实验四_种子生活力测定
实验四种子生活力测定
一、目的要求
通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
二、材料与器具
1．材料刺槐种子。
2．器具及药品种子检验板、烧杯、解剖刀、小镊子、手持放大镜、量筒、培养皿、解剖针、玻璃棒、胶匙、四唑等。
三、方法步骤
1．靛兰染色法靛兰为兰色粉末，分子式为C16H8N2O2（SO3）2Na2，它能透过种子的死细胞组织染上蓝色，但不能透过活细胞组织，因此活细胞不染色。所以染成蓝色的种胚是无生活力的种子；未染色的是有生活力的种子。根据染色部位和比例大小即可判断种子的生活力。
（1）抽取测定样品所需样品从净度测定选出的纯净种子中提取，用四分法随机取出四组种子，每组100粒，此外还要抽取约100粒种子作为后备，以便代替取胚时弄坏的种子。
（2）浸种浸种时间因树种而异。松属、雪松属的种子在室温下浸3～5天。刺槐种子可加入沸水不断搅拌至水凉或用锐利的解剖针或小刀等仔细地从胚根
后面弄破种皮，然后用室温水浸种24h，浸种过程中更换1～2次水。
（3）取胚以松属树种为例。浸种后，分组取胚，沿种子的棱切开种皮和胚乳。取出种胚，种胚取出后放在盛有清水的玻璃皿里，以免种胚干燥萎缩而丧失生活力。取胚时随时记下空粒、腐烂粒、感染了病害虫害的种粒以及其它显然没有生活力的种子粒数分组记入记录表。如取胚时由于人为技术而破坏种胚，可以从后备组中任取一粒取胚补上。
（4）溶液的配制及染色用蒸馏水配成浓度为0.05～0.1的溶液。随配随用，不宜存放过久。在20℃～30℃条件下约需浸2～3h。试剂的用量应该能够完全浸没种胚。
将玻璃器皿中清水到出余下种胚，立即注入靛兰溶液，淹没种胚，如有种胚浮在表面，应将其拨沉，
（5）观察记载当到达染色所规定的时间之后倒出靛兰溶液。用清水冲洗种胚，立即将种胚放在垫有潮湿的白纸的培养皿中观察。根据染色的部位和程度，把胚分为有生活力的和无生活力的两类，记入表5-1。
取胚时受到机械损伤的部分也会染上颜色，但不要把它作为没有生活力的种胚。
（6）结果计算生活力的百分率根据四组重复计算平均值，不带小数。重复间最大允许差距与发芽测定的规定相同。
2．四唑染色法2,3,5－三苯基氯化（或溴化）四唑简称为四唑，分子式为C19H15N4Cl（Br）。四唑为白色粉末，水溶液无色，种胚浸入溶液中，由于种胚活细胞组织中的脱氢酶产生氢，使浸入种胚内的四唑经氢的作用，在活细胞中生产红色稳定而不扩散的三苯基甲月替。凡种胚染成红色者表示有生活力，不染色的种子即为无生活力的种子，不染色的部位即为坏死的部位，根据坏死组织出现的部位及其分布状况，可以判断种子的生活力。
（1）抽取测定样品所需刺槐从净度测定选出的纯净种子中提取，用四分法随机取出二组种子，每组50粒，此外还要抽取约50粒种子作为后备，以便代替取胚时弄坏的种子。
（2）浸种取种胚剥去外种皮和内种皮。尽量不使胚乳受到损伤，种胚取出后放在盛有清水的玻璃皿里。取胚时随时记下空粒、腐烂粒、感染了病害虫害的种粒以及其它显然没有生活力的种子粒数分组记入记录表。如取胚时由于人为技术而破坏种胚，可以从后备组中任取一粒取胚补上。
（3）溶液的配制及染色取9.078克KH2PO4溶于1000mL水中，得a液；又取11.876克Na2HPO4·2H2O溶于1000mL水中，得b液，取a液2份和b液3份混合，配制为缓冲溶液。在该缓冲溶液里溶解准确数量的四唑盐，以获得正确的浓度。如配制浓度为0.5%的四唑溶液，可称取四唑5克溶于1000mL的缓冲溶液，或用中性蒸馏水（pH6.5～7）溶解四唑。
四唑溶液的浓度可在0.1～1%范围内选择，浓度高，反应较快，但药剂消耗量大，浓度低，染色的时间较长。刺槐种子测定的适宜浓度为0.5~1.0%，待种胚全部剥完后再一起放入四唑溶液中，使溶液淹没种仁，上浮者要压沉。置黑暗处，保持30～35℃，染色2～3h即可鉴定。
（4）观察记载剖开胚乳，使胚露出。如胚乳从外向内由红色明显地过渡到无色，表示四唑溶液的渗入尚不充分。在这种情况下，应当让检测样品在四唑溶液中保持一段时间。
经过染色的种子分组放在潮湿的滤纸上，借助于手持放大镜或实体显微镜逐粒观察。种胚和胚乳完全着色的是有生活力的种子。种胚和胚乳完全不着色的是无生活力的种子。还有些种子在种胚或胚乳上呈现未着色的斑块，表明是一些坏死的组织，判断种子有无生活力主要是看坏死组织出现的部位和其大小，而不一定在于染色的深浅。各种树种的判断标准也不完全一致。判断刺槐种子有生活力的标准是种胚不染色的最大面积不超过1/4子叶末端。将染色结果分组记入表中。
（5）结果计算生活力的百分率根据四-五个重复组计算，不带小数，重复组间最大容许误差与发芽测定的规定相同，最后以四组生活力百分率的平均值为该种子批的生活力。
表4-1 种子生活力测定记录表
树种样品号样品情况
染色剂浓度测试地点
环境条件：温度℃湿度％测试仪器：名称编号
四、报告内容
1．填写种子生活力的测定记录表。
