醋酸洋红染色液配制及使用方法
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醋酸洋红染色液
英文名称：Acetocarmine
产品说明：醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。在观察植物细胞有丝分裂时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。花粉检测中，可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。华越洋醋酸洋红染色液含高浓度乙酸和洋红，pH呈酸性，是很好的细胞核、线粒体染色剂。
操作说明：（仅供参考）
1、花粉类颗粒：取少量花粉物质置于载玻片，滴加适量醋酸洋红染色液，充分混合，立即盖片染色10～30min后，吸去多余液体，显微镜下观察。
2、动植物切片：常规处理(如脱蜡至水)，滴加醋酸洋红染色液染色5～20min，自来水冲洗，封片，显微镜下观察。
3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮)，直接浸染于醋酸洋红染色液5～20min，自来水冲洗2～3min，置于载玻片并盖上盖玻片，显微镜观察。
注意事项：
1、染完色后，应立即显微镜下观察。
2、由于本试剂含有高浓度弱酸，有刺激性气味，请注意自我保护。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
储存条件：避光常温保存，复检期为1年。
关键词：醋酸洋红染色液
醋酸洋红染色液相关染色产品:
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实验室各种染料的配比
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制 一、生物标本常用染料性能简介 （一）天然染料 1、苏木精苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。 苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。 2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。 洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。 （二）人工染料 人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。 1、酸性品红酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。 组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。 2、刚果红刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。他能作染料，也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。 3、甲基蓝甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化，因此用他染色后不能长久保存。 4、固绿固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为4%）和酒精（溶解度为9%）。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。 5、苏丹Ⅲ苏丹Ⅲ是弱酸性染料，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为0.15%）。苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。 6、伊红这类染料种类很多。常用的伊红Y，是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状，溶于水（15摄氏度是溶解度达44%）和酒精（溶于无水酒精的溶解度为2%）。伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木精的衬染剂。 7、碱性品（复）红碱性品红是碱性染料，呈暗红色粉末或结晶状，能溶于水（溶解度1%）和酒精（溶解度8%）。碱性品红在生物学制片中用途很广，可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁，又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆菌。在尔根氏反应中用作组织化学试剂，已核查脱氧核糖核酸。 8、结晶紫结晶紫是碱性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度8.75%）。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时，用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色，染色体染成红色，纺锤丝染成紫色，所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛，效果也很好。用结晶紫染色的切片，缺点是不易长久保存。 9、龙胆紫龙胆紫是混合的碱性染料，主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是，龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水，主要成分是甲基紫，需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 10、中性红中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度4%）和酒精（溶解度1.8%）。它的碱性溶液中呈现黄色，在强碱性溶液中呈蓝色，而在弱酸性溶液中呈红色，所以能用作指示剂。中性红无毒，常做活体染色的染料，用来染原生动物
醋酸洋红染色液
