试验方案-试验数据-记录格式

实验方案

单因素实验一：

1、啤酒酵母→精瘦肉100g，肥膘25g，白糖1.25g,食盐3.125g,胡椒粉0.125g,辣

椒粉0.125g,姜粉1g。

2、安琪酵母→精瘦肉100g，肥膘25g，白糖1.25g,食盐3.125g,胡椒粉0.125g,

辣椒粉0.125g,姜粉1g。

3、葡萄酒酵母：精瘦肉100g，肥膘25g，白糖1.25g,食盐3.125g,胡椒粉0.125g,

辣椒粉0.125g,姜粉1g。

总：精瘦肉900g，肥膘225g，白糖11.25g,食盐28.125g,胡椒粉1.125g,辣椒粉1.125g,姜粉9g。（原料绞碎后与配料混合，再分装于9个烧杯中，其中3个接种啤酒酵母，3个接种安琪酵母，3个接种葡萄酒酵母，贴上标签A1、A2、A3，B1、B2、B3，C1、C2、C3，盖上保鲜膜，于恒温箱中32℃发酵24h，检测酵母数，乙醇含量，以判断何种发酵剂发酵能力最好，确定下步实验使用的酵母。

单因素实验二：

（1） 1 2 3 空白

精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g

肥膘12.5g肥膘12.5g 肥膘12.5g 肥膘12.5g

食盐1.56g 食盐1.56g 食盐1.56g 食盐1.56g

胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g

辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g

姜粉0.5g姜粉0.5g 姜粉0.5g 姜粉0.5g

白糖0.0625g(0.1%) 白糖0.625g(1%) 白糖6.25g(10%) 0

总：精瘦肉50×4×3=600g，肥膘12.5×4×3=150g，食盐18.7g, 胡椒粉0.75g,辣椒粉0.75g, 姜粉6g→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，3个为一组，其中3个烧杯中共加0.1875g白糖，3个烧杯中共加1.875g白糖，3个烧杯中共加18.75g 白糖。再平均分装于烧杯中。（接种实验一中确定的酵母）

（2） 1 2 3 空白

精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g

肥膘12.5g肥膘12.5g 肥膘12.5g 肥膘12.5g

白糖0.625g 白糖0.625g 白糖0.625g 白糖0.625g

胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g

辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g

姜粉0.5g姜粉0.5g 姜粉0.5g 姜粉0.5g

食盐0.3125g(0.5%)食盐1.875g(3%) 食盐3.75g(6%) 0

总：精瘦肉50×4×3=600g，肥膘12.5×4×3=150g，白糖0.625×4×3=7.5g, 胡椒粉0.75g,辣椒粉0.75g, 姜粉6g→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，3个为一组，其中3个烧杯中共加食盐0.9375g，3个烧杯中共加食盐5.625g，3个烧杯中共加食盐11.25g。再平均分装于烧杯中。（接种实验一中确定的酵母）

（3） 1 2 3 空白

精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g

肥膘12.5g肥膘12.5g 肥膘12.5g 肥膘12.5g

白糖0.625g 白糖0.625g 白糖0.625g 白糖0.625g

食盐1.56g 食盐1.56g 食盐1.56g 食盐1.56g

胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g 胡椒粉0.0625g

姜粉0.5g姜粉0.5g 姜粉0.5g 姜粉0.5g

辣椒粉0.00625g(0.01%)辣椒粉0.0625g(0.1%)辣椒粉0.625g(1%) 0

总：精瘦肉50×4×3=600g，肥膘12.5×4×3=150g，白糖0.625×4×3=7.5g, 食盐1.56g, 胡椒粉0.75g, 姜粉6g→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，3个为一组，其中3个烧杯中共加辣椒粉0.01875g，3个烧杯中共加辣椒粉0.1875g，3个烧杯中共加辣椒粉1.875g。再平均分装于烧杯中。（接种实验一中确定的酵母）（4） 1 2 3 空白

