石蜡疗法

石蜡疗法
石蜡疗法

石蜡疗法

(1)定义:利用加热熔化的石蜡作为导热体将热能传递至机体,而达到治疗疾病的目的的方法叫石蜡疗法。

(2)石蜡的理化特性

1)石蜡是高分子碳氢化合物,使石油的蒸馏产物,为白色或黄色半透明固体,无臭无味,不溶于水,微溶于酒精。

2)医用石蜡的熔点为50到60度,精炼石蜡的熔点为52到54度,沸点110到120度。3)石蜡的热容量大,导热性差,不含水分和其他液体,气体不能通过,几乎无对流现象,因而有很好的蓄热性能。加热后能吸收大量热,保温时间长,冷却时缓慢放出大量热,是一种很好的带热体。

4)石蜡有很好的可塑性,粘滞性和伸展性,随着热能的释放,石蜡逐渐变硬,其体积可缩小10%到20%。

5)石蜡与皮肤之间的温差可迅速形成蜡膜,阻止热的迅速传递,使热缓慢由体表向较深组织传递。

2、治疗作用:

1)温热作用:蜡的温热作用可以减轻疼痛,缓解痉挛,加强血液循环,改善组织营养,促进炎症浸润吸收,加速组织修复,降低纤维组织的张力,增加其弹性。

2)机械作用:石蜡具有良好的可塑性、柔韧性、粘滞性和延展性,因此蜡疗时蜡可紧贴皮肤,冷却时体积缩小10%—20%,对组织产生机械压迫作用,促进水肿消散。

3)滑润作用:石蜡具有油性,可增加敷蜡部位皮肤的滑润性,软化瘢痕。

3、临床应用

1)适应症:软组织牵拉伤和扭挫伤恢复期、肌纤维织炎、慢性关节炎、肩关节周围炎、腱鞘炎、术后或外伤后瘢痕增生、骨折或关节术后挛缩、肌痉挛、坐骨神经痛、皮肤美容等,周围神经损伤慎用。

2)禁忌症:高热、昏迷、急性化脓性炎症早期、风湿性关节炎活动期、结核、孕妇腰腹部、恶性肿瘤、出血倾向者。

3、石蜡的准备

(1)石蜡的加热:采用间接加热法,用双层套锅隔水加热,或采用电热熔蜡槽,上层为蜡液,底层为水,在槽底以电热法加热。

(2)石蜡的清洁:石蜡重复使用,反复或加温过度后氧化变质,使蜡的热容量、导热性、可塑性和柔韧性下降,氧化变质的蜡和混入的汗、尘埃和皮屑易导致过敏性皮炎,因此经常要清洁。

1)平时的清洁:石蜡使用后应先除去蜡块表面所附汗水、毛发、皮屑等杂物,方可放回蜡槽加热反复使用。

2)定时的清洁

①定时加新蜡:石蜡使用一段时间后因混入杂质而变黄,并因蜡渣掉落,蜡量减少,需酌情定时加入10%—20%新蜡,以保持石蜡清洁质纯。

②定时清除杂质:常用的方法有水洗沉淀法、过滤法、白陶土沉淀法、滑石粉沉淀法。较简便常用的方法是水洗沉淀法:将石蜡熔化后加入相当于石蜡量1/3—1/2的热水,搅拌混合后静置,石蜡上浮,水与杂质下沉,取出石蜡即可清除底部杂质,或从蜡槽底部将水与杂质排出。

4、治疗操作

1)蜡饼法:将加热后完全熔化的蜡液倒入搪瓷盘或不锈钢盘内,蜡液厚约2~3cm,冷却至

石蜡初步凝结成块时(表面45℃~50℃),用小铲刀将蜡块取出,敷于患部,外包塑料布、棉垫保温。此法适应于躯干或肢体。

2)浸蜡法:将加热后完全熔化的蜡液冷却到55℃~65℃时,患者手足浸入蜡液后立即提出,蜡液在手足浸入部分的表面冷却形成一薄层蜡液,如此反复浸入、提出数次,直到蜡膜厚达0.5 ~1cm,成为手套或袜套样,然后再持续浸入蜡液中,此法适用于手足部。

3)刷蜡法:将加热后完全熔化的蜡液冷却到55℃~65℃时,用排笔蘸蜡液后再病患部位均匀涂刷,使蜡液在皮肤表面冷却凝成一薄层蜡液,如此反复涂刷,直到蜡膜厚0.5 ~1cm时,外面再包一块热蜡饼,或继续将蜡涂刷到1 ~2cm厚,然后用塑料布、棉垫包裹保温。此法适用于躯体、肢体或面部。

4)治疗参数:以上各种方法30 ~40min,每日1次,15~30次为一疗程。

5、注意事项

1)切不可采用直接加热法熔蜡,以免引起石蜡变质、燃烧。

2)治疗时要保持治疗部位静止不动,以免蜡膜或蜡饼破裂而致蜡液由破口直接接触皮肤,因过热而引起烫伤。

3)面部用蜡应单独加热,与其它部位用蜡分别熔化。伤口用蜡使用后应弃去。

4)蜡袋法虽然简单易行,但蜡不能直接接触皮肤,只能发生温热作用,失去蜡疗的特有作用,不应提倡。

5)在有瘢痕、感觉障碍、血液循环障碍部位治疗时应谨慎,蜡温度应稍低,避免过热。6)少数患者对蜡疗过敏后,接触的出现皮肤瘙痒和丘疹,停止蜡疗后过敏反应可消失。

HE石蜡切片步骤,免疫组化步骤

HE染色 1.取材 切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透,通常以6mm×6mm×5mm为宜。 注意事项: (1)取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。 (2)切片材料应根据需要观察的部位进行选,尽可能不要损伤所需要的部分。 2.固定 将切好的组织用生理盐水组织洗3次,立即投入10%中性福尔马林固定液或4%多聚甲醛中固定,固定36小时。 注意事项: (1)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。 (2)有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。 (3)固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1-2次新液。 (4)材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶液中投入相应的标签,以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字,应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。 脱钙72小时中间不换液是样本30倍中杉金桥(进口脱钙液) 镊子触质粒由硬变韧性为准。 (美):固定3-5天根据组织大小确定天数,越大固定时间越长。 3. 洗涤 材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。(20,30,30,60) (美):流水冲洗约4小时 4. 脱水 材料依次经80%、90%、100%、100%各级乙醇溶液脱水,各30min 注意事项: (1)脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。 (2)在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。 (3)在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。 (4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。(5)如需过夜,应停留在80%酒精中。 (6)脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象 (美):80%的酒精×2小时 95%的酒精×2小时 100%的酒精×2小时×2 100%的酒精×1小时或者更长时间 5.透明(环保透明脱蜡液)中杉金桥 纯酒精、二甲苯等量混合液15min,二甲苯Ⅰ60min、Ⅱ30min(至透明为止)。 由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度的透明状态。

绿色康复

【单选题】(5分) 下列能缓解疼痛的康复治疗方法是( )? A. 冷疗 B. 热疗 C. 超声波 D. 紫外线 E. 以上都可以 正确答案是:E 患者癌痛需用吗啡类止痛药,其疼痛严重时V A S评分最可能是( )? A. 0分 B. 3分 C. 5分 D. 7分 E. 10分 正确答案是:D 下列属急性疼痛的是( )?