2．写出各种测定法的不同染色原理。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定 一、实验原理 通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。 二、实验原理 （1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。 （2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以据此鉴别细胞是否死亡。 三、实验材料、药品和器具 1、实验材料：花生、黄豆 2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等 四、试验方法 1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。 2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。 五、实验结果 品种测定方法测定种子总数有生活力种子粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC 30 28 2 93% 品红30 28 2 93% 黄豆TTC 30 30 0 100% 品红30 29 1 97% 实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。 结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。 六、注意事项 1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。 2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。 3、染色时间要尽量控制在规定时间内，染色过长过短都会影响结果测定。 4、清洗品红染液时，要冲洗干净，冲洗数次，直至冲洗液无色为止，冲洗不干净直接影响实验结果的测定。
种子生活力的测定(红墨水法)教学设计
《林果生产技术》实验实训2“种子质量的简易测定”之五：种子生活力的测定（红墨水法）教学设计 课题：种子生活力的测定（红墨水法）课型：专业技能实 训课 班级：2014级现代农艺班时间：2015年10月9日 教学目标： 1、应知：种子生活力的概念，红墨水法测定生活力的原理、意义、步骤。 2、应会：掌握用红墨水染色法测定种子生活力的操作技能，熟悉种子质量鉴定技术过程。 3、能力培养：学会自主学习、合作学习、探究学习，培养动手能力、观察能力、合作意识和专业情感。 教学重点： 小麦种子生活力红墨水染色法测定的方法步骤。 教学难点： 1、切分种子。 2、有无生活力的判断。 教学方法： 1、紧抓生本课堂的五大元素“前置学习、合作学习、展示分享、质疑问难、教师点拨”，让学生自主学习，先做后学，先学后教。 2、恰当运用信息化教学手段。
课前任务布置： 提前一天晚自习分发学案和适量材料样品（每小组分发经浸泡后充分吸胀了的小麦种子50粒左右，单面刀片2片，镊子2把，放大镜1个），自学时间2课时。学案附后。 材料器具准备： 经浸种吸胀后的小麦种子（每小组600粒左右）、直尺、烧杯、9cm培养皿（每小组4套）、镊子（每人1把）、单面刀片（每人1片）、瓷盘、洗瓶、滤纸、5%红墨水。 导入： 种子质量的好坏，直接关系到农业的丰歉。种子的纯度、净度、发芽率、生活力、含水量等是种子分级、是否合格的重要指标。今天我们以小麦种子为例，通过实训操作一起来学习种子生活力的测定方法。同学们课前已经做了预习，在操作之前我们先来弄清楚几个问题，分小组回答： 问题一：种子生活力指的是什么？（一组回答） 答案：种子生活力是指种子潜在的发芽能力。 问题二：既然种子生活力是指种子潜在的发芽能力，那么我们为什么不直接测定种子的发芽率，而测定种子生活力? （二组回答）答案：用标准发芽试验无法准确测出处于休眠状态的种子的发芽能力；发芽试验测定发芽率，所需时间较长，如小麦需要8天，水稻需要14天，多数林木种子则需要更长的时间，而生活力的测定可
种子生活力的测定
种子生活力的测定 一、氯化三苯基四氮唑（TTC）法 【原理】 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原时，可产生红色的三苯基甲（TTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。TTC还原反应如下： TTC（无色） TTF（红色） 【仪器与用具】 培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH试纸。 【试剂】 TTC溶液的配制：取1g TTC溶于１L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC溶液。药液pＨ应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。 【方法】 1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。 2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。 3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC溶液，以浸没种子为度。 4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min. 5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。 表32-1 染色法测定种子生活力记载表 【注意事项】 1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。 2.染色温度一般以25～35℃为宜。 3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。 4.判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；
种子生活力的测定红墨水法教学设计
种子生活力的测定红墨 水法教学设计 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