醋酸洋红染色液 编码名称规格单位 北京华越洋生物GT12219-100ml醋酸洋红染色液100ml瓶 醋酸洋红染色液说明： 醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。在观察植物细胞有丝分裂时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。花粉检测中，可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。华越洋醋酸洋红染色液含高浓度乙酸和洋红，pH呈酸性，是很好的细胞核、线粒体染色剂。 醋酸洋红染色液操作说明：（仅供参考） 1.花粉类颗粒：取少量花粉物质置于载玻片，滴加适量醋酸洋红染色液，充分混合，立即 盖片染色10～30min后，吸去多余液体，显微镜下观察。 2.动植物切片：常规处理(如脱蜡至水)，滴加醋酸洋红染色液染色5～20min，自来水冲洗， 封片，显微镜下观察。 3.部分新鲜植物组织(如洋葱表皮)，直接浸染于醋酸洋红染色液5～20min，自来水冲洗2～ 3min，置于载玻片并盖上盖玻片，显微镜观察。 醋酸洋红染色液注意事项： 1.染完色后，应立即显微镜下观察。 2.由于醋酸洋红染色液试剂含有高浓度弱酸，有刺激性气味，请注意自我保护。 3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。 储存条件：避光常温保存，复检期为1年。 醋酸洋红染色液的相关染色液： 名称规格名称规格 中性红染色液(0.33%）500ml 结晶紫水溶液(0.1%) 100ml 中性红染色液(0.5%）500ml 核固红染色液(0.1%) 100ml 中性红染色液(0.1% 常规染色) 100ml 天狼星红染色试剂盒2*50mL TTC染色液（0.4%）500ml 0.5%伊文斯蓝/埃文斯蓝溶液100mL Masson三色染色试剂盒7×50ml 茜素红S染色液(1%,pH4.2) 100mL 普鲁士蓝染色试剂盒2*50ml 0.2%核固红染色液100ml 尼氏染色液(焦油紫法) 2*100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液100ml 吕氏碱性美蓝染色液（0.4%）100ml 改良Lillie-Mayer苏木素染色液500ml 亮绿SF染色液100ml Ehrlich苏木素染色液100ml 溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液100ml Ehrlich苏木素染色液500ml 饱和油红O染色液100ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 100ml Van Gieson 染色液50ml 苏木素伊红混合染色液(一步法) 500ml Van Gieson 染色试剂盒3×50ml 改良Harris苏木素染色液100ml Schiff试剂50ml 改良Harris苏木素染色液500ml 茜素红S染色液（0.2%）100ml Mayer苏木素染色液100ml 煌焦油蓝染色液100ml Mayer苏木素染色液500ml 2% TTC染色液100ml 苏木素伊红(HE)染色液2×100ml 革兰氏染色液试剂盒4×10ml 苏木素伊红(HE)染色液2×500ml 醋酸洋红染色液100ml Core苏木素染色液100ml 姬姆萨原液100ml Core苏木素染色液500ml 姬姆萨工作液100ml Carazzi苏木素染色液100ml 瑞氏-姬姆萨复合染液100ml Carazzi苏木素染色液500ml 瑞氏染液50ml Delafield苏木素染色液100ml 结晶紫染色液(2.5%) 10ml Delafield苏木素染色液500ml 结晶紫染色液(1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 100ml 结晶紫染色液(0.1%) 10ml Gill苏木素染色液(Gill No.1) 500ml 荚膜染色液（试剂盒）50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 100ml 芽孢染色液（试剂盒）50ml×2 Gill苏木素染色液(Gill No.2) 500ml 鞭毛染色液（试剂盒）100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 100ml 石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Gill苏木素染色液(Gill No.3) 500ml 改良型石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 100ml Heidenhain铁苏木素染色液3×100ml 抗酸染色液（试剂盒）50ml×3 天青石蓝苏木素染色液2×50ml 吕氏碱性美蓝染色液（0.1%）100ml 改良MacConaill铅苏木素染色液140ml 卢戈碘液（革兰氏染色）10ml 苏木素无水乙醇溶液(5%) 100ml 番红染色液（沙黄）10ml 苏木素无水乙醇溶液(10%) 100ml 卢戈碘液（标准碘液）100ml 伊红染色液(进口水溶) 100ml Mayer'苏木素染液(免疫组化) 10ml 伊红染色液(进口水溶) 500ml HE染色液(试剂盒) 3×10ml 伊红染色液(水溶) 100ml Cole氏苏木素染色液(常规染色) 100ml 伊红染色液(水溶) 500ml Weigert苏木素染色液2×50ml 伊红染色液(水溶,5%) 100ml
液体配制及实验方法
（一）液体配制 1.完全培养基 DMEM+10%FBS+1%双抗+（1%HAPS液） 若放置时间长于2周加1%谷氨酰胺 2.PBS 1000ml去离子水中溶解8.0gNaCl、0.2gKCl、2.89gNa2HPO4、0.26gNaH2PO4 3.胰酶 用之前调节PH值至7.6 4.CaCl2 将0.165gCaCl2粉末溶于10ml去离子水中配制成50X的溶液 每5ml胶原酶中加入100μl CaCl2溶液（终浓度3μmol/L）用于激活胶原酶的活性 5.双抗 终浓度：青霉素100万U/100ml 链霉素100万U/100ml 青霉素0.6μg为1个单位链霉素 1.2195μg为一个单位 称取青、链霉素粉末各0.6、1.2195g溶于10mlPBS中再定容至100ml 6.两性霉素B 100mg两性霉素B粉末溶于40mlPBS中，制成浓度为2.5mg/ml(1000X)的浓缩液 每100ml完全培养基中加入100μl 浓缩液，稀释为终浓度2.5μg/ml 7.细胞冻存液 20%DMSO+80%FBS(1mlDMSO+4mlFBS) 8STZ溶液 STZ溶于柠檬酸和柠檬酸三钠的盐溶液中 称取柠檬酸0.105g溶于5mlPBS 称取柠檬酸三钠0.145g溶于5mlPBS中混合两者制成10毫升的溶解液. 再将100mgSTZ粉末溶于该溶解液中制成浓度1%的STZ溶液，调节PH值至4.5，4°避光保存，由于STZ水溶性不稳定，溶液最好在半小时内使用完毕. 9油红O 原液：油红O 0.6g溶于异丙醇（99% ）100ml 。 稀释液：油红O 原液20ml ，蒸馏水20ml ，过滤后使用。 10茜素红 称取0.1g茜素红粉溶于100mlPBS，调节PH值到7.2，过滤后使用.