A. 损伤后持续足痛半个月 B. 损伤后持续足痛1个半月 C. 损伤后持续足痛2个月 D. 损伤后持续足痛3个月 正确答案是:A COPD的禁忌症不包括? A. 新近骨折 B. 支气管扩张症 C. 重度认知障碍 D. 癌转移 E. 近期心梗 正确答案是:B COPD的体味引流治疗中,头高脚低位的禁忌症为? A. 腹胀 B. 低血压 C. 眼科术后患者 D. 食管手术 E. 咯血

正确答案是:B 冠心病康复的最佳的训练形式为? A. 间断性运动 B. 连续性运动 C. 有氧运动 D. 无氧运动 E. 抗阻运动 正确答案是:A 冠心病1期康复患者须无下列并发症,除了? A. 心源性休克 B. 心衰 C. 心绞痛 D. 严重心律失常 E. 严重的精神、神经疾病 正确答案是:C 冠心病康复的意义不包括?

A. 帮助缓解症状 B. 提高生活质量 C. 减轻残疾和减少再次发作风险 D. 治愈疾病 E. 改善心功能 正确答案是:D 关于腰椎滑脱、肌筋膜炎,下列说法错误的是? A. 腰椎滑脱患者一般腰椎前屈正常,后伸受限 B. 腰椎滑脱可为五度 C. 腰肌筋膜炎患者若属于无力型应加强腰背肌锻炼 D. 腰椎滑脱手术治疗适用于椎体滑脱I、II度或II度以上,伴腰腿痛症状明显者 E. 腰肌筋膜炎患者腰部疼痛于久坐、久行、清晨或阴雨天时加重 正确答案是:B 腰椎间盘突出症病理分型中哪型应以手术治疗为主? A. 膨出型 B. 脱出后纵韧带下型 C. 突出型 D. 脱出后纵韧带后型

石蜡切片详细步骤

石蜡切片 1.仪器 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。 2. 试剂 FAA固定液(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。 3.取材 幼嫩的油菜植株叶片和茎 4.方法与步骤(参照) 1.固定: FAA固定液固定48小时以上。 2.脱水: 50%酒精→70%酒精→83%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。每级2h。100%酒精中1.5h。其中70%酒精处可长期保存。 3.透明: 1/2二甲苯+1/2无水乙醇 (2h) →纯二甲苯(1.5h) →纯二甲苯(1.5h) 4.浸蜡: 将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中,40℃烘箱敞口过夜。 5.包埋: 先提升恒温箱的温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,也可在凉水盆中放置过夜。 6.切片 对包埋的材料进行修块、粘块、整修后,保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑,并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平,使石蜡块牢固地粘在台木上。检查切片机,安装切片刀、调整好刀的角度,调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。

7.粘片 将粘贴剂置簿玻片上,再取切片浮置粘片剂上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在玻片上编号,放入温箱中烘干,温度30~40℃中过夜。 8.脱蜡 脱蜡用二甲苯,把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中:纯二甲苯(10-20min)→纯二甲苯(5-10min) 9.染色 将纯二甲苯脱蜡完全的材料,1/2 二甲苯十1/2纯酒精→100%酒精→95%酒精→85%酒精→70%酒精→50%酒精→1%番红染色(4h以上) →50%酒精→70%酒精→85%酒精→95%酒精→0.5%固绿(1min)→95%酒精→100%酒精→100%酒精(未注明时间各级均为3min) 10.胶封 滴加加拿大树胶封藏。 11.镜检,拍照

石蜡切片步骤

石蜡切片制作 大致步骤:取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。 1、取材 植物材料选择时必须尽可能不损伤植物体或所需要的部分。 取材必须新鲜,尽可能割取所需要的组织块,并随即投入固定液。 取材时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤。 切取的材料应该小而薄,便于固定剂迅速渗入内部。一般厚度不超过2mm,大小不超过5*5mm2。 2、固定 用适当的化学药液—固定液浸渍切成小块的新鲜材料,迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化,尽可能保持其活体时的结构。 固定液的选用:FAA固定液 FAA固定液配制:福尔马林(38%甲醛)5 ml 冰醋酸 5 ml 70%酒精 90 ml 5 ml甘油(丙三醇) 固定时间根据材料块的大小及松密程度而定。 3、洗涤与脱水 固定后的组织材料需要除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀,否则会影响以后的染色效果。多数用流水冲洗:使用含有苦味酸的固定液固定的则需要用酒精多次浸洗;如果组织经酒精或酒精混合液固定,则不必洗涤,可直接进行脱水。 酒精为常用的脱水剂,为了减少组织材料的急剧收缩,应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行,通常从30%或50%酒精开始,经70%、85%、95%直至纯酒精(无水乙醇),每次时间为1-数小时,如不能及时进行脱水,材料可以放在70%酒精中保存,因高浓度酒精易使组织收缩硬化。 4、透明 选用二甲苯为酒精和石蜡的浸媒液,替换出组织内的酒精。通常组织先经过纯酒精和透明剂各半的混合液浸渍1-2小时,再转入纯透明剂中浸渍。时间根据材料块大小而定。 5、浸蜡与包埋 用石蜡取代透明剂,使石蜡浸入组织而起支持作用。通常把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1-2小时,再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍3小时左右,浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右的温箱中进行,以利于石蜡浸入组织内。浸蜡后的组织材料块放在装有蜡液的容器中(摆好在蜡中的位置),待蜡液表层凝固即迅速放入冷水中冷却,即做成含有组织块的蜡块。容器可用光亮且厚的纸折叠成纸盒或金属包埋框盒。如果包埋的组织块数量多,应进行编号,以免差错。石蜡熔化后应在蜡箱内过滤后使用,以免因含有杂质而影响切片质量,且可能损伤切片刀。 6、切片 包埋好的蜡块用刀片修成规整的四棱台,以少许热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上,夹在轮转式切片机的蜡块钳内,使蜡块切面与切片刀刃平行,旋紧。切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度。通常切片厚度为 4-7微米,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上。 7、贴片与烤片