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实验六 种子生活力的快速测定
实验六 种子生活力的快速测定 一、实验目的 1.加深对种子作用的理解； 2.掌握种子生活力的测定方法。 二、实验原理 在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。 有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H ） 种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深； 死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC 还原成红色； 种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色； 三、实验材料及用品 材料：绿豆种子 实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片 实验试剂：0.5%TTC 溶液（避光保存） 四、实验步骤 1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。 2. 显色 ：a 、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。 b 、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC 溶液，以 刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h 。 c 、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min 后，加入0.5%TTC 溶液， 以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保温1h 。 有生活力的种子进行呼吸 作用，呼吸代谢途径催化产 生的氢（H ）
3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染 色情况。有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染 色。 生活力的种子数 计算种子生活力的比率= ————————X 100% 实验组测定种子数 五、实验现象与结果 表一种子染色情况记录表 图1 未煮沸的种子染色情况 图2 煮沸的种子染色情况 生活力的种子数 未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70% 实验组测定种子数
三种常用检测种子生活力方法比较
植物生理学小论文 三种常用检测种子生活力方法的比较 班级：09级生物技术2班 学号: 系别: 化学与生命科学系 : 雪婷 日期：2012年5月15日
浅谈三种常用检测种子生活力的方法 雪婷 （师学院化学与生命科学系675000） [摘要] 种子活力是种子最重要的生理及生产指标之一，近年来，无论在育种选种方面还是植物生理实验方面都得到广泛关注。本文基于对种子活力的概念、影响种子活力的因素和种子活力快速测定的最新研究进展为基准, 对TTC法、BTB法及红墨水染色法三种常见种子活力快速检测方法进行了简要综述。结论：四氮唑染色法是蔓荆子种子生活力测定的最佳方法，生活力与发芽率呈显著的正相关。 关键词：种子活力；TTC法；BTB法；红墨水染色法；研究进展 The discussion on three kinds of methods to detect seed vigor SUN-xueting （Chuxiong normal university，chuxiong，yunnan675000，China） Abstracts: The seed vigor is the most important physiological and seed production indexes. In recent years，No matter in selecting seeds breeding or in plant physiology experiments. The seed vigor is widely mentioned This paper based on the concept of the seed vigor influence factors of the seed vigor and the seed vigor rapid determination of the latest research progress Comparition of three kinds of methods to determine seed vigor. Keywords: seed vigor ；Triphenyl Tetrazolium Chloride method；Bromo—thymol blue method; red ink method;research progress 种子生活力是检测种子质量最重要的指标之一，它对于种子的发育，萌发，成熟以及成长为植株的潜在能力具有十分紧密的联系。对于科学选种，快速预测种子的利用价值也具有重要的意义。快速检测种子生活力的方法很多，但生产实验及植物生理实验中常用的主要有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚蓝(BTB)法和红墨水染色法。这三种方法都能快速测定种子的正常生理代功能是否受到损害，胚是否存活,以了解种子是否还具有发芽的潜力。 种子生活力（seed viability)是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具有生命力（即活的）种子数占种子总数的百分率。早在1876年种子学的创始人Nobbe（德国）[1]就指出在同一批种子存在个体间发芽和幼苗生长速度的差异，并且不
