differentiation were detected by RT-PCR and immunocytochemistry technology. The results show that the isolated muscle satellite cells were healthy, and expressed the marker genes of paired protein box (Pax7) and myogenic differentiation antigen (MyoD ). After inducing to the myotubes, myogenin (MyoG ) and myosin heavy chain (MHC )showed positive expression. The results indicate that mouse skeletal muscle satellite cells of high purity, which can provide cell sources for muscle development and damage repair study, are successfully isolated. Key words: mouse; skeletal muscle satellite cell; cell culture; identification 骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cell)是骨骼肌中具有分化增殖潜能的肌源性干细胞,通 常以静息状态存在于肌纤维肌膜与基底膜之间[1] ,在一定条件下可以被激活,发生增殖和分化,形 成骨骼肌细胞。1961年,Mauro [2] 首次在蛙的肌肉中发现了肌卫星细胞,其后,有多种动物的肌卫星细胞被成功分离,并进行了体外培养。肌卫星细胞在肌肉的发育和再生中发挥了重要作用,而 肌卫星细胞的增殖和分化受众多因素的影响[3] ,目前,其分离效率仍然很低,建立高效的体外培养、鉴定与诱导分化方法仍然是卫星细胞研究和利用的关键。本研究采用胶原酶和胰蛋白酶联用的酶消化法从小鼠肌肉组织中分离肌卫星细胞,并对其进行了诱导分化和鉴定,以期为肌肉的发育分化和损伤修复研究提供参考。 1 材料和方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物 10日龄昆明小鼠,体重约3.2 g。 1.1.2 主要试剂 胎牛血清(Gibco);马血清(Gibco);DMEM 高糖培养基(Hyclone);胶原酶Ⅱ(Sigma);0.25%胰蛋白酶溶液(索来宝);青链霉素混合液(10 000 m g /L青霉素、10 000 m g/L链霉素,索莱宝);PBS (自配);4%多聚甲醛、山羊封闭血清、羊抗兔Cy3标记二抗、羊抗兔FITC标记二抗、羊抗小鼠FITC 标记二抗(武汉博士德);DAPI、兔抗Pax7抗体、兔抗MyoD抗体、兔抗MyoG抗体(北京博奥森);鼠抗Myosin抗体(中杉金桥);TRIzol试剂(Invitrogen);
第02章-细胞和组织的损伤与修复
细胞和组织的适应、损伤与修复 1.细胞坏死主要表现在: A、细胞膜 B、细胞浆 C、细胞器 D、细胞核 E、细胞连接 2.细胞坏死后,核的变化之一可表现为: A、核分裂 B、核碎裂 C、核异型 D、核仁肥大 E、核膜增厚 3.坏死组织经腐败菌作用后,常可发生() A、凝固 B、梗死 C、栓塞 D、坏疽 E、脂肪坏死 4.下列各项属病理性增生与肥大的是() A、妊娠期子宫肥大 B、哺乳期乳腺肥大 C、高血压引起的心肌肥大 D、运动员肌肉肥大 E、长期体力劳动者的心室肥大 5.在萎缩的肌细胞内可见() A、含铁血黄素 B、脂褐素 C、黑色素 D、胆色素 E、纤维素 6.细胞水肿与脂肪变性最易发生在() A、肺、脾、肾 B、心、肝、肾 C、肺、脾、心 D、心、肝、脾 E、肝、肾、脾 7.