石蜡切片的制作过程(精)

石蜡切片的制作 目的要求:了解生物制片的基本原理和方法;了解石蜡切片制作的基本过程;学会制作石蜡切片。 一、生物制片的基本原理 (一生物制片的目的与发展概况 生物制片是研究生物有机体微观结构的基础方法,其目的是提供在显微镜下以适度的样品,有效地对其进行形态和功能观察研究。 (二生物制片的方法 当我们研究生物体的组织或细胞时,除了某些生物体可用相差显微镜或偏光显微镜等方法达到观察目的外,其余大部分生物体,因为组织较厚,光线不易透过内部等关系而达不到观察的要求,为了达到此目的,就必须将生物体的组织切成薄切片或不切片,经过一系列处理,使光线易于透过,即可进行观察。因此,根据标本的制作方法分为切片法和非切片法两种。这些方法,各有优缺点,应该适当的配合使用,才能获得比较理想的结果。 1.切片法 (1切片法的种类 切片法就是利用锐利的刀具,将器官组织或幼小个体分割成许多极薄的薄片,而制成切片标本的一种方法。切片法在切成薄片以前必须设法使组织内渗透某种支持物质。使组织保持一定的硬度,然后利用切片机进行切片。根据所用支持物质的不同切片法又可分为石蜡切片法、火棉胶切片法、冰冻切片法、炭蜡切片法等类型。现分述如下: ⅰ.石蜡切片法

石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法,因此用得最多,它有很多优点:比较省时间,容易操作,可切成极薄的切片(4um 以下,能制作连续切片,组织块可包埋在石蜡中永久保存。缺点是只能用于较小的组织块,较大的组织块不易切好,容易破碎,组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆。制片时间太长。 ⅱ.火棉胶切片法 火棉胶切片法是以火棉胶为支持剂进行切片的方法。此法的优点是包埋过程中不用二甲苯及石蜡,不经高温,可避免组织收缩及变脆,适于精细材料(如脑的切片,也引火棉胶有韧性切片不知有折卷或破裂,适宜于大块组织及多空洞的组织(脑、眼球,硬度较高的组织(骨、肌腱。缺点:手续麻烦、费时间,切片不能切薄,起码在10um以上,不能作连续切片,因此,在生物制片技术上已经不经常采用。 ⅲ.冰冻切片法 冰冻切片法是利用液体二氧化碳或其它药剂(如氯乙烷在变成气体时吸收大量的热使组织迅速结成冰块而后再进行切片的方法。目前国内外用半导体致冷调节器来代替二氧化碳的冰冻,冷冻速度更快更为方便。 冰冻切片法的优点是较前两种方法简便,组织不经脱水、透明、包埋等手续即可切片,因而可节省很多时间,十分钟左右即能制成切片。常用于临床病理手术诊断,银材料不经溶媒处理就可直接进行切片,材料不受试剂的激烈刺激及温度影响,所以组织没有显著的收缩,细胞形态不致有大的改变,也引冰冻切片不需有机溶剂处理,所以能保存脂肪、类脂等成分,所以冰冻切片法常用于组织化学,尤其是神经组织,临床病理学等方面的研究。 新鲜的组织或已经固定的组织,经短时间处理后即可进行切片。用任何固定及处理的材料均适合冰冻切片,但一般的经验用福尔马林固定的材料最适合冰冻切片,而用酒精、甘油保存的材料必须充分水洗后才易于冰冻,否则不易切成完整的切片

石蜡切片的制片方法

石蜡切片制作基本技术 实验器材:转动切片机、镊子、解剖刀、解剖针、玻璃缸或小塑料盆、小烧杯(50ml)、酒精灯、打火机、染色缸、吸管、温台、温箱、毛笔、纱布、双面刀片。 试剂:95%的乙醇、无水乙醇、二甲苯、甲醛、石碳酸、甘油、新鲜鸡蛋清、加拿大树胶、番红、铬绿、熔点48~50℃和56~58℃的石蜡。 其它:无水CaCl2 、铁帆、苏木精、重铬酸钾、浓硫酸 石蜡切片制作基本技术:石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、 浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。 1.取材应根据要求选取材料来源及部位。采下的标本要注意保湿,冲洗干净后截取大小合适的样品迅速投入固定液中。(注意材料切割形状以便于包埋,尤其植物叶片横纵切面) 2.固定卡诺氏固定液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)固定24h,70%酒精保存。固定液的用量通常为材料块的20倍左右,固定时间则根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定,可以从1小时至数天,通常为数小时至24小时。 3.洗涤与脱水从50%开始→70%→85%→95%→无水乙醇(30min)(此步骤需两遍),每次时间为1~2h;如不能及时进行各级脱水,材料可以放在70%酒精中保存。脱水乙醇的用量为材料体积的3~5倍。 无水乙醇中要加入不含结晶水的CaCl2 ;用95%的乙醇配制各级脱水乙醇(原浓度95%,要配浓度y%,则取yml95%乙醇加上95-y=?ml蒸馏水即可)。 4.透明经1/2无水乙醇+1/2二甲苯(氯仿)至纯二甲苯(氯仿)两级透明,每级停留2h。在1/2无水乙醇+1/2二甲苯时加入少量番红干粉。 5.浸蜡在浸入有植物材料的透明剂中投入切成小块的低熔点石蜡,加入石蜡的量溶入透明剂的用石蜡溶液=透明剂体积为原则。用浮石蜡(石蜡放入容器中,水浴熔融,取出石蜡,冷却时不断用玻璃棒搅拌,空气进入,冷却后即为浮石蜡)。加蜡后放有材料的有盖容器放入35℃的温箱中6h或更长时间。之后调高温度至56℃,打开盖子让透明剂蒸发,2h后将石蜡溶液倾去。将植物材料移入高熔点的熔融纯石蜡小烧杯中,2~4h再换一次熔融纯石蜡,2~4h即可进行包埋。 6.包埋、切片和粘片 (1)折包埋纸盒; (2)材料包埋:熔融的石蜡到入纸盒中,用在酒精灯上烧热的镊子或解剖针将材料排好(快速,避免石蜡结晶),然后将包埋纸盒放入冷水中冷却凝固。(3)修蜡:每块拉一个材料,双面刀片切开。 (4)粘蜡快:2*2*2.5~3cm的长方形木块,长轴一端刻出网格;木块具网格一端浸入已溶化的废石蜡中,蜡块修成下宽上窄的台体,用烧热的解剖针一面贴