精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g 精瘦肉50g 肥膘12.5g肥膘12.5g 肥膘12.5g 肥膘12.5g

白糖0.625g 白糖0.625g 白糖0.625g 白糖0.625g

食盐1.56g 食盐1.56g 食盐1.56g 食盐1.56g

辣椒粉0.0625g 辣椒0.0625g 辣椒粉0.0625g 辣椒粉0.0625g 姜粉0.5g姜粉0.5g 姜粉0.5g 姜粉0.5g

胡椒粉0.00625g(0.01%) 胡椒粉0.0625g(0.1%) 胡椒粉0.625g(1%) 0 总：精瘦肉50×4×3=600g，肥膘12.5×4×3=150g，白糖0.625×4×3=7.5g, 食盐1.56g, 辣椒粉0.0625g，姜粉6g,→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，3个为一组，其中3个烧杯中共加胡椒粉0.01875g，3个烧杯中共加辣椒粉0.1875g，3个烧杯中共加辣椒粉1.875g。再平均分装于烧杯中。（接种实验一中确定的酵母）

①此实验步骤所用仪器：显微镜1台、恒温箱1台、分光光度计1台、分析天

平1台、绞肉机1台、水浴锅1台、血球记数板9个、250ml烧杯36个、玻璃棒2支、100ml容量瓶9个、刀具一套、蒸馏瓶3个、500ml圆底烧瓶3个、100ml圆底烧瓶3个、1ml吸管2支、5ml吸管2支、

②原料与试剂：精瘦肉2400g、肥膘600g、白糖40（28.3125）g,食盐50（36.5325）

g, 辣椒粉4(2.83125)g,胡椒粉4(2.83125)g,姜粉10(8)g；重铬酸钾溶液，浓硫酸

本实验目的为确定哪些是影响发酵的主要因素（寻因），为下步正交实验寻找因素

2009年12月20、21、22日

单因素实验一：

4、啤酒酵母→精瘦肉80g，肥膘20g，白糖3g,食盐2.5g,胡椒粉0.5g,辣椒粉0.5g,姜粉0.2g。

5、安琪酵母→精瘦肉80g，肥膘20g，白糖3g,食盐2.5g,胡椒粉0.5g,辣椒粉0.5g,姜粉0.2g。

6、葡萄酒酵母→精瘦肉80g，肥膘20g，白糖3g,食盐2.5g,胡椒粉0.5g,辣椒粉0.5g,姜粉0.2g。总：精瘦肉720g，肥膘180g，白糖27g,食盐22.5g,胡椒粉4.5g,辣椒粉4.5g,姜粉1.8g。（原料绞碎后与配料混合，再分装于9个烧杯中，其中3个接种啤酒酵母，3个接种安琪酵母，3个接种葡萄酒酵母，贴上标签A1、A2、A3（A→啤酒酵母），B1、B2、B3（B→安琪酵母），C1、C2、C3（C→葡萄酒酵母），盖上保鲜膜，于恒温箱中32℃发酵，24h后测量酵母菌数，48h后测定乙醇含量。以判断何种发酵剂发酵能力最好，确定下步实验使用的酵母。

步骤：原料肉剔分、切丁、称量→绞肉→与配料混合（配料先称好）→分装→接种酵母→发酵→24h后检测酵母菌数（方法见下）→48h后测乙醇含量（方法见下，注意提前将水浴锅加热至沸腾）。

注：三种酵母接种量均为1.6×10^6个/杯

24h后检测酵母菌数均无变化且样品中无乙醇香气，怀疑接种量太少，或是糖浓度太低：

重新加糖使A2，B2，C2糖浓度增至6%，A3，B3，C3糖浓度增至9%，A1，B1，C1保持糖浓度不

变（3%），每个样杯中再接种3.2×10^6个。

重新接种21h后，A3中酵母菌为2.88×10^8个/g，B3中酵母菌为 4.16×10^8个/g，C3中酵

母菌为 3.4×10^8个/g。

33h后:B3,C3酒香气浓郁,选择B3,C3进行酵母菌检测:B3中为3.2×10^8个/g,C3中为

2.04×10^8个/g.