下列哪种变性性质上为组织坏死() A、细胞水变性 B、玻璃样变性 C、纤维素样变性 D、黏液变性 E、淀粉样变性 8.下述哪项与液化性坏死无关() A、脑组织坏死 B、化脓性菌感染 C、乳房的外伤性脂肪坏死 D、急性胰腺炎引起的脂肪坏死 E、肾梗死 9.下列各种细胞再生能力最强的是() A、表皮细胞 B、平滑肌细胞 C、肾小管上皮细胞 D、血管内皮细胞 E、软骨母细胞 10.一期愈合的手术切口,一般在术后多长时间可拆线() A、第3天 B、第5~6天 C、2周 D、3周 E、以上都不是 11.有关肉芽组织的描述中,不恰当的提法是() A、肉芽组织是不完全修复的必经之途 B、含大量新生的毛细血管和成纤维细胞 C、常伴有炎性水肿及数量不等的炎症细胞 D、当它老化时血管和胶原均见增多
E、最后被大量纤维组织反取代 12.肉芽组织与肉芽肿的光镜下区别在于() A、局部是否有淋巴细胞浸润 B、病灶内是否有单核细胞浸润 C、局部是否有单核巨噬细胞结节形成 D、是否有纤维细胞增生 E、是否含有毛细血管 13.最易通过完全性再生达到修复的组织是() A、上皮组织 B、结缔组织 C、骨组织 D、神经组织 E、肌肉组织 14.易发生化生的组织为() A、关节软骨 B、支气管粘膜 C、横纹肌 D、宫颈粘膜 E、胃粘膜 15.中枢神经系统的坏死常为() A、脂肪坏死 B、坏疽 C、干酪样杯死 D、凝固性坏死 E、液化性坏死 16.关于脂肪变性,下列哪一项是正确的? A、器官体积肿大,质地变硬 B、器官颜色灰白,切面有油腻感 C、镜下见胞浆内出现大小不等的空泡(HE染色) D、镜下见胞浆内充满淡红染微细颗粒(HE染色) E、为一种不可恢复性病变 17.营养不良性萎缩时,首先萎缩的组织是: A、肌肉 B、肝脏 C、心脏 D、脑 E、脂肪 18.创面一期愈合的条件是() A、手术烧伤 B、刀伤 C、创面小面整齐,组织损伤少 D、不伴有继发感染的创面 E、已经扩创处理的大面积创伤 19.肉芽组织中一般不含有() A、单核巨噬细胞 B、中性粒细胞 C、神经纤维 D、细菌 E、异物 20.细胞坏死过程中,核变小,染色质浓聚,被之为() A、核内包涵体 B、核溶解 C、核碎裂 D、核分裂相 E、核固缩 21.区别组织坏死与尸体组织自溶最无诊断价值的病理变化是()A、中性粒细胞浸润B、充血反应带C、病灶呈楔形 D、核碎裂、溶解 E、间质纤维蛋白样坏死 22.不属于凝固性坏死的病变是() A、肝阿米巴脓肿 B、心肌梗死 C、干酪样坏死 D、肾梗死 E、肝细胞嗜酸性小体
骨骼肌细胞的超微结构特点
骨骼肌细胞的超微结构特点 肌肉和肌纤维周围均包有结缔组织,按其位置不同分为肌外膜、肌束膜和肌内膜。 包在整块肌肉外面的致密结缔组织,称肌外膜。 若干条肌纤维集成束,束的外周包有较厚的结缔组织,称肌束膜。 分布在每条肌纤维周围的少量结缔组织,称肌内膜。 骨骼肌纤维表面附有肌卫星细胞,肌纤维损伤后肌卫星细胞分化形成肌纤维。 (一)骨骼肌纤维的光镜结构 骨骼肌纤维呈长圆柱形,一条肌纤维内含多个细胞核,核呈扁椭圆形,位于肌膜下方; 肌浆内含大量肌原纤维,每条肌原纤维上都有明暗相间的横纹,后者由明带和暗带组成明带又称Ι带,其中部为Z线 暗带又称A带,其中部较浅的窄带称H带,H带中央为M线 * 肌节(sarcomere)为两条相邻Z线之间的一段肌原纤维,由?I带+A带+?I带组成;是骨骼肌收缩的基本结构单位 肌膜外有基膜紧贴,肌膜与基膜间有肌卫星细胞,肌纤维损伤后,肌卫星细胞分化形成肌纤维。 (二)骨骼肌纤维的超微结构 肌原纤维、横小管和肌浆网等是骨骼肌纤维最主要的超微结构。 1.肌原纤维(myofibril) 由粗、细两种肌丝(myofilament)规律排列组成。 粗肌丝位于肌节的暗带,中央固定在 M线上,两端游离。 细肌丝位于肌节两端,一端附于Z线,另一端伸至粗肌丝间,末端游离,止于H带外侧; Ι带仅有细肌丝;H带(A带中部) 仅有粗肌丝;H带两侧的A带既有粗肌丝,又有细肌丝; (1)粗肌丝的分子结构: 由肌球蛋白分子组成,肌球蛋白形似豆芽,分头和杆两部分,头部具有ATP酶活性。 (2)细肌丝的分子结构: 细肌丝由肌动蛋白、原肌球蛋白、肌原蛋白组成。 骨骼肌肌纤维的结构 骨骼肌由骨骼肌纤维组成。骨骼肌纤维呈长圆柱状,其大小因肌肉类型和生理活动的状况而不同,一般长度约3--40mm,镫骨肌纤维最短,长约lmm;缝匠肌纤维长达125mm。肌纤维的宽度约为10--100μm,加强体育锻练能使肌纤维体积增粗。