石蜡切片步骤

石蜡切片基本步骤 (一)取材和固定 根据实验目的选择材料。将整个虫体或虫体的内部器官(如肠道、马氏管、唾液腺等)取出后,立即投入固定液。 取材大小:0.5cm×0.5 cm×0.2或者1.0 cm×1.0 cm×0.2,厚度不宜超过3mm。 固定液:2.5%的戊二醛固定液,Bouin氏液,10%甲醛等。 固定时间:4oC固定24小时。 注意事项: 取材:1.勿使组织块受挤压切取组织块所用刀、剪要锋利,切割时不可来回切割。夹取组织时,镊子要轻,切勿挤压,以免损伤组织。取材时,组织块可稍大一点,以便在固定后,将组织块的不平整部分修去。 2.选好组织块的切面应熟悉器官组织的组成,并根据观察目的来确定纵切或横切。 3.保持材料的清洁组织块上如有血液、污物、粘液、食物等,先用生理盐水冲洗干净,再入固定液。 4.切除(清除)不需要的部分特别是组织周围的脂肪等,应尽可能清除掉,以免影响以后的程序和观察。 固定:1.材料新鲜取出组织后须立即固定。否则时间相隔过久,体积就要收缩变形或发生自溶现象。 2.抽气生物组织常有气体的存在,使材料不能沉入固定液中,抽气使得固定液有效渗入。真空泵抽气或者用空针管抽气。昆虫整体固定,固定前用解剖针刺数个小孔,以利用固定液渗透。 3.固定剂用量一般为组织体积的10~20倍。勿使组织贴于瓶底或瓶壁,以免影响固定剂的渗入。 4.避免阳光尽可能避免接触阳光以免失去固定作用。 5.加速固定轻轻摇动盛器使组织移动有利于固定液渗入,对长期固定的标本可经常更换固定液。

(二)洗涤 2.5%戊二醛固定液固定的组织:0.2M, pH7.2磷酸缓冲液漂洗三次,每次10min Bouin氏固定液固定的组织:直接入70%酒精更换数次即可脱水,注意苦味酸。 甲醛固定的组织:直接投入50%或70%酒精脱水,不经水洗。但如果在甲醛中时间过长,则仍应当用流水冲洗。 陈旧性标本和混合性固定液应及时洗涤,有利于脱水、切片和染色。否则会影响以后的染色效果。 (三)脱水与透明 漂洗后即入酒精脱水,经50%,70%,80%,90%,95%,100%酒精脱水,其中95%,100%酒精需重复两次。每级10min。 脱水后,入1/3二甲苯+2/3乙醇混合液→1/2二甲苯+1/2乙醇混合液→2/3二甲苯+1/3乙醇混合液→二甲苯→二甲苯,每次约10min,至组织透明为止。 注意: 1. 一般经水洗的材料脱水可从35%开始,柔弱的材料从15%开始,若用酒精洗涤,则可直接移入50%或70%酒精中继续脱水。 2. 每级脱水时间,依照材料的大小、性质以及留在固定液中的时间长短和固定液的溶解性而定。动物组织每级10~30min。 3. 脱水应彻底,否则与二甲苯混合后混浊,必须倒回重脱水且效果不好;如需过夜,则停留在70%酒精中。 (四)透蜡 透明后,先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍3小时,再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍6小时左右,直至用石蜡完全置换了组织块中的二甲苯,浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右(60°C)的温箱中进行,以利石蜡浸入组织内。便于今后的包理与切片。

冷热疗法

温热疗法 定义:以热源为介体将热作用于人体而治疗疾病的方法叫做温热疗法。 热的基本概念: 热量:由于温度的差别而引起物体吸收热或放出热的物理量,即在热传递过程中所转移的热能。热量的国际单位是焦耳(J)。 热容量:物体温度每升高1℃过程中所吸收的热量,可简称热容,热容量的国际单位是焦/开(J/K)。 比热:单位质量物质的热容量,比热的国际单位是焦/(千克﹒开){J/(Kg﹒K)} 热平衡方程:温度不同的物质相互接触时要发生内能的传递,使得相互接触的物体趋向热平衡状态。如果没有外界的影响,原来温度较高的物体放出的能量等于原来温度较低的物体吸收的能量。 物态的变化: 1、熔解:物体从固态变为液态的现象。 2、凝固:物体从液态变为固态的现象。 3、熔点:固态物质在一定温度下才能熔解,这个温度叫熔点。在熔点温度固态与液态可以共存。 4、汽化:物体从液态变为气态的现象。汽化有蒸发和沸腾两种方式。汽化的过程吸收热。5、液化:物体从气态变为液态的现象。 热传递方式: (1)热传导:物体通过接触而传递热的方式。传导的热量与物体的性质、相互间的接触面积和周围环境温度等因素有关。 (2)热辐射:热源直接向空间发散热的方式。太阳向地球传递热的方式是热辐射。(3)热对流:依靠物体本身流动而传递热的方式。(液体、气体) 生物学效应: 1、对新陈代谢的影响 (1)细胞化学反应:温度的变化影响细胞内的氧化过程。温热能使组织摄氧量增加,有利于促进组织的代谢和愈合。 (2)基础代谢和能量代谢:在一定的温度范围内,温度每升高10℃,基础代谢率增加2~3倍。随着温度的增高,人体的能量代谢加快,能量消耗增加。 (3)消炎:热使组织温度升高,血管扩张,血流加快,毛细血管壁通透性增高,有利于代谢产物、炎症产物以及致痛物质的排除而达到消肿、消炎、止痛。 (4)组织修复:热使血液循环加强,代谢活跃,营养改善,有利于组织损伤的修复。2、对各器官、系统的影响 (1)皮肤:温热刺激作用于皮肤,可使皮肤血管扩张,加强皮肤的营养和代谢,促进皮肤伤口愈合,热能增加软组织的延展性,有利于瘢痕软化,粘连松解,改善皮肤功能。(2)肌肉:温热可降低肌肉的张力,缓解肌肉的痉挛,减轻肌紧张引起的疼痛。 (3)心血管系统:机体受热时,心率加快,心肌收缩力增强,血压升高。但热刺激持久、广泛、强烈地作用于人体时,则导致心肌收缩力减低,甚至发生心力衰竭。温热对血管系统的影响主要是扩张血管,改善血液循环。 (4)呼吸系统:适当的温热可以加深呼吸,但持久而强烈的热刺激可引起呼吸浅快。(5)消化系统:温热可以缓解胃肠平滑肌痉挛,增加胃黏膜血流量,促进胃肠蠕动,增加消化液分泌。 (6)神经系统:热能降低感觉神经末梢的兴奋性和神经传导速度,提高痛阈,从而达到缓解疼痛。