伊红染色液溶液的配制方法
伊红染色液配制方法 溶液的配制方法如下： 华越洋伊红染色液：100ml 伊红染料配方较多在常规配方中，有的染色效果好，但操作较繁琐，且消耗较多试剂。有的操作简单，但染色时间长，染液有效期短，常需加入冰醋酸，但加入剂量不易掌握，量少达不到促染作用，加入过多染液易沉淀，且引起色调不正，特别是容易褪色，染色结果不能长期保存。为此，对伊红Y染色液配制进行了改进。改进后的方法具有操作简便、经济、染色性质稳定、着色力强且持久颜色鲜艳等优点； 制备方法：伊红Y1G，蒸馏水90ML，苦味酸饱和水溶液10ML。将蒸馏水加入伊红，待其全部溶解后，加入苦味酸饱和水溶液。 染色结果观察：染色时间0.5-1分钟。伊红所着的颜色鲜艳，层次分明，与蓝色的细胞核对比突出。 伊红Y（四嗅荧光素二钠盐，分子式：C20-H6O5Br4NO2）是一种酸性红色胞浆性染料，室温下，在水中的溶解度度远大于在酒精中的溶解度。它在溶液反应中，由于钠离子的存在而呈碱性状态。苦味酸[分子式：（NO2）3C6HOH]是一种较强的酸性染料，它的颜色是由硝基发色团所致，染色性能是由羟基助色团产生的。苦味酸具有三种作用：1本身是一种胞浆染料，具有染色作用。2又是一种酸，加入伊红Y染色液中，使染色造成比胞浆等电点略为酸性的环境，抑制了部分氨基酸中羟基官能团，从而使氨基酸中氨基官能团和酸性染料结合，增加了染液与组织间的亲和力，起到促染作用。3苦味酸又是一种氧化剂，在染色体中经过氧化物作用后，使染色剂与组织成份结合的更牢固。组织着色鲜艳，染色后不易褪色，因而切片可长期保存。 华越洋伊红染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。 本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。 本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本伊红染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。 本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
改良型石炭酸复红染液(卡宝品红染色液)使用说明
改良型石炭酸复红染液(卡宝品红染色液)使用说明 货号：G1165 规格：100ml/500ml 保存：室温密封保存，有效期12个月。 产品说明： 改良型石炭酸复红染色液又称卡宝品红(Carbol fuchsin)染色液、改良苯酚品红染色液。该染色液与醋酸洋红有相似之处，醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。生物学上也常用卡宝品红(Carbol fuchsin)作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。染色体染色时用醋酸洋红染色液染色,虽然染色效果较好,但却存在着染色需时较长的问题。 改良型石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法，染液稳定。索莱宝改良型石炭酸复红染色液采用改良配方，加入衬染剂，使染色效果更佳。主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色，是很好的细胞核、线粒体染色剂。 使用步骤（仅供参考）： 1.固定将经过预处理或没有预处理的材料，放到卡诺氏固定液（3份甲醇：1份冰乙酸）中固定2～24h，再分别在95％和85％乙醇中各30min，再转入70%酒精中，可4℃保存备用。 2.解离取固定好的植物组织，用蒸馏水漂洗2～3次，放入1N HCl溶液中60℃水解8～12min，再用蒸馏水洗净。 3.染色将组织放在载玻片中央，用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。滴加改良苯酚品红染液，染色8～15min后，盖上盖玻片。 4.压片在盖玻片上面铺上滤纸，固定好盖玻片，用拇指垂直压片，然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片，至肉眼见材料呈雾状即可，使细胞核染色体分散。 5.镜检观察显微镜下观察染色形态和计数，对典型分裂相细胞进行摄影记录。
注意事项： 组织4℃保存时间最好不超过二个月。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴手套操作。
高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)精编版
1 斐林试剂检测可溶性还原糖 原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热. 应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎. 2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察. 应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪. 3 双缩脲试剂检测蛋白质 原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意：双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温（不需要加热）. 应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定. 4 碘液检测淀粉 原理：淀粉+碘液→蓝色 注意：这里的碘是单质碘,而不是离子碘. 应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉 5 DNA的染色与鉴定 染色原理：DNA+甲基绿→绿色 应用：可以显示DNA在细胞中的分布. 鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色
