CTAB法提取DNA简要步骤

1，取超低温保存的叶片样本，研钵磨碎后加入2.0ml离心管中(加入的叶片粉末量没过2.0ml 离心管的底部的尖端即可)。

2，迅速加入65℃预热过的CTAB 800μl（2%CTAB，使用前加入0.5-1% β-巯基乙醇），混合均匀后放入65℃水浴一小时。每十分钟摇动一次，使CTAB与叶片样本充分混匀。3，取出离心管至常温，放置2分钟后加入800μl氯仿/异戊醇（24:1）混合液，将混合液与CTAB混匀后缓缓摇动1-2分钟，使CTAB与氯仿充分接触。

4，12000rpm离心5-10分钟，小心吸取上清液至新的2.0ml离心管中，再次加入700μl氯仿/异戊醇混合液，缓缓混匀1-2分钟后，再次离心，吸取上清液至1.5ml离心管中。5，迅速向1.5ml离心管中加入等体积的-20℃预冷过的异丙醇，混匀，-20℃放置2小时左右。

6，将-20℃保存的离心管取出，12000rpm离心5-10分钟，弃去液体，DNA应沉淀在离心管底部。

7，加入1ml 70%乙醇洗涤DNA沉淀（甩一下离心管让DNA沉淀飘起来就行），洗涤两次。

8，将乙醇洗涤过的DNA风干（超净工作台吹一下或者真空浓缩仪）。

9，风干后用50-80μl ddH2O溶解，待用。本步骤一定不要多加水，SNP需要较高浓度DNA。