蜡疗可以自己做么

蜡疗可以自己做么?怎么做,需要哪些原料? 1.刷蜡法。用平毛刷浸沾加热到55—65℃的石蜡,在治疗部位迅速而均匀地反复涂刷,使蜡层厚度达1—2毫米即可,就象穿士蜡制的鞋袜或衣服一样,然后用棉垫包裹保温。 2.蜡盘法。将熔化的石醋倒在各种规格的盘于里(最好用木盘),厚度为1.5—2厘米,待成饼型后将其取出放在塑料布上,然后敷在治疗部位上,再用棉垫包裹保温。 3.蜡袋法。将已熔化石蜡放入塑料口袋中,约占塑料口袋容量的1/3排除空气,把口封好。治疗时将蜡袋放在热水中浸泡加温,然后将其冷却至半熔化状态(相当于56一60℃)取出敷于治疗部位即可。 4.浸蜡法。依治疗部位不同,准备特制的木盆或瓷盆,将手、足等治疗部位先按刷蜡涂敷石蜡,待形成一层蜡壳后,再浸入盛有55—60℃的石蜡容器中进行治疗。石蜡疗法一般每日或隔日进行一次,每次治疗持续30—60分钟,连续进行12—20次,如需要,休息一周后开始第二个疗程摘自王大夫蜡疗养生堂 在家做蜡疗,首先你得有石蜡或者蜜蜡,然后还得有化蜡机,其实挺简单的,把蜡放机子里大约20分钟到半个小时就化开了,找一个木勺子和一个小碗还有一个小刷子像刷油漆的那种,什么地方需要做蜡疗,最好先按摩一下该部位,然后刷上蜡就可以了,大约1-2毫米厚度就可以,20分钟或者半个小时剥下来就可以了。禁忌:蜡要完全化开不能有小的硬块或者气泡盛具要完全干燥没有水分以免烫伤 怎樣~就是賺不到我的錢,在家自已做手腳蠟療 來看看我在家自已怎麼玩手腳蠟療~~~~~~~~~~~~~~~~~~首先,我們要買一台蠟療機,及香療蠟, 這次我選的玫瑰口味的,弄成小塊後置入蠟療機中(一次需放入三~四塊〕 愈小快融的愈快,約需要20分鐘左右就可融好啦! 試一下溫度,如果覺得太熱的人,能先關了電源再置入你的手腳, 好舒服啊~~特別是在冬天~~~ 置入個三秒就好,馬上拿起,等第一層較冷卻後再置入 這樣反反覆覆約五次左右 接著包上塑膠袋,也可再包上個電熱手袋之類的, 真的有讓血循更好的感覺,我的腳正在享受vip的待遇啊! 包上15分鐘後,拿下袋子,就長這樣 用過的蠟能再扔回机器中,前提是使用前把腳洗的很乾淨後才做腳療, 同樣的蠟約可使用20~40次 如果沙龍店中為了省蠟而把客人用過的再扔回去,給其他人繼續使用,就很可怕了~不過就算不是扔回去,我也還是一點也不想泡別人泡過的蠟耶~~

石蜡切片

(请教)石蜡切片时碎片的缘故! vetsyl 发贴:67 积分: 1 状态:离线 2005-04-28 17:08 石蜡切片时怎么老是碎片和片堆积到一起,褶皱很大啊 vetsyl 发贴:67 积分: 1 状态:离线 2005-04-28 17:10 请各位专家给出宝贵的建议!谢谢 bluelove 用心做好每件事 发贴:164 积分:33 状态:隐身 2005-04-28 19:28 组织切下来之后要先放到水浴锅里,温度一般是40度左右,待组织完 全展开之后再捞片,就不会皱了! 碎片的原因有很多,有可能是你的组织处理(脱水问题)的问题,也有 可能是切片时蜡块没有修齐,要找到原因再对症处理了! vetsyl 发贴:67 积分: 1 状态:离线 2005-04-29 15:58 这边展片不是在水浴锅里,是放在载玻片上,然后放到一个加热 的板上。 但是问题是切片时那些薄片松散的很厉害,像一包渣样,假如有 浴锅可能都放不进去呀,不知道是刀片的问题,还是脱水的问题, 还是修切的问题? bluelove2005-04-29 19:53

用心做好每件事 发贴:164 积分:33 状态:隐身 我个人认为组织放到载玻片上之后就沾上去了展片效果不好,还 是在水浴锅里等组织完全展开之后再捞片效果好一些! 你的切片是什么地方烂?如果是组织烂就可能是组织处理的问 题,如果石蜡部分都是烂的,恐怕就是你修切的问题了吧! 野原 诺言来之不易 丁香园版主 发贴:3774 积分:404 状态:隐身 2005-04-30 08:12 vetsyl wrote: 这边展片不是在水浴锅里,是放在载玻片上,然后放到一个加热的板上。 但是问题是切片时那些薄片松散的很厉害,像一包渣样,假如有浴锅可 能都放不进去呀,不知道是刀片的问题,还是脱水的问题,还是修切的 问题? 1.切片时用一块冰在石蜡切面上冷冻一下蜡块再切。 2.使用的蜡太软,换用硬一些的蜡再次浸蜡包埋。 3.换用新刀片,找高手切。 4.标本处理有问题,在纯酒精中时间太久导致组织脱水严重从而质地变 硬变脆。 GOOD LUCK! bluelove 用心做好每件事 发贴:164 积分:33 状态:隐身 2005-04-30 13:07 野原wrote: 1.切片时用一块冰在石蜡切面上冷冻一下蜡块再切。 2.使用的蜡太软,换用硬一些的蜡再次浸蜡包埋。 3.换用新刀片,找高手切。 4.标本处理有问题,在纯酒精中时间太久导致组织脱水严重从而质地变 硬变脆。