四唑法测定种子生活力Word版
四唑染色法测定种子生活力 福建农林大学20**级农学0******* ***** 一、目的 1、了解种子生活力测定方法 2、熟悉利用四唑染色法测定种子活力方法及操作方式 二、原理 有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都发生氧化还原反应，四唑溶液作为一种无色的指示剂，被种子吸收后参与活细胞的还原反应，从脱氢酶接受氢离子，在活细胞里产生红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲。化学反应如下：DPNH2 + TTC DPN + TTCH + HCl （辅酶IH2）（四唑）（辅酶Ⅰ）（甲）（氯化氢） H N‐N‐C6H5N‐N‐C6H5 ∥2H ∥ C6H5‐C C6H5‐C +HCl \ \ N﹦N+‐C6H5 N＝N‐C6H5 无生活力的种子则无此反应。 根据种子的四唑显色的部位，即可区分有活力的部分和死亡部分。一般鉴定原则是，凡是胚的主要结构及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色，且组织状态正常的，为有生活力的种子。凡是胚的主要构造局部不染色或染色成异常的颜色和光泽，并且活营养组织部染色成无光泽的淡红色或灰白色，且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。 三、试材与设备 1、材料大豆种子 2、设备烧杯、滤纸、刀片、镊子、恒温培养箱 3、试剂 1.0%的四唑溶液 四、实验步骤 从净度分析后并经过充分混合的大豆种子中，随机抽取30粒，3次重复。 1、种子预湿将选取的大豆种子水浸预湿，室温下浸泡8h，使其充分吸胀。 2、种子处理将吸胀的大豆种子的种皮去除，掰开子叶，露出子胚芽，保持湿润备用。 3、四唑染色将处理好的种子放入烧杯中，加入1.0%的四唑溶液，将种子淹没，然后置于35℃恒温培养箱中避光染色0.5~1 h。 4、观察鉴定将染色后的大豆种子经清水冲洗后进行染色情况的观察鉴定。胚部全部显成鲜红色、仅子叶远离胚芽部分少量未染色、仅子叶边缘少许未染色，为有生活力的种子。 5、结果计算及处理统计各个重复中有生活力的大豆种子数，并计算其平均值。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定 实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业 试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。 本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。 实验仪器及材料： 1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀 2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5% 3、材料：玉米、小麦吸胀种子 方法一：红墨水染色法 实验原理： 红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质 的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。 操作步骤： 1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸 涨备用。 2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养 皿中，用5%红墨水染色。 3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着 色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。 结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100 方法二：BTB变色法 实验原理： 活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。色泽差异显著，易于观察。 操作步骤：
实验 34 种子生活力的快速测定 - 食品伙伴网