细胞和组织的损伤与修复
细胞和组织的损伤与修 复 内部编号:(YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128)
第一章细胞和组织的损伤与修复 一、选择题 (一)单项选择题 1.萎缩的概念下列哪项是错误的: A.细胞体积缩小 B.细胞数目减小 C.细胞功能降低 D.细胞适应减弱 2.当尿路阻塞时,尿液在肾盂中潴留,引起肾体积增大,肾实质变薄,称为: A.变性 B.肥大 C.萎缩 D.增生 3.骨折时石膏固定后患肢可出现: A.营养不良性萎缩 B.废用性萎缩 C.压迫性萎缩 D.神经性萎缩 4.细胞内或间质中出现异常物质或正常物质显着增多,称为: A.代偿 B.适应
C.变性 D.坏死 5.最常见的轻度变性是: A.细胞水肿 B.脂肪变性 C.玻璃样变性 D.纤维蛋白样变性 6.脂肪变性是指: A.脂肪细胞内出现了脂肪滴 B.组织内出现了脂肪细胞 C.正常不见或仅见少量脂滴的细胞质内出现脂滴或脂滴增多D.脂肪组织中脂滴增多 7.局部组织细胞代谢停止,功能丧失是: A.变质 B.变性 C.坏死 D.死亡 8.细胞水肿和脂肪变性主要发生于: A.脾、肾、肺 B.心、肝、肾 C.心、肺、脾 D.肝、肾、脾 9.最严重的组织损伤是:
A.水样变性 B.脂肪变性 C.玻璃样变性 D.坏死 10.血管壁的玻璃样变常发生于: A.细动脉 B.小动脉 C.大动脉 D.小静脉 11.下列哪种变性实为组织坏死的一种表现:A.玻璃样变性 B.脂肪变性 C.纤维蛋白样变性 D.黏液样变性 12.判断细胞坏死的主要标志是哪项改变:A.细胞膜 B.细胞质 C.细胞器 D.细胞核 13.坏死与坏疽的主要区别是: A.病变部位不同 B.病变范围不同 C.病变性质不同
细胞和组织的损伤与修复
细胞和组织的损伤与修 复 Document number:BGCG-0857-BTDO-0089-2022
第一章细胞和组织的损伤与修复 一、选择题 (一)单项选择题 1.萎缩的概念下列哪项是错误的: A.细胞体积缩小 B.细胞数目减小 C.细胞功能降低 D.细胞适应减弱 2.当尿路阻塞时,尿液在肾盂中潴留,引起肾体积增大,肾实质变薄,称为: A.变性 B.肥大 C.萎缩 D.增生 3.骨折时石膏固定后患肢可出现: A.营养不良性萎缩 B.废用性萎缩 C.压迫性萎缩 D.神经性萎缩 4.细胞内或间质中出现异常物质或正常物质显着增多,称为:A.代偿 B.适应
C.变性 D.坏死 5.最常见的轻度变性是: A.细胞水肿 B.脂肪变性 C.玻璃样变性 D.纤维蛋白样变性 6.脂肪变性是指: A.脂肪细胞内出现了脂肪滴 B.组织内出现了脂肪细胞 C.正常不见或仅见少量脂滴的细胞质内出现脂滴或脂滴增多D.脂肪组织中脂滴增多 7.局部组织细胞代谢停止,功能丧失是: A.变质 B.变性 C.坏死 D.死亡 8.细胞水肿和脂肪变性主要发生于: A.脾、肾、肺 B.心、肝、肾 C.心、肺、脾 D.肝、肾、脾
9.最严重的组织损伤是: A.水样变性 B.脂肪变性 C.玻璃样变性 D.坏死 10.血管壁的玻璃样变常发生于: A.细动脉 B.小动脉 C.大动脉 D.小静脉 11.下列哪种变性实为组织坏死的一种表现:A.玻璃样变性 B.脂肪变性 C.纤维蛋白样变性 D.黏液样变性 12.判断细胞坏死的主要标志是哪项改变:A.细胞膜 B.细胞质 C.细胞器 D.细胞核 13.坏死与坏疽的主要区别是: A.病变部位不同