石蜡切片免疫荧光染色方法精修订

石蜡切片免疫荧光染色 方法 GE GROUP system office room 【GEIHUA16H-GEIHUA GEIHUA8Q8-

对于石蜡切片: 1、烤片:60℃ 60分钟 2、脱蜡:二甲苯中Ⅰ脱蜡15分钟→二甲苯Ⅱ脱蜡15分钟→无水乙醇Ⅰ5分钟→无水乙醇Ⅱ5分钟→90%乙醇Ⅰ5分钟→90%乙醇Ⅱ5分钟→70%乙醇5分钟 →蒸馏水5分钟→蒸馏水5分钟。 3、抗原修复:高压修复,事先烧开锅中的水,修复盒中加入0.01mol/l柠檬酸钠,pH6.0(柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g加入1000ml蒸馏水中),上汽后加热10分钟,关火。修复盒取出,放入装有自来水的瓷缸中缓慢冷却至室温。 2. 去除内源性酶:玻片取出放入湿盒,加3%H 2O2 2 (2ml H 2 O2 2 加入18ml蒸馏水 中,现配现用,避光),室温孵育10分钟,PBS洗3次,每次5分钟。(也可不用去除内源性酶)。 3. 封闭(Blocking) 加10%正常驴血清(原液100ul+900ulPBS,1ml够用30张片子),室温孵育封闭30分钟。如果背景较高,可以4℃封闭过夜。不用洗,用滤纸吸干周边水分。从封闭开始所有的步骤,一定要注意样品的保湿,避免样品的干燥,否则极易产生较高的背景。 4. 一抗孵育(Primary antibody incubation) 参考一抗的说明书,按照适当比例用免疫染色一抗稀释液(10%山羊血清PBS或1%BSA-PBS)稀释一抗。 立即加入稀释好的一抗, 4℃过夜,第二天取出复温45分钟。PBS洗3次,每次5分钟。

5. 二抗孵育(Secondary antibody inucubation) 按照适当比例用免疫荧光染色二抗稀释液稀释荧光标记的二抗,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。 PBS洗涤3次。每次5分钟。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。 6. 蛋白检测(Detection of proteins) 对于免疫荧光染色,此时已经可以直接到荧光显微镜下观察。 7. 复染 用DAPI对细胞核进行染色,室温10分钟,PBS冲洗5分钟×3次,封片(封片剂或分析纯的甘油与0.5molpH9.5碳酸缓冲液1:1混合)显微镜观察,染色后为蓝色荧光。 多重荧光染色:可使用红色荧光、绿色荧光和蓝色荧光进行三重荧光染色。例如用免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠Cy3(P0193)进行红色荧光染色,随后可以用免疫荧光染色试剂盒-抗兔FITC(P0186)进行绿色荧光染色,在完成上述两种染色后可以使用Hoechst染色试剂盒(C0003)对细胞核进行染色,染色后为蓝色荧光。 0.5molpH9.5碳酸缓冲液配方: NaHCO3 3.7g Na2CO3 0.6g 双蒸水溶解至100ml,调节pH至9.5

蜡疗

蜡药疗法简介: 蜡疗是以石蜡为主要原料来治病的一种方法,由于石蜡的热容量高,导热系数小,散热时间长,是传导热疗中最好的一种介质,且能与身体各部位紧密接触,因此临床上,常用于治疗风、寒、湿痹引起的疼痛。石蜡加热后敷贴于患处,能使局部组织受热、血管扩张、循环加快、细胞通透性增加,由于热能持续时间较长,故有利于深部组织水肿消散、消炎、镇痛。 传统的石蜡疗法缺点是太脆、易碎,用在大面积较平的部位尚可,若用在凹凸的关节面上,里面未凝固的石蜡则容易流出来,烫伤皮肤。而且对一些疑难病的治疗效果见效缓慢。 新型蜡药疗法克服了以上缺点,巧妙地将中药止痛散与加热后的石蜡混合于一体。新式蜡疗采用的独特配方能使其贴敷于患部后不呈对流现象,而且基础蜡的配制也有改进,加入了防止烫伤的中药入内,故皮肤能耐受较高的温度( 60 ℃— 70 ℃)而不会烫伤皮肤。经特殊工艺处理过的介质不易破碎,再将药物的有效成份强渗入人体的患病部位,起到了双重治疗作用,通过多年临床治疗中不断研究改善,其治疗效果、治疗范围更有了突破性进展,对风湿类疾病有奇效!并对颈椎病、腰椎间盘突出症,骨质增生,软组织损伤 , 腱鞘炎、肩周炎、术后粘连、关节强直等各类风寒湿痹痛症有特效。此法简便易行,家庭亦可采用,在医疗费用日益昂贵,普通老百姓难以承受的今天,此方犹其值得广泛推广。现将新型蜡疗制作介绍于下: 新型蜡药疗法特点: 1 、具有很强柔韧性,可随意贴敷身体的任何部位。 2 、疗效好,见效快,具有活血、抗炎、祛风除湿的多重功效,能迅速打通人体经络,将人体内的风寒湿邪逼出体外,达到快速治愈顽疾的目的,如轻症一次可治愈。 3 、安全、对皮肤无任何副作用, 4 、操作方便,治疗成本极低,是搞风湿疼痛专科人员新的经济增长点。 5 、标本兼治、对一些病情严重,病程长的疑难症有专用内服药物,可达标本同治之功效。 1:基础蜡的配制 为改变传统石蜡易碎的缺点,使之变得柔韧,我们在石蜡中配入适量黄蜡及香油,具体比例可参考10斤石蜡配入1斤医用黄蜡0.5斤香油。 2:溶蜡 将所需用量基础蜡石蜡和黄蜡(视治疗部位而定,一般腰部用3斤左右即可)放入铝锅内,置于文火上加热(一定用文火防止石蜡起烟燃烧),待蜡完全溶化后,加入香油,边加加搅拌,继续加热,直到啪啪声或泡沫(水分)消失为止。 3:加药 配方:①紫草15克②红花10克③威灵仙15克 ④羌活10克⑤川芎10克⑥白芷15克 ⑦生马钱子15克 上药各自研细粉,先将①③④⑤⑥⑦放入溶化的蜡锅内炸1分钟左右,放药时要缓,防止石蜡沸溢流出,再放②炸20秒钟即关火,待下一步骤: 4:浇注模具 预先另备长30cm宽20cm深4cm左右不锈钢盘一个,先在方盘内均匀涂抹点香油,此是为方便蜡药脱模。将上述制好之蜡药缓缓倒入盘里,待其自然降温至表面凝