实验 17 种子生活力的快速测定 种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。测定种子生活力常采用发芽实验，即在适宜条件下，让种子吸水萌发，在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。但是常规方法（直接发芽）测定种子生活力所需时间较长，特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定发芽率，遇到休眠种子也无法知道。而采用以下的化学方法，则能在较短时间内获得结果。 Ⅰ氯化三苯基四氮唑法（ TTC 法） 一、原理 凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲（ TTF ），而且种子的生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深。死亡的种子由于没有呼吸作用，因而不会将 TTC 还原为红色。种胚生活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被染色。因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 玉米、小麦等种子。 （二）试剂 0.5% TTC 溶液：称取 0.5 gTTC 放在烧杯中，加入少许 95% 乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至 100 mL 。溶液避光保存，若变红色，即不能再用。 （三）仪器设备 恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子，天平。 三、实验步骤 1. 浸种将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。 2. 显色取吸胀的种子 200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿 100 个半粒，加入适量的 0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。 将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。 3. 计算活种子的百分率，如果可能的话与实际发芽率作一比较看是否相符？ Ⅱ溴麝香草酚蓝法（ BTB 法） 一、原理 凡活细胞必有呼吸作用，吸收空气中的 O 2 放出 CO 2 。 CO 2 溶于水成为 H 2 CO 3 ， H 2 CO 3 解离成 H + 和 HCO 3 ˉ，使得种胚周围环境的酸度增加，可用溴麝香草酚蓝（ BTB ）来测定酸度的改变。 BTB 的变色范围为 pH6.0 ～ 7.6 ，酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为 pH 7.1 ）。色泽差异显著，易于观察。 二、实验材料、试剂与仪器设备
实验六 种子生活力的快速测定
实验六种子生活力的快速测定 一、实验目的 1.加深对种子作用的理解； 2.掌握种子生活力的测定方法。 二、实验原理 在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。 有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H） 有生活力的种子进行呼吸 作用，呼吸代谢途径催化产 种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深； 死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色； 种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色； 三、实验材料及用品 材料：绿豆种子 实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片 实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存） 四、实验步骤 1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。 2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。 b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚 好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。 c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液， 以刚好浸没种子为宜，恒温（
32℃）中保温1h。 3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染 色情况。有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染 色。 生活力的种子数 计算种子生活力的比率= ————————X 100% 实验组测定种子数 五、实验现象与结果 保温1h后种子染色情况： 被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6 煮沸的种子 0 20 表一种子染色情况记录表 图1 未煮沸的种子染色情况 图2 煮沸的种子染色情况 生活力的种子数 未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%
种子生活力快速测定-教案-参考模板
种子生活力快速测定 ------红墨水染色法 一、教学目标： 知识与能力 熟悉红墨水染色法测定种子生活力的原理和方法及其计算 过程与方法 通过实验，培养学生动手操作的能力 情感态度与价值观 通过观察和实验等教学活动，培养学生科学的思维方法，实事求是的科学态度以及协作精神。 二、教学重点和难点 显色过程既是重点又是难点 三、教学准备 （一）教师准备 1.仪器设备、材料和试剂 （1）仪器： 培养皿2套；镊子1把；单面刀片1片；垫板(切种子用)1块；烧杯1个；搪瓷盘1个； （2）试剂： 取市售红墨水稀释20倍（1份红墨水加19份自来水）做为染色剂。 （3）材料： 玉米或小麦 2.实验操作准备 浸种 实验组将待测种子在30～35℃温水中浸泡(大麦、小麦、籼谷6～8h , 玉米5h左右,梗谷2h), 以增强种胚的呼吸强度,使显色迅速。 对照组取充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3～5min，