应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂. 6 吡罗红使RNA呈现红色 原理：RNA+吡罗红→红色 应用：可以显示RNA在细胞中的分布. 注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色. 7 台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理：正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色. 应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性. 8 线粒体的染色 原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色. 应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在. 9 酒精的检测 原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色. 应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶. 10 CO2的检测 原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.
常用染色液配方
实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升 B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色 10 min；入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。
铁矾醋酸洋红染色液
铁矾醋酸洋红染色液 简介： Leagene 铁矾醋酸洋红染色液又称明矾胭脂红染色液，主要由高浓度乙酸、洋红(也称胭脂红)等组成，pH 呈酸性。铁矾醋酸洋红染色液主要用于花粉、动植物组织切片等样本中细胞学的染色，尤其适用于小麦花粉、洋葱根尖表皮细胞等，能够较为清楚的显示染色体、细胞核(被染成深红色)，细胞质呈浅红色。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、载玻片 2、盖玻片 3、光学显微镜 操作步骤(仅供参考)： 1、花粉类颗粒：取少量花粉物质置于载玻片，滴加适量铁矾醋酸洋红染色液，充分混合，立即盖片染色后，吸去多余液体，显微镜下观察。 2、动植物切片：常规处理(如脱蜡至水)，滴铁矾醋酸洋红染色液染色，自来水冲洗，封片，显微镜下观察。 3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮)，直接浸染于铁矾醋酸洋红染色液，自来水冲洗2～3min，置于载玻片并盖上盖玻片，显微镜观察。 4、如果效果不佳，在酒精灯上迅速来回轻烤几次，以破坏染色质，使细胞核着色。注意事项： 1、染完色后，应立即显微镜下观察。 2、由于本试剂含有高浓度弱酸，有刺激性气味，请注意自我保护。 3、注意密闭保存，否则染色效率会下降。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。编号 名称DA0043Storage 铁矾醋酸洋红染色液 100ml RT 避光使用说明书1份
有效期：12个月有效。 相关： 编号名称 CS0001ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DA0065台盼蓝染色液(0.4%) DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液 PW0053Western抗体洗脱液(碱性) TC0699植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) TC0733乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
染料化学实验使用全解
染料化学实验 实验一 合成酸性橙Ⅱ 用途：羊毛、蚕丝、皮革等的染色。 一、 反应 1、重氮化反应 NH 2SO 3Na + 2HCl + NaNO 2SO 3- N=N +Cl - + 2NaCl + 2H 2O 10℃ 2、乙萘酚的溶解 -OH + NaOH -ONa + H 2O 3、偶合反应 SO 3- N=N +Cl --ONa NaO 3S-N N OH ++ HCl 二、 主要原料 1、对氨基苯磺酸 8.7克 2、30%HCl （d=1.15） 18.3克 3、NaNO 2 3.5克 4、30%NaOH （d=1.33） 7.4克 5、乙萘酚 7.3克 6、食盐 约7.5克 7、碳酸钠 2.7克 8、尿素