石蜡切片

石蜡切片 【摘要】石蜡切片组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等 学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已 相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。活的细胞或组织多为无色 透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不 易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原 有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免 细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。 【关键词】石蜡切片、组织固定、染色 石蜡切片的简要过程:石蜡切片法包括致死→取材→水洗→固定→洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→粘片→染色;染色当然简要过程:脱蜡→复水→水→苏木精→水洗浮色→酸水→水洗→兰化→伊红→脱水→伊红→95%酒精→100%酒精→?(酒精+二甲苯)→二甲苯→封片→干燥等步骤。 (一)石蜡切片流程 一、致死 需根据需要选择致死的方法 二、取材 应根据要求选取材料来源及部位;材料必须新鲜,搁臵时间过久则产生蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋生,而不能反映组织活体时的形态结构。 三、水洗 将选取的材料用其对应的生理盐水洗净。如洗去血液或者组织表面粘液等等。 四、固定 用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料,迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化,尽可能保持其活体时的结构。固定能使组织硬化,有利于切片的进行,而且也有媒浸作用,有利于组织着色。 五、洗涤 固定后的组织材料需除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀,否则会影响以后的染色效果。多数用流水冲洗;使用含有苦味酸的固定液固定的则需用酒精多次浸洗;如果组织经酒精或酒精混合液固定,则不必洗涤,可直接进行脱水。

HE石蜡切片步骤-使用

石蜡切片制作 一、苏木精-伊红对染法 ——paraffin section 一、器材及试剂: 1. 器材: 切片刀,切片机,恒温箱,蜡杯,酒精灯,解剖刀,解剖剪,解剖盘,培养皿,镊子,单面刀片,毛笔,包埋盒,染色缸,盖玻片,载玻片,玻片盘,树胶,树胶瓶,显微镜,温度计,脸盆,水浴锅。 切片机,切片刀,温台,恒温箱,解剖刀,镊子,剪刀,解剖针,单面刀片,小台木,洒精灯,包埋纸盒,染色缸,烧杯,水盆,熔蜡炉,蜡杯。 2.试剂: 中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液, 1%伊红酒精溶液,1%盐酸酒精溶液,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。 卡诺(Carnoy)固定液,埃利希苏木精染液,1%伊红酒精溶液,1%盐酸乙醇液,各级酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲苯,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。 3. 材料: 鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。 二、实验原理: 石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。 三、试剂配法: 1.中性甲醛固定液: 甲醛(37%-40%,市售,本所购买即为此浓度) 100mL 磷酸氢二钠 6.5

磷酸二氢钾(钠) 4g 双蒸水 900mL 2.苏木精、伊红染色液为碧云天产品 3.1%盐酸乙醇液 盐酸 1份 70%酒精 100份 4.甘油蛋白贴片剂: 蛋白 50 ml 甘油 50 ml 水杨酸钠(防腐剂) 1g 配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中,去蛋黄留下蛋白,用玻棒调打成雪花状 泡沫,然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中,经数小时或一夜,即可滤出透明蛋 白液。此时在其中再加等量的甘油,稍稍振摇使两者混合。最后加入防腐剂(水 杨酸钠)作防腐用。可保存几个月。 四、实验步骤: 1.取材 颈椎脱臼法处死小鼠,打开腹腔,剪取肝组织(或其他组织)。 切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透,通常以5mm×5mm×2mm或10 mm×10 mm×2 mm为宜。取下所需要的肝组织,切成一小块2-3mm厚。 注意事项: (1)取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。 (2)切片材料应根据需要观察的部位进行选择,尽可能不要损伤所需要的部分。 2.固定 将切好的肝组织用生理盐水组织洗一下,立即投入中性福尔马林固定液中 固定,固定30-50min。 注意事项: (1)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化 学变化,失去固定作用。 (2)有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合 太早,固定时就没有作用了。

石蜡疗法

石蜡疗法 (1)定义:利用加热熔化的石蜡作为导热体将热能传递至机体,而达到治疗疾病的目的的方法叫石蜡疗法。 (2)石蜡的理化特性 1)石蜡是高分子碳氢化合物,使石油的蒸馏产物,为白色或黄色半透明固体,无臭无味,不溶于水,微溶于酒精。 2)医用石蜡的熔点为50到60度,精炼石蜡的熔点为52到54度,沸点110到120度。3)石蜡的热容量大,导热性差,不含水分和其他液体,气体不能通过,几乎无对流现象,因而有很好的蓄热性能。加热后能吸收大量热,保温时间长,冷却时缓慢放出大量热,是一种很好的带热体。 4)石蜡有很好的可塑性,粘滞性和伸展性,随着热能的释放,石蜡逐渐变硬,其体积可缩小10%到20%。 5)石蜡与皮肤之间的温差可迅速形成蜡膜,阻止热的迅速传递,使热缓慢由体表向较深组织传递。 2、治疗作用: 1)温热作用:蜡的温热作用可以减轻疼痛,缓解痉挛,加强血液循环,改善组织营养,促进炎症浸润吸收,加速组织修复,降低纤维组织的张力,增加其弹性。 2)机械作用:石蜡具有良好的可塑性、柔韧性、粘滞性和延展性,因此蜡疗时蜡可紧贴皮肤,冷却时体积缩小10%—20%,对组织产生机械压迫作用,促进水肿消散。 3)滑润作用:石蜡具有油性,可增加敷蜡部位皮肤的滑润性,软化瘢痕。 3、临床应用 1)适应症:软组织牵拉伤和扭挫伤恢复期、肌纤维织炎、慢性关节炎、肩关节周围炎、腱鞘炎、术后或外伤后瘢痕增生、骨折或关节术后挛缩、肌痉挛、坐骨神经痛、皮肤美容等,周围神经损伤慎用。 2)禁忌症:高热、昏迷、急性化脓性炎症早期、风湿性关节炎活动期、结核、孕妇腰腹部、恶性肿瘤、出血倾向者。 3、石蜡的准备 (1)石蜡的加热:采用间接加热法,用双层套锅隔水加热,或采用电热熔蜡槽,上层为蜡液,底层为水,在槽底以电热法加热。 (2)石蜡的清洁:石蜡重复使用,反复或加温过度后氧化变质,使蜡的热容量、导热性、可塑性和柔韧性下降,氧化变质的蜡和混入的汗、尘埃和皮屑易导致过敏性皮炎,因此经常要清洁。 1)平时的清洁:石蜡使用后应先除去蜡块表面所附汗水、毛发、皮屑等杂物,方可放回蜡槽加热反复使用。 2)定时的清洁 ①定时加新蜡:石蜡使用一段时间后因混入杂质而变黄,并因蜡渣掉落,蜡量减少,需酌情定时加入10%—20%新蜡,以保持石蜡清洁质纯。 ②定时清除杂质:常用的方法有水洗沉淀法、过滤法、白陶土沉淀法、滑石粉沉淀法。较简便常用的方法是水洗沉淀法:将石蜡熔化后加入相当于石蜡量1/3—1/2的热水,搅拌混合后静置,石蜡上浮,水与杂质下沉,取出石蜡即可清除底部杂质,或从蜡槽底部将水与杂质排出。 4、治疗操作 1)蜡饼法:将加热后完全熔化的蜡液倒入搪瓷盘或不锈钢盘内,蜡液厚约2~3cm,冷却至