由此可知此糖浓度较适宜酵母菌生长.

酵母菌总数测定：

1、仪器：血球计数板、生物显微镜、分析天平。

2、分析步骤：称取试样10.0g加水稀释至100ml,充分摇匀(摇时可加入数十粒小玻璃球以

便使样品中的细胞充分分散) ,吸取1ml 再稀释10或100倍(稀释倍数应以血球计数板的每小

格内含有1一2个酵母细胞为宜)。取一干净的血球计数板 ,将盖玻片置于计数板上。用吸管

吸取稀释后的菌液 ,加1滴于盖玻片边缘菌液自行渗入 ,充满整个计数室 ,静置1-2min,使

细胞全部沉降至计数板表面,用生物显微镜计数。

3、计算：X=A×400×10^4×D/n×m×10^8=A×4×D/n×m×10^2

式中X一试样的酵母菌总数 ,亿个/g n一所数得小格数

A一 n个小格内酵母菌的总数 ,个 D一试样的稀释倍数 ,

m一试样的质量 ,以干物质计 400一血球计数板上总的小格数

10一 相当于计数室容积扩大为1ml时换算系数。

乙醇含量的检测

重铬酸钾比色法

3.3.1 原理：

重铬酸钾把酒精氧化为醋酸，同时6价铬被还原为3价铬，可用比色法进行测定。

3 C H3 C H 2 O H +2 K 2 C r 2 O7+8 H 2 SO 4=3 C H3 C OO H + 2 C r 2 ( S O 4) 3 +2 K2SO

4 +11H 2O

3.3.2 测定步骤

1 标准系列管的配制

在 1 0 m 1 比色管中按表 1 加入各溶液 ,

表1

编号0 1 2 3 4 5

0.1%(v/v)标准乙醇溶液 0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

各管中加 1 m L 2 ％重铬酸钾溶液，5 m L浓硫酸，摇匀。于沸水浴中加热 1 0 min，取出冷却。

2 试样制备

称取 1 0 0 g 样品，置于5 0 0 m L圆底烧瓶中，加 2 0 0 m L水，蒸馏，用 1 0 0 m L 容量瓶正确接收流出液l 0 0 m L ，摇匀。吸取 5 mL馏出液，置于l 0 mL比色管中，加 1 mL 2％重铬酸钾溶液，5 m L 浓硫酸，摇匀。与标准系列管一起于沸水浴中加热 10 m

i n ，取出冷却

3 分光光度法测光密度

在 6 0 0nm下测定光密度，绘制标准曲线，得出回归方程。根据回归方程计算出 5 m L馏出液的乙醇含量。最后换算出 1 0 0 g样品中乙醇含量。

2009年12月23、24、24、25日

第（1）组中对添加不同含量白糖的肉糜检测酵母菌生长情况：

1 2 3 空白

精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g

肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g

食盐1.25g 食盐1.25g 食盐1.25g 食盐1.25g

胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g

辣椒粉0.25g 辣椒粉0.25g 辣椒粉0.25g 辣椒粉0.25g

姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g

白糖3.5g(7%) 白糖4.5g(9%) 白糖6g(12%) 0

总：精瘦肉40×4×3=480g，肥膘10×4×3=120g，食盐15g, 胡椒粉3g, 辣椒粉3g, 姜粉1.2g→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，其中3个烧杯中不加白糖作空白, 标上(1)、0、A，（1）、0、B，（1）、0、C；3个烧杯中各加3.5g白糖，标上（1）、1、A，, （1）、1、B，（1）、1、C ；3个烧杯中各加4.5g白糖，标上（1）、2、A ，（1）、2、B ，（1）、2、C ；3个烧杯中各加6g白糖，标上(1)、3、A，（1）、3、B，（1）、3、C。