细胞和组织的损伤与修复
第一章细胞和组织的损伤与修复 一、选择题 (一)单项选择题 1.萎缩的概念下列哪项是错误的: A.细胞体积缩小 B.细胞数目减小 C.细胞功能降低 D.细胞适应减弱 2.当尿路阻塞时,尿液在肾盂中潴留,引起肾体积增大,肾实质变薄,称为:A.变性 B.肥大 C.萎缩 D.增生 3.骨折时石膏固定后患肢可出现: A.营养不良性萎缩 B.废用性萎缩 C.压迫性萎缩 D.神经性萎缩 4.细胞内或间质中出现异常物质或正常物质显着增多,称为: A.代偿 B.适应 C.变性 D.坏死 5.最常见的轻度变性是: A.细胞水肿 B.脂肪变性 C.玻璃样变性 D.纤维蛋白样变性 6.脂肪变性是指:
A.脂肪细胞内出现了脂肪滴 B.组织内出现了脂肪细胞 C.正常不见或仅见少量脂滴的细胞质内出现脂滴或脂滴增多D.脂肪组织中脂滴增多 7.局部组织细胞代谢停止,功能丧失是: A.变质 B.变性 C.坏死 D.死亡 8.细胞水肿和脂肪变性主要发生于: A.脾、肾、肺 B.心、肝、肾 C.心、肺、脾 D.肝、肾、脾 9.最严重的组织损伤是: A.水样变性 B.脂肪变性 C.玻璃样变性 D.坏死 10.血管壁的玻璃样变常发生于: A.细动脉 B.小动脉 C.大动脉 D.小静脉 11.下列哪种变性实为组织坏死的一种表现: A.玻璃样变性 B.脂肪变性 C.纤维蛋白样变性 D.黏液样变性 12.判断细胞坏死的主要标志是哪项改变:
A.细胞膜 B.细胞质 C.细胞器 D.细胞核 13.坏死与坏疽的主要区别是: A.病变部位不同 B.病变范围不同 C.病变性质不同 D.有无腐败菌感染 14.干性坏疽多发生于: A.肢端 B.肺 C.肾 D.脾 15.下列各项无再生能力的是: A.神经纤维 B.神经细胞 C.平滑肌细胞 D.原始间叶细胞 16.完全再生是指: A.同种细胞的修复 B.邻近细胞的修复 C.纤维性修复 D.手术修复 17.肉芽组织在光镜下主要由什么成份构成:A.炎症细胞及成纤维细胞 B.成纤维细胞及胶原纤维 C.新生的毛细血管及成纤维细胞 D.毛细血管及胶原纤维 18.坏死组织逐渐被肉芽组织取代的过程称为:
细胞和组织的适应损伤与修复
第一章细胞和组织的适应、损伤与修复 一、教学大纲要求 1. 掌握适应及萎缩、肥大、增生、化生的概念、类型和病理变化。 2. 掌握变性、坏死的概念、类型、形态学变化及后果。 3. 掌握肉芽组织的概念、形态特征及其在创伤愈合中的作用。 4. 掌握创伤愈合的类型与骨折愈合过程。 5. 熟悉再生的概念、类型及各种细胞的再生能力与再生过程。 6. 熟悉适应、变性、坏死与修复的结局或转归。 7. 熟悉细胞凋亡与老化的概念及形态学表现。 8. 了解组织损伤的原因与发生机制。 9. 了解影响修复的因素。 二、理论内容提要 (一)细胞和组织的适应性反应 萎缩、肥大、增生、化生的概念、类型与病变特征,举例。 1、萎缩:病理性:营养不良性、压迫性、失用性、去神经性、内分泌性 2、肥大:代偿性,内分泌性 3、增生:内分泌性,代偿性,再生修复性,肿瘤性。 4、化生:(1)鳞状上皮化生:膀胱、肾盂移行上皮→鳞状上皮(鳞状化生可癌变) 支气管、胆囊、子宫颈柱状上皮→鳞状上皮(2)腺上皮化生:胃→肠上皮化生(大肠上皮化生可癌变)。 (3)结缔组织化生:成纤维细胞、间叶细胞→软骨细胞、骨细胞 (二)细胞和组织的损伤 1.细胞和组织损伤的原因与损伤过程、机制 各种损伤因素→生化代谢改变→组织化学和超微结构改变→光镜改变→肉眼改变。 机制:细胞膜的破坏,活性氧类物质的损伤,细胞质内高游离钙的损伤,缺氧,化学性损伤,遗传变异 2.细胞损伤的基本病理过程 细胞核:大小、形状、结构、核内包含物及核仁的改变。 细胞器:内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架的改变。 细胞膜:形态结构、通透性的改变。 3.各种可逆性损伤(变性)的概念,好发部位(组织、细胞)及其形态学变化,举例