三、实验方法 1、重氮化 ⑴在150ml烧杯中，加入55ml水，8.7克对氨基苯磺酸，2.7克碳酸钠，加热使其全部溶解。冷却后，再加入溶于8ml水的3.5克NaNO2的溶液，搅拌，备用。（用手搅即可） ⑵在250ml烧杯中，加入40ml水，再加入16ml 30%HCl搅匀，冰浴冷却，控制温度在10℃~15℃。将上述混合液于10~15分钟内均匀加入。加完后保持此温度，继续搅拌30分钟，得重氮盐白色悬浮液。 用刚果红试纸检测呈兰色，显示悬浮液保持酸性。加入少量尿素破坏过量的亚硝酸。 2、偶合 在400ml烧杯中，加入60ml水，7.3克乙萘酚，在搅拌下加入6ml 30%NaOH，升温到80℃，使其全部溶解。然后把此溶液倒入已经备有冰浴冷却，电动搅拌的500ml搪瓷烧杯中，使其冷却至8℃，加盐2克，快速加入重氮盐全部量的1/2，此时pH为8~10，再加盐3克，然后将剩余的1/2重氮盐控制在10分钟内均匀加完，并随时用液碱调pH≥8。加完重氮盐，继续搅拌30分钟，再加盐2.5克，并用HCl调染液pH= 7。继续搅拌约30分钟，直至重氮盐消失时为偶合终点。（用H酸作渗圈实验）。 偶合完成后染料应全部析出，用水抽过滤，得橙红色滤并，自然干燥，作实验三染色之用。
常用染色液配制
常用染色液配制 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020
1．草酸铵结晶紫染色液 A液：结晶紫，95%乙醇25mL。 B液：草酸铵，蒸馏水1000mL。 制备时，将结晶紫研细，加入95%乙醇溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合静止48h后，过滤后使用。 2．鲁格尔氏（路戈氏）碘液 碘，，蒸馏水300mL。先用3~5mL蒸馏水溶解KI，再加入碘片，稍加热溶解，加足水过滤后使用。 3．脱色液：95%乙醇；或丙酮乙醇溶液：95％乙醇70mL，丙酮30mL 4．沙黄（番红）染色液 ％沙黄（番红）乙醇溶液：沙黄（番红），95%乙醇100mL。 此母液存放于不透气的棕色瓶中，使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。 5．％美兰染色液 溶解于100mL蒸馏水中。 6．吕氏碱性美蓝色染色液 A液：美蓝，95%乙醇30mL。 B液：，蒸馏水100mL，分别配制A液和B液，混合即可。 7．瑞氏染色液 瑞氏染料粉未,甘油3mL，甲醇97mL。将染料放乳钵内研磨，先加甘油，后加甲醇，过夜后过滤即可。 8．5％孔雀绿水溶液（芽孢染色用） 孔雀绿,蒸馏水100mL。先将孔雀绿放乳钵内研磨，加少许95％乙醇溶解，再加蒸馏水。 9．黑色素水溶液（荚膜负染色用） 黑色素10g，蒸馏水100mL，40％甲醛（福尔马林）。将黑色素溶于蒸馏水中，煮沸5min，再加福尔马林作防腐剂，用玻璃棉过滤。 10．硝酸银鞭毛染色液 A液：单宁酸，，福尔马林(15%)，1%，蒸馏水100mL。 B液：,蒸馏水100mL。 将AgNO3溶解后，取出10mL备用，向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵，则形成很厚的沉淀，再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。再将备用的硝酸银慢慢滴入，则出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状的沉淀又消失，再滴入硝酸银，直到摇动后，仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。 11．改良利夫森（Leifson’s）鞭毛染色液 A：20％单宁（鞣酸）；B：饱和钾明矾液(20%)；C：5％石炭酸；D：碱性复红酒精（95％）饱和液。 将以上各液于染色前1~3d，按B加到A中，C加到A、B混合液中，D加到A、B、C混合液中的顺序，混合均匀，马上过滤15~20次，2~3d内使用效果较好。 12．石炭酸复红染色液 A液:碱性复红，95%乙醇10mL；B液：石炭酸（苯酚）5g，蒸馏水95mL。 先将染料溶解于乙醇，将苯酚溶于水，AB两液混合即可。
颜色反应实验归纳
一、颜色反应归纳及拓展 （1）碘应是单质成分，不是离子成分。若用碘来检测叶片光合作用产生的淀粉，则需要先对叶片进行脱色处理。 （2）斐林试剂和双缩脲试剂均由NaOH 溶液和Cu 2SO 4溶液组成，但两者NaOH 溶液的浓度不同，并且两者的使用方法也不同。如斐林试剂甲液和乙液要等量混合均匀后使用，即现用现配，而且要水浴50-60℃加热，而双缩脲试剂在使用时，先加甲液后再加乙液，加的量不同（甲液1mL ，乙液4滴），而且不需要加热。 （3）蛋白质的鉴定是在碱性环境下Cu 2+与蛋白质的肽键结合成特定化合物的紫色反应。而还原糖的鉴定是新制的的Cu(OH)2 与还原糖的醛基反应，生成砖红色的Cu 2O 沉淀。 （4）健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料。可使活细胞中的线粒体染成蓝绿色，而细胞质接近无色。 （5）观察DNA 和RNA 在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂（即吡罗红甲基绿染色剂），而不是单独染色，应该注意的是该试剂应现用现配。 （6）根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短，可以定量检测酵母菌培养液中CO 2的产生情况。 （7）染色体（染色质）容易被碱性染料龙胆紫溶液染成深紫色，用高倍显微镜可以观察细胞的有丝分裂过程中染色体的行为。另外，脂肪的鉴定和细胞中线粒体的观察，也需要染色后，再借助显微镜观察。 （8）龙胆紫和醋酸洋红均为碱性染料，染色体被龙胆紫染成紫色，而被醋酸洋红染成红色。 2012·安徽卷）某同学以新鲜洋葱鳞片叶内表皮为材料，经不同处理和染色剂染色，用高倍显微镜观察。下列描述正确的是( ) A ．经吡罗红甲基绿染色，可观察到红色的细胞核 B ．经吡罗红甲基绿染色，可观察到绿色的细胞质 C ．经健那绿染色，可观察到蓝绿色颗粒状的线粒体 D ．经苏丹Ⅲ染色，可观察到橘黄色颗粒状的蛋白质 解析：甲基绿能将DNA 染成绿色，吡罗红能将RNA 染成红色，DNA 主要分布在细胞核中，RNA 主要分布在细胞质中，A 、B 项错误；健那绿可将线粒体染成蓝绿色，C 项正确；苏丹Ⅲ可以用来鉴定脂肪，不能用来鉴定蛋白质，D 项错误。 答案：C