第（2）组中对添加不同含量食盐的肉糜检测酵母菌生长情况：

1 2 3 空白

精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉10g

肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g

白糖4.5g 白糖4.5g 白糖4.5g 白糖4.5g

胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g

辣椒粉0.25g 辣椒粉0.25g 辣椒粉0.25g 辣椒粉0.25g

姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g

食盐0.25g(0.5%) 食盐1.5g(3%) 食盐3g(6%) 0

总：精瘦肉40×4×3=480g，肥膘10×4×3=120g，白糖1.5×4×3=18g, 胡椒粉3g, 辣椒粉3g, 姜粉1.2g→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，其中3个烧杯中不加食盐作空白，标上(2)、0、A，（2）、0、B，（2）、0、C；3个烧杯中各加食盐0.25g，标上（2）、1、A，, （2）、

1、B，（2）、1、C ；3个烧杯中各加食盐1.5g，标上（2）、

2、A ，（2）、2、B ，（2）、2、

C ；3个烧杯中各加食盐3g，标上(2)、3、A，（2）、3、B，（2）、3、C。

注：每杯中接种量为9.6×10^7个

20h后检测酵母菌数：

（1）、0、A：4×10^8个/g

（1）、1、A：3.28×10^9个/g

（1）、2、A：4.68×10^8个/g

（1）、3、A：3.7×10^9个/g

（2）、0、A：1.88×10^10个/g

（2）、1、A：2.64×10^9个/g

（2）、2、A：1.6×10^9个/g

（2）、3、A：1.68×10^10个/g

48h后测定乙醇含量：

标样吸光值：

编号0 1 2 3 4 5

0.1%乙醇0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

吸光值 0 0.051 0.099 0.151 0.206 0.221

样品吸光值：

（1）、0、A：0.038

（1）、0、B：0.051

（1）、0、C：0.046

（1）、1、A：0.047

（1）、1、B：0.042

（1）、1、C：0.040

（1）、2、A：0.045

（1）、2、B：0.061

（1）、2、C：0.050

（1）、3、A：0.105

（1）、3、B：0.071

（1）、3、C：0.090

（2）、0、A：0.088

（2）、0、B：0.239

（2）、0、C：0.109

（2）、1、A：0.155

（2）、1、B：0.227

（2）、1、C：0.199

（2）、2、A：0.186

（2）、2、B：0.079

（2）、2、C：0.090

（2）、3、A：0.054

（2）、3、B：0.034

（2）、3、C：0.046

50h后检测酵母菌数：

（1）、0、B：7.6×10^7个/g

（1）、1、B：4.5×10^7个/g

（1）、2、B：4.44×10^7个/g

（1）、3、B：4×10^7个/g

（2）、0、B：6.2×10^7个/g

（2）、1、B：6.48×10^7个/g

（2）、2、B：6.4×10^6个/g

（2）、3、B：3.8×10^7个/g

注：（2）、0、A，（2）、0、B，（2）、0、C，（2）、1、A，（2）、1、B，（2）、1、C，酒香气浓郁，肉质松软。

由检测的酵母菌数和吸光值两个指标可确定食盐含量在0.5%时酵母菌生长情况最好。

2009年12月26、27、28日

第（3）组中对添加不同含量的辣椒粉的肉糜检测酵母菌生长情况：

1 2 3 空白

精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g

肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g

白糖6g 白糖6g 白糖6g 白糖6g (12%)

食盐0.25g 食盐0.25g 食盐0.25g 食盐0.25g (0.5%)

胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g 胡椒粉0.25g (0.5%)

姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g (0.2%)