3．学生分好组 （二）、学生准备 学生课前认真的自学，自己查找相关资料，了解与弄清所需实验用具或用品的用途和用法，做好预习案及实验前的一切准备。 四、教学方法、教学手段： 1、教学方法：实验探究。 2、教学手段：本节课以学生亲自动手实践为主，教师演示与辅导为辅的教学手段。 五、教学设计： （一）创设情景，导入新课： 教师讲述：种子生活力就是种子发芽的潜在能力，通过对种子生活力的测定可以快速预测种子的发芽能力，为我们的播种选种提供理论依据，本节课我们就是学习怎样动手快速测定种子生活力。 （二）讲授新课 1.将在预习过程中遇到的疑惑，带到课堂师生共同解决，师生共同回顾种子生活力的相关知识。 2.红墨水染色法测种子生活力 （1）教师示范操作（同时讲解操作要点） 步骤： ①. 显色 取吸胀的种子和死种子各50粒,用刀片沿种胚中央纵切为两半, 其中一半放入培养皿中，加适量红墨水溶液（以浸没种子为度），染 色10-20min后倒去红墨水溶液,用水反复冲洗多次,至冲洗液无色为止。 ②.观察 对比观察冲洗后两组种子胚部着色情况。凡胚部不着色或略带浅 红色者，即具有生活力的种子，若胚部染成与胚乳相同的红色，则为 死种子，把测定结果记录在表格内。 （2）学生动手操作，教师巡回指导 （3）引导学生在观察的过程中讨论解决下列问题。 ①.种子生活力的测定方法还有哪些？
实验四 种子生活力测定
实验四种子生活力测定 一、目的要求 应用化学药剂处理和生物化学法快速测定体眠种子生活力并比较不同方法的效果。 二、材料用具 （一）材料：水稻和玉米种子 （二）药品：2．3—5一氯化三苯基四氮唑和红墨水等。 三、方法步骤 （一）四唑盐类法： 1．在洁净的水稻种子中，随机数取试样2份，各100粒剥去谷壳，浸入30℃的水中6－8小时。 2．用2．3．5－氯化三苯基四氮唑配制成的溶液，装在棕色玻璃瓶里，保存在黑暗中。 3．将已剥去壳的软化的米粒沿种胚纵切，取其一半浸于已配好的药液中，放于暗处（最好用棕色发芽皿盛放），经24小时可观察结果，如果提高温度可以缩短处理时间（40℃1小时）。 4．观察结果：凡种胚的主要构造染成深红色者为有生活力的种子，凡种胚的主要构造染成浅红色或不染色者为无生活力的种子。 5．具体种子具体做法： 取水稻种子样品200粒，去壳，放纸间或水中30℃预湿12h，沿种子侧面胚纵切，放入0.1%四唑溶液35℃染色1-2h，凡是胚的主要构造染成正常鲜红色，或胚根尖端2/3不染色而其他部分正常染色的种子为有生活力种子。 （二）红墨水染色法： 1．从洁净玉米种子随机数取试样二，各100粒，于30℃温水中浸2-3小时。 2．配制红墨水溶液，用红墨水加水配成1：60的溶液。 3．取出软化过的种子，沿胚切成对半，取其半粒种子。 4．浸入红墨水溶液，15分钟后取出，用清水冲洗。 5．观察结果：凡种胚的主要构造不染色或染色浅者为有生活力的种子，凡种胚染色者为无生活力的种子。
四、结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复间最大容许差距不得超过附表（生活力测定重复间的最大容许差距）的规定，平均百分率计算到最近似的整数。
简单测定种子的生活力
8种子生活力测定 Z—1概述 种子生活力（Seed viability）是指种子发芽的潜在能力。种子生活力测定在农业生产上具有重要的意义：①测定休眠种子的生活力。许多植物种子因存在休眠，暂时不能萌发，因此发芽率很低，尤其是新收获的和野生性较强的种子，必须进行生活力测定，才能了解种子的发芽潜力，以便合理利用种子。播种前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理。种子检验时，若发芽试验末期有新鲜不发芽种子或硬实种子，也应接着进行生活力测定，以正确评定种子品质。②快速预测种子的发芽力。休眠种子可借助于各种处理措施打破休眠，然后进行发芽试验，但所需时间较长。而种子贸易中，有时因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需时间更长，如小麦需8d，水稻需14d，某些蔬菜和牧草种子需2～3周，而多数林木种子则需要更长的时间。在这种情况下，可用生物化学速测法测定种子生活力作为参考。 种子生活力测定方法有10多种，根据其测定原理可大致分为4类：①生物化学法，如四唑测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。②组织化学法，如靛蓝染色法、红墨水染色法和软x射线造影法等。③荧光分析法。④离体胚测定法。本节主要介绍四唑测定法、离体胚测定法、染料染色法和软x射线造影法。 Z—2生活力测定方法 一、测定原理 有生活力的种子，其活细胞原生质膜具有选择透性，当种子浸入染料后，染料大分子不能进入活细胞内，所以胚部等活组织不能被染料染色，而死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力，故可被染料染色。 二、测定方法 （一）染色法 1．靛蓝染色法 此法适用于豆类、谷类、棉花、瓜类和林木等大粒种子的生活力测定。所用试剂为靛蓝（或称靛蓝洋红），分子式为C18H8O2N2（SO5Na）2，系蓝色粉剂，能缓慢溶于水。测定方法如下： (l) 种子预处理：将种子浸人30℃水中，水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等种子须先去壳再浸种，浸种时间因种子不同而异，小麦、大麦、大豆、豌豆和向日葵等为3h，燕麦、芝麻等4h，油菜、花生、棉籽等6 h，蓖麻、红麻、大麻等7 h、黍8 h、水稻12 h、玉米20 h将充分吸胀的种子(100粒2次重复），沿胚中线纵切（如禾谷类）或剥去种皮（如双子叶种子），以备染色用。