高中生物常用的染色剂染色机理
普知--关于遗传物质被碱性染料染色~ 碱性液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用1．2龙胆紫C笛HIN具有金属光泽的暗绿色粉末。能溶于水、三氯甲烷和醇；难溶于醚。加热至275℃分解。其1％一2％溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。 2染色剂的配制 2．1配方1醋酸一洋红染液取100mL45％冰醋酸，煮沸后徐徐加入洋红1g，搅拌均匀后加入1颗锈铁钉，煮沸10min，冷却后过滤，贮存在棕色瓶内。 2．2配方2龙胆紫染液，取龙胆紫1～2g，溶解在100mL2％乙酸溶液中，直到溶液成深紫色为止(实验过程中视具体情况溶液可适当稀释)。保存在棕色瓶内。 3染料的作用机理 3．1碱性染料染色试剂的酸碱性与溶液的酸碱性不是一回事。染色试剂的酸碱性，其划分依据在于染料分子电离后的有色成分是阳离子还是阴离子，如果着色的基团是阳离子的为碱性染料，着色的基团是阴离子的为酸性染料 3_2染色机理龙胆紫能不能染DNA?还是只是把染色质上的蛋白质染色?或是DNA和蛋白质都被染色?上文提到，碱性染料的着色基团是阳离子，着色基团可以与细胞中的带负电荷部分牢固地结合。DNA是酸性物质，可电离出H，其余的部分就带上了负电荷。因此，带负电荷部分就能和碱性染料电离出的着色阳离子通过电荷问的引力作用牢固结合，而被染上颜色。有的染色作用随溶液中的pH值而变动。细胞的主要成分是蛋白质，它含有氨基和羧基，在酸性溶液中，当溶液的pH值小于该蛋白质的等电点时，则蛋白质带正电荷，易被酸性染料染色；在碱性溶液中，当溶液的DH值大于该蛋白质的等电点时，则蛋白质带负电荷。容易被碱性染料染色。所以，可以得出结论：碱性染料使染色体着色，使DNA和蛋白质都被染色。只不过这2种物质被染色的机理是不同的。 4碱性染料用酸配制的原因龙胆紫和洋红都溶于水和酒精。而做实验用的龙胆紫和洋红溶液。却都是用醋酸溶液配制的。这又是为什么呢?原因有2个：1)是为了染色物能方便地进入细胞内，又不会发生细胞膨胀。因为水和酒精这2种溶剂进入细胞的速度是很快的，容易引起细胞膨胀破裂。2)因为像洋红这种碱性染色剂溶于碱性溶液时，能使细胞质和细胞核都染色，只是细胞核较浓些，溶于酸性溶液(如醋酸)时，对染色质有高度的亲合力，对细胞质着色很浅。在煮沸的45％醋酸中加洋红使之饱和，再加入微量的铁离子，配制成的醋酸洋红溶液就能将核或染色体染成红色。如果用1％龙胆紫溶液对根尖进行染色，细胞核内都被
HE染色程序及相关溶液配制
HE 染色程序 1.取材与固定：一般取立方米，基本不用再次修形。置于4%甲 醛溶液中，至少固定24小时。室温保存即可。 2．水洗：视组织块大小而定。一般与固定时间相等或至少水洗24小时。 3.脱水：70%酒精(过夜或2h) T80%酒精(过夜或1h) -90% 酒精（1h）- 95% 酒精1（ 1h）- 95% 酒精（1h）n- 100% 酒精I (1h) -100%酒精n (1h)，梯度酒精脱水 注：当酒精浓度逐渐升高时，特别是100%的酒精，注意观察组 织块情况，不能脱水脱过了，如果拖过了，切片时，组织易碎。如果水脱的不彻底，则浸蜡时，蜡不能完全浸入，也会影响后期切片。 4、透明：二甲苯1( 10min)7二甲苯n (10min)。 5、浸蜡：58C (—般用新蜡) 6、包埋：叠好的蜡槽，一般深1cm宽1cm长7cm放4个组 织块为宜。注：包埋一般采用旧蜡，避免产生气泡。包埋时用来夹 取组织块的镊子，要同时放在蜡箱里预热。先向蜡槽内倒蜡，然后 用预热的镊子夹取浸蜡缸中的组织，放到蜡槽底部，尽量避免漂浮。 包埋后，就不要挪动蜡槽了，否则组织漂浮在蜡槽的表面。 7、常规切片，一般组织3-5 微米，神经组织切7 微米。展片温度为52 摄氏度。捞片时刻直接从95%的酒精中取载玻片直接捞片， 不必擦干载玻片上的酒精。捞好片后，置于37度温箱恒温干燥过夜。 & 切片脱蜡：二甲苯1( 5min)7二甲苯n (8min),
9、水化：100%酒精(1min)790%酒精(1min) f 80%酒精(1min) T 70%酒精(1min) 脱水：70%酒精(10s ) T80%酒精(20s ) T90%酒精(30s ) T95%酒精(1min)T 100%酒精(2min) f 100%酒精(2min) 17、二甲苯透明：二甲苯1( 5min)T 二甲苯n (5min) 18、中型树胶封片，镜检。 相关液体 1、 4%甲醛固定液： 40%的甲醛溶液 10ml + 90ml 蒸馏水，摇匀即可。 2、处理载玻片用的盐酸酒精： 95%酒精 100ml + 36-38%盐酸 1 ml 摇 匀即可。 3、分化用 1%盐酸酒精：注： 1%盐酸酒精配制： 75%酒精 99ml+36-38%HCL 1ml 即可。 4、二甲苯：无需配制，用商品化得即可。 5、各个浓度的酒精，均用 100%的酒精或 95%酒精按比例稀释配制即 可。 10、 水洗 2-5min 11、 苏木素染色 15-20min 12、 水洗至灰黄色 13、 分化：1%盐酸酒精分化30s 至桃粉色, 14、 水洗返蓝： 2-3h 15、 伊红染色： 15min 16、