辣椒粉0.05g（0.1%） 0.25g（0.5%）1g（2%）0

总：精瘦肉40×4×3=480g，肥膘10×4×3=120g，食盐3g, 白糖72g，胡椒粉3g, 姜粉1.2g →绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，3个为一组，其中3个杯中不加辣椒粉作空白，标

1、A，, （3）、1、B，（3）、1、C ;3个烧杯中各加0..25（0.5%）g辣椒粉，标上（3）、

2、

A ，（3）、2、

B ，（3）、2、

C ；3个烧杯中各加1（2%）g辣椒粉，标上(3)、3、A，（3）、

3、B，（3）、3、C。盖上保鲜膜，于37℃培养箱中培养。

接种20h后检测酵母菌数：

(3)、0、A：1.16×10^8个/g，（3）、0、B：7.2×10^7个/g，（3）、0、C：4.56×10^7个/g （3）、1、A：5.76×10^7个/g，（3）、1、B：1.36×10^7个/g，（3）、1、C：3.4×10^7个/g （3）、2、A：3.76×10^7个/g，（3）、2、B：3.5×10^7个/g，（3）、2、C: 3.72×10^7个/g (3)、3、A：2.4×10^7个/g，（3）、3、B：4.56×10^7个/g，（3）、3、C：4.72×10^7个/g 48h后检测乙醇含量：

标样吸光值：

编号0 1 2 3 4 5

0.1%乙醇0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

吸光值0 —0.1416 —0.1244 —0.0590 —0.0111 0.0193

样品吸光值：

（3）、0、A：0.0045

（3）、0、B：0.0360

（3）、0、C：0.0240

（3）、1、A：0.0512

（3）、1、B：0.0667

（3）、1、C：0.0674

（3）、2、A：0.0527

（3）、2、B：0.0861

（3）、2、C：0.1036

（3）、3、A：0.0892

（3）、3、B：0.1590

（3）、3、C：0.1222

2009年12月29、30、31日

第（4）组中对添加不同含量的胡椒粉的肉糜检测酵母菌生长情况：

1 2 3 空白

精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g 精瘦肉40g

肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g 肥膘10g

白糖6g 白糖6g 白糖6g 白糖6g (12%)

食盐0.25g 食盐0.25g 食盐0.25g 食盐0.25g (0.5%)

辣椒粉1g 辣椒粉1g 辣椒粉1g 辣椒粉1g (2%)

姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g 姜粉0.1g (0.2%)

胡椒粉0.05g（0.1%） 0.25g（0.5%）1g（2%）0

总：精瘦肉40×4×3=480g，肥膘10×4×3=120g，食盐3g, 白糖72g，辣椒粉12g, 姜粉1.2g→绞碎后与配料混合均匀，先分成4组，3个为一组，其中3个杯中不加胡椒粉作空白，

（4）、1、A，, （4）、1、B，（4）、1、C ;3个烧杯中各加0..25（0.5%）g胡椒粉，标上（4）、

2、A ，（4）、2、B ，（4）、2、C ；3个烧杯中各加1（2%）g胡椒粉，标上(4)、

3、A，（4）、

3、B，（4）、3、C。盖上保鲜膜，于37℃培养箱中培养。

注：每杯中的接种量为：3.024×10^7个/杯

接种20h后检测酵母菌数：

(4)、0、A：8×10^7个/g，（4）、0、B：9×10^7个/g，（4）、0、C：1.04×10^8个/g （4）、1、A：1.42×10^8个/g，（4）、1、B：8.2×10^7个/g，（4）、1、C：5.4×10^7个/g （4）、2、A：1.34×10^8个/g，（4）、2、B：9×10^7个/g，（4）、2、C: 4.2×10^7个/g (4)、3、A：7×10^7个/g，（4）、3、B：7.4×10^7个/g，（4）、3、C：1.02×10^8个/g