实验 植物种子生活力快速测定 (1)
实验十一植物种子生活力快速测定 一、实验目的 掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。 二、实验原理 种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现（指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标），种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力（通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率）。种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的，因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。测定种子生活力方法常用发芽率测定法，该法是指在最适宜的条件下，在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。但是常规方法（直接发芽）测定种子发芽率所需的时间较长，对于处于深休眠状态的种子，几乎难于应用。特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定种子发芽率，所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。 红墨水染色法 凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力，它对某些染料不让透过，因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，于是染料进入死细胞，将胚完全染色。因此，可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。 三、实验材料 小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。 四、设备与试剂 恒温箱，培养皿，烧杯，镊子，刀片，紫外荧光灯，滤纸（无荧光），琼脂，沸水。 5％红墨水：市售红墨水5 mL加95 mL自来水。 五、实验步骤 1．红墨水染色法 将待测种子在30～35℃温水中浸种（小麦、大麦、籼稻种子6～8h；玉米种子5 h 左右；粳稻种子2 h），以增加种胚的呼吸速率，使显色迅速；取吸胀的种子200 粒，沿种子胚的中心线纵切为二半，将其中的一半置于红墨水培养皿中5～10 min；用红墨水染色后，倒去废液，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止，并检查种子死活。凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。也可用沸水杀死的种子作为对照观察。
8、种子生活力的快速测定(TTC法)
华南农业大学实验报告 专业班次11农学1班组别201130010110 题目种子生活力的快速测定（TTC法）姓名梁志雄日期2012-11-21 一、实验原理 有活力种胚中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色TTF，如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力 二、实验材料与实验器材 水稻种子、恒温箱、小白瓷碗、镊子、小烧杯 三、实验步骤 1、实验之前将种子放在微波炉里稍微加热，将水稻种子用温水（30~35℃）浸泡2~6h，使 种子充分吸涨 2、随机抽取30粒水稻种子，小心剥去种皮，千万不要伤害种胚，然后把处理好的种子置 于小白瓷碗中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为度，与恒温箱中（30~35℃）中保温0.5-1h。 3、染色结束后要立即进行鉴定，因放置太久会褪色。倒出TTC溶液，再用清水将种子清 洗1~2次，观察种胚染色的情况。凡种胚全部或大部分被染成红色即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。 四、数据记录记录 本实验测得染色种子25粒，无色种子5粒，其中染色的25粒种子中有19粒种子染色是比较深的，说明其生长活性物质多，生命力强。根据以下公式 种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%
可以知道种子活力=25/30*100%=83.3% 六、实验总结 有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸过程中的代谢物质跟TTC反应生成红色TTF，且代谢物质越多，颜色越深，代谢强度越大。从本实验结果来看，种子生命力总体上时比较强的，且其中的19粒染色较深的那些则更高。另外TTC法还可以运用于花粉活力的测定。