常用染色液的配制
常用染色液的配制 1.吕氏（Loefflev）美蓝染色液 A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液 B液：10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2.石炭酸复红染色液 A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、 配成A液。 B液：5%石炭酸溶液 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。 但稀释液易变质失效，一次不宜多配。 3.革兰氏（gram）染色液 （1）草酸铵结晶紫染液： A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液 B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液 取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。 （2）路哥氏（Lugol）碘液： 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部 溶解后，加够水即成。 （3）95%酒精溶液 （4）蕃红（沙黄）复染液： 2.5%蕃红（Safranlne O）95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4.芽孢染色液 （1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 （2）0.5%蕃红溶液。 （3）苯酚品红溶液 称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。 再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。 （4）黑色素(nigrosin)溶液 10%黑色素溶液，置沸水浴中30min后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，
高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)
1斐林试剂检测可溶性还原糖 原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热. 应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎. 2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察. 应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪. 3 双缩脲试剂检测蛋白质 原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意：双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温（不需要加热）. 应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定. 4 碘液检测淀粉 原理：淀粉+碘液→蓝色 注意：这里的碘是单质碘,而不是离子碘. 应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉 5 DNA的染色与鉴定 染色原理：DNA+甲基绿→绿色 应用：可以显示DNA在细胞中的分布. 鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色
应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂. 6 吡罗红使RNA呈现红色 原理：RNA+吡罗红→红色 应用：可以显示RNA在细胞中的分布. 注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色. 7 台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理：正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色. 应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性. 8 线粒体的染色 原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色. 应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在. 9 酒精的检测 原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色. 应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶. 10 CO2的检测 原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.
Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍
Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明： 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一，可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单，操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟，蒸馏水2 分钟， b)对于冰冻切片：蒸馏水2 分钟， c)对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10 分钟以上，蒸馏水洗涤2 分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2 分钟。 2、苏木素（HE）染色对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10 分钟（可以根据染色结果和要求调整时间），用自来水洗去残留的染色液，约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片：95%乙醇脱水2 分钟，换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟；二甲苯透明 5 分钟，换用新鲜的二甲苯，再透明 5 分钟，用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色：如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色，在苏木素染色后，70％乙醇洗涤2 次，每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用
于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项： 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次，但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地：国产 提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。 保存：室温避光储存，有效期至少12 个月。 关键词：Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:
GUS染色液配制
G U S染色液配制 Prepared on 24 November 2020
一染色液配制 1）X－Gluc母液：X-Gluc，用N-N-二甲基酰胺(DMF)配成20mM的贮存液，分装成每管100μL，保存于-20℃。 2）X－Gluc基液（50mM PBS，）。配制方法： 50mM NaH2PO4·100ml； 50mM Na2HPO4 100ml共同溶解； Na2EDTA （10mM，372mg）， Triton-100（％，100μl）, K3 [Fe(CN) 6] （铁氰化钾）（，） K4 [Fe(CN) 6] （亚铁氰化钾）（，） 染色液：50μl X-Gluc母液＋450μl基液 需要试剂：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X－Gluc）； N-N-二甲基甲酰胺(DMF) ； NaH2PO4； Na2HPO4 ； Na2EDTA ；Triton-100； K3 [Fe(CN) 6] （铁氰化钾）； K4 [Fe(CN) 6] （亚铁氰化钾） 二染色方法： 1.将准备好的试材浸泡在染液，于25—37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2—3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为Gus表达位点。
三实验原理 适宜的反应条件下，β- 葡萄糖苷酸酶（GUS）可将X－Gluc水解成蓝色物质，因此具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。 gus基因是目前常用的一种报告基因，是β－D－葡萄糖苷酸酶(gus)基因，其表达产物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS)能催化裂解一系列的β－葡萄糖苷酸，它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X－Gluc）分解为蓝色的物质,也可以将4-甲基-伞形花酮-β-D-葡萄糖苷酯(4-MUG)分解为蓝色物质。其检测方法简单、快速、灵敏、稳定，且背景活性低。 gus基因的最大优点是它能测定外源基因表达的具体细胞和组织部位，这是其它报告基因所不能及的。 四注意事项 用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1- 3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。