48h后检测乙醇含量：

标样吸光值：

编号0 1 2 3 4 5

0.1%乙醇0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

吸光值0 0.1062 —0.0308 0.0079 0.0564 0.0969

样品吸光值：

（4）、0、A：0.0690

（4）、0、B：0.0900

（4）、0、C：0.0949

（4）、1、A：0.1162

（4）、1、B：0.1193

（4）、1、C：0.1242

（4）、2、A：0.2014

（4）、2、B：0.1346

（4）、2、C：0.1348

（4）、3、A：0.1244

（4）、3、B：0.1200

（4）、3、C：0.1635

★找出3个主要因素分别为：温度，食盐，白糖

2010年1月1日、2日、3日

A：白糖B：食盐C：温度

A1：白糖10%，A2：白糖12%，A3：白糖14%

B1：食盐0.3%，B2：食盐0.5%，B3：食盐0.7%

C1：温度37℃，C2：温度28℃，C3：温度22℃

一：

A1B1C3（白糖10%，食盐0.3%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

A1B2C1（白糖10%，食盐0.5%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

A1B3C2（白糖10%，食盐0.7%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

二：

A2B1C2（白糖12%，食盐0.3%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A2B2C3（白糖12%，食盐0.5%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A2B3C1（白糖12%，食盐0.7%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）三：

A3B1C1（白糖14%，食盐0.3%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A3B2C2（白糖14%，食盐0.5%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A3B3C3（白糖14%，食盐0.7%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）注：每杯中的接种量为4×10^7个

24h后检测酵母菌数量：

A1B1C3：2.6×10^7个/g，A1B2C1：6.57×10^7个/g，A1B3C2：2.2×10^7个/g

A2B1C2：7.6×10^7个/g，A2B2C3：5.5×10^7个/g，A2B3C1：3×10^7个/g

A3B1C1：5.2×10^7个/g，A3B2C2：3.76×10^7个/g，A3B3C3：3.36×10^7个/g

40h后检测乙醇含量：（20g样加40ml水稀释蒸馏）

标样吸光值：

编号0 1 2 3 4 5

0.1%乙醇0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

吸光值0 —0.0763 —0.0355 0.0061 0.0357 0.1004

样品吸光值：

A1B1C3：0.0310 A2B1C2：0.1178 A3B1C1：0.1779

A1B2C1：0.0704 A2B2C3：—0.682 A3B2C2：—0.0211

A1B3C2：—0.1260 A2B3C1：0.1180 A3B3C3：—0.0012

气相色谱检测结果：

1、A1B2C2：液体、气体进样均无出峰

2、A2B1C2：

液：峰保留时间峰高峰面积含量

1 6.048 332.359 4810.700 100.0000

气：1 6.015 289.742 907.350 100.0000

3、A2B2C3：液体、气体进样均无出峰

4、A2B1C1：液体进样无出峰

气：1 6.032 295.667 897.750 100.0000

5、A2B3C1：

液：1 6.032 222.662 298.250 100.0000

气：1 6.040 111.970 381.800 100.0000

6、A3B1C1

液：1 6.048 1392.174 20247.000 24.3685

2 9.42

3 334.54

4 62839.801 75.6315

气：1 6.032 295.667 897.750 100.0000

7、A3B3C3：气体进样无出峰

液：1 6.028 92.529 998.600 100.0000

2010年1月4、5、6日

A：白糖B：食盐C：温度

A1：白糖10%，A2：白糖12%，A3：白糖14%

B1：食盐0.3%，B2：食盐0.5%，B3：食盐0.7%

C1：温度37℃，C2：温度28℃，C3：温度22℃

一：

A1B1C3（白糖10%，食盐0.3%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A1B2C1（白糖10%，食盐0.5%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A1B3C2（白糖10%，食盐0.7%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）二：

A2B1C2（白糖12%，食盐0.3%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A2B2C3（白糖12%，食盐0.5%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A2B3C1（白糖12%，食盐0.7%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）三：