石蜡切片免疫荧光染色方法

对于石蜡切片: 1、烤片:60℃ 60分钟 2、脱蜡:二甲苯中Ⅰ脱蜡15分钟→二甲苯Ⅱ脱蜡15分钟→无水乙醇Ⅰ5分钟→无水乙醇Ⅱ5分钟→90%乙醇Ⅰ5分钟→90%乙醇Ⅱ5分钟→70%乙醇5分钟→蒸馏水5分钟→蒸馏水5分钟。 3、抗原修复:高压修复,事先烧开锅中的水,修复盒中加入l柠檬酸钠,(柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g加入1000ml蒸馏水中),上汽后加热10分钟,关火。修复盒取出,放入装有自来水的瓷缸中缓慢冷却至室温。 2. 去除内源性酶:玻片取出放入湿盒,加3%H 2O2 2 (2ml H 2 O2 2 加入18ml蒸馏水 中,现配现用,避光),室温孵育10分钟,PBS洗3次,每次5分钟。(也可不用去除内源性酶)。 3. 封闭(Blocking) 加10%正常驴血清(原液100ul+900ulPBS,1ml够用30张片子),室温孵育封闭30分钟。如果背景较高,可以4℃封闭过夜。不用洗,用滤纸吸干周边水分。从封闭开始所有的步骤,一定要注意样品的保湿,避免样品的干燥,否则极易产生较高的背景。 4. 一抗孵育(Primary antibody incubation) 参考一抗的说明书,按照适当比例用(10%山羊血清PBS或1%BSA-PBS)稀释一抗。 立即加入稀释好的一抗, 4℃过夜,第二天取出复温45分钟。PBS洗3次,每次5分钟。 5. 二抗孵育(Secondary antibody inucubation) 按照适当比例用稀释荧光标记的二抗,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。 PBS洗涤3次。每次5分钟。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加

蜡疗的作用

蜡疗的作用: (一)温热作用石蜡的热容量大,导热性小和没有热的对流特性,又不含水分,冷却时放出大量热能(熔解热或凝固热),因此能使人的机体组织耐受到较高温度(55-70℃)而持久的热作用,这就比其他热疗优越。一般认为石蜡敷于人体后,局部温度很快升高8-12℃。经过一段时间后逐渐下降,但温度下降得很慢,在60分钟内还保持一定的温度。 (二)压缩作用石蜡的固有特性是有良好的可塑性和粘滞性。在冷却过程中,石蜡的体积逐渐缩小,治疗时与皮肤又紧密接触,产生对组织压缩和轻微的挤压。 因而促进温度向深部组织传递,呈现一种机械压迫作用。 (三)化学作用石蜡对机体的化学作用是很小的。实验表明,其化学作用取决于石蜡中矿物油的含量,如向石蜡中加入化学物质或油类物质用于治疗时能呈现出化学作用,增强治疗效果。 (四)石蜡疗法的透热作用可深达皮下组织0.2—1厘米,且热容量很大,导热性小,即使温度高达60—75℃,也不致发生皮肤烫伤,它散热慢,保温时间长,可达2~8小时。蜡疗后,局部小血管扩张,可以改善血液循环、代谢和缓解肌肉痉挛的作用。随着局部涂敷石蜡温度的下降,体积可逐渐缩小10%左右,降低纤维组织的张力,增强其弹性。因此,蜡疗对局部又有柔和的机械压迫作用,从而防止组织内淋巴液和血液渗出,对关节具有消炎、止痛和消肿作用。对类风湿关节炎慢性期有较好的疗效。 蜡疗的适应症: 、损伤及劳损,如挫伤、扭伤、外伤性滑囊炎、腱鞘炎、骨膜炎、肌肉损伤等。 2、关节功能障碍,关节强直疤痕挛缩、循环障碍等。 3、外伤或手术后遗症,如疤痕粘连及浸润等。 4、各种慢性炎症,如关节炎、胃十二指肠溃疡疾病、胃炎、胃肠神经官能症、肝炎、胸膜炎、胆囊炎、盆腔炎、神经炎和神经痛、慢性骨髓炎、肌炎、小儿迁延性肺炎。 5、伤口或溃疡面愈合不良以及营养不良性溃疡,冻伤及冻伤后遗症等。 禁忌症: 虚弱高热、恶性肿瘤、活动性肺结核、有出血倾向的疾病、重症糖尿病、甲状腺功能亢进症、慢性肾功能不全、感染性皮肤病以及孕产妇、婴儿。

石蜡切片的制作方法

石蜡切片 1 仪器 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。 2 试剂 FAA固定液(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。 3 方法与步骤 固定: FAA固定液固定48小时以上。 脱水: 50%酒精——70%酒精——83%酒精——95%酒精——100%酒精——100%酒精。每级2h。100%酒精中1.5h。其中70%酒精可长期保存。 透明: 1/2二甲苯+1/2无水乙醇(2h)——纯二甲苯(1.5h)——纯二甲苯(1.5h) 浸蜡: 将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中,40℃烘箱敞口过夜。 包埋: 先提升恒温想的温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,也可在凉水喷中放置过夜。 切片: 对包埋的材料进行修块、粘块、整修后,保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑,并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平,使石蜡块牢固的粘在台木上。检查切片机,安装切片刀、调整好刀的角度,调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。 粘片: 将粘贴剂置于薄玻片上,再取切片浮置粘片剂上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在载玻片上编号,放入温箱中烘干,温度30-40℃中过夜。 脱蜡: 脱蜡用二甲苯,把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中:纯二甲苯(10-20min)——纯二甲苯(5-10min)。 染色: 将纯二甲苯脱蜡完全的材料,1/2二甲苯+1/2纯酒精——100%酒精——95%酒精——85%酒精——70%酒精——50%酒精——1%番红染色(4h以上)——50%酒精——70%酒精——85%酒精——95%酒精——0.5%固绿(1min)——95%酒精——100%酒精——100%酒精(未注明时间各级均为3min)。 胶封: 滴加加拿大树胶封藏。 镜检,拍照。

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