A3B1C1（白糖14%，食盐0.3%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A3B2C2（白糖14%，食盐0.5%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A3B3C3（白糖14%，食盐0.7%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）注：每杯中的接种量为6.24×10^7个

接种20h后检测酵母菌数：

A1B1C3：1.06×10^8个/g，A1B2C1：2.6×10^8个/g，A1B3C2：9.2×10^7个/g

A2B1C2：2.24×10^8个/g，A2B2C3：7.2×10^7个/g，A2B3C1：4.8×10^7个/g

A3B1C1：1.12×10^8个/g，A3B2C2：1.56×10^8个/g，A3B3C3：2×10^6个/g

接种48h后检测乙醇含量（20g加40ml水稀释蒸馏）：

标样吸光值：

编号0 1 2 3 4 5

0.1%乙醇0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

吸光值 0 0.0309 0.0730 0.1259 0.1786 0.2235

样品吸光值：

A1B1C3：0.1512 A2B1C2：0.2314 A3B1C1：0.2322

A1B2C1：0.2687 A2B2C3：0.0563 A3B2C2：0.1006

A1B3C2：0.0736 A2B3C1：0.0288 A3B3C3：0.0024

2010年1月7、8、9日

A：白糖B：食盐C：温度

A1：白糖10%，A2：白糖12%，A3：白糖14%

B1：食盐0.3%，B2：食盐0.5%，B3：食盐0.7%

C1：温度37℃，C2：温度28℃，C3：温度22℃

一：

A1B1C3（白糖10%，食盐0.3%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A1B2C1（白糖10%，食盐0.5%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）A1B3C2（白糖10%，食盐0.7%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

二：

A2B1C2（白糖12%，食盐0.3%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

A2B2C3（白糖12%，食盐0.5%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

A2B3C1（白糖12%，食盐0.7%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）三：

A3B1C1（白糖14%，食盐0.3%，温度37℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

A3B2C2（白糖14%，食盐0.5%，温度28℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）

A3B3C3（白糖14%，食盐0.7%，温度22℃，辣椒粉2%，胡椒粉0.5%，姜粉0.2%）注：酵母菌接种量为：4.6×10^7个/杯

20h后检测酵母菌数：

A1B1C3：2.6×10^7个/g，A1B2C1：6×10^7个/g，A1B3C2：1.6×10^7个/g

A2B1C2：8.6×10^7个/g，A2B2C3：6×10^6个/g，A2B3C1：8.6×10^7个/g

A3B1C1：2.62×10^8个/g，A3B2C2：7.4×10^7个/g，A3B3C3：1.2×10^7个/g

接种48h后检测乙醇含量（20g加40ml水稀释蒸馏）：

标样吸光值：

编号0 1 2 3 4 5

0.1%乙醇0 1 2 3 4 5

水（ml） 5 4 3 2 1 0

吸光值 0 0.0723 0.1132 0.1596 0.2099 0.2643

样品吸光值：

A1B1C3：0.0806 A2B1C2：0.2981 A3B1C1：0.2518

A1B2C1：0.2907 A2B2C3：0.2765 A3B2C2：0.1057

A1B3C2：0.2775 A2B3C1：0.2322 A3B3C3：0.0159

酵母菌的冷冻干燥保存方法：

将无菌牛奶直接加到待保存的菌种斜面内,用接种环将菌种刮下,轻轻搅拌使其均匀地悬浮在牛奶内成悬浮液。将悬浮液分装入安瓿管至 1 /3处。将分装好的安瓿管在 - 25℃～ - 40℃之间的干冰酒精中进行预冻1h。预冻以后,将安瓿管放入真空器中,开动真空泵进行干燥。封管前将安瓿管装入歧管,真空度抽至11333 Pa后,火焰熔封,安瓿管放置在低温避光处保存。注意冷干法在预冻之后,接上真空抽气,动作要快,不能使冰冻菌液受热融化,如果融化不宜再用,因为反复冰融易使细